FUNDACIN UNIVERSIDAD DE AMRICA QUMICA ORGNICA EXPERIMENTAL GRUPO 1
INFORME # 1
EXTRACCIN DE ESENCIAS Y SEPARACIN DE
NATURALES (CLOROFILA, XANTOFILAS Y CAROTENOS)
Jimena Ramirez
Mara Camila Gutirrez
Paola Andrea Melgarejo
Qumica Orgnica Experimental Grupo I
Fundacin Universidad de Amrica
Resumen
En el presente informe se muestran los procesos
realizados con el fin de reconocer y comprender los
diferentes mtodos de extraccin de esencias
utilizados a nivel de laboratorio e industrial,
efectuando extracciones de tipo continuo tanto
soxhlet como destilacin por arrastre de vapor con
el uso de disolventes polares. De igual forma se
obtuvieron los compuestos qumicos que le dan el
aroma a las muestras de canela y nuez moscada, a
partir de consultas bibliogrficas realizadas. Con
respecto al mtodo de extraccin de pigmentos
naturales de cloroplastos por cromatografa, se dio
cuenta que las cantidades de los reactivos de
acetona utilizados para encontrar la cantidad
porcentual de clorofilas y xantofilas mostraron un
porcentaje del 81.08% y 94.59% , dejando
evidenciar la eficiencia de este compuesto en el
proceso de cromatografa de capa fina en
comparacin del uso de etanol. Finalmente se
calcul la cantidad total de clorofila por el mtodo
de espectofotometra, facilitando el nivel de
absorvancia de cada muestra realizada en la praxis.
Palabras claves: Cromatografa, Esencia,
Pigmento, Extraccin, Clorofilas.
Abstrac
In this report the processes carried out in order to
recognize and understand the different methods of
extracting essences used in the laboratory and
industrial, performing extractions continually both
soxleht as stripping steam with the use of polar
solvents shown . Likewise, the chemicals that give
flavor to the samples of cinnamon and nutmeg,
from literature consultations were obtained.
Regarding the method of extraction of natural
pigments chloroplasts by chromatography he
realized that the amounts of the reagents of acetone
used to find the percentage amount of chlorophylls
and xanthophylls showed a percentage of 81.08%
and 94.59%, leaving evidence efficiency this
1.
11-08-2016 | Nota :_____/50
PIGMENTOS
compound in the process of thin layer
chromatography compared the use of ethanol.
Finally the total amount of chlorophyll was
calculated by the spectrophotometric method,
facilitating the level of absorbance of each sample
done in practice.
Key words: Chromatography, Essence, Pigment,
Extraction, Clorofilas .
Objetivo General
Clasificar, identificar los diferentes tipos de esencias
y separar pigmentos naturales.
Objetivos especficos
- Clasificar, identificar y relacionar los diferentes
tipos de esencias que se pueden encontrar en el
reino vegetal.
- Identificar los compuestos orgnicos que estn
presentes en las diferentes esencias.
- Extraer y separar los diferentes tipos de
pigmentos de cloroplastos por cromatografa de
papel en funcin de su polaridad relativa.
- Extraer los pigmentos de cloroplastos de un
material vegetal y determinar la cantidad de
clorofila.
Introduccin
En la actualidad las esencias son muy utilizadas a
nivel industrial y sobretodo comercial. Por sta
razn el trabajo realizado en sta prctica nos dio
un acercamiento hacia la aplicacin en el campo
laboral permitindonos desarrollar diferentes
competencias que reunen los conocimientos de los
semestres atneriores y del presente.
Para la realizacin del trabajo se tuvo como punto
de inicio la asimilacin de conceptos acordes a la
temtica del semestre y la asociacin de stos con
las temticas previamente vistas. As, se permiti
cumplir el objetivo de comprender, diferenciar y
clasificar los tipos de esencia por medio de
mtodos de extraccin de esencias, informacin
que fue entregada por la docente a cargo a travs
de guas de laboratorio explicadas por ella misma.
Con base en lo anterior, la prctica tuvo como
objeto la identifiacin y clasificacin de las
distintas esencias que pueden ser contenidas en los
alimentos y de los compuestos orgnicos que en
ellos se presentan, al igual que la separacin de la
pigmentacin en cada una de las muestras del
alimento y clasificacin segn su color y tipo de
cloroplasto presente en ellas. De sta forma
pudimos reconocer, separar y comparar los
diferentes mtodos utilizados a nivel industrial y en
el laboratorio enriqueciendo y ampliando el
conocimiento de los futuros ingenieros qumicos.
Fundamento terico
Esencia: Se define como aquella sustancia oleosa,
inflamable, voltil, aromtica de origen vegetal
segregada por glndulas especializadas de flores,
frutos y hojas. La mayora de las esencias en
condiciones ambientales son lquidas, sin embargo
existen casos en que pueden aparecer de forma
slida o cristalinas; pero ninguna tiene el tacto
grasiento de los aceites. Existen dos tipos de
esencias a nivel industrial:
- Esencia natural: Es aquella sustancia voltil a
temperatura ordinaria, que se obtiene de plantas
o animales a partir de procedimientos
artesanales o industriales.
- Esencia sinttica: Producto qumico no voltil
generado por mtodos qumicos para imitar la
naturaleza o estructura de un componente.
Extraccin: Tcnica empleada que tiene por objeto
separar un producto orgnico de una mezcla o de
una fuente natural, con el fin de purificarla
mediante el uso de un disolvente (agua, ter,
etanol, cetona y cloroformo). Los mtodos de
extraccin pueden ser:
- Extraccin continua: Tambin denominada
extraccin Slido-Lquido, consiste en la
separacin de uno o ms de un componente de
una mezcla slida mediante un disolvene
lquido. Este proceso puede ser llevado a cabo
mediante un extractor tipo soxleht o con
destilacin con arrastre de vapor.
- Extraccin discontinua: Consiste en la
transferencia de una sustancia de una fase a
1.
otra, llevndose a cabo entre dos lquidos
inmiscibles. Las dos fases lquidas de una
extraccin son la fase acuosa y la fase
orgnica. Este proceso extraccin Lquido-
Lquido se puede llevar a cabo mediante la
agitacin de un disolvente en un embudo de
decantacin.
Cromatografa: Mtodo fsico de separacin en el
que los componentes que se han de separar se
distribuyen en dos fases, una de las cuales est en
reposo (Fase estacionaria) mientras que la otra
(Fase mvil) se mueve en una direccin definida,
con el fin de identificar y determinar las cantidades
de dichos componentes. Dependiendo de la
naturaleza de la fase estacionaria y de la fase mvil
se pueden distinguir distintos tipos de
cromatografa:
1. Cromatografa slido-lquido: La fase
estacionaria es un slido y la mvil un
lquido.
2. Cromatografa lquido-lquido: La fase
estacionaria es un lquido anclado a un
soporte slido.
3. Cromatografa lquido-gas: La fase
estacionaria es un lquido no voltil
impregnado en un slido y la fase mvil es
un gas.
4. Cromatografa slido-gas: La fase
estacionaria es un slido y la mvil es un
gas.
Al mismo tiempo se puede clasificar segn el tipo
de interaccin que se establece entre los
componentes de la mezcla y la fase mvil y
estacionaria.
1. Cromatografa de adsorcin: La fase
estacionaria es un slido polar capaz de
adsorber a los componentes de la mezcla
mediante interacciones de tipo polar.
2. Cromatografa de particin: La separacin
se basa en las diferencias de solubilidad de
los componentes lquidos de la mezcla en
las fases estacionaria y mvil.
3. Cromatografa de intercambio inico: La
fase estacionaria es un slido que lleva
anclados grupos funcionales ionizables
cuya carga se puede intercambiar por
aquellos iones presentes en la fase mvil.
4. Cromatografa de exclusin: Tambin
conocida como exclusin molecular, se
basa en diferencias de tamao, forma o
carga entre las molculas de los distintos
componentes de la muestra.
Pigmento: Sustancia orgnica de naturaleza no
proteica caracterizada por dar un tono especfico Metodologa
como resultado de la absorcin de ciertas ondas de
luz dependiendo su longitud de onda a la que emite
o refleja la luz solar. Un claro ejemplo de
pigmentos orgnicos vegetales se ve reflejado en
los cloroplastos, los cuales pueden ser:

1. Clorofilas: Principal pigmento fotosinttico

cuya estructura est constituida por un
tetrapirrol cerrado con varios sustituyentes
laterales. En las plantas existen dos tipos de
clorofilas (a y b) que se diferencian en el
sustituyente R en el ciclo II del anillo
tetrapirrlico (Figura 1). Cabe aadir que el
pico mximo de absorcin del espectro
luminoso de la clorofila a es de 700 nm en
comparacin a la clorofila b con un valor de
680nm que les permite reflejar un color verde.

Figura 1. Estructura de la clorofila [2]

2. Carotenoides: Son molculas hidrocarbonadas

de 40 tomos de carbono presentes en diversas
estructuras de plantas y en gran variedad de
algas, hongos, animales y bacterias con
propiedades que les confiere absorver el
espectro de luz visible en diferentes longitudes
de onda, desde 385 nm hasta 500nm que
reflejan colores que van desde el amarillo
hasta rojo. Los carotenoides que participan en
la fotosntesis son de dos tipos:

- Los carotenoides tipo caroteno que constan

exclusivamente de carbono e hidrgeno.

- Los carotenoides tipo xantofila contiene en su

estructura oxgeno adems de carbono e
hidrgeno.

1.
 obtencin de
la esencia de
nuez
moscada.
El 90 % del aceite La esencia de
esencial de la canela
canela se compone present una
de Cinamaldehdo. Arrastre de coloracin
Canela vapor transparente ,
con un fuerte
olor a canela
en estado
lquido. Al
cabo de unos
das la
esencia
continua con
su olor
caracterstico
.

Tabla 2 : Cromatografa experimental

Materia Mtodo de Pigmento de la mancha

Prima extraccin
La muestra nos deja ver un
Espinaca pigmento de color verde
oscuro al ser macerada tanto
con acetona como etanol.
Cromatografa La pigmentacin que genera
la zanahoria segn el
Zanahoria observador, mostr una
tonalidad naranja opaco al
Resultados y Discusin ser macerada con acetona y
etanol.

Tabla 1 : Extraccin continua experimental. Tabla 3 : Extraccin con solventes orgnicos, anlisis con
Materia Componente Mtodo de Comentarios espectofotometra
Prima qumico que le da extraccin
el aroma Muestras Longitud Nivel de
El aroma se La esencia de onda Absorvancia
Nuez encuentra dado por obtenida 10 mL de Acetona + 0.5 g de 620 nm 1.333A
moscada el 60-85% de mostr una Espinaca
terpenos coloracin 10 mL de Acetona + 0.51 g de 620 nm 0.289A
(canfeno). Con soxhlet marrn, con Zanahoria
un olor 10 mL de Etanol + 0.5g de 645 nm 0.394 A
penetrante y Espinaca
una textura 10 mL de Etanol + 0.5 g de 645 nm 0.078 A
espesa. Sin Zanahoria
embargo se
detect un = . + .
ligero olor a
etanol al = 20.2 1.333 + 8.02 0.394
hacer uso de Clorofila Total en Espinaca = 30.086 g/mL
este
disolvente = 20.2 0.289 + 8.02 0.078
como fase Clorofila Total en Zanahoria = 6.463 g/mL
mvil para la

1.
 espinaca y la zanahoria ocn la acetona, y la
Tabla 4 : Cromatografa de capa fina espinaca y la zanahoria con el etanol, presentaron
la misma coloracin, siendo verde para las
Espinaca Zanahoria Espinaca Zanahoria primeras, y naranja para las segundas.
con con con con Tambin se pudo comparar la distancia recorrida
Etanol Etanol Acetona Acetona por la muestra (Rc) desde la marca de 1cm en la
Rc 2.9 cm 3. 7cm 3 cm 3.5 cm parte inferior del papel whatman, obteneindo una
diferencia de tan slo 1mm entre la espinaca con
Rs Etanol Acetona etanol y la espinaca con la acetona, siendo mayor
5.2 cm 3.7 cm la distancia en presencia del etanol; en el caso de la
zanahoria con etanol y acetona, la diferencia de Rc
fue de 2mm, nuevamente siendo mayor con el
% () = etanol, y finalmente el Rs fue mayor en el etanol,

con una diferencia de 1,5cm.
% () =
2.9
100 = 55.76 % Por ltimo, para la espectrofotometra se tuvo
5.2 como referencia que el mximo de absorbancia
3
para la clorofila es de 665nm, dando como
% () = 100 = 81.08 % resultado tras la medicin datos de 645nm y 620nm
3.7
con una absorbancia inferior a 2. sta abrosbancia
% () =
3.5
100 = 94.59% es proporcional a la concentracin de la sustancia
3.7 contenida en la muestra, indicando as la presencia
3.7
de clorofila en las muestras analizadas. En ste
% () = 100 = 71.15% laboratorio se obtuvo que la cantidad total de
5.2
clorofila presente en la espinaca y la zanahoria.
Anlisis
Cuestionario
Las esencias se extraen por medio de distintos
mtodos y directamente de partes de algunas
plantas: hojas, flores, races,.. y su aroma es 1. Qu normatividad existe en el pas para
concentrado y duradero depedneidno si es una esencias?
esencia natural o sintetizada. Estos productos no se encuentran normalizados
Las esencias obntenidas en el laboratrio fueron de pero deben contar con una informacin mnima en
carcter lquido con un aroma carcterstico en cada su etiqueta la cual es: a. Laboratorio fabricante y su
una, lo que indica que no todas las esencias ubicacin. b. Numero de lote. c. No deben contener
naturales poseen el mismo aroma, sino que ste usos teraputicos o indicaciones teraputicas.
depende de la estructura de cada planta.
Para ambas extracciones se observ que el tiempo 2. Componentes qumicos que
requerido para la obtencin de las esencias fue proporcionan el olor de la esencia,
elevad, necesitando de calor para dar paso a la frmulas estructurales.
extraccin, lo cual indica un consumo de energa, Se destaca la riqueza del limoneno.
proceso que resulta siendo costoso a un nivel ms Elaborar un paralelo entre esencia natural y
elevado de produccin como el nivel industrial. sinttica.
En el mtodo de arrastre por vapor se obtuvo El aroma de una esencia natural es ms spero y
mayor cantidad de producto (esencia) que en el duradero. El aroma de una esencia sinttica es muy
mtodo de extraccin soxhlet. Tambin se observ dulce y se va rpidamente.
que con el primer mtodo la esencia era incolora, y En la etiqueta figura el nombre de la planta de la
en un mismo recipiente se obtuvo la esencia de la que proviene mientras que en la sinttica al ser
canela, mientras que en el segundo el producto diluida, se indica su porcentaje.
presentaba un color marrn, arrastrando a travs Las esencias naturales pueden ser usadas con
del condensador el alcohol contenido en la muestra motivo teraputico, las esencias sintpeticas slo
hacia un baker, dejando totalmente aislada la sirven para aromatizar.
esencia de la nuez moscada en el baln. Mientras que las esencias naturales se encuentran
en un envase de vidrio con coloracin oscura para
Para la cromatografa de los pigmentos contenidos evitar que se dae con la luz, las esencias sintticas
en la zanahoria y la espinaca, cada uno de ellos se encuentran el envases claros.
contenidos en muestras con acetona y etanol, se
pudo identificar el tipo de clrolasto existente en 3. Investigar en qu consiste la extraccin
cada muestra. Un punto importante fue que tanto la de esencias por disolucin de aceites

1.
 fijos.
La extraccin de esencias por disolucin de aceites
fijos consiste en la extraccin por fluidos
superctricos.
4. Explique en qu consiste la extraccin
por fluidos superctricos y de ejemplos
industriales de compuestos que se
puedan extrar por esta tcnica.
Cuando un gas se somete a calentamiento a
elevadas presiones, se comporta como una
sustancia con propiedades intermedias entre gas y
lquido. El material vegetal se coloca en un tanque
de acero y se inyecta dixido de carbono hasta
alcanzar presiones superando el punto crtico, aqu
el dixido de carbono actuar como el solvente de
extraccin. Tras liberarse la presin del tanque de
dixido de carbono volver a su estado gaseoso sin
dejar residuos de solvente.
Ejemplo: Primer uso comercial. Lpulos y cafena
del caf, remocin de nicotina de tabaco,
desasfaltado de petrleo, extraccin de aceites de
semillas oleaginosas y extraccin de aceites
esenciales para saborizantes o perfumes.
5. Explique en qu consiste el proceso de
enflorado.
El enflorado es un proceso utilizado para capturar
fragancias de las plantas por medio de grasas
inodoras y slidas a temperatura ambiente. El
enflorado puede ser en fro o en caliente. Para el
primer caso se utiliza una placa de vidrio (chasis)
que se usa con una capa de grasa animal y encima
de sta se colocan las materias vegetales. Al
trascurso de 1 a 3 das se aroma se habr
impregnado en la grasa. El proceso se repite
reemplazando los vegetales por unos ms frescos
hasta llegar a la pomada enflorada, que hace
referencia a la saturacin de la esencia en la grasa.
El proceso se puede continuar agregando a la grasa
alcohol etlico para extraer de la grasa las
molculas de fragancia y as transferirlas al
alcohol. Luego de esto, el alcohol se evapora. En el
segundo caso, en caliente, las grasas slidas se
calientan mientras que las materias vegetales se
agitan, mezclndolas con la grasa impregnando a
esta ltima su aroma. El proceso se repite
sustituyendo los vegetales por otros ms frescos
hasta llegar a la pomada enflorada y as se puede
continuar el proceso como en el anterior.
6. Distinga en su muestra a qu pigmento
corresponde cada mancha.
En la muestra del etanol que contena espinaca, se
presentaron dos coloraciones: la primera a 2,9 cm
de color verde indicando la presencia de
cloroplastos tipo a, y la segunda marca de color
amarillo a 3,2 cm indicanco la presencia de
1.
xantfilas. Con respecto a la muestra que contena
zanahoria se present una nica coloracin que en
ste caso fue amarillenta, evidenciando la presencia
de xentfilas.
Para la muestra que contena acetona y espinaca y
acetona y zanahoria, se observaron las mismas
coloraciones que en las de etanol, dando como
resultado el mismo pigmento con las mismas
caractersticas correspondientes a l.
7. Calcular la movillidad relativa de los
distintos pigmentos Rf.
% () =
2.9
% () = 100 = 55.76 %
5.2
3
% () = 3.7 100 = 81.08 %
3.5
% () = 3.7 100 = 94.59%
3.7
% () = 5.2 100 = 71.15%
8. Qu factores pueden afectar el Rf?
Depende de factores como el solvente, placa de
cromatografa en capa fina en donde tambin se
encuentra el factor de retencin, haciendo alucin a
la afinidad relativa de la sustancia con el disolvente
cambiando el absorbente, y el coeficiente de
preservacin qumica, que es una medida de cmo
la placa se mueve en respuesta al movimiento del
disolvente.
Tambin encontramos otros factores como la
temperatura a la cual se encuentra el solvente y la
placa, la tcnica de aplicacin de la muestra, la
aplicacion de demasiada muestra tendr como
resultado grandes franjas difusas al mover del
plato, ya que no se podr estimar con presicin la
distancia a la que la sustancia fue entregada.
9. Haga los clculos correspondientes para
la extraccin de pigmentos.
= . + .
= 20.2 1.333 + 8.02
0.394
Clorofila Total en Espinaca = 30.086
= 20.2 0.289 + 8.02
0.078
Clorofila Total en Zanahoria = 30.086
Conclusiones ANEXOS
En la prctica realizada se identifico el compuesto
qumico que le da el aroma tanto a la canela como
a la nuez moscada a partir de consultas tericas que
dieron como referencia un 60-85 % de terpenos
(canfeno) en la esencia de la nuez mosacada y un
90% de cinamaldehdos en la composicin del
aceite esencial de la canela.

Se evidenci un ligero aroma de etanol en la

esencia de nuez mosacada a causa de que la
concentracin de etanol utilizada como disolvente,
no se elimin en su totalidad durante el proceso de
extraccin continua de soxhlet y destilacin,
afectando y alterando el aroma en el resultado
final.

Se observ a partir de la extraccin de pigmentos

de cloroplastos por cromatografa de papel en
funcin de su polaridad, que tanto la clorofila con
un porcentaje de 81.08 % como xantofilas al
94.59% mostraron un alto porcentaje al usar
acetona como disolvente, lo cual deja evidenciar la Equipo de extraccin continua tipo soxhlet.
eficiencia de este compuesto para la extraccin de
pigmentos en el proceso de cromatografa de capa
fina, en comparacin con el uso de etanol que
arrojo porcentajes del 71.15% de xantofilas y
55.76% de clorofila en menores cantidades
porcentuales.

A partir de los niveles de absorvancia obtenidos en

las muestras de espinaca y zanahoria con acetona y
etanol (disolventes polares), se determin la
cantidad total de clorofila en la zanahoria,
arrojando un valor de 6.463 g/mL; de igual forma
la cantidad total de clorofila en la espinaca fue de
30.086g/mL del extracto obtenido.

Referencias

[1] M.HERNNDEZ, B.TOVAR. GUAS PARA

LAS PRCTICAS DE LABORATORIO.
Prctica 2:Extraccin de esencias y separacin de
pigmentos naturales (Clorofila, xantofilas y
carotenos). 2015.
Extraccin continua por mtodo de destilacin por
[2]Nuez Uncal, Mara del Carmen, [En lnea]
arrastre de vapor.
Disponible en:
http://almez.pntic.mec.es/~jrem0000/dpbg/Fotosin
tesis/clorofila_y_pigmentos_accesorios.html
(Consultado el 05 de Agosto del 2016)

1.
Solucin de acetona con tejido vegetal disgregado/
Solucin de etanol con tejido vegetal disgregado.

Resultado cromatografa de capa fina

1.