Tincin de Gram

La tincin de Gram o coloracin de Gram es un tipo de tincin

diferencial empleado en bacteriologa para la visualizacin de bacterias, sobre
todo en muestras clnicas. Debe su nombre al bacterilogo dans Christian
Gram (1853-1938), que desarroll la tcnica en 18841. Se utiliza tanto para poder
referirse a la morfologa celular bacteriana, como para poder realizar una primera
aproximacin a la diferenciacin bacteriana, considerndose bacterias gram
positivas a las que se visualizan de color morado, y bacterias gram negativas a las
que se visualizan de color rosa, rojo o grosella.

PROCEDIMIENTO

1. Recoger muestras para ubicarlas en el microscopio.

2. Hacer el extendido con un palillo de madera.
3. Dejar secar a temperatura ambiente o fijarlas utilizando un mechero.
4. Fijar la muestra con metanol durante un minuto o al calor (flameado tres
veces aproximadamente).
5. Agregar azul violeta (cristal violeta o violeta de genciana) y esperar un
minuto.
6. Enjuagar con agua no directamente sobre la muestra
7. Agregar lugol y esperar un minuto aproximadamente.
8. Agregar alcohol acetona y esperar entre 5 y 30 segundos segn la
concentracin del reactivo (parte crtica de la coloracin). (las gram - se
decoloran, las gram + no)
9. Enjuagar con agua.
10. Tincin de contraste agregando safranina o fucsina bsica y esperar un
minuto. Este tinte dejar de color rosado-rojizo las bacterias gram
negativas.
11. Lavar levemente con agua.
Para observar al microscopio ptico es conveniente hacerlo a 100x con aceite de
inmersin.

EXPLICACIN

El cristal violeta (colorante catinico) penetra en todas las clulas bacterianas

(tanto gram positivas como gram negativas) a travs de la pared bacteriana.
El lugol es un compuesto formado por I2 (yodo) en equilibrio con KI (yoduro de
potasio) y Sl (Siulterio), los cuales estn presente para solubilizar el yodo, y actan
de mordiente, haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la
pared de la clula bacteriana. El I2 entra en las clulas y forma un complejo
insoluble en solucin acuosa con el cristal violeta..

La mezcla de alcohol-acetona que se agrega, sirve para realizar la decoloracin,

ya que en la misma es soluble el complejo I2/cristal violeta. Los organismos gram
positivos no se decoloran, mientras que los gram negativos s lo hacen.

Para poner de manifiesto las clulas gram negativas se utiliza una coloracin de
contraste. Habitualmente es un colorante de color rojo, como la safranina o
la fucsina. Despus de la coloracin de contraste las clulas gram negativas son
rojas, mientras que las gram positivas permanecen violetas.

La safranina puede o no utilizarse, no es crucial para la tcnica. Sirve para hacer

una tincin de contraste que pone de manifiesto las bacterias gram negativas. Al
trmino del protocolo, las gram positivas se vern azul-violceas y las gram
negativas, se vern rosas (si no se hizo la tincin de contraste) o rojas (si se us,
por ejemplo, safranina).

Algunos microorganismos retienen el colorante violeta, an despus de tratarlos

con un decolorante, y el color no se modifica al aadir ste; otros pierden con
facilidad el primer tinte, y toman el segundo. Los que fijan el violeta, se califican de
gram positivos, y los que pierden la primera coloracin y retienen la segunda, de
gram negativos. Basndonos pues, en la reaccin gram, podemos clasificar a los
microorganismos en uno de los dos grupos. Los colorantes de p-rosanilina son los
que mejores resultados dan en la coloracin gram. Los representantes ms
usados de este grupo son violeta de metilo y violeta cristal o de genciana. En
realidad, violeta de metilo es el nombre atribuido al compuesto tetrametil-p-
rosanilina.

El matiz de color de la p-rosanilina se intensifica al aumentar el nmero de grupos

metilo en la molcula; por consiguiente, de los tres grupos, el tono ms oscuro es
la hexametil-p-rosanilina (violeta cristal), y el tinte ms ligero, la tetrametil-p-
rosanilina (violeta de metilo). Los nombres violeta de metilo 3R, 2R, R, B, 2B, 3B,
etc., se refieren al nmero de grupos metilo contenidos. La letra R indica matices
rojos, y la letra B, tonos azules. El violeta de cristal contiene seis grupos metilo, y
se considera como el mejor colorante primario para teir por el mtodo de Gram.

La facultad de las clulas para tomar la coloracin gram no es propia de toda

sustancia viviente, sino que se limita casi en absoluto a hongos y bacterias. As
vemos que las clulas de plantas y animales superiores no conservan la primera
coloracin; los mohos se tien con cierta irregularidad; los grnulos de micelios
propenden retener el colorante. La reaccin de Gram no es infalible ni constante;
puede variar con el tiempo del cultivo y el pH del medio, y quiz por otras causas.
TEORAS

Un microorganismo gram positivo debe presentar una pared celular sana. El

mismo microorganismo, si sufre dao de la pared por una u otra causa, se vuelve
gram negativo. Esto indica la importancia de la pared para la retencin o el escape
del colorante. Una posible teora del mecanismo de tincin es la siguiente:

El colorante bsico entra al microorganismo, donde forma con el yodo una laca
insoluble en agua. El alcohol o la acetona empleados para aclarar, deshidrata las
paredes de los microorganismos gram positivos, tratados con mordiente, y forma
una barrera que la laca no puede atravesar. En las clulas gram negativas, los
lpidos de la pared (ms abundantes que en las clulas gram positivas) se
disuelven por este tratamiento, lo que permite el escape del complejo de cristal
violeta con yodo. Algunos autores objetan esta teora, pero es indudable la
importancia general de la pared celular.

Varias son las teoras emitidas para explicar el mecanismo de la tincin de Gram.
Stearn (1923) bas la suya en una combinacin qumica entre el colorante y las
protenas de las bacterias, las protenas y aminocidos son cuerpos anfteros,
esto es, tienen la facultad de reaccionar con cidos y con bases, gracias a sus
grupos amino y carboxilo; en soluciones cidas, reaccionan con los cidos, y en
soluciones alcalinas lo hacen con las bases. De igual manera, comprobaron que la
reaccin de tincin de las bacterias obedece en gran parte a su contenido
protenico; estos microorganismos se conducen como cuerpos anfteros, al
combinarse con colorantes cidos en soluciones cidas y con los bsicos en
medio alcalino. La combinacin con ambos tipos de colorante no se produce en el
punto isoelctrico. Como los microorganismos contienen ms de una protena,
ese punto no tiene un valor preciso y definido, sino que constituye ms bien una
gama o escala que comprende dos o tres unidades de pH. Segn Stern y Stearn,
los microorganismos gram positivos tienen una escala isoelctrica de pH inferior a
la de los microorganismos gram negativos; y, a base de sus datos experimentales,
deducen las siguientes conclusiones:
 Los microorganismos gram positivos pueden hacerse gram negativos al
aumentar la acidez.
Los microorganismos gram negativos pueden hacerse gram positivos al
aumentar la alcalinidad.
Los microorganismos de reaccin positiva a los colorantes cidos pueden
hacerse gram negativos por aumentar la alcalinidad.
Los microorganismos de reaccin positiva a los colorantes bsicos pueden
hacerse gram negativos por aumentar la acidez.
En la zona isoelctrica caracterstica de cada especie es muy escasa la
tendencia a retener cualquier colorante.
Parece estar bien demostrado que las protenas de las bacterias no son
simples, sino ms bien una dbil combinacin de sustancias protenicas con
otras lipoideas o grasas.
La materia grasa extrada de los microorganismos gram positivos difiere de la
obtenida de los microorganismos gram negativos, en que la primera contiene
una proporcin mucho mayor de cidos no saturados que muestren gran
afinidad por los agentes oxidantes. Todos los mordientes (como el yodo)
empleados en la coloracin gram son oxidantes; su efecto, en general,
consiste en dar a la sustancia oxidada un carcter ms cido. Esto aumenta la
afinidad de un microorganismo por los colorantes bsicos.
El cambio de respuesta a la coloracin de Gram con el tiempo es propio, sobre
todo, de los microorganismos dbilmente gram positivos cultivados en los
medios que contengan sustancias capaces de fermentar, y cuya reaccin se
vuelve cida en el curso del desarrollo.

Gianni (1952) comprob que las bacterias gram positivas Bacillus

subtilis y Bacillus anthracis originaban una reaccin negativa cuando los cultivos
databan de dos a tres horas. Luego se desarrollaba la sustancia gram positiva
debajo de la pared celular y se inverta la reaccin. Otra explicacin de la reaccin
de Gram puede ser la posible existencia de una capa exterior alrededor de un
ncleo gram negativo. Libenson y Mcllroy, han comunicado que si la reaccin
gram positiva depende de que se forme una combinacin compleja entre los
componentes de la coloracin de Gram y las protenas de la pared celular, sera
de esperar que las bacterias desintegradas por medios fsicos retuviesen este
tinte, ya que ese tratamiento no podra cambiar el carcter qumico de los
materiales de dicha pared. Por el contrario, los grmenes gram positivos
desintegrados pierden su capacidad de retener el colorante primario y no se tien

La pared celular de los microorganismos gram positivos y gram negativos es

permeable al violeta cristal. Sin embargo, la de los primeros no lo es al complejo
de yodo y colorante formado en el interior de la clula. Los resultados
experimentales obtenidos con una difusin celular exenta de protenas, y la
escasa solubilidad del complejo de yodo y violeta cristal en alcohol y acetona,
parecen sustentar la opinin de que la reaccin gram positiva consiste
esencialmente en la formacin, dentro de la clula, de una cantidad apreciable de
complejo de yodo y colorante difcil de eliminar con el disolvente. La pared celular
de los microorganismos gram positivos, a diferencia de la de los gram negativos,
sera prcticamente impermeable al violeta cristal. Los microorganismos
aparecern teidos despus de tratarlos con violeta cristal, por ser absorbido el
colorante en la superficie externa de la pared celular, y el disolvente eliminar sin
dificultad el complejo formado despus del tratamiento con yodo.

Ni los grupos sulfhidrilo ni las protenas bsicas han influido especficamente en el

mecanismo del colorante de Gram. Libenson y Mcllroy han sostenido que la
permeabilidad de la pared celular al violeta cristal, la escasa solubilidad del
complejo de yodo y colorante en alcohol y acetona, y el libre acceso del disolvente
al complejo constituido, son los principales factores que intervienen en el
mecanismo de esa coloracin.
BACTERIAS RESISTENTES A LA TINCIN DE GRAM

Las siguientes bacterias de naturaleza gram positiva se tien como gram

negativas:

Mycobacterias (estn encapsuladas).

Mycoplasmas (no tienen pared).
Formas L (prdida ocasional de la pared).
Protoplastos y esferoplastos (eliminacin total y parcial de la pared,
respectivamente).

UTILIDADES

En el anlisis de muestras clnicas suele ser un estudio fundamental por cumplir

varias funciones:

Identificacin preliminar de la bacteria causal de una infeccin.

Utilidad como control calidad del aislamiento bacteriano. Los morfotipos
bacterianos identificados en la tincin de Gram se deben de corresponder con
aislamientos bacterianos realizados en los cultivos. Si se observan mayor
nmero de formas bacterianas que las aisladas hay que reconsiderar los
medios de cultivos empleados as como la atmsfera de incubacin.

A partir de la tincin de Gram pueden distinguirse varios morfotipos distintos:

Los cocos son de forma esfrica. Pueden aparecer aislados despus de la divisin
celular (micrococos), aparecer por pares (diplococos), formar cadenas
(estreptococos), o agruparse de manera irregular (estafilococos).

Los bacilos poseen forma alargada. En general suelen agruparse en forma de

cadena (estreptobacilos) o en empalizada.

Tambin pueden distinguirse los espirales, que se clasifican en espirilos (si son de
forma rgida) o espiroquetas (si son blandas y onduladas). Si por el contrario,
poseen forma de coma (o curvados) entonces se los designa vibrios.
FUNDAMENTOS DE DIFERENCIACIN DE GRAM POSITIVO Y
GRAM NEGATIVO

Los fundamentos de la tcnica se basan en las diferencias entre las paredes

celulares de las bacterias gram positivas y gram negativas

La pared celular de las bacterias gram positivas posee una gruesa capa
de peptidoglicano, adems de dos clases de cidos teicoicos: anclado en la cara
interna de la pared celular y unido a la membrana plasmtica, se encuentra
el cido lipoteicoico, y ms en la superficie, el cido teicoico que est anclado
solamente en el peptidoglicano (tambin conocido como murena).

Por el contrario, la capa de peptidoglucano de las bacterias gram negativas es

delgada, y se encuentra unida a una segunda membrana plasmtica exterior (de
composicin distinta a la interna) por medio de lipoprotenas. Tiene una capa
delgada de peptidoglicano unida a una membrana exterior por lipoprotenas. La
membrana exterior est hecha de protena, fosfolpido y lipopolisacrido.

Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se tien diferencialmente debido a estas

diferencias constitutivas de su pared. La clave es el peptidoglicano, ya que es el
material que confiere su rigidez a la pared celular bacteriana, y las gram positivas
lo poseen en mucha mayor proporcin que las gram negativas.

La diferencia que se observa en la resistencia a la decoloracin se debe a que la

membrana externa de las bacterias gram negativas es soluble en solventes
orgnicos, como por ejemplo la mezcla de alcohol/acetona. La capa de
peptidoglucano que posee es demasiado delgada como para poder retener el
complejo de cristal violeta/yodo que se form previamente, y por lo tanto este
complejo se escapa, perdindose la coloracin azul-violcea. Por el contrario, las
bacterias gram positivas, al poseer una pared celular ms resistente y con mayor
proporcin de peptidoglicanos, no son susceptibles a la accin del solvente
orgnico, sino que este acta deshidratando los poros, cerrndolos, lo que impide
que pueda escaparse el complejo cristal violeta/yodo, y manteniendo la coloracin
azul-violeta.
FACTORES QUE ALTERAN LA TINCIN DE GRAM

Edad de la bacteria.
Errores del operador.
Uso de antibiticos

A pesar de la gran utilidad de la tincin de Gram, este mtodo debe ser valorado
con precaucin, ya que la reaccin puede variar segn la edad de las clulas
(cultivos viejos de bacterias gram positivas pueden perder capas de
peptidoglicanos y teirse como gram negativos) y la tcnica empleada (al
decolorar por un tiempo muy prolongado se puede correr el riesgo que bacterias
gram positivas se tian como gram negativas). Por esta situacin, junto a la
muestra deben teirse controles con bacterias gram positivas (por
ejemplo Staphylococcus aureus) y gram negativas (por ejemplo, Escherichia coli).

Bacterias Escherichia coli (gram negativas) vistas al microscopio tras ser teidas
con la tincin de Gram.

Bacterias Clostridium perfringens (grampositivas).

Bacterias grampositivas de Bacillus anthracis (bacilos morados) que producen una
enfermedad llamada carbunco, encontrados en una muestra de lquido
cerebroespinal. Si hubiera una especie de bacteria gram negativa, aparecera de
color rosa. El resto son los leucocitos que atacan la infeccin.

Una tincin de Gram en la que se observa un mezclado de Staphylococcus

aureus (coco gram positivo) y Escherichia coli (bacilo gramnegativo).
EN LABORATORIO:

Se realizo la prueba de tincin gram con:

Papa en descomposicin resultado : gram negativo color

rosado ( patgeno)

Nota: los granos fueron sumergidos en agua pectonada

Frejol canario guardado resultado: gram negativo color

rosado lila ( patgeno)

Trigo resultado: gram negativo color rosado ( patgeno)

 CUESTIONARIO:

Como se realiza el control de calidad a la

coloracin de Gram ?

La concentracin de las soluciones de tincin, por efecto de la evaporacin de los

solventes o las variaciones introducidas en los mtodos recomendados, pueden
afectar los resultados de las tinciones para diferenciar microorganismos por su
reaccin a la tincin de Gram y la morfologa, tintes para cpsulas, esporas, etc.
El control de calidad de estos tintes debe realizarse primero con cada nuevo lote,
luego basta con un control semanal para mantener un grado de seguridad
apropiado en su uso. Para facilitar el control de los tintes, se recomienda preparar
placas con microorganismos aislados en el trabajo rutinario o cepas de la ATCC
frescas, tomado en cuenta aquellos que pudieran ser ms tiles segn la tincin a
evaluar.
Para el control diario de la tincin de Gram, se recomienda el uso de una cepa
ATCC de Staphylococcus aureus y de Escherichia coli.
Es necesario llevar un registro de estos controles.
 Como se realiza la coloracin de Ziehl-Neelsen

y como se observan los microorganismos?

La tincin de Ziehl-Neelsen es una tcnica de tincin diferencial rpida y

econmica, usada para la identificacin de bacterias cido-alcohol resistentes
(BAAR) , como M. tuberculosis o el Phylum Apicomplexa (coccidios intestinales)
entre otros. Fue descrita por primera vez por dos mdicos alemanes: Franz Ziehl,
un bacterilogo, y Friedrich Neelsen, un patlogo.

Fundamento
Las paredes celulares de ciertas bacterias contienen cidos grasos (cidos
miclicos) de cadena larga (50 a 90 tomos de carbono) que les confieren la
propiedad de resistir la decoloracn con alcohol-cido, despus de la tincin con
colorantes bsicos. Por esto se denominan cido-alcohol resistentes. Las
micobacterias como Mycobacterium tuberculosis y M. marinum se caracterizan por
sus propiedades de cido-alcohol resistencia. La coloracin clsica de Ziehl-
Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared
bacteriana que contiene ceras. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua,
provoca una nueva solidificacin de lo cidos grasos de modo que el colorante ya
no puede salir de las bacterias. Por otro lado, el calentamiento aumenta la energa
cintica de las molculas del colorante lo cual tambin facilita su entrada a las
bacterias. Las bacterias que resisten la decoloracin son de color rojo y las que
no, se ven de color azul ya que se utiliza azul de metileno como tincin de
contraste.
Tcnica
Esta tcnica puede realizarse tanto en muestras histolgicas (variante histolgica)
como citolgicas (variante clsica).

Variante histolgica

Para demostrar la presencia de BAAR en cortes de tejido en parafina. Los

reactivos necesarios para su realizacin son los siguientes:

1. cido perydico 58%

2. carbol fucsina de Ziehl culina (fucsina fenicada). Preparar mezclando en el
orden dado:
1. 0,5 g fucsina bsica
2. 50 ml agua destilada
3. 5 ml etanol absoluto
4. 28,5 g cristales de fenol derretidos
3. hematoxilina
4. alcohol cido 1%:
1. alcohol de 35
2. cido clorhdrico

El procedimiento es el siguiente:
1. desparafinar e hidratar los cortes
2. cido peridico 5%, 10 min
3. lavar con agua destilada
4. fucsina fenicada, 15 min
5. decolorar en alcohol cido al 50%
6. lavar con agua destilada
7. hematoxilina, 10 min
8. azulidificar con, por ejemplo, carbonato de litio
9. deshidratar, aclarar y montar preparaciones
Resultados
BAAR: rojo/amarillo
Ncleos: azul semiamarillo.

Variante clsica "en caliente"

1. Hacer un frotis de la muestra.
1. La fijacin al calor asegurar de que el frotis quede adherido
al portaobjetos. Un frotis muy delgado puede darle
resultados falsamente negativos y un frotis muy grueso
puede desprenderse del portaobjetos durante la tincin.
2. Utilizando pinzas, coloque los portaobjetos en una gradilla de
tincin con los extendidos hacia arriba.
2. Dejar el frotis sobre el puente de tincin.
3. Aplicar fucsina-fenicada.
1. Deje que el colorante permanezca sobre los portaobjetos
durante 5 minutos. Mantenga el calor durante este perodo,
4. Calentar con un mechero hasta la emisin de vapores (3-5 minutos).
1. Se requiere el tiempo adecuado para que la fucsina fenicada
penetre y tia la pared celular de la bacteria. No deje que
hierva o se seque el colorante.
2. Lave suavemente el colorante de cada portaobjetos con
agua corriente fra hasta que toda la tincin libre quede
lavada. Lave suavemente de manera que el extendido no se
barra del portaobjetos. Retire el exceso de agua.
5. Decolorar con alcohol-cido.
1. Cubra cada portaobjetos con la solucin decolorante, tal
como alcohol cido y mantngalo sobre el portaobjetos
durante 7 minutos. Si no se decolora suficientemente, el
contenido del esputo que no son bacilos TBC puede
permanecer teido. Enjuague con agua una vez ms los
 portaobjetos y quite el exceso de agua. Si los portaobjetos
an estn rosa, aplique una cantidad adicional de la solucin
decolorante de 1 a 3 minutos.
6. Aplicar azul de metileno (1 minuto).
1. Aplique la solucin de contraste, azul de metileno, durante 1
minuto.
7. Enjuagar con agua
1. Vuelva a enjuagar con un leve chorro de agua e incline cada
portaobjetos hasta drenar el exceso de agua. Finalmente,
coloque cada portaobjetos en una gradilla a que sequen al
aire.
8. Ahora coloquele una pequeita gota de aceite de inmersin y haga
la observacin al microscopio con 100 x 100

Variante clsica en "fro" (Tincin de

Kinyoun)
1. Hacer un frotis.
2. Dejarlo en el puente de tincin.
3. Aplicar fucsina-fenicada (solucin con fenol y mayor concentracin
de fucsina).
4. Dejar en vasos coplin durante 20 minutos.
5. Decolorar con alcohol cido.
6. Lavar con agua del grifo.
7. Contrastar con azul de metileno
Algunos microorganismos cido-alcohol
resistentes
Mycobacterium: fuertemente cido-alcohol resistentes.1
Nocardia y Actinomices: dbilmente cido-alcohol resistentes.2
Parsitos coccdeos (Cryptosporidium) de muestras fecales.3

Mediante un dibujo explique las diferencias

entre las paredes celulares Gram positiva y

Gram negativa.
 Clasifique por tincin de Gram los siguientes

microorganismos:

Streptococcus pneumoniae, Staphylococcus

aureus, Porphyromonas endodontalis, Proteus

mirabilis, Ancylostoma duodenale, Bacillus

anthracis, Etamoeba gingivalis, Aedes aegipti,

Virus de influenza.

Streptococcus pneumoniae

El neumococo, Streptococcus pneumoniae, es un microorganismo patgeno

capaz de causar en humanos diversas infecciones y procesos invasivos severos.
Se trata de una bacteria Gram positiva de 1,2-1,8 m de longitud, que presenta
una forma oval y el extremo distal lanceolado. Es inmvil, no forma endosporas, y
es un miembro alfa-hemoltico del gneroStreptococcus.1 Generalmente, se
presenta en forma de diplococo, por lo que inicialmente fue
denominado Diplococcus pneumoniae, aunque existen algunos factores que
pueden inducir la formacin de cadenas. Neumococo es un patgeno casi
exclusivamente humano causante de un gran nmero de infecciones
(neumona, sinusitis, peritonitis, etc) y de procesos invasivos severos
(meningitis, sepsis, etc), particularmente en ancianos, nios y personas
inmunodeprimidas. Es el principal microorganismo causante de Neumonia
adquirida en la comunidad (NAC).

El hbitat natural de neumococo es la nasofaringe humana y la colonizacin puede

tener lugar durante los primeros das de vida.
Metablicamente hablando, neumococo es un microorganismo microaerfilo,
catalasa negativo, que se encuentra dentro del grupo de las bacterias cido
lcticas, ya que este compuesto es el principal producto resultante de la
fermentacin de carbohidratos.

Staphylococcus aureus

(pronunciacin: /stafilokokus awrews/), conocido como estafilococo

ureo o estafilococo dorado, es una bacteria anaerobia facultativa, grampositiva,
productora de coagulasa, catalasa, inmvil y no esporulada que se encuentra
ampliamente distribuida por todo el mundo, estimndose que una de cada tres
personas se hallan colonizadas, aunque no infectadas, por ella. 1

Puede producir una amplia gama de enfermedades, que van desde infecciones
cutneas y de las mucosas relativamente benignas, tales como foliculitis,
forunculosis o conjuntivitis, hasta enfermedades de riesgo vital, como celulitis,
abscesos profundos, osteomielitis, meningitis, sepsis, endocarditis o neumona.
Adems, tambin puede afectar al aparato gastrointestinal, ya sea por presencia
fsica de Staphylococcus aureus o por la ingesta de la enterotoxina
estafiloccica secretada por la bacteria.

En la actualidad, este microorganismo se encuentra como el principal causante de

las infecciones nosocomiales. Esta situacin se ve favorecida por el hecho de que
esta especie habita tanto en las mucosas como en la piel de los seres humanos, lo
que permite que a travs de las heridas quirrgicas pueda penetrar en el torrente
sanguneo del paciente por medio del contacto directo o indirecto con el personal
sanitario, con un objeto contaminado o incluso con otro paciente. 2

Las cepas habituales de Staphylococcus aureus son resistentes a la penicilina,

dejando como los antibiticos ms eficaces para combatirlos a
los aminoglucsidos, las cefalosporinas, la oxacilina o la nafcilina.3 Adems de la
administracin del tratamiento antimicrobiano correspondiente, puede ser
conveniente, en funcin del caso, la eliminacin de puertas de entradas como
catteres venosos permanentes o drenajes quirrgicos.
Porphyromonas endodontalis

Descripcin y significado

Porphyromonas endodontalis es un microbio gram negativo negativo pigmentado

negro asociado con periodontitis, infecciones endodnticas, gingivitis y necrosis de
la pulpa del diente. [1] P. endodontalis han demostrado un crecimiento ptimo en
el cultivo alrededor de 37 grados Celsius y ambientes ligeramente alcalinos. Se
diferencia de otros miembros del gnero en que un producto principal de la
bacteria es succinato. Microbios relacionados del gnero tales como P.
gingivalis y P. asaccharolytica son tambin bacterias pigmentadas negras y
nativas de la cavidad oral.

Estructura, Metabolismo y Ciclo de Vida

Las Porphyromonas endodontalis son varillas anaerbicas, pigmentadas en negro,

no polimrficas, no motrices que utilizan sustratos nitrogenos como fuentes de
energa. [2] El pigmento negro se observa en colonias despus de 7 a 14 das. El
pigmento principal asociado al color oscuro es el protoheme, aunque la
protoporfirina tambin est asociada al color. Al igual que otras bacterias gram-
negativas , Prophyromonas endodontalis tiene una pared celular hecha de
peptidoglicano que tiene una alta concentracin de lisina. [2] Los principales
productos de fermentacin son los cidos n-butrico y actico, as como los niveles
ms bajos de cidos propinico, isobutrico e isovalrico.

Ecologa y patognesis

Porphyromonas endodontalis forma colonias negras en las clulas epiteliales

gingivales . La colonizacin de este microbio provoca lesiones periapicales con
sntomas agudos como dolor, hinchazn y supuracin. [3] Los estudios
han demostrado que P. endodontalis se encuentra principalmente en infecciones
orales sintomticas, pero tambin puede encontrarse en infecciones
asintomticas. Se sugiere que P. endodontalis causa infecciones liberando
ampollas de membrana externa que pueden contener un lipopolisacrido. [4] Otros
posibles factores de virulencia incluyen cpsulas, proteasas y productos
metablicos txicos. [5] El mecanismo de cmo P. endodontalis se adhiere a las
clulas epiteliales gingivales es diferente de las bacterias relacionadas y un tema
actual de la investigacin.

Proteus mirabilis

Proteus mirabilis es un bacilo gram negativo, facultativamente anaerbico.

Muestra aglutinacin, motilidad, y actividad ureasa. P. mirabilis causa el 90% de
todas las infecciones por 'Proteus'. Viene de la Tribu Proteae.

Diagnstico

Una muestra de orina alcalina es un posible signo de P. mirabilis.

P. mirabilis puede diagnosticarse en el laboratorio debido a su caracterstica

motilidad agrupada, e inhabilidad para metabolizar lactosa en el medio agar
McConkey , por ejemplo. Y P. mirabilis produce un muy distintivo olor a pescado
podrido.

Enfermedad
Esta bacteria de colonias redondeadas tiene la habilidad de producir grandes
niveles de ureasa. La ureasa hidroliza urea a amonaco, (NH3) y eso hace a la
orina ms alcalina. Y al subir la alcalinidad puede liderar la formacin
de cristales de estruvita, carbonato de calcio, y/o apatita. Esta bacteria puede
encontrarse en clculos, y esas bacterias escondidas all, pueden reiniciar una
infeccin post tratamientos antibiticos.

Tratamiento

P. mirabilis es generalmente susceptible a muchos antibiticos como tetraciclinas,

aunque el 10%20% d, y formar filmes claros en medios de crecimiento. Es mtil,
posee flagelo peritricoso, y es conocido por su habilidad para aglutinarse. Est
comnmente en el tracto intestinal de humanos. P. Proteus perribillis no es
patognico en cobayos Cavia porcellus o en gallinas. Tiene la distincin de ser el
nico organismo patgeno con el factor de virulencia nombrado ZapA en honor al
msico de rock Frank Zappa.

El microorganismo testea:

Indol negativo y Nitrgeno Reductasa positivo (no produce burbujas de gas).

Rojo Metilo negativo y Vogues-Proskauer negativo.
Catalasa positiva y Citocro
BACILLUS ANTHRACIS

Bacillus anthracis

Bacillus anthracis en tincin de

Gram - bacilos de color morado.

Taxonoma

Dominio: Bacteria

Filo: Firmicutes

Clase: Bacilli

Orden: Bacillales

Familia: Bacillaceae

Gnero: Bacillus
Bacillus anthracis es una especie del gnero de bacterias Gram
positivas Bacillus siendo aerobia estricta. El nombre de la especie, anthracis,
proviene del griego anthrakis (), "carbn", y se refiere al carbunco cutneo,
la patologa ms comn producida por la bacteria, en el cual se forma una gran
lesin negra en la piel.

HAEMOPHILUS INFLUENZA,

anteriormente llamado bacilo de Pfeiffer o Bacillus influenzae, son

cocobacilos Gram-negativo no mviles descritos en 1892 por Richard
Pfeiffer durante una pandemia de gripe. Es generalmente aerobio pero puede
crecer como anaerobio facultativo. H. influenzae fue considerado errneamente
como la causa de la gripe comn hasta 1933, cuando la etiologa viral de la gripe
lleg a ser aparente. Sin embargo, H. influenzae es responsable de un amplio
rango de enfermedades como meningitis, epiglotitis, neumona, sepsis y otras de
menor gravedad.1

Debido a su pequeo genoma, H. influenzae fue el primer organismo de vida libre

cuyo genoma completo fue secuenciado, por Craig Venter. Su genoma consiste de
1.830.140 pares de bases y contiene 1.740 genes.2