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PRCTICA N 10: EXTRACCIN DE ADN DE TEJIDOS ANIMAL Y VEGETAL.

1. INTRODUCCIN.
El cido desoxirribonucleico (DNA), es la base qumica de la herencia, y est organizada en genes, las unidades
fundamentales de la informacin gentica. Se ha dilucidado la va de informacin bsica, es decir, el DNA, que
dirige la sntesis de RNA, que a su vez dirige y regula la sntesis de protena. Los genes no funcionan de modo
autnomo; su replicacin y funcin estn controladas por diversos productos de gen, a menudo en colaboracin con
componentes de diversas vas de transduccin de seal. El conocimiento de la estructura y funcin de los cidos
nucleicos es esencial para entender los aspectos genticos y muchos de la fisiopatologa, as como la base gentica
de la enfermedad (Harper, 2013).
2. OBJETIVOS. ambas soluciones, porque en la interface se
Extraer el ADN del tejido animal y vegetal. precipitar el ADN. Figura 4.
3. MATERIALES Y MTODOS. g) El ADN apareci poco a poco en la interface
3.1 MATERIALES. agua-alcohol en forma de grumos blancos. Se
Tejido animal (hgado de pollo), vegetal (pltano favoreci la precipitacin y recoleccin
maduro), 1 pia recogiendo mediante la varilla de vidrio al
Mortero introducirla ligeramente bajo la interface y
Tenedor hacindola girar suavemente mientras se
Embudo extrae. Figura 5.
Tela para filtrar Extraccin de ADN de Pltano maduro
Arena fina y lavada (si se usa mortero) a. Con la ayuda de un cuchillo se cort unos
Probeta 100g de pltano y se troce hasta obtener
Pipetas porciones muy pequeas. Luego se aplast
Varilla de vidrio
todos los trozos con un tenedor para formar
Vaso de precipitados
una pasta homognea. Esta se coloc en un
Matraz Erlenmeyer
vaso precipitado. Figura 6.
Pipeta Pasteur
b. Se pes 3g de sal. Se aadi 100 ml de agua
Papel filtro
Bandeja destilada y 10 ml de jabn lquido en una
Hielo probeta. Se mezcl todo en un Erlenmeyer
3.2 REACTIVOS procurando no formar burbujas.
Alcohol 96 (congelar mnimo 3 horas antes del c. Se aadi la solucin al vaso de precipitado
desarrollo de los experimentos) que contiene el pltano y se mezcl
Agua destilada procurando de no hacer burbujas. Figura 7.
Solucin de NaCl 2M d. Luego se puso el vaso precipitado a bao
Detergente tipo lavavajillas maria a 60C durante 15 minutos y se movi
3.3 EQUIPOS. ligeramente tratando de no hacer burbujas.
Licuadora Figura 8.
Balanza e. Se prepar un recipiente con agua, hielo y se
Termmetro introdujo el vaso precipitado. Se dej el vaso
Microscopio en el bao de agua helada por 5 minutos
Refrigerador removiendo ligera y constantemente. Figura 9.
3.4 METODOLOGA. f. Se licu y se filtr a la pia para obtener el
Extraccin de ADN de Hgado de pollo zumo. Figura 10.
a) Se tritur el hgado en el mortero. Figura 1. g. Se filtr la solucin del vaso precipitado
b) Se aadi 50 ml de agua y se removi (muestra del paso e.). A continuacin, se
suavemente. prepar un embudo con un papel filtro encima
c) Se filtr con un pedazo de tela. Figura 2. y se verti la solucin obtenida anteriormente
d) Se aadi al filtrado un volumen igual de
solucin de NaCl 2M. Figura 3.
e) Se Aadi 1 ml de detergente (tipo Mistol o recogiendo el lquido en un tubo de ensayo.
Woolite), se removi suavemente y se evit Figura 11.
que forme espuma. Se repiti la mezcla varias h. Con una pipeta Pasteur se aadi 1ml de zumo
veces dejando reposar un minuto cada vez. de pia y 5ml de sol. del vaso precipitado ya
Cuando se form espuma se retir con una filtrado en un tubo de ensayo. Se dej que
esquina de papel de filtro o con un acte el zumo en la solucin de 2 o 3 minutos.
cuentagotas. i. Se sac el alcohol del congelador y se aadi
f) Se inclin el vaso precipitado y se aadi 50 en un tubo de ensayo aproximadamente el
ml de alcohol muy fro. Se dej resbalar mismo volumen de alcohol que de la solucin
lentamente el alcohol por la pared de del vaso de inters (volumen obtenido en el paso h.).
precipitado para formar una capa sobre la
solucin anterior. Se evit que se mezclen
j. Se verti lentamente el alcohol en el tubo de La funcin del alcohol es separar el ADN de otros
ensayo con la solucin. Luego de pocos componentes celulares.
segundos se observ el ADN. Figura 12. 5. CONCLUSIN.
4. RESULTADOS Y DISCUSIN. Gracias a este experimento logramos comprobar la
Logramos observar el ADN del pollo y del pltano. presencia de ADN en las clulas de un tejido
Se utiliz sal porque acta disminuyendo la vegetal y animal.
solubilidad de las protenas, lo que hace que se El ADN puede ser extrado de cualquier clula de
separe ms fcil el ADN. un ser vivo.
Se tritur las muestras porque esto ayuda a que se El ADN es muy largo y tiende a agruparse y esto
rompan las clulas y queden los ncleos sueltos. permite extraerla y visualizarla con facilidad.
Se utiliz detergente porque ayuda a destruir las La extraccin de ADN es un proceso secuencial
membranas celulares del tejido de las muestras, donde se asla la molcula de sus dems
disuelve las grasas que es el componente principal componentes.
de la membrana plasmadita y nuclear de las Los reactivos como jabn lquido, sal, alcohol, son
clulas. Al romperse las membranas celulares muy importantes, ya que cada uno cumple ciertas
permite la salida de ADN al exterior. funciones que hacen la extraccin de ADN
El producto final no es ADN puro, ya que se
encuentran fragmentos de ARN y algunas
En la extraccin de ADN del pltano se utiliz el protenas.
jugo de pia porque esta ataca a las protenas de 6. REFERENCIAS.
las clulas y permite romperlas y separarlas del Harper. Bioqumica Ilustrada. Mcgraw-Hill
ADN. Interamericana Editores, Mxico 2013.
7. ANEXO.

Figura 1 Figura 2 Figura 3

Figura 4 Figura 5 Figura 6

Figura 7 Figura 8 Figura 9


Figura 10 Figura 11 Figura 12

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