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PRCTICA N2.
IDENTIFICACIN BACTERIANA
OBJETIVOS.
Objetivo General.
Identificar la morfologa bacteria con el uso de tcnicas de microscopa

Objetivos Especficos (plantear al menos 3)

INTRODUCCIN.
La microbiologa empieza como ciencia en el momento en que se descubre el microscopio y comienza la
observacin de los primeros microorganismos, pero es indudable que la puesta a punto de los medios de
cultivo y la utilizacin del agar como solidificante, marcan dos importantes puntos de inflexin en su
evolucin de esta ciencia. (Murray, 2009)
Los microorganismos vivos o activos son por lo general incoloros, por los que no se observarn con facilidad
en un microscopio ptico de campo claro por la falta de contraste entre las clulas y el medio circundante, por
lo que es necesario fijarlos y teirlos en un frotis.
MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS
Materiales
4 Placas cubre y portaobjetos
Asa de siembra
Gotero
Mechero
Cronometro
Reactivos
Cristal violeta
Lugol
Acetona
Safranina
Aceite de inmersin
Agua destilada
Equipo
Microscopio
PROCEDIMIENTO
Frotis en Fresco
1. Esterilizar el asa de siembra con el mechero, hasta que el asa llegue a la incandescencia.
2. Colocar una gota de agua destilada en el centro del portaobjetos
3. Tomar una porcin de la colonia a observarse y suspenderla en el portaobjetos
4. Colocar el cubre objetos
5. Realizar la observacin con el lente de 4X, 10X y 40X,

Tincin Gram.
1. Esterilizar el asa de siembra con el mechero, hasta que el asa llegue a la incandescencia
2. Colocar una pequea gota de agua en el centro de un portaobjetos limpio.
3. Con la ayuda de la asa preparar un frotis de cada uno de los microorganismos.
4. Fijar la preparacin pasando 2 o 3 veces el portaobjetos por el mechero
5. Teir con cristal violeta y dejar actuar durante 1 minuto.
6. Lavar suavemente con agua.
7. Coocr yodo Gram, y dejar actuar durante 1 minuto.
8. Lavar suavemente con agua.
9. Decolorar con alcohol etlico durante 30 segundos
10. Lavar suavemente con agua.
11. Agregar la safranina para la tincin de contraste durante un minuto
12. Lavar suavemente con agua.
13. Secar la preparacin.
14. Examinar al microscopio con el objetivo 100X de inmersin de aceite.

Figura 1. Preparacin de Frotis de slidos

Fuente: Volke, et.al, 2012

RESULTADOS
OBSERVACIONES
DISCUSIN
CONCLUSIONES
RECOMENDACIONES
BIBLIOGRAFA
ANEXOS