MEDIOS DE CULTIVO REV: 1

MC-OVB-O01 OGY & VERDE VIGENTE: PGINAS 1 A

BRILLANTE 10/06/2022 5

MEDIOS DE CULTIVO
OGY
VERDE BRILLANTE
Presentado por:
Jos Alfredo castilla gil
Luis Guillermo Agudelo
Yoimar Torres

Profesora:
Grey Muos

Ficha: 1136144

Tecnlogo en control de calidad de los alimentos

2016

Elaboro: Jos Reviso: Greys Aprob: Greys

Castilla, Luis Fecha:09-08-16 Muos Fecha:11-21-16 Muos Fecha:11-10-16
Agudelo, Yoimar
Torres
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MEDIO OGYE
Fundamentos
El agar OGY (Agar-Oxitetraciclina-glucosa-extracto de levadura). Es un agar selectivo
para la demostracin y numeracin de mohos y levaduras en todo tipo de material de
investigacin (alimentos, material clnico, etc.) El agar-oxitetraciclina-glucosa-extracto
de levadura ha sido recomendado como medio de rutina para la investigacin de
mantequilla.
Composicin:
Est compuesto por extracto de levadura, D-glucosa, Agar-agar, Oxitetraciclina 0,1 o
Gentamicina 0,05.
Procedimiento
Se prepararon diluciones logartmicas a base 10 (10-1,10-2y 10-3). Semarco un
frasco como dilucin10-1 y se adicionaron 90ml de agua peptonada al 0.1%;
marcamos dos tubos de vidrio tapa rosca como 10-2y dilucin 10-3 y adicionamos 9ml
de agua peptona da al 0.1%.
Dilucin 10-1: pesamos 10g del alimento (cande de cerdo) y lo agregamos al frasco
marcado como dilucin 10-1 y mesclamos hasta homogenizar la mezcla.
Dilucin 10-2: Tomamos 1ml de la dilucin 10-1 y lo agregamos al tubo marcado
como 10-2 Y se mesclo hasta homogenizar.
Dilucin 10-3: tom 1ml de la dilucin anterior y se agreg al tubo marcado como 10-
3
Obteniendo as las tres diluciones:
A partir de estas tres diluciones realizamos la determinacin para mohos y levaduras
y la determinacin de esporas de Clostridium sulfito reductor.

Elaboro: Jos Reviso: Greys Aprob: Greys

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Torres
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Determinacin de mohos y levaduras en carne de cerdo.

Se realizaron siembras en profundidad, para esto tomamos 3 cajas de Petri estriles y
las marcamos como 10-1,10-2y 10-3.

Mezclamos unas diez veces con la pipeta de la dilucin 10-1 y tomamos 1ml de esta
dilucin y lo adicionamos en la caja marcada como 10-1, mezclamos de igual forma
con la pipeta marcada como 10-2y tomamos 1ml de la dilucin 10-2 y lo adicionamos
en la caja marcada con la misma dilucin, de la misma forma se tom 1ml de la
dilucin 10-3y fueron agregados a la caja marcada como 10-3.
Adicionamos 15ml de agar Extracto de malta-oxitetraciclina (OGY) fundido a 45C a
cada una de las cajas. Una vez agregado el agar mezclamos varias veces en forma
de ochosn direccin de las manecillas del reloj con el fin de que se produzca una
distribucin homognea de la muestra en el medio de cultivo, se dej en reposo para
que se solidificara el agar y se incubaron a 22Cpor 7 das.

Elaboro: Jos Reviso: Greys Aprob: Greys

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MEDIO DE CULTIVO VERDE BRILLANTE

Es un medio altamente selectivo utilizado para el aislamiento de microorganismos
pertenecientes al gnero Salmonella con excepcin de la Salmonella typhi.
PRINCIPIO O FUNDAMENTO
La selectividad de este medio se basa en la concentracin del verde brillante,
que inhibe microorganismos Gram positivos y parcialmente a Gram negativos.
La lactosa y la sacarosa permiten diferenciar la flora acompaante que utiliza
estos carbohidratos, del gnero Salmonella que no los degrada.

CLASIFICACION, EN QUE TIPO DE MEDIO SE ENCUENTRAN Y POR QUE?

MEDIOS SELECTIVOS: son aquellos medios a los que se les incorporan
sustancias para inhibir al crecimiento de la mayor parte de los
microorganismos con excepcin de aquellos para los que fueron ideados, por
ejemplo, el medio telurito para el bacilo productor de la difteria y el agar citrato-
dexosicolato para los grupos de Salmonella sp y Shigella sp.
MEDIOS COMPLEJOS O DE COMPOSICIN INDEFINIDA: Estos medios llevan
ingredientes como extracto de levadura, peptona, infusin de cerebro, extracto de
carne, etc. que contienen nutrientes en abundancia pero sin saber con exactitud la
composicin cualitativa ni cuantitativa de estos nutrientes.

Elaboro: Jos Reviso: Greys Aprob: Greys

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TIPO DE MICROORGANISMOS QUE CRECEN EN EL MEDIO Y QUE FUNCION

CUMPLEN CADA UNO?

Microorganismos Caractersticas
Escherichia coli Amarillo-verdosas sobre fondo amarillento
Salmonella enteritidis Rosas, blancas o transparentes sobre fondo rojo
Salmonella typhi Crecimiento inhibido
Salmonella typhimurium Rosas, blancas o transparentes sobre fondo rojo
Shigella flexneri Crecimiento inhibido
Staphylococcus aureus Crecimiento inhibido

TECNICA DE IDENTIFICACION (PROCESO Y MATERIALES)

Mtodo:

Suspender 58g del medio en un litro de agua purificada. Calentar con agitacin suave
hasta su completa disolucin y hervir durante un minuto. Esterilizar en autoclave a
121c (15 libras de presin) durante 15 minutos. Dejar enfriar a una temperatura entre
45-50c y vaciar en placas de Petri estriles. ES IMPORTANTE PROTEGERLO DE
LA LUZ. Conservar en refrigeracin de 2 a 8C.

Procedimiento:

1. para el aislamiento de salmonella a partir de muestras clnicas, inocular una

muestra de materia fecal o del hisopo rectal en la placa y sembrar por el mtodo de la
estra.

2. incubar las placas a 35c durante 18-24 horas y examinar el desarrollo colonial.

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INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS

Bacterias que fermentan la lactosa y/o sacarosa: colonias amarillo-verdosas,

rodeadas por un halo de color amarillo verdoso del medio de cultivo.

Bacterias que no fermentan la lactosa y/o sacarosa: colonias de color blanco

rosadas o transparentes rodeadas por un halo rojizo del medio de cultivo.

Elaboro: Jos Reviso: Greys Aprob: Greys

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