MICROBIOLOGIA AGROINDUSTRIAL

PRACTICA 07: RECUENTRO TOTAL DE HONGOS Y LEVADURAS:

V. RESULTADOS:

MUESTRA 10 gr de lenteja serrana

AGAR Agar nutritivo

CANTIDAD PREPARADA 400 ml de agar

CANTIDAD PESADA 14.8 gr

OXITETRACICLINA 5%

INCUBACION T ambiente por una semana

CALCULOS DE AGAR 37gr ----------- 1000 ml

X gr ----------- 400 ml
X= 14.8 gr
CALCULOS DE OXITETRACICLINA 400 5% = 20

FIGURA N 01: DILUSION 10-2

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FIGURA N 02: DILUSION 10-3

FIGURA N 03: DILUSION 10-4

FIGURA N 04: DILUSION 10-5

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VI. Discusin:
La presencia de microorganismos en los alimentos no representa necesariamente un
peligro para el consumidor o una calidad inferior en estos productos, ms si se tiene en
cuenta que la gran mayora contiene naturalmente levaduras, mohos, bacterias y otros
microorganismos inocuos. La mayor parte de los alimentos se convierten en
potencialmente peligrosos solo despus de que se han violado los principios de higiene,
limpieza y desinfeccin. La puesta en evidencia de estos riesgos se basa en el examen de
muestras de alimentos en busca de los propios agentes causales o indicadores de una
contaminacin no admisible. (ICMSF, 2000), al realizar estas practica nos dimos cuenta
de que podemos encontrar microrganismo en los alimentos.
Las levaduras y los mohos crecen ms lentamente que las bacterias en los alimentos no
cidos que conservan humedad y por ello pocas veces determinan problemas en tales
alimentos. Sin embargo, en los alimentos cidos y en los de baja actividad de agua, crecen
con mayor rapidez que las bacterias, determinando por ello importantes prdidas por
alteracin de frutas, jugos, vegetales, quesos, productos derivados de los cereales y
encurtidos, as como los alimentos congelados y en los deshidratados, cuyo
almacenamiento se realiza en condiciones inadecuadas. Adems existe el peligro
potencial de produccin de micotoxinas por parte de los hongos. Por lo tanto, los mohos
y las levaduras son los agentes alterantes de un nmero importante de alimentos.
(ICMSF, 2000), esto nos pudimos dar cuenta en la prctica al ver que en los cereales
como la lenteja serrana pudimos evaluarla que si hay presencia de mohos y levaduras
La identificacin de los hongos filamentosos se basa en el examen macroscpico de la
colonia y en sus caractersticas microscpicas. Semejanzas macroscpicas como la forma
de la colonia, el color de la superficie, la textura y la produccin de pigmentos son muy
tiles para la identificacin. En general la morfologa microscpica de los hongos es
estable y presenta pocas variaciones. La identificacin definitiva se basa en la norma
caracterstica, mtodo de produccin y ordenamiento de las esporas, siendo tambin
importante el tamao y la disposicin de las hifas. (Adams & Moss, 1997); al realizar la
prctica los resultados que pudimos observar es de que tenan caractersticas de hongos
filamentosos.
Waksman (1922) sugiri el uso de medios acidificados para el recuento de mohos del
suelo y a partir de la fecha se adopt esta tcnica para el recuento de hongos y levaduras
en alimentos. Para inhibir el crecimiento de bacterias en estos medios se han utilizado
antibiticos como cloranfenicol, estreptomicina, ciclotetraciclina, oxitetraciclina y
gentamicina. La mejor incubacin de los cultivos se sita alrededor de 22C y el tiempo
de incubacin ms adecuado es de cinco das. Alguno de los medios de cultivo empleados
para el aislamiento de hongos y levaduras son el agar Rosa de bengala y el agar
oxitetraciclina gentamicina extracto de levadura glucosa (OGY). (Mossel, 2003),
coincidimos con los autores al realizar la prctica e hicimos un agar con medios cidos.
Este tipo de recuento se define como un procedimiento en el cual cada clula viable puede
formar una colonia en placa con agar especfico para el microorganismos, donde un cierto
volumen de cultivo diluido que no suele ser superior a 0.1 ml se extiende sobre la
superficie de una placas con medio solid utilizando una asa estril o escobilln de vidrio.
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La placa se incuba en un ambiente predeterminado, hasta que aparecen las colonias y se

cuenta su nmero. (ICMSF, 2000)

Al observar las colonias y realizar el contaje respectivos vimos de que excedan los lmites
de colonias ya que segn ATC las colonias deben estar en un rango de 30 a 300 colonias
lo cual al contar sobrepasaban los limites es por ello
VII. Bibliografas:
International commission on Microbial specifications for Food, of the
international Union of Biological Societies. (ICMSF). 2000.
Microorganismos de los alimentos: su significado y mtodos de
enumeracin. Segunda edicin. Editorial Acribia S.A Zaragoza, Espaa.
Adams, M.R, Moss M.O. 1997. Microbiologa de los alimentos. Editorial
Acribia. Zaragoza. Espaa.PG 125-138

Mossel, D.2003. Microbiologa de los alimentos. Editorial Acribia

Zaragoza Pg 52-98

VIII. Conclusin:
No se realiz la prctica adecuadamente mediante el mtodo de cuenta en placa,
el nmero de mohos y levaduras viables presentes en productos alimenticios
destinados al consumo humano.
Se comprendi el fundamento de todas las etapas del mtodo de deteccin y
cuantificacin y cuantificacin mohos y levaduras en alimentos.
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IX. ANEXOS:
PREPARACIN DE AGAR:
Formula de agar: 37gr por 1 litro
Suspender 14.8gr g del polvo en 400 ml de agua purificada en un matraz; todo esto por
separado 200 ml en un matraz y en otro lo mismo
Reposar 5 minutos y mezclar hasta uniformar.
Calentar agitando frecuentemente y hervir 1 minuto hasta disolver completamente.

Figura N 01: Adicin y mezclado de agar nutritivo.

PREPARACIN DE OXITETRACICLINA:

Suspender una capsula de oxitetraciclina en 100 ml de agua destilada

Figura N 02: Capsula de oxitetraciclina.

Mezclamos uniformente hasta disolver todas las partculas.

Figura N 03: Preparacin de oxitetraciclina.

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Una vez preparado la oxitetraciclina y el agar se le agrega al agar 10 ml de oxitetracilina

en cada matraz con 200 ml de agar.

Preparacin de la muestra a examinar:

Pesar 10 gr de lenteja serrana

Suspenderla en 90 ml de agua purificada con solucin salina fisiolgica

Figura N 04: Lenteja serrana con agua purificada y

solucin salina fisiologa (dilucin 10 -1)

Preparacin de las dems diluciones

Figura N 05: Muestra con concentracin diferentes

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Realizamos la respectiva siembra ( 0.1 ml de muestra) en los agares con oxitetraciclina a

diferentes concentraciones.

Figura N 06: Siembra por superficie con Figura N 07: Siembra respectiva a
asa de drigasqui diferentes concentraciones

Incubacin a temperatura ambiente por siete das.