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http://www.labome.es/method/Protein-Quantitation.html#ref4
Algunas ventajas y/o desventajas del Mtodo
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Figura 2. Representacin esquemtica del ensayo de Bradford.
La mayora de los investigadores utilizan ASB como estndar
proteico ya que es econmica y de fcil disponibilidad pero no
siempre es adecuada. De hecho, una de las desventajas de utilizar
ASB es que exhibe una respuesta fuerte al colorante y puede
subestimar el contenido de protenas. Inmunoglobulina G (IgG) o
lisozima, u otro estndar proteico debera ser utilizado dependiendo
del tipo de protena de la muestra [16].
Entre las ventajas de este mtodo se encuentran su compatibilidad
con agentes reductores utilizados para estabilizar las protenas en
solucin, los cuales no son compatibles con el ensayo de Lowry y
en algn grado con el ensayo de BCA, y la posibilidad de medir
protenas de alto peso molecular ya que el colorante no se une a
pptidos de bajo peso molecular [4, 16].
La principal limitacin del ensayo de Bradford es su incompatibilidad
con detergentes, los cuales se utilizan de rutina para solubilizar
protenas de membrana. Solo un nivel de detergente no inico muy
bajo, tal como Triton X-100 a una concentracin final de 0,008 %
(v/v), puede mejorar la sensibilidad y variabilidad del ensayo de
Bradford [17]. Los detergentes pueden ser removidos por
cromatografa de exclusin molecular o por dilisis, lo que lleva a la
dilucin de la muestra; o por precipitacin con fosfato de calcio [16]
o acetona, ambos mtodos que permiten recuperar como mucho el
70 % de la cantidad inicial de protena. En una publicacin reciente
Cheng et al [18] describen un mtodo basado en el ensayo de
Bradford que permite la cuantificacin de protenas de manera
rpida incluso cuando la solucin de protenas contiene substancias
que interfieren. El mtodo demuestra una tasa de recuperacin de
protenas mejorada luego de tan solo 1 hora de precipitacin en
acetona posterior a la adicin de sacarosa, un componente que no
interfiere con el ensayo de Bradford.