Linfocitos B y

anticuerpos

Dra Mirta Giordano

Linfocitos B y plasmocitos secretores de anticuerpos

Antgeno

Receptor
para Ag

Anticuerpos

Linfocito B Plasmocito
 Estructura de las inmunoglobulinas

Cadena
liviana
Puentes
disulfuro

Extremo Extremo
N-terminal Regin N-terminal
Cadena
variable
pesada

Regin
constante

Extremo
C-terminal
Cinco clases distintas de cadenas
pesadas:

Dos clases dintintas de cadenas

livianas:
El reconocimiento del antgeno se realiza a travs de
la porcin variable de la Ig.

Antgeno

Receptor
para Ag

Anticuerpos

Linfocito B Plasmocito
Recombinacin somtica de los genes de inmunoglobulinas

Cadena L Cadena H

DNA
germinal

Recombinacin
gnica

DNA
rearreglado
La recombinacin somtica (generacin
de diversidad de Igs) ocurre durante la
ontogenia de los linfocitos B en la
mdula sea.

Antes del encuentro con el antgeno

 Ciclo de vida de los linfocitos B

Linfocito B Linfocito B inmaduro Linfocito B Diferenciacin de

precursor que reconoce a Ag maduro reconoce linfocitos B a
propio a Ag extrao plasmocito

Clula estromal
de mdula sea

Generacin de Induccin de Activacin de Secrecin de Acs

linfocitos B en tolerancia hacia linfocitos B en en mdula sea y
mdula sea Ags propios y bazo tejidos linfticos tejidos linfticos
secundarios secundarios
 Poblaciones de linfocitos B

Linfocitos
LinfocitosB2:
B2 95% de los linfocitos
o foliculares: 95% deBlos enlinfocitos
sangre yB
ganglios
en sangre linfticos
y ganglios linfticos

Linfocitos B1: predominan en las cavidades

peritoneal y pleural

Linfocitos B de la zona marginal del bazo

 Activacin de los linfocitos B con colaboracin
de linfocitos T CD4 (TFH)

El Ag (protena viral) es reconocido El linfocito B presenta pptidos

por el BCR derivados de las protenas virales
El El linfocito TFH
entrecruzamiento reconoce el
del BCR por el Ag pptido-MHC II
induce seales de presentado por
activacin el linfocito B

El virus y la Ig son endocitados y

degradados
El linfocito B se diferencia a clula
productora de anticuerpos El linfocito B
El Ag se procesa activado se
por la va diferencia a
endoctica plasmocito y
secreta
anticuerpos
especficos
 Entrecruzamiento de
la Ig por el antgeno

+
P P ITAMs
P P
Syk PTK
Lyn,Fyn, Blk

Activacin de distintas vas

transduccionales.

Activacin de FT que permitirn la

transcripcin de diversos genes.
 Activacin de los linfocitos B con colaboracin
de linfocitos T CD4 (TFH)

El Ag (protena viral) es reconocido El linfocito B presenta pptidos

por el BCR derivados de las protenas virales
El El linfocito TFH
entrecruzamiento reconoce el
del BCR por el Ag pptido-MHC II
induce seales de presentado por
activacin el linfocito B

El virus y la Ig son endocitados y

degradados
El linfocito B se diferencia a clula
productora de anticuerpos El linfocito B
El Ag se procesa activado se
por la va diferencia a
endoctica plasmocito y
secreta
anticuerpos
especficos
Frecuencia de linfocitos
vrgenes (T o B) entre 1:10.000 y 1:1.000.000
especficos para un
antgeno

Cmo consiguen encontrarse para

colaborar en la produccin de anticuerpos?
 Estructura del ganglio linftico

Linftico aferente

Seno
trabecular Zona paracortical
Seno
subcapsular

Folculo

Conductos fibroreticulares que

ordenan el trnsito de los
linfocitos y clulas dendrticas en
la zona paracortical

Red de conductos T
fibroreticulares
 Ingreso de los linfocitos T vrgenes al ganglio linftico

AFERENTE
LINFTICO Antgeno
HEV

T
TCR
Clula T
dendrtica

MHC II-pptido
T

ZONA PARACORTICAL DEL GANGLIO

 Ingreso de los linfocitos B vrgenes al ganglio linftico

HEV

CXCR5

V
B B

V
V V
Y Y B V
Y
AFERENTE
LINFTICO

V
B V
Y

CXCL13

CFD

V
B V
V B
Y

V
V
ZONA PARACORTICAL DEL Y B V
GANGLIO Y
V

B V
Y
FOLCULO PRIMARIO
 La activacin de los linfocitos T CD4+
induce la secrecin de IL-21
La diferenciacin a TFH es
un proceso multifactorial TCR
que ocurre en etapas IL-21

T
IL-6 T T CXCR5
T CCR7
T
IL-12 T
CD28 T
TCR alta
afinidad
MHC II-
pptido
ICOS

Los linfocitos T activados aumentan la expresin de

CXCR5 y disminuyen la expresin de CCR7.
Se induce la expresin de la molcula co-
estimulatoria ICOS.
ZONA PARACORTICAL
DEL GANGLIO
 Pre-TFH

La expresin sostenida de
CXCR5 es propia del linfocito
T folicular helper (TFH)
Los linfocitos pre-TFH migran hacia el
folculo primario atrados por CXCL13 CXCL13
TFH

El factor de transcripcin BCL-6

coordina la diferenciacin de los FOLCULO
linfocitos T a TFH PRIMARIO
Qu sucede con los linfocitos B en el
ganglio linftico?
 Los linfocitos B que
T T reconocen el antgeno
T
T aumentan la
T
expresin de CCR7
CCL19
CCL21
MHC II-
pptido

T
Y

V
CD4 B

V
TFH B
Y V Macrfago
subcapsular
V

V
B

Y
ZONA PARACORTICAL DEL GANGLIO

FOLCULO PRIMARIO
Cooperacin T-B
en el borde del
folculo
 MEDULA DEL GANGLIO
LINFATICO

IgM

IL-6
PLASMOCITOS

PLASMOBLASTOS

FOCO B
PRIMARIO
Zona del manto
TFH (linfocitos B en reposo)
B
B
B
CFD
B
FOLCULO PRIMARIO

CXCL13
 FORMACIN DEL CENTRO GERMINAL

TFH

FOCO
PRIMARIO
B

CFD

CENTROBLASTOS
Hipermutacin
somtica
 Hipermutacin somtica

hotspots

Cadena H VDJ ADN

Cadena L VJ ADN

Mutaciones en la region variable

(1 par de bases cada 1000 en
cada mitosis)

50% de las clulas hijas en cada

mitosis porta una Ig diferente
 TFH

CFD
Y
Y
THF
Y Ki-67, marcador de
Y ZONA proliferacin celular

Y Y CLARA
Y

Y
CENTROCITOS
TFH

ZONA
CENTROBLASTOS OSCURA
Seleccin de los centrocitos con BCR de mayor afinidad por el Ag

Receptores para

Y
complemento

Y
Receptores Ag
para Fc de Ig opsonizado
Y
CFD

Y
Y
Y TFH
Y
B

Y
Seales de
Y sobrevida
Y
Y

Centrocito
apopttico
Y
TFH
Y B
Y
El aumento de la afinidad de los anticuerpos favorece la respuesta
anti-infecciosa facilitando la neutralizacin de los patgenos
virus Influenza ingresa a la
clula blanco por unin de
Interaccin con el antgeno Hemaglutinina a residuos de
cido silico en la membrana
Alta afinidad Baja afinidad

antgeno antgeno

Menor Mayor
concentracin concentracin

~300 molculas de Hemaglutinina

por virin
60-110 molculas de anticuerpo
para impedir el ingreso del virus
(neutralizacin)
la afinidad aumenta desde 10-4M
hasta > 10-8M
 Cambio de isotipo de inmunoglobulina

Receptores para

Y
complemento

Y
Receptores Ag
para Fc de Ig opsonizado
Y
CFD

Y
Y
Y TFH
Y
B Seales de

Y
sobrevida
Y
Y
Y

Centrocito
apopttico
Cambio de isotipo
Y THF
Y B
Y
 Cambio de isotipo de Inmunoglobulina

Cadena H de la inmunoglobulina en un linfocito B que expresa IgM

5 IgM
regiones S

Corte del ADN en la regin constante de la cadena pesada

Unin de la porcin VDJ con un exn de regin constante distinto de y

Cadena H de la Ig en un linfocito B que expresa IgG1 IgG1

Segmento de ADN que se pierde

 La hipermutacin somtica y el cambio de isotipo
dependen de la enzima AID (citidina deaminasa inducida por activacin)

AID deamina la citidina del ADN convirtindola en uracilo.

AID acta nicamente sobre ADN simple cadena, lo que explica

que la transcripcin sea crtica para la HS y el CI.

La expresin de AID se encuentra fuertemente regulada.

 La hipermutacin somtica y el cambio de isotipo dependen de la
enzima AID (citidina deaminasa inducida por activacin)

Hipermutacin Cambio de
somtica (HS) isotipo (CI)

ADN
Mutaciones en AID
deaminacin de
citidina en uracilo provocan el sindrome transcripcin de la regin S
de hiper-IgM tipo 2 y deaminacin de citidina

exincin del uracilo

reparacin del esqueleto exincin del uracilo

de fosfodisteres

reemplazo por otra base

ruptura de las hebras de
ADN por endonucleasas

Recombinacin de
Las mutaciones en la En el CI, AID es regiones S

HS son consecuencia de necesaria para inducir la

los errores introducidos ruptura de las hebras de
por la maquinaria de ADN en las regiones S que son
reparacin del ADN. luego unidas por las recombinasas
 Cambios en los genes que codifican las cadenas
pesada y liviana de las Inmunoglobulinas:

Recombinacin somtica: involucra a los genes V(D)J (porcin variable)

de las cadenas H y L. Ocurre durante la ontogenia, en la mdula sea,
antes del encuentro con el antgeno.

Hipermutacin somtica: involucra a los genes V(D)J (porcin variable)

de las cadenas H y L. Ocurre en los rganos linfticos secundarios,
despus del encuentro con el antgeno.

Cambio de isotipo de Ig: involucra a los genes de la porcin constante de

la cadena H. Ocurre en los rganos linfticos secundarios, despus del
encuentro con el antgeno.
 Cambios en los genes que codifican las cadenas
pesada y liviana de las Inmunoglobulinas

Capacidad para Ruptura de la doble

reconocer una hlice de ADN.
enorme diversidad
de molculas. Mutaciones
inducidas por errores
Aumento de la en la reparacin
afinidad de los genmica.
anticuerpos.
Ms del 95% de las
Produccin de leucemias y linfomas
anticuerpos de humanos son de
distintos isotipos. origen B.
 Diferenciacin del centrocito

HLA-II
Y Clula B de
memoria

Y
BCR

Y Y
Y

B
Y

Y Y
Y

Y
Y
Y

Y
Plasmocito
Y
 BCL-6
Principales factores de
transcripcin en la PAX-5
diferenciacin del linfocito B BLIMP-1
XBP-1

PAX-5

PAX-5 PAX-5 XBP-1 XBP-1 XBP-1 alto

BCL-6 (inhibe Deja de expresarse Deja de BLIMP-1 (inhibe BLIMP-1 alto
expresin de BLIMP-1) BCL-6 expresarse PAX-5 expresin de BCL-6 y
PAX-5
 Respuesta de Respuesta de Respuesta de
centro germinal en centro germinal en centro germinal en
el ganglio el bazo las mucosas

CG

Zona del
manto

CG Placa de
Zona
marginal Peyer

Trabculas Arteriola
central
Pulpa
roja
 Ciclo de vida de los linfocitos B2 o foliculares

Mdula sea y bazo

Generacin del repertorio B e
induccin de tolerancia central

Circulacin
Linfocitos B vrgenes IgM+ IgD+

Linfocitos B que no pueden competir Linfocitos B vrgenes que reciben

con xito por las seales de sobrevida seales de sobrevida
Vida media: alrededor de 3 das Vida media: 3 a 8 semanas

Linfocitos B activados por el

Antgeno

Clulas B de memoria: de larga Plasmocitos (vida media

vida (meses-aos) corta o larga)
 Supervivencia de los plasmocitos en la mdula sea
mdula sea
hueso

Clula estromal
productora de
CXCL12

eosinfilo
vaso
sanguneo

Plasmocito de vida
media larga
plasmoblasto

megacariocito

monocito

Current Opinion in Immunology 33:64, 2015

 Poblaciones de linfocitos B

Linfocitos B2: 95% de los linfocitos B en sangre y

ganglios linfticos

Linfocitos B1: predominan en las cavidades

peritoneal y pleural

Linfocitos B de la zona marginal del bazo

Ciclo de vida de los linfocitos B1
 Linfocitos B1

Se activan por reconocimiento de antgenos Antgeno T

independiente de tipo II
que presentan epitopes repetitivos.
Y
Ejs: polisacridos bacterianos, fosforilcolina,

Y
protenas virales como hemaglutinina de virus
Influenza. B

Y
Y

La activacin no requiere que colaboren con

linfocitos TFH a travs de HLA-II.
Secrecin de
anticuerpos
 Linfocitos B1

El linfocito B1 no necesita presentar el pptido

junto a molculas HLA-II al linfocito TFH para
proliferar y diferenciarse en clula plasmtica

Cmo se induce la
segunda seal de activacin
que requiere el B1 para
diferenciarse?
Y
Y

Y
plasmocito
B anticuerpos
Y

Y
 NKT

NK

Y
plasmocito
anticuerpos
Y

Y
Los linfocitos T, clulas NK,

Y
NKT y clulas dendrticas
B

Y
pueden inducir seales de

Y
activacin en las B1 para que Y
se diferencien en plasmocitos
(citoquinas, BAFF, CD40-
CD40L, etc)
clula
dendrtica
T
 plasmocito
TLR2 Y anticuerpos
Y Y
Y

Y
Y

Y
B B
Y

Y
Y Y
TLR9

Ligandos de los TLR tambin

pueden inducir la segunda seal
de activacin para la
diferenciacin de las B1 en
plasmocitos
Los linfocitos B1 secretan anticuerpos naturales

IgM> IgG> IgA de baja afinidad y polirreactivos.

Repertorio menos diverso que los linfocitos B2.
Una parte sustancial de la IgM natural reconoce
epitopes oxidados.
Importantes en la respuesta anti-infecciosa
temprana y en la homeostasis.
 Importancia de los anticuerpos naturales en las infecciones virales

Filtrado en los tejidos Estimulan la respuesta

Limitan la diseminacin viral linfticos secundarios
adaptativa
Neutralizacin

Anticuerpos
naturales
Transporte de los
antgenos virales a
los tejidos linfticos
secundarios
Complejos inmunes

Unin a
Activacin del complemento receptores de
complemento y
remocin del virus
Lisis de los viriones y/o las
clulas infectadas
 Poblaciones de linfocitos B

Linfocitos B2: 95% de los linfocitos B en sangre y

ganglios linfticos

Linfocitos B1: predominan en las cavidades

peritoneal y pleural

Linfocitos B de la zona marginal del bazo

 Estructura del bazo

macrfagos

Zona
Pulpa blanca
Zona perifolicular
Pulpa Roja
marginal
Cpsula
Arteria esplnica

Folculo
Clulas BZM
Arteriola

Arteriola

Zona T
Linfocitos B1 y linfocitos de la zona marginal del bazo
(clulas B innatas - innate-like B cells)

Linfocitos B1 Linfocitos B de la zona

marginal del bazo

Repertorio B restringido

Activacin sin necesidad de contacto

con T CD4 a travs de MHC II

Respuesta rpida (3-4 das de ingresado

el antgeno)

Produccin de Acs polirreactivos de baja

afinidad

Acs de isotipo IgM, IgA e IgG3 Acs de isotipo IgM e IgG2

Cavidad peritoneal y pleural Bazo

Relevantes en la proteccin contra bacterias

encapsuladas:Streptococcus pneumoniae, Haemophilus
influenzae, Neisseria meningitides
 Respuesta inmune a la infeccin con Streptococcus pneumoniae
Evita la infeccin a rganos vitales
Atrapamiento de
la bacteria en el
bazo Aumenta la inmunogenicidad

Mucosa
respiratoria

bacterias
Y
Y
Transporte a

Y Y
tejidos linfticos
secundariosl Activacin del
complemento
YY
IgM
3 das post-infeccin: Altos ttulos de IgM
natural Y
Y Y
de baja afinidad
YY
Y IgA
Y
Despus de 1-2 semana: IgG de alta afinidad

Sangre
Clases o isotipos de anticuerpos
 IgM
Anticuerpos IgG
naturales IgA

B CP

Respuesta primaria y secundaria

de anticuerpos

Ttulo de anticuerpos IgG

Antgeno Antgeno
IgA
IgE

IgM

Tiempo (semanas o meses)

Funciones de los anticuerpos
 Funciones de los anticuerpos segn el isotipo de Ig

Activacin de la va clsica del

IgM complemento
Neutralizacin de antgenos

Neutralizacin de antgenos
Interaccin con RFc (fagocitosis,
CCDA, secrecin de citoquinas)
IgG
Activacin de la va clsica del
complemento

IgA Neutralizacin de antgenos

Sensibilizacin de mastocitos
IgE Interaccin con RFc (CCDA)
Distribucin de las Inmunoglobulinas en el organismo
 Principales caractersticas de los isotipos de Igs

IgM IgD IgG1 IgG2 IgG3 IgG4 IgA IgE

Neutraliza antgenos + - ++ ++ ++ ++ ++ -
Activa va clsica del C +++ - ++ + ++ - - -
Activa va alterna del C - - - - - - - -
Sensibiliza mastocitos - - - - - - - +++
Atraviesa placenta - - ++ ++ ++ ++ - -
Difusin extravascular +/- - ++ ++ ++ ++ ++ +
Nivel srico (mg/ml) 1,5 0,04 9 3 1 0,5 2 3x10-5
Vida media (das) 10 3 21 20 7 21 6 2