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RESULTADOS Y DISCUCIONES:

Se observ el producto filamentoso (fibras coloreadas) que son las fibras de ADN (cromatina)
de la lechuga. Estas no son ADN puro ya que entremezclado con l hay fragmento de ARN.

DISCUCIONES:

En la prctica de laboratorio extraccin del ADN vegetal, se identific y se obtuvieron los


siguientes resultados: Al extraer el ADN del tejido vegetal, de la lechuga en el cual se vio la
separacin en capas con la agrupacin de muchas fibras de ADN, de manera que para extraer
los cidos nucleicos del material biolgico es preciso provocar una lisis celular, inactivar las
nucleasas celulares y separar los cidos nucleicos de los restos de clulas. El procedimiento de
lisis idneo suele consistir en un equilibrio de tcnicas y ha de ser suficientemente fuerte para
romper el material inicial complejo, pero suficientemente suave para preservar el cido
nucleico diana.

El protocolo del mtodo del bromuro de cetil-trimetil amonio (CTAB) (Murray y Thompson,
1980) y publicado posteriormente, en 1987 (Wagner et al., 1987).

El mtodo es adecuado para extraer y purificar ADN de vegetales y alimentos derivados de


vegetales y est especialmente indicado para eliminar los polisacridos y los compuestos
polifenlicos, que, de otro modo, alteraran la pureza del ADN y, por tanto, su calidad As
mismo se concuerda: al separarse los complejos formados por los cidos nucleicos y el CTAB
de los polisacridos, los compuestos fenlicos, las protenas y los dems lisados celulares
disueltos en la solucin acuosa. Es especialmente importante eliminar los polisacridos y los
compuestos fenlicos, pues pueden inhibir numerosas reacciones enzimticas. En
concentraciones hiposalinas (NaCl < 0,5 M), los contaminantes de los complejos de cidos
nucleicos no precipitan y pueden eliminarse extrayendo la solucin acuosa con cloroformo. El
cloroformo desnaturaliza las protenas y facilita la separacin de las fases acuosa y orgnica. La
fase acuosa suele constituir la fase superior. No obstante, si dicha fase es densa debido a la
concentracin salina (> 0,5 M), formar la fase inferior. Adems, si el pH de la solucin acuosa
no se ha equilibrado debidamente (pH 7,8 8,0), los cidos nucleicos tendern a repartirse en
la fase orgnica. Si es preciso, la extraccin con cloroformo se realizar dos o tres veces, con
objeto de eliminar por completo las impurezas de la capa acuosa. Para perfeccionar la
extraccin de los cidos nucleicos, puede retroextraerse la fase orgnica con una solucin
acuosa. Una vez purificados los complejos de cidos nucleicos, puede procederse a la
precipitacin, Una alta concentracin salina es necesaria para que se forme un precipitado de
cidos nucleicos. Puede ser preferible emplear acetato de sodio en lugar de NaCl por su
capacidad tampn. En estas condiciones, el detergente, que es ms soluble en alcohol que en
agua, puede eliminarse por lavado, mientras que los cidos nucleicos precipitan. El posterior
tratamiento con etanol al 70 % permite una mayor purificacin o elucin de los cidos
nucleicos de la sal residual.