Activacin y medios para la produccin de enzimas

La cepa es mantenida en tubos inclinados a 4C en medio de conservacin. Para iniciar su

crecimiento, el microorganismo es transferido a cajas Petri con medio de mantenimiento y se
incuban a 30C durante 5 das. Tras el periodo de incubacin se utilizan cilindros de agar de
aproximadamente 5mm de dimetro como inoculo para el crecimiento en un medio ms rico en
nutrientes. Se colocan cuatro o cinco trozos circulares de agar en un erlenmeyer de 1 L que
contenga 120ml del medio de cultivo. El microorganismo se mantiene a condiciones estticas a
30C durante 5 das, tiempo necesario para el recubrimiento total de toda la superficie del medio.
Una vez generada la biopelcula, el hongo es triturado durante 1 minuto en condiciones estriles y
el micelio homogenizado es utilizado como preinculo para el medio de produccin en una
proporcin del 10%. Los cultivos se llevan a cabo en erlenmeyers de 250 ml con medio Tien-Kirk.

Medio de conservacin para hongos ligninolticos

Agar 15 g/L KH2PO4 1,0 g/L

Glucosa 20 g/L MgSO4.5H2O 0,5 g/L

Peptona 5,0 g/L Serrn 2,0 g/L

Extracto de Levadura 2,0 g/L pH 5,5

Medio de mantenimiento para hongos ligninolticos

Agar 15 g/L Extracto de malta 3,5 g/L

Glucosa 10 g/L pH 5,5

Medio de cultivo para hongos ligninolticos

Glucosa 10 g/L CaCl2 0,1 g/L

Peptona 5,0 g/L Trazas de sales 100 ml/L

Tiamina 2,0 mg/L pH 4,5

Medio de Tien Kirk para hongos ligninolticos

Glucosa 10 g/L Acetato de sodio 3,3 g/L

Tartrato de amonio 0,2 g/L Tween 80 (al 10%) 5 ml

KH2PO4.5H2O 2,0 g/L Trazas de sales 10 ml

MgSO4.5H2O 0,5 g/L Tiamina 2,0 mg/L

CaCl2 0,1 g/L pH 4,5

Trazas de sales
MgSO4 3,0 g/L CuSO4 0,1 g/L

MnSO4 0,5 g/L H3BO4 0,01 g/L

NaCl 1,0 g/L Na2MoO4.2H2O 0,01 g/L

FeSO4.7H2O 0,1 g/L AlK(SO4)2.12H2O 0,01 g/L

CoCl2 0,1 g/L Nitrilotriacetato 1,5 g/L

ZnSO4.7H2O 0,1 g/L

Medio Kimura

Cultivo en estado solido

Agar (15 g/L)

Glucosa (20 g/L)

Peptona (5 g/L)

Extracto de levadura (2 g/L)

KH2PO4 (1 g/L)

MgSO4. 5H2O (0,5 g/L)

PH 5,5