CONTENIDO

Introduccin

Definicin del HLA

Impacto de la compatibilidad del HLA en el

trasplante.

Pruebas de compatibilidad.
 INTRODUCCIN
TRASPLANTE:
Tratamiento mdico, en el que se remplazan tejidos,
rganos o clulas enfermos en un individuo, por los de
otro individuo sano.
rgano slido: Rin
Hgado
Corazn
Pncreas
Injerto Pulmn
Piel
Crnea
Progenitores hematopoyticos:
Mdula sea
INTRODUCCIN CLASIFICACIN DE TRASPLANTES
AUTLOGO: Un mismo individuo funciona como donador y receptor.

ALOGNICO: Entre individuos de la misma especie.

Donador relacionado

Donador
NO-relacionado
(vivo, cadavrico)
INTRODUCCIN CLASIFICACIN DE TRASPLANTES
TRASPLANTE. Tipos de donador
Singnico: El trasplante se realiza entre individuos
de la misma especie y genticamente iguales.
 XENOGENICO: Entre organismos de DIFERENTE ESPECIE.

NO SE LLEVA A CABO
CLNICAMENTE
INTRODUCCIN
INTRODUCCIN
 Histocompatibilidad.
PETER MEDAWER, 1944. Premio Nobel. Especfica

Inducible Memoria Transferible

El rechazo de un injerto cumple con las caractersticas de

una respuesta inmunolgica adaptativa antgeno especfico
 ASPECTOS INMUNOLGICOS

Cules son los antgenos

reconocidos entre donador y
receptor involucrados en el
trasplante ?
 1958 Descubrimiento
Complejo delprincipal
sistema HLA
de por Dusset y Van Roux. Premio
histocompatibilidad= MHC=
HLA-A1, HLA-A10
Nobel.
Human
Leukocytary HLA-B2, HLA-A20

Antigens

HLA-C3, HLA-C30

HLA-DR1, HLA-DR10

HLA-DQ2, HLA-DQ20
HLA-DP3, HLA-DP30
 HLA Complejo principal de histocompatibilidad= MHC=
HLA-A1, HLA-A10

(protenas)
HLA-B2, HLA-A20

HLA-A1 HLA-A10

HLA-B2 HLA-B20

HLA-Cw3 HLA-Cw30 HLA-C3, HLA-C30

HLA-DR1 HLA-DR10

HLA-DQ2 HLA-DQ20

HLA-DP3 HLA-DP30

HAPLOTIPO- M HAPLOTIPO-P

MHC HLA-DR1, HLA-DR10

(genes)

HLA-DQ2, HLA-DQ20
HLA-DP3, HLA-DP30
 Complejo principal de histocompatibilidad= MHC=

El MHC-I contiene tres locus: HLA-A, HLA-B, HLA-C

El MHC-II contiene tres locus: HLA-DR, HLA-DQ, HLA-DP
Los genes se heredan en forma ligada y se expresan en
codominancia.

Cada individuo pos un haplotipo paterno y uno materno

Cada haplotipo esta compuesto por 6 genes/protenas;

cada individuo expresa, al menos, 12 molculas del MHC
 HLA Complejo principal de histocompatibilidad= MHC=
HLA-A1, HLA-A10

(protenas)
HLA-B2, HLA-A20

HLA-A1 HLA-A10

HLA-B2 HLA-B20

HLA-Cw3 HLA-Cw30 HLA-C3, HLA-C30

HLA-DR1 HLA-DR10

HLA-DQ2 HLA-DQ20

HLA-DP3 HLA-DP30

HAPLOTIPO- M HAPLOTIPO-P

MHC HLA-DR1, HLA-DR10

(genes)

HLA-DQ2, HLA-DQ20
HLA-DP3, HLA-DP30
Patrn de herencia de MHC

Los genes del MHC tienen un patrn de herencia mendeliano y son de expresin

codominante

La probabilidad de que 2 hermanos sean 100% compatibles es del 25%

La probabilidad de que 2 hermanos sean 50% compatibles es del 50%

La probabilidad de que 2 hermanos sean 0% compatibles es del 25%

HLA: Sistema poligentico y ALTAMENTE polimrfico
HLA (6 GENES) ABO (3 GENES)
Promedio 250
polimorfismos/gen= NO POLIMRFICO
3000 alelos
 HLA

FUNCIN DEL HLA

Ciertamente, la naturaleza no
ha mantenido un polimorfismo tal
como el del HLA solamente para
hacer fracasar los trasplantes

Ceppellini, 1967
 Funcin biolgica del HLA

RESTRICCIN GENTICA:
El linfocito T reconoce
pptidos presentados en
molculas de MHC-I, II
propias

Restriccin gentica por MHC

R Zinkernagel/Doherty.
Premio Nobel.
Funcin biolgica del HLA

HLA Clase I
Presente en todas
las clulas
nucleadas
Presenta
pptidos a
linfocitos T CD8+
Funcin biolgica del HLA

HLA-II
Presente en las clulas
presentadoras de antgeno
(APC)
monocito/macrfago, clulas
dendrticas, linfocitos B
Presenta pptidos a linfocitos
TCD4+
 Inmunologa del trasplante de rgano slido
Trasplante de rgano slido: El rechazo agudo/crnico del rgano
trasplantado es mediado, en parte, por linfocitos T de receptor.

RECEPTOR:
DONADOR
Inmunocompetente

Rechazo

Linfocitos T del receptor Tejido del rgano

(Linfocitos T alo-reactivos) trasplantado (Alo-
antgenos)
 Relacin entre la compatibilidad HLA y el xito del trasplante

Nmero de incompatibilidades en el HLA entre el donador y receptor contra el

rechazo de los injertos renales
 HLA y trasplantes
INCOMPATIBILIDAD ENTRE DONADOR/RECEPTOR:
Trasplante de clulas hematopoyticas: Enfermedad injerto contra husped
RECEPTOR DONADOR
(paciente):Inmunodeficienica
Adquirida

Enfermedad de injerto contra

husped (EICH)
Relacin entre la compatibilidad HLA y el xito del trasplante

Incompatibilidades en los genes

HLA-A, HLA-B y HLA-DR
REACCIONES INMUNOLGICAS DE

RECHAZO DE UN RGANO SLIDO:

Rechazo hiperagudo

Rechazo agudo

Rechazo crnico
 RECHAZO HIPERAGUDO

Rechazo mediado por anticuerpos pre-formados.

Anti-ABO (IgM)
Anti-Rh (IgM, IgG)
Anti-HLA (IgM, IgG)
Se presenta en minutos-horas
Resistente a terapia con esteroides
Si ya se present, se tiene que retirar el injerto.
 RECHAZO HIPERAGUDO

Anticuerpos anti-HLA pre-formados?

Sensibilizacin:
Trasplante previo
Transfusiones sanguneas mltiples
Sensibilizacin hacia grupo sanguneo
Sensibilizacin hacia HLA
Multpara
 RECHAZO HIPERAGUDO
(RECEPTOR)
(DONADOR) Alo-anticuerpos:
Alo-antgenos: Anti- ABO,
ABO, HLA Anti-HLA

Dao tisular en el
rgano
trasplantado:

Disfuncin
orgnica
Citocinas pro-inflamatorias: TNF-
Clulas cebadas, (Aumento en la permeabilidad vascular, Coagulacin
Neutrfilos, reclutamiento de molculas y clulas intravascular
inflamtorias)
macrfagos Mediadores lipdicos:PG, TX, LT
Prdida del injerto
 Rechazo agudo. Mediado por diferencias en el HLA
Monocito

rgano linfoide
secundario del paciente
(bazo o ganglio regional)

Linfocito T
APC alo-reactivo
del Nave
donador (receptor)

Alo-reconocimiento
directo
Clula dendrtica

Presencia de APC propias

del donador, presentes en
el rgano trasplantado.
 Reconocimiento alognico de linfocitos T
Linfocito T
del receptor
MHC propio + Antgeno Proceso
extrao fisiolgico

Linfocito T
del receptor
MHC alognico Reconocimiento
(MHC propio + Antgeno alognico
extrao) MHC-
alognico
Linfocito T
del receptor

Reconocimiento
MHC+pptido alognico alognico
(MHC propio+Antgeno
extrao)
 Inmunologa del trasplante de rgano slido

Activacin y proliferacin clonal de

linfocitos T alo-reactivos
(efectores)

Linfocito T del paciente

APC del DONADOR

(HLA alognico)
Linfocitos T alo-reactivos
efectores.
RECHAZO
Mecanismo de citotoxicidad.
Lf. T CD8:
Perforinas Granzimas
FasL
TNFa

Apoptosis de las clulas del

tejido trasplantado.

Rechazo agudo
Rechazo crnico
 Pruebas de compatibilidad pre-trasplante

ABO

Rh

Alo- Prueba cruzada para HLA

antgenos:
HLA. Tipificado por

mtodos moleculares.
Pruebas de histocompatibilidad
ABO
Rh
Prueba cruzada (anticuerpos preformados
anti-HLA. IgG o IgM). Trasplante de
rgano slido.
Determinacin de antgenos/alelos del
HLA
 Microlinfocitotoxicidad (Paul, Terasaki en 1964)
Prueba cruzada y HLA

suero del
RECEPTOR
(Ac`s)

Leucocitos del DONADOR

(Antgenos)
 Microlinfocitotoxicidad
Fuente externa de
SUERO PACIENTE complemento

Cel. muerta: Presencia de

anticuerpo anti-HLA
preformados

LINFOCITOS DEL DONADOR IgG, IgM (DTT)

PC (+) para HLA-I o HLA-II
 Tipificacin del HLA

Serologa
(Antgenos)

Biologa molecular
Alelos genes, DNA-

Discrepancias entre la tipifiacin serolgica y por Biologa molecular en

HLA de clase I es del 24%
 MOLECULAR:
HLA-A *0201
*0202
*0203
Serologa
*0258
HLA-A2
(Determinante
Antignico) (58 genes
diferentes)
 Mtodos Moleculares para HLA
Nombre Reactivos Procesos Polimorfismos
caractersticos caractersticos detectados
SSP Cebadores de PCR PCR/electroforsis en Genrico a antgenos
especficos a gel HLA a nvel de alelo
secuencia
Secuenciacin Secuenciador de DNA Secuenciador de A nivel de alelos
de DNA DNA individuales
SSP: Sondas de secuencia especfica ( sequence specific probes)
SSP (Baja resolucin):
Nos da la misma informacin que el mtodo serolgico, pero con la
seguridad de determinar genes
Es un buen mtodo rpido
Adecuado para la donacin DE DONADOR RELACIONADO
HLA-A*02 (*0201-+0258)

Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)

SSP: Sondas de secuencia especfica ( sequence specific probes) PCR
Secuenciacin de DNA
Alta resolucin
Resolucin a nivel de alelos individuales (secuencia de nucletidos)
Estndar de oro en tipificacin HLA
Se realiza una PCR y el producto se somete a secuenciacin
Indispensable para tipificacin de sangre de CORDN UMBILICAL y para
registros internacionales de donador NO RELACIONADO
HLA-A*0201