Informe de Laboratorio N1:

Espectofotometra de absorcin UV-Visible

Fecha: 05/04/2013
Objetivos

Realizar el espectro de absorcin UV-Visible del Permanganato de

potasio y determinar la longitud de onda ptima para realizar la curva de
calibracin.
Construir la curva de calibracin a la longitud de onda elegida.
Medir la concentracin de permanganato de una solucin problema.

Introduccin
Las tcnicas espectroscpicas de absorcin de radiacin se basan en la
interaccin de la radiacin electromagntica con la materia. Esta interaccin
depende de la irradiacin electromagntica usada y de la estructura molecular.
La espectroscopa de absorcin UV-Visible presenta varias ventajas entre las
cuales se destacan:

Alta sensibilidad, lo que permite determinar concentraciones muy

pequeas.
Buena exactitud ya que presenta errores relativos entre el 1% y 5%.
Facilidad y rapidez de las mediciones.

Espectros UV-Visibles
A diferencia de los tomos que experimentan slo transiciones electrnicas, las
molculas experimentan 3 tipos de transicin: rotacional, vibracional y
electrnica.
Las transiciones rotacionales y vibracionales generan cambios de energa muy
prximos entre s, razn por la cual el espectro de una molcula se presenta
como espectro de bandas.

Transmitancia, Absorbancia y Ley de Lambert-Beer

Se define la transmitancia como la relacin entre la radiacin que llega al
detector del equipo y la radiacin incidente en la muestra.

T=P/P0

La absorbancia se define como el menos logaritmo de la transmitancia.

A= -Log(P/P0)= -Log (T)

Existen 2 factores que generan variaciones en la absorbancia:

 Trayectoria: Para una solucin de concentracin C, cunto ms largo
sea el medio que atraviesa la radiacin, existirn ms molculas
absorbentes y por lo tanto la absorbancia ser mayor.
Concentracin: para una trayectoria fija, un aumento en C del analito
implica ms molculas en el trayecto, lo que producir ms absorbancia.

En funcin de stos 2 factores se deduce lo que se conoce como Ley de

Lambert-Beer:

A=K.b.C

Donde K= [Lmol-1cm-1]

se define como absortividad molar y es una constante que depende de:

Naturaleza del absorbente
Longitud de onda
Temperatura
Solvente

Seleccin de longitud de onda

A la hora de construir curvas de calibracin a partir de un espectro de
absorcin, es conveniente seleccionar aquellas longitudes de onda en donde el
espectro presenta mximos.
Esta situacin nos garantiza que la variacin en la absorbancia ante pequeas
variaciones en la longitud de onda no ser significativa y el error en las
mediciones ser menor.
En caso de espectros que presenten ms de un pico la longitud de onda ms
conveniente ser aquella que corresponda al pico ms agudo, lo que otorgar
mayor sensibilidad al mtodo.

Procedimiento
Seleccin de la longitud de onda de trabajo

A partir de una solucin patrn de permanganato de potasio se prepararon

25ml de una solucin 2x10-4M.

Error pipetas (Ep)=0.01ml

Error matraz 25ml (Em)=0.04ml
Concentracin del patrn= 1.863x10-3M (se considera que la solucin patrn no
presenta error)

25ml 2x104 mol

Moles a extraer = = 5x106 moles
1000ml
 1000ml 5x106 mol
Volmen a extraer = = 2.68ml
1.863x103 mol

Error de la concentracin de la solucin:

Ep Em
Ec = ( + )C
Vp Vm

0.01 0.04
Ec = ( + ) 2x104 = 0.01x104 M
2.68 25

Concentracin de la solucin preparada= (2.00x10-4 0.01x10-4) M

A dicha solucin se le midi la absorbancia a diferentes longitudes de onda (de

400 a 600 nm.) obteniendo as un espectro de bandas.

Tabla 1

(nm) A(absorbancia) (nm) A(absorbancia)

400 0.037 520 0.414
410 0.027 525 0.437
420 0.025 530 0.393
430 0.027 535 0.380
440 0.037 540 0.409
450 0.051 545 0.452
460 0.071 550 0.363
470 0.110 555 0.304
480 0.165 560 0.254
490 0.218 570 0.232
500 0.297 580 0.111
510 0.340 590 0.060
515 0.354 600 0.050

Con los valores de la tabla construimos el espectro de bandas correspondiente

al KMnO4.
 Grfico 1

Observando dicho espectro y en funcin de los conocimientos tericos

adquiridos decidimos realizar la curva de calibracin a una longitud de onda de
545 nm, la cual corresponde a uno de los mximos del espectro, lo que
otorgar mayor sensibilidad al mtodo.

Obtencin de la curva de calibracin

Para la obtencin de la curva de calibracin en principio se prepararon 5

soluciones de 25 ml de KMnO4 de diferente concentracin extrayendo 0.5; 1;
1.5; 2; 2.5 ml de la solucin patrn respectivamente.

Extraccin de 0.5ml

0.5ml 1.863x103 mol

Moles extrados = = 9.315x107 mol
1000ml
1000ml 9.315x107 mol
C1 = = 3.726x105 M
25ml
0.01 0.04
Ec1 = ( + ) 3.726x105 M = 8.048x107 M
0.5 25
C1= (3.726x10-5 0.080x10-5) M

Extraccin de 1ml

1ml 1.863x103 mol

Moles extrados = = 1.863x106 mol
1000ml
1000ml 1.863x106 mol
C2 = = 7.452x105 M
25ml
0.01 0.04
Ec2 = ( + ) 7.452x105 M = 8.644x107 M
1 25

C2= (7.452x10-5 0.086x10-5) M

Extraccin de 1.5ml

1.5ml 1.863x103 mol

Moles extrados = = 2.795x106 mol
1000ml
1000ml 2.795x106 mol
C3 = = 1.118x104 M
25ml
0.01 0.04
Ec3 = ( + ) 1.118x104 M = 9.242x107 M
1.5 25

C3= (1.118x10-4 0.009x10-4) M

Extraccin de 2ml

2ml 1.863x103 mol

Moles extrados = = 3.726x106 mol
1000ml
1000ml 3.726x106 mol
C4 = = 1.4904x104 M
25ml
0.01 0.04
Ec4 = ( + ) 1.4904x104 M = 9.83664x107 M
2 25

C4= (1.49x10-4 0.01x10-4) M

Extraccin de 2.5ml
 2.5ml 1.863x103 mol
Moles extrados = = 4.657x106 mol
1000ml
1000ml 4.657x106 mol
C5 = = 1.863x104 M
25ml
0.01 0.04
Ec5 = ( + ) 1.863x104 M = 1.043x106 M
2.5 25

C5= (1.863x10-4 0.010x10-4) M

Una vez preparadas las soluciones, se midi la absorbancia de las mismas a

545 nm. Las mediciones se hicieron por duplicado para poder estimar el error
del equipo utilizado.

Tabla 2

C(M) Absorbancia (A1) Absorbancia (A2) A

0.00003726 0.089 0.094 0,005
0.00007452 0.163 0.167 0.004
0.00011800 0.258 0.264 0.006
0.00014900 0.336 0.338 0.002
0.00018630 0.424 0.424 0.000

Definimos el error del equipo como la media de los A.

EA=0.0034

Con los datos obtenidos y por medio de una aproximacin por mnimos
cuadrados obtuvimos la curva de calibracin.

Grfico 2
De la curva de calibracin y basndonos en la Ley de Lambert-Beer obtenemos
el valor de la pendiente de la curva con su respectivo error.
ste valor representa la absortividad molar del KMnO4 a 545 nm.

= (2270.6 16.3) Lmol-1cm-1

Registro de resultados
Una vez construida la curva de calibracin medimos la absorbancia de una
solucin problema de KMnO4 (Tambin por duplicado).
Las mediciones obtenidas fueron las siguientes:

A1= 0.222
A2= 0.221

Con stos valores y haciendo uso de la Ley de Lambert-Beer determinamos la

concentracin de la solucin problema y su respectivo error.

Ley de Lambert-Beer: A=.b.C

A 0.2215
Cproblema = = 1 1
= 9.75x105 molL
b 1cm 2270.6Lmol cm

El paso ptico (b) de la celda utilizada es de 1cm y se considera que no

presenta error.

EA E
Ec = ( + ) C
A
0.0034 16.3
Ec = ( + ) 9.75x105 M = 2.19x106 M
0.2215 2270.6

Cproblema= (9.75x10-5 0.22x10-5) M

Grficamente, a simple vista, para un valor de A=0.2215 el valor de Cp es

aproximadamente 9x10-5M.
Conclusiones
En funcin del trabajo realizado podemos concluir lo siguiente:

El espectro de absorcin obtenido present una forma similar al arrojado

por el equipo ms preciso (arreglo de diodos), pudindose observar los 2
picos agudos y las irregularidades en las bandas. Sin embargo, en
nuestro espectro, el pico ms agudo se observ a 545 nm, y el otro a
525 nm, situacin inversa a la obtenida en el equipo manipulado por el
profesor.
La absortividad molar determinada con la curva de calibracin a 545 nm
arroj un valor de 2270 Lmol-1cm-1, resultado similar al correspondiente
en bibliografa, el cual es de 2200 Lmol-1cm-1 a una longitud de onda de
525 nm.
La comparacin de estos valores nos da nocin de que la tcnica fue
llevada a cabo correctamente.
El haber elegido el pico ms agudo del espectro de absorcin le otorg
mayor sensibilidad al mtodo, pudiendo medir dentro de la curva de
calibracin una concentracin del orden de 10-5.
El valor de la concentracin de la muestra problema calculado
analticamente por medio de la Ley de Lambert-Beer (9.75x10-5),
coincide con el orden del valor obtenido grficamente (9x10-5 aprox.).
No podemos concluir nada sobre la exactitud del mtodo, ya que no
tenemos datos sobre la concentracin esperada de la muestra problema.