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Manual de prcticas
Institucionales de la Escuela
de Ciencias de la Salud
2017
-----MICROBIOLOGA I-----
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derechos reservados.
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Presentacin
ASIGNATURA: MICROBIOLOGA I
CLAVE: 563003 CRDITOS 7.50 HORAS TOTALES 6
TOTALES:
Observaciones: HORAS DE 1
APRENDIZAJE
INDEPENDIENTE
Aspectos Curriculares
1.- OBJETIVO GENERAL DE LA ASIGNATURA:
Competencias especficas
Saber:
1. Vase contenidos de la asignatura
2. Fundamentos de las tcnicas microscpicas de investigacin estructural
3. Estudio estructural y funcional de los organelos celulares
4. Capacidad de plantear metodologas para el estudio de la clula
Saber hacer:
1. Aplicacin de las tcnicas microscpicas a la investigacin celular
2. Capacidad para exponer trabajos cientficos
3. Capacidad de manejo de modelos celulares y moleculares.
Ser:
1. Capacidad de utilizacin y reconocimiento del mtodo cientfico
2. Capacidad y habilidad para investigar el desarrollo de diversas patologas.
3.- CONTENIDOS:
Materiales
Sustancias:
Agua destilada
Actividades
Antes de la prctica:
1. Qu es esterilizar?
2. Cuntos mtodos de esterilizado existen y cules son?
3. Menciona porque es ms eficiente el proceso de esterilizacin de calor hmedo que el de calor seco.
4. En qu procesos industriales y/o clnicos se utiliza el vapor hmedo como mtodo de esterilizacin?
5. Qu es una autoclave?
6. Bajo que condiciones debe de trabajar la autoclave para lograr la esterilizacin?
7. anexa un diagrama que indique las partes de una autoclave y su funcionamiento general.
8. Qu tipo de materiales se pueden esterilizar en autoclave?
9. Qu diferencia hay entre desinfeccin y asepsia?
10. Accesa al siguiente video https://www.youtube.com/watch?v=Nw5DkCnVEWw y describe como
procesan el manejo de material del laboratorio de microbiologa.
Despus de la prctica:
1. Anexa las hojas tcnicas de todos los reactivos utilizados.
2. Realiza un diagrama de flujo del procedimiento detallado de la prctica.
Mtodo de Evaluacin
Carrillo, Y. (5 de marzo de 2010). Espacio nurseil. Recuperado el 6 de marzo de 2016, de Esterilizacin, Desinfeccin,
Asepsia y Antisepsia: http://espacionurseril.blogspot.mx/2010/03/esterilizacion-desinfeccion-asepsia-y.html
Materiales
Equipo:
Microscopio ptico
Sustancias:
Frascos de 50 ml de las siguientes soluciones:
Cristal violeta
H2O
Lugol
Alcohol etlico al 95%
Acetona
Safranina
Solucin salina esteril (0.85%)
Fucsina cida
Acido actico glacial
Azul de metileno o verde de malaquita
Actividades
solicitud de materiales con los auxiliares de 3. Dejar secar al aire y una vez seco, fijar con calor,
laboratorio con mnimo 24 h de anticipacin pasndolo por la flama del mechero varias veces de
3. El docente verifica que los auxiliares de manera ms o menos rpida.
laboratorio entreguen el material a los alumnos 4. Proceder a teir, de acuerdo a la tcnica sealada
contra vale de solicitud y credencial del por el profesor.
responsable del equipo, posterior al briefing 5. En caso de ser la muestra slida, tomar con asa de
4. El docente verifica que el alumno revise que nicromo y colocar en el portaobjetos una gota de
cuenta con el 100% de los materiales solicitados solucin salina y sobre esta poner la muestra,
5. El docente verifica que el alumno tenga el rea realizando la misma accin del paso 1 y 2.
de trabajo limpia y despejada 6. Proceder con los pasos 3 y 4.
Tincin de GRAM
EJECUCIN DE LA PRCTICA 1. Realiza un frotis con la muestra problema.
1. Lleva los tiempos y ayuda a los alumnos a 2. Coloca en el barrido Cristal Violeta cubriendo toda la
llevar la cronologa. muestra (frotis) durante 1 minuto.
2. Provee Feedback descriptivo durante la 3. Quita el exceso con abundante H2O, sin dejarla caer
prctica. directamente sobre el frotis.
3. Resuelve dudas durante la ejecucin. 4. Coloca Lugol cubriendo todo el frotis y deja reposar
4. Promueve el buen Comportamiento del equipo por 1 minuto.
durante la ejecucin de la prctica 5. Lava la muestra con alcohol-cetona por la parte
5. Verifica la Entrega de material limpio y superior del frotis.
completo. 6. Finalmente coloca Safranina durante 1 minuto
6. Utiliza un Modelo de FACILITADOR NO 7. Lava nuevamente con H2O el exceso.
INSTRUCCIONAL. 8. Deja secar el frotis al aire para analizar.
7. Llenado de bitcora electrnica: 9. Observa el frotis en el microscopio ptico con
https://goo.gl/forms/Ep16K5pZtsuutiRE3 objetivo 100x y aceite de inmersin.
Antes de la prctica:
1) Menciona los diferentes tipos de fijacin existentes en microbiologa.
2) Por qu es necesario el proceso de fijacin en una tincin?
3) Qu genero de bacterias se tien positivos en la tincin de BAAR?
4) De qu color se tien las bacterias Gram positivas y de qu color las Gram negativas?
Para apoyarte en tu respuesta puedes consultar el siguiente video:
https://www.youtube.com/watch?v=aJpZzF3h3kc y mencionar que hiciste igual o diferente
respecto a tu procedimiento en clase.
5) Para qu se utilizar el aceite de inmersin?
6) Qu tipo de aceite es el aceite de inmersin?
Despus de la prctica:
1) Realiza un diagrama de flujo de la tincin de GRAM
2) Realiza un diagrama de flujo de la tincin de BAAR
3) Anexa las hojas tcnicas de todos los reactivos utilizados.
Mtodo de Evaluacin
Carrillo, Y. (5 de marzo de 2010). Espacio nurseil. Recuperado el 6 de marzo de 2016, de Esterilizacin, Desinfeccin,
Asepsia y Antisepsia: http://espacionurseril.blogspot.mx/2010/03/esterilizacion-desinfeccion-asepsia-y.html
Materiales
Equipo:
Microscopio ptico compuesto
Sustancias:
Frascos de 50 ml de las siguientes sustancias
Alcohol etlico al 95%.
Aceite de inmersin.
Azul de metileno.
Tinta china (pelikan)
Solucin salina esteril
Muestra de heces fecales
Actividades
contra vale de solicitud y credencial del 8. Deja caer por las esquinas o bordes del
responsable del equipo, posterior al briefing cubreobjetos una gota de tinta china.
4. El docente verifica que el alumno revise que 9. Observa con el microscopio, utilizando objetivo
cuenta con el 100% de los materiales solicitados de 4x, 10x y 40x, respectivamente.
5. El docente verifica que el alumno tenga el rea
de trabajo limpia y despejada Tincin simple con azul de metileno
1. Lava perfectamente tu rea de trabajo y el
material a utilizar.
EJECUCIN DE LA PRCTICA 2. Toma un poco de muestra con ayuda de un asa
1. Lleva los tiempos y ayuda a los alumnos a de nicromo previamente esterilizada con el
llevar la cronologa. mechero.
2. Provee Feedback descriptivo durante la 3. Coloca en el portaobjetos.
prctica. 4. En caso de no ser lquida la muestra, aade una
3. Resuelve dudas durante la ejecucin. gota de solucin salina y expande en forma
4. Promueve el buen Comportamiento del equipo circular
durante la ejecucin de la prctica 5. Coloca el cubre objetos sobre la muestra.
5. Verifica la Entrega de material limpio y 6. Deja caer por las esquinas o bordes del
completo. cubreobjetos una gota de azul de metileno.
6. Utiliza un Modelo de FACILITADOR NO 7. Observa con el microscopio, utilizando objetivo
INSTRUCCIONAL. de 4x, 10x y 40x, respectivamente.
7. Llenado de bitcora electrnica:
https://goo.gl/forms/Ep16K5pZtsuutiRE3 Limpieza de material y entrega
Antes de la prctica:
a) Qu es capsula bacteriana y para qu sirve?
b) Qu es una endoespora bacteriana y para que le sirve a la bacteria?
c) Cmo es la estructura de un flagelo y de que est constituido principalmente?
d) Realiza diagramas de flujo donde especifiques el procedimiento completo para cada una de las
tinciones realizadas.
Despus de la prctica:
a) Realiza un diagrama de flujo de cada una de las tcnicas que realizaste.
b) Anexa las hojas tcnicas de todos los reactivos utilizados
Mtodo de Evaluacin
Carrillo, Y. (5 de marzo de 2010). Espacio nurseil. Recuperado el 6 de marzo de 2016, de Esterilizacin, Desinfeccin,
Asepsia y Antisepsia: http://espacionurseril.blogspot.mx/2010/03/esterilizacion-desinfeccion-asepsia-y.html
Materiales
Sustancias:
Por equipo
250 ml de Agar nutritivo.
250 ml de Agar Sangre
250 ml de Caldo nutritivo.
Actividades
Antes de la prctica:
a) A qu se le llaman medio de cultivo?
b) Menciona las diferencias entre los medios de cultivos sintticos y no sintticos.
c) Cul es la finalidad de usar materiales estriles en el laboratorio?
d) Anota Tres puntos bsicos que hay que cuidar al preparar un medio de cultivo slido.
e) Anota tres puntos importantes que hay que tomar en cuenta para la preparacin de medios de cultivo lquido.
f) Anota la clasificacin de los diferentes medios de cultivo en base a su utilidad en el laboratorio.
Despus de la prctica:
a) Cules mtodos de esterilizacin y desinfeccin se usan en la prctica?
b) Qu tipos de medios de cultivo son los que se usaron en la prctica y qu tipo de microorganismos crecen
en ellos
c) Elabora un diagrama de flujo en la que se integre la preparacin de medios y mtodos de esterilizacin.
d) Anexa las hojas tcnicas de todos los reactivos utilizados.
e) Por que en la preparacin del agar sangre no se debe agregar la sangre cuando el agar esta muy caliente
(temperatura arriba de 60 grados)? Puedes apoyarte con el siguiente video:
https://www.youtube.com/watch?v=X5dU98-K5_g para desarrollar tu respuesta.
Mtodo de Evaluacin
Carrillo, Y. (5 de marzo de 2010). Espacio nurseil. Recuperado el 6 de marzo de 2016, de Esterilizacin, Desinfeccin,
Asepsia y Antisepsia: http://espacionurseril.blogspot.mx/2010/03/esterilizacion-desinfeccion-asepsia-y.html
Materiales
Investigacin previa
Equipo:
Autoclave
Estufa incubadora
Sustancias:
Muestra de orina (la proporciona el alumno)
250 ml Caldo nutritivo
250 ml de Medio Eosina y Azul de metileno.
250 ml de Medio de cultivo agar sangre
Actividades
Antes de la prctica:
1) Investiga tres tipos diferentes de siembra en placa.
2) Por qu es importante elegir bien el mtodo de siembra?
3) En qu casos se esteriliza el asa de nicromo entre cada estriado?
4) Cul es el objetivo de aislar bacterias
5) Anexa las hojas tcnicas y de seguridad de los reactivos y sustancias que se utilizaran.
Despus de la prctica:
a) Realiza un diagrama de flujo solo con imgenes que indique el procedimiento de siembra que
utilizaste en esta prctica.
Mtodo de Evaluacin
Carrillo, Y. (5 de marzo de 2010). Espacio nurseil. Recuperado el 6 de marzo de 2016, de Esterilizacin, Desinfeccin,
Asepsia y Antisepsia: http://espacionurseril.blogspot.mx/2010/03/esterilizacion-desinfeccion-asepsia-y.html
Materiales
Equipo:
Autoclave
Estufa incubadora
Sustancias:
200 ml Caldo nutritivo
100 ml Agar TSI
100 ml Agar SIM
Actividades
Antes de la prctica:
a) Qu es el Agar y de donde se obtiene?
b) Qu nutrientes bsicos proporciona al microorganismo?
c) Por qu el Agar nutritivo es un medio de uso general para el cultivo de bacterias?
d) Cul es la composicin qumica de los medios EMB,y Agar sangre?
e) Anexa las hojas tcnicas de todos los reactivos a utilizar.
Despus de la prctica:
a) Realiza un diagrama de flujo de la prctica realizada.
Mtodo de Evaluacin
Carrillo, Y. (5 de marzo de 2010). Espacio nurseil. Recuperado el 6 de marzo de 2016, de Esterilizacin, Desinfeccin,
Asepsia y Antisepsia: http://espacionurseril.blogspot.mx/2010/03/esterilizacion-desinfeccion-asepsia-y.html
Materiales
Equipo:
Microscopio ptico
Mechero bunsen
Autoclave
Balanza analtica
Sustancias:
Frascos de 50 ml que contengan
Azul de metileno
Aceite de inmersin
Agua destilada
Solucin salina isotnica estril
Actividades
examen rpido
Preparacin de medios:
PREPARACIN INICIAL (15 MINUTOS) 1. Elabora los medios y los caldos a preparar de
1. El docente solicita a los auxiliares de acuerdo a las proporciones indicadas por el
laboratorio con 1 semana de anticipacin sus fabricante.
materiales
2. Coloca en la autoclave, para esterilizar los medios.
2. El docente verifica que el alumno ingres su
3. Una vez esterilizadas las cajas, procede a llenarlas
solicitud de materiales con los auxiliares de
laboratorio con mnimo 24 h de anticipacin con el medio deseado.
3. El docente verifica que los auxiliares de 4. Dejar reposar para solidificar el medio.
laboratorio entreguen el material a los alumnos
contra vale de solicitud y credencial del Preparacin de muestras y sembrado
responsable del equipo, posterior al briefing
4. El docente verifica que el alumno revise que 1. Busca una muestra de hongo para examinar.
cuenta con el 100% de los materiales solicitados 2. Raspa la muestra con el asa para obtener un poco
5. El docente verifica que el alumno tenga el rea de esta. preparacin
de trabajo limpia y despejada
3. Una vez obtenida la muestra, pica con el asa
levemente en el centro de la caja, incrustando de
EJECUCIN DE LA PRCTICA manera casi superficial la muestra.
1. Lleva los tiempos y ayuda a los alumnos a 4. Etiqueta la caja e incuba la muestra a la incubadora
llevar la cronologa. y deja ah por 5 das.
2. Provee Feedback descriptivo durante la
prctica. Observacin de formas fngicas, moho/levaduras:
3. Resuelve dudas durante la ejecucin.
4. Promueve el buen Comportamiento del equipo 1. Coloca en un portaobjetos una gota de solucin
durante la ejecucin de la prctica salina.
5. Verifica la Entrega de material limpio y 2. Cuidadosamente agrega la muestra de hongo
completo.
obtenida despus de la incubacin sin daarla.
6. Utiliza un Modelo de FACILITADOR NO
INSTRUCCIONAL. 3. Expande en el porta objetos con la solucin.
7. Llenado de bitcora electrnica: 4. Coloca una gota de azul de metileno y un cubre
https://goo.gl/forms/Ep16K5pZtsuutiRE3 objetos.
5. Observa en microscopio
DEBRIEFING (10 MINUTOS)
1. Recapitula con los alumnos los hechos Observacin de estructuras fngicas, setas:
ocurridos.
2. Promueve la reflexin, discusin y resolucin 1. Lava una seta con agua corriente y despus agua
de dudas. destilada y deja que seque un poco, posteriormente
3. Verifica si se cumpli el propsito de
colocarla en una caja Petri desechable esteril.
aprendizaje.
2. Con la hoja de bistur, realiza cortes longitudinales y
transversales del hongo.
3. Coloca en un portaobjetos y observa con objetivo de
4x, 10x y 40x.
Antes de la prctica:
1) A qu se le denomina Dimorfismo?
2) Realiza un esquema donde seales las principales formas de un moho, hifa y un hongo zeta.
3) Menciona 3 caractersticas nicas en los hongos.
4) Realiza una tabla donde especifiques con imgenes 5 hongos macromicetos, 5 hongos
micromicetos y 5 en forma de levadura, sus caractersticas y usos o perjuicios al humano.
5) De que est constituida la pared celular de los hongos?
6) Mencione 4 medios que utilicen para el aislamiento de los hongos
7) Mencione 2 medios de cultivo que se utilicen para el aislamiento de levaduras.
8) Qu tipo de crecimiento presentan los hongos filamentosos y las levaduras? Es igual?
9) Anexa las hojas tcnicas de las sustancias utilizadas en la prctica.
Despus de la prctica:
a) Realiza un diagrama de flujo de los procedimientos que se realizaron en la prctica.
Mtodo de Evaluacin
Carrillo, Y. (5 de marzo de 2010). Espacio nurseil. Recuperado el 6 de marzo de 2016, de Esterilizacin, Desinfeccin,
Asepsia y Antisepsia: http://espacionurseril.blogspot.mx/2010/03/esterilizacion-desinfeccion-asepsia-y.html
Materiales
Equipo:
Mecheros bunsen
Sustancias:
50 ml Agar TSI
50 ml Agar MIO
50 ml Agar SIM
50 ml Agar LIA
50 ml Caldo Urea
50 ml Citrato de Simmons
Actividades
Antes de la prctica:
a) Qu caractersticas tienen los medios diferenciales?
b) Elabora una tabla con los medios de cultivo a utilizar en la prctica y las siguientes caractersticas
de cada uno: principales componentes, indicador en caso de contenerlo, modo de siembra,
cambios bioqumicos que se pueden observar en el medio, como se deben de vaciar los medios,
es decir si van en tubo o caja y verticales o con pico de flauta.
c) Qu tipos de bacterias son objeto de este tipo de pruebas bioqumicas?
Despus de la prctica:
a) Menciona tres puntos importantes que hay que tomar en cuenta para la correcta siembra de los
medios de cultivo utilizados.
b) Para que nos sirve las pruebas bioqumicas?
Mtodo de Evaluacin
Carrillo, Y. (5 de marzo de 2010). Espacio nurseil. Recuperado el 6 de marzo de 2016, de Esterilizacin, Desinfeccin,
Asepsia y Antisepsia: http://espacionurseril.blogspot.mx/2010/03/esterilizacion-desinfeccion-asepsia-y.html
ANEXOS
NO 31076E21908326 DD3CE07407C60 NO no
10 8 6 5
Excelente Bueno Regular Deficiente
10 pts 8 pts 6 pts 0 pts
1.Formato tipo 7118464 7118465 7118466 7118467
artculo en formato
electrnico -Nombre de la Ins Falta alguno de lo Faltan ms de la m No presenta los d
5%
Excelente Bueno Regular Deficiente
-Cumple con el formato Hubo incumplimiento Hubo incumplimiento Hubo incumplimiento
que se anexa al final de en uno de los tres en dos de los tres en los tres requisitos:
este manual requisitos: requisitos: -Cumple con el formato
-Se entreg en tiempo -Cumple con el formato -Cumple con el formato que se anexa al final de
- Se entreg en formato que se anexa al final de que se anexa al final de este manual
electrnico este manual este manual -Se entreg en tiempo
-Se entreg en tiempo -Se entreg en tiempo - Se entreg en formato
- Se entreg en formato - Se entreg en formato electrnico
electrnico electrnico