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LDL Colesterol

C monofase AA
Para la determinacin de LDL colesterol en suero o plasma

SIGNIFICACION CLINICA en el rtulo. Cerrar el vial y dejar 5 minutos. Luego disolver el conte-
Las lipoprotenas plasmticas son partculas esfricas que nido del vial por agitacin suave evitando la formacin de espuma.
contienen cantidades variables de colesterol, triglicridos,
fosfolpidos y protenas. Estas partculas solubilizan y trans- PRECAUCIONES
portan el colesterol en el torrente sanguneo. - Los Reactivos son para uso diagnstico "in vitro".
La proporcin relativa de protena y lpido determina la - No pipetear con la boca.
densidad de estas lipoprotenas y provee las bases sobre - El Calibrador ha sido examinado para HBsAg, HCV y anticuer-
las cuales establecer una clasificacin. Estas clases son: po contra HIV 1/2, encontrndose no Reactivo. No obstante
quilomicrones, lipoprotenas de muy baja densidad (VLDL debe procesarse como si se tratara de material infectivo.
- Very Low Density Lipoproteins), lipoprotenas de baja den- - Utilizar los Reactivos guardando las precauciones habitua-
sidad (LDL - Low Density Lipoproteins) y lipoprotenas de les de trabajo en el laboratorio de qumica clnica.
alta densidad (HDL - High Density Lipoproteins). Numerosos - Todos los Reactivos y las muestras deben descartarse de
estudios clnicos han demostrado que las diferentes clases acuerdo a la normativa local vigente.
de lipoprotenas tienen distintos y variados efectos en el
riesgo de enfermedad coronaria. Estos estudios sealan al ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
LDL colesterol como el factor clave en la patognesis de la ALMACENAMIENTO
ateroesclerosis y la enfermedad cardaca coronaria (ECC), Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-10oC)
mientras que el HDL colesterol es considerado como factor hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
protectivo. Puede ocurrir un aumento en el LDL colesterol, Una vez abierto los Reactivos son estables durante 4 sema-
an con concentraciones normales de colesterol, asociado nas en refrigerador (2-10oC).
a un incremento en el riesgo de ECC. Calibrador: estable en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha
de vencimiento indicada en la caja. Una vez reconstituido es
FUNDAMENTOS DEL METODO estable 2 semanas en refrigerador (2-10 oC). Puede
El presente mtodo es un ensayo homogneo sin precipita- fraccionarse en alcuotas debiendo ser conservado a -80oC.
cin, en dos pasos. En el primero, se agrega un tensioactivo
(Reactivo A) que solubiliza las partculas lipoproteicas no- MUESTRA
LDL. El colesterol liberado es consumido por la colesterol es- Suero o plasma
terasa y la colesterol oxidasa en una reaccin sin desarrollo a) Recoleccin: obtener la muestra de la manera usual.
de color. Un segundo tensioactivo (Reactivo B) solubiliza las b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plasma
partculas de LDL formndose, por la presencia de enzimas y usar EDTA o heparina como anticoagulantes.
un Reactivo cromognico, un color proporcional a la cantidad c) Sustancias interferentes conocidas: no se encuentran
de LDL colesterol presente en la muestra. interferencias por cido ascrbico hasta 50 mg/dl, hemoglo-
bina hasta 500 mg/dl, bilirrubina hasta 20 mg/dl y -globulina
REACTIVOS PROVISTOS hasta 50 g/l. En caso de muestras con concentraciones
A. Reactivo A: solucin conteniendo colesterol esterasa superiores de interferentes, debern diluirse con solucin
1000 U/l, colesterol oxidasa 1200 U/l, peroxidasa 1250 U/l, fisiolgica antes de proceder a su ensayo, multiplicando el
ascorbato oxidasa 3000 U/l, 4-aminoantipirina 1 g/l y tensio- resultado obtenido por la dilucin efectuada.
activo 7 g/l en buffer MES 50 mM. Referirse a la bibliografa de Young para los efectos de las
B. Reactivo B: solucin conteniendo N,N-bis-(4-sulfobutil)- drogas en el presente mtodo.
m-toluidina disdica (DSBmT) 0,4 g/l y tensioactivo 10 g/l d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento:
en buffer MES 50 mM. centrifugar y separar el suero del cogulo dentro de las 3
Calibrador: suero humano liofilizado conteniendo lipopro- horas posteriores a la extraccin. De no procesar las mues-
tenas de diversos tipos incluyendo LDL. La concentracin tras inmediatamente, las mismas pueden ser conservadas
es variable lote a lote (ver ttulo en el rtulo). durante 5 das en refrigerador (2-10oC).

INSTRUCCIONES PARA SU USO MATERIAL REQUERIDO (no provisto)


Reactivos A y B: listos para usar. - Material volumtrico para medir los volmenes indicados.
Calibrador: reconstituir con el volumen de agua destilada indicado - Analizador automtico.

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Mtodo LDL Colesterol Referencia
PROCEDIMIENTO
monofase AA
(analizadores automticos)
A continuacin se detalla un procedimiento general N de muestras 54 54
para LDL Colesterol monofase AA en un analizador promedio (mg/dl) 122,5 125,1
automtico. Cuando se implemente la tcnica para desvo standard (mg/dl) 30,7 30,9
un analizador en particular seguir las instrucciones de coeficiente de correlacin: 0,96
trabajo del mismo.
Muestra o Calibrador 3 ul Mtodo LDL Colesterol Mtodo
monofase AA directo
Reactivo A 300 ul
N de muestras 92 92
Incubacin durante 5 minutos a 37oC. Lectura de absor- promedio (mg/dl) 120,0 122,8
bancia a 660/546 nm (Blanco de Muestra). desvo standard (mg/dl) 30,5 31,6
Reactivo B 100 ul coeficiente de correlacin: 0,97
Incubacin durante 5 minutos a 37oC. Lectura del resul-
tado a 660/546 nm (concentracin de LDL-colesterol). b) Precisin: procesando simultneamente 20 muestras en
el mismo da se obtuvo la siguiente variacin intraensayo:

Nivel D.S. C.V.


CALIBRACION 98,1 mg/dl 0,72 mg/dl 0,73 %
El Calibrador debe procesarse junto con las muestras y en la 146,5 mg/dl 0,96 mg/dl 0,66 %
misma forma que stas. Las concentraciones del Calibrador 209,8 mg/dl 1,31 mg/dl 0,62 %

Los resultados de la comparacin fueron los siguientes:


y son variables lote a lote (ver ttulo en el rtulo). Ingresar

cambie de lote.

CALCULO DE LOS RESULTADOS


LDL colesterol (mmol/l) = LDL colesterol (mg/dl) x 0,02586

METODO DE CONTROL DE CALIDAD


Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
de LDL colesterol, con cada determinacin.

VALORES DE REFERENCIA
El panel de expertos del National Cholesterol Education
Program (NCEP) provee los siguientes valores de LDL
colesterol en relacin al riesgo de contraer enfermedad
cardaca coronaria (ECC):
- Riesgo bajo o nulo (sujetos normales): valores de LDL
colesterol menores de 129 mg/dl.
- Riesgo moderado a elevado (individuos con probabilidad
de contraer ECC): valores entre 130 y 189 mg/dl.
- Riesgo muy elevado (individuos sospechosos de padecer
ECC): valores de LDL colesterol 190 mg/dl.
No obstante, es recomendable que cada laboratorio esta-
blezca sus propios valores de referencia.

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO


Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
No deben emplearse anticoagulantes que contengan citrato.

PERFORMANCE
a) Exactitud: la exactitud del mtodo descripto se verific
por comparacin con los valores obtenidos por el mtodo
de referencia de ultracentrifugacin y anlisis del colesterol
y con el mtodo directo de inmunoseparacin de LDL.
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c) Lmite de deteccin: 0,278 mg/dl.

PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS


Para las instrucciones de programacin consulte el manual
del usuario del analizador en uso.

PRESENTACION
- 80 ml (1 x 60 ml + 1 x 20 ml), con Calibrador (Cd. 1220220)
- 80 ml (2 x 30 ml + 2 x 10 ml), con Calibrador (Cd. 1009283)
- 80 ml (2 x 30 ml + 2 x 10 ml), con Calibrador (Cd. 1009348)
- 160 ml (2 x 60 ml + 2 x 20 ml), con Calibrador (Cd. 1009627)

BIBLIOGRAFIA
- Crouse, J.R. et al. - J- Lipid Res. 26: 566, 1985.
- Barr, D.P.; Russ, E.M.; Eder, H.A. - Am. J. Med. 11:480,
1951.
- William, P. Robinson, D.; Baily, A. - Lancet 1:72, 1979.
- Kannel, W.B.; et al. - Am. Intern. Med. 90/1:85, 1979.
- Bachorik, P.S.; et al. - Clin. Chem. 41/10, 1995.
- Grundy, S.M. et al. - JAMA 269/23:3015, 1993.
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
AACC Press, 4th ed., 2001.
- Tietz, N.W. - W.B. Saunders Co., Philadelphia, p.256, 1986.
- Expert Panel of National Cholesterol Education Program -
JAMA 285/19:2486 (2001).

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Smbolos
Los siguientes smbolos se utilizan en todos los kits de reactivos para diagnstico de Wiener lab.

Este producto cumple con los requerimientos

C previstos por la Directiva Europea 98/79 CE de M Elaborado por:

productos sanitarios para el diagnstico "in vitro"


Xn

P Representante autorizado en la Comunidad


Europea Nocivo

V Uso diagnstico "in vitro"


Corrosivo / Castico

X Contenido suficiente para <n> ensayos


Xi

Irritante

H Fecha de caducidad

i Consultar instrucciones de uso

l Lmite de temperatura (conservar a)

Calibr. Calibrador
No congelar

b Control

F Riesgo biolgico

Volumen despus de la reconstitucin


b Control Positivo

Cont. Contenido c Control Negativo

g Nmero de lote h Nmero de catlogo

M Wiener Laboratorios S.A.I.C. Riobamba 2944


2000 - Rosario - Argentina http://www.wiener-lab.com.ar Dir. Tc.: Viviana E. Ctola Bioqumica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Cert. N: 3135/99
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PCR-ltex
directo Prueba directa de aglutinacin en placa para la
determinacin de Protena C Reactiva

SIGNIFICACION CLINICA Los Reactivos Provistos son para uso diagnstico "in vitro".
La Protena C Reactiva (PCR) es una protena termolbil que Los Controles han sido examinados para antgeno de
no atraviesa la barrera placentaria y cuya movilidad electro- superficie del virus de hepatitis B, virus de la hepatitis C y
fortica se encuentra entre las zonas de las y globulinas.
Su nombre se debe a la capacidad para precipitar los poli-
sacridos C de los pneumococos.
Es una de las llamadas protenas de fase aguda y se incre-
menta en suero, en una gran variedad de enfermedades
inflamatorias o como respuesta a necrosis tisular.
Su determinacin es importante debido a que aumenta
rpidamente al comienzo de la enfermedad, 14 a 26 horas
luego de la inflamacin o injuria tisular y desaparece en la
etapa de recuperacin, apareciendo slo durante la fase
activa del proceso inflamatorio.
La PCR se encuentra comnmente aumentada en: artritis
reumatoidea activa, infecciones virales, tuberculosis, fiebre
reumtica activa, infarto agudo de miocardio, etc. Tambin
se la puede hallar luego de una operacin quirrgica y en
gran porcentaje luego de transfusiones sanguneas. La
determinacin de PCR no slo indica la intensidad de la
enfermedad sino tambin la respuesta del paciente a un
tratamiento dado.

FUNDAMENTOS DEL METODO


La PCR se detecta en suero por reaccin con un anticuerpo
especfico adsorbido sobre un soporte inerte de ltex. La
PCR se une a los anticuerpos adsorbidos produciendo la
aglutinacin de las partculas de ltex.

REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: suspensin de partculas de ltex-poliestireno
sensibilizadas con anticuerpos anti-PCR.
Control Positivo*: dilucin de protenas sricas conteniendo
protena C reactiva.
Control Negativo*: dilucin de protenas sricas no reactiva.

REACTIVOS NO PROVISTOS
Solucin fisiolgica.

INSTRUCCIONES PARA SU USO


Reactivo A: agitar bien y luego cambiar la tapa ciega por la
tapa gotero suministrada adicionalmente.
Controles Positivo y Negativo: listos para usar.

PRECAUCIONES
anticuerpos contra HIV 1/2, encontrndose no reactivos. c) Sustancias interferentes conocidas: los sueros marca-
No obstante, deben ser empleados como si se tratara de damente lipmicos o contaminados pueden dar resultados
material infectivo. falsamente positivos.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el
de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. suero debe ser preferentemente fresco. En caso de no pro-
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de cesarse en el momento puede conservarse hasta 24 horas en
acuerdo a la normativa local vigente. refrigerador (2-10oC) y hasta 4 semanas congelado a -20oC.

ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE MATERIAL REQUERIDO


ALMACENAMIENTO 1- Provisto
Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2- - placas de plstico o vidrio fondo negro*
10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. - 1 tapa gotero de 25 ul
No congelar. 2- No Provisto
- pipetas y micropipetas capaces de dispensar los volme-
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
nes indicados
REACTIVOS
- palillos mezcladores descartables
La autoaglutinacin del Reactivo A es indicio de deterioro
- cronmetro
del mismo. En tal caso desechar.
- lmpara o fuente de luz
MUESTRA
Suero
PROCEDIMIENTO
a) Recoleccin: obtener suero de la manera usual.
Llevar los reactivos y las muestras a temperatura am-
b) Aditivos: no se requieren.
biente antes de usar. Agitar el Reactivo A antes de usar,
vaciando previamente la pipeta del gotero.

* No provisto con todas las presentaciones 870800022 / 01 p. 1/8


PRESENTACION
I- TECNICA CUALITATIVA Equipo para 150 determinaciones (Cd. 1683155).
Muestra o Control 25 ul
BIBLIOGRAFIA
Reactivo A 1 gota (25 ul) - Singer, J.M.; Plotz, C.M.; Parker, E. and Elster, S.K. - Am.
J. Clin. Path. 28:611 (1957).
Mezclar con un palillo descartable hasta obtener una
- Nilson, L.A. - Acta Pathol. Microbiol. Scand. 73:129 (1968).
suspensin uniforme en toda la superficie del crculo.
- Scherffarth, F.; Prez-Miranda, M. and Goetz, H. - Blut.
Inmediatamente disparar un cronmetro, balancear
20: 296 (1970).
suavemente la placa y observar macroscpicamente el
resultado bajo un haz luminoso dentro de los 2 minutos.
II- TITULACION
Los sueros positivos pueden titularse efectuando dilu-
ciones seriadas en 8 tubos de Kahn.
a) Colocar 0,5 ml de solucin fisiolgica en cada uno
de los tubos.
b) Agregar 0,5 ml de suero al tubo N 1 y mezclar.
Transferir 0,5 ml de esta dilucin al tubo N 2 y mezclar,
continuando as las diluciones hasta el ltimo tubo.
Las diluciones as obtenidas equivalen a 1:2, 1:4, 1:8,
1:16, etc.
c) Ensayar cada dilucin segn la TECNICA I.

INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS


Negativo: suspensin homognea.
Positivo: aglutinacin que aparece dentro de los 2 minutos.
Se califica de 1 a 4 +.
Ttulo: inversa de la mxima dilucin a la que se produce
aglutinacin visible macroscpicamente.
La concentracin aproximada de PCR en la muestra puede
ser calculada por la frmula siguiente:
PCR (mg/l) = Ttulo x Sensibilidad de la reaccin (6 mg/l)
Ejemplo: la muestra presenta un ttulo de 1:2. Su concentra-
cin de PCR es de 2 x 6 = 12 mg/l.

METODO DE CONTROL DE CALIDAD


Procesar simultneamente los controles provistos o sueros
probadamente reactivos, empleando 25 ul del Control corres-
pondiente y 25 ul de Reactivo A segn la tcnica cualitativa.

VALORES DE REFERENCIA
Hasta 6 mg/l.
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
valores de referencia.

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO


Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
- Tiempos de reaccin mayores de dos minutos pueden
producir reacciones falsamente positivas por efectos de
secado de los reactivos.
- Cualquier alteracin en la proporcin Muestra/Reactivo,
puede conducir a resultados errneos.

PERFORMANCE
Sensibilidad: PCR-ltex directo maxi detecta 6 mg/l de
protena C reactiva.
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SIMBOLOS
Los siguientes smbolos se utilizan en todos los kits de
reactivos para diagnstico de Wiener lab.

Este producto cumple con los requerimientos previstos

C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios


para el diagnstico "in vitro"

P Representante autorizado en la Comunidad Europea


V Uso diagnstico "in vitro"

X Contenido suficiente para <n> ensayos

H Fecha de caducidad

l Lmite de temperatura (conservar a)

No congelar

F Riesgo biolgico

Volumen despus de la reconstitucin


Cont. Contenido

g Nmero de lote

M Elaborado por:
Xn
Nocivo

Corrosivo / Castico

Xi
Irritante

i Consultar instrucciones de uso

Calibr. Calibrador

b Control

b Control Positivo

c Control Negativo

h Nmero de catlogo

M Wiener Laboratorios
S.A.I.C. Riobamba 2944
2000 - Rosario -
Argentina
http://www.wiener-
lab.com.ar Dir. Tc.:
Viviana E. Ctola
Bioqumica
utorizado A.N.M.A.T.
Cert. N: 4698/02
870800022 / 01 p. 3/8

Wiener lab.
2000 Rosario - Argentina
UR130708