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AGENTES FSICOS
Temperatura
Desecacin
Radiaciones
Ondas sonoras
Presin hidrosttica
Presin osmtica
Efecto de la temperatura
La temperatura es uno de los parmetros ambientales ms importantes que condicionan el
crecimiento y la supervivencia de lo s microorganismos.
La temperatura afecta a la velocidad de crecimiento (y, por lo tanto al tiempo de generacin, g).
Cada bacteria (y suponiendo que el resto de con diciones ambientales se mantien en
constantes) muestra una curva caracterstica de tasa de c recimiento en funcin de la
temperatura, donde se puede distinguir tres puntos caractersticos llamados temperaturas
cardinales:
o Temperatura mnima: por debajo de ella no hay crecimiento;
o Temperatura mxima: por encima de ella tampoco existe crecimiento;
o Temperatura ptima: permite la mxima tasa de crecimiento (o sea, g mnimo).
Calor hmedo
La inactivacin por calor hmedo requiere menores temperaturas que la que se realiza en
ausencia de agua. Veamos el ejemplo ms comn de condiciones de inactivacin total por
calor hmedo:
o Autoclave (introducido por Chamberlan d en 1884): Es un aparato que permite calentar
muestras por calor hmedo a temperaturas superiores a las de ebullicin del agua (sin que
sta hierva), debido a que el tratamiento se efecta en un compartimento estanco saturado
con vapor de agua y a presion es superiores a la atmosfrica. (El funcionamiento del
autoclave ser oportunamente explicado en clases prcticas). Los parmetros de
esterilizacin suelen ser: temperatura 121C y 10 -15 min. Como se puede deducir, estos
parmetros vienen fijados por la re sistencia de las esporas de especies saprofitas (ver
ltima lnea de la tabla anterior), que son las formas de vida que ms aguantan el calor sin
perder viabilidad.
Liofilizacin
La liofilizacin es la desecacin al vaco de una muestra previamente conge lada. Aplicada a
bacterias, es uno de los mtodos que mantiene por ms tiempo la viabilidad bacteriana (varios
aos). Para obtenerla, el cultivo bacteriano se adiciona de leche o suero (vase epgrafe
anterior), se congela sobre nieve carbnica ( -78C), y se conecta a una bomba de vaco, que
provoca la desecacin. La eliminacin de toda el agua sobre la muestra congelada aumenta la
viabilidad de sta, que se guarda en ampollas cerradas de vidrio a temperatura ambiente, hasta
su uso, que como vemos, puede se r incluso muchos aos despus.
Radiaciones
Su accin depende de:
o Tipo de radiacin.
o Tiempo de exposicin.
o Dosis.
Ionizantes
Producen iones y radicales libres que alteran las bases de los cidos nucleicos, estructuras
proteicas y lipdicas, y componentes esenciales para la viabilidad de los microorganismos.
Tienen gran penetrabilidad y se las utiliza para esterilizar materiales termolbiles
(termosensibles) como jeringas descartables, sondas, etc. Se utilizan a escala industrial por
sus costos.
No se utilizan para medios de cultivo o soluciones proteicas porque producen alteraciones
de los componentes.
Ultravioletas
Afectan a las molculas de DNA de los microorganismos debido a que forman dmeros de
pirimidinas adyacentes que inducen error es en la duplicacin y por lo tanto la prdida de la
viabilidad de las clulas.
Son escasamente penetrantes y se utilizan para superficies.
ANTIMICROBIANOS
QUIMIOTERAPICOS
Los quimioterpicos son sustancias con actividad antimicrobiana (microbicida o microbiosttica)
con toxicidad suficientemente baja como para poder ser administrados a un organismo por la
va adecuada, hasta alcanzar y mantener concentraciones eficaces en los tejidos.
Las propiedades deseables de un quimioterpico ideal seran las si guientes:
Que tenga toxicidad selectiva, es decir, actuar segn el principio de bala mgica que daa
al microorganismo respetando al hospedador .
Que sea microbicida, es decir, que mate o inactive irreversiblemente el microorganismo,
provocando la prdida total de viabilidad. En el mundo real, sin embargo, hay muchos
quimioterpicos microbiostticos. En estos casos, los sistemas de defensa natural del
hospedador (mecanismos de inmunidad) hacen el resto, eliminando el agente microbiano
previamente inhibido por el quimioterpico.
Los microorganismos susceptibles no deberan desarrollar resistencias al quimioterpico.
Pero desgraciadamente, en muchos casos, al cabo de un tiempo de uso del antimicrobiano
comienzan a surgir cepas microbianas resistentes al mi smo. La quimioterapia es una
autntica escalada de armamentos entre los microorganismos y los humanos, en los que
ante una nueva arma de estos ltimos los microbios pueden responder al cabo del tiempo
con estrategias de resistencia, lo que obliga a un uso racional de los quimioterpicos, y a
una bsqueda continua de nuevos agentes.
ANTIBITICOS
Los antibiticos son sustancias normalmente de bajo peso molecular producidas por seres
vivos (antibiticos naturales) o modificadas artificialmente a partir de ellas (antibiticos
semisintticos), que a pequeas concentraciones tienen efect os antimicrobianos (microbicidas
o microbiostticos), tras ser administrados por va adecuada a un organismo receptor.
La mayor parte de los antibiticos proceden del metabolismo secundario de microorganismos
procariotas (actinomicetos, Bacillus, etc.) o eucariotas (hongos de los gneros Penicillium,
Cephalosporium, etc.).
Se conocen unos 5.000 antibiticos distintos, y cada ao se descubre unos 300 nuevos, pero
en clnica solo se usa un 1% de los descubiertos. Su importancia econmica se pone de
manifiesto al pensar en las 100.000 Tm. de antibiticos producidas al ao, por un valor
equivalente a 3.000 millones de euros, lo cual representa una de las industrias biotecnolgicas
ms importantes.
La mayor parte de los antibiticos comerciales se emplea para tratar enfermedades de etiologa
bacteriana, aunque algunos se usan contra hongos y levaduras, y unos pocos presentan
actividad antitumoral.
Desde el punto de vista qumico, se clasifican en grandes familias:
antibiticos que contienen carbohidratos;
lactonas macrocclicas;
quinonas y compuestos relacionados;
antibiticos peptdicos y con aminocidos;
heterociclos del N;
heterociclos del O;
aromticos;
alifticos, etc.
La mayora de los antibiticos son molculas relativamente pequeas pero complejas, con
regiones hidrofbicas que facilitan el transporte al interior celular. Muchos poseen varios anillos,
algunos de los cuales mejoran la interaccin de la molcula con su diana macromolecular.
Para estudiarlos es ms til agrupar a los antibiticos no por clases segn su naturaleza
qumica, sino en funcin de las dianas sobre las que actan y con las que interfieren:
A) antibiticos que interfieren con la biosn tesis de la pared celular
B) antibiticos que actan sobre la membrana celular
C) antibiticos que inhiben la sntesis de protenas
D) antibiticos que actan sobre la sntesis de cidos nucleicos.
Los antibiticos ms abundantes, y los mejor estudiado s, son los que interfieren con enzimas
de la biosntesis del peptidoglucano de las eubacterias, y los que interfieren con la funcin del
ribosoma eubacteriano (obviamente, esto cumple el requerimiento de balas mgicas). A
continuacin estudiaremos alguno s grupos importantes de antibiticos, dando importancia a
sus mecanismos de accin.
RESISTENCIA BACTERIANA
Desde el punto de vista medico, la resis tencia de los antibiticos, se define como la falta de
respuesta clnica a su administracin. A pesar de los recursos con los que se cuenta en la
actualidad, an resultan muy difciles simular las situaciones dinmicas presentes en el
hospedero, como son el entorno bioqumico, las concentraciones fluctuantes del frmaco y la
falta de penetracin de ste a los espacios anatmicos o fisiolgicos que se encuentran
infectados.
Existe una gran variedad de compuestos qumicos capaces de impedir el crecimiento de las
bacterias. A estos compuestos se les ha denominado antibiticos o antimicrobianos. En la
naturaleza se encuentran bacterias que son, por s mismas, resistentes a los antibiticos, y
bacterias que pueden llegar ser resistentes debido a mutaciones. Los genes involucrados en la
resistencia se localizan en el cromosoma y en elementos genticos mviles, como son los
plsmidos y los transposones.
La resistencia bacteriana es un fenmeno intrnseco y por lo tanto antiguo, que se evidenci
desde la incorporacin de los primeros antimicrobianos. Afecta a microorganismos tanto de la
comunidad como del ambiente hospitalario, aunque por sus repercusiones en multirresistencia
llama ms la atencin a nivel del hospital. Este fenmeno se ha profundizado por la pres in
selectiva del uso intensivo de antimicrobianos y se focaliza particularmente en algunas
bacterias como Stapylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae y Pseudomonas aeruginosa. La
resistencia bacteriana se produce por mecanismos como la produccin de enzi mas
inactivantes, alteracin del sitio de unin en la bacteria y por disminucin de la permeabilidad
celular.
Mecanismos de resistencia
El fenmeno de resistencia tiene un sustrato gentico intrnseco o adquirido que se expresa
fenotpicamente por mecanismos bioqumicos. De esta manera puede observarse la
resistencia desde el ambiente biolgico y otro el bioqumico.
LA RESISTENCIA NATURAL a los mecanismos permanentes determinados
genticamente, no correlacionables con el incremento de dosis del antibitico. Un
ejemplo de esto es la resistencia de la Pseudomonas aeruginosa. a las
bencilpenicilinas y al trimetoprin sulfametoxazol; bacilos gram negativos aerbicos a
clindamicina.
Mecanismos de resistencia
Desde el punto de vista molecular y bioqumico existen bsicamente tres mecanismos por
medio de los cuales una bacteria puede hacerse resistente al efecto del antibitico, a saber:
Inactivacin del antibitico.
Alteracin del sitio blanco del antibitico.
Barreras de permeabilidad.
Cabe resaltar que los tres mecanismos pueden ocurrir simultneamente.
Referencias bibliogrficas
1. Enrique Iaez Pareja. 2006. Curso de Microbiologa General. Departamento de
Microbiologa. Facultad de Ciencias. Universidad de Granada Espaa.
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3. Murray, P.; Rosenthal, K.; Kobayashi, G. y M. Pfaller. 2002. Microbiologa Mdica. 4ta.
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