PREGUNTAS RESUELTAS DEL EXAMEN

NOMBRE YESICA VERA LIRA

MATERIA ANALISIS INSTRUMENTAL II

5 TIPOS DE COLUMANS DE RELLENO

En cuanto a los rellenos, pueden dividirse en tres grandes clases:

a) Slidos troceados: son los ms baratos y se utilizan en tamaos muy distintos. Ofrecen buena resistencia a
la corrosin, pero son menos satisfactorios en cuanto al flujo del lquido o a la superficie efectiva para la
transferencia. No son rellenos uniformes con porosidad constante, (riesgo de canalizaciones).

b) Rellenos de una forma determinada: Son los ms comunes en las plantas qumicas (anillos Raschig, Pall,
Lessing, monturas Berl, etc., y los ms recientes, anillos Mini, monturas Intalox, Hy-Pak, etc.). Presentan una
gran eficacia y una baja cada de presin, encontrndose disponibles en una amplia gama de tamaos y
materiales. Presentan menos riesgo de canalizaciones y mejor distribucin de lquidos, pero son ms caros,
sobretodo los de menor tamao.

Las propiedades de algunos rellenos pueden verse tablas en la bibliografa.

El tamao del relleno utilizado influye en la altura y el dimetro de la columna, y en la cada de presin y coste
del relleno. Generalmente, al aumentar el tamao del relleno, se reduce el coste por unidad de volumen y la
cada de presin por unidad de altura, pero se reduce la eficacia en la transferencia de materia, por lo que se
precisar una mayor altura de columna.

c) Rellenos de rejilla: Fciles de fabricar, se utilizan normalmente para columnas de seccin cuadrada.
Tambin se construyen de diversos materiales, originando bajas cadas de presin debido a los espacios
libres entre rejillas. Son fciles de montar, pudindose utilizar para suspensiones.

El principal problema que presentan es la mala distribucin de lquidos para flujos elevados, porque se forman
canalillos, y no gotas.
9.-LINEABILIDAD Y SENSIBILIDAD DEL DETECTOR

SENSIBILIDAD: intensidad de la respuesta del detector ante un cambio de la propiedad fsica que mide esta
frente a la variacin de la cantidad de componente).

LINEALIDAD. Rango de masa concentracin de muestra sobre el cual el detector mantiene una sensibilidad
constante sin una desviacin arbitraria. El significado prctico de la linealidad del detector es el que le indica
al analista la concentracin para la cual el detector es confiable. Hay dos lmites en la curva de linealidad:

o El lmite de concentracin inferior, que es dado por el lmite de deteccin y,

o El lmite Superior, definido por un porcentaje de desviacin arbitrario de la curva de
linealidad, normalmente se toma un 5% de desviacin.

10 .- QUE SIGNIFICA AMPLITUD DE CONDICIONES EN EL DETECTOR

Amplitud de condicionesexperimentales de trabajo en las que el detector se puede utilizar como intervalo de
temperaturas, tiposde portador empleado, compatibilidad con fases estacionarias, etc.
Amplitud de componentes o selectividad, refleja la magnitud de la gama de compuestos qumicos a los que es
aplicable su uso de forma satisfactoria. La mayor o menor selectividad de un detector no es interesante en
smisma en trminos absolutos, sino que depende de la aplicacin que se quiera dar a ese detector, por
ejemplo, para un trabajo con analitos muy variados o desconocidos serms operativo un detector "universal",
poco selectivo pero para la cuantificacin de una familia de compuestos qumicos muy concreta, serpreferible
el empleo de un detector muy sensible a esos componentes, es decir, de gran selectividad.
11 en QUE INFLUYE LA COLUMNA EN EL DETECTOR

Columna: Puede influir sobre el detector en dos aspectos: contaminacin del gas portador por la fase
estacionaria y fluctuaciones en el caudal de dicho gas debidas al arrastre de la fase estacionaria por parte de
la fase mvil.

12.- COMO SE ORIGINA LA SEAL DE FONDO

La seal procedente del detector, se modifica en el procesador de seales, adaptndose al dispositivo de
lectura. En muchas ocasiones se produce simplemente una amplificacin, si bien, a menudo,
simultneamente las seales se filtran para reducir el ruido de fondo.

13.- A QUE SE DENOMINA NIVELES ESTADISTICOS DE LA SEAL DE FONDO

14 COMO ES EL MECANISMO DE DETECCION

15 EXPLICA EL MONTAJE DE CONDUCTIVIDAD TERMICA

Detector de Conductividad Trmica (TCD)

Es un detector universal y no destructivo, pero poco sensible y no muy estable. El hecho de ser universal,
barato y de funcionamiento simple, lo hace extremamente til para anlisis que no necesitan de alta
sensibilidad
16 COMO SON LAS CURVAS CARACTERISTICAS DE LA IONIZACION

17 QUE ES EL FACTOR DE CARBONO

En los detectores de ionizacin a la llama la respuesta es proporcional a lo que se denomina factor carbono
que se define como:
FC= Peso mulecular del componente de
(nmero de tomos de carbono del componente *12
El factor carbono es caracterstico de cada componente. Parece que es conveniente excluir del recuento de
carbonos aquellos que estn unidos a tomos de oxgeno, cuando los haya. Al interpretar el cromatograma se
utiliza el factor carbono como un factor de correccin para las reas de pico.

20 CUALES SON LOS SISTEMAS DE INYECCION DE MUESTRAS

Sistemas de inyeccin de muestra

El modo estndar, adecuado para aproximadamente 95% de las aplicaciones de las columnas
empacadas (o empaquetadas), es la inyeccin directa. La muestra es inyectada con una jeringa hipodrmica
a travs de un sptum de goma (o hule) de silicona autosellante, a un alineador de vidrio (glass insert)
contenido en un bloque metlico, donde es vaporizada y barrida hacia la columna (Fig. 3.2). El bloque se
calienta a una temperatura que se fija en un valor suficientemente alto para convertir prcticamente en forma
instantnea la muestra lquida en vapor. La cantidad de muestra inyectada es del orden de L para lquidos y
algo superior para gases.

Figura 3.2. Esquema de un puerto de inyeccin por vaporizacin instantnea tpico

Las muestras, lquidas y gaseosas, tambin pueden introducirse con un lazo (o bucle) calibrado,
introducindolas despus a la corriente del gas que fluye por medio de una vlvula (Fig. 3.3).

Figura 3.3. Vlvula rotatoria de seis vas

Inyeccin en columnas capilares. Es necesaria una reduccin del volumen de la muestra cuando
se trabaja con columnas capilares. Esto se logra mediante un inyector divisor (inyeccin en split) , donde
generalmente se inyecta una muestra de 1 L pero slo entra al capilar 0.01 L; el resto es desechado. Esta
tcnica impide la sobrecarga de la columna, pero desperdicia una porcin significativa de la muestra,

Cuando se realizan anlisis en cantidades pequeas de muestra con algunos componentes en

concentraciones del orden de milsimos de parte por milln, se introducira muy poco material en la columna
si para estas muestras se utiliza el divisor. Para ellas se requiere de solvente o inyeccin sin divisin (inyector
en splitless). La muestra completa, incluyendo el disolvente, se inyecta en la columna tubular abierta, a travs
de un vaporizador instantneo caliente. Se evita un coleo pronunciado del disolvente abriendo hacia la
atmsfera el puerto de inyeccin despus de algn tiempo (quiz unos 30s), cuando la mayor parte del
disolvente, y esencialmente toda la muestra, entraron en la columna. El tiempo apropiado antes de esa
descarga es crtico; si es demasiado corto se produce la prdida de los componentes de la muestra, mientras
que si es demasiado largo se produce un pico del disolvente ms grande del necesario, que puede sepultar
algunos de los picos de inters.

Muestreador automtico. Un muestreador automtico reproduce las inyecciones y medidas

manuales. Los frascos para las muestras son de vidrio, desechables, con tapones de sptum con sellado para
vapores. El muestreador enjuaga la jeringa con una muestra nueva para lavar las trazas de la muestra
anterior, bombea la muestra nueva para humedecer la jeringa y eliminar por completo cualquier burbuja, toma
una cantidad de muestra medida con precisin, la inyecta al cromatgrafo de gases. Los muestreadores
automticos tienen reproducibidad mecnica y son consistentemente ms precisos que un cromatografista
experimentado. Tambin, la operacin que no requiere atencin personal libera al operador para otras
actividades,

Muestreo de la cabeza gaseosa. Ms all del anlisis convencional de gases y lquidos de baja
viscosidad por CG (cromatografa de gases), algunos casos se manejan ms eficazmente con muestreo de la
cabeza gaseosa (vapor sobrenadante, o headspace). Esto es vlido cuando slo interesa el vapor sobre la
muestra, como en el caso de los perfumes o los productos alimenticios; con los constituyentes orgnicos
voltiles de muestras, como la orina, la respiracin del hombre y muestras ambientales; cuando la muestra es
un lquido que normalmente requerira de algn tratamiento antes de la inyeccin, como la sangre, aguas
residuales o agua potable, Los picos de los disolventes son mucho ms pequeos de lo que seran al inyectar
la muestra lquida tal cual. El muestreo de la cabeza gaseosa puede efectuarse sobre muestras con cualquier
matriz, siempre y cuando el coeficiente de reparto permita que exista una cantidad suficiente del analito en la
fase gaseosa.

Desorcin trmica y purga y trampa. Los constituyentes orgnicos voltiles de una muestra (slida
o lquida) se pueden purgar o extraer de ella haciendo pasar a travs de la misma una corriente de He y
atraparlos en una trampa adsorbente que forma parte del sistema de inyeccin del cromatgrafo y que puede
ser de Tenax, carbn activo u otro adsorbente a la temperatura ambiente. En el caso de muestras gaseosas
estos compuestos pueden ser atrapados en un tubo de vidrio externo al cromatgrafo, relleno de adsorbente
por el que se hace circular mediante bombeo el gas a analizar y que despus son colocados en el sistema de
inyeccin del cromatgrafo.

En el primero de los casos se trata de sistemas de purga-trampa y en el segundo de desorcin

trmica. Calentando esta trampa se desorben los voltiles hasta una precolumna enfriada con nitrgeno
lquido. Una vez se ha producido toda la desorcin adsorcin, se calienta en pocos segundos esta
precolumna que est unida a la columna cromatogrfica de CG y se inicia el anlisis. Algunos ejemplos de
compuestos analizados por purga y trampa son los de los constituyentes orgnicos de la orina, fruta, quesos.
Ejemplos de desercin trmica son los anlisis de la respiracin humana y del aire ambiental.
 Pirlisis. La cromatografa gas - lquido alcanza su lmite prctico cuando la cantidad de energa
necesaria para vaporizar la muestra es igual a la que se requiere para romper un enlace carbono-carbono. La
tcnica de pirlisis (o fragmentacin trmica controlada) extiende los anlisis por cromatografa de gases a
compuestos de tan baja volatilidad como el caucho (o hule), polmeros, pelculas de pintura, resinas,
microorganismos, suelos, carbones, textiles y organometlicos. La muestra se introduce en un pirolizador que
la calienta a temperatura muy elevada y suficiente para llevar a cabo la descomposicin. Se forman
fragmentos voltiles y se introducen automticamente en el cromatgrafo para el anlisis.

21 CUALES SISTEMAS EXISTEN PARA ATENUAR LA SEAL DE UN DETECTOR CROMATOGRAFO DE

GASES
El detector mide la intensidad de la luz y amplifica la seal. El detector es un fotomultiplicador que produce
una corriente elctrica dependiente de la intensidad de la luz incidente. La corriente elctrica del
fotomultiplicador es procesada por la electrnica del elemento; se produce una seal que es una medida de la
atenuacin de la luz en la celda de muestreo

23 PARA QUE SIRVE EL AREA DE UN PICO

Area del pico (S) es la comprendida entre el pico y la prolongacin de la lnea de base. Precisamente a
obtener el valor de este parmetro, en los picos del cromatograma, se dedican los dispositivos integradores.

24 CUANTITATIVAMENTE INTERPRETA UN RESULTADO DADO POR EL REGISTRADOR DE C.G.

25 COMO ES UN HPLC
Los cinco componentes ms importantes en el HPLC son: la fase mvil, la bomba, el sistema de
inyeccin, la columna y el detector. A continuacin un diagram de los componentes bsicos de un HPLC.

Fase mvil se debe filtrar y degasificar (sistema para degasificar gases disueltos en la fase mvil)
antes de acondicionar el equipo.
El papel esencial de las bombas es impulsar a la fase mvil con presin y flujo constante. La bomba
debe tener las siguientes caractersticas:

1) Debe producer presiones estables hasta 6000psi.

2) Debe mantener el flujo libre de pulsaciones.

3) Deben generar intervalos de caudales de flujo (0.1mL/min a 10 mL/min).

4) Deben permitir un control y reproducibilidad del flujo del solvente.

5) Sus componentes deben ser resistentes a la corrosin.

El proceso de inyeccin de la muestra en la actualidad es automtico. El sistema de inyeccin debe ser
reproducible y los vlumenes van desde 0.5L a 500L.
 Las columnas que se utilizan normalmente son de acero inoxidable Las columnas son rectas y miden
entre 10 y 30cm de longitude con un dimetro interno entre 4 a 10mm. Su relleno son de partculas porosas
que van entre 3 a 10m.
Los detectores su papel fundamentalmente es de indicar el momento de aparicin de los diferentes
componentes que constituyen la muestra, calificarlo
La tcnica de HPLC se basa en el principio de las interacciones hidrofbicas que resultan de las
fuerzas de repulsin entre un disolvente relativamente polar, un compuesto relativamente no polar y una fase
estacionaria no polar. Dependiendo la interaccin del analito con la fase estacionaria y la fase mvil se
demostrar la separacin dando un tiempo de retencin. El tiempo de retencin (tR) es el tiempo que
transcurre despus de la inyeccin de la muestra para que el pico del analito alcance el detector. El tiempo
muerto (tm) es el tiempo necesario para que una molcula de la fase mvil pase a travs de la columna y
llegue al detector.
Dependiendo del tipo de fase estacionaria y del tipo de fenmeno fsico que provoca la separacin, la
cromatografa lquida de alta resolucin puede ser:

a) Cromatografa de adsorcin la fase estacionaria es un slido y se utiliza exclusivamente slice

y se utiliza para compuestos no polares con masas molares menores de 5000.
b) Cromatografa de reparto es la ms comn y como fase estacionaria se utilizan compuestos
unidos qumicamente en un soporte de slice. En la cromatografa de fase normal, la fase
estacionaria es polar y la fase mvil es no polar, obteniendo as los compuestos no polares que
eluyen primero. En la cromatografa de reversa, la fase estacionaria es no polar y la fase mvil
es polar, obteniendo as los compuestos polares que eluyen primero. Se utiliza para compuestos
polares no inicos de baja o moderada masa molar.
c) Cromatografa inica se utilizan columnas rellenas con resina de intercambio inico para
separar y determinar iones.
d) Cromatografa por exclusin por tamao la fase estacionaria est formada por partculas
polimricas o de slice que contienen una red uniforme de poros y llevan a cabo un
fraccionamiento relacionado con el tamao molecular. Las molculas de tamao mayor son
excludas y eluyen primero, mientras que las ms pequeas que penetran en los poros son
retenidas ms tiempo. Se utiliza para especies de alto masa molecular.

26 COMO SE MANIPULA UN HPLC

I. Procedimiento
A. Preparacin de la fase mvil
1) Preparar una solucin de metanol 50% y agua 50% a una proporcin de 1:1
utilizando una probeta. Preparar un litro de solucin.
2) Degasificar la fase mvil para evitar que formen burbujas que afecten el flujo y la
presin los cuales deben permanecer constantes.
B. Preparacin de la curva de calibracin
1) Preparar 100mL una solucin madre de cafena (M.W. 194.14g/mol) de 0.0025M.
 2) Se disuelve un poco de la muestra con el disolvente de trabajo (agua) y se
transfiere cuantitativamente a un matraz volumtrico de 100mL. Aforar la solucin con
agua y homogenizarla.
3) Se tomarn alcuotas de diferentes volmenes: 2.00mL, 5.00mL, 8.00mL, y
10.00mL utilizando pipetas volumtricas y transferirlas cuantitativamente a matraces
volumtricos de 50mL.
4) Aforar las soluciones con el disolvente de trabajo (agua) y homogenizarla.
5) Construir una curva de calibracin con los datos obtenidos (tiempo de retencin,
rea de picos y altura de platos tericos).

29 CUAL SON LAS DIFERENCIAS Y SIMILITUDES ENTRE EL HPLC Y CROMATOGRAFO DE GASES

Como caractersticas de ambos mtodos:

Son eficientes, muy selectivos, ampliamente aplicables.

Slo se requiere una muestra pequea.

Pueden utilizarse sin destruir la muestra.

Se adapta fcilmente al anlisis cuantitativo.

Ventajas de la HPLC:

Puede acomodar muestras no voltiles e inestable trmicamente.

Es aplicable a iones inorgnicos.

Ventajas de la CG:

Se trata de un equipo sencillo y barato en comparacin con HPLC.

Es rpido.

Tiene resolucin en paralelo (columnas capilares).

Se conecta fcilmente con la espectroscopia de masas, (MS).

La CG, ofrece la ventaja de la velocidad y simplicidad del equipo, pero la HPLC es aplicable a sustancias no
voltiles y materiales trmicamente inestables.

Algunas diferencias instrumentales:

En HPLC no existen detectores tan aplicables universalmente, ni tan tampoco tan fiables como en
CG.

El detector en HPLC no es necesario que sea sensible en un intervalo tan grande de temperaturas.
 El detector usado en HPLC debe tener un volumen interno mnimo a fin de reducir el ensanchamiento
de banda.

30 CUAL ES LA APLICACION INDUSTRIAL DE UN CROMATOGRAFO DE GASES Y DE UN HPLC

Aplicaciones en Cromatografa de lquidos de alta resolucin (HPLC) : Como aplicaciones de la

cromatografa de reparto en productos de alimentacin : edulcorantes artificiales, antioxidadntes, aflatoxinas,
aditivos, colorantes, aminocidos, proteinas, carbohidratos, lpidos.

Las aplicaciones de la cromatografa inica est el anlisis de drogas y sus metabolitos, sueros, conservantes
de alimentos, mezclas para vitaminas, azcares, y preparaciones farmacuticas.

Respecto a las aplicaciones referidas a productos alimenticios en cromatografa por exclusin de tamaos:
separacin de cidos grasos, determinacin de glucosa fructosa y sacarosa en zumos enlatados.

Aplicaciones de La cromatografa de Gases. Se pueden destacar las siguientes aplicaciones o ejemplos.

Aminas aromticas heterocclicas (HAA) formadas durante la coccin de alimentos proteicos (carne y
pescados). Donde estos compuestos son mutagnicos potentes bien conocidos y algunos de ellos
son carcingenos. Se han formado en alimentos cocinados, y tambin se han detectado en las
muestras ambientales (aerotransportadas partculas, aire de interior, humo del cigarrillo...) y en las
muestras biolgicas (orina, plasma). Por lo tanto, el aislamiento y la medida de HAA son muy
importantes para el gravamen de riesgo para la salud humana.

Control de los procesos de destilado de aguardientes a escala industrial: Se identifica y cuantifica,

mediante cromatografa en fase gaseosa aquellos componentes que definen la calidad bsica de
los orujos y cuyo control exige la administracin: grado alcohlico, acidez total, acetato de etilo,
metanol, acetaldehido, acetal y alcoholes superiores.

Determinacin de enantiomeric de compuestos chiral en aceites de mesa ( aceites de oliva, avellana,

cacahuete y nuez) haciendo uso de HPLC inversa y CG.

Estudio de vinos monovarietales.

Caracterizacin de avellanas por su composicin en cidos grasos.

Identificacin d compuestos voltiles en granos de cacao.

Determinacin del perfil del cido graso, acidez y valor del perxido en la calidad del aceite de oliva
contra el almacenaje.

Determinacin cuali y cuantitativa de componentes voltiles en hierbas y especias.

Separacin de compuestos voltiles del queso.

Anlisis de compuestos terpnicos de la uva de la variedad albario.

Estudio de compuestos azufrados voltiles pesados es vinos tintos de la denominacin de origen

ribeira sacra.