Вы находитесь на странице: 1из 462

UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS


DEPARTAMENTO DE INGENIERA QUMICA

11IDhENE/<I~4pps
* ~30953
UNIVERSIDAD COMPLUTENSE

ESTUDIO FENOMENOLOGICO Y MODELADO


CINETICO DE LA SNTESIS ENZIMATICA DE
ESTERES DE BAJO, MEDIO Y ALTO PESO
MOLECULAR

ASomivo

MEMORIA
Que para optar al Grado de
DOCTOR en Ciencias Qumicas
PRESENTA

TOMAS GAlICIA MARTIN


MADRID, DICIEMBRE 1995
INDICE

1. INTRODUCCION 1

1.1 ACEITE DE JOJOBA 9

1.1.1 OBTENCION DEL ACEITE DEJOJOBA 10

1.1.2 CARACTERSTICAS Y COMPOSICION DEL ACEITE DE

JOJOBA 11

1.1.3 APLICACIONES DEL ACEITE DE JOJOBA 13

1.2 ACEITE DE CACHALOTE 18

1.2.1 OBTENCION DEL ACEITE DE CACHALOTE .... 20

1.2.2 CARACTERISTICAS Y COMPOSICION DEL ACEITE DE

CACHALOTE 21

1.2.3 APLICACIONES DEL ACEITE DE CACHALOTE Y SUS

DERIVADOS 26

1.3 MIRISTATO DE MIRISTILO 28

1.3.1 OBTENCION DEL MIRISTATO DE MITRISTILO 30

1.3.2 CARACTERISTICAS Y COMPOSICION DE LAS GRASAS DE

MIRISTACEAS 31

1.3.3 USOS Y APLICACIONES DE LAS MIRISTACEAS Y SUS

DERIVADOS 32

1.4 2-METIL-BUTIRATO DE OLEILO 33

1.4.1 ORTENCION DEL 2-METIL-BUIJIRATO DE OLEILO 34

1.4.2 CARACTERISTICAS Y COMPOSICION DE LOS ACEITES 35

1.4.3 USOS Y APLICACIONES DEL 2-METIL-BUTIRATO DE OLEILO.. 37


1.5 PALMITATO DE ISOPROPILO 38

1.5.1 OBTENCION DEL PALMITATO DE ISOPROPILO 39

1.5.2 CARACTERSTICAS Y COMPOSICION DE LOS ACEITES 40

1.5.3 USOS Y APLICACIONES DEL PALMITATO DE ISOPROPILO .... 42

1.6 OLEATO DE ISOPROPILO 44

1.6.1 OBTENCION DEL OLEATO DE ISOPROPILO Y DEL ACIDO

OLEICO 45

1.6.2 CARACTERSTICAS Y COMPOSICION DE LOS ACEITES 46

1.6.3 USOS Y APLICACIONES DEL OLEATO DE ISOPROPILO 51

1.7 METODOS PARA LA SIINTESIS DE ESTERES 55

1.7.1 REACCIONES DE SOLVOLISIS 55

1.7.1.1 Reacciones a partir de cloruros de cido . . . . 55

1.7.1.2 Reacciones a partir de anhdridos de cido 56

1.7.1.3 Reacciones a partir de sales de cidos y haluros de alquilo. .. 56

1.7.1.4 Reacciones a partir de cidos carboxilicos y alcoholes

orgnicos: Esterificacin 56

1.7.2 REACCIONES DE OXIDACION-REDUCCION 58

1.7.3 ESTERIFICACION CATALTICA 59

1.7.3.1 Catlisis clsica. 59

1.7.3.2 Catlisis por cidos de Lewis 61

1.7.3.3 Catlisis mediante zeolitas 62

1.7.3.4 Catlisis enzimtica 63

1.8 VARIABLES DE OPERACION EN LOS PROCESOS DE

ESTERIFICACION 78

1.9 OBJETIVOS Y PLAN DE TRABAJO.. 80

1.10 BIBLIOGRAFIA ... 82


2. CINETICA ENZIMATICA 97

2.1 MODELOS PARA UN SOLO SUSTRATO 102

2.2 INI-IIBICION ENZIMATICA 108

2.2.1 INHIBICION COMPETITIVA ... 110

2.2.2 INHIBICION NO COMPETITIVA 112

2.2.3 INHIBICION ACOMPETITIVA ... 117

2.2.4 INHIBICION MIXTA 119

2.3 CINETICA ENZIMATICA PARA SISTEMAS

MULTIREACTANTES 120

2.3.1 MECANISMO DE REACCION AL AZAR 121

2.3.2 MECANISMO PINO-PONG.. 122

2.3.3 MECANISMO DE REACCION ORDENADO 124

2.4 BIBLIOGRAHA 131

3. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL 135

3.1 INSTALACION EXPERIMENTAL 139

3.1.1 SISTEMA DE REACCION 142

3.1.2 SISTEMA DE CALEFACCION Y CONTROL DE TEMPERA TURA.. 143

3.1.3 SISTEMA DE AGITACION, REGULACION Y MEDIDA 144

3.1.4 SISTEMA DE VACIO 144

3.2 MATERIALES EMPLEADOS 145

3.2.1 REACTIVOS QUMICOS 145

3.2.2 SISTEMAS CATALTICOS 148

3.3 CONDICIONES DE OPERACION 154

3.4 DESARROLLO DE UN EXPERIMENTO ... 157


3.5 BIBLIOGRAFIA 159

4. METODOS DE ANLISIS 161

4.1 CROMATOGRAFIA GAS-LIQUIDO 164

4.1.1 ELECCION DE LA COLUMNA 164

4.1.2 CONDICIONES DE OPERACION 165

4.2 CROMATOGRAFIA DE GASES-ESPECTROMETRIA DE

MASAS 166

4.2.1 ELECCION DE LA COLUMNA 166

4.2.2. CONDICIONES DE OPERACION 167

4.3 RESULTADOS Y DISCUSION DEL METODO DE ANALISIS ... 168

5. ELECCION DEL CATALIZADOR 183

5.1 ESTERIFICACION DE ACIDO OLEICO CON ALCOHOL

OLEICO 186

5.2 ESTERIFICACION DE ACIDO OLEICO CON ALCOHOL

CETILICO 189

5.3 ESTERIFICACION DE ACIDO MIRISTICO CON ALCOHOL

MIRISTICO 192

5.4 ESTERIFICACION DE ACIDO OLEICO CON ISOPROPANOL... 195

5.5 ESTERIFICACION DE ACIDO PALMTICO CON

ISOPROPANOL 198

5.6 ESTERIFICACION DE ACIDO 2-METIL-BUTIRICO CON

ALCOHOL OLEICO 201

5.7 IMPORTANCIA DEL TIPO DE SUSTRATO 204


6. RESULTADOS EXPERIMENTALES 207

6.1 SNTESIS DE OLEATO DE OLEILO 211

6.1.1 INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA 212

6.1.2 INFLUENCIA DE LA PRESION 213

6.1.3 INFLUENCIA DE LA CONCENTRACION INICIAL DE

CATALIZADOR 215

6.1.4 INFLUENCIA DE LA RELACION MOLAR ACIDO/ALCOHOL 218

6.1.5 ESTUDIO DE LA CONCENTRACION DE ESTER EN EL MEDIO DE

REACCION 222

6.1.6 ESTUDIO DE LA CONCENTRACION DE AGUA EN EL MEDIO DE

REACCION 224

6.2 SNTESIS DE OLEATO DE CElLO 226

6.2.1 INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA 22>7

6.2.2 INFLUENCIA DE LA PRESION 228

6.2.3 INFLUENCIA DE LA CONCENTRACION INICIAL DE

CATALIZADOR 229

6.2.4 INFLUENCIA DE LA RELACION MOLAR ACIDO/ALCOHOL 232

6.2.5 ESTUDIO DE LA CONCENTRACION DE PRODUCTOS EN EL

MEDIO DE REACCION 236

6.3 SINTESIS DE MIRISTATO DE MIRISTILO 238

6.3.1 INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA 239

6.3.2 INFLUENCIA DE LA PRESION 240

6.3.3 INFLUENCIA DE LA CONCENTRACION INICIAL DE

CATALIZADOR 241

6.3.4 INFLUENCIA DE LA RELACION MOLAR ACIDO/ALCOHOL .... 244


6.3.5 ESTUDIO DE LA CONCENTRACION DE PRODUCTOS EN EL

MEDIO DE REACCION 247

6.4 SINTESIS DE OLEATO DE ISOPROPILO 249

6.4.1 INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA 250

6.4.2 INFLUENCIA DE LA CONCENTRACION INICIAL DE

CATALIZADOR 251

6.4.3 INFLUENCIA DE LA RELACION MOLAR ACIDO/ALCOHOL .... 253

6.4.4 ESTUDIO DE LA CONCENTRACION DE PRODUCTOS EN EL

MEDIO DE REACCJON 257

6.5 SINTESIS DE PALMITATO DE ISOPROPILO 259

6.5.1 INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA 260

6.5.2 INFLUENCIA DE LA CONCENTRACION INICIAL DE

CATALIZADOR 261

6.5.3 INFLUENCIA DE LA RELACION MOLAR ACIDO/ALCOHOL .... 263

6.5.4 ESTUDIO DE LA CONCENTRACION DE PRODUCTOS EN EL

MEDIO DE REACCION 266

6.6 SINTESIS DE 2-METIL-BUTIRATO DE OLEILO 268

6.6.1 INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA 269

6.6.2 INFLUENCIA DE LA PRESION 270

6.6.3 INFLUENCIA DE LA CONCENTRACION INICIAL DE

CATALIZADOR 271

6.6.4 INFLUENCIA DE LA RELACION MOLAR ACIDO/ALCOHOL 274

6.6.5 ESTUDIO DE LA CONCENTRACION DE PRODUCTOS EN EL

MEDIO DE REACCION 277

7. MODELADO CINETICO 279

7.1 MODELADO DE LA SNTESIS DE OLEATO DE OLEILO .... 292


7.1.1 ESTUDIO DEL SISTEMA EN CONDICIONES DE

IRREVERSIBILIDAD 292

7.1.2 ESTUDIO DEL SISTEMA EN CONDICIONES DE

REVERSIBILIDAD 299

7.2 MODELADO DE LA SINTESIS DE OLEATO DE CETWO 302

7.2.1 ESTUDIO DEL SISTEMA EN CONDICIONES DE

IRREVERSIBILIDAD 302

7.2.2 ESTUDIO DEL SISTEMA EN CONDICIONES DE

REVERSIBILIDAD 308

7.3 MODELADO DE LA SNTESIS DE MIRISTATO DE

MIRISTIILO 310

7.3.1 ESTUDIO DEL SISTEMA EN CONDICIONES DE

IRREVERSIBILIDAD 310

7.3.2 ESTUDIO DEL SISTEMA EN CONDICIONES DE

REVERSIBILIDAD 315

7.4 MODELADO DE LA SNTESIS DE OLEATO DE

ISOPROPITLO 317

7.5 MODELADO DE LA SNTESIS DE PALMITATO DE

ISOPROPILO 323

7.6 MODELADO DE LA SNTESIS DE 2-METIL-BUTIR.ATO DE

OLEILO 331

7.6.1 ESTUDIO DEL SISTEMA EN CONDICIONES DE

IRREVERSIBILIDAD 332

7.6.2 ESTUDIO DEL SISTEMA EN CONDICIONES DE

REVERSIBILIDAD . 339
7.7 EFECTO DE LA TEMPERATURA 340

7.7.1 EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE K2 342

7.7.2 EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE K 345

8. SIMULACION TEORICA COMO BASE PARA LA

OPTIMACION Y CAMBIO DE ESCALA DE UN

PROCESO DE ESTERIFICACION 353

8.1 SIMULACION DE LA SNTESIS DE OLEATO DE OLEILO 356

8.2 SIMULACION DE LA SNTESIS DE OLEATO DE CETILO 369

8.3 SIMULACION DE LA SNTESIS DE MIRISTATO DE

MIRISTILO.. 376

8.4 SIMULACION DE LA SNTESIS DE OLEATO DE

ISOPROPILO 383

8.5 SIMULACION DE LA SNTESIS DE PALMITATO DE

ISOPROPWO 388

8.6 SIMULACION DE LA SINTESIS DE 2-METIL-BUTIRATO DE

OLEWO... 392

9. RESUMEN Y CONCLUSIONES 399

9.1 RESUMEN 401

92 CONCLUSIONES 404

10. NOMENCLATURA 411

ANEXO 1: ESTUDIO PARA LA PUESTA EN PLANTA DE

UN PROCESO DE ESTERIFICACION.. 415


1.1 ESTUDIO PARA LA OPTIMACION DEL PROCESO 418

1.1.1 ELECCION DE LA RESPUESTA A MEDIR 419

1.1.2 ELECCION DE LAS VARIABLES DE OPERACION.. 419

1.1.3 ELECCION DE LOS INTERVALOS DE OPERACION P ARA CADA

UNA DE LAS VARIABLES DE OPERACION .... 420

1.1.4 PLANIFICACION DE EXPERIMENTOS 422

1.1.5 RESULTADOS DE LA OPTIMACION DEL PROCESO 423

1.1.6 ESTIMACION DEL ERROR COMETIDO 425

1.1.6.1 Estimacin del error por el mtodo Danjels. 426

1.1.6.2 Estimacion del error por el metodo de la replicacion de los

puntos centrales 427

1.1.7 DETERMINACION DE LOS MODELOS ESTADSTICO E

INDUSTRIAL 428

1.2 ESTUDIO CINETICO DE LA SINTESIS DE MIRISTATO DE

ISOPROPILO 431

ANEXO II: DISEO FACTORIAL DE EXPERIMENTOS .... 441

11.1 MODELOS MATEMATICOS 444

11.2 ESTIMACION DE LA INFLUENCIA DE LOS FACTORES 445

11.3 ERROR EN LA RESPUESTA 446

11.4 SISTEMAS NO LINEALES 447

11.4.1 DISEOS COMPUESTOS: PLANIFICACION 448

11.4.1.1 Diselios compuestos centrales 448

11.4.1.2 Superficies de respuesta 449


El presente trabajo de investigacin ha sido desarrollado en los laboratorios de Fisicoqumica

de los Procesos Industriales del Departamento de Ingeniera Qumica de la Facultad de Ciencias

Qumicas de la Universidad Complutense de Madrid, bajo la direccin de los Profesores Titulares Dr.

Jos Aracil Mira y Dra. Mercedes Martnez Rodrguez, para quienes slo tengo palabras de

agradecimiento por sus enseanzas, dedicacin, paciencia y ayuda.

As mismo, deseo expresar mi ms sincero agradecimiento a todos los compaeros y anigos

del grupo de investigacin, los cuales han estado dispuestos en todo momento a echarme ua mano

y han sabido demostrar tanto su paciencia como su apoyo, hasta la conclusin de esta memoria. Quiero

que sepan que sin ellos nada hubiese sido lo mismo.

Madrid, diciembre de 1995.


A MIS PADRES
1. INTRODUCCION
Introduccin 3

Las grasas, aceites y ceras naturales se han venido utilizando, durante dcadas como materias

primas en la preparacin de jabones, lubricantes para maquinarias con mayor o menor grado de

desarrollo, preparados de carcter medicinal, obtencin de ciertos perfumes y esencias, preparacin de

barnices y pinturas, y en la composicin de unglientos, geles, blsamos y pomadas de uso tpico.

Con la aparicin de las primeras industrias, estos compuestos de origen natural se han seguido

empleando en la fabricacin de diferentes productos de inters industrial hasta la mitad de este siglo.

Desde entonces, la situacin ha cambiada considerablemente: El aumento de la demanda de estos

productos, la aparicin de otros nuevos, la disminucin de recursos naturales, el desarrollo de la

industria del petrleo y la coyuntura econmica han sido factores decisivos en el desarrollo de los

mismos, sintticamente. En algunos casos, ciertas sustancias se han podido sustituir por otras de origen

vegetal, pero en la mayora, dicha sustitucin se hace imposible debido, principalmente, a su uso

cotidiano. Por lo general, los productos derivados de grasas, aceites y ceras de origen natural, se

emplean en la industria farmacutica, cosmtica, de la alimentacin y en la preparacin de aditivos,

y, por lo tanto, los niveles de pureza e inocuidad exigidos son muy estrictos.
4 Introduccin

Debido a esto y para subsanar tanto la creciente demanda como la inminente escasez de

recursos naturales de estos productos, actualmente se ha tenido que recurrir a la bsqueda de

compuestos anlogos obtenidos por sntesis qumica [AUSTIN, 1988]. En este sentido, el crecimiento

del n&nero de investigaciones y proyectos para el desarrollo de nuevos productos de qumica fina que

sustituyan a los convencionales, est adquiriendo gran importancia en los ltimos aos.

Teniendo en cuenta que las grasas, aceites y ceras naturales son sustancias que pertenecen al

grupo de compuestos orgnicos denominado lpidos, su obtencin se lleva a cabo conjuntamente. Los

lpidos se encuentran en la naturaleza formando parte importante de los constituyentes de animales y

plantas, presentando como propiedad ms importante su escasa o inexistente solubilidad en agua,

aunque son solubles en disolventes orgnicos apolares. Este grupo de compuestos puede subdividirse

a su vez en otros dos subgrupos atendiendo a su capacidad para ser hidrolizados al ponerse en contacto

con una base acuosa. Cuando este hecho tiene lugar, se produce la saponificacin de los reactivos y

se dice que los lpidos de partida eran grasas, aceites o ceras. Cuando, por el contrario, la reaccin de

saponificacin no tiene lugar, los lpidos de partida se denominan esteroides. Por esto, en el primer

paso para acondicionar las materias primas, es importante purificar la mezcla de partida liberndola de

esteroides, en mayor o menor grado, segn las especificaciones del proceso para el que vayan a ser

empleadas. En la tabla 1.1 se muestran algunas fuentes de obtencin de estos compuestos, detailndose

su composicin y dos parmetros determinantes de la calidad de la materiaprima obtenida, como son

el ndice de iodo y el ndice de saponificacin.

Tanto a las grasas como a los aceites y a las ceras se les considera steres de cidos grasos,

principalmente cido oleico, esterico y palmtico. Sin embargo, los trminos grasa y aceite se refieren

a los correspondientes steres formados con la glicerina, siendo los ms comunes en la naturaleza los

triglicridos. La diferencia entre grasas y aceites viene dada por el estado de agregacin de la materia

que constituyen dichos steres, encontrndose las primeras como slidos y los ltimos como lquidos.
Introduccin 5
0.
<4
9 8
- 88 -~ . ej
e-> 88
U o 99 a 9 9 e~ 9 fl
e ~.,, C 9o9 9 0 Oe.a~~O< 09 999
ej O 8 48
u - ~
e 1 . o aae.aaao,O.oar~o~e.cc~c r
<4 <.49 ~ ej ..4 .~ 9 .4 del ej ~ ej ej.~ 4 ej 8-4 <.4 ej ej <4
o
o -, . e e y, o9
9 9fl 1~~ = oc oa o e. O a o 9.~ 9
2
U ~
o ..48. 5 .4 4 -~
o
LI

o
Oc
2048
a 9 a 99
e. ~ ~ . O~ .~ 9
(4
a e. y,
u
a
o a e
-, <e .4
1=
a
~J
o
4
a
-~
<t
a
4-
0 .9
U 8
~1
~
.3
a
H
o
LI
a
o
a
.0
1A ~ $11 .! 1 J~JI 1 ~ ~1 1 J 3
6 Introduccin

Las ceras, por su parte, se diferencian de las grasas y los aceites en que no son steres de la

glicerina, sino steres de cidos grasos de cadena larga y par monobsico, y alcoholes grasos de

cadena larga y par que slo posee un grupo hidroxilo terminal, siendo estas insaponificables cuando

hierven con un lcali [HART & SCI-IUETZ, 1980].

En cuanto al proceso bsico de obtencin del crudo de dichos productos, se puede decir que

ha cambiado muy poco en los ltimos tiempos, ya que se reduce a procesos de prensado hidrulico o

maceracin, dependiendo del tipo de materia prima de partida, y a una serie de tratamientos de

extraccin con diferentes tipos de disolvente. En cambio, con el fin de aumentar la calidad del producto

final, mejorar la eficacia de los procesos, reducir los costes de capital y evitar tanto la presencia de

sustancias contaminantes como el deterioro del medioambiente, el posterior tratamiento del crudo ha

sufrido bastantes cambios en las ltimas dcadas [MAG, 1994]. En la figura 1.1 se muestra el esquema

bsico empleado en el procesado de grasas, ceras y aceites.

PRODUCTO FINAL

Figura 1.1. Esquema bsico del procesado de grasas, aceites y ceras.


Introduccin 7

El consumo mundial de grasas, ceras y aceites fue, durante el ao 1994, de unos 78.9 millones

de toneladas mtricas. Teniendo en cuenta que el precio medio mundial es de unos 400 $/Tm. el

volumen econmico puesto en juego es de unos 3 1.56 billones de dlares anuales, lo que nos da una

idea de la importancia del mercado de productos sobre la economa mundial. Para el ao 2001, las

previsiones parecen apuntar hacia un aumento de la demanda de entorno a un 13.6% sobre el total

actual. Al parecer, el aumento de dicha demanda tendr lugar mayoritariamente en los pases orientales,

concretamente en la India, China y Japn. En la figura 1.2 se muestran datos econmicos del mercado

de grasas, aceites y ceras en los ltimos aos. Como puede observarse, el principal productor est

constituido por la Unin Europea, seguido de Estados Unidos y Canad. La demanda casi se ha

doblado en los ltimos 15 aos, siendo los productos de mayor consumo los obtenidos a partir de

materias primas de origen vegetal [MIELKE; DIXON; BASIRON & IBRAHIIM; MERGELL; OFIC94,

1994].

PRODUCCION MUND PRECIOS MEDIOS MUNDIALES


MalONES DE Th DOLARES / T~n
100 50

HL
80 400

60 300

40
Rl
20
en -~
,r,,i,r,,itr,~
1981> 1990 1991 1992 1993 1994 2000
200
100
-, 19871988198919901991 19921993 19942000
AO
FRSVIflO
(+) VALOR
PRINCIPALES PAISES ORIGEN DE PROCEDENCIA
PRODUCTORES
PLANTAS
HISPANOAMERICA 13% 58.3 7.
~XJU 24%

EUROPA 27%
CHINA 7%

amos 1
ANII~L4LES
TERRESTRES MARINOS
AFRICA 19% 33.3%
INDIA & PAKISTAN 9% 8.4%

Figura 1.2. Datos econmicos a nivel mundial para grasas, aceites y ceras.
8 Introduccin

Habida cuenta de lo anteriormente expuesto, en el presente trabajo de investigacidn se ha

llevado a cabo la obtencin, el anlisis y el modelado cintico para su posterior puesta en planta de

productos de sntesis que puedan sustituir o complementar la creciente demanda del mercado, sin dejar

de tener en cuenta el punto de vista econmico-industrial.

Los productos que se han estudiado pueden encuadrarse, por definicin, dentro del trmino

Ceras, ya que son steres constituidos por monocidos grasos y monoalcoholes grasos. La eleccin de

los diferentes steres se ha llevado a cabo en base a la longitud de la cadena tanto del cido como del

alcohol, y teniendo en cuenta la presencia de insaturacin en dichas cadenas. En la tabla 1.3 se hace

un resumen de las ceras que se van a estudiar a continuacin. Algunos de estos steres pueden

emplearse como compuestos anlogos a otros de origen natural, mientras otros, an siendo sus materias

primas de origen natural, son de origen sinttico. No obstante, en todos los casos el ster objeto de

estudio encuentra, diferentes tipos de aplicacin como producto de Qumica Fina dentro del sector

qumico industrial.

Tabla 1.2. Esteres objeto de estudio.

TIPO DE ACIDO ALCOHOL ESTER


CERA

OLEATO
PESO OLEICO OLEICO DE OLEILO
MOLECULAR
ALTO OLEICO CETILICO OLEATO
DE CETRO
MIRISTATO
PESO MIRISTICO MIRISTICO DE MIRISTILO
MOLECULAR
2-METIL-BUTIRATO
MEDIO 2-METIL-BUTIRICO OLEICO DE OLEILO

OLEATO
PESO OLEICO ISOPROPILICO DE ISOPROPILO
MOLECULAR
BAJO PALMITICO ISOPROPILICO DEPALMITATO
ISOPROPILO
Aceite de Jojoba 9

LI ACEITE DE JOJOBA

La jojoba (Simmondsia Chinensis Schneider) es una planta que crece en medio de un clima

desrtico, sobre los terrenos semiridos del suroeste de los Estados Unidos, Mjico, algunas zonas de

Latino Amrica, Israel, zona sur de Africa, otras regiones africanas y Australia.

Las industrias que demandan el aceite de jojoba, debido a sus caractersticas, son las industrias

de lubricantes, plsticos, cosmtica, farmacutica y alimentacin, principalmente. Este aceite de origen

natural presenta una serie de ventajas frente a los otros aceites del mismo tipo que lo hacen ser ms

codiciado por el sector industrial [AYERZA, 1993]. Las principales ventajas residen en que presenta

una composicin ms uniforme, es inodoro, contiene menor nmero y cantidad de impurezas, es capaz

de mantenerse en estado liquido despus de haber sido sulfatado y puede ampilarse su campo de

utilizacin empleando tcnicas de hidrogenacin para dar lugar a una cera dura y blanca. Debido a esto

el aceite de jojoba, tambin puede reemplazar a otro tipo de ceras de origen natural, como puede ser

el aceite de cachalote o esperma de ballena [BHATIA, 1990; SANCREZ, 1992; BUSSON, 1994].

El principal inconveniente que se presenta a la hora de la obtencin del aceite de jojoba reside

en el ciclo de reproduccin de la planta, que tiene una duracin mnima de cinco a seis aos, por lo

que son necesarios importantes desembolsos econmicos a medio y largo plazo. Hoy en da, se tiende

al estudio de las mejoras del cultivo, por lo que se ha propuesto el empleo de plantones artificiales,

a los que se llega a partir de plantas de crecimiento espontaneo mediante la tcnica de donacin. Estos

sistemas proporcionan una mayor resistencia frente a las condiciones medio-ambientales, as como un

mayor rendimiento en cuanto a la produccin de semillas y a su contenido en aceite.

Las principales lneas de investigacin y desarrollo del aceite de jojoba se llevan a cabo en los

campos de la cosmtica, lubricacin y farmacia [WISNIAK, 1988].


10 Introduccin

1.1.1 OBTENCION DEL ACEITE DE JOJOBA.

El mtodo convencionalmente empleado para la obtencin del aceite de jojoba es el prensado

hidrulico, que permite la separacin del aceite procedente de las semillas. Este mtodo da lugar a una

prdida de rendimiento debido a que, junto con el residuo de las semillas, queda una apreciable

cantidad residual de aceite; esto hace que la tcnica de prensado hidrulico presente una baja eficacia.

Con el fin de subsanar este tipo de deficiencias, se someti el residuo del prensado, en un principio,

a un sistema de extraccin con disolventes, basado en la tcnica convencional de la extraccin del

petrleo, pero utilizando como disolvente dixido de carbono disuelto en sulfuro de carbono. Debido

a la baja eficacia que proporcionaba la extraccin con este tipo de disolvente [FRIEDRICH, 1998], el

proceso se desestim por su inviabilidad econmica.

Actualmente, la tcnica ms empleada es la extraccin directa con disolventes. Como las

variables crticas a controlar son la naturaleza del disolvente (por su influencia directa sobre el

rendimiento y la eficacia de la operacin) y la calidad del producto, fue objeto de estudio el empleo

de diferentes tipos de disolventes de origen orgnico, tales como el tetracloruro de carbono, benceno,

hexano, heptano, alcohol isoproplico y tetracloroetileno. La conclusin a la que se lleg fue que el ms

efectivo era el alcohol isoproplico, pero, por cuestiones de tipo econmico, se adopt como disolvente

el hexano, y, en algunos casos, la mezcla hexano-heptano.

Para conseguir un aprovechamiento integral de la semilla, una vez que se ha logrado extraer

al mximo el aceite, se procede al aprovechamiento del residuo. Este residuo contiene,

aproximadamente, un 32 % de masa proteica, que puede procesarse para producir comida para animales

domsticos. Para llevar esto a cabo, es necesario proceder a la eliminacin del grupo ciano de uno de

los componentes que integran el residuo: Simmondsin (2-cianometiln-3-hidroxi-4,5-

dimetoxiciclohexil-D-glucxido) [ELLIGER, 1975].


Aceite de Jojoba II

1.1.2 CARACTERSTICAS Y COMPOSICION DEL ACEITE DE JOJOBA.

Segn sea la procedencia y el origen de la plantaen cuestin, se obtedrn semillas de diferente

composicin, que segn su contenido en cera pueden clasificarse en dos grupos:

(a) Semillas de elevado contenido en ceras, cuya composicin mxima en steres es del 58.6 %

y su contenido proteico del 28.5 %.

(b) Semillas de bajo contenido en ceras, cuya composicin mnima es del 43.2 % y su contenido

proteico del 30.7 %.

Las caractersticas organolpticas del aceite de jojoba vienen definidas por su color amarillo

oscuro o mbar, por su olor ligeramente graso y por su apariencia clara o ligeramente turbia. En cuanto

a las caractersticas fsico-qumicas, las analogas entre el aceite de jojoba y el aceite de cachalote

vienen detalladas por el peso especifico y el Indice de refraccin de ambos, mientras que las diferencias

ms marcadas vienen dadas por el punto de fusin y el ndice de viscosidad. No obstante, las

caractersticas de ambos son bastante parecidas [ROEHR, 1910; MALINS, 1970; BAILEY, 1952;

BUSSON,1994]. En la tabla 1.3 se detallan las caractersticas del aceite de Jojoba.

Tabla 1.3. Caractersticas del aceite de jojoba.

I PURO REFINADO

COLOR amarillo-mbar incoloro


OLOR graso inodoro
APARIENCIA clara-turbia clara
INDICE REFRACCION (250C) 1.465 1.465
PESO ESPECIFICO (250C) 0.863 0.863
PUNTO FUSION (0C) 6.8-7.0 6.8-7.0
PUNTO EBULLICION (4C) 398 398
VISCOSIDAD, 250C, (es) 58-60 58-60
12 Introduccin

En cuanto a los anlisis realizados para la determinacin de la composicin, los resultados

revelan que los principales alcoholes predominantes que integran el aceite de jojoba son el 13-

Docosenol y el 1 1-Eicosenol, mientras que las estructuras cidas predominantes son tas

correspondientes a los cidos t1-Eicosenoico, 13-Docosenoico y 9-Octadecenoico (ver tabla 1.4).

Por tanto, las formulaciones que se ajustan a la composicin media de las estructuras, tanto

cidas como alcohlicas, que integran el aceite dejojoba, sontas siguientes [MIWA, 1971; STANSBY,

1981; BUSSON,1994]:

CH3 - (CH2)7 - CH = CH- (CH2)~ - COOH

CH3 - (CH2)7 - CH = CH - (CH4,, - CHQOH

Siendo n superior a 2 y m superior a 4.

Tabla 1.4. Estructuras cidas y alcohlicas del aceite de jojoba.

N
0 CARBONOS [ AODO ALCOHOL %

12 Dodecanoico Trazas
14 Tetradecanoico Tetradecanol 0.1

15 Pentadecanoico Trazas
16 Hexadecanoico Hexadecanol 0.1-1.2
17 Heptadecanoico Heptadecenol Trazas
Octadecanoico Octadecanol 0.2
18 9-Octadecenoico 9-Octadecenol 10.1
l-Octadecenoico 11-Octadecenol 0.7
19 Nonadecanoico Trazas

20 Eicosanoico Eicosanol 0.1


1 l-Eicosenoico 1 1-Ficosenol 71.3-43.8

21 12-Hencosenol Trazas

22 Docosanoico
1 3-Docosenoico Docosanol
1 3-Dococenol 0.2-1.0
13.6-44.9
Trazas
24 Tetracosanoico
IS-Tetracosenoico 15-Tetracosenol 1.3-8.9
Aceite de Jojoba 13

Por ltimo, hay que tener en cuenta la composicin del aceite de jojoba en cuanto a steres

[WISNIAK,19741975,1977]. que son los principales responsables de las caractersticas que presenta

este aceite. Los steres predominantes son todos de alto peso molecular. El principal ster integrante

del aceite de jojoba es el eicosenoato de docosenilo, seguido del eicosenoato de eicosenilo. En la tabla

1.5 se muestra la composicin del aceite de jojoba, teniendo en cuenta su contenido en steres.

Tabla 1.5. Contenido porcentual en steres del aceite de Jojoba.

N0 CARBONOS TIPO DE ESTER

Octadecanoato de eicosemlo 5.9


38
Eicosenato de octadecenilo 1.0
40 Eicosenato de eicosenilo 30.9
42 Docosenoato de eicosenilo 7.6
Eicosenaonato de tetracosenilo 6.2
44 Docosenoato de docosenilo 1.8
Tetracosenoato de eicosenilo 0.8
46 Docosenoato de tetracosenilo 0.9

1.1.3 APLICACIONES DEL ACEITE DE JOJOBA

Las aplicaciones del aceite de jojoba dependen directamente de sus propiedades fsicas, de su

composicin, de su comportamiento qumico y de sus caractersticas en general. Sus propiedades y

caractersticas pueden resuniirse de la manera siguiente:

1.- Presenta una elevada pureza y una estructura perfectamente definida y conocida.

2.- Debido a su elevada estabilidad, el aceite de jojoba presenta una gran resistencia frente a la

oxidacin y a las reacciones de pardeo, por lo que puede permanecer varios aos sin

enranciarse.
14 Introduccin

3.- Presenta un doble enlace tanto en las estructuras cidas como en las alcohlicas, por lo que

permanece en estado lquido a temperatura ambiente.

4.- Cumple las especificaciones exigidas por la industria de lubricantes, por lo que puede ser

utilizado como tal mediante un proceso de sulfuracin.

5.- Presenta un potencial estimable para ser sometido a reacciones de hidrogenacin y

polimerizacin.

Por todas estas razones, sus aplicaciones son las que se indican a continuacin:

Lubricante.

La elevada viscosidad del producto, unido a otra serie de caractersticas, tales como su baja

presin, la ausencia de componentes voltiles, as como un punto de solidificacin suficientemente bajo

para permanecer en estado lquido a la temperatura de trabajo, dan lugar a que los steres de alto peso

molecular posean unas excelentes propiedades para ser utilizados como lubricantes o como aditivos de

estos para elevar su viscosidad [ELGIVED,1988].

Debido a su elevada estabilidad y su escasa tendencia a oxidarse [BEANE,1987], puede

utilizarse en sistemas que operan bajo condiciones extremas de presin. Al no variar apreciablemente

la viscosidad del aceite con la temperatura, su campo de utilizacin aumenta, pudiendo utilizarse como

lubricante de frenos, armas y maquinarias que operan a elevada velocidad y temperatura. En su empleo

como lubricante, el aceite de jojoba presenta una serie de ventajas frente al aceite de cachalote, como

son su olor ms suave, la ausencia de glicridos y el no necesitar un refino previo para su utilizacin,

entre otras.

El principal inconveniente que se presenta a la hora de su utilizacin como lubricante, en

comparacin con los aceites minerales, es su bajo ndice de acidez; esto puede subsanarse mediante
Aceite de Jojoba 15

un proceso de sulfuracin parcial [BHATHIA,1990], obtenindose as unas condiciones ms ptimas

e, incluso, un aumento de la viscosidad.

Farmacia.

Debido a su naturaleza crea, el aceite de jojoba resulta una sustancia no digerible para la

mayora de los animales. Esto le confiere propiedades para ser utilizado como soporte de productos

farmacuticos. La tcnica empleada consiste en incorporarlo a principios activos que atraviesan el

estmago y no son liberados hasta que se encuentran en el intestino ~H1NDS,1950]. Tambin puede

emplearse como soporte de varias fonnas de vitamina A, ya que inhibe la hidrlisis de esta; y para la

preparacin de productos que previenen y curan el acn, por su actividad reductora de las sereciones

excesivas de las glndulas sebceas.

Encuentra aplicacin como emulgente, para dar soporte y textura adecuada a productos de

aplicacin externa. Su elevado contenido en steres de alto peso molecular, le confiere, adems,

propiedades ptimas para ser utilizado como purgante [GUNSTONE,1986].

El aceite de jojoba tambin se emplea como agente protector y estabiizante de compuestos de

la penicilina, como inhibidor del crecimient de los bacilos de la tuberculosis, como sustituto del aceite

de ricino en sus funciones dietticas y como componente fundamental en la preparacin de linimentos,

ungtientos, blsamos y lociones capilares [MIROV,1952].

Cosmtica.

La industria de la cosmtica es la que ms se sirve del aceite de jojoba para producir una

mayor variedad de productos. As, en forma de emulsin, constituye la fase discontinua y activa de los

agentes corporales de proteccin, a la vez que puede servir para ajustar la viscosidad de las cremas y

lociones [AVIDON, 1994].


16 Introduccin

Su condicin crea, le permite actuar como estructura y soporte de los aceites lquidos que se

incluyen en las barras de labios y blsamos. La cantidad y composicin de las ceras utilizadas en este

tipo de productos sirve para controlar su dureza, brillo, punto de fusin y facilidad de aplicacin. Por

ello, en la preparacin de maquillajes puede utilizarse, junto con otras ceras, para producir una fina

pelcula sobre la piel [MASAYUKJ,1976];permitiendo laposterior adherencia del cosmtico, as como

una mayor facilidad a la hora del desmaquillado.

Tambin es empleado en la produccin de champes, suavizantes, geles de bao, jabones,

espumas de afeitar y todo tipo de cremas y aceites protectores, solares, hidratantes, para pieles

delicadas y para nios [MASAYIJKJ,1980; MAGDASSI,1990].

Alimentacin.

El aceite de jojoba, debido a la estructura de sus componentes, puede utilizarse dentro del

campo de la alimentacin [MORI, 1964] para cocinar, como aceite crudo bajo en caloras y en la

preparacin de margarinas y mantecas mediante una hidrogenacin parcial previa. Por tanto, su

aplicacin en alimentacin est orientada hacia la diettica.

Otras aplicaciones.

En general, el resto de las aplicaciones se consiguen mediante la modificacin qumica del

aceite de jojoba. Dichas modificaciones se llevan a cabo empleando el aceite como materia prima en

reacciones de adicin de los dobles enlaces que presenta en su composicin, o bien, sometindolo a

procesos de polimerizacin, segn vaya a ser su aplicacin final.

El producto sulfurado, se emplea como lubricante de mquinas que trabajan a presiones

extremas, mientras que cuando se presenta sulfatado encuentra aplicacin en la industria textil

[GISSER,1975].
Aceite de Jojoba 17

Cuando el aceite de jojoba se somete a un proceso de polimerizacin [MIROV,1952], se

obtienen gomas que se diferencian de otros polmeros de origen vegetal, por ser los primeros solubles

en disolventes tales como el benzol y la gasolina. Estos productos se emplean en la fabricacin de

chicles, adhesivos, barnices y tintas [PAISLEY,1961]. El aceite de jojoba puede incorporarse a una

mezcla de polimerizacin para la obtencin de plsticos primarios, tales como el DOP o TCP [FORE,

1958], pero en una concentracin no superior al 5%, por ser incompatible con los polmeros de vinilo.

Esta propiedad es debida a las insaturaciones que se presentan en su estructura, que pueden ser atacadas

con acido actico, dando lugar a un producto nico por oxidacin.

Para la hidrogenacin del aceite de jojoba, se emplean catalizadores de Ni-Cu, sometindolo

a temperaturas y presiones suaves. Mediante este proceso, se llega a la obtencin de una cera cristalina

y dura de color blanco, cuyo punto de fusin es de 700C, y que se emplea para la fabricacin de ceras,
papel carbn, en el encerado de frutas y para impregnar recipientes de cartn resistentes al calor

[KUBLE,1960]. Tambin es empleado para la fabricacin de velas con las que se pretende conseguir

una llama brillante, poco humo y gran duracin. Esta cera hidrogenada, tambin, se utiliza como

aditivo en la preparacin de lubricantes cuya aplicacin est destinada a maquinarias constituidas por

metales maleables, tales como el cobre, magnesio y aluminio.

Los derivados bromados pueden obtenerse atacando la cera con N-Bromosuccinimida (NB8)

en medio orgnico (CI


4C), dando lugar a un producto de mayor densidad que puede emplearse para

la fabricacin de materiales ignfugos; mientras que si partimos de derivados altamente bromados,

podemos conseguir sustancias polisaturadas, mediante la eliminacin de cido bromhdrico [SHANI,

1988], que se emplean para la preparacin de pinturas de secado rpido.

En este trabajo, el estudio est orientado hacia la obtencin de un compuesto sinttico anlogo

al aceite de jojoba: Oleato de odio que, por sus caractersticas, puede reemplazar a dicho aceite.
18 Introduccin

1.2 ACEITE DE CACHALOTE

El Aceite de cachalote, tambin denominado Esperma de Ballena o Spermaceti, es una cera rica

en steres de alto peso molecular obtenida principalmente de la cavidad craneal del cachalote, cuyo

campo de aplicacin se extiende a las industrias farmacutica, de lubricantes, de plsticos, papelera,

cosmtica y alimentaria.

La persecucin y captura de las ballenas para ser utilizadas como alimento, por su aceite para

otros usos humanos (huesos, cosmtica y farmacologa) se practica por lo menos desde hace 1000 aos.

Comoindustria se cree que naci entono a 1550, en Inglaterra, Rusia, Dinamarca, Noruega y Holanda,

a] descubrirse la g?an proliferacin de grandes cetceos en las aguas del norte y noroeste de Europa.

De la misma manera se comenz, a principios del siglo XVII, la caza costera en Norteamerica. La

desaparicin de las ballenas de las reas costeras oblig a la pesca de altura, apareciendo los barcos

balleneros. La historia de la caza de ballenas viene determinada por el criterio de la explotacin rpida

de los stocks ms rentables (generalmente los ms abundantes), por lo cual en cada momento, el inters

se centraba en algunas especies de ballena, no ms de tres, que eran sustituidas en funcin del inters

comercial, una vez que haban sido reducidas a niveles infracomerciales.

Esto explica que tras la drstica reduccin de las ballenas Vasca, Franca y Gris antes de finales

del siglo XIX, el objetivo de la caza fuera la Yubarta hasta alrededor de 1915. Posteriormente, fue la

ballena A zul la especie ms perseguida, que al final de los aos 30 se encontraba en peligro de

extincin (se estima que se capturaron unas 320.000). Se emprendi entonces la caza del Rorcual

comn hasta el comienzo de los 60, y desde entonces Rorcual borea4 Rorcual de Bryde y

posteriormente el Cachalote han constituido las ltimas posibilidades para la caza de grandes cetceos.

En la Figura 1.3 se reflejan los volmenes anuales de captura de las ballenas con inters comercial a

los largo del presente siglo.


Aceite de Cachalote 19

Figura 1.3. Volmenes anuales de la caza de ballenas.

Para intentar controlar y racionalizar el nmero de capturas de ballenas se creo en Washington

en 1946 la Comisin Ballenera Internacional (C.B.I.), la cual firmaba el da 2 de diciembre de ese

mismo ao el convenio internacional para la regulacin de la pesca ballenera. La comisin ha tratado

de reducir la captura de ballenas con escaso xito. En lo referente a los cachalotes, a partir de la

temporada pelgica de 1981/1982 se prohibi su captura excepto en el stock dc la Divisin Oeste de

Pacifico Septentrional [CONVENIO,1988].

Entre los das 10-14 de mayo de 1993 en Kioto, Japn, se celebr la asamblea anual de la CBI.

Delegados de treinta y seis pases decidieron sobre la conveniencia de reanudar la caza comercial de

la ballena. Los pases interesados en atenuar la moratoria eran, principalmente, Noruega y Japn,

quienes argumentaban tradiciones culturales y el uso licito de sus recursos naturales. El grupo opuesto

lo encabezaban Francia, Oran Bretaa, Estados Unidos, Australia, Nueva Zelanda y Espaa, quienes
20 Introduccin

mantenan la propuesta de mantener la moratoria sobre la caza comercial de la ballena, as como la

creacin de un santuario en la Antrtida. Afortunadamente, la resolucin de la CBI estuvo a favor de

estos ltimos, por lo que en la actualidad slo se admiten capturas para fines cientficos y para

necesidades de poblaciones aborgenes.

Actualmente, el aceite de cachalote est considerado como una cera muy apreciada por la

industria qumica, al estar compuestos por esteres de alto peso molecular, y aunque su actividad

comercia] contina por medio de los pases que siguen cazando ballenas (Japn, Noruega e Islandia),

el acuerdo del resto de pases de no cazarlas, ha reducido en gran medida su produccin,

mantenindose la pujanza de la demanda.

Debido a esto; se han desarrollado una serie de lineas de investigacin dirigidas hacia la

obtencin de nuevas frentes y procedimientos alternativos para conseguir grasa y ceras de con

propiedades fsicas y qumicas anlogas a las del aceite de cachalote [WOOD,1976].

Esta situacin induce a una bsqueda alternativa de grasas y ceras anlogas a las usadas hasta

ahora. La obtencin de steres sintticos de alto peso molecular por va cataltica, empleando tanto

catalizadores clsicos (inorgnicos), como enzimticos, es fundamentalmente la lnea que se sigue en

la actualidad. En este trabajo, la alternativa objeto de estudio es el Oleato de cetilo.

1.2.1 OBTENCION DEL ACEITE DE CACHALOTE

El Aceite de cachalote se obtiene en general de la grasa de los cetceos, siendo la procedente

de la cavidad craneal del cachalote la ms rica en este producto. El procedimiento ms comnmente

extendido para su obtencin es el que utiliza la tcnica de enfriamiento. La mezcla de todas las grasas

reunidas de la ballena se deja enfriar y reposar progregvamente de forma que se van solidificando poco
Aceite de Cachalote 21

a poco los diferentes componentes. De esta manera se obtienen varias fracciones de grasas y ceras

agrupadas por intervalos de puntos de fusin.

Por otro lado, para aprovechar el aceite remanente en el animal, este es prensado, obtenindose

una mezcla de agua y grasas de la que se separan las ltimas por centrifugacin, obtenindose el

llamado aceite de segunda presin. Una vez recogidas todas las fracciones se procede al proceso de

clarificacin, que se realiza lavando cada una de ellas con agua caliente, de forma que sta arrastra las

impurezas que contienen. La posterior separacin de ambas fases se produce por centrifugacin.

Las refineras clasifican los aceites de ballena obtenidos por el procedimiento anterior en cuatro

fracciones cuyos intervalos de fusin y rendimientos aproximadosrespecto del total de grasas obtenida

se reflejan en la tabla 1.6.

Tabla 1.6. Fracciones obtendas del aceite de cachalote.

FRACCION DE ACEITE ]_RENDIMIENTO_J__LIMITE DE SEPARACION

ACEITE DE INVIERNO 75 % SOLIDIFICA A 30C


ACEITE DE PRIMAVERA 9 % SOLIDIFICA ENTRE 10-15.50C
ACEITE DE SEGUNDA PRESION 5 % FUNDE ENTRE 32-350C
ESPERMACETI CRUDO 11 % FUNDE A PARTIR DE 43-460C

Finalmente, el espermaceti y el resto de los aceites se almacenan y envasan en lugares y

recipientes secos, hasta su utilizacin o distribucin.

1.2.2 CARACTERISTICAS Y COMPOSICION DEL ACEITE DE CACHALOTE

El aceite de cachalote es un slido cristalino a temperatura ambiente, de color blanco brillante.

Las especiales propiedades fsicas de esta cera estn relacionados con su elevado contenido en steres
22 Introduccin

de alto peso molecular, 76 % y su relativamente bajo contenido en triglicridos 23 % [MORI. 1964]

en comparacin con otros aceites de animales marinos. En la tabla 1.7 se muestran caractersticas

fsico-qumicas del aceite de cachalote comercial [WISNIAK,1977; BAYLEY, 1952; OIL SOAP,

1942; STANSBY, 1967].

Tabla 1.7. CaracterstIcas del aceite de cachalote.

COLOR Blanco cristalino


OLOR A pescado

APARIENCIA Crea
PESO ESPECIFICO, (25 0C) 0.905-0.96
1.470-1.477

41-49
121-135
INDICE DE YODO 2.6-3.8

INDICE DE ACETILO 2.6

MATERIA SAPONIFICABLE (%) 52

La hidrlisis de los triglicridos que constituyen el aceite de cachalote, realizada para las

especies que proceden del Artico y Antrtico, dio como resultado una composicin en cidos grasos

que no era exactamente igual para ambas, aunque puede considerase cualitativamente semejante

[MORI,1964]. Los cidos grasos obtenidos eran todos de un nmero par de tomos de carbono, entre

14 y 22, fundamentalmente monoinsaturados, con claro predominio del cido cis-9-octadecenoico, cido

oleico, seguido de los cidos 9-bexadecenoico y 1 1-cicosenoico. A continuacin se muestra, en la tabla

1.8 los principales cidos grasos componentes del aceite de cachalote segn la distinta procedencia de

la captura. La diferencia en la composicin de cidos grasos en esta especie de ballenas procedentes

de dos zonas diferentes se debe tanto a las variaciones estacionales como a la localizacin geogrfica

en la que habitan [STANSBY,1981]. Ambos factores, sin embargo, estn subordinados a otro ms

determinante: la naturaleza de la dieta alimenticia.


Aceite de Cachalote 23

Tabla 1.8. Variacin de los cidos grasos componentes del aceite de cachalote segn la zona de
pmcedencia de la captura.

ACIDO BALLENA ANTARTICA (%) BALLENA ARTICA (%)

14:0 8.3 7.4


16:0 11.9 10.4
18:0 1.1 1.0
16:1 18.0 15.9
18:1 32.8 27.7
20:1 11 16.6
22:1 3.8 8.6
18:2 0.1 0.7

Por otro lado, la hidrlisis completa de la fraccin de steres del aceite de cachalote produce

cidos y alcoholes orgnicos de cadena comprendida entre 10 y 20 tomos de carbono, con predominio

de los que contienen un nmero par de los mismos. Los cidos grasos ms frecuentes en estos steres

son el cido cis-9-octadecenico y el 9-hexanodecenico, y los alcoholes ms usuales el 9-octadecenol

y el 1-hexadecanol (alcohol cetlico). En la tabla 1.9, se relacionan los cidos y alcoholes obtenidos

por hidrlisis de los steres contenidos en dicho aceite [NEVENZEL, 19701.

En cuanto a la estructura de los triglicrdos puede decirse que es compleja y que para

determinara se han realizado varios estudios con el fin de conocer la distribucin de cidos grasos. De

dichos trabajos se concluye que en los mamferos marinos, los cidos poliinsaturados abundan las

posiciones 1 y 3 [BROCKERHOFF, 1968] a diferencia de la estructura de los triglicridos contenidos

en aceites de pescado donde los cidos polilusaturados ocupan la posicin 2; los saturados la posicin

1 y los monoinsaturados las posiciones 1 y 3 [BROCKERHOFF, 1968; LITCHFIELD, 1972; MALINS,

19701.
24 Introduccin

Tabla 1.9. Relacin de cidos y alcoholes de esteres contenidos en el espermaceti.

HOMOLOGO ALCOHOL (%) ACIDO (%)1

10:0 0.9
12:0 0.2 5.5
12:1 0.6

14:0 9.9 10.7


14:1 0.7 7.4
15:0 1.5 0.2
16:0 27.2 4.5
16:1 10.1 21.4
17:0 1.0 0.2
17:1 1.1
18:0 2.8 1.3

18:1 38.6 35.0


20:1 6.9 9.2

En la tabla 1.10 se detalla la distribucin de cidos grasos (sin diferenciar los diferentes

ismeros de cada uno) en los triglicridos de la grasa de uno de los cetceos tpicos, el rorcual boreal

[BROCKERHOFF~ 1968]. Los cidos grasos monoetilnicos ms frecuentes son, por lo tanto, el cido

9-hexadecenoico (cido palmitoleico), el cido cis~9-octadecenoico (cido oleico) y su ismero, el cido

cis-1 1-octadecenoico (cido vacnico).

La existencia de unas cantidades apreciables de cidos grasos poiinsaturados es una de las

caractersticas de las grasas de los animales marinos. El cido 4,7,10,13,16,19-docosahexaenoico est

relacionado aparentemente con el sistema nervioso de los vertebrados [CRAWFORD, 1974; LENAR,

1978]. Esto explica la presencia de este cido graso en el aceite de cachalote, que procede de la

cavidad craneal del cachalote.


Aceite de Cachalote 25

Tabla 1.10. Porcentaje en moles de cidos grasos en los triglicridos de la grasa del mrcual boreal.

ACIDO GRASO POSICION 1 (%) POSICION 2 (%) POSICION 3 (%)

14:0 3 12 4
16:0 13 6 6

16:1 3 12 2

18:0 4 1 2

18:1 14 29 7
18:2 1 5 1

18:4 1 4 1

20:1 33 10 28

20:4 5 6 3
20:5 3 5 6

22:1 10 2 16

22:5 1 1 3

22:6 6 3 16

Otms 3 4 2

Referente a este tipo de cidos, recientes trabajos han sugerido que la asociacin de cidos

grasos de cadena larga y altamente insaturados, especialmente los cidos pentaeicosanico y

docosohexenico, son beneficiosos para el tratamiento de la arteriosclerosis. [DYERBERG, 1978;

BARLOW, 1980].

Respecto a la estructura de los steres, la mayora son insaturados y monoinsaturados, debido

al predominio en la composicin de los alcoholes del 1-hexadecanol, el cual tiende a esterificarse

principalmente con el cido hexadecanoico (cido palmtico), produciendo hexadecanoato de hexadecilo

(palmitato de cetilo), que es el ester predominante en el aceite de cachalote, y en segundo lugar con

los cidos cis-9-octadecenoico y 9-hexadecenoico (cido oleico y cido palmitoleico), para producir

octadecenoato de hexadecio (oleato de cetilo) y hexadecenoato de hexadecio Walmitoleato de cetilo)


26 Introduccin

[NEVENZEL, 1970]. La abundancia de steres saturados y monosaturados explica que el aceite de

cachalote tenga un punto de fusin tan relativamente elevado, permaneciendo en estado slido a

temperatura ambiente.

1.2.3 APLICACIONES DEL ACEITE DE CACHALOTE Y SUS DERIVADOS

Las posibles aplicaciones del aceite de cachalote vienen determinadas por sus propiedades

fsicas, comportamiento qumico por ambos conjuntamente. Debido a la analoga existente entre el

aceite de cachalote y el aceite dejojoba, van a tener varias aplicaciones en comn. Los principales usos

a los que se destina el espermaceti se indican a continuacin.

Lubricantes.

La elevada viscosidad del producto, unido a otra serie de caractersticas, como son su baja

presin de vapor, la ausencia de componentes voltiles as como un producto de solidificacin

suficientemente bajo para estar en estado lquido a la temperatura de trabajo, conceden a los steres

de alto peso molecular (PCT WO 86/00300) y especialmente al aceite de cachalote unas excelentes

propiedades lubricantes en su uso tanto como lubricante base como aditivo de stos para aumentar su

viscosidad [EIGTVED, 1988]. Al igual que el aceite dejojoba, su alta estabilidad y su escasa tendencia

a oxidarse le confieren caractersticas ptimas para emplearse en sistemas que operan bajo condiciones

extremas, especialmente de presin, ya que estas caractersticas son las buscadas en este tipo de

aplicaciones [BEANE, 19871.

Cosmtica.

La industria cosmtica es la que ms se sirve del espermaceti para preparar una mayor variedad

de productos [DORGAN, 1983]. En forma de emulsin, constituyendo la fase discontinua acta como

agente corporal de proteccin, a la vez que puede servir para ajustar la viscosidad de cremas y lociones.
Aceite de Cachalote 27

En estado slido sirve la estructura y soporte para los aceites liquidos que se incluyen en las

barras de labios y blsamos. La cantidad y composicin de las ceras usadas en estos productos sirve

para controlar su dureza (evitando as su deterioro), brillo, punto de fusin y facilidad de aplicacin.

Tambin en maquillajes se emplean espermaceti y otras ceras como base para producir una fina pelcula

sobre la piel que permita la posterior adherencia de polvos de colorete.

Farmacia.

Al igual que en el caso del aceite de jojoba, esta cera no es digerible por la mayora de los

animales y, por tanto, se emplea para incorporar principios activos que no deben ser liberados hasta

su llegada al intestino [JIS. Patent, 1949].

Encuentra tambin aplicacin como emoliente y, al igual que en cosmtica, para dar el soporte

y la textura adecuada a productos de aplicacin externa.

Alimentacin.

Para obtener un producto de estabilidad oxidativa adecuada para uso en la alimentacin, el

aceite de cachalote se hidrogena parcialmente el uso de catalizadores metlicos tipo Ni-Cu a presin

relativamente reducida. De esta forma s utiliza en la produccin de margarinas y mantecas

[GUNSTONE, 1986].

Otras aplicaciones.

La grasa hidrogenada, debido al aumento de la dureza, resistencia y punto de fusin, se emplea

en la fabricacin de jabones, pinturas y barnices, tintas, protectores antihumedad, plastificantes de

superficie de papel y cartn, as como en el tratamiento de pieles [SWERN, 1979].


28 Introduccin

1.3 MIRISTATO DE MIRISTILO

El Miristato de miristilo es un ster de origen sinttico, que se encuentra en la naturaleza en

proporciones muy pequeas, en algunos aceites, ceras y grasas; y cuyo campo de aplicacin est

prcticamente limitado a la industria cosmtica y de perfumera [GUNSTONE, 1982].

Los aceites naturales a partir de los cuales se obtienen las materias primas constituyentes de

dicho ster son, bsicamente, las denominadas Grasas mirisricceas o Grasas miristceas. Este tipo

de grasas se caracterizan por ser muy ricas en gcido mirstico y cido lurico, predominando en su

composicin el primero. Casi todas ellas son slidas, incluso en verano, debido al elevado punto de

fusin que les confiere, precisamente, su contenido en cido miristico; mientras que el contenido de

cidos grasos inferiores suele ser exiguo. El Indice de iodo es variable, generalmente bajo, dependiendo

de la procedencia del aceite de partida. Entre las grasas de mayor contenido en cido nrstico se

destacan las siguientes: manteca de nuez moscada, grasa de mangalore, aceite de macias, manteca de

Kombo, grasa de otoba, sebo de virola, aceite de nueces de California, y grasa de ucuhuba

[MANGRANE,1944].

La manteca de nuez moscada, es una grasa que est contenida en una proporcin alrededor del

25-35% en las semillas de Myr(srica officinales, Myr(stica moscata, Myr(stica ftagans, Myrstica

argentea y Myrstica omento&a, plantas que se encuentran en la mayora de los pases tropicales. La

grasa tiene una consistencia parecida a la del sebo, un olor fuerte, sabor a nueces y presenta un color

que puede ser ms o menos rojizo, dependiendo de la planta de partida.

La grasa de mangalore se obtiene mediante extraccin a partir de las semillas de Myrstica

canaria, y presenta un aspecto similar a la de nuez moscada, pero contieneun mayor nmero de cidos

voltiles, por lo que presenta una menor consistencia.


Miristato de Miristilo 29

El aceite de maGias se obtiene a partir de algunas plantas que crecen en Bombay, Penang.

Macasar y Zanzbar. Es un aceite semilquido a temperatura ambiente, presenta un color amarillo ms

o menos oscuro y tiene un olor que recuerda al vegetal de partida.

La manteca de kombo procede de la planta Myrstica kombo, que crece en algunas regiones

del Congo y Gabn. Presenta un aspecto similar al del aceite de macias, pero se utiliza menos, debido

a la limitacin de su produccin.

La grasa de otolia se extrae de las semillas de Myrstica oroba, tambin llamada nuez moscada

de Santa Fe, que crece en algunas zonas de Nueva Granada. Es de color amarillo plido, de

consistencia semejante a la del sebo y olor a nuez moscada. Durante su conservacin se oscurece y se

enrancia. Sus caractersticas dependen del contenido de insaponitcables, que puede llegar hasta el 25%.

El sebo de vimia se extrae de las semillas de Myrstica sebifera, Virola micheli, Virola sebQera

y Virola venezuelensis, plantas tpicas de las Guayanas, Guatemala, islas Carolinas, etc., que contienen

alrededor de un 40-50% de grasa. El sebo de virola presenta la consistencia del sebo de buey, pudiendo

observarse la formacin de pequeos cristales. Es amarillento, ms o menos rojizo y tiene un olor

semejante al de la nuez moscada y se enracia rpidamente.

La Grasa de ucuhuba se extrae de las semillas de la planta Myrstica becuhyba, tpica de brasil

y que contiene alrededor de un 60% de una grasa semejante a la manteca de nuez moscada, pero

presenta un olor muy desagradable y un sabor cido.

Existen otras grasas miristceas como el aceite de nueces de california, obtenido a partir del

fruto de la planta Tumion calfornicum, que contiene cantidades variables de un aceite no secante; La

grasa de las semillas de Irya de Ceiln y la India, que presenta caractersticas semejantes a la manteca
30 Introduccin

de nuez moscada; la manteca de ochoco, que se extrae de las semillas de Seyphocephaiium oc/zoca,

de las costas de Africa occidental, y que contiene un 60-70% de una grasa formada, casi

exclusivamente, por trimiristina. Tambin hay que tener en cuenta otras plantas, a partir de las cuales

se pueden obtener compuestos, mayoritariamente constituidos por cadenas de estructura mirstica, como

son el aceite de nuez de suri y las grasas de mirica y otras plantas originarias de Mrica y Amrica del

sur.

1.3.1 ORTENCION DEL MIRISTATO DE MIRISTILO

La obtencin del miristato de miristilo se lleva a cabo principalmente mediante reacciones de

esterificacin directa entre el cido mirstico y el alcohol mirstico [MILLER,1988], para lo cual se

pueden emplear los mtodos de sntesis de steres que se detallan en el punto 1.7 de este captulo.

Generalmente el mtodo ms empleado es el de esterificacin cataltica, donde el tipo de catalizador

empleado juega un importante papel.

A partir de las grasas y aceites anteriormente descritas, se obtienen las materias primas para

dicha reaccin de esterificacin. En ocasiones, cuando no se requiere una estricta pureza del producto

final, se puede someter la grasa cruda a una reacin de esterificacin, con lo que se llega a obtener

una mezcla de steres de diferentes naturalezas, segn sean los componentes de la materia prima de

partida [PRYDE,1979].

La obtencin de la grasa se lleva a cabo, bsicamente, como se indica en el esquema de la

figura 1.1. De esta manera, para la extraccin de la manteca de nuez moscada se emplean las nueces

picadas o atacadas por insectos. Se tuestan, se pulverizan y se someten a prensado hidrulico. En el

caso del sebo de virola, la extraccin se lleva a cabo machacando las semillas e hirvindolas en agua

durante horas, dejando decantar posteriormente la grasa. La extraccin a partir del resto de las semillas
Miristato de Miristilo 31

mencionadas anteriormente, en general se lleva a cabo sometiendo a presin las semillas tostadas y

pulverizadas.

1.3.2 CARACTERISTICAS Y COMPOSICION DE LAS GRASAS DE MIRISTACEAS

En general, los aceites, grasas y ceras de las miristceas suelen ser slidas a temperatura

ambiente, debido principalmente a su composicin. Sus propiedades fsico-qumicas dependen

fundamentalmente de su composicin, y estas, a su vez, dependen del terreno y la climatologa donde

crece y se desarrolla la planta. En la tabla 1.11 se relacionan los puntos de fusin, ndices de

refraccin, ndices de iodo e ndices de saponificacin de las grasas de las miristceas ms relevantes.

Tabla 1.11. Propiedades de las grasas de las miristceas.

GRASA CERA PUNTO DE INDICE DE INDICE DE INDICE

ACEITE FUSION (0C) REFEACCION SAPONIFICACION DE lODO

Nuez moscada 39-42 1.466-1.471 173-200 31-60


Mangalore 215
Macias 25-32 1.001-5.121 169-192 50-81
Otoba 35-40 1.470 165-200 20-54
Virola 54-55 - 219-221 10-35
Nueces California 17-20 - 190-195 95
Ucuhuba 32-34 - 235-240 9-36
achoco 45-48 - 235-240 1-4

En cuanto a la composicin de los aceites extrados a partir de las diferentes plantas, puede

decirse que presentan composiciones muy variables. Aunque el componente mayoritario, referido a

cidos, suele ser el cido mirstico, en la mayora de los casos va acompaado cidos superiores, tales

como el cido palmtico y el cido oleico. En otros casos, adems va acompaado por cidos inferiores,

principalmente el cido lurico. En la tabla 1.12 se presenta la composicin, referida a cidos grasos,
32 Introduccin

de los aceites, grasas y ceras extradas a partir de las principales fuentes plantas miristaceas productoras

del cido mirstico [HOEKENOOGEN,1941].

Tabla 1.12. Composicin de las principales miristceas.

FUENTE ~ C12 C14 C16 C18:1 C1S:2


Salvadora 6-7 4748 28-30 - 11-12 1-2
Laurel 2-3 20-22 1-2 60-65 12-15
Mirica - - 60-63 35-38 1-2
Nuez moscada - 1-2 60-78 9-11 8-12 1-2
Dika - 18-40 50-75 - 8-12 -

Virola - 20-22 70-75 0-1 5-10 -

1.13 USOS Y APLICACIONES DE LAS MIRISTACEAS Y SUS DERIVADOS

Como se ha mencionado anteriormente, el empleo de este tipo de grasas, aceites y ceras, tiene

lugar principalmente dentro del campo de la cosmtica y de la perfumera. As se utilizan como soporte

de algunos perfumes, para diluirlos, o en la preparacin de cosmticos a base de aceites esenciales,

donde dichos componentes grasos actan como materiainerte para dar consistencia a dichos preparados

[OUENTHIER,1955].

En cuanto al miristato de miristilo, puede decirse que est dentro de un grupo de steres que

poseen excelentes propiedades grasas para su aplicacin en la industria cosmtica. Dichas propiedades

se aprovechan para incluirlo dentro de la fabricacin de cremas, lociones y todo tipo de emulsiones.

Es especialmente vlido como componente fundamental en la composicin de emulsiones agua/aceite.

La composicin crtica de dichas formulaciones, hace que sean especialmente inestables, por lo que

la naturaleza de los componentes empleados juega un papel importante en la obtencin del producto

final [PRYDE, 1979j.


2-Med-Butirato de Oleilo 33

1.4 2-METIL-BUTIRATO DE OLEILO

El 2-Metil-Butirato de oleilo es un ster de origen sinttico que, en raras ocasiones, puede

encontrarse en la naturaleza como tal. Slo se encuentra en la naturaleza formando parte, en pequeas

cantidades, de las fracciones ms voltiles del aceite de caf, en el aceite de las races de anglica y

en unos pocos aceites esenciales ms [BAILEY,1945].

El cido precursor, 2-metil-butrico, tambin puede encontrarse libre o en la forma de steres

inferiores en el aceite de la flor de Champaca, aunque en pequeas cantidades. Debido a su escasez,

la preparacin de este cido se lleva a cabo de forma sinttica a partir de los cortes de las fracciones

ligeras del petrleo con el fin de poder abastecer el pequeo mercado de este producto, que

prcticamente se ve restringido a la industria cosmtica, de insecticidas y potenciadores del sabor.

En la mayora de los casos, este cido se encuentra en la naturaleza formando mezclas

inseparables con el cido isovalerinico. De esta forma podemos encontrarlo en numerosos aceites

voltiles como en los aceites de adormideras, citronela, ciprs, bayas de laurel, menta americana, etc.,

y formando steres superiores en la espalda y la cavidad craneal de algunos cetceos como los delfines

y tiburones [MANCJRANE,
1944].

En general, de las conferas pueden extraerse aceites, en cuya composicin est presentes este

tipo de cidos. As, el aceite de pino silvestre se obtiene de las semillas de Pinus silvestris, que

contienen entre un 25 y un 30% de un aceite secante algo viscoso, de color amarillo bastante oscuro

y de olor a esencia de trementina. El aceite de abeto se obtiene a partir de las semillas de A bies alba,

que contiene un 25-30% de aceite cuyas propiedades y caractersticas son similares a las del aceite de

pino silvestre. El aceite depinasrro se puede extraer de las semillas de Picea excelsa y Picea vulgaris,

cuya composicin en aceite oscila entre un 25-35%. El aceite de piones de las pias de Pinus
34 Introduccin

niomop/iylla que condenen un 12-15% de aceite sernisecante, amarillento, de color y sabor

desagradables. El aceite de cedro se obtiene a partir de la nuez de cedro que condene hasta un 35%

de un aceite amarillo dorado y de sabor suave y desagradable, mientras que el aceite de ciprs se

obtiene a partir de sus semillas que contienen alrededor del 10% de un aceite de color amarillo oscuro.

Existen otros aceites a partir de los cuales pueden obtenerse estos cidos, como son el aceite

de perifolio, de aneto, zanahoria, apio, perejil, ans, comino, anglica silvestre, y otros vegetales de las

mismas especies. Todos ellos presentan caractersticas similares en cuanto a sus aceites se refiere.

Tambin pueden encontrarse estos cidos en algunos aceites que se incluyen dentro deY gmpo

de los llamados aceites de pescado. Concretamente en los aceites de tiburn y ms corrientemente en

los aceites de delfn [MANGRANE,1944].

1.4.1 OBTENCION DEL 2-METIL-BUTIRATO DE OLEILO

El 2-metil-butirato de oleilo se obtiene por esterificacin directa, generalmente cataltica, entre

el cido 2-metil-butrico y el alcohol oleico [STAMATIS, 1993; OKUMURA, 1979], aunque tambin

puede obtenerse por esterificacin conjunta, al igtal que el miristato de miristilo, de la grasa natural

de procedencia del cido en cuestin [SPENER,1979].

Las mencionadas grasas se obtienen a partir de sus materias primas siguiendo el esquema

general detallado al principio de este capitulo (figura 1.1). La nica diferencia existente reside en que

para los aceites de pescado, obtenidos principalmente de las cavidades seas y del hgado, es necesaria

una maceracin y un filtrado previo. Normalmente, para su extraccin se tritura la grosura y se hierve

con agua o vapor en autoclaves. Segn la intensidad de la extraccin, el color y el olor son ms o

menos fuertes. Los aceites provenientes del hgado de este grupo se obtienen a baja temperatura,
2-Med-Butirato de Oleilo 35

dejando fluir el aceite de los trozos de hgado calentados suavemente, envueltos con trapos y

amontonados. Los aceites de menos calidad se extraen por presin de los residuos anteriores y,

finalmente, se lleva a cabo una fusin con agua o vapor directo o indirecto [MANGRANE,1944].

1.4.2 CARACTERISTICAS Y COMPOSICION DE LOS ACEITES

Como se ha indicado anteriormente la fuente de materia prima para la obtencin de los aceites,

grasas y ceras de este grupo la constituyen fundamentalmente la familia de las conferas, la familia de

las crucferas y algunos aceites de pescado. Las propiedades y caractersticas de estas plantas vara

mucho, dependiendo del lugar de crecimiento y de la naturaleza de las propias plantas. En la tabla 1.13

se muestran las propiedades tpicas de las grasas y aceites procedentes de materias vegetales tpicas.

Tabla 1.13. Propiedades de las grasas y aceites de partida.

GRASA CERA PUNTO DE INDICE DE INDICE DE INDICE

FUSION (0C) REFRACCION J_SAPONIFICACION_J DE lODO


Pino silvestre 20-25 1.477-1.479 190-195 145-170
Abeto 10-15 1.487-1.489 190-192 118-121
Piones 12-15 1.452-1.455 189-193 100-110
Cedro 18-20 1.475-1.477 190-196 158-180
Ciprs 2-4 1.485 187-195 169-196
Hinojo 0-4 1.478-1.481 180-182 95-102
Apio 5-14 1.476-1A80 176-180 90-100
Aneto 1-5 1.478-1.482 175-180 115-125
Ans -3-0 1.474 175-180 105-lIS
Comino 5-10 1.471-1.473 176-181 176-181
Laurel 20-25 1.464 240-255 20-30
Champaca 12-20 190 135
Caf 8-9 1.468-1.478 146-195 76-98
36 Introduccin

En cuanto a los aceites de pescado, tambin denominados por algunos autores como tranes,

incluyen los aceites de balnidos, pescados osiculados, aceites de cachalotes, tiburones y de delfines.

En este caso, los aceites de mayor inters para nosotros son los dos ltimos. Los aceites de tiburn

presentan un contenido de insaponificables muy variable, desde casi cero hasta un 90%, constituido,

en parte, por escualeno. El aceite se extrae generalmente del hgado, y adems de los cidos grasos de

este grupo, contienen cantidades variables de cido selacoleico. Las especies ms representativas de

este grupos son el Tiburn rojo, Tiburn gigante, Etmopletus, Esqualos acanihias, Somniosus, Esquino,

Erizo marino> Alopias, Tiburn atigrado, Tiburn Lila, Pez sierra y Tiburn azul (Isuropsis). Los

aceites de delfn, por su parte, presentan la particularidad de contener cantidades de los cidos

isovalerinico y 2-metil-butrico, mucho ms importantes que los aceites de tiburn. As se observa en

su composicin un contenido de hasta un 30% de estos cidos, mientras que el contenido en

insaponificabes oscila entre un 2 y un 20%. Las especies ms preciadas para este fin son Phocaena

communis y Puerco marino (Delphnus phocaena). En la tabla 1.14 se muestran las propiedades de

algunos de estos aceites, tanto de tiburn como de delfn [MANGRANE;1944].

Tabla 1.14. Propiedades de los aceites de tiburn y delfin.

INSAPON. INDICE DE INDICE DE INDICE


ACEITE (%) REFRACCION SAPONIFICACION DE lODO

Tiburn rojo 80 1.490-1.493 23-54 264-345


Tiburn gigante 50 1.477-1.484 86-146 161-200
Etmopletus 10-25 1.474-1.476 146-188 110-146
Erizo marino 4-15 1.475-1.477 156-188 156-188
Tiburn atigrado 2-4 1.474-1.485 177-184 144-200
Tiburn azul 1 1.470-1.475 180 105-120
Pez sierra - 1.480 180-182 170
P. communis 2-20 1.465-1.472 t97-230 110
D. phocaena 2-20 1.462-1.470 210-230 119-132
2-Med-Butirato de OleiJo 37

1.4.3 USOS Y APLICACIONES DEL 2-METIL-BUTIRATO DE OLEILO

Su empleo en la industria cosmtica est bsicamente ligado a su capacidad para hacer ms

estables las emulsiones agua/aceite, por lo que puede emplearse en la composicin de lociones, cremas,

ungentos y cosmticos de caractersticas similares [SWERN,1979].

Tambin puede emplearse en la composicin de algunos sprays insecticidas, en forma de

detergentes u otros materiales activos de superficie. En algunos casos, este compuesto puede tener

propiedades insecticidas por s mismo, aunque, por lo general, se emplea junto con otros insecticidas

de mayor potencia [BAILEY,1945].

En algunos casos, el aceite, en su conjunto, esterificado puede emplearse como potenciador del

sabor, sin embargo es poco empleado para este fin. En cambio, estos aceites sin esterificar,

especialmente los de pescado, son una frente importante de vitaminas A y D, por lo que pueden

emplearse en la preparacin de algunos productos medicinales [GUNSTONE, 1982].


38 Introduccin

1.5 PALMITATO DE ISOPROPILO

El palmitato de isopropilo es un ester de origen sinttico, que no se encuentra en la naturaleza

como tal. Debido a la naturaleza sinttica del alcohol isopropiico, que suele obtenerse a partir de las

fracciones ms ligeras del petrleo, la sntesis del ster puede llevarse a cabo por diferentes mtodos,

aunque, por lo general, se emplea la reaccin directa de esterificacin cataltica entre el cido palmtico

y el alcohol isoproplico [LANZANI,1986; SAROJA, 1986]. Lgicamente, al igual que en los casos

anteriores, las grasas con elevado contenido en cido palmtico pueden esterificarse en su conjunto

dando lugar a una mezcla de steres que pueden tener aplicaciones dentro de la industria cosmtica.

En cuanto a las fuentes de materia prima del cido palmtico, puede decirse que son varias,

rincipalmente todas ellas de origen vegetal. Tanto el aceite de palma como de palmisre suelen ir

unidos en la produccin y el comercio, ya que proceden, respectivamente, del fruto y de la almendra

de la palma. Las palmas productoras de aceite crecen sobre todo en la parte occidental de Africa

tropical y en algunos lugares de Brasil. Otras grasas con un contenido elevado en cido palmtico son

las llamadas Sebo de Japn y Sebo de China.

El primero se obtiene a partir de las semillas de las variedades de rhus. Los centros principales

de produccin se encuentran en Japn, aunque tambin se produce en Formosa y en Vietnam. Este

aceite se emplea en la fabricacin de bujas, cerillas, jabones, encerado de muebles, pomadas,

cosmticos y conservacin de cueros; el segundo se extrae de las semillas de Stillingia sebfera (rbol

del sebo), que procede sobre todo de China, la India, Carolina del sur y Florida.

Otras fuentes de cido palmtico son las grasas de las sapindceas y las grasas de las

celastrceas y poligalceas. Al primer grupo pertenecen el aceite de Macassar, el sebo de Ranburn,

la denominada grasa del rbol del jabn, y los aceites de airee, timb y ungnadia. El segundo grupo
Palmitato de Isopropilo 39

est integrado por varios tipos de grasas y aceites. Hay que hacer notar, que por lo general, adems

de cido palmtico, pueden existir en estas grasas cantidades apreciables dc otros cidos grasos,

principalmente cido lurico, mirstico y oleico; y en menores proporciones otros cidos grasos de

caractersticas similares.

1.5.1 OBTENCION DEL PALMITATO DE ISOPROPILO

Como se ha expuesto anteriormente, la obtencin del palmitato de isopropilo se lleva a cabo

por esterificacin directa y, como se ver en el desarrollo del capitulo, suele emplearse la sntesis

cataltica. Tambin puede obtenerse por el mismo mtodo, partiendo del conjunto de la grasa total

extrada. En cuanto a los aceites de partida del cido palmtico, se emplea el mtodo de prensado

hidrulico y posterior extraccin con disolventes.

Cuando se requiere una pureza elevada del cido palmtico, el crudo de aceite se somete a otro

tipo de tratamientos que, en general, suelen ser operaciones de destilado con corriente de chorro de

vapor y posteriores cristalizaciones para purificar convenientemente el cido palmtico. Por regla

general, estos tratamientos se complementan con posteriores operaciones para decolorar y refinar el

aceite obtenido [PRYDE,1979].

Despus de la disociacin de una grasa o un aceite, se separa el cido palmtico comercial de

la mezcla de cidos grasos por dos procedimientos. Como los cidos grasos no saturados de la misma

longitud de cadena se presentan en cantidades importantes solamente en los aceites de animales

marinos, es posible separar el cido palmtico por destilacin fraccionada de la mezcla de cidos de

otras grasas. El otro procedimiento importante para la preparacin de cido palmtico implica la

cristalizacin fraccionada de mezclas de cidos grasos en acetona o metanol. De la mezcla de cidos

grasos del aceite de palma, que tiene una proporcin relativamente baja de cido esterico y es rica en
40 Introduccin

cido palmtico y cidos no saturados, los cidos saturados se separan fcilmente de los no saturados

y resulta una fraccin rica en cido palmtico. El cido palmtico destilado fraccionadamente tiene una

riqueza del 90% [GUNSTONE, 1982].

1.5.2 CARACTERSTICAS Y COMPOSICION DE LOS ACEITES

Los principales aceites para la obtencin de cido palmtico se resumen a continuacin, as

como sus principales caractersticas y composicin. As el aceite de Macassar, tambin denominado

aceite de Ketjatki, de Kusum y de Ko procede las semillas de Schleichera Injuga, que contienen entre

un 35 y un 40% de grasa. Dicha planta crece en algunas zonas de Java, Ceiln, Timor, costas de

Malabar y algunas regiones del Himalaya. La grasa presenta una consistencia mantecosa, color

amarillento y sabor suave.

El sebo de rambuzn se obtiene de los frutos de Nephelium lappaceum, que contienen alrededor

de un 35% de grasa. La grasa del rbol del jabn se extrae conjuntamente del fruto y de la semilla de

Sapindus trifoliazus, que crece en la India y en Ceiln. Es una grasa amarillenta, slida en invierno y

lquida en verano, y se obtiene principalmente por extraccin con disolventes de la semilla.

El aceite de akee se obtiene a partir de las semillas de Buighia spida y tambin de Hornea

mauritania, que crecen en algunas regiones de Brasil. Esta grasa suele ser amarilla, de consistencia

mantecosa, olor suave y sabor desagradable.

Tambin los aceites y grasas de las celastrceas, poligalceas y semejantes son fuentes

importantes de cido palmtico. Estas grasas, generalmente solidifican a temperatura ambiente.

Presentan una composicin muy variable, siendo bastante ricas en cido palmtico y urico, y

presentan cantidades variables de cido mirstico.


Palmitato de Isopropilo 41

Los aceites ms representativos son el aceite de bonetero y el aceite de celastro. Las semillas

de bonetero, Evonimus europaeus contienen un 25-35% de un aceite espeso, rojizo, de olor

desagradable y sabor amargo. Las semillas de Celanrus pan iculaws, por su parte, llegan a contener

hasta un 50% de un aceite parecido al anterior, y son originarias de la India, Etiopa y Senegal. En la

tabla 1.15 se muestran algunas de las propiedades de los aceites ms caractersticos pertenecientes a

estos grupos.

Tabla 1.15. Pwpiedades de los aceites ms tepresentativos.

ACEITE 0 PUNTO DE INDICE DE INDICE DE INDICE DE

GRASA FUSION (0C) REFRACCION SAPONIFICACION TODO

Bonetero 38 1.491 230


Mahuba 53 270-275 15-25
Lindera 45 1.476 220-285 10-70
Tangkallak 44-47 260-270 2-10
Aguacate 40 1.485 180 60
Litsea 41 245 34-48
Kusu 22-23 1.452 282-285 4-5
Malukang 30 1.454-1.456 250-254 49-52

Senega 192495 8083


Macassar 10-20 1.460 221-227 47-55
Rambutn 4246 192-196 38-42
Arbol del Jabn 23-30 190-195 55-60
Akee 25-35 188-195 42-53

En cuanto a la composicin de los aceites extrados a partir de las diferentes plantas, puede

decirse que presentan composiciones muy variables. Aunque el componente mayoritario, referido a

cidos, suele ser el cido palmtico, en la mayora de los casos va acompaado cidos superiores,

siendo sus mayores competidores el cido oleico y el cido linlico. En otros casos, adems va
42 Introduccin

acompaado por cidos inferiores, principalmente el cido mirstico. En la tabla 1 .16 se presenta la

composicin, referida a cidos grasos, de los aceites, grasas y ceras extradas a partir de las principales

fuentes de obtencin del cido palmtico [BOEKENOOGEN, 1941].

Tabla 1.16. Composicin de los principales aceites.

FUENTE C14 Cl CiS CIS:1 CIS:2

Palma 1-5 3445 3-6 40-52 7-11


Stillingia 3-6 57-72 - 1-2 -

Sebo de China 3-4 56-66 1-2 25-35 -

Cacao 2-3 24-30 30-35 30-40 24


Catapa 1 28-30 4-6 40-42 22-24
Caf 2 20-25 1-9 12-27 23-38

1.5.3 USOS Y APLICACIONES DEL PALMITATO DE ISOPROPILO

Debido a las caractersticas de este compuesto, su aplicacin fundamental tiene lugar dentro

del campo de la cosmtica, aunque tambin puede einplearse para la llamada lubricacin de algunos

materiales de la industria textil, especialmente cueros; e incluso en la preparacin de sustancias que

actan como aceites hidrulicos.

Cosmtica.

El Palmitato de Isopropilo, debido a que es un liquido transparente, inodoro y viscoso, se

emplea como componente para diversos tipos de preparados cosmticos tales como cremas, unguentos

y lociones. Puede actuar como emulsificante y presenta propiedades excelentes para ser absorbido en

la piel. Al ser aplicado, produce una sensacin muy agradable, evitando el efecto grasiento y pegajoso,

tpico de algunos cosmticos. Este tipo de producto que puede emplearse como disolvente de aceites
Palmitato de Isopropilo 43

esenciales e ingredientes activos ampliamente empleados dentro de la industria cosmtica, que se

comercializan como compuestos hidratantes que ejercen algn otro tipo de accin especial sobre la piel

[GUENTHiER,1955; GUNSTONE, 1982].

Industria textil.

Las fibras acabadas en piel o cuero, deben ser lubricadas con una fina pelcula de aceite, con

el fin de que tengan un tacto suave y una flexibilidad adecuada. Para este fin se emplean diversos tipos

de aceites, grasas y ceras, siendo eJ palmitato de isopropilo una de las ceras incluidas dentro de este

grupo [SWERN, 1979].

Los cueros suaves se someten a un proceso de lubricacin por goteo, para lo que se emplean

emulsiones diluidas de este aceite en agua estabilizada con el propio aceite sulfonado. Dicho aceite

sulfonado, sirve como medio de transporte a la emulsin hasta el interior de la piel, donde se deposita

el aceite con la consiguiente ruptura de la emulsin. Cuando se lubrican cueros duros, el mtodo

empleado consiste en extender una capa de aceite o grasa sobre la piel, que hace de vehculo para que

la emulsin penetre en su interior y, una vez realizado el proceso, debe procederse a la eliminacin de

la primera capa [BAILEY, 1945].

Aceites hidrulicos.

Algunos aceites se emplean para la preparacin de fluidos hidrulicos y, particularmente, los

que deben ser expuestos a bajas temperaturas, como es el casos de los circuitos de los automviles o

de los sistemas aeronuticos. El palmitato de isopropilo, presenta caractersticas adecuadas para este

uso, ya que adems es compatible con otros lquidos polares de baja viscosidad, y no genera residuos

slidos en el interior de las conducciones [SWERN,1979].


44 Introduccin

1.6 OLEATO DE ISOPROPILO

El oleato de isopropilo, al igual que el palntato de isopropilo es un ster de naturaleza

sinttica, que se obtiene empleando cualquiera de los mtodos disponibles para la obtencin de steres

que se detallan en el punto 1.7. Este producto no aparece en la naturaleza debido a que uno de sus

constituyentes, el alcohol isoproplico, se obtiene de manera sinttica mediante la reaccin de la

correspondiente olefina con el cido sulfrico, seguida de la hidrlisis del cido alquilsulfrico

resultante. Utilizando la reaccin con el cido sulfrico, se acometi la primera fabricacin del alcohol

isopropiico al final de la primera Guerra Mundial por la Melco Chemical Company por medio del

proceso Ellis.

El otro constituyente del oleato de isopropilo es el cido oleico. El cido oleico (cido cis-9-

octadecenoico) es probablemente el ms abundante de todos los cidos grasos naturales. Sus glicridos

se encuentran en cantidades notables en todas las grasas de los animales terrestres y marinos y en todos

los aceites vegetales. En las grasas animales es el principal componente: de 40 a 50% de la grasa; pero

los mayores porcentajes se encuentran en los aceites vegetales; en el aceite de oliva 70-85% y en el

aceite de almendras 75%, o ms. Se encuentra tambin en las siguientes proporciones,

aproximadamente: aceite de cacahuete, 57%, aceite de maz, 45%; aceite de palma, 41%, aceite de

semilla de calabaza, 37%, aceite de algodn, 35%, aceite de soja, 33%, aceite de girasol, 33%. Se han

descrito dos formas cristalinas del cido oleico: punto fusin 13.4 y 1 6.30C.

Los usos del cido oleico tcnico son muy variados, por lo que tanto su produccin, como su

comercializacin se lleva a cabo en grandes volmenes. En 1992 se produjeron en los Estados Unidos

aproximadamente 30 millones de toneladas de cido oleico de calidad comercial (aceite rojo). De esta

cantidad, se emplearon aproximadamente 7 millones de toneladas en la preparacin de jabones para

diversas aplicaciones textiles. Para la lubricacin de fibras textiles se usaron aproximadamente 5


Oleato de Isopropilo 45

millones de toneladas de aceite rojo. Se emple tambin en la fabricacin de lubricantes y grasas (1.5

millones de toneladas), aceites sulfonados (1.6 millones de toneladas), detergentes sintticos (1.451.000

Kg), caucho (771.000 1(g), productos intermedios (907.000 toneladas), revestimientos protectores

(771.000 toneladas), resinas (953.000 toneladas), en operaciones para el trabajo de metales (1 milln

de toneladas) y para diversas aplicaciones industriales (1.2 millones de toneladas).

1.6.1 OBTENCION DEL OLEATO DE ISOPROPILO Y DEL ACIDO OLEICO

Como se ha comentado anteriormente, el oleato de isopropilo se obtiene va esterificacin

cataltica [KNEZ,1990; OKUMURA, 1979; LINFIELD, 1984] a partir del cido oleico y el alcohol

isopropflico- (punto 1.7), aunque tambin puede obtenerse formando mezclas con otros steres

esterificando el aceite o la grasa de partida. Sin embargo, cuando se pretende obtener el compuesto con

cierta pureza, es necesario emplear como producto de partida el cido oleico con una pureza aceptable.

El cido oleico de calidad comercial, llamado comnmente aceite rojo, suele obtenerse

industrialmente partiendo del sebo no comestible o grasa no comestible.

Por el procedimiento antiguo, los cidos grasos obtenidos por hidrlisis cida (mtodo

Twitchell) de las grasas se someten a una o varias destilaciones directas en vaco. El destilado, que

consta de 40-50% de cidos saturados, principalmente palmtico y esterico, hasta 10% de cido

linoleico y 405% de cido oleico, se recoge en pailas y se enfra lentamente hasta unos WC en una

cmara refrigerada.

Las tortas as formadas se envuelven en tela y se someten a presin moderada en una prensa

hidrulica. El liquido exprimido es aceite rojo, el slido que queda como residuo, el cido esterico

de una sola presin.


46 Introduccin

1.6.2 CARACTERISTICAS Y COMPOSICION DE LOS ACEITES

Los principales aceites que sirven de materia prima para la obtencin de cido oleico son los

aceites de oleceas, betulceas y zeceas. Estos aceites estn constituidos casi exclusivamente por

glicridos del cido oleico, ms del 80%, junto con pequeas proporciones de cido linlico, menos

del 10%. Los cidos slidos estn constituidos casi exclusivamente por cido palmtico, generalmente

menos del 10%, que eventualmente se encuentra mezclado junto con mnimas proporciones de cido

esterico. Son, por tanto, fluidos a temperatura ordinaria, salvo algunas variedades del aceite de oJiva

y se incluyen dentro de la categora de aceites no secantes.

El aceite dccliv a es el que se extrae de la aceituna, fruto del olivo (Olea europea), en sus dos

formas, cultivada y silvestre, cuyo contenido en dicho aceite es muy variable. Aunque, por regla

general, oscila entre el 15 y el 27%, estos lmites llegan a veces al 10 y el 50%. Las variedades picuda,

nevadilla blanca y negra, y olivo negro, contienen alrededor del 26%. En cambio, las variedades

manzanilla, gordal, carrasqueo y sevillana, tienen un contenido del 22-23%, mientras que la aceituna

lechn contiene slo alrededor del 20% de aceite [BAIiLEY, 1945].

El aceite est contenido principalmente en la parte carnosa del fruto, aunque la almendra del

hueso contiene tambin el 20-30% de su peso de un aceite cuyas caractersticas son esencialmente

diferentes. En general, la pulpa contiene alrededor de un 25-35% de su peso; la alinendra, alrededor

del 25%, y la parte leosa, menos del 1%.

La constitucin de los cidos grasos y de las constantes son, aproximadamente las mismas en

todas las calidades del aceite de oliva. El sabor de este aceite constituye una caracterstica de su

comercio, que lo distingue del de todas las dems grasas vegetales; en este sentido, esisten grandes

diferencias, que dependen de la clase de aceituna, madurez de la misma, mtodo de recoleccin,


Oleato de Isopropilo 47

conservacin y extraccin. La extraccin del aceite de oJiva difiere bastante de los mtodos generales,

debido principalmente a la importante proporcin de agua que contiene la aceituna.

Las operaciones principales consisten en la limpieza de las aceitunas, molienda de las mismas

y prensado de la aceituna molida. Dentro de la misma aceituna, la calidad del aceite va desmereciendo

a medida que se fuerza la presin. El color del aceite es muy variable debido a la propia naturaleza

de la aceituna y, en parte, debido a las condiciones de extracin del mismo. Por esto puede oscilar

desde amarillento plido a amarillo verdoso bastante pronunciado.

Una de las caractersticas de este aceite consiste en las grandes variaciones de acidez, las cuales

no se presentan en la mayora de los aceites de semillas. Esta caracterstica dependeprincipalmente de

las condiciones de recogida y almacenamiento de la aceituna y de la fabricacin y conservacin del

aceite.

El residuo de la prensa, denominado orujo de oliva, contiene todava cantidades variables de

aceite, cuya proporcin depende de como se ha forzado la extraccin por presin. El aceite de orujo

se extrae principalmente con sulfuro de carbono, y en algunas fbricas con tricloruro de etileno. Dicho

aceite es uno de los productos grasos ms interesantes desde el punto de vista qumico. La composicin

del aceite vara segn el tiempo y circunstancias del almacenaje del orujo y de las condiciones en que

se realiza el secado del orujo, antes de proceder a la extraccin del aceite.

Cuando se procede a la extraccin de los orujos inmediatamente despus de haber sido

prensados y extrado el aceite de oliva, la composicin de los cidos grasos y las constantes del aceite

de orujo son prcticamente las del correspondiente aceite de ojiva. Slo en algunos casos, e] aceite de

orujo contiene hasta un 1% ms de cidos slidos que el correspondiente aceite de oliva, siendo dicho

aumento debido, principalmente, al cido esterico y al cido palmtico. En cuanto a los aceites de
48 Introduccin

orujo comerciales ya refinados, no puede hacerse ninguna consideracin, ya que la operacin de

desmargarinizacin separa el exceso de glicridos slidos. Las principales caractersticas de los aceites

de orujo, coinciden con las de su aceite de oliva de origen [GUNSTONE, 1982].

El aceite de hueso de aceituna, generalmente se extrae conjuntamente con el aceite de oliva

y, sobre todo, con el aceite de orujo, por lo que no existe como tal prodcto comercializado. El hueso

de la aceituna presenta una alimendra cuyo peso equivale al 10% del hueso y en la cual est contenido

casi todo el aceite que llega a constituir el 25% del peso de la almendra. Este aceite es amarillo, ms

o menos verdoso, dependiendo del tipo de acituna, y cuando se ha extraido a partir de las almendras

machacadas, prsenta un sabor algo dulce y diferente al del aceite de oliva.

Existen otros aceites de las oleceas como el extraido de las semillas de tat, del Brasil, que

contienen alrededor de un 15% de un aceite oscuro, inodoro y de sabor amargo. Tambin existen otros

aceites como el aceite de fresno, o el aceite de sano, que pueden llegar a contener una cantidad de

aceite muy variable, pero es poco usado.

El principal representante de los aceites de las betulceas, es el denominado aceite de avellanas.

La avdllana contiene entre un 50 y un 60% en lieso de aceite, que se extrae separando la envoltura

exterior, moliendo la almendra y prensando en fro al principio y en caliente ms tarde. El aceite as

obtenido presenta un color amarillento y es de olor y gusto agradables, pero puede enranciarse con

relativa facilidad [MANCIRANE, 1944].

Los aceites de t, tambin denominados, segn la procedencia, aceites de subaki o aceites de

sasancua, se extraen de las semillas de Thea sinensis, Camelia japnica y Camelia olefera. La

almendra de las semillas del primero contienen entre un 20 y un 25% de un aceite amarillo con una

cierta tonalidad rojiza, su sabor es un tanto amargo y su olor suele ser un poco desagradable.
Oleato de Isopropilo 49

El aceite de Camelia japnica, tambin llamado aceite de t japons o aceite de tsubaki. es

bastante parecido al aceite de oliva. La almendra de la semilla contiene alredor del 60-65% dc aceite,

el cual presenta la cualidad de enranciarse con menor facilidad, o que se aprovecha para ser empleado

en perfumera en la fabricacin de ciertos cosmticos y brillantinas, e incluso en Japn se emplea

dentro del campo de la alimentacin [GUNSTONE, 1982].

Las semillas procedentes de Camelia olijera contienen alrededor del 40% de un aceite espeso,

de olor y sabor poco agradables. Propiedades muy similares presenta el aceite denominado de sasancua,

que se extrae de las semillas de Thea sasanqua, cuya almendra contiene alrededor de un 60% de aceite

en peso. En la tabla 1.17 se muestran las caractersticas ms relevantes de los aceites, a partir de los

cuales se lleva a cabo la principal obtencin de cido oleico.

Tabla 1.17. Propiedades de los aceites a partir de los cuales se obtiene cido oleico.

PUNTO DE INDICE DE INDICE DE INDICE DE


ACEI1E FUSION (0C) REFRACCION 1_SAPONIFICACION_1 lODO1

Oliva 4-8 1.465-1.469 185-196 78-86


Hueso aceituna 4-6 1.463-1.475 179-198 68-86
Fresno 162-170 140-144
Avellanas 17-20 1.469-1.470 187-192 84-90

T 9-21 1.467-1.470 188-197 77-85


Tsubalci 15-22 1.467-1.470 188-197 78-92
Sansaqua 9-10 1.462-1.470 190-194 80-85

Sesamo 3-6 1.469-1.472 187-195 103-1 12


Cacahuete 0-3 1.468-1.471 188-194 83-103

Soja 8-18 1.472-1.475 188-195 103-139


Colza 4-12 1.470-1.474 167-185 94-106
Mostaza negra 11-18 1.471-1.474 174-187 96-107
Mostaza blanca 8-16 1.469-1.471 170-185 92-109
50 Introduccin

Adems de los aceites ya mencionados existen otros aceites ricos en cido oleico que se

obtienen a partir de materias vegetales diferentes. Este es el caso del aceite de Cachuete de la familia

de las leguminosas, que estn constiuidas principalmente por cido oleico y linoleico. Dicho aceite

proviene en un 75% de la almendra del cacahuete y el 25% restante se extrae de su corteza. El

contenido total en aceite oscila entre un 40. y un 55% en peso del mismo, y dentro de los lmites

sealados, presentan mayor riqueza en aceite las almendras de los cacahuetes de Rufisque, Senegal y

Congo, 50%, seguidos de las de Hispanoamrica, Bombay y Japn, 45%, y por ltimo las almendras

de los cacahuetes Georgianos y Espoles, en torno al 35%. Para la extraccin de estos aceites se parte

de las almendras ya limpias y molidas, se tamizan y se trituran con cilindros de pas y estriados, para

posterionnente ser sometidos a presin, primero a unos 30-400C y despus a unos 700C.

Otros aceites empleados son los provenientes de la familia de las papilionceas, en los que la

composicin est dominada por el cido linoleico, seguido del cido oleico en una proporcin

importante, aunque tambin estn presentes los cidos palmtico, esterico y araquinico. De este grupo,

el ms representativo es el aceite obtenido a partir de las semillas de soja (Soja hispida) cuyo contenido

en aceite est en torno al 20%. Algunos aceites de la familia de las crucferas, tales como el aceite de

Colza o Mostaza, tambin presentan un contenido importante en cido oleico, pero son ms interesantes

dede el punto de vista industrial para la obtencin de cido ercico [SWERN, 1979].

En cuanto a la composicin de dichos aceites, como ya se ha mencionado en los anteriores

casos, puede decirse que es muy variable, dependiendo de la naturaleza de la planta de procedencia y

del propio mtodo de extraccin empleado. En la tabla 1.18 se muestra la composicin, referida a su

contenido en cidos grasos, de los aceites ms relevantes que sirven de materia prima para la

produccin de cido oleico. En esta tabla no se incluyen las posibles materias primas derivadas de

animales tanto marinos como terrestres, por ser sobre todo estos ltimos fuentes principales del cido

esterico, que presenta otra serie de aplicaciones [MANGRANE, 1944; RATTRAY, 1984].
Oleato de Isopropilo 51

Tabla 1.18. Composicin de los principales aceites para la obtencin de cido oleico.

FUENTE C14 Cl CtS C1S:1 C1S:2 C1S:3

Oliva y orujo 0-1 7-15 1-2 70-85 4-12 -

Hueso aceituna - 4-6 2-4 75-85 4-10 -

Cacahuete - 12-15 14-16 54-76 12-25 -

Almendra - 5-8 - 75-80 2-4 -

T 0-1 7-8 0-1 83-85 22-24 -

Avellanas 0-1 2-4 1-2 90-95 2-3 -

Soja 0-1 7-10 3-6 25-35 52-60 2-6


Maz - 7-8 2-4 45-50 40-45 5-10
Fruto de laurel 20-22 1-2 - 60-65 12-15 -

Laurel cerezo 1-2 6-9 1-2 70-75 12-14 -

Anacardio - 6-7 11-12 74-75 7-8 -

16.3 USOS Y APLICACIONES DEL OLEATO DE ISOPROPIILO

Las aplicaciones del oleato de isopropio a nivel industrial son similares a las del palmitato de

isopropilo, pero adems, por presentar un doble enlace en su composicin, tiene una mayor versatilidad

en su empleo dentro de dichas industrias. Debido a esto se emple a dedntro de la industria cosmtica,

industia de plsticos, lubricantes, preparacinde aceiteshidrulicos, industria textil, etc. A continuacin

se detallarn algunas de las aplicaciones ms relevantes.

Cosmtica.

El Oleato de Isopropilo, presenta propiedades similares a las del palmitato de isopropilo, es

decir un liquido transparente, inodoro y viscoso, y por tanto se emplea como componente para diversos

tipos de preparados cosmticos tales como cremas, ungilentos y lociones. Puede actuar tambin como

emulsilicante y presenta propiedades excelentes para ser absorbido en la piel [SWERN, 1979].
52 Introduccin

Al ser aplicado, produce una sensacin muy agradable, evitando el efecto grasiento y pegajoso

tpico de algunos cosmticos cuya composicin tiene un elevado contenido en sustancias excesivamente

grasas [GUNSTONE, 1986].

Estetipo de producto que puede utilizarse como disolvente de aceites esenciales e ingredientes

activos ampliamente empleados dentro de la industria cosmtica, que se comercializan como

compuestos hidratantes que ejercen algn otro tipo de accin especial sobre la piel [GUENTHER,

1955], y por tanto hacen de agente transportador de vitaminas, proteinas. etc.

Farmacia y Medicina.

Al ser un agente con excelentres propiedades transportadoras de principios inmediatos, puede

ser empleado dentro de la industria fannacctica en la preparacin de jarabes y frmacos lquidos de

ingestin oral. Adems puede actuar como vehculo de transporte a travs de la piel, formando parte

de preparados de uso tpico para el tratamiento de trastornos traumatolgicos [BAILEY, 1945;

GUNSTONE, 1982].

Industria textil.

Las fibras acabadas en piel o cuero, deben ser lubricadas con una fina pelcula de aceite, con

el fin de que tengan un tacto suave y una flexibilidad adecuada. Para este fin se emplean diversos tipos

de aceites, grasas y ceras, siendo el oleato de isopropio, al igual que el palmitato de isopropilo, una

de las ceras incluidas dentro de este grupo [SWERN, 19791.

Dentro de este campo, el oleato de isopropilo acta tanto como vehculo de transporte para

otros aceites, como de agente lubricante en el proceso de acabado de las prendas producidas por este

tipo de industrias [BAILEN,1945]. Siendo una de las ceras ms verstiles para el lubricado tanto de

cueros duros como de cueros blandos o pieles dedicadas a este fin.


Oleato de Isopropilo 53

Aceites hidrulicos.

Algunos aceites se emplean para la preparacin de fluidos hidrulicos y, particularmente, los

que deben ser expuestos a bajas temperaturas, como es el casos de los circuitos de los automviles o

de los sistemas aeronuticos. El oleato de isopropio, presenta caractersticas adecuadas para este uso,

ya que adems es compatible con otros lquidos polares de baja viscosidad, y no genera residuos

slidos en el interior de las conducciones [SWERN, 1979].

Lubricantes.

Por su condicin de liquido viscoso, presenta propiedades reolgicas que lo hacen apto para

su empleo como lubricante de maquinarias delicadas. En general, puede emplearse par lubricar

maquinarias tales como aparatos de relojera e instrumentos de ciertaprecisin, principalemente cuando

se trata de instrumentos de medida, en los cuales es fundamental que, aunque no varen drsticamente

sus condiciones de operacin, el sistema de lubricacin sea muy eficaz para conseguir la precisin

requerida [BAILEN, 1945].

Debido al elevado coste de este tipo de lubricantes, generalmente se emplean preparaciones que

consisiten en mezclas de esta cera con otros aceites naturales o sintticos, que hacen que el producto

final tenga un menor coste en el mercado:

Bandees y pinturas.

Las caractersticas del oleato de isopropilo, tambin lo hacen apto para su empleo dentro de

la composicin de algunos barnices, pinturas y recubrimientos que hacen de sustancias protectoras para

todo tipo de superficies expuestas a un deterioro. As puede emplearse en la preparacin de algunas

sustancias reparadoras de muebles, suelos de madera, ceras para automviles, metales, etc.

Generalmente forma parte de la composicin crea de todos estos revestimientos que existen en el

mercado [SWERN, l9791.


54 Introduccin

industria de plsticos.

El Oleato de isopropilo, es uno dc los steres ms importantes dentro de la industria del

procesado de plsticos. Su accin consiste en actuar como lubricante, especialmente en la fabricacin

de PVC, donde tiene bsicamente dos funciones. En primer lugar, se emplea para regular las

caracterfsticas del flujo de las partculas de PVC durante su procesado, donde adems ejerce una accin

de control sobre la capacidad de gelatinizacin de los plsticos. La segunda funcin del oleato de

isopropilo, no menos importante, consiste en la formacin de una pelcula deslizante sobre la superficie

de las paredes de los diferentes equipos con el fin de evitar que los polimeros no queden adheridos

durante su procesado [jPRYDE,1979].

Los steres provenientes de cidos grasos y alcoholes de cadena corta, tales como el oleato de

isopropilo, son miscibles con el PVC, e incluso a elevadas concentraciones son capaces de producir

un efecto de lubricacin interna, sin afectar al acabado del producto final, por lo que se consideran

como excelentes plastificantes [GUNSTONE, 1982].


Mtodos para la Obtencin de Esteres 55

1.7 METODOS PARA LA SINTESIS DE ESTERES

Las reacciones para la obtencin de steres pueden dividirse en dos grandes grupos. En primer

lugar estan las denominadas reacciones de solvolisis, en las cuales el reactivo principal lo constituye

un compuesto orgnico de naturaleza cida o un derivado de cido. Al segundo grupo pertenecen otro

tipo de reacciones, cuyas materiasprimas de partida no tienen por qu ser un cido graso o un derivado

de cido. Las reacciones ms verstiles para la sntesis de steres son las reacciones de solvolisis, ya

que permiten la obtencin de steres a partir de un elevado nmero de productos de partida. Los tipos

de reacciones ms empleadas son las que se consideran a continuacin.

1.7.1 REACCIONES DE SOLVOLISIS

En general, este tipo de reacciones tienen lugar va sustitucin nuclefila. Segn el medio

empleado y el tipo de catalizador tiene lugar la disociacin parcial de las materias primas en mayor

o menor medida, las cuales vuelven a reorgamzarse para dar lugar al correspondiente producto de

reaccin. Dependiendo de los productos de partida, podemos clasificar estas reacciones como se indica

a continuacin:

1.7.1.1 Reacciones a partir de clornms de cido.

Los reactivos empleados son, junto al cloruro de cido, un alcohol orgnico y un catalizador

bsico, como por ejemplo, dimetilamina [HANSEN,I955] o piridina. El esquema de reaccin general

puede considerarse de la manera siguiente:

4
o ,0
+ R2OH ~ R1C + HCI
Cl OR~
56 Introduccin

1.7.1.2 Reacciones a partir de anhdridos de cido.

En este tipo de reacciones tiene lugar la formacin de nuevos productos, adems del ster que

es el producto principal, tambin se forma un cido orgnico. Para que se lleve a cabo la reaccin.

se parte del anhdrido y un alcohol orgnico, y es necesaria la presencia de catalizadores de tipo cido,

tales como el cido sulfrico [PRICHARD, 1955], cloruro de cinc [BAKER, 1955; BROWN, 1961],

sulfato frrico [CALMAN, 1957], cido clorosulfnico rERDOS, 1951], metxido sdico

[STANSBY,1965]o cido p-toluensulfnico monohidratado [COPE,1963]. El esquema general de

reaccin es el siguiente:

00 o o
6 4 1/ II
R1C NN~ xC R1 + ROH ~ RICN +
O

1.7.1.3 Reacciones a partir de sales de cidos y haluros de alquilo.

Para alcanzar altos rendimientos, se utiliza como catalizador la trietilenamina [MILLS, 1962],

obtenindose conjuntamente el ster deseado y la sal correspondiente, como se muestra a continuacin:

O
4 + R2X fr R1C + NaX
Na N0R2

1.7.1.4 Reacciones a partir de cidos carboxlicos y alcoholes orgnicos: Esterificacion.

El mtodo de esterificacin es el ms empleado cuando los reactivos son asequibles. Para

aumentar la velocidad de reaccin y alcanzar, lo ms rpidamente posible, el equilibrio, se utilizan

catalizadores de carcter cido, tales como el cido sulfrico, clorhdrico, cidos sulfnicos, cloruros

metlicos, etc. Cuando se precisa que el medio de reaccin no sea fuertemente cido, se pueden utilizar

resinas de intercambio inico como catalizador LiBOCHNER, 1965].


Mtodos para la Obtencin dc Esteres 57

El esquema de reaccin coincide con el clsico sistema de esterificacin, en el que se obtiene

el ster deseado y agua como subproducto:

R1C + R2OH ~

OH 0R2

Para favorecer el rendimiento en ster se puede desplazar el equilibrio por adicin de exceso

de uno de los reactivos de partida (generalmente el alcohol), o tambin por eliminacin del agua que

se va formando en el medio de reaccin (principio de Le Chatelier). Generalmente se elimina el agua

por destilacin azeotrpica del medio de reaccin, sobre todo cuando las especificaciones del proceso

requieren la operacin equimolar.

La esterificacin se lleva a cabo a elevada temperatura y en presencia de un sistema cataltico.

La velocidad de formacin del ster depende en gran medida del cido carboxilico y del alcohol

empleados. Los ms ligeros reaccionan antes que los pesados. As mismo los alcoholes primarios

reaccionan con mayor prontitud que los secundarios y estos ms rpidamente que los terciarios y dentro

de cada serie reaccionan antes los ms ligeros que los mas pesados. Aquellos de estructura lineal

reaccionan antes que los ramificados, siendo la velocidad de esterificacin especialmente ms lenta si

la ramificacin es en la posicin a.

Ms recientemente se han utilizado enzimas y zeolitas como catalizador, de manera que se

evitan los problemas que provocan los catalizadores cidos de Lewis que dan lugar a una dificultad

de separacin, con la consiguiente contaminacin del producto de reaccin; el cual es preciso someter

a un tratamiento de purificacin. En el punto siguiente, se har referencia exclusivamente a la

esterificacin cataltica, por ser este el mtodo ms viable desde el punto de vista industrial para la

obtencin de los steres objeto de este estudio.


58 Introduccin

1.7.2 REACCIONES DE OXIDACION-REDUCCION

Las reacciones que no se incluyen dentro del grupo de las solvolticas, pero que tambin

pueden emplearse para la sntesis de steres a nivel indsutrial, son las reacciones denominadas de

oxidacin y reduccin [MARCH, 1985].

Reacciones de oxidacion.

Utilizando este tipo de reacciones, se consiguen steres simtricos. El producto de partida es

un alcohol orgnico y como agente oxidante se emplea una disolucin de dicromato potsico en cido

sulfrico. La reaccin transcurre va hemiacetal.

02
RCH2OH ~ RCOOCH2R

Esta reaccin no puede emplearse con reactivos insaturados, debido a que provocara la

oxidacin de los dobles enlaces.

Reacciones de reduccion.

Este tipo de reacciones precisa la utilizacin de reactores a presin y la presencia de

catalizadores en forma de xidos metlicos, tales como los xidos de cinc, cromo y aluminio. El uso

de hidrgeno como agente reductor y a alta presin, plantea problemas y riesgos en su manejo.

Por lo tanto, las reacciones de solvlisis son las ms adecuadas para obtener steres de

cualquiernaturaleza y, dentro de ellas, las de esterificacin son las ms rentables, puesto que eliminan

las operaciones adicionales de obtencin y purificacin de los productos de partida.


Mtodos para la Obtencin de Esteres 59

1.7.3 ESTERIFICACION CATALITICA

La esterificacin es la reaccin de formacin de un ster a partir del cido y el alcohol

correspondientes al tipo de ster que se desee obtener. Para aumentar la velocidad con que se produce

dicha reaccin, lo ms habitual es emplear algn tipo de sustancia que de lugar a una disminucin de

la energa de activacin y el consiguiente aumento de la velocidad de la misma.

Los mejores rendimientos en la obtencin de steres lgicamente se consiguen empleando

catalizadores, pero el problema se presenta a la hora de la eleccin de los mismos. Obviamente dicha

eleccin, desde el punto de vista industrial, no slo pasa por la mejora del rendimiento de la reaccin,

sino que adems ser necesario tener en cuenta otros parmetros econmico-industriales, tales como

el acondicionamiento de las materias primas, la necesidad de purificacin de los productos obtenidos

con el fin de cumplir las especificaciones de mercado y el ahorro energtico, entre otros. Segn el tipo

de catalizador que se emplee, se puede distinguir entre los diferentes tipos de procesos catalticos que

se detallan a continuacin.

1.7.3.1 Catlisis clsica.

En este tipo de proceso se emplean como catalizadores cidos minerales fuertes (cido

clorhdrico y cido sulfrico), sales de estao, compuestos organometlicos, gel de sffice y resinas de

intercambio inico [BILBAO, 1984]. Este tipo de catlisis puede ser homognea o heterognea

dependiendo de la naturaleza de los materiales puestos en juego a la hora de llevar a cabo la sntesis

de los productos correspondientes.

Los catalizadores ms importantes clsicamenteempleados en la preparacin de steres a escala

industrial para su posterior comercializacin, as como sus principales caractersticas son los que se

indican a continuacin:
60 Introduccin

(a) La catlisis empleando cidos minerales fuertes ha sido ampliamente estudiada en el caso de

las reacciones de esterificacin. El cido de mayor aceptacin ha sido el cido sulfrico, con

el que se obtienen mayores conversiones y adems no es tan corrosivo como el cido

clorhdrico [BERMAN, 1948; DANUKA, 1977; AL-SAADI, 1981; GOTO, 1991]. Puede

presentar varios problemas debido a que un pequeo aumento de la concentracin de

catalizador o trabajando a temperaturas elevadas, puede provocarse la deshidratacin del

alcohol al ter u olefina correspondientes. Generalmente se emplea en concentraciones

inferiores al 1 2% en peso, sin embargo, en la mayora de los casos, se producen compuestos

secundarios que despus es necesario eliminar, lo que suponeun gasto adicional que repercute

en el coste del producto final.

(b) Los cidos sulfnicos, bencenosulfnico, paratoluensulfnico o metasulfnico tambin pueden

emplearse como catalizador en sustitucin de los cidos minerales fuertes, ya que debido a que

son poco corrosivos, pueden emplearse en plantas industriales de proceso [ZHOU, 1984]. No

obstante, requieren temperaturas elevadas de trabajo, por lo que pueden dar lugar a la

oxidacin de las especies involucradas en el medio de reaccin, apareciendo coloraciones

mdeseables en el producto final.

(c) Las resinas de intercambio inico de carcter cido se emplean en los procesos constituidos

por lechos fluidizados, trabajando en rgimen continuo. Generalmente, las resinas empleadas

son de intercambio catinico, siendo las ms habituales las constituidas por grupos sulfnicos.

El principal inconveniente que se presenta a la hora de la puesta en planta de procesos

catalizados por estas resinas es su elevado coste y, en algunos casos, favorecen las reacciones

de polimerizacin secundarias [ASTLE, 1955; SHARMA, 1972; DAKSHINAMURTY, 1984;

GIMENEZ, 1987; GOTO, 1992].


Mtodos para la Obtencin de Esteres 61

(d) El cido fosfrico puede catalizar reacciones de esterificacin, pero generalmente la velocidad

que se consiguen son relativamente bajas. Las sales metlicas del cido fosfrico reducen las

reacciones colaterales. Su principal inconveniente es que precisan una temperatura de operacin

elevada, superior a la de los cidos fuertes [ELVERS, 1990].

(e) Algunos xidos metlicos (xido de cinc), cuya funcin es la de aumentar la velocidad de

reaccin en procesos de esterificacin de cidos grasos sintticos con dioxano [RATREVICH,

1978; NAVROCIK, 1985], sin reducir la estabilidad trmica del alcohol.

(1) Algunas sales como cloruro de tionilo. Se ha empleado tambin en Ja sntesis de steres creos

saturados en presencia de un medio orgnico y a temperatura ambiente, alcanzndoseelevados

rendimientos [PRABHUDE-SAI, 1978]. Recientemente se han sintetizado steres cricos

saturados por reaccin equimolecular de alcoholes de cadena larga y cidos grasos en presencia

de cloruro de tionilo como catalizador. El proceso tiene lugar en solucin de benceno a

temperatura ambiente, alcanzando rendimientos alrededor del 85%.

1.7.3.2 Catlisis por cidos de Lewis.

Los cidos de Lewis, y en especial los haluros metlicos, son los empleados para catalizar la

esterificacin de alcoholes y cidos orgnicos de alto peso molecular [KLEIN, 1982]. Los ms

empleados son los cloruros de aluminio, boro, berilio, cinc, galio (III), titanio (LV), hierro (III) y

bismuto (III). Tambin se utilizan los bromuros de boro, galio (III), estao (IV) y el fluoruro de boro.

La propiedad principal de estos compuestos es que el tomo metlico posee una deficiencia

electrnica en su estructura, por lo que los electrones integrantes de los reactivos bsicos son atrados

por el ncleo metlico del catalizador. Para acelerar la velocidad de reaccin se emplean como
62 Introduccin

promotores bien donadores de protones (compuestos hidroxlicos y cidos), o bien formadores de

cationes (halgenos, oxgeno, azufre, etc..).

Los iniciadores o cocatalizadores pueden ser de dos tipos: Por una parte tenemos sustancias

donadoras de protones, tales como compuestos hidroxilos (agua, alcoholes) y protones cidos (cloruro

de hidrgeno, cido sulfrico, cidos orgnicos, cido fosfrico, etc). Tambim pueden estar

constituidos por sustancias formadoras de cationes, i~ue son especies donadoras de protones, tales

como halgenos, oxgeno, azufre, etc.

El empleo de cloruros metlicos permite trabajar en fase homognea, a la vez que evita la

reaccin con los dobles enlaces [URTEAGA, 1985]. El principal problema que se presenta con este

tipo de catalizadores es que producen la coloracin del producto obtenido, por lo que es obligado

someterlo a un proceso de decoloracin y purificacin.

1.7.3.3 CatMisis mediante zeolitas.

Recientemente se han utilizado zeolitas clsicas y zeolitas ultraestables, debido a que estn

constituidas por centros cidos (tanto de Lewis, como de Brnsted), que constituyen los centros activs

del catalizador en las reacciones de esterificaci.

Las zeolitas son aluminosilicatos cristalinos de elementos del grupo lA y hA como sodio,

potasio, magnesio y calcio. Qumicamente se pueden representar por la frmula:

M49.A1203.ySiO2.wH2O

donde y est comprendido entre 2 y 10, vi es la valencia del catin correspondiente y w representa el

agua contenida en los huecos de la zeolita. La estructura bsica esta consituida por canales o huecos

interconectados que se hallan ocupados por los cationes, que proporcionan neutralidad elctrica a la

estructura, y molculas de agua. El agua puede eliminarse por simple calentamiento dejando una
Mtodos para la Obtencin de Esteres 63

estructura cristalina intacta atravesadapor numerosos canales que incluye grandes cavidades que pueden

llegar a suponer el 50% del volumen total del cristal, lo que hace que se denominen tambin tamices

moleculares.

Este tipo de catalizadores se caracteriza por poseer una actividad superior a la de los cidos

convencionalmente empleados. Su actividad depende de la relacin siice/almina, del tamao del

cristal, del tamao de poro y de la superficie especfica principalmente [SANCHEZ, 1994]. Por poseer

dimetros de poro con una o ms distribuciones de tamaos y ser estos de orden molecular, las zeolitas

pueden funcionar como tamices moleculares actuando catalizadores con selectividad de forma.

1.7.3.4 Catlisis enzinitica.

Desde el principio de los tiempos, el hombre ha empleado grasas, aceites y ceras para una gran

variedad de propsitos. La necesidad de aumentar y mejorar la produccin, inicialmente di lugar a

la puesta a punto de procesos tales como la fermentacin, que a penas ha empezado a evolucionar hasta

ahora. La necesidad de mejorar y modernizar este tipo de procesos ha dado paso a una nueva rama

dentro de la ingeniera qumica: la biotecnologa [RA1TRAY, 1984].

La biotecnologa ha cobrado ltimamente gran importancia, tanto a nivel industrial como a

nivel de investigacin. Los procesos enzimticos constituyen una de las ramas ms importantes dentro

de esta disciplina debido a los continuos avances que se estn consiguiendo dentro del campo de la

ingeniera qumica con este tipo de sistemas. La antigtia tecnologa empleaba tejidos ntegros de

animales o plantas, e incluso cepas de microorganismos completas. La tecnologa actual ha hecho

posible el aislamiento, purificacin, caracterizacin, e incluso procedimientos de ingeniera gentica,

que han dado lugar al empleo de estos sitemas en forma de clula simple o sistemas enzimticos (ver

figura 1.4).
64 Introduccin

ALIMENTACION
DOSMEliCA

PLAW1CW

AOT1WE

INDJSTRA
F AAIACEJJI1CA

p~IcT~
EFECIAL ES

EIa~Qt8tBTrBLE LUDRCAHrE

Figura 1.4. Desarrollo y aplicaciones de la Biotecnologa

Las enzimas son biomolculas con actividad cataltica, generalmente de carcter proteico, es

decir, estn formadas mediante la polimerizacin de unidades peptdicas. Las enzimas utilizadas para

la sntesis de steres son las denominadas lipasas, cuya especificidad varia en cada caso, dependiendo

de su naturaleza [HILLS, 1990; BERGER, 1992]. En general muesan regioespeciflcidad hacia los

grupos hidroxilos y una estereoespeciflcidad que puede permitir a algunas de ellas que acten sobre

un nico ismero ptico [LAZAR, 1986; SANTANIELLO,1993].

Se han desarrollado procedimientos con lipasas seleccionadas e inmovilizadas de forma que

se aumenta su termoestabilidad y se retrasa su desactivacin, a la vez que se facilita su manejo y la

separacin posterior de la mezcla de reaccin [EIGTVED, 1988; IBRAHIM, 1988; CARTA, 1991].

La utilizacin industrial de los procesos enzimticos ha sido muy limitada hasta ahora, por la

inestabilidad relativa de las enzimas en disolucin acuosa, que origina una rpida prdida de la

actividad cataltica. Otro factor de desventaja ha sido el coste de aislamiento y purificacin [HUGE-
Mtodos para la Obtencin de Esteres 65

JENSEN, 1988], unido a las dificultades que supone la recuperacin de la enzima una vez completado

el proceso cataltico [HOQ, 1984; YAMANE, 1988; VAN DER PADT, 1992].

Las lipasas (triacilglicerol hidrolasas EC 3.1.1.3) se han venido empleando con xito como

biocatalizadores en reacciones de esterificacin y reacciones de intercambio de grupos ster como

acidolisis, alcoholisis y transesterificacin. El mecanismo de esterificacin transcurre a travs de un

intermedio acil-enzima. La reaccin tiene lugar en la interfase entre el agua y el substrato insoluble.

Esta interfase constituida por agua y aceite es esencial para conservar la conformacin y la actividad

cataltica de la enzima. En el caso de una enzima inmovilizada, la interfase se obtiene inmovilizando

la cantidad necesaria de aguajunto con la enzima. La reaccin es reversible, y en condiciones de baja

concentracin de agua la enzima actuar a la inversa, es decir tendr lugar la formacin del ster en

lugar de su hidrlisis [SCHUCH, 1989]. El esquema fundamental, que representa el mecanismo de la

reaccin en la estn involucradas tanto la formacin de ster como el agotamiento de este en favor de

sus reactivos iniciales, es el que se muestra a continuacin.

HIDROLISIS ENZIMATICA
HOH R1OH

R1OH o HOH o

R~OR R4! Emana

Enzima

ESTERIFICACION ENZIMATICA
R1OH> HOH

HOH R1OH o
RCOH
ci ~-fr~m
Rc 2~ RC 0R1

Enzinn Enzinn
66 Introduccin

Como se ha mencionado anteriormente, adems de las reacciones de esterificacin e hidrlisis.

las lipasas son capaces de producir steres empleando otro tipo de reacciones. interesterificacin y

transesterificacin. Concretamente, el trmino transesterificacin est referido a la obtencin de un ster

detenninado, empleando otros dos steres de partida, los cuales, mediante catlisis enzimtica, son

capaces de intercambiar sus cadenas originales. El trmino interesterificacin incluye las reacciones de

alcoholisis y acidolisis, que fundamentalmente consisten en el intercambio de la cadena cida o

alcohlica con la correspondiente cadena del ster de partida, con lo que se consigue un ster diferente.

Algunos autores incluyen dentro de este ltimo tnnino e] de reaccin de transesterificacin, ya que

el mecanismo de reaccin de esta ltima no difiere bsicamente de los anteriores. A continuacin se

muestran los esquemas correspondientes a estas reacciones [LINFIELt), 1984; HANSEN, t986].

ALCOHOLISIS ENZIMATICA
ROl! O
O ROH
1 o 2
II II
Enzima~sc~t!~tR 00R2
R

Enzima Enzima

ACIDOLISIS ENZIMATICA
O
II

O R-C-OH o
II ~~-w..- II II
RCOR1~~R CEnziIna~~R c 0112
~~2
Enzima Enzima

TRANSES TERIFI CACI QN ENZIMATICA


O
II

ROH O R-C-0R3 O
II 1 II II
11 c-----OR1~~~R cEnziina-----~..=,~- R C 0113

Enzima Enzima
Mtodos para la Obtencin de Esteres 67

La enzimologa moderna ha realizado grandes avances en el desarrollo de las tcnicas de

inmovilizacin de enzimas. La inmovilizacin elimina la gran parte de las desventajas anteriormente

mencionadas y permite la utilizacin de las enzimas en los procesos continuos de manera similar a la

utilizacin de los catalizadores clsicos [LIE, 1991; MOJOVIC, 1993].

Las enzimas inmovilizadas se definen como enzimas que son ITsicamente confinadas o

localizadas en ciertas regiones con retencin de su actividad cataltica, y que pueden ser reutilizadas

repetida y continuamente. El empleo de enzimas inmovilizadas supone una serie de ventajas sobre la

utilizacin de enzimas en disolucin [KENNEDY,1983], estas ventajas consisten principalmente en la

posibilidad de ser reutilizadas, la facilidad de recuperacin del medio de reaccin, la minimizacin de

residuos e impurezas, la posibilidad de operar en continuo y, en algunos casos, la inmovilizacin

contribuye a un aumento de la estabilidad de la enzima [MESSING, 1975].

Los mtodos de inmovilizacin empleados pueden clasificarse segn sean la naturaleza del

soporte y de la interaccin responsable de la inmovilizacin [CHIBATA,1978]. En la figura 1.5 se

muestra se recogen los mtodos ms empleados para la inmovilizacin de enzimas.

La posibilidad de incluir enzimas en microemulsiones acuosas permite el estudio de la

transformacin de sustratos insolubles en agua en cantidades moderadas parcialmente solubles en agua

[BELLO,1986].El inters de la dispersin de un lquido en otro viene dado por la formacin de un

producto parcialmente acuoso que puede funcionar como agente tensioactivo.

Recientemente, la sntesis de steres procedentes de cidos grasos mediante catlisis enzimtica

ha cobrado gran atencin, ya que presenta claras ventajas sobre el procedimiento clsico, tales como

la selectividad con que se da la reaccin y las condiciones ms suaves del proceso, que conllevan un

gran ahorro energtico [HOQ,1984].


Si adems la enzima se emplea inmovilizada sobre un soporte que
68 Introduccin

aumente tanto su estabilidad trmica como su resistencia mecanica. su utilizacin a nivel industrial

adquiere un mayor inters [GERESH, 1991].

Figura 1.5. Clasificacin de los mtodos de inmovilizacin de enzimas.

Los beneficios que ofrece la utilizacin de enzimas a nivel industrial se resumen a

continuacin, y se considera que son principalmente tres [POSQRSKE,1984;LANGRAND, 1988]:

- La especificidad de la enzima da lugar a una modificacin particular de las molculas que

se deseen transformar, segn esto, basta elegir a enzima adecuada para obtener el producto deseado.

- Como una cantidad moderada de enzima permite alcanzar conversiones elevadas, podemos

trabajar con relaciones enzima/reactivos bajas, con lo que los parmetros de diseo no se ven afectados

por la utilizacin de un catalizador de tipo enzimtico; adems, las condiciones de presin y


Mtodos para la Obtencin de Esteres 69

temperatura son moderadas, por lo que los costes de operacin y las necesidades energticas no se ven

incrementadas.

- Finalmente, los procesos enzimticos tienden a un bajo coste de tratamiento. Normalmente

las enzimas son biodegradables y su dosificacin no suele exceder el 1% del substrato, debido a esto,

los efluentes de una planta que trabaje con enzimas catalticas van a presentar una baja DBO, con lo

cual, los posibles contaminantes se eliminan con facilidad.

Por otra parte, algunos autores [ZAKS, 1985; BOYER, 1990] han demostrado la necesidad de

una pequea cantidad de agua para potenciar la accin enzntica. Esta conclusin se ha alcanzado a

travs de la certeza de que el agua acta directa o indirectamente sobre las interacciones no covalentes.

La eliminacin total del medio acuoso da lugar a la inactivacin de la enzima [CARTA, 1991].

Los estudios realizados por Gatfield [GATFIELD, 1980] revelan que las enzimas precisan un

cierta presencia de agua, pero que la conversin es inversamente proporcional al contenido de agua en

el medio de reaccin cuando se traspasa un lmite ya que, al tratarse de una reaccin de esterificaci,

cuando el aumento de la concentracin de agua es elevado, el equilibrio se desplaza hacia la formacin

de reactivos. Lo mismo sucede cuando se emplea un disolvente orgnico y se elimina totalmente el

contenido en agua del medio de reaccin, puesto que es necesaria una pequea cantidad de agua para

que el mecanismo de reaccin se verifique satisfactoriamente. Algunos autores [FABER, 1992] opinan

adems que una elevada concentracin de agua en el medio puede ser contraproducente para la

regulacin y el control de la especificidad y la enantioselectividad del complejo enzimtico por el

sustrato que se desea modificar.

Halling [HALLING, 1990] afirma que las lipasas en sistemas bifsicos ofrecen un potencial

considerable para la industria dedicada a la conversin cataltica de aceites, grasas y reactivos qumicos
70 Introduccin

similares, y que debido a esto, algunos procesos sern comercializados en un futuro prximo. Adems.

concluye diciendo que los factores que influyen sobre el equilibrio en estos sistemas de reaccin. lo

hacen de manera lgica, pero que el conocimiento de las cinticas de reaccin, en cuanto a mecanismos

se refiere, es todava bastante limitado.

Z. Knez, junto con otros investigadores ha llegado a la conclusin de que la enzima Mucor

Miehei cataliza la sntesis de steres, la cual depende principalmente del tipo de alcohol utilizado y de

las condiciones de operacin [KNEZ, 1990]. Afinna que presenta una actividad elevada especialmente

para la sntesis de steres del cido oleico.

Los estudios realizados por Macrae corroboran la necesidad de una pequea cantidad de agua

presente el medio para que las enzimas puedan ser utilizadas como catalizadores efectivos en los

procesos de esterificacin y coincide con la necesidad de desarrollar una tecnologa enzimtica

adecuada y eficiente para introducir estos procesos definitivamente dentro del mbito industrial

[MACRAE, 1983 & 1989].

Algunos estudios realizados emplean diferentes tipos de enzimas, unas inmovilizadas y otras

no, aplicndolas a los diferentes tipos de process estudiados, con el fin de llegar a una optimacin

sobre el tipo de enzima que se debe utilizar. Las enzimas de mayor inters industrial son las lipasas

[SENIO, 1984; KOSUGI, 1987; SCI-IUCH, 1989; HIRATA, 1989].

Las lipasas son carboxilesterasas que hidrolizan los steres en medio acuoso. La diferencia las

lipasas y otras carboxilesterasas, tales como las proteasas o pectinesterasas, es que mientras estas

ltimas actan sobre los sustratos presentes en disoluciones acuosas homogneas, las lipasas slo actan

como enzimas hidrolticas de steres en la interfase lipdica-acuosa de los sistemas heterogneos. La

especificidad de las lipasas depende directamente de la longitud de la cadena del substrato que
Mtodos para la Obtencin de Esteres 71

pretendamos atacar y de la colocacin de los grupos funcionales existentes en el mismo. Pero adems

de estos, debemos tener en cuenta otros factores a la hora de disear un proceso de esterificacin

enzimtica [AIRES-BARROS,1989; ROY, 1993]. El principal problema que presenta la esterificacin

a escala industrial es que los reactivos o bien son slidos o bien son inniiscibles entre si, por lo que

caben dos posibilidades de actuacin en el diseo de la reaccin.

La primera posibilidad consiste en emplear un disolvente que sea capaz de mejorar la mezcla

de reactivos y mejorar el contacto entre las fases para poder llevar a cabo la reaccin. Se ha podido

observar que dependiendo del disolvente que se utilice, las lipasas pueden variar su actividad cataltica,

aumentandola o disminuyndola, llegando incluso a permanecer totalmente inactivas. Aquellos

disolventes en los que la lipasa se desactiva son los miscibles con el agua, lo que parece indicar que

estos disolventes extraen el agua esencial de la estructura de la protena, causando la ruptura de los

puentes salinos y fuerzas hidrfobas y destruyen, por desnaturalizacin, la estructura enzimtica.

Desnaturalizacin que puede ser reversible dependiendo del grado de deshidratacin alcanzado en la

estructura de la lipasa. Este factor ha de ser tenido por tanto en consideracin a la hora de proceder

a la esterificacin enzimtica [HIRATA, 1989; JOHN, 1990; KNEZ, 1990; MILLER, 1988].

La segunda posibilidad consiste cii trabajar en las condiciones ms adecuadas desde el punto

de vista termodinmico [PECNIK, 1992; ALVAREZ, 1993]. Es decir buscar condiciones de presin

y temperatura en las que todos los reactivos se encuentren en fase lquida para que el contacto entre

las fases mejore y la mezcla de reaccin sea homogenea. Lgicamente, las limitaciones a esta

posibilidad van a venir dadas por la naturaleza de las especies involucradas en el medio de reaccin.

Las presiones de vapor de los reactivos son un factor determinante en las reacciones de esterificacin,

y cuando el catalizador es una lipasa inmovilizada [MALACATA, 1990], el intervalo de trabajo se

reduce an ms. En este caso la velocidad de agitacin, cuando se trate de un reactor tipo tanque

agitado, vendr limitada por la resistencia mecnica del soporte sobre el que est inmovilizada la lipasa
72 Introduccin

[CHEN,1989; MALACAT, 1991]. La posibilidad de trabajar a vaco para eliminar el agua del medio

de reaccin, y as desplazar el equilibrio hacia la formacin de productos, es viable, siempre y cuando

est garantizado el agua de constitucin que precisa la enzima para mantener su actividad cataltica.

Sin embargo, con el parmetro temperatura, las posibilidades son escasas [LOPES,1993;
VALVETY,

1991].

Generalmente, an cuando las lipasas estn inmovilizadas en soportes que aumentan

considerablemente su resistencia trmica, la temperatura de trabajo no puede superar los 80-1000C, Jo


que supone que en determinados casos, los reactivos permanezcan en fase slida y la reaccin no se

pueda llevar a cabo fcilmente [ROY, 1993]. Cuando la temperatura aumenta por encima de la

temperatura umbral permitida por la lipasa, la actividad comienza a caer a gran velocidad. Existe un

intervalo por encima de dicha temperatura, en el cual la lipasa pierde su estructura globular con la

consiguiente prdida de actividad, pero si disminuye la temperatura la enzima es capaz de volver a

recuperar su conformacin original [LOPES, 1993]. Cuando este fenmeno tiene lugar, se dice que la

enzima se desnaturaliza por accin trmica. En cambio, si la temperatura sigue aumentando, lo que

sucede es que la lipasa se desactiva por efecto de la temperatura y la recuperacin de su actividad es

irreversible.

Debido a que la disponibilidad de lipasas en la naturaleza es muy variada y a que la

especificidad de las mismas lo es an ms, la eleccin de una lipasa como sistema cataltico va a venir

dada por las caractersticas del proceso que se vaya a poner a punto. Por tanto hay una necesidad

fundamental de estudiar todos y cada uno de los parmetros que se ponen en juego en dicho proceso,

tales como variables de operacin y naturaleza de los diferentes sustratos que van a intervenir en la

reaccin. Pese a la dificultad existente en clasificar las lipasas desde el punto de vista de su empleo

como catalizador, segn las materias primas a partir de las cuales se obtienen este tipo de catalizadores,

podemos dividir las lipasas en tres grupos fundamentales:


Mtodos para la Obtencin de Esteres 73

(a) Lipasas obtenidas a partir del pncreas de cerdo, del cul slo se obtienen esterasas de baja

actividad, proteasas y amilasas.

(b) Lipasas obtenidas a partir del estmago de ciertos animales, estas enzimas catalizan la

hidrlisis de los cidos grasos de cadena corta presentes en la leche, para la preparacin de quesos.

(c) Lipasas obtenidas por fermentacin de cepas bacterianas, fngicas y microbianas. Este tipo

de lipasas, adems de hidrolizar sustancias grasas, tambin las sintetizan, de ah su elevado inters

industrial. A este grupo pertenecen las especies Aspergillus, Cndida cylindracea, Rhizopus, Mucor,

fosfolipasas y pseudomonas.

En cuanto a su empleo desde el punto de vista industrial dentro del campo del proceso de ceras

grasas y aceites, en la tabla 1.19 se recogen las lipasas ms empleadas en los procesos que emplean

reactores de soporte de membrana. En la tabla 1.20 se recogen algunos de los procesos que emplean

reactores de lecho fijo, la tabla 1.21 presenta los procesos en los que se emplean enzimas inmovilizadas

en tanques agitados que operan en continuo y la tabla 1.22 los que emplean un tanque agitado que

opera en discontinuo o por cargas. En ellas se detalla el tipo de reactor, la fuente de procedencia de

la lipasa, el soporte sobre el que est inmovilizada, as como el mtodo de inmovilizacin y el tipo de

reaccin que se lleva a cabo.

Tabla 1.19. Reactores de membrana.

Fuente de
Tipo de Reactor Metodo de
InmovIlIzacin Reaccin Refe,tncla
Lipasa

Membrana sumergida Pseudomonas Entrapainiento MBBAe> Hidrlisis Karube 1977


Mucor Entrapantiento MEBA Hidrlisis Suzuki 1977
Fibras cruzadas C. rugosa Adsorcin CHBPr> Esterific. Van Der Padt 1990
c. rugosa Adsorcin Celulosa Hidrlisis Pronk 1988
Flujo tangencial C. cylindracea Adsorcin Celulosa Hidrlisis Hoq 1985
1?. joponicus Adsorcin Polipropileno Esterific. Hoq 1985
M. miehel Polipropileno
P. fluorescens
C. viscosum Adsorcin Esterific. Hoq 1984
A. niger Adsorcin Polipropileno Hidrlisis Malacata 1990
Flujo a travs de C. cylindracea Adsorcin Polipropileno Hidrlisis Erad> 1988
membrana C. cylindraceo Adsorcin Polipropileno Hidrlisis Brady 1986
T. anuginosus Adsorcin Polipropileno Hidrlisis Taylor 1986
Acrlica
CHBP: 4-ciano-4-bepti1b~o. EA: 4-metoxibencilideno-4-butilanilina.
74 Introduccin

Tabla 1.20. Reactores de lecho fijo.

Fuente de Lipasa Metodo de


InmovIlizacin Sopote Reaccin Referencia

Aspergillus niger Adsorcin Zeolita Interesterificacin Macrae 1985


Mucor miehei
A spergiflus niger Adsorcin Resma lnteresteflcacin Macrae 1983
G. candidun,
Rhizopus niveus
.4 spergillus niger Enlace covalente Vidrio poroso Hidr6flsis Kobayasbi 1980
1. fuorescens Adsorcin
Rhizopus japonica
Rhizopus delemar
C. cyindracea
Poncreas de cerdo
Pancreos de cerdo Adsorcin Sphewsil Hidrlisis Lavayre 1982
C. cylindracea
C. cyindracea Entrapamiento ENTP ~ Hidrlisis Kimura 1983
Adsorcin
Enlace covalente
Humicola anginosa Entrapainiento ENTP. Amberlita Hidrlisis Omar 1988
Cross-linking Alginato clcico
C. cylindracea Adsorcin HOPE <.> Hidrlisis Brad> 1988
C. cylindracea Adsorcin Polipropileno Hidrlisis Brady 1986
Rhizopus o.rrhizus Adsorcin Zeolita Interesterificacin Wisdom 1987
Rhizopus an*izus Enlace celular Fngico Hidrlisis Bel! 1981
Rhizopus anhizus Enlace celular Ftingico Esterificacin Patterson 1979
Mucor miehel Intercambio inico Resma Interesterificacin Posorske 1988
Macar miehd Intercambio jnico Resma lnteresteflcacin Hansen 1986
Esterificacin
Mucor miehei Adsorcin Zeolita lntnesterificacin Ison 1988

t~ BNTP: Polipropilenglicol. HOPE: Polietileno de alta densidad.

Tabla 1.21. Reactores continuos tipo tanque agitado y lecho fluidizado.

Tipo de Reactor Fuente de Metodo de


Lipasa InmovIlIzacIn Soporte Reacdon Referencia

Lecho fluidizado Pancreas cerdo E. Covalente Metlico Hidrlisis Lieberman 1975


Cross-linking Poliacrilamida
CSTR t.~ <IX cylindracea Adsorcin Zeolita Hidrlisis Brad> 1986
Celulosa Erad> 1987
Gel de slice Brad> 1988
Resma
Almina
CPG c.~
Carbono
Nylon
HDFE t>
Polipropileno
C5TR ~ R. arrhizus E. celular Fngico Estefc. Takahashi 1987

ti CSTR: Reactor continuo tipo tanque agitado. CPG: Vidrio poroso controlado. HOPE: Polietileno de alta densidad.
Mtodos para la Obtencin de Esteres 75

Tabla 1.22. Reactores discontinuos tipo tanque agitado.

Metodo de
Fuente de Lipasa inmir Sopaste Reaccin Referencia

Geotricum candidum Adsorcin Vidrio poroso Esterificacin Marlot 1985


Aspergillus niger Entrapamiento Almina
Mucor miehei Zeolita
Pancreas de cerdo Poliuretano
Candida cylndracea
Rhizopus arrhizus
Aspergillus niger Adsorcin Zeolita Interesterificacin Macrae 1985
Mucor miehei
Aspergillus niger Adsorcin Resma Interesterificacin Macrae 1986
Candida cylndracea
Ceotricum candidum
Pancreas de cerdo Enlace covajente Sepbadex Hidrlisis Melius 1974
Celulosa
Aspergiltus nger Enlace covalente Vidrio poroso Hidrlisis Kobayashi 1980
P. jluorescens Adsorcin Sheparose
Rhizopus japonica Dowex
Candida cylindracea
Pancreas de cerdo Enlace covalente Sepharose Hidrlisis Patton 1988
Candida cytindracea Entrapamiento Duolite, Zeolita Hidrlisis Tahoun 1986
Adsorcin CPGr>
Enlace covalente
Rhizopus deterner Entrapainiento Zeolita Interesterificacin Yokoceki 1982
Adsorcin Poliuretano
AEC, CPG (1
Candida cylindracea Enlace covalente Agarosa Hidrlisis Kilaia 1977
Sepharose Hidrlisis Kilaia 1981
Entrapamiento Poiacrilamida
Semilla de algodn Enlace covalente Poliamida Hidrlisis Rakhimov 1977
Pancreas de cerdo
Mucorjavanicus Enlace coya]ente ABC ~ Hidrlisis Ogiso 1972
Intercambio inico Agarosa
Celulosa
Candida rugosa Entrapamiento Polietilenglicol Hidrlisis Kwon 1987
Rhizopus arrhzus Interesterificacin
Rhizopus deterno Entrapamiento Alginato clcico Hidrlisis Kawashimna 1976
Alginato sdico
Humicota lo.uginosa Entrapamiento AECQ) Hidrlisis Omar 1988
Adsorcin Polluretano
Cross-linking Amberlita
Aspergillus o~yzae Microencapsulacin Manteca Hidrlisis Pannel 1989
AspergUlus niger
C. viscosum Microencapsulacin Silice, Dextrano Hidrlisis Kitajima 1969
Pancreas de cerdo Adsorcin Vidrio Hidrlisis Hills 1989
Semilla de coiza Adsorcin Zeolita Esterificacin Kadyrova 1983
Semilla de algodn Adsorcin Zeolita Interesterificacin Wisdom 1985
Aspergillus nger Adsorcin Zeolita Interesterificacin
CPG n
Candida nigasa Adsorcin Sephadex Hidrlisis Kang 1988
Rhizopus arrhizus Adsorcin Zeolita Interesterificacin Goderis 1987
P. mephidca Adsorcin DADA ~ Hdrlisis Kosugi 1979
Mucor miehel Intercambio inico Resma sinttica Esterificacin Miller 1988
Rhizopus oryzae Enlace covalente Almina Hidrlisis Neklyudov 1981
P. fragi Enlace covalente Magnetita Esterificacin Takahasbi 1987

c~ CPG: Vidrio poroso controlado. DADA: I,12-Diaminododecano Agarosa. ABC: Aminoetilcelulosa.


76 Introduccin

Por otra parte, cuando se valora el potencial de aplicacin de una nueva tecnologa para su

incorporacin en una produccin a escala industrial, deben tenerse en cuenta dos cuestiones

fundamentales: a) Si el proceso es capaz de producir el producto final deseado con un rendimiento

aceptable y si se obtiene el grado de pureza requerido (Viabilidad Tcnica), y b) Si el proceso puede

conseguir estos objetivos con unos costes razonables (Viabilidad Econmica). El primer factor va a

depender exclusivamente de los medios y de las materias primas empleadas. La lipasa empleada en el

proceso va a jugar uno de los papeles ms importantes, si no el ms importante. Uno de los problemas

que pueden presentarse es el fenmeno de la desactivacin trmica, por eso es necesario trabajar dentro

del intervalo que marquen las especificaciones de dicho catalizador sin que se produzca una calda

drstica de la actividad catalca con la consiguiente prdida de rendimiento que esto supondra. La

viabilidad econmica del proceso va a pasar precisamente por el tiempo de. vida medio de la enzima,

por lo que es importante que esta funcione con una actividad adecuada, sin perdida de actividad por

desactivacin tnnica y, que el rendimiento se mantenga constante en el proceso.

Para aumentar la estabilidad tnnica de la lipasa que se va a emplear como catalizador se acude

a la tcnica de inmovilizacin, pero hay ocasiones en que esta es insuficiente debido a las limitaciones

impuestas por la propia naturaleza de la lipasa en cuestin. Para subsanar este hecho, se ha recurrido

en muchos casos a otros mtodos de estabilizacin trmica. Los mtodos ms empleados estan

constituidos por la ingeniera gentica, la modificacin qumica y algunos tratamientos fsicos.

Son varios los autores que dedican su investigacin a la caracterizacin e identificacin de las

lipasas para poder aplicarlas a procedimientos para la obtencin de productos de qumica fina con una

mayor selectividad y estabilidad. Algunos ejemplos incluyen el estudio de la cepa de A spergillus nigeT

que produce lipasas muy especficas para residuos cidos de cadena corta [MACRAE, 1983], o la cepa

de A spergiflus Oyzae, que produce lipasas capaces de generar cierto tipo de aditivos potenciadores

del sabor [ARBIGE,1986]. Las tcnicas de recombinacin de DNA han aumentado considerablemente
Mtodos para la Obtencin de Esteres 77

el potencial de nuevas investigaciones relacionadas con las lipasas. Este inters ha venido dado por su

aplicacin a la industria de coagulacin de quesos [BARACH, 1985]. Los mecanismos de produccin

de las lipasas estn controlados por los diferentes genes que constituyen su cdigo gentico y este sera

el que determine la estructura y las caractersticas del complejo enzimtico. Para modificar estas

estructuras proteicas hay que tener en cuenta tres factores fundamentales: Las interacciones existentes

con los diferentes tipos de estructuras lipdicas, la degradacin parcial efectuada por las proteasas que

coexisten con las lipasas y el equilibrio de asociacin-disociacin de las subunidades que constituyen

la estructura de la lipasa.

Los tratamientos qumicos ms comunmente empleados, involucrados en la modificacin de

lipasas o en la modificacin de su actividd son los tratamientos con disolventes orgnicos. El

disolvente ms utilizado para este fin es el propilenglicol [TAKAHASHI, 1987]. Este procedimiento

asegura la hidratacin en los alrededores de la lipasa y permite su buen funcionamiento.

El otro procedimiento empleado para aumentar la estabilidad de las lipasas est constituido por

los mtodos de inmovilizacin, cuyas propiedades y beneficios aplicados a las enzimas en general y

a las lipasas en particular ya han sido suficientemente detallados anteriormente.


78 Introduccin

1.8 VARIABLES DE OPERACION EN LOS PROCESOS DE ESTERIFICACION

Las variables que influyen en los procesos de esterificacin cataltica que se llevan a cabo en

reactores tipo tanque agitado que opera en discontinuo son las que se indican a continuacin:

- Temperatura. - Presin.

- Tiempo de operacin. - Catalizador: naturaleza y concentracin.

- Relacin molar entre reactivos. - Velocidad de agitacin.

El tiempo de operacin para alcanzar una determinada conversin depende de la temperatura,

presin y concentracin de catalizador, y suele estar comprendido, en la mayora de los procesos de

esterificacin, entre 90 minutos y 7horas [McCRACKEN, 1967; NAVROCIK, 1985; GIMENEZ, 1987;

GOTO, 1991 & 1992; GARCA, 1993].

Los lmites de temperatura y presin de trabajo vienen generalmente determinados por los

puntos de fusin y ebullicin de los reactivos y productos, y en nuestro caso, tambin por las

especificaciones del sistema enzimtico empledo como catalizador.

En la mayora de la bibliografa consultada, las condiciones de presin varan entre trabajar a

vaco y a presin atmosfrica, mientras que los rangos de temperatura utilizados, para el caso de la

catlisis enzimtica, oscilan entre 400C y 900C.

Dependiendo del cido y alcohol de partida, el ster obtenido puede ser de diferentes tipos. As

tendremos steres ms o menos voltiles segn sean las volatilidades de los reactivos de partida.

Cuando los steres formados presentan una volatilidad media o alta, es necesaria la formacin de

azctropos para la eliminacin del agua formada en el medio de reaccin, en el caso de que el

rendimiento de la reaccin no sea satisfactorio.


Variables de Operacin en los Procesos de Esterificacin 79

En el caso de los steres poco voltiles, pueden presentarse dos situaciones en relacin con el

cido y el alcohol de partida: La primera es que ambos presenten baja presin de vapor y por tanto una

baja volatilidad, por lo que, al ser estos steres poco voltiles, el componente ms voltil de la mezcla

de reaccin va a ser el agua, el cual puede eliminarse del medio por una simple purga con un gas inerte

o por destilacin continua, aplicando condiciones de vaco. Por el contrario, cuando uno de los

reactivos o los dos sean voltiles, segunda situacin posible, presentarn presiones de vapor segn las

cuales el proceso de eliminacin del agua aplicando vaco, es inviable, puesto que arrastraramos los

reactivos ms voltiles con el agua. Por este motivo el sistema empleado no puede trabajar a presiones

inferiores a la atmosfrica. Si en esta situacin los resultados son aceptables, no habra inconveniente

en operar hasta alcanzar la conversin de equilibrio.

En el caso de que la anterior situacin no tuviese lugar, sera necesario considerar la

modificacin del sistema de reaccin para operar, por ejemplo, con un sistema de separacin de los

componentes de la fase vapor y recircular al reactor dicha corriente en fase lquida y exenta de agua.

Lgicamente pueden emplearse otro tipo de procedimientos como pueden ser el empleo de tamices

moleculares para la retencin del agua, o una operacin en semicontinuo por adicin de los reactivos

ms voltiles.

En los casos que aqu se van a exponer, todos los compuestos involucrados en los diferentes

medios de reaccin presentan presiones de vapor que hacen viable trabajar en condiciones de vaco,

a excepcin de uno de los reactivos, el alcohol isopropilico, sin embargo la mezcla de reaccin final

trabajando a presin atmosfrica sin eliminacin de agua, presenta una conversin de equilibrio

adecuada para su aplicacin en el mercado.


80 Introduccin

1.9 OBJETIVOS Y PLAN DE TRABAJO

Debido al elevado nmero de aplicaciones de las ceras objeto de la presente memoria y las

limitaciones que presenta su obtencin, en unos casos a partir de fuentes naturales y, en otros, mediante

sntesis, es necesario sustituir los productos naturales por compuestos anlogos en sus caractersticas

fsicas y qumicas para su utilizacin por parte de lasindustrias interesadas en su aprovechamiento, y

mejorar los procedimientos de sntesis con el fin de obtener mejoras de calidad y de tipo econmico.

Los compuestos anlogos para los aceites de jojoba y de cachalote, se obtendrn a partir del

cido oleico y los alcoholes oleico y cetlico respectivamente. Tanto el cido oleico como el alcohol

oleico pueden obtenerse a partir del aceite de oliva, mientras que el alcohol cetilico se obtiene a partir

del aceite de palma. Estas materias primas son bastante comunes en Espaa, por lo que el precio de

las materias primas va a influir positivamente en el factor econmico del proceso.

En cuanto a los dems productos objeto de sntesis, puede decirse que las materias primas de

partida son bastante asequibles en cuanto a calidad, cantidad y precio. Si, adems, tenemos en cuenta

el elevarlo valor aadido de los productos obtenidos, as como sus numerosas aplicaciones y demanda

por parte del mercado, la posibilidad de hacer viable el procedimiento de obtencin puede considerarse

atractiva, tanto desde el punto de vista econmico, como tcnico.

Por otra parte, la escasez de modelos cinticos, segn las fuentes bibliogrficas consultadas,

para la sntesis de este tipo de steres, empleando sistemas enzimticos como catalizador, nos lleva a

la proposicin de determinar modelos cinticos que describan el campo experimental ensayado, con

el fin de obtener informacin til tanto para el diseo del reactor, como para la puesta en planta del

proceso.
Objetivos y Plan de Trabajo 81

Con el fin de conseguir los objetivos propuestos, se han planteado una serie de lineas de

actuacin que constituyen el presente plan de trabajo, y que se resume en los puntos que se muestran

a continuacin:

1- Realizar un estudio bibliogrfico a cerca de las sustancias con que se va a trabajar y de los

distintos modos de operacin viables para nuestro caso concreto, con el fin de obtener la

informacin necesaria para plantear el proceso de snteis.

2- Puesta a punto del mtodo de anlisis con el fin de identificar las especies en el medio de

reaccin, as como cuantificar dichas especies lo largo tiempo transcurrido en proceso.

3- Estudio discriminatorio en la eleccin dl sistema cataltico enzimtico.

4- Estudio de las variables que influyen sobre el proceso de esterificacin, as como la

cuantificacin y optimacin de las mismas.

5- Realizacin de experimentos cinticas con el fin de estimar la influencia de las variables de

operacin sobre la velocidad de reaccin.

6- Elaboracin y discusin de resultados dirigida hacia la proposicin de modelos cinticos que

explique el comportamiento del proceso y permita el diseo del reactor.


82 Introduccin

1.10 BIBLiOGRAFIA

AIRES-BARROS, MR., CARRAL, J.M.S., WILLSON, R.C., HAMEL, J.F.P. and COONEY, CL.,

Esterification-coupled extaction of organic acids: Partition enhacement and underlying reaction and

distribution equilibria, Biorechnol. Bioeng. 34 pg 909-915 (1989).

AL-SAADI, AN., and JEFFI4EYS, G.U .,Esterification of butanol in a two-phase liquid-liquid system.

Quaternary phase equilibria studies, A IChE i., 22 (5) pg 754-776 (1981).

ALVAREZ, 1. and MERAZ, M., Control of enzyme activity in stirred bioreactors, Chern. Eng. il

pg Rl 1-Ri (1993).

Anexo al Convenio Internacional para la Regulacin de la Pesca de la Ballena (1988).

ARBIGE, M.V., FREUND, PR., SILVER, F.C. and ZELKO, J.T., Nobel lipase for cheddar cheese

flavor development, Food Technol., 4D pg 91-95 (1986).

ASmE, Ml., SCHIAEFFER, B. and OBELAND, CO., Catalysis with cation-exchange resins, JA ni.

Chem. Soc., 22 pg 3643-3647 (1955).

AUSTIN, O. T. Shreves Chemical Process Industries. St Ed. MCGraw-Hill International Editions.

Chemical Engineering Series. (1988).

AVIDON, y. and SHANI, A., Functionalization at te double bond region of Jojoba oil. Production

of ainines via azides, JA OCS, 21. (9) pg 993-997 (1994).

AYERZA, R., Effect of irrigation on jojoba oil production under aid chaco conditions II. JA OCS,

2fl (12) pg 1225-1228 (1993).

BAILEY, A.E. Industrial Oil and Pat Products. Ed. Interscience Publishers Inc. New York (1945).

BAKER, R. and BORDWELL, FO,, Modification of alcohols using tin chloride. Org. Syn. Col?.,

3 pg 141-145 (1955).

BARACE, J.T., TALBOT, L.L. and BUSCH, 5., Enzyme preparation for accelerating te aging

process of cheese, 1. Daby Sel., ~ pg 69-75 (1985).


Bibliografa 83

BARLOW, S.M. Nutritional Evaluation of Long Chain Fatty Acids in Fish Oil. Ed. Academie Press.

New York (1980).

BASIRON, Y. and IBRAHIM, A., Palm oil: Od myths, new facts JNFORM, 5 (9) pg 977-980

(1994).

BAYLEY, BE.; CARTER, N.M. and SWAIN, L., The chemistry of marine oils, Fish Res. It Can.

Ottawa MilL, 8~ pg 413-418 (1952).

BEANE, G.A.; GSCHWENDER, J.L. and SNYDER, C.E., Military aircraft propulsion lubricants.

Cunent and fliture trenOs, 1 Syndz. Lubricanis, 3 (4) pg 263-267 (1987).

BELL, O.; TODD, IR., BLAIN, .LA., PATIERSON .1.D.E. and SHAW, C.E., Hydrolysis of

triglycerides by solid phase lipolytic enzymes of Rhizopus arrbizus in continuous reactor systems,

BiotechnoL Bioeng., 23 pg 1703-1709 (1980).

BELLO, M.; PIEVIC, M. and ADENIIER, C. R., Transesterification, interesterification and ester

synthesis catalyzed by lipases in microemulsions, A cad. Set Paris, 3. serie III, (5) pg 296-300 (1986).

BERGER, M.; LAUMLEN, K. and SCHNEIDER, MP., Enzymatic esterification of glycerol 1. Lipase-

catalyzed synthesis of regiosomerically pure 1,3-sn-diacylglycerols, JA OCS, ~2 (10) pg 955-960

(1992).

BERGER, M.; LAUMEN, K. and SCHNEIDER, MP., Enzymaticesterification of glycerol II. Lipase-

catalyzed synthesis ofregioisomerically pur 1 (3)-rac-Monoacylglycerols, JA OCS, ~2(10) pg 961-965

(1992).

BERMAN, S.; MELNICHUK, I.L. and OTEMER, D.F., Dibutyl phtalate reaction rate ofesterification

, Ivzd. Eng. Chem., 4Q (7) pg 1312-1319 (1948).

BERTIA, V.K. and GULATI, I.B., Chemisny and utilization ofjojoba, Chem. ETa, II pg 137-144

(198 1).

BHATIA, V.K., CHAUDRHY, A., SIVASANKARAN, G.A., BISHT, R.P.S. and KASHYAP, M.,

Modification of jojoba oil for lubricant formulations, JAOCS, 2(1) pg 1-7 (1990).
84 Introduccin

BILBAO, J., GONZALEZ, J.R., GONZALEZ, JA. and AGUAYO, A.T., Kinetics of gas-phase

esterification of acede acid and n-butanol, Anal. Quinn. &i pg 155-161 (1984).

BOCIINER, M., Ion exchange resin-catalyzed esterification of salicylic acid withmethanol, md. Eng.
Chern. un., 4 pg 314-318 (1965).

BOEKENOOGEN, M.,Determination of soap iii refmed oil. Oh. Ven. OUa., 2 pg 143-145 (1941).

BOYER, J.L., GILOT, B. anO GUIRA UD, R., Heterogeneousenzymatic esterification: analysis ofthe

effect of water, Appl. Microbio?. Biozechnot, fl pg 372-376 (1990).

BRADY, C., METCALFE, L, SLABOSZEWSKI, D. anO FRANK, D.,Hydrolysis of fats, LS. Pat,

4,629,742 (1986).

BRADY, C., MIETCALFE, L., SLABOSZEWSICI, D. and FRANK, D., Hydrolysis of fats

(extension), Ibid, 4,678,580 (1987).

BRADY, C., METCALFE, L., SLABOSZEWSKI, D. and FRANK, D., Lipase immobilized on a

hydrophobic microporous support for te hydrolysis of fats, JA OCS, ~ pg 917-922 (1988).

BROCKERHOFF, H., HOYLE, R.J., LIWANG, P.C. and L1ICHFIELD, C.,Structural lipids lii marine

and vegetable oils. Lipids, 3. pg 24-30 (1968).

BROWN, CE. and COOK, C.D., Antiwear lubricants containing B esters. Org. Syn. Col)., 41 pg

79-82 (1961).

BUSSON, S.J., FARINES, M. and SOULIER, Ji, Jojoba wax: Its esters and some of its minors

components, JA OCS, fl. (9) pg 999-1002 (1994).

CALMAN, C. and KRESSMAN, T.R.E., Ion Exchanger on Organic Chemistry anO Biochemistry.

CARTA, O., GAINER, J.L. and RENTaN, A.H., Enzymatic synthesis of esters using an immobilized

lipase, Biotech. Bioeng. 32 pg 1004-1009 (1991).

CREN, C.S. anO SIH, C.J., General aspeas and optimization of enantioselective biocatalysis in

organic solvents: The use of lipases, Angw. Chem. nl. Ed. Erig. Za pg 695-707 (1989).

CHIBATA, 1., Inmobilized enzymes-research and development. Codansha, tokyo (1978).


Biblio2rafia 85

COPE, A.C. and HERRICK, E.C .,Esterification of monohydrated p-toluensulphonic acid. Org. Syn.

Col?. 4 pg 304-307 (1963).

CRAWFORD, M.A.,Structural lipids and their polyenoic constituents inhuman milk. RU. tal Sost.

Grasse, 42 pg 302-308 (1974).

DAKSHJNAMURTY, E, RAMAO, M.V.S. and RAMACHANDRAMURTY, Ch.V., Kinetics of

catalytic esterification of 1 -propanol with propanoic acid using cation-exchange resins, Chem. Tech.

Riorechnot, 34 pg 257-261 (1984).

DHNUKA, V.R., MALSHE, V.C. and CHANDOLIA, S.B., Kinetics of te liquid phase

esterification of carboxilic acids with alcohols in te presence of acid catalysts; reinterpretation of

published data, Chem. Eng. Set, 32 pg 551-556 (1977).

DIiXON, P., Vegetable oil impon barriers. An overview, INFORM, 5 (9) pg 974-976 (1994).

DORGAN, P.D., On te use of marine oils in cosmetic compositions. Drugs and Cosmetic md., (12)

pg 30-37 (1974).

DYERBERG, J.; BANG, HO.; SHOFFERSON, E.; MONCADA, 5. and VANE, J.R. Plama,

Cholesterol Concentration in Caucasian Daney. Ed. Lancet. pg 117-125 (1978).

EIGTVED, P.; HANSEN, T.T. and MILLER, C.A. Proceedings of te World Conference on

Biotechnology for te Fats and Oils Industry. Ed. Thomas H. Applewhite. American Oil Chemists

Society (1988).

ELVERS, B.; HAWKINS, 5. and SCHULZ, O. Ulimanns Encyclopedia of Industrial Chemistry. St

Ed. VCH. Weinheim. Gennany (1990).

ELLIGER, C.A., WAISS, J.A.C. and BOOTH, A.N., Isolation of a toxic factor from a jojoba oil.

LS. Pat, 3.929:432,11 Nov. (1975).

ERDOS, J., Electrochemical metbods in te synthesis of esterols, A ngew. Chem., ~3.pg 329-332

(1951).

FABER, K. and RUJA, S.,Enzyme-Catalyzed Irreversible Acyl Transfer, Shynthesis i.Q pg 895-910

(1992).
86 Introduccin

FORE, S.P.; MAGNE, F.C. anO BICKFORD, W.G., Epoxidized Jojoba oil as a stablizer for vinyl

cliloride plastics, JA OCS 35 pg 469-474 (1958).

FRIEDRICH, LP., Estimation of supercritical fluid-liquid solubility parameter differences for vegetable

oils. JA OCS, ~5 (1) pg 30-36 (1988).

GARCIA, T.; MARTINEZ, M. and ARACIL, J. Enzymatic synthesis of an analogue of jojoba oil:

Optimization by satatistical analysis. Eriz. Microb. Techno., i~ (6) ig 607-610(1993).

GARCIA, T.; MARTINEZ, M. anO ARACIL, 1. <Kinetics of tite enzymatic synthesis of an analogue

of jojoba oil. Traris ChemE. pan C, 21. (3) pg 47-51 (1993).

GATFIELD, I.L., Tite enzymatic synthesis of esters in nonaqueous systems, Am. N. Y. Acad. Sci,

pg 569-572 (1980).

GERESH, S. and GILBOA, Y., Enzymatic syntheses of alkyds. II: Lipase-catalyzed

polytransesterification of dichloroethyl fumarate with alipitatie and aromatic diols, B iorech. B loeng.,

32 pg883-888 (1991).

GIMENEZ, J.; COSTA, 1. anO CERVERA, S., Vapor pitase esterification of acetic acid with etanol

catalyzed by a macroporous sulfonated styrene divinylbenzene (20%) resin, md. Eng. Client. Res. 2fi

pg 198-202 (1987).

GISSER, II.; MESSINA, J. and CHASA, D., Jojoba oil as sperm oil substitute, Wear34pg 53-58

(1975).

GODERIS, H.L.; AMPE, O.; FEYTEN, M.P.; FOUWE B.L. and GUFFENS, W.M., Lipase-catalyzed

ester excitange reactions in organic media with controiled huxnidity, Ibid 30:258 (1987).

GOTO, S.; TAXEUCHI, M. and MATOUQ, MR, Kinetics of esterification of Palmidc Acid with

Isobutyl Alcohol, ini. 1 Client. Km. 23. pg 17-26 (1991).

GaTO, S.; TAKEUCHI, M. and MATOUQ, M.H., Kinetics of esterification of palmitic acid with

isobutyl alcohol on ion-exchange resin pellets, ini. Client. Km. 24 pg 587-592 (1992).
Biblio2rafa 87

COTO, M., COTO, M., NAKASHIO, E, YOSHIZUKA, K., INOUE, K. anO BABA, Y., Mechanism

of hydrolysis of triolein with upase in a holow fiber membrane-bioreactor, Ini. 1 Chern. Rin. 34 pg

410416 (1994).

COTO, M., COTO, M., KAMIVA, N., and NAKASHIO, F., Enzymatic interesterification of

Triglyceride with surfactant-coated lipase in organic media, Biotech. Bioeng., 4~ pg 27-32 (1995).

GUENTHER,E. andALTHAUSEN, O. Essential Oils. Ed. Van Nostrand Co. Inc.. New York. March

(1955).

GUNSTONE, ED.; HARWOOD, S.L. and PADLEY, F.B. Tite Lipid Handbook. Ed. Chapman and

Hall (1986).

GUNSTONE, FO. and NORRIS, F. Lipids in Foods . Ed. Pergamon Press. London (1982).

HALLINO, P. J., Lipase-Catalysed modification of oils and fats in organic two phase systems, os

Set Teclinot, 92~ (2) pg 3 14-320 (1990).

RANSEN, C.R., Pitotochemical oxidation offatty acid esters witih and without chloropyll. Ultraviolet

and infrared studies of products. Org. Sun. Col?. 3. pg 142-148 (1955).

HANSEN, T.T. and EIGTVED, P. A new immobilized lipase for interesterification and ester

synthesis, Actas of te World Conference on Emerging Technology of Fats and Oils in te Industry.

Ed. American Oil Chemists Society. pg 365-369. U.S.A. (1986).

HART, E. and SCHUETZ, R.D. OrganicChemistry. 4th Ed. ISE. Cap. 11, pg 256-265 (1980).

HILLS, M.; KIEWITT, 1. and MUKHERJEE, K.D., Enzymatic fractionation offattyacids: Enrichment

of gainma-linoleic acid and docosahexanoic acid by selective esterification catalyzed by lipases,

JAOCS, ~i (9) pg 561-564 (1990).

HILLS, M.; KIEWIIT, 1. and MUKHER.JEE, KO., Esterification reaction catalyzed by immobilized

lipase from oilseed rape (Brassica napus upase), Biochem. Soc. Traris., ji pg 478-482 (1989).

HINDS, W.E., Penicilhium products, U.S. Pos, ~ 929:432, 8 Nov. (1949).


88 Introduccin

HIRATA, 1-1.; HJGUCHL 1<. And VAMASRINA, Y., Enzyme Reaction in Or2anic Solvent III, Effect

of water content. Inhibition of alcohol for tite lipase catalyzed transesterification in tributyrin containing

1-octanol, Bu?). Chem. Soc. Jpn. 3~ (1) pg 48-52 (1989).

HOQ, M.M., YAMANE, T., SHIMIZU, S., FUNADA, T. and HISHIDA, 5., Continuous synthesis

of glycerides by lipase in a microporous membrane bioreactor, JA OCS, U pg 776-780 (1984).

HOQ, MM., TAGAMI, H., VAMANE, T. and SHIMTZU, S., Bioreactor for enzymic reaction of fat

and fatty acid derivatives. Pan U. Some characterictics of continuous glyceride synthesis by lipase in

a microporous hydrophobic membrane bioreactor, A gc. Rio)? Chan., 42 pg 335-339 (1985).

HUGE-JENSEN, B.; GALLUZZO, DR. AndJENSEN, R.G., Studieson freeandimmobilizedlipases

from Mucor Miehei, JA OCS ~5 (6) pg 905-909 (1988).

IBRAHIM, C.O., SAEKI, H., NISHIO, N. and NAGAI, S., Hydrolysis of triglyceridesby immobilized

thermostable lipase from Humicola lanuginosa, Agrie. Rio?. Client., 52(1) pg 99-105 (1988).

ISON, AP., DUNNILL, P. and LILLY, M.D., Hydrolysis of fats using immobilized enzymes, Eriz.

Microb. Teclino?., 111 pg 47-51 (1988).

JOHN, V.T. and ABRHAM, O. Biocatalysis for industry, Ed. In. Dordick, J., New York (1990).

KADYROVA, Z.K., ABDURAKHIMOV, A.S. and KHALNIYAZOV, ICK., Enzymic synthesis of

glycerides, Khirni. dr. Soedin. 4 pg 439-444 (1983).

KANG, ST. and RHEE, J.S., Effect of water on hydrolysis of olive oil by immobilized lipase in

reverse pitase systems, Biojeclinol. Leu. Mi pg 341-344 (1988).

KARUBE, I.W., YUGETA, Y. and SUZUKI, H., Electric field control of lipase membrane activity,

Bioteclinot Bioeng. jj pg 1401-1466 (1977).

KAWASHIMA, K. and UMEDA, K., Granular immobilized enzyme A grie. BIoL Client. 4~pg 1143-

1148 (1976).

KENNEDY, J. E anO CABEAL, J. M., Solid pitase biochemistry: Inmobilized enzymes. Ed. John

Willey and sons. New York (1983).

KILARA, A., Immobilized proteases and upases, Pmcess Bochem. .i.~ pg 25-30 (1981).
Bibliografa 89

KILARA, A. and WAGNER, FW., Preparation and citaracterization of immobilized lactose,

Bioteclinol. Bioeng. 12 pg 1703-1708 (1977).

KIMURA, Y., TANAKA, A., SONOMOTO, K., NIHIRA, T. and FUKUI, S., Application of

immobiized lipase to hidrolysis of trioleylglycerine. Sur. App?. Microbio?. Bioreclinol. .12 pg 107-

112 (1983).

KITAJTMA, M., MIVANO, S. and KONDO, A., Enzyme-containing microcapsules. Kog. Kagak.

Zass. 22 pg 493-498 (1969).

XLEIN, J. anO WIDDECKE, U., Alkilation of pitenois with gaseous olefias, Chcm. Eng. Tech. 54

(6) pg 595-596 (1982).

KNEZ, 1; LIETGEB, M.; ZAVRSNII<, D. anO LAVRIE, B., Synthesis of Olcie acid esters with

immobilized Lipase, Fat Sci. Teclino?. 92(4) pg 169-172 (1990).

KOBAYASHI, J., KATO, 1., OIzIMIYA, K. and SHIMIZU, S., Application of immobilized alkaline

protease to cheese-making. A gric. Bid. Chem. 44 pg 413-415 (1980).

KOSUGI, Y.; IGUSA, H. and TOMIZUKA, N., Olyceride production from hihg free fatty acid rice

bran oil using immobilez lipase, Yukagaku 3~ pg 769-775 (1987).

KOSUGI, Y.; SUZUKI, E. and RAMIBAYASHI, A., Immobiiztion of lipases, Jpn. Kok. Tok. KM.

Pat. 79:76,892 (1979).

KUBIE, W.L., Cold forming lubricants, JiS. Pat, 2921:874, 19 Jan. (1960).

KWON, RA.; I~!M, K.H. and RHEE, J.S., Hydrolysis of triglycerides in two-phase systems using

immobilized lipase. Kor. Appl. Microb. Bioeng. 15 pg 122-128 (1987).

LANGRAND, G., TRIANTAPHVLIDES, C. and BARATII, J.,Lipase catalized formation of flavour

esters, Bioech. Len., Mi (8) pg 549-554 (1988).

LAVAYRE, J. and BARA1TI, 3., Preparation and properties of immobiized lipases, Bioteclinol.

Bioeng. 24pg 1007-1012 (1982).


90 Introduccin

LANZAN1, A., BONDIOLI, P., CitA, L. anO FEDEL, E., Esrerificazione degli acidi grassi.

Metilazione, etilazione e isopropilazione di acidi grassi liberi in miscela, RU. Scsi. Cras., 63 pg 19-24

(1986).

LAZAR, O. A.; WEISS, s. and SCHIMD, R. O., Proceedings of tite world conference emerging

technology, fats and oils industry. Ed. A. R. Baldwin, 365-370, American Oil Chemists Society.

Champaigh, 1. L. (1986).

LENAR, Ch., Compositionof fatty structures in marine oils Rey. Franc. Corps. Cras., 25.pg 303-307

(1978).

LIE, E. and MOLIN, O., Hydrolysis and esterification with immobilized lipase on hydrophobic and

bydrophilic zeolites, Chem. Tech. Bioteclino?., 5Q pg 549-553 (1991).

LIEBERMAN, R.B. and OLLIS, D.F.,Compositions to enhancetal oil soappreparation. Bioteclinol.

Bioeng. 12 pg 1401-1407 (1975).

LINFTELD, W.M., BARAUSKAS, R.A., SIVIERI, L., SEROTA, S. and STEVENSON, R.W.,

Enzymatic fat hidrolysis and synthesis, JA OCS, Li. (2) pg 191-195 (1984).

LITCHFIELD, D. Analysis of Triglycerides. Ed. Academic Press. New York (1972).

LOPES, TI. and MALA CATA, F.X.,Optimal deign of a series of CSTRs for biochemical reactions

in tite presence of enzyme deactivation, CIem. Eng. Jpn., 2 (1) pg 94-98 (1993).

MACRAE, A. R.,Tailored triacylglycerols and sters, Biochem. Soc. Traris. (6)pg 421428 (1989).

MACRAE, A. R., Lipase catalyzed interesterification of oils and fats, JA OCS ~fl(12) pg 291-295

(1983).

MACRAE, A. R., Biocatalysts in Organic Synthesis Ed. 3. Tramper, H.C. Van der Plaas and P.

Linko. Ed. Elsevier. pg 195-205. Amsterdam (1985).

MAG, T.K., How processing has improved oil quality, INFORM, 5. (8) pg 926-929 (1994).

MAGDASSI, S. and SHANI, A., Surface activity of quaternary ammoniwn salts derived fromjojoba

oil, JAOCS, 62(9) pg 605-606 (1990).


Bibliografa 91

MALACATA, EX., HILL, CG. and AMUNDSON, CH., Hydrolysis of butteroil by immobilized

lipase using a hollow-fiber reactor: Pan II. Uniresponse kinetic studies, Biotech. Bioeng., 3~ pg 853-

868 (1991).

MALACATA, EX., HILL, C.G. and AMUNOSON, CH. Actas of lE]? Annual Meeting, Anaheim CA

(1990).

MLACATA, EX., REYES, H.R., GARCIA, H.S., HILL, C.G. andAMUNOSON, CH., Immobilized

lipase reactions for modification of fats and oils. A review, JA OCS, 62 (12) pg 890-910 (1990).

MALINS, D. anO VARANASI, US., Unusual wax esters from dic mandibular canal of tite porpoise

fIursiops gilli). Pmg. Client. Fais other Lipids, (10) pg 337-346 (1970).

MANGRANE, D. Progresos en la Qumica de los Aceites, Grasas y Derivados Industriales. Ed.

Espasa-Calpe. Madrid (1944).

MASAYUKI, T. Test Results on Safety on Jojoba Oil to be User for Cosmetics. Proceediings of

second International Conference on Jojoba Oil and titeir Uses. Ensenada. Mjico (1976).

MASAYUKI, T. andTAKESIII,K.,Creams substitutes compositions. Cosmer. and Toil. 95.pg 39-46

(1980).

MARCH, 3. Advanced Organic Chemistry: Reactions Mechanism and Structure. 3th El. John Wiley

and sons. New York (1985).

MARLOT, C.; LANDGRALND, g. TRIANTAPHYLIDES, C. and BARAITI, 3., Ester synthesis iii

solvents catalyzed by lipases immobilized on hydrophobic supports, B joteclinol. Lea., 2 pg 647-652

(1985).

McCRACKEN, D. J. and DICKSON, P. F., Reaction kinetics of cyclohexanol-acetic acid

esterification, md. Eng. Client. Proc. Res. Dey. 6 286-290 (1967).

MELIUS, P. and WANG, B.C., On tite use of enzymes in advanced fatty acid hydrolysis methods.

Adv. Exp. Mcd. Bici., 42~ pg 339-345 (1974).

MERGELL, A., IASC president urges freer frade, food aid, INFORM, 5. (11)pg 1281-1287 (1994).
92 Introduccin

MESSING, R. A., lnmobilized enzymes for industrial reactors. Ed. Academic Press. New York

(1975).

MIELKE, T., Oil usage forecast to rise 47% in 20 years, INFORM, 5. (6) pg 715-717 (1994).

MIELKE, T., Emerging markets poised for rebound, INFORM, 5. (8) pg 872-884 (1994).

MILLER, C.; AUSTIN, H.; POSORSKE, L. and GONZALEZ, J., Characteristics of an inmmobilized

Lipase for tite commercial synthesis of esters, JA OCS, ~5.(6) pg 927-931 (1988).

MILLS, R.H., Assocation ofpolyhydroxy compounds withcations iii solution. Client. ni!., pg 2144-

2149 (1962).

MIROV, NT., Composition of gum turpentines of dimers, Econ. BoL, pg 41-46 (1952).

MIWA, T.K., Jojoba oil wax esters and derived fatty acids and alcohols. Gas chromatographic

analysis, JAOCS,.4& (2) pg 259-264(1971).

MOJOVIC, L.; SILER-MARINKOVIC, 5.; KUKIC, G. and VUNJAK-NOVAKOVIC, G., Rhizopus

arritizus lipase-catalyzed interesterification of te midfraction of palni oil to a cocoa butter equivalent

fat, Ritz. Micmb. TeclinoL, 15 (5) pg 438-443 (1993).

MORI, M.; IWAKARI, Y.; OZAWA, A. and SHIBATA, S.,Technical uses of marine oils. Bu??. Jpn.

Soc. Sc!. Fish., 311 pg 161-165 (1964).

NAVROCIK, J., NOREK, J. and NOVROCIKONA, M., Esterification of phtalic anhydride by primary

alcohols in te presence of titanium dioxide Chernie. Prum., 35. (1) pg 3 1-33 (1985).

NEKLYUDOV Al)., SHVEDOV, B.D. and TSIBANOV, VV., Properties of an immobilized lipase

preparation ftom Rflizopus oryzae d/c. Rio/ch. Microbiol. .12 pg 510-515 (1981).

NEVENZEL, J.C., Wax estera in marine copepods, Lipids, 5. pg 308-314 (1970).

OGISO, T.; SUGIURA, N. and KATO, Y., Enzymes. Bite sensitive lipase. Action pattern and

mechanism of lipolysis by Mucor Jipase, Client. bmw. Bu??. 211 pg 2542-2547 (1972).

Oil Soap, 19 pg 140-148 (1942).

OFIC94, Palm oil tu spotlight at Kuala Lumpur conference, 11VFORM 5. (11) pg 1212-1223 (1994).
,
Bibliografa 93

OKUMURA, S., IWAI, M. and TSUJISAKA, Y., Synthesis of various kinds of esters by four

nicrobial lipases, Biochim. Biophys. Acta, 575 pg 156-165 (1979).

OMAR, 1.C., SAEKI, H., NISHIO, N. and NAGAI, 5., Hydrolysis of Triglycerides by immobiized

titermostable lipase from Humicola lanuginosa, Agric. Bio?. Client., 52 pg 99-115 (1988).

PAISLEY, DM., Polymerization reactions of tite acrylate and methacrylate esters of oils from

Simmondsia chinensis seed oil. Polymerization reactions of organophosphorous compounds, Diss.

Absir., 21 pg 3635-36 (1961).

PArIERSON IDE., BLAIN, J.A., SHAW, CEL., TODD, R. and BELL, G.,Synthesis of glycerides

and esters by fungal cell-bound enzymes in continuous reactor systems,Rioechnol. Lett. 1 pg2ll-216

(1979).

PArION, 1.5. and ANDERSSON, L., Immobiized pancreatic lipase aud colipase for purification

studies, BBS Len., ~ pg 179-184 (1978).

PECNIK, 5. aud KNEZ, Z., Enzymatic fatty ester synthesis, JA OCS, & (3) pg 261-265 (1992).

POSORSKE, L. H., Industrial-scale application of enzymes to tite fats and oil industry, JA OCS Li.

(11) pg 38-42 (1984).

POSORSICE, L. H., LEFEBVRE, G.K., MILLER, CA. HANSEN, T.T. and GLENVIG, B.L., Process

considerations ofcontinuous reactors for modification with immobilized lipase,JA OCS b5. pg 922-927

(1988).

PRABHUDE-SAI, A. V. aud VISWANATHAN, C. y.., Preparation and purification of wax esters

a different approach, Chem. Phys. Lipids, 22, pg 71-75 (1978).

PRICHARD, L., Whats ahead for fats and oils, Org. Syn. Col?., 3. pg 452-456 (1955).

PRONK, W., KERKHOF, P.J., VAN HELDEN. C. aud VAN]? RIET, K., The hydrolysis of

triglyceridesby immobiized lipase in a micropore membrane reactor, B ioteclnol. B ioeng., 32 pg 512-

516 (1988).

PRYDE, EH. Fatty Acids. Ed. American Oil Chemists Society. U.S.A. (1979).
94 Introduccin

RAKHIMOV, MM.; DZHANBAEVA, NR. and BEREZIN, IV., Role of hydrophobic interactions

in te manifestation of catalytic activity oflipolytic enzymes, Dol? Bioe/ern. 229 pg 389-393 (1977).

RATKEVICH, J.; MASHKIN, S.S. anO ROMANKOV, R.K., Study of the use of zinc oxide in tite

esterification stage during te preparation of a cold resistant oksoplast plasticizer, Neft. Nefek. 2 pg

34-38 (1978).

RAITRAY, J.B.M., Biotechnology and te fats and oil industry. An overview, JAOCS, fi (11) pg

1701-1712 (1984).

ROY, S.S. and BHArYACHARYVA, D.K., Distinction between enzymically and citemically catalyzed

interesterification, JAOCS, 211(12) pg 1293-1294 (1993).

SANCHEZ, N., MARTINEZ, M., CORMA, A. and ARACIL, J., Synthesis of Oleyl Oleate as ajojoba

oil analog, JAOCS, ~9 pg 1150-1154 (1992)

SANCIIEZ, N., Diseo de sistemas zeolticos como catalizadores de sntesis de productos de qumica

fina>, Tesis Doctoral, Departamento de Ingeniera Qumica, Facultad de Ciencias Qumicas,

Universidad Complutense de Madrid. (1994).

SANTANIELLO, E., FE1iJUBOSCHI, P. and GRISENTI, P., Lipase-catalized transesterification in

organic solvents: Applications to tite preparation of enantiomericallypure compounds, Enzy. Microb.

Teclinot, 15. pg 367-382 (1993).

SAROJA, M. and KAIMAL, T.N.B., A convenient metitod of esterification of fatty acids. Preparation

of alkyl esters, sterol esters, waxesters andtriacylglyucerols,Shyn. Comrn.,tpg 1423-1430 (1986).

SENIO, H., Enzymatic Syntesis of Carbohidrole esters of Fatty Acid (1) Esterificacin of sucrose,

glucose, fructose and sorbitol, JA OCS U (11) pg 832-836 (1984).

SCHUCH, R. anO MUKHER.JEE. K. D., Lipase catalyzed reactions of fatty acids wit glycerol and

acyl glycerol, Appi. Microb. Bioteclinol. 311 pg 332-337 (1989).

SHARMA, ON., NAGESHWAR, G.D. and MENE, PS., Lipase-catalyzed reactions of fatty acds

wit long chain alcohols. ndicin Tech., 111 pg 221-226 (1972).

SHANI, A., Functionalization at te double bound region of jojoba oil. Pan 5, JA OCS, ~3.(8) pg

812-816 (1988).
HibliogralTa 95

SPENER, E, Preparation of conimon and unusual waxes, Client. Phys. Lip., 24pg 431-448 (1979).

STAMATIS, 1+, XENAKIS, A., PROVELEGION, M. and KOLISIS, FN., Esterificacion reactions

catalyzed by lipases in microemulsions: The role of enzyme localization in relation to its selectivity,

Biotech. Bioeng., 42 pg 103-110 (1993).


STANSBY, ME., Fatty acid patterns iii marine, freshwater aud anacromus flsh, A VI Westpori,

(1967).

STANSBY, M.E.,Reliability of fatty acid values purpousing for representation conditions of oil fish

from different sources of fish, JAOCS, sa (1) pg 13-17 (1981).

SUZUKI, S. and KARUBE, 1., New industrial uses of enzymes. Controlling tite activity of

immobiized enzymes, Jpn. Ko/ca! Pat., 77:156,990 (1977).

SWERN, D. Baileys Industrial Oil and Fat Products. U 4th Edition. Ed. John Wiley & Sons. New

York (1979).

TAKAHASHI, K., TAMAURA, Y., KODERA, Y., MIHAMA, T. SAlTO, Y. aud INADA, Y.,

Magneticlipase actives in organic solvents, Biochem. Biophys. Res. Corn ni. I4Zpg 291-296 (1987).

TAYLOR, F., PANZER C.C., CRAIG, J.C. and OBRIEN D.J., Continuous hydrolysis of tallow oil

with immobiized upase in macroporous membrane reactor, bid, 28:1318 (1986).

TOHOUN, M.K., Use of natural oils with low caloric properties. Food Chem., 22 pg 297-303 (1986).

URTEAGA, L. Analisis Cintico de la Reaccin de Esterificacin empleando Alcohol yAcido de Alto

Peso molecular, Tesis de Licenciatura, U. C. M., Fac. ce. Qumicas (1985).

VALIVETY, R.H.; IOHNSTON, G.A.; SUCKLING, C.J. aud HALLING, P.J., Solvent effects on

biocatalysis in organic systems: Equiiibrium position and rates of lipase catalyzed esterification,

BioteclinoL Bioeng., 3&pg 1137-1143 (1991).

VAN DER PADT, A.; KEURENTJES, J.T.F.; SEWALT, .l.J.W.; VAN DAM, EM.; VAN DORP, J.L.

and VANT RIET. K., Enzymatic synthesis of monoglycerides in a membrane bioreactor with an in-

line adsorption column, JAOCS, ~Q(8) pg 748-754 (1992).

VAN DER PADT, A.; EDEMA, M.J.; SEWALT, JLW. and VAN]? RIET, K., Enzymatic

acylglycerol synthesis lix a menbrane bioreactor, JA OCS, ~Zpg 347-751(1990).


96 Introduccin

WISDOM, RA., DUNNILL, P. anO LILLY, MD., Effect of carboxylate group modification on

enzymic and cardiotoxic of phospholipases. Eriz. Microb. Teclinol., 2 pg 567-572 (1985).

WISDOM, RA., DUNNILL, P. and LILLY, MD,, Enzymic interesterification of fats. Lab and pilot-

scale studies with linmobilized lipase fromRhizopus arritizus, Bioteclino?. Bioeng., 2Qpg 1081-1087

(1987).

WISNIAK, 3. and STEIN, S., Hydrogen solubility in aqueous solutions of sugars and sugar alcohols,

JAOCS, 5.1 (4) pg 482488 (1974).

WISNIAK, J. and LIBERMAN, D., Physical properties of simmondsin oil JA O CS, 52(2) pg 259-264

(1975).

WISNIAK, 3. aud ALFANDARY, P., Geometrical isomerization ofjojoba oil, bid. Eng. Client. Pmc.

Res. Dey., 14 (3) pg 177-185 (1975).

WISNIAK, J. and BENAJAHU, H., Sulpiturization of jojoba oil, nd. Eng. Client. Proc. Res. Dey.,

14 (4) pg 247-25 1 (1975).

WISNIAK, 3., Jojoba oil and derivates, Prog. Client. Fats other Lipids, 5. (5) pg 167-175 (1977).

WISNIAK, 3. 7th International Conference on Jojoba and its uses. Phoenix. January (1988).

WOOD, J. M. Biochemical and Biophysical perspectives in Marine Biology. Ed. Malins. Academic

Press. 3. London. (1976).

YAMANE, T., HOQ, MM. and SHIMIZU, 5., Continuous synthesis of glycerides by lipase by a

macroporous membrane bioreactor, Ami. N. Y. Acad. Sci., pg 558-568 (1985).

YOKOZEKI, K., YAMANAKA, 5. and KUKUI, 5., Application of immobilized lipase to

regiospecific interesterification of triglycerides in organic solvents, bid, 14 pg 1-8 (1982).

ZAKS, A. anO KLIIBANOV, A. M., Enzyme-catalyzed processes in organic solvents, mc. Nos)?

Acad. Sci. ~ pg 3192-397 (1985).

ZHOU, M., GILOT, B. anO DOMENECH, 5., Modelisation dun reacteur desterification. Esterification

de lacide oleique par le methanol. Determination des donnees thennodynamiques et cinetiques,

Entrc.pie, 1211 pg 3-27 (1984).


2. CINETICA ENZIMATICA
Cintica Enzimtica 99

El empleo adecuado de algunos catalizadores como los sistemas enzimticos, dentro ciertos

campos de aplicacin tcnica inmediata, como lo son en el desarrollo de la sntesis de algunos

metabolitos especficos, en el diagnstico clnico o en el anlisis de alimentos, requiere el conocimiento

exhaustivo de la cintica involucrada en dichos procesos. Cuando estos sistemas enzimticos se

purifican, encuentran muchas aplicaciones directas dentro del campo de la ingeniera qumica. Los

denominados reactores enzimticos emplean como catalizador enzimas inmovilizadas, en algn soporte

slido que aumenta sus propiedades mecnicas y trmicas. Su empleo es fundamentalmente en la

sntesis de productos de qumica fina, en dnde se requiere que no tengan lugar reacciones colaterales,

o que sean despreciables frente a la reaccin principal. El diseo de dichos reactores es evidentemente

un problema cintico, de ah la importancia de conocer los parmetros cinticos que intervienen en el

proceso.

En algunos casos, debido a determinadas especificaciones, interesa que la actividad enzimtica

cese. Este caso se da principalmente, en acciones teraputicas de inters fannacolgico. Para conseguir

este cese de actividad, se emplean sustancias inhibidoras de dichas enzimas. Los inhibidores actan

reconociendo el centro activo de la estructura proteica que constituye la enzima, y se fijan en l,


100 Cintica Enzimtica

impidiendo que tengan lugar otro tipo de reacciones, indeseables en este caso. El caso extremadamente

opuesto seria el papel que desempean las coenzimas, cuya misin es fijarse en un centre activo

especifico, con el fin de que el centro activo en el que se va dar la reaccin que nos interesa, adquiera

una configuracin tal que pueda ser reconocido el sustrato, se fije en dicho centro y tenga lugar la

reaccin. En el campo de la ingeniera qumica, generalmente lo que sucede es lo contrario. Es decir

ciertas sustancias son capaces de inhibir la accin del catalizador, de modo que es necesario conocer

las condiciones ms adecuadas para que este fenmeno no tenga lugar. En cualquier caso, es totalmente

necesario el conocimiento de los factores cinticos que constituyen dichos procesos, con el fin de

maxiinizarlos o minimizarlos, segn convenga [ENGEL, 1981]. En cualquier caso, a la hora de preparar

un sistema cataltico de estas caractersticas, uno de los factores fundamentales es la medida de la

actividad de dicho sistema. Dicha actividad va a estar sujeta a un pequeo intervalo impuesto por las

variables de operacin. En general cuando se habla de la actividad cataltica de una enzima, dicha

actividad se refiere a unas condiciones de operacin muy concretas, ya que una pequea variacin de

estas condiciones da lugar a una cada drstica de dicha actividad.

Por regla general, para medir dicha actividad se emplea un medio en el cual las condiciones

de operacin son las ms adecuadas y, por tamo, la enzima sea lo ms estable posible y no exista

peligro de desnaturalizacin o desactivacin. Una Vez conseguido esto, la actividad se mide empleando

para ello una reaccin prueba, en la cual se lleva a cabo un seguimiento de la velocidad con la que

tiene lugar dicha reaccin. Las unidades correspondientes a dicha actividad van a venir dadas por la

cantidad de enzima que es capaz de convenir un pmo? de susrato por minuto bajo las condiciones en

que se lleva a cabo la reaccin que se tomarn como condiciones standard.

Desde el punto de vista de la ingeniera qumica, las enzimas inmovilizadas en soportes slidos

presentan una serie de ventajas evidentes respecto a las enzimas solubles cuando se aplican en procesos

de inters industrial. Sin embargo, a pesar de que se ha diversificado el empleo de los ms variados
Cintica Enzimtica 101

sistemas de contacto enzima inmovilizada-sustrato, fundamentalmente a escala de laboratorio, son muy

escasos los modelos matemticos generalizados que aparecen en la literatura representando la

descripcin de tales sistemas [CHARTON & MACRAE, 1993].

Los parmetros tomados como bsicos para introducirse dentro del estudio, ms complejo, de

la cintica de este tipo de sistemas, corresponden a hiptesis que tienen en cuenta reacciones con un

slo sustrato para dar un producto determinado, suponiendo para ello una cintica de primer orden

[TAYYAB,1992].

Lgicamente, son estos los modelos ms desarrollados por ser los ms simples,

independientemente de que haya ms de uno. Estos modelos coinciden en que el tratamiento ms

adecuado para explicar el comportamiento de la cintica enzimtica, consiste en proponer como modelo

bsico la denominada ecuacin de Michaelis-Menten. Dicho anlisis cintico permite obtener una serie

de parmetros fijando las condiciones de operacin (presin, temperatura, concentraciones iniciales,

empleo de disolventes, etc.). Los parmetros que se obtienen son la velocidad mxima de reaccin,

constituida por el producto de la concentracin total de catalizador y la constante cintica de la

reaccin de formacin de producto, y la constante de Michaelis-Menten con respecto al sustrato

interviene en la formacin de un complejo con la enzima, a partir del cual transcurre la reaccin

principal del proceso. Combinando esta reaccin con la posible aparicin de complejos indeseables,

producidos por el enlace entre la enzima libre y supuestos inhibidores de la misma, pueden obtenerse

otros parmetros denominados constantes de inhibicin [ZAKS, 1985; MALACATA, 1992]

Debido a que los estudios cinticos que involucran sistemas enzimticos como catalizadores,

estn basados en los modelos matemticos para las reacciones simples de un solo sustrato, a

continuacin se comentarn someramente dichos modelos matemticos.


102 Cintica Enzimtica

2.1 MODELOS PARA UN SOLO SIJSTRATO

Desde principios de siglo, la mayora de los autores que han estudiado el comportamiento

cintico de este tipo de sistemas, lo han hecho, casi exclusivamente, basndose en los datos de

equilibrio de dichas reacciones. La primera ecuacin general aparece con unos estudios realizados por

Henri en 1903. El modelo matemtico en el que concluyen dichos estudios est constituido por un

sistema de primer orden de reaccin con respecto al sustrato. La velocidad de reaccin que se describe

no aumenta linealmente con la concentracin de sustrato, sino que el valor de la velocidad de reaccin

tiende a un valor mximo. Las hiptesis en las que se basa dicho estudio son las siguientes:

- El sistema enzimtico se comporta exclusivamente como un catalizador.

- La enzima y el sustrato reaccionan a elevada velocidad para dar lugar a la formacin de un complejo

enzima-sustrato.

- Slo estn involucrados en el mecanismo de reaccin un nico sustrato y un nico complejo enzima-

sustrato, el cual se transforma dando lugar a la liberacin de un producto y de la enzima libre.

- La enzima, el sustrato y el complejo enzima-sustrato estn en equilibrio, de manera que la velocidad

de disociacin del complejo enzima-sustrato en sustrato y enzima libre es muy superior a la de

formacin producto y liberacin de la enzima.

- La concentracin de sustrato es mucho mayor que la concentracin de enzima, por lo que la

formacin del complejo enzima-sustrato no produce alteraciones en la concentracin de sustrato.

- La velocidad global del proceso est controlada por la velocidad de liberacin de la enzima libre y

el producto final de reaccin.

- Cuando la velocidad del proceso se mide a tiempos cortos de reaccin, la velocidad de la reaccin

inversa es insignificante.

Diez aos ms tarde, Michaelis y Menten confirmaron la investigacin experimental de Henri

y presentaron una versin modificada de la expresin de velocidad de reaccin iicialmente propuesta.


Modelos para Un solo Sustrato 103

La expresin de la ecuacin general presentada por Henri en un principio, y comprobada y

contrastada posteriormente por Michaelis y Menten, es la que se muestra a continuacin:

E+SES .. <~
ES-E+P ..

(ra) (rs)max[S] [2.1]


K~+ [s]

Partiendo de esta ecuacin, pueden suponerse dos casos fundamentales: (a) que la velocidad

con que se alcanza el equilibrio de formacin del complejo enzima-sustrato es muy rpida, o (b) asumir

la hiptesis del estado estacionario para dicho complejo. En el primer caso la concentracin de dicho

complejo puede ponerse en funcin de la concentracin de enzima libre, de la concentracin de sustrato

libre y de la constante de Michaelis-Menten, empleando para ello las correspondientes ecuaciones

cinticas para cada uno de los pasos del supuesto esquema de reaccin y la ecuacin de conservacin

de materia para la concentracin de enzima. La expresin final va a dar lugar a una ecuacin que

explica el sistema de equilibrio, y si se desea obtener la ecuacin cintica es necesario introducir el

trmino de concentracin del complejo enzima-sustrato [SEGEL, 1993].

En el segundo caso propuesto, es decir cuando se tiene en cuenta la hiptesis del estado

estacionario, se llega a la deduccin de la expresin propuesta por Briggs-Haldane. En 1925, Briggs

y Haldane propusieron que no era necesario que el complejo enzima-sustrato estuviesen en equilibrio

con la concentracin de enzima libre y de sustrato, sin embargo suponan que un segundo antes de que

tuviese lugar la disociacin del complejo en enzima libre y producto, la concentracin de dicho

complejo deba ser constante. Es decir que se supone que el sistema est en estado estacionario y por

tanto la velocidad de formacin del complejo es igual a la velocidad de desaparicin del mismo y la

variacin de la concentracin del complejo con respecto del tiempo vale cero.
104 Cintica Enzimtica

En ambos casos, la forma de la ecuacin obtenida es la misma (ecuacin 2.1), la diferencia

estriba en la naturaleza de la constante K,,~. En el primer caso la constante obtenida, es una constante

de equilibrio de formacin del complejo enzima-sustrato, mientras que en el segundo caso, la constante

es de pseudoequilibrio, ya que adems tiene en cuenta la desaparicin del complejo debido a su

disociacin para liberar el producto de reaccin y la enzima libre. Por esta razn la aproximacin del

estado estacionario es ms rigurosa y se emplea cuando los modelos son ms complejos.

Por tanto los parmetros caractersticos del modelo van a venir dados por la velocidad mxima

de reaccin y la constante de Michaelis-Menten. La velocidad mxima sera la velocidad

correspondiente a un tiempo cero y una concentracin de sustrato igual a la inicial. La constante de

Michaelis-Menten, por su parte, se define como la concentracin del reactivo o producto al que est

referida, para la cual la velocidad de reaccin toma un Valor igual a la mitad del valor de la velocidad

mxima de desaparicin de sustrato o de formacin de producto.

Por otra parte, cabe la posibilidad de considerar la reaccin como un sistema reversible, en el

cual se produce un equilibrio impuesto por la propia reaccin que puede desplazarse aadiendo

reactivos o eliminando productos. En cualquier caso, tendremos que tener en cuenta una velocidad de

desaparicin de reactivos y una velocidad de desparicin de productos, por lo que aparecern dos

nuevos trminos en la ecuacin de velocidad, quedando esta de la siguiente manera:

E+S~&ES <1

ES-E~P ..

(r ) [s] (re> [PJ


3 max K !nax
= mp [2.2]
~ + [~] + ___
<mp
Modelos para Un solo Sustrato 105

En cuanto al orden de una reaccin catalizada por un sistema enzimtico, puede decirse que

cuando se examina una curva tpica de velocidad frente a concentracin de sustrato, ver figura 2.1,

pueden observarse tres zonas claramente diferenciadas:

- Cuando la concentracin de sustrato es mucho menor que el valor de la constante de

Michaelis-Menten, la reaccin se comporta como si fuese de primer orden.

- Cuando la concentracin de sustrato es mucho mayor que el valor de la constante de

Michaelis-Menten, la reaccin se comporta como si fuese de orden cero.

- En los casos intermedios, el orden de reaccin es variable, y va tomando valores entre uno y

cero, a medida que va aumentando la concentracin de sustrato.

z
O

pl
o

CONaENTRACION DE StlSrR.ATO

z
O

CONCENTRACION DE SUS TRATO

Figura 2.1. Curva tpica correspondiente a una cintica enzimtica.


106 Cintica Enzimtica

La resolucin de estos modelos puede llevarse a cabo empleando mtodos numricos o

linealizando las ecuaciones y resolviendolas por regresin lineal a partir de los datos experimentales.

Los primeros autores que resolvieron estos modelos matemticos, linealizando la ecuacin y

representndola grficamente, sistematizaron sus grficos, de forma que el mtodo de solucin lleva

su propio nombre [SEGEL,1993j1.

As en 1934, se propuso el mtodo grfico de Lineweaver-Burk, sugerido inicialmente por

1-laldane y Stern en 1932. Este mtodo est basado en la transformacin a un modelo lineal de la

ecuacin de Henr-Michaelis-Menten, es el mtodo ms popular y consiste en representar el valor

inverso de la velocidad de reaccin frente al valor de la inversa de la concentracin de sustrato. La

solucin grfica de~ esta ecuacin lineal, nos va a dar una ordenada en el origen y una pendiente a

partir de las cuales se obtienen directamente la velocidad mxima de reaccin y la constante de

Michaeis-Menten.

Si se representan los valores experimentales de velocidad de reaccin frente a la relacin

velocidad de reaccin/concentracin de sustrato, se obtiene el denominado grfico de Eade-Hofstee,

cuya ordenada en el origen nos da el valor de la velocidad mxima y la pendiente el valor de la

constante de Michaelis-Menten. Algunas variante de este grfico son las representaciones grficas

propuestas por Woolf-Augustinsson-Hofstee o Eadie-Scatchanl, en cuyos modelos los gmpos de

variables a representar estn reordenados de diferentes maneras, pero el tipo de representacin final es

muy similar. Este grupo de modelos esta considerado como ms inexacto que el primero, ya que en

los casos extremos de concentracin de sustrato, pueden existir dispersiones considerables.

En 1974, Eisenthal y Comsh-Bowden observaron que representando los valores experimentales

de concentracin de sustrato sobre un eje horizontal negativo frente a los valores de velocidad de

reaccin en el eje vertical; las lneas que unen cada pareja de valores se cortan en el mismo punto del
Modelos para Un solo Sustrato 107

primer cuadrante, cuyo par ordenado est compuesto por los valores de velocidad mxima y constante

de Michaelis-Menten. Otra variante de este mtodo es el denominado grfico de Dixon. que se basa

en la determinacin de la velocidad mxima empleando para ello datos experimentales de reacciones

con exceso de sustrato, haciendo el clculo de la constante de Michaelis-menten a partir del valor de

la velocidad mxima.

Lgicamente, todos estos modelos encuentran solucin numrica, empleando para ello

algoritmos matemticos capaces de resolver las ecuaciones cinticas planteadas a partir del esquema

de reaccin que se haya supuesto [ROZZELL, 1992].


108 Cintica Enzimtica

2.2 INHIBICION ENZIMATICA

La velocidad de una reaccin catalizada por una enzima puede modificarse dependiendo de los

posibles sustratos que se encuentran en el medio de reaccin. En el caso de que dicha velocidad

aumente, se dice que lo hace debido a un activador. En cambio, cuando la velocidad de reaccin

disminuye, puede deberse a dos causas, la primera viene dada por la desactivacin de la propia enzima

y la segunda puede ser debida a una sustancia presente en el medio que acta como inhibidor Este

ltimo caso es el que ahora nos ocupa, ya que el estudio de dichas sustancias encuentra aplicaciones

prcticas directas. As, en un principio, se descubri que los inhibidores eran las sustancias responsables

de que las enzimas presentasen o no actividad frente a determinados metabolitos y ejerciesen un control

exhaustivo sobre la degradacin de los mismos. Despus, el estudio se orient principalmente hacia

la accin de determinadas sustancias txicas para el organismo, tales como drogas, pesticidas u otras.

En la actualidad, el estudio se ha extendido a la accin cintica ejercida en los procesos catalticos en

general.

El estudio del fenmeno de la inhibicin supone conseguir informacin sobre tres aspectos de

la actividad enzimtica. Por una parte puede obtenerse informacin sobre la selectividad de la propia

enzima con respecto a los diferentes tipos de sustrato presentes en el medio. Tambin puede

proporcionar informacin sobre las caractersticas fsicas y qumicas de los centros activos en los que

tiene lugar la reaccin qumica. Y, por ltimo, puede obtenerse informacin sobre el posible

mecanismo de reaccin que gobierna el proceso enzimtico.

En el caso de las reacciones de esterificacin e hidrlisis, es habitual el fenmeno de la

inhibicin de la lipasa que acta como catalizador. Por lo general, el propio cido u alcohol tiende a

ser la sustancia inhibidora y, aunque el mecanismo exacto no est del todo claro todava

[MALACATA,1992], se cree que las molculas de cido, alcohol y ster se acumulan en la interfase
Inhibicin Enzimtica 109

acuosa/lipidica, bloqueando el acceso de uno de los reactivos o de los dos [PRAZERES,1993]. Otros

factores de favorecen la inhibicin de las lipasas, vienen dados por la presencia de alcoholes de bajo

peso molecular, cationes ligeros y pesados y algunos disolventes orgnicos.

Los iones calcio, generalmente, ejercen gran influencia tanto en las reacciones de hidrlisis

como en las de esterificacin, aumentando notablemente las velocidades de reaccin. La presencia de

iones sodio tambin producen un incremento de la actividad enzimtica, pero producen una inhibicin

parcial de la misma. Los metales pesados, por su parte, inhiben el sistema enzimtico en todos los

casos, generalmente la inhibicin es reversible cuando el tiempo de exposicin es cono, pero para

largos perodos de contado la enzima se desactiva [MALACATA,1992].

En cuanto a los disolventes orgnicos se refiere, puede decirse que los efectos ejercidos por

los mismos son de una gran variedad. Pueden influir sobre la velocidad de reaccin aumentndola o

disminuyndola, facilitar el equilibrio entre la conformacin activa e inactivade la lipasa, desnaturalizar

el sistema enzimtico, reaccionar con el mismo e, incluso, actuar como sustancia inhibidora

compitiendo con el sustrato [JANSSEN,1993]. Por regla general, la inhibicin debida a la presencia

de algunos disolventes en el medio de reaccin se produce debido a que se impide la movilidad

conformacional del sistema enzimtico, ya que las pequeas variaciones de la concentracin de agua

dan lugar a que la lipasa adquiera una conformacin no deseable, con la consiguiente prdida de

actividad. Este fenmeno es tambin el primer paso que se da en la desactivacin trmica, por lo que

este hecho explica la inactividad de algunas lipasas que se emplean con disolventes polares o miscibles

con el agua, ya que la enzima se deshidrata y se incumple el requisisto fundamental de la existencia

de pequeas cantidades de agua en las inmediaciones de la enzima, que afectan directamente a los

puentes salinos intrainoleculares y a las interacciones hidrfobas del sistema cataltico. A continuacin

se comentarn brevemente los diferentes tipos de inhibicin enzimtica ms frecuentes, ya que este

fenmeno influye directamente sobre la cintica de reaccin.


110 Cintica Enzimtica

2.2.1 INIHIBICION COMPETITIVA

Se considera que una sustancia acta como agente de inhibicin competitiva cuando se combina

con la enzima libre existente en el medio, adelantndose o evitando la formacin del complejo principal

enzima-sustrato. El sustrato y el inhibidor compiten por los centros activos libres de la estructura

enzimtica y se excluyen mutuamente. Este tipo de inhibidores pueden ser sustancias no metabolizables

anlogas al sustrato principal, o un derivado del sustrato o una sustancia que lo acompae o, incluso,

el propio producto de reaccin

En la figura 2.2 se muestran posibles situaciones de exclusin entre el inhibidor y el sustrato

que compiten por la formacin de complejo con la enzima libre.

e ~ d
-wJ~
&
Endina
t jIi~

qp ~ ~, ~ dSfi

3.
1 s
11~ II

rL
w Enzima

Figura 2.2. Modelos para inhibicin competitiva (5: sustrato. 1: inhibidor).


Inhibicin Enzimtica 111

El modelo 1 representa el modelo clsico de inhibicin competitiva. El sustrato y el inhibidor

compiten por el mismo centro activo, ya que ambos son estructuralmente anlogos. En el caso del

modelo 2, el sustrato y el inhibidor se excluyen mutuamente debido nicamente a un efecto de

impedimento estrico. En el modelo 3, como puede observarse, la exclusin de ambos va a venir dada

por la presencia de un grupo enlazante comn a ambos, sobre uno de los centros activos de la enzima.

El modelo 4 representa un sistema en el cual los centros activos sn distintos para sustrato e inhibidor,

sin embargo dichos centros estn solapados, por lo que uno de ellos queda excluido cuando se forma

el complejo con el otro. En cuanto al modelo .5, la exclusin tiene lugar debido a que se produce un

cambio conformacional en la estructura terciara o cuaternaria de la enzima cuando uno de las dos

sustancias competidoras es capaz de unirse a su centro activo.

En cualquier caso, sea cual sea el modelo al que se ajuste la inhibicin, el esquema

representativo de la inhibicin competitiva es el que se muestra a continuacin, el cual pone de

manifiesto la exclusin existente entre la formacin de uno u otro complejo.

E+S -= ES - EI-P
+

[E] .[si
[ES]

K1~ = [E

EJ [El]

]
112 Cintica Enzimtica

La velocidad de reaccin va a ser proporcional a la concentracin del complejo enzima-sustrato

ES, por lo tanto la velocidad de reaccin en presencia de un inhibidor puede igualarse a la velocidad

que existira si el inhibidor no estuviese en el medio cuando la concentracin de sustrato sea muy

elevada, y por tanto la velocidad mxima de reaccin no se ve afectada por la presencia de un inhibidor

competitivo; hecho que ha sido comprobado experimentalmente [TSAI, 1991]. La expresin de

velocidad de reaccin quedar, por tanto, de la siguiente manera:

= <-rs)rn [SI
+
[II ) + ES] [2.3]

Por tanto, el grado de inhibicin debida a un inhibidor competitivo depende de la concentracin

de sustrato de la concentracin de la sustancia inhibidora, de la constante de Michaelis-Menten para

el sustrato y de la constante de inhibicin. Un aumento de la concentracin de la sustancia inhibidora,

para una concentracin de sustrato constante da lugar a un aumento del grado de inhibicin.

2.2.2 INHIBICION NO COMPETITIVA

La denominada clsicamente inhibicin no competitiva, es aquella en la cual el inhibidor no

afecta, en absoluto, a la formacin del enlace entre el sustrato principal y la enzima libre. En este caso,

tanto la sustancia inhibidora como el sustrato se fijan en diferentes centros activos de manera reversible

e independiente. Es decir, que el inhibidor puede unirse bien a la enzima libre, bien al complejo

enzima-sustrato, y el sustrato puede fijarse a la enzima libre o al complejo enzima-inhibidor, sin que

el enlace de uno de los ligandos afecte a la constante de disociacin del otro. No obstante, el complejo

formado triple inhibidor-enzima-sustrato es totalmente inactivo. En la figura 2.3 se muestra un modelo

clsico para un sistema enzimtico, en el cual se da la inhibicin no competitiva.


Inhibicin Enzimtica 113

P
r

4 4
5
ESI

Figura 2.3. Modelo clsico para la inhibicin no competitiva (5: sustrato, 1: inhibidor).

En este caso el sustrato y la sustancia inhibidora, como puede observarse, no se excluyen, sino

que pueden llegar a formar un complejo temario que es catalticamente inactivo. Cuando el sustrato

se fija a la enzima, esta sufre un cambio conformacional dando lugar a que el complejo sea

cataliticamente activo. Por el contrario, cuando se forma el enlace con la sustancia inhibidora, el

complejo pasa a su forma no activa, independientemente de que el sustrato se encuentre formando

complejo o no con la enzima; sin embargo el inhibidor no interviene en ningn momento en la

formacin del enlace con dicho sustrato.

Una situacin similar se produce en el modelo de la figura 2.4. En este caso no tiene lugar el

equilibrio entre los complejos enzima-sustrato y sustrato-enzima-inhibidor, pero de la misma manera,

las cuatro especies estn en equilibrio.


114 Cintica Enzimtica

Figura 2.4. Posible mecanismo de inhibicin no competitiva.

El equilibrio de inhibicin no competitiva va a venir dado por el esquema de reaccin que se

muestra a continuacin:

E+S ES E+P
+ +

1 1 LE] [si
.
[nl . Es]
[ES] [Hs]

[rl. [II [Es] [II


1(1=
FI+S FIS En] [HS]
Inhibicin Enzimtica 115

Corno puede deducirse de dicho esquema, una concentracin de sustrato lo suficientemente

elevada no es capaz de conducir toda la enzima a la forma activa enzima-sustrato. Para cualquier

concentracin de la sustancia inhibidora est presente el complejo ternario inactivo y, por lo tanto, la

velocidad de reaccin siempre va a ser inferior a la velocidad mxima de reaccin, independientemente

de que la concentracin de sustrato tienda a infinito. En cambio, la constante de Michaelis-Mentenpara

el sustrato va a permanecer invariable.

La inhibicin no competitiva puede ser reversible o irreversible, segn sea la naturaleza de la

enzima y del sustrato. Aunque generalmente sea reversible, puede diferenciarse la accin de cada una

de las posibilidades. En el caso de que la inhibicin sea irreversible, la velocidad mxima de reaccin

se hace nula cuando la concentracin de enzima coincide con la concentracin de enzima inhibida,

mientras que en el caso de la inhibicin no competitiva reversible, la velocidad mxima de reaccin

se hace nula cuando la concentracin de enzima en el medio es nula Cabe destacar que, en ocasiones,

el fenmeno de desactivacin de la enzima por accin de una sustancia indeseable en el medio se

confunde con el fenmeno de inhibicin no competitiva irreversible y se trata errneamente como tal.

El modelo matemtico sencillo que gobierna un proceso enzimtico en el qe se da el

fenmeno de inhibicin no competitiva, cnsiderando un solo sustrato y un (nico inhibidor, puede

obtenerse siguiendo el mismo razonamiento empleado en la obtencin de los anteriores modelos,

considerando un equilibrio rpido o la hiptesis del estado estacionario. En ambos casos la ecuacin

que se obtiene es la siguiente:


(r3) max [s
K~(i + ___ + [5] (1 -.- ) [2.4]
<
116 Cintica Enzimtica

Los estudios realizados por Noble [NOBLE, 1990] corroboran este modelo, que se ha

comprobado experimentalmente para la obtencin de glucosa a partir de celobiosa, empleando para ello

un sistema enzimtico inmovilizado por encapsulacin, constituido por la enzima ~-D-glucoxidasa.

Otro modelo posible para explicar el fenmeno de inhibicin no competitiva puede ser el que

se muestra en la figura 2.5. En este caso, la inhibicin viene dada por el impedimento estrico que

ejerce la sustancia inhibidora al combinarse con la enzima libre o con el complejo enzima-sustrato. En

cualquier caso, sigue cumplindose que los complejos en los que se ve involucrado el inhibidor son

totalmente inactivos para dar lugar a la formacin de producto, y que la sustancia inhibidora no influye

sobre el enlace del sustrato con la enzima. Lgicamente, los modelos matemticos que se obtienen

siguiendo las aproximaciones del estado estacionario y del equilibrio rpido, son idnticos y coinciden

con la ecuacin [2.4].

E+ P

+
1
$1

Figura 2.5. Tercer modelo para la inhibicin no competitiva.


Inhibicin Enzimtica 117

2.2.3 INHIRICION ACOMPETITIVA

Se dice que una sustancia da lugar a una inhibicin acompetitiva cuando se combina de manera

reversible dnicamente con el complejo enzima-sustrato, dando lugar a un nuevo complejo sustrato-

enzima-inhibidor catalfticamente inactivo. En al figura 2.6 se representa un modelo clsico que explica

como tiene lugar este tipo de inhibicin.

~~~=0; Enzima +171


ji
*- Producto
rs ~-rr~ Ks
A

9k

Figura 2.6. Modelo para la inhibicin acompetitiva (S:sustrato, I:iinhibidor, C:centro activo).

La inhibicin acompetitiva pura, tambin denominada inhibicin anticompetitiva o inhibicin

acoplada, raras veces tiene lugar en los sistemas monoreactantes, en cambio puede tener lugar en los

sistemas en los que la adicin de varios ligandos a una enzima debe llevarse a cabo dc una manera

secuencial (sistemas multirreactantes).

En este caso, una elevada concentracin de sustrato no impide que se forme el complejo

ternario inactivo, ya que en presencia de la sustancia inhibidora, la formacin de dicho complejo


118 Cintica Enzimtica

siempre estar favorecida. En consecuencia, puede decirse que el valor de la velocidad mxima de

reaccin siempre va a ser inferior al valor esperado cuando la reaccin tiene lugar en ausencia de

inhibidor. El esquema de reaccin para este tipo de procesos es el que se muestra a continuacin:

ES .~ FS E+P
+
1 [E]. [si
[EW
Kil [Es]. [II

[ss]

Al contrario que en el caso de la inhibicin no competitiva, la constante de Michdis-Menten

puede variar con la concentracin de inhibidor presente en el medio. Generalmente, dicha constante

disminuye debido a que la formacin del complejo temario hace disminuir la concentracin del

complejo enzima-sustrato. Bajo determinadas condiciones de operacin, un inhibidor de tipo mixto

puede dar lugar a los mismos efectos.

El modelo que gobierna este tipo de inhibicin se deduce de las ecuaciones de conservacin,

empleando el mismo razonamiento que en los casos anteriores, adquiriendo este la siguiente forma:

(-r3) = (-ra) LS
Kms + [s] <1 + [II
[2.5]
Inhibicin Enzimtica 119

2.2.4 INHIBICION MIXTA

Un sistema enzimtico tambin puede estar constituido por varias enzimas o varias formas de

la misma enzima que catalizan la misma reaccin. En este caso, las diferentes especies catalticas

pueden tener diferentes selectividades con respecto a una sustancia inhibidora determinada, aunque

catalicen el proceso con velocidades de reaccin similares. Frecuentemente, estos procesos se tratan,

de manera errnea, suponiendo que todas las especies se comportan de la misma manera. Sin embargo,

no sucede as realmente, sino que la velocidad global del proceso va a venir dada por la suma de los

diferentes efectos catalticos de cada una de las especies enzimticas presentes en el medio.

Si suponemos que el complejo enzimtico est constituido por dos especies cuyas velocidades

mximas de reaccin y constantes de Michadis-Menten son similares respecto del sustrato que se desea

convertir, pero slo una de ellas es susceptible de ser modificada, en su accin enzimtica, por una

sustancia presente en el medio de reaccin que acta como inhibidor competitivo, por ejemplo, la

expresin que predice la velocidad de reaccin global del proceso adquirir la siguiente forma:

(r8) = +

= <s>:a?1] + (r3)18~ [sI [2.6]


Kms(1 + ) + [SI

Es obvio que pueden coexistir varios tipos de inhibicin dentro de un mismo proceso, por lo

que el planteamiento de las ecuaciones cinticas pasa por la suposicin de posibles esquemas de

reaccin para, posteriormente, estudiar por separado cada uno de los fenmenos de inhibicin y

solucionar el modelo acoplando los diferentes fenmenos y obteniendo su validez comprobando el

modelo experimentalmente.
120 Cintica Enzimtica

2.3 CINETICA ENZIMATICA PARA SISTEMAS MULTIREACTANTES

La mayora de los sistemas enzimticos que presentan ms de un reactante dan lugar a tal

nmero de especies en el medio de reaccin que no pueden describirse satisfactoriamente empleando

las hiptesis del equilibrio rpido. En este caso, la distribucin de especies en las que se encuentra

involucrada la enzima depende de las constantes de equilibrio de todos y cada uno de los pasos de la

reaccin, incluido el paso de formacin de producto. Las ecuaciones de velocidad que gobiernan el

proceso pueden obtenerse algebraicamente teniendo en cuenta las hiptesis del estado estacionado. No

obstante, al ser el nmero de especies en el medio tan elevado, el desarrollo matemtico se hace muy

complicado y tedioso.

Para evitar esto, King y Altman propusieron un mtodo en 1956 que facilitaba la obtencin

algebraica de estas expresiones. Este mtodo consiste en poner las expresiones para la distribucin

relativa de las especies en ncin de la concentracin de sustrato y varias constantes de velocidad que

se obtienen agrupando los parmetros correspondientes a cada uno de los pasos de la reaccin.

Cuando en el medio de reaccin coexisten dos reactivos y dos productos y el sistema cataltico

es puro o monoenzimtico, es decir la enzima no est contaminada con especies enzimticas de otra

naturaleza, los mtodos ms empleados a la hora de plantear el esquema de reaccin y el posterior

modelo cintico son tres:

- Suponer que la formacin de los complejos con los sustratos y la liberacin de productos es

al azar y, en cualquier caso, la reaccin que tiene lugar es la esperada: mecanismo al azar.

- Suponer que a cada adicin de sustrato a la enzima, le sigue una liberacin de producto de

reaccin y, por tanto, nunca se dara un complejo ternario: mecanismo Ping-Pong.

- Suponer que los reactivos y los productos se adicionan y se liberan siguiendo un orden

determinado: mecanismo ordenado o forzado.


Cintica Enzimtica para Sistemas Multireactantes 121

2.3.1 MECANISMO DE REACCION AL AZAR

Aceptando las hiptesis del equilibrio rpido, el esquema global para la reaccin sera el que

se muestra a continuacin:

EA EP

E prEPQ E

EB EQ

Como puede observarse, el nmero de complejos que puede formarse por mhiitncin de

sustratos o productos es bastante elevado. Debido a esto, la solucin del modelo pasara por estudiar

independientemente cada uno de los efectos ejercidos por los diferentes tipos de complejos sobre el

mecanismo cintico. Lo que sucede es que la hiptesis del equilibrio rpido se cumple parcialmente

y las constantes de varan con la concentracin de inhibidor de acuerdo con un modelo hiperblico,

por lo que el nmero de parmetros aumenta considerablemente.

Cuando se asume la hiptesis del estado estacionario, el tratamiento matemtico para obtener

las ecuaciones de velocidad se hace incluso ms complicado, apareciendo en el denominador de la

expresin del orden de unos cuarenta trminos, ya que las constantes no varan con la concentracin

de las especies presentes en el medio segn una funcin lineal, parablica o hiperblica, sino que lo

hacen segn funciones no lineales y el nmero de parmetros a calcular se multiplica.


122 Cintica Enzimtica

2.3.2 MECANISMO PING-PONG

Se dice que un sistema de reaccin responde a un mecanismo ping-pong cuando entre las

adiciones de dos sustratos a una enzima se libera un producto. El esquema de reaccin para este tipo

de mecanismo es el que se expresa a continuacin:

E+A~ ~ F
+
B

t
FB~EQ~E + Q

Atendiendo a este esquema de reaccin el modelo planteado, siguiendo la tcnica propuesta

por King-Altman, estara formado por cuatro especies enzimticas presentes en el medio y podra ser

el siguiente

N
k1[A]
<E> (EAi=SFP

N

4
k4~jQ] k2 [1]

Y Y

(E~=~FB) F
k4B]
Cintica Enzimtica para Sistemas Multireactantes 123

Siguiendo este esquema pueden deducirse las ecuaciones que expresan las concentraciones de

las especies constituidas por complejos enzimticos en funcin de las constantes de formacin y

desaparicin de dichos complejos:

[E] = 1<41<11<2[P] + 1<21<3 + 1<3 [31k41<1


[E]1<4 + k,k2 EF] k1
[E]~ DENOMINADOR

[EA] + [FP] = k41<1[A]k4P] + k4 [O]k3k2 [P] + 1<3 [E] k4k1[A] + k3k2[P]k1[A]


[E]~ DENOMINADOR

(FI = 1<41<~ [A]


1<2 + k4 [Qlk3k2 + k~1<~ [O]k~3 +

[E)T DENOMINADOR

[Fa] + [SQl - k2 [PIk1k4 [Q] + k4 [0] 1<21<3 [3] + [011<3[3] + 1<~ [A]1<21<3 [3]
[E] ~ DENOMINADOR

DENOMINADOR = [E] ~- = [E] + [EA] + [FPJ + [FI + [FR] + [Ecl

[2.7]

Sustituyendo las expresiones de concentracin en la ecuacin de velocidad de reaccin y

reagrupando coeficientes, podemos definir las constantes segn las expresiones [2.8]. Teniendo esto

en cuenta, y reagrupando trminos, podemos llegar a la expresin general de velocidad [2.9],en la <pie

no se incluyen los tnninos debidos a la inhibicin.

(rA) = k1[z] [A] - t1 [EA] [FR]

= Coef~
_____ - Coef~4
Coe4~ tAB
Oce
_____ K - Coeff~
Km = Coef0
Coef~0 ~Q Coe4~,

K. Coef
Cons t
_____ -

Coeff~ 5 - Const
CoefAP CoefA
Q Coe40 Coef0
= Num2 .;K Num1 [2.8]
= Num1 (rAflax Coeff~Q eg Num2
COe4B
124 Cintica Enzimtica

(~XA)tx(~TA),~ax( [A] [E] [P] ~


Keq
(~rA) =
)LKmQ[PI + U-rA) itxKm~
_____ - [Ql +

(rA)~K,A] + VTA> r~axKm [E] + (EA K


0g
eq

TA) rflaXKWA [Rl


+ ( lA) ~~[Al [El + (~Xa)L[A] [P] + (A)LX[PI [O] + _______ [Ql
KeqKi Keq

[2.9]

Lgicamente, habra que incluir en este modelo los debidos a la inhibicin por parte de los

reactivos, productos u otras especies involucradas en el medio de reaccin.

2.3.3 MECANISMO DE RFAACCION ORDENADO

Cuando en una reaccin enzimtica entre dos reactivos, para dar dos productos, la combinacin

de la enzima libre con los reactivos se lleva a cabo siguiendo un orden determinado, y la liberacin

de los productos es igualmente ordenada, se diceque el mecanismo de reaccin es ordenado o forjado.

Dicha reaccin puede representarse segn el siguiente esquema:

EQ -~ h~E+Q
+ +
B

EAB
____

~- EPQ
1
Cintica Enzimtica para Sistemas Multireactantes 125

Atendiendo a este esquema, y siguiendo el mtodo propuesto por King-Altman, la figura

representativa correspondiente a dicho esquema es la siguiente:

k1[A]

4 4
k4 k4 [O] k2[B]
r
k3[P]
{EPcrE4
A

Por tanto, la distribucin de las especies enzimnticas obtenidas segn dicha figura, responder

a las siguientes expresiones de concentracin:

EF + k~2k~3 [Pllc, + k~ [Sk4k3 + k3k~k.1


E El,. DENOMINADOR

[F~41 JC4k~ [A] k~2 + k~ [A]k2k, [Pl + ~ [Q]k2k, [Pl + k,k4k1 [A


[E],. DENOMINADOR

(FAS] + [EPQ) 1c4k1 [Al k2 [S + k1 [A)k.~3 [Plk~ [Rl + k~ [Ql&, [P)


k2 [.2] + ~ [Qlk, [Pl
[E],. DENOMINADOR
EEC) k2k1k4(QI + k1[AIk3kJSI + k2[R]&4[Qlk3 + k,k,k.JQI

E E] ~ DENOMINADOR

DENOMINADOR= [E],.= EF] + [EA] + [EAS] + [EM + [FC]

[2.10]
126 Cintica Enzimtica

Sustituyendo las expresiones de concentracin en la ecuacin de velocidad de reaccin y

reagrupando coeficientes, podemos definir las constantes segn las expresiones [2.11].Teniendo esto

en cuenta, y reagrupando trminos, podemos llegar a la expresin general de velocidad de reaccin

[2.12],que se expresan a continuacin.

(rA) = k1[E] [A] k 1[EA]

Km = Coef~ Km = toe
Coe4~ Cae ~AB

Km =. Coef0 ~ = Coef~
Cae ffpQ
Cae fpQ

Cons t Coef~ Cons t


- Coef~
CoefAP Cae o Coe40 Coef0
1AB
Co ef~0 Cae
P CaelABP [2.11]
Cae
Num
Nun21 2 Nurn1
VrA) max
d (TA)~X CoefPQ ~Keq = ___

Cae Nuzn2

(TA),~X<TA)LX< [Al [Rl LP] ~


Keq
VTA) =

VTA) ~yK~ [P]


(~TA>txKiKm + VTA) 4axKm [Al + (-vrA)t,CK [Rl .4- +

VTA) LcKm, [Ql (TA)xKfl[AI LP] V.rA)L LP] [Q]


+ + ( T9~,<LAl [Rl + + +
K,q KeqXi, K,q

(-rA)~x LE [Pi [Ql


+ VTA)txKl,,j5] [Ql + +

K
o
fl

[2.12]
Cintica Enzimtica para Sistemas Multireactantes 127

Los estudios cinticos de las reacciones que emplean enzimas como catalizador son

relativamente escasos y han empezado a tomar auge en los ltimos aos. El modelo cintico a emplear

en este tipo de estudios no est todava muy claro, ya que depende de la suposicin del mecanismo

propuesto para la reaccin. As Khmelnitsky y colaboradores estudiaron la deshidrogenacin de varios

alcoholes, para lo cual emplearon una enzima alcohol deshidrogenasa en disolucin de buifer de fosfato

para conseguir pH 8.8 a 250C, que resultaron ser las condiciones de operacin ptimas para dicha
enzima. El modelado cintico de este tipo de reacciones result ajustarse a un modelo sencillo de tipo

Michaelis-Menten, obtenindose diferentes velocidades de reaccin mximas, as como las constates

de Michaelis correspondientes [KHMELNITSKY,1990].

Por otra parte, Deleuze pudo constatar, empleando dos lipasas diferentes (Candida cylindracea

y Mucor mieheO, que el estudio cintico de las reacciones de hidrlisis, esterificacin y

transesterificacin en medio orgnico, en un reactor tipo tanque agitado discontinuo a 4~C de

temperatura respondan a un esquema de reaccin con un mecanismo del tipo ping-pong, en el cual

la enzima forma un primer enlace con el cido graso, seguido de la liberacin de una molcula de

agua, con la consecucin de un complejo enzimtico distinto al inicial y dispuesto a adicionar una

molcula de alcohol, para liberar a continuacin la correspondiente molcuia de ster, quedando la

molcula de enzima en el mismo estado inicial y dispuesta a formar de nuevo eniace con una nueva

molcula de cido graso [7DELEUZE,


1987].

Posteriormente Thai et al propusieron un mecanismo del tipo Michaeis-Menten sencillo para

la hidrlisis de aceite de oliva en medio orgnico, empleando isooctano como disolvente. El sistema

cataltico empleado consista en una disolucin de la lipasa de Candida rugosa en buffer de fosfato

para conseguir un pH adecuado para su actividad (7.1). El mecanismo de reaccin supone la existencia

de un nico sustrato, aceite de oliva, y un nico producto, cido oleico; considerando que el producto

de reaccin da lugar a una inhibicin competitiva [TSAI,1991].


128 Cintica Enzimtica

Miller, por su parte, dedujo que en las reacciones de hidrlisis, interesterificacin y

transesterificacidn de triglicridos del cido ladrico, el mecanismo de reaccin de las lipasas, pasaba

porla formacin de un complejo intermedio adil-enzima, sin la formacin del cual la reaccin no tiene

lugar. En sus estudios, tambin incluy la reaccin de esterificacin del cido larico, empleando como

catalizador una disolucin de la lipasa de Candida cytindracea en buifer de fosfato para conseguir un

pH de 7.7. El modelo propuesto es de tipo Michaelis-menten, sencillo sin inhibicin cuando se emplea

como disolvente orgnico ciclohexano y la reaccin tiene lugar a 350C [MILLER,19911.

De forma anloga, los estudios de Guit proponen un mecanismo similar al anterior,

considerando un sistema monosustrato en la hidrlisis de triglicridos del cido actico en un reactor

tipo flujo pistn constituido por una membrana anular sobre Ja que va inmovilizada la lipasa de

Candida cylindracea, cuya temperatura ptima de operacin es de 300C. Dicho modelo supone que el

sustrato principal es el triglicrido, y que la reaccin tiene lugar exclusivamente mediante la formacin

de enlaces acil-enzima [GUIT, 1991].

Los estudios de Lortie, revelan que la reaccin de esterificacin entre el cido oleico y el

glicerol para obtener mono, di y triglicridos de dicho cido sigue un mecanismo cintico forzando a

que la reaccin tenga lugar va formacin del complejo acil-enzima con el cido oleico, con la posterior

formacin de ster en la posicin uno, que por isomerizacin hacia la posicin dos, puede dar lugar

a una nueva adicin para obtener el dister y, posteriormente, el trister. La reaccin se lleva a cabo

en un reactor discontinuo de mezcla perfecta a 600C, empleando un catalizador comercial constituido

por una lipasa de Mucor me/id inmovilizada [LORTIE,1992].

Otros autores proponen, en cambio, un mecanismo de reaccin de tipo ping-pong, empleando

el mismo catalizador para la sntesis de acetato de geranilo, partiendo de acetato de n-propilo y

geraniol, a 44YC de temperatura y 140 bares de presin, aceptando que la reaccin est forzada a un
Cintica Enzimtica para Sistemas Multireactantes 129

paso previo de formacin del complejo acil-enzima, y que se produce inhibicin competitiva debido

a la presencia de geraniol. La comprobacin de dicho modelo se lleva a cabo a partir de experimentos

con disolventes orgnicos, tales como n-hexano y dixido de carbono [CHIJLALAKSANANUKUL,

1992 & 1993].

El equipo de investigacin de Shiraishi, estudiando el comportamiento cataltico de la enzima

de Rhizopus niveus inmovilizada sobre un material cermico, para la hidrlisis de almidn comprob

que la catlisis de esta glucoamilasa a 500C, se corresponda con un mecanismo cintico sencillo de
tipo Michaelis-Menten [SHIIRAISHI,1993].

Staxnartis et al. decidieron considerar un mecanismo de tipo ping-pong para reaccin de

esterificacin entre el cido larico y el mentol al emplear una disolucin cataltica de la enzima de

Penidillium simpllcissimum en una microemulsin a pH 5 y 350C de temperatura, aunque el modelo

cintico propuesto slo considera la reaccin directa [STAMALRTIS,


1993].

De nuevo, en este caso Prazeres et al., se vuelve a considerarel estudio cintico de la hidrlisis

de los triglicridos del aceite de ojiva en medio orgnico, empleando isooctano como disolvente a

300C, mientras que el catalizador es la lipsa de Chromobacteriwn viscosuin disuelta en un tampn

cuyo pH es 7. El estudio concluye en que la cintica responde a un Modelo del tipo Michaelis-Menten

considerando un nico sustrato, que propone que la inhibicin con respecto del producto de reaccin

es de orden tres [PRAZERES,1993].

Los estudios sobre la hidrlisis de celulosa y celobiosa, en un reactor de mezcla perfecta a

30C, confirma de nuevo que la reaccin signe un modelo cintico sencillo de tipo Michaelis-Menten,

cuando se emplea la lipasa de Trichoderma reesei en disolucin de buifer de acetato para un pH 4.8

[NIDETZKY,1994].
130 Cintica Enzimtica

En cambio, los estudios de Ramamurthi vuelven a considerar un mecanismo ping-pong para

la reaccin de esterificacin entre el cido oleico y el inetanol en n-hexano a 250C. aprecindose una
clara inhibicin competitiva por la presencia de un exceso de metanol. En este caso el catalizador es

comercial y est constituido por una lipasa de Candida antarctica inmovilizada sobre una resma de

intercambio. Una vez ms se confirma que para que la reaccin tenga lugar es necesaria la formacin

del complejo va ah-enzima [RAMAMURTHI,19941.

Los estudios de Reyes, basados en la acidolisis de los triglicridos del aceite de ojiva y de

algunas grasas animales, empleando para ello cido octanico y cido linolnico, revelan que la lipasa

de Pseudornonas cepacia en disolucin de buifer de fosfato (pH 7), da lugar a una cintica cataltica

que responde a dos modelos de tipo Michaelis-Menten con inhibicin competitiva por parte del cido

de partida. Uno de los modelos corresponde a la desaparicin del cido libre de partida, mientras que

el segundo modelo corresponde a la velocidad de aparicin del nuevo cido graso [REYES,1994].

Teniendo en cuenta los estudios de los diferentes autores consuitados, queda suficientemente

claro que la cintica enzimtica debe abordarse teniendo en cuenta el razonamiento propuesto por

Michaelis-Menten. lbmbin queda desechado totalmente el mecanismo de reaccin al azar, ya que para

que la reaccin de esterificacin enzimticateng lugar, es imprescindible que se forme el coffiplejo

acil-enzima, por lo que el primer paso del mecanismo va a venir dado por la adicin del cido graso

a la lipasa.
Bibliografa 131

2.4 BIBLIOGRAFIA

CHARTON, E. and MACRAE, AR., Specificities of iinmobilized Geotrichum candidum CMICC

335426 lipases A and B un hydrolysis and ester synthesis reactions in organic solvents, Ritz. Microb.

Technoi. .j5 (6), pg 489493 (1993).

CHULALAKSANANUKUL, W., CONDORET, J.S. and COMBES, D., Kinetics ofgeranyl acetate

syntbesis by lipase-catalysed transesterificationin n-hexane, Ritz. Microh. Tee/inol. 14(4) pg 293-298

(1992).

CHULALAKSANANUKUL, W., CONDORET, J.S. and COMBES, DJGeranyl acetate synthesis by

lipase-catalyzed transesterification in supercritical carbon dioxide, Ritz. Microb. Techno 151(8) pg

691-698 (1993).

DELEUZE, H., LANGRAND, O., MILLET, H., BARA1TI, J., BUONO, O. and

TRIANTAPHYLU)ES, C., Lipase-catalyzed reactions in organic media: competition and applications,

Bloc/fm. Biophys. Acta 911 pg 117-120 (1987).

ENGEL, P.C. Enzyme Kinetics. The Steady-State Approach. Ed. Chapman and Hall. 2nd Ed. London

(1981).

GUIT, R.P.M., KLOOSTERMAN, M., MEINDERSMA, (1W., MAYER, M. and MEIJER, E.M.,

Lipase ldnetics: Hydrolysis of triacetin by lipase from Candida cylindracea in a hollow-fiber

membrane reactor, Biorechnot Bioeng., 3~ pg 727-732 (1991).

.JANSSEN, A.E.M., VAN DER PADT, A., VAN SONSBEEK, M.V. and VAN97 RIET, K., Theeffect

of organic solvents on the equilibriuin position of enzymatic acylglycerol synthesis, B iotechnol.

Bioeng., 41 pg 95-103 (1993).

JANSSEN, A.E.M., VAN DER PADT, A. and VANT RIET, K., Solvent effects on lipase-catiyzed

esterification of glycerol and fatty acids, Biotee/nol. Bioeng., 4Z pg 953-962 (1993).


132 Cintica Enzimtica

KHMELNITSKY, Y.L., NEVEROVA, IN., POLYAKOV, Ml., GRINRERO, MIt, LEVASHOV, A.V.

and MARTJiNEK, K., Kinetic theory of enzymatic reactions in reversed micellar systems. Application

of te pseudophase approach for partitioning substrates, Eur 1. Biochem., 19Q pg 155-159 (1990).

LORTIE, R., TRANI, M. and ERGAN, E, Kinetic study ofte lipase-catalyzed synthesis oftriolein,

Biotechnol. Bioeng., 41 pg 1021-1026 (1993).

MALACATA, EX., REYES, BR., GARCIA, H.S., HILL, CG. and AMUNDSON, C.H., Kiinetics

and mechanisms ofreactions catalysed by immobilized lipases, Ritz. Microb. Technol., 14(6) pg 426-

446 (1992).

MILLER, D.A., PRAUSNITZ, J.M. and BLANCE, H .W., Kinetics of lipase-catalysed

interesterification of triglycerides in cyclohexane, Ritz. Microb. Technoi., 2 (2) pg 98-103 (1991).

NIDETZKY, B., ZACHARJAE, W., GERCKEN, O., IIAYN, M. and STEINER, W., Hydrolysis of

cellooligosaccharides by Trichoderma reesei cellobiohydrolases: Experimental data and kinetic

modeling, Ritz. Microb. Technol., jfi (1) pg 43-52 (1994).

NOBLE, R.D., Analysis of enzyme catalysis under batcb conditions, Chem. Eng. 1., AA pg B47-B50

(1990).

PRAZERES, D.M.F., LEMOS, F., GARCIA, F.A.P. and CARRAL, J.M.S., Modeling lipolysis in a

reversed micellar system: Pan 1. Conventional batch reactor, Bioechnot. Bioeng., 42 pg 759-764

(1993).

PRAZERES. D.M.F., LEMOS, F., GARCIA, F.A.P. and CARRAL, J.M.S., Modeling lipolysis in a

reversed micellar system: Pan II. Membrane reactor, Bioechnol. Bioeng., 42 pg 765-771 (1993).

RAMAMURTHI, 5. and McCIJRDY, A.R.,Lipase-catalyzed esterification of oleic acid and methanol

in hexane. A kinetic study, JA OCS, 21 (9) pg 927-930 (1994).

REYES, H.R. ami HILL, C.G.J., Kinetic modeling of interesterification reactions catalyzed by

immobiiized upase, Bioechnol. Bioeng., 43. pg 171-182 (1994).

ROZZELL, O. and WAGNER, F. Biocatalytic Production of Amino Acids & Derivatives. Ed.

Hanser. Germany (1992).


Bibliografa 133

SEGEL, I.H. Enzyme Kinetics. Behavior and Analysis ofRapid Equiibrium and Steady-State Enzyme

Systems. Ed. John Wilwy & Sons. New York (1993).

SHIIRAISHI, F., Experimental evaluation of the usefulness of equations describing te apparent

maximum reaction rate and apparent Michaelis constant of an immobilized enzyme reaction, Enz.

Micrnb. TechnoL, 15 (2) pg 150-154 (1993).

STAMATIS, H., XENAKIS, A., MENGE, U. and KOLISIS, F.N.,Esterificacion reactions catalyzed

by upases inmicroemulsions: The role ofenzyme localization in relation to its selectivity, Bioteclinol.

Bioeng., 42 pg 103-110 (1993).


STAMATIS, H., XENAKIS, A., MENGE, U. and KOLISIS, F.N., Kinetic study oflipase catalyzed

esterification reactions in water-in-oil microemulsions, Bioechnol. Bioeng., 42 pg 931-937 (1993).

TAYYAB, 5. aud QAMAR, 5., A look into enzyme kinetics: Some introductory experiments,

Biochem. Educ., 2Q (2) pg 116-118 (1992).

TASAI, S.W. and CHJANG, C.L., Kinetics, mechanism and time course analysis of lipase-catalyzed

hydrolysis ofbigh concentration olive oil in AOT-isooctane reversed micelles, Bioechnol. Bioeng.,

3Bpg 206-211 (1991).

TASAI, S.W.,WU, G.H. and CmANG,C.L., Kinetics ofenzymatichydrolysis ofolive oil inbiphasic

organic-aqueous systems, Biorechnol. Bioeng.. 3~ pg 761-766 (1991).

ZAKS, A. and KLIBANOV, A., Enzyme-atalyzed processes in organic solvent%, Proc. Neal. A cad.

Sel. USA, ~pg 3192-3196 (1985).


3. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Procedimiento Experimental 137

Teniendo en cuenta que los productos de sntesis objeto de estudio de este trabajo estn

considerados como productos de qumica fina desde el punto de vista industrial, su produccin a gran

escala no puede ser considerada empleando operaciones en continuo. Ms bien se trata de proponer

pequeas producciones de varios productos que se procesan en equipos de dimensiones relativamente

pequeas, en comparacin con los empleados en la industria qumica clsica para un nico producto,

y que operan en discontinuo, por lo que el tiempo de operacin puede ser relativamente elevado en

comparacin con el tiempo de residencia de las especies qumicas en el interior del reactor.

En contrapartida, los productos finales obtenidos son de un elevado valor aadido, lo que

compensa el tiempo de operacin invertido en el proceso, as como las producciones pequeas. Debido

a esto el reactor empleado en este estudio es un reactor tipo tanque agitado que opera en discontinuo

o por cargas.

En los ensayos de reaccin para la obtencin de los diferentes steres objeto de estudio en un

reactor discontinuo, puede considerarse que todos los reactivos pennanecen en condiciones de mezcla

completa, salvo en los casos en que el agua que se extrae continuamente del interior del reactor para
138 Procedimiento Experimental

desplazar el equilibrio hacia la formacin del producto final. En cualquier caso, se busca que la

composicin de la masa de reaccin en todos los puntos del tanque sea la misma, con el fin de que la

reaccin tenga un comportamiento lo ms homogneo posible. Esto, lgicamente, va a depender de los

parmetros de diseo del reactor, de su forma, capacidad, potencia de agitacin y el flujo de fluidos

en el interior de dicho reactor.

Las condiciones de flujo en el interior del reactor, estn influenciadas por su geometra, forma

y potencia del agitador empleado, as como por las dimensiones relativas de ste respecto al reactor.

Para obtener una turbulencia ptima, las dimensiones relativas que deben tener el dimetro del agitador

(da), la altura del lquido sobre el mismo (h) y el dimetro del reactor (d.), deben calcularse segn las

correlaciones que aparecen en la bibliografa [MEHTA,1971].

Habitualmente, el agitador es perpendicular y esta centrado en el reactor, generndose el

movimiento desde el centro del tanque hacia las paredes del mismo. La velocidad de giro vendra dada

por dos componentes una axial y otra radial, si las condiciones de operacin fuesen ideales. Sin

embargo, aparece una tercera componente de velocidad, tangencial, que va a dar lugar a la generacin

de un vrtice que hace que exista un rgimen de circuiacin laminar en la superficie de la mezcla, con

la consiguiente modificacin tanto de la transmisin de calor como de la transferencia de materia y

perdindose as la condicin de mezcla perfecta.

Este efecto se ve ms acentuado cuando el catalizador est constituido por partculas slidas,

ya que la accin de la fuerza centrfuga favorece la circulacin de partculas hacia las paredes del

tanque, donde colisionan y tienden a caer hacia el fondo del reactor. Para paliar esto, se hace necesario

el empleo de tabiques deflectores que cortan las lneas de flujo tangencial y, por tanto, favorecen la

permanencia del rgimen turbulento con lo que se produce una mayor aproximacin a la mezcla

perfecta, que es el objetivo deseado [RASE, 1977].


Instalacin Experimental 139

3.1 INSTALACION EXPERIMENTAL

La instalacin empleada para realizar los experimentos correspondientes al estudio de las

reacciones de esterificacin que aqu nos ocupan, va a variar dependiendo de las condiciones de presin

en que se trabaje. As cuando la reaccin se lleva a cabo a presin atmosfrica, el reactor debe ir

provisto de un refrigerante de reflujo con el fin de que los componentes ms voltiles del medio de

reaccin no se pierdan al pasar a la fase de vapor por efecto de la temperatura, obligndolos a pasar

de nuevo a la fase lquida. En este caso, el sistema se considera que opera en condiciones de

reversibilidad, ya que el equilibrio no se ver modificado por la eliminacin de reactivos o productos

del medio de reaccin.

Por otra parte, cuando interese desplazar dicho equilibrio por eliminacin de alguno de los

componentes de la mezcla de reaccin, variando, para ello, la presin de operacin, con el fin de

trabajar en condiciones de vaco, la instalacinexperimental sever modificada, sustituyendo el sistema

de condensacin de reflujo por un sistema de vaco capaz de mantener la presin de reaccin por

debajo de la atmosfrica. En este caso, puesto que el equilibrio de reaccin se ver alterado por la

eliminacin del medio de alguno de los componentes del mismo, consideraremos que el sistema opera

en condiciones de irreversibilidad.

Teniendo esto en cuenta, los esquemas bsicos de las instalaciones montadas y utilizadas para

llevar a cabo las reacciones objeto de este estudio, se presentan en la figura 3.1 para el primer caso y

en la figura 3.2 para el segundo. En ambas figuras puede observarse que la instalacin se divide en

cinco partes fundamentales, que se describirn posteriormente: sistema de reaccin, sistema de

calefaccin y control de temperatura, sistema de regulacin y control de la agitacin, sistema de toma

de muestras y sistema de vaco o de condensacin de reflujo, segn sea el tipo de reaccin que se

desee llevar a cabo.


140 Procedimiento Experimental

~3~ a
~ O <1
b
Os
M Ib w O
O. 0. Ib Os
O ~ ~ -t
w 1>

~ 9
E
O
~1 u,

Figura 3.1. Esquema del sistema a presin atmosfrica.


Instalacin Experimental 141
Figura 3.2. Esquema del sistema en condiciones de vaco.
142 Procedimiento Experimental

3.1.1 SISTEMA DE REACCION

El sistema de reaccin est constituido por un recipiente de vidrio Pyrex de forma cilndrica,

de 500 c.c. de capacidad, cuyas partes principales se detallan en la figura 3.3. La parte superior del

mismo consta de cinco bocas esmeriladas, con las siguientes funciones:

- Colocacin del refrigerante, para condensar el agua que se va formando en el transcurso de la

reaccin, y que es eliminada del medio de reaccin con el fin de favorecer el desplazamiento

de la misma hacia la formacin de los productos, en el caso de que la reaccin se lleve a cabo

en condiciones de presin inferior a la atmosfrica. Cuando no es as, el sistema de yaci se

sustituye por un sistema de condensacin de reflujo, cuya niisin es la romper el equilibrio de

la fase lquida con la fase vapor, producida por accin de la temperatura, de los componentes

ms voltiles de la mezcla de reaccin, que pueden ser el agua formado en el transcurso de la

reaccin, y en algunos casos los propios reactivos de partida.

- Colocacin del sistema de regulacin y control de la agitacin cuya misin fundamental es que

el flujo de fluidos tenga lugar en rgimen turbuiento para que las condiciones se aproximen

a la mezcla perfecta.

- Colocacin del sistema de toma de muestrs: Cuando se trabaja a presin reducida, ya que los

reactivos son productos de elevado punto de ebullicin, se extraen las muestras con una aguja

hipodrmica, que se introduce en el reactor a travs de un cierre de goma hermtico, y se

extrae la muestra con una bomba de vacio, evitando, de esta manera, que se produzcan grandes

variaciones de la presin en el interior del sistema de reaccin. En el caso de que el sistema

opere a presin atmosfrica, el sistema de toma de muestras puede sustituirse por una simple

rama sumergida en el mdio de reaccin y conectada a una bomba.

- Colocacin del sistema de medida de la temperatura en el medio de reaccin.

- Colocacin del sistema de carga o adicin de reactivos.


Instalacin Experimental 143

Figura 3.3. Reactor empleado para la experimentacin.

3.1.2 SISTEMA DE CALEFACCION Y CONTROL DE TEMPERATURA

El sistema de calefaccin, est constituido por un bao termostlico, el cual se consta de un

recipiente cilndrico lleno con un fluido calefactor, que en este caso es agua, debido a que la

temperatura de operacin est por debajo de los 1000C, puesto que las especificaciones de las especies
catalticas as lo requieren. La temperatura se estabiliza y mantiene constante mediante un tennostato

marca 5. Invester, el cual lleva incoiporado un termmetro de contacto elctrico, controlador de Ja

temperatura, que no permite variaciones apreciables de la misma, por lo que puede considerarse que

el sistema trabaja en rgimen isotermo.


144 Procedimiento Experimental

3.1.3 SISTEMA DE AGITACION, REGULACION Y MEDIDA

Est constituido por un agitador de hlice, colocado a una distancia del nivel del lquido,

aproximadamente igual a un medio del dimetro del recipiente, siendo la altura del lquido del orden

del dimetro del reactor.

El agitador est conectado a un motor Anderson Mark IV de 1/30 HP., 220 y., 50 cps., provisto

de un regulador de velocidad que alcanza un intervalo de 100 a 6000 rpm. El control del agitador se

efecta a distancia mediante un autotransformador, independiente del mismo, con mltiples posiciones,

proporcionandovelocidades altamente estabilizadas, con una gran fuerza de torsin abajas velocidades.

La medida de las revoluciones del agitador, se realiza mediante un sistema de clula

fotoelctrica acoplada a un tacmetro, que indica las revoluciones de O a 6000 rpm.

3.1.4 SISTEMA DE VACIO

El sistema de vaco consta de una bomba tipo AIT-25, de motor trifsico, 220/380 y., 1/4 HP.,

50 Hz., que se alcanza 1420 rpm., una vlvula reguladora de presin, una llave conectada a la

atmsfera y un vanumetro de columna de mercurio, para la lectura de la presin reinante en el

sistema.
Materiales Empleados 145

3.2 MATERIALES EMPLEADOS

Los materiales empleados en la elaboracin de este trabajo pueden clasificarse en dos grandes

grupos. Por una parte se emplearon varios sistemas catalticos con el fin de elegir el ms adecuado para

nuestros propsitos y, por otra, pueden considerarse los diferentes reactivos qumicos empleados en la

sntesis de los seis tipos de steres estudiados.

En primer lugar se tendrn en cuenta estos ltimos, es decir las especies qumicas de partida,

con el fin de hacer una breve identificacin de los sistemas de reaccin objeto de estudio.

3.2.1 REACTIVOS QUIMICOS

Acidos grasos empleados.

Los cidos grasos empleados han sido el cido oleico, cido palmtico, cido mirstico y el

cido 2-metil-butrico. Los tres primeros suministrados por la empresa Henkel-Ibrica S.A. y elltimo

por Aldrich Qunica. En todos los casos de calidad reactivo. En la tabla 3.1 se muestran las

propiedades fsicas ms relevantes de dichos cidos. Los puntos de fusin y ebullicin de los diferentes

compuestos son propiedades definitivas a la hora de elegir las condiciones de operacin, as como las

presiones de vapor de los mismos.

En la figura 3.4 se muestran los grficos correspondientes a los diferentes cidos empleados,

en los cuales estn representadas las presiones de vapor de cada uno de ellos en funcin de la

temperatura de trabajo. Segn estos grficos podremos fijar tanto la temperatura como la presin del

sistema de reaccin, teniendo en cuenta el estado en el que se desee que se encuentren dichos cidos

en el medio de reaccin.
146 Procedimiento Experimental

Tabla 3.1. Constantes fsicas de los cidos empleados.

I Oleico Palmtico
~1 Mirstico 2-metil-butrico

Punto de fusin (0C) 13.3-16.4 63.1 53.9-58 -7


Punto ebullicin (0C) 360-365 353.8 318.2 176.5
Densidad (200C) (g/cc) 0.8905-0.8935 0.8534 0.858 0.936
Indice refraccin (200C) 1.4582 1.4309 1.4273 1.4055

Peso molecular 282.47 256.42 228.36 102.13


Indice neutralizacin 198.6 218.8 245.68 77.6
Indice iodo 89.87 - -

Solubilidad: etanol parcialmente parcialmente soluble soluble


ter soluble soluble poco soluble
acetona soluble parcialmente soluble soluble
benceno soluble soluble soluble soluble

AGU Unce ACIfl M4wmce


T~A~Aft)

5 1W SS 4W SU TUS 4W 5 tU 4W 4W e 7W

~UfN <u., 1W PRSH (ca Hg~

LUDe MIRISTCS ACIBU 2-METIL.UIJT1 Mcm

o- 1W ,ssuss os 1W

Figura 3.4. Presiones de vapor de los cidos grasos empleados.


Materiales Empleados 147

Alcoholes grasos empleados.

Los alcoholes empleados fueron el oleico, isoproplico, cetlico y mirstico. Todos ellos de la

marca Henkel-Ibrica y con una calidad correspondiente a la de reactivo. En la tabla 3.2 se muestran

las propiedades fsicas ms representativas de dichos alcoholes, y en la figura 3.5 las correspondientes

representaciones de presin de vapor frente a temperatura de operacin.

Tabla 3.2. Constantes fsicas de los aicoholes empleados.

Punto de fusin (0C)


ri Oleico

6-7
~1 Cetilico

50
1 Miristico

39-40
1 Isoproplico

-89.5
Punto ebullicin (0C) 335-340 334 263.2 82.4
Densidad (20C) (g/cc) 0.8489 0.8176 0.8236 0.7855
Indice refraccin (200C) 1.4606 1.4283 1.4012 1.3776
Peso molecular 268.49 242.45 214.40 60.11
Solubilidad: etanol soluble poco soluble soluble
ter soluble soluble soluble soluble
acetona parcialmente soluble soluble soluble
benceno. parcialmente soluble soluble soluble

Otros reactivos.

Otros reactivos empleados han sido bsicamente disolventes, involucrados en la recuperacin

de las enzimas inmovilizadas y en la limpieza de equipos. Dichos disolventes fueron etanol, metanol,

cloruro de metileno, acetona e isopropanol, suministrados por la marca Panreac, con una pureza

superior al 98%.

En la preparacin de las muestras para el anlisis cromatogrfico se utiliz como disolvente

de las especies constituyentes del medio de reaccin, sulfuro de carbono, marca Panreac, con calidad

de reactivo para anlisis.


148 Procedimiento Experimental

Los gases empleados en el sistema de anlisis cromatogrfico fueron helio, como gas portador

y auxiliar, y aire e hidrgeno en el detector. Todos ellos suministrados por Liquid Carbonic Espaola

con una calidad L-48 para el helio y L-40 para el hidrgeno y el aire.

ALceHBL elElce ALCOHSL CEnU~

WMPERATWA It>
4-

a -_

. a a
U uf a. SS 4W NS 4W
PUtSINInm,Ihj
a

ALceHUL MIRIBllcm ALCWIUL ISBpR@PIUcS

TBIPEMIUWA9C>
1U

a u

la 4.

a U

5 a-
e lW Ss SS e SU SU TU. SU 5 1U. a a 4W SU NS
< 1W ~n 1W

Figura 3.5. Presiones de vapor de los alcoholes empleados.

3.2.2 SISTEMAS CATALTICOS

Los sistemas catalticos empleados en este trabajo fueron varios catalizadores enzimticos

comerciales, todos ellos provenientes de dos especies fngicas: Mucor miehei y Candida anrarctica.

Todos ellos fueron suministrados por la firma comercial Novo Nordisk Bioindustries.
Materiales Empleados 149

Los preparados enzimticos comerciales de Mucor mieliei fueron cuatro: Lipozyme IM-20,

Lipozyme IM-50, Lipozyme IM y Upozyme 10.000 L. Esta tiltima esta presentada como enzima en

disolucin con una actividad nominal de 10.000 LU/g, siendo un LU (Lipase Unit) la cantidad de

enzima capaz de liberar un micromol de cido butrico por minuto partiendo de una emulsin del

triglicrido correspondiente, a 300C de temperatura y a pH 7.0. La densidad del preparado original es


de 1.15 g/ml, siendo este soluble en agua en todas las proporciones. En la figura 3.6 se muestran los

efectos ejercidos por la temperatura y el pH sobre la actividad de dicha lipasa.

ACTIVIDAD (Y.) ACTIVIDAD (%)


100 iao

80 80

60 60

40 40
Sustrato: 3% GIIceroI-trbutfrato Sustrato: 3% Glcerol-trbutirato
20 Temperatura: 30C 20 pH: 7.0

4 5 6 7 8,9 pH 20 30 40 50 eo
TEMPERATURA CC)

Figura 3.6. Especificaciones de la lipasa Lipozyme 10.000.

Los tres primeros preparados estn constituidos porla misma lipasa, triacilglicerolhidrolasa(EC

3.1.1.3) producida por dicha especie flingica, e inmovilizadasobre resinas de intercambio anionico con

diferentes propiedades cadauna de ellas, y a diferentes concentraciones. La actividad de dichas enzimas

viene dada en BIU/g, siendo un BIU, Batch Interesterification Unit, el nmero de imoles de cido

palmtico transformados con trioleina por minuto utilizando la enzima inmovilizada en cuestin a una

temperatura de 4(rC. En la tabla 3.3 se muestran las actividades de dichos catalizadores, as como las

principales caractersticas de los soportes sobre los que estn inmovilizadas las enzimas.
150 Procedimiento Experimental

Los sistemas enzimticos producidos por la segunda especie fngica (Candida anrarchea)

utilizados en este estudio son los preparados comerciales SP-435 A, SP-435 L y Novozym 435. Dichos

catalizadores se han producido empleando la tecnologa de recombinacin del DNA mediante la

transferencia del cdigo gentico de la especie Candida antaretica a la especie A spergiflus Otyzae. La

lipasa obtenida a partir de esta nueva especie, triacilglicerol hidrolasa (EC 3.1.1.3), se presenta

comercialmenteinmovilizada sobrediferentes resinas macroporosas, de naturaleza acrflica. La actividad

de dichos sistemas catalticos viene dada en PLU/g, siendo un PLU (Propyl Laurate Units) el nmero

de micromoles de laurato de n-propilo obtenidos partiendo de cido larico y 1-propanol durante un

tiempo de 15 minutos de reaccin a 600C. En la tabla 3.3 se muestra la actividad de los diferentes
sistemas catalticos, as como las propiedades representativas, superficie especficay dimetro de poro

medio de los diferentes soportes sobrelos que estn inmovilizadas dichas lipasas, obtenidas empleando

un equipo BET.

Tabla 3.3. Pmpiedades caractersticas de las enzimas inmovilizadas empleadas.

Especie Catalizador Tipo de Superficie Dinietm de Actividad


Soporte Especfica Poin Medio
Fngica Comercial (Resma) (m2/g) (A) Enzimtica

Lipozyme Intercambio 35.80 142.1 31 BIU


IM-20 aninico.
Mucor Lipozyme Intercambio 59.88 175.9 60 BIU
miehel IM aninico
Lipozyme Intercambio 61.78 243.4 58 BIU
IM-50 aninico
Acrlica 29.17 291.7 10200 PLU
A Macroporosa

Candida 5P435 L Acrlica 67.23 210.1 7800 PLU


anrarcrica Macroporosa
Novozym Acrlica 179.2 7000 PLU
435 Macroporosa 95.50
Materiales Empleados 151

Las dos especies enzimticas pueden ejercer con elevada efectividad la accin de lipasa o la

accin de carboxilesterasa y, tambin en ambos casos, la especificidad de dichas enzimas puede ser

posicional o no dependiendo del tipo de sustrato que se desee modificar con ellas. Cuando el sustrato

es adecuado, la especificidad de dichas enzimas esta dirigida hacia las posiciones 1,3 de los

correspondientes sustratos.

En cuanto al efecto de la temperatura de operacin sobre la actividad de estas enzimas

inmovilizadas, puede decirse que el aumento de la estabilidad vine dado por el tipo de soporte

empleado en la inmovilizacin de las mismas y que al ser las resinas, en ambos casos, de la misma

naturaleza, la diferencia de estabilidad entre los diferentes preparados comerciales es despreciable. En

la figura 3.7 se presentan las curvas medias correspondientes a las lipasas de Mucor me/id y de

Candida antarcilca.

ACTIVIDAD <)

100 ACTIVIDAD (1)

loo.

65.

go

o
LI
1an d.
20 60- Condida ant araica
50 -
35 00 01
50 65
20 40 50 90
1EMPERATURA CC)
TEAWERATURA CC>

Figura 3.7. Especificaciones de las lipasas de Mucor mit/id y Orad/da antarctica.

Aunque la estructura de estas lipasas ha sido estudiada por algunos autores [BRADY,1990;

BRZOZOWSKI, 1991], la localizacin de los centros activos de dichas estructuras no est, todava,
152 Procedimiento Experimental

muy claro. Los anlisis realizados mediante la tcnica de rayos X revelan que las lipasas estn

constituidas por estructuras proteicas con conformacin globular, formadas por una cadena de

polipptidos con ms de 269 residuos, cuyo peso molecular oscila entre 29.000 y 30.000 urnas.

Segn dicho estudio, puede considerarse que el centro activo de la protena est constituido por

una triada cataltica de aminocidos cuya secuencia es Serina-Histidina-Asparagina, junto con una

molcuia de Serna activa situada bajo un fragmento helicoidal prolongacin de una superficie curva

y alargada Al parecer la activaci6n de la Jipasa en las inmediaciones de la interfase acuoso-lipidica

depende de muchos factores, siendo los ms acentuados la concentracin de sustrato en dicha interfase,

la orientacin del enlace a romper, la reduccin de la pelcula acuosa que rodea a las molculas de

lpido, o el cambio conformacional que se produce en la enzima.

Enzima Nativa Enzima Activada

Trada cataldea

Ruiliol a swdtur Ser


(HMr6<aw paras Idio vaso) Activada

O
1/
Ser NH. !Enuaceescis=e
.OC1Ct~Oyser
Ser 0W
A
Acido Graso

Figura 3.8. Esquema del cambio conformacional de la lipasa.


Materiales Empleados 153

El cambio de conformacin de la lipasa puede describirse como un movimiento simple del

cuerno rgido de su parte helicoidal. Consiste en una translacin del centro de gravedad en unos ocho

amstrons y una rotacin de 167 grados sobre un eje casi paralelo al de la hlice. Dicho cambio

conformacional esta estrechamente ligado a la fonnacin del complejo enzima sustrato, en el que

interviene la serma activa que acompaa a la triada cataltica, formando un enlace covalente con el

carbono terminal del grupo cido perteneciente a la molcula de sustrato.

Los grupos amino e hidroxilo pertenecientes a la serma de la triada cataltica, se encargan de

estabilizar el oxgeno carboxlico correspondiente, mientras que el grupo constituido por el tomo de

nitrgeno correspondiente a la histidina se encarga de estabilizar el oxgeno del grupo hidroxilo

perteneciente al sustrato. En la figura 3.8 se muestra un esquema correspondiente al cambio

conformacional de la lipasa, as como una aproximacin de la formacin de enlaces con el sustrato

correspondiente.
154 Procedimiento Experimental

3.3 CONDICIONES DE OPERACION

En general, las variables que ejercen una mayor influencia en los procesos de esterificacin

cataltica son temperatura, presin, tiempo de operacin, agitacin, estructura qumica y proporciones

relativas de los reactivos de partida, y naturaleza y concentracin del catalizador empleado.

En funcin de los reactivos que se vayan a emplear en las reacciones de esterificacin

correspondientes, las condiciones de operacin quedaran fijadas dependiendo de los puntos de fusin

y ebullicin de los mencionados reactivos y productos, as como de las especificaciones marcadas por

el tipo de catalizador utilizado.

Debido a que los steres objeto de estudio presentan un punto de ebullicin relativamente

elevado, en principio podra pensarse que el equilibrio de reaccin puede desplazarse hacia la

formacin de productos eliminando el agua de reaccin trabajando a presiones reducidas, ya que este

sera el componente ms voltil del medio de reaccin y a temperaturas moderadas se encontrarla en

fase vapor [IPATIEFF,1936]. No obstante, en el caso en el que uno de los reactivos sea ms voltil

que el agua, dicho reactivo sera arrastrado junto con l. En nuestro caso se da este fenmeno cuando

trabajamos con el alcohol isoproplico, por lo que en dicha situacin tendremos que trabajar a presin

atmosfrica y a temperaturas inferiores a los 830C.

Por otra parte, no conviene trabajar a presiones excesivamente bajas, ya que un vacio

demasiado efectivo podra dar Jugar a una inestabilidad del sistema cataltico, ya que el agua de

constitucin y el agua junto con el que est inmovilizada la enzima dara lugar a una desnaturalizacin

de la misma. En los casos en que los que es viable operar a presin reducida, el limite inferior para

la presin ha sido fijado en 60 nunlig, valor para el cual no se ha observado perdida de actividad

apreciable.
Condiciones de Operacin 155

Segn las especificaciones de las lipasas empleadas, est claro que la temperatura de operacin

no puede ser superior a los 800C, ya que a partir de esta temperatura la actividad cataltica de las
enzimas cae bruscamente, por lo que este valor marcar el lmite superior desde el punto de vista

cataltico. Tambin segn dichas especificaciones, el lmite inferiorpara la temperatura quedara fijado

en 600C, ya que por debajo de este valor, la actividad enzimtica toma valores inferiores al 90% de

la actividad mxima. Segn esto, los lmites de temperatura quedaran fijados desde el punto de vista

de la actividad cataltica.

Sin embargo, para fijar la temperatura tambin es necesario tener en cuenta los puntos de

fusin y ebullicin de los reactantes. As, cuando el alcohol de partida es el isopropanol, el lmite

superior para la temperatura se ha fijado en 750C, con el fin de conseguir que la mayor parte del

alcohol se encuentre en estado lquido. Por otra parte, en los casos en los que el cido o el alcohol de

partida presentanpuntos de fusin relativamente elevados (cido palmtico y alcohol cetlico), el lmite

inferior para la temperatura se ha fijado en 650C, con el fin de disminuir la viscosidad de la mezcla

de reaccin y conseguir un flujo de fluidos adecuado para nuestros propsitos.

Aunque, en un principio, podra considerarse que las condiciones de temperatura impuestas por

el catalizador no son favorables para las reabciones de esterificacin, hay que hacer notar que adems

del consiguiente ahorro energtico que suponen, en comparacin con los procesos clsicos, dan lugar

a una ventaja adicional.

Cuando la temperatura de operacin es elevada, el salto energtico necesario para que tenga

lugar la reaccin es mucho menor, pero tambin se favorecen reacciones secundarias no deseadas, as

como la degradacin de algunos productos de la mezclade reaccin por simples procesos de oxidacin

o polimerizacin. Por tanto, trabajando dentro de los lmites fijados para la temperatura eliminamos

dichas reacciones indeseables.


156 Procedimiento Experimental

Las especificaciones del catalizador, tambin nos fijan la concentracin del mismo en el medio

de reaccin. Segn las mismas, el lmite inferior quedara fijado en un 1% en peso de catalizador con

respecto a la masa total de reaccin, ya que por debajo de esta concentracin la reactividad no varia

linealmente con Ja concentracin, mientras que el lmite superior queda fijado en un 7% en peso, ya

que por encima de dicha concentracin, el sistema deja de comportarse como homogneo o

pseudohomogeneo.

El tiempo de reaccin requerido va a depender de como se hayan lijado el resto de las

condiciones de operacin. Los valores observados en otros procesos oscilan entre los 90 minutos y las

7 horas de reaccin, aunque en algunos casos no se alcanza la concentracin de equilibrio hasta

despus de transcurridos varios das [McCRACKEN,1967]. En nuestro caso se ha podido observar que

el equilibrio se alcanza entorno a las dos-tres horas de reaccin.

La velocidad de agitacin empleada debera ser lo ms elevada posible, con el fin de que el

flujo de fluidos se aproxime lo mximo posible a la aproximacin de mezcla perfecta, es decir que el

rgimen de operacin sea turbuiento y que los fenmenos de transferencia de materia sean

despreciables frente a la etapa constituida por la reaccin qumica. La velocidad de agitacin

recomendada para que se produzca esta situacin, depende de la viscosidad de la mezcla de reaccin,

y puede estimarse en un intervalo de entre 300 y 800 rpm., dependiendo de la estabilidad del sistema.

Por ltimo, queda por fijar la proporcin relativa de los reactivos de partida. Normalmente,

cuando interesa desplazar el equilibrio de la reaccin se trabaja en exceso de alcohol, ya que trabajar

con exceso de cido da lugar a un producto final que no puede destinarse a usos cosmticos o

farmacolgicos. En nuestro casos interesa trabajar con relaciones molares 1:1, ya que el producto final

se obtiene con una conversin suficientemente elevada, cumplindose as las especificaciones

comerciales impuestas sin necesidad de una posterior purificacin del producto final.
Desarrollo de un Experimento 157

3.4 DESARROLLO DE UN EXPERIMENTO

La experimentacin sellev a cabo de modo que siempre atendiese a la misma sistemtica, con

el fin de que todos los experimentos fuesen comparables desde el punto de vista de las condiciones de

operacin. As, el inicio de cada experimento se realiz cargando el reactor con la mezcla de reaccin:

alcohol, cido y enzima inmovilizada como catalizador.

Las cantidades de los reactivos y catalizador vienen determinadas por las concentraciones

deseadas para la realizacin de cada experimento, y por el nivel del lquido que ocupa la mezcla de

reaccin en el reactor, que debe ser tal que la agitacin proporcionada sea la adecuada, segn las

consideraciones anteriormente expuestas.

Una vez alcanzada la temperatura de operacin en el bao termostatizado, as como en el

reactor cargado que esta introducido dentro del mismo; se conecta el sistema de vaco, el cual

proporciona un incremento de altura en la columna de mercurio determinado, segn la presin a la que

se lleve a cabo la reaccin. Lgicamente, en el caso en el que la reaccin se realice en trminos de

presin atmosfrica, el sistema de vaco no se conectar.

Simultneamente, se pondr en funcionamiento el sistema de agitacin, y se conectar el

refrigerante que hace condensar el agua que se va formando en el reactor, y que se recoge en otro

matraz a la salida del refrigerante. En el caso en que la reaccin se lleve a cabo a presin atmosfrica,

se conectar eJ refrigerante de reflujo, con el fin de que la mayor parte de los componentes voltiles

permanezcan en fase lquida en el seno de la mezcla de reaccin.

Para que las condiciones de operacin no varen durante el transcurso de la reaccin, evitando

as retrasos en la consecucin del estado estacionario o inestabilidades dentro del propio sistema, ser
158 Procedimiento Experimental

necesario emplear sistemas de instrumentacin y control capaces de mantener constantes los siguientes

parmetros:

(a) La presin del sistema; esto se consigue manteniendo constante la diferencia de alturas entre

las ramas del manmetro de mercurio, regulando para ello la cantidad de la mezcla aire-vapor

succionada por la bomba de vaco.

(b) La temperatura del bao termostatizado; valindose para ello de un termmetro de contacto

acoplado a un termostato que se encarga de conectar o desconectar la resistencia calefactora.

(c) El nmero de revoluciones del agitador; que es reguiado mediante un selector de velocidades

acoplado al motor de agitacin.

Las muestras, de unos 0.5 cm3 aproximadamente, se extraen con un intervalo de tiempo de diez
minutos durante la primera media hora de reaccin, y con un intervalo de media hora para las restantes.

La extraccin se realiza mediante una aguja acoplada a un sistema de vacio; la toma de muestras debe

ser rpida para no producir perturbaciones que puedan dar lugar a variaciones de presin apreciables

en el interior del reactor.

Las muestras extradas se conservan en rcipientes cerrados y sometidos a refrigeracin con

el fin de congelar la reaccin para que su composicin no sea alterada Posteriormente se procede a

la preparacin de dichas muestras para el consiguiente anlisis, el cual se detallar en el captulo

siguiente.

Una vez finalizada la reaccin, se procede a la recuperacin de la enzima. Para ello se utiliza

un sistema de filtrado a vaco, con el que se obtiene por una parte la mezcla de reaccin resultante

(cido-alcohol-ster) y por otra la enzima inmovilizada. Esta ltima deber someterse posteriormente
Biblio2rafa 159

a un sistema de lavado con disolventes para dejarla exenta de los posibles productos acumulados

durante la reaccin y conseguir la eliminacin de la posible cantidad de agua depositada.

Por ltimo, se somete el catalizador a un sistema de secado con aire a presin, con el fin de

que quede listo para ser reutilizado en una nueva carga de reaccin; mientras que los disolventes

empleados en las operaciones anteriores se recuperan mediante una operacin de destilacin para evitar

la prdida de los mismos.

3.5 BIBLIOGRAFIA

BRADY, L., BRZOZOWSKI, A.M., DEREWENDA, Z.S., DODSON, E., DODSON, 0., TOLLEY,

5., TURKENBURG, Ji>., CHRISTh4NSEN, L., HUGE-JENSEN, B., NORSKOV, L., THIM, L.

and MENGE, U.,A serme protease triadforms te catalytic center of a triacylglycerol lipase, Naiure

343 (2) pg 767-770 (1990).

BRZOZOWSKI, A.M., DEREWENDA, U, DEREWENDA, Z.S., DODSON, 0.0., LAWSON,

DM., TURKENBURG, J.P., B.JORKLING, E, HUGE-JENSEN, B., PATKAR, S.A. and THIM,

L., A model for interfacial activation in lipases from tbe structure of a fungal lipase-inhibitor

complex, Nature 351 (6) pg 491-494 (1991).

IPATIEFF, VN. and GOSSE, A.V., Aikilation of parafflns with oleflns in the presence of

Alundnium trichioride, 1. Am. Chem. Soc. 58 pg 915-918 (1936).

MCCRACKEN, D.I. and DICKSON, EF., Reaction Kinetics of ciclohexanol -AcOH esterification,

md. Eng. Chem. Proc. Res. Dey, 6 pg 286-291 (1967).

MEETA, V.D., Mass transfer in mechnically agitated gas-liquid contactors, Chem. Eng. Sci. 26 pg

461467 (1971).

RASE. H.E, Chemical Reactor Desgn for Process Plants. Principies & Techniques. Ed. John Willey

& Sons. New York (1977).


4. METODOS DE ANALISIS
Mtodos de Anlisis 163

En el presente capitulo se detalla el estudio realizado para la eleccin de los mtodos de

anlisis para el seguimiento e identificacin de las especies qumicas presentes en la sntesis enzimtica

de steres de cidos y alcoholes grasos. La identificacin de las especies presentes en el medio de

reaccin es necesaria para asegurarse de que los la mezcla de reaccin es la deseada. Sin embargo, el

seguimiento de las concentraciones de las mismas puede Jevarse a cabo mediante eJ estudio de una

de las especies, una vez conocidas las reacciones que tienen lugar en el seno de la reaccin. Los cidos

grasos para los cuales se ha llevado a cabo dicho estudio han sido los cidos oleico; palmtico y

mirstico. Mientras que los alcoholes en los que se basa el seguimiento de las conversiones

correspondientes, fueron el oleico y el cetflico. Por tanto, en las muestras de reaccin, caben esperarse

como especies mayoritarias dichos cidos y alcoholes grasos, as como los steres correspondientes,

segn sea el tipo de reaccin que se vaya a analizar.

Entre las tcnicas analticas conocidas, las que mejores resultados proporcionan a la hora de

la determinacin, tanto cuantitativa como cualitativa, de los reactivos y productos de sntesis objeto de

inters en este trabajo, son la cromatografa gas-liquido y la espectrometra de masas, cuya fiabilidad

est sobradamente demostrada.


164 Mtodos de Anlisis

4.1 CROMATOGRAIA GAS-LIQUIDO

El anlisis cuantitativo y el seguimiento en el tiempo de las especies qumicas presentes en el

sistema de reaccin, se ha realizado mediante Cromatografa Gas-Lquido. Dicha cuantificacin se ha

llevado a cabo mediante la tcnica cromatogrfica basada en el empleo de patrn interno.

El campo de aplicacin de la cromatografa de gases es bastante amplio en cuanto al anlisis

de materias grasas se refiere. Aunque la volatilidad de este tipo de compuestos es escasa, el empleo

de esta tcnica es viable empleando para ello mtodos de derivatizacin que disminuyen el punto de

ebullicin de los mismos, o empleando fases estacionarias estables a elevadas temperaturas.

Los anlisis realizados para el desarrollo del anlisis de estos productos se han llevado a cabo

en un cromatgrafo de gases Hewlett-Packard 5890 Sedes II.

4.1.1 ELECCION DE LA COLUMNA

Las columnas de tipo capilar o semicapilar son las ms adecuadas para este tipo de anlisis,

ya que, adems de ser muy verstiles, permiten trabajar con flujos gaseosos relativamente elevados,

lo que da lugar a mejoras considerables en la transferencia de materia existente entre la fase mvil y

la fase estacionaria de la columna. Este hecho redunda en la obtencin de unos picos mucho ms

simtricos y, por tanto, en una mejora de la cuantificacin de las especies analizadas.

Con objeto de seleccionar la columna apropiada para los sistemas en cuestin, se llev a cabo

una revisin bibliogrfica de las columnas empleadas en esta tcnica de anlisis, as como una

seleccin entre las diferentes marcas comerciales, lo que dio lugar a la eleccin de una columna capilar

de slice fundida con un contenido del 5% de fenilmetilsilicona.


Cromatografa Gas-Liquido 165

4.1.2 CONDiCIONES DE OPERACION

Las condiciones de operacin para el anlisis cromatogrfico dependen, lgicamente, de todas

y cada una de las especies presentes en la muestra a analizar. Por eso fue necesario tener en cuenta las

propiedades fsico-qumicas de dichas especies.

Salvo el programa de temperaturas empleado en el horno cromatogrfico para resolver el

mtodo de anlisis de cadauna de las diferentes muestras, las condiciones de operacin para el anlisis

y el equipo empleado fueron las mismas en todos los casos. En la tabla 4.1 se detallan dichas

condiciones de anlisis, generales para todos los casos.

Tabla 4.1. Condiciones de operacin del cromatgrafo HP 5890 Series II.

slice fundida
MATERIAL crosslinked con un 5% de
fenilmetilsilicona
COLUMNA DIAMETRO INTERNO 0.31 mm
LONGITUD 25 m
ESPESOR PELCULA 0.71 gnn

PORTAL INYECCION 2700(2


TEMPERATURAS
DETECTOR (FIl)) 27O~C
NATURALEZA Helio
GAS PORTADOR CAUDAL 1 ml/mm
PRESION 21 p.s.i.
SISTEMA INYECCION splitiess (50 s)
MUESTRA 1 pi (0fl25 gen 1.8 g
INTRODUCIDA CONCENTRACION de disolvente)
DURACION ANALISIS 20 -40 rin
166 Mtodos de Anlisis

En cuanto los programas de temperaturas empleados para llevar a cabo dicho anlisis, se

proponen dos. En la tabla 4.2 se detallan dichos programas. El primero de ellos se emple para resolver

el anlisis de los steres ms voltiles: oleato de isopropilo, palmitato de isopropilo y 2-metil-butirato

de oleilo. El segundo programa de temperaturas se utiliz para solucionar el anlisis de los steres ms

pesados: miristato de miristilo, oleato de oleilo y oleato de cetilo.

Tabla 4.2. Programas de temperaturas del cromatgrafo HP 5890 Series II.

PROGRAMA 1 PROGRAMA 2
TEMPERATURA INICIAL 1500C iicm
TIEMPO INICIAL 1 mm ruin
VELOCIDAD DE CALENTAMIENTO 5.50C/min l0C/min
TEMPERATURA FINAL 2000C 27CfC
TIEMPO FINAL 15 mm 20 mm

4.2 CROMATOGRAFIA DE GASES-ESPECTROMETRIA DE MASAS

La identificacin de las especies qumicas producidas en el medio de reaccin, se ha Jlevado

a cabo mediante la tcnica de cromatografa de gases-espectrometra de masas (OC/EM). El anlisis

de las muestras se realiz en un aparato compacto de cromatografa de gases-espectrometra de masas


Hewlett-Packard, modelo 5992B, provisto de una columna capilar.

4.2.1 ELECCION DE LA COLUMNA

La eleccin de la columna se realiz igual que en el caso de la cromatografa gas-liquido y,

lgicamente, esta result ser una columna capilar de slice fundida con un contenido del 5% de

fenilmetilsilicona.
Cromatografa de Gases-Espectrometra de Masas 167

4.2.2. CONDICIONES DE OPERACION

Las condiciones de operacin para el anlisis por cromatografa de gases-espectrometra de

masas se han elegido de la misma forma que en el caso del anlisis mediante cromatografa gas-liquido.

Dichas condiciones generales se detallan en la tabla 4.3.

Tabla 4.3. Condiciones de operacin del equipo HP 5992B.

slice fundida
MATERIAL crosslinked con un 5% de
fenilmetilsilicona
COLUMNA DIAMETRO INTERNO 0.31 mm
LONGITUD 12 m

ESPESOR PELCULA 0.71 inn


ENERGA DE IONIZACION 70 e.v.

RANGO DE MASAS EMPLEADO 150-550 u.m.a.


TEMPERATURA DEL PORTAL INVECCION 2750(2
NATURALEZA Helio
GAS PORTADOR CAUDAL 1 ml/mm
PRESION 10 p.s.i.
SISTEMA INYECCION splitless (30 s)
1 pl (0.020 g en 1.8 g
MUESTRA CONCENTRACION de disolvente)
INTRODUCIDA
TIEMPO DE ELUCION 2 mm
DEL DISOLVENTE

Tambin en este caso el programa de temperaturas varia dependiendo de la volatilidad de los

steres que se vayan a analizar, por eso, al igual que en el punto anterior, ser necesario emplear dos

programas de temperaturas. Dichos programas se detallan en la tabla 4.4. El primero se emplea para

las muestran que presentan oleato de isopropilo, palinitato de isopropilo, 2-metil-butirato de oleilo y

miristil miristato, mientras que el segundo se emplear para el oleato de oleilo y el oleato de cetilo.
168 Mtodos de Anlisis

Tabla 4.4. Programas de temperaturas del cromatgra% HP 5890 Series II.

PROGRAMA 1
j PROGRAMA 2

TEMPERATURA INICIAL l5~C l7rnC


TIEMPO INICIAL 5 mm 1 mm
VELOCIDAD DE CALENTAMIENTO 1 5.50C/min 100C/min
TEMPERATURA 1 2000C 2700(2
TIEMPO 1 15 mm 20 mm
VELOCIDAD DE CALENTAMIENTO 2 smC/mm 500(2
TEMPERATURA FINAL 30(YC 30~C
TIEMPO FINAL 5 ruin 5 mm

4.3 RESULTADOS Y DISCUSION DEL METODO DE ANALISIS

A continuacin se exponen los resultados obtenidos mediante Cromatografa Gas-Liquido. En

las figuras 4.1, 4.2, 4.3, 4.4, 4.5 y 4.6 se puede observar los cromatogramas tpicos correspondientes

a las tuuestras de las reacciones de esterificacin entre los diferentes cidos y los alcoholes grasos

correspondientes. En las Ibblas 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9 y 4.10 se recogen los picos obtenidos en los

anlisis, los tiempos de retencin correspondientes a cada uno de los picos y el nombre de los

compuestos correspondientes a los picos identificados.

Exceptuando los picos correspondientes a los cidos y alcoholes grasos de partida, el resto son

desconocidos. La identificacin de estos picos, se llevar a cabo empleando la tcnica de Cromatografa

de Gases-Espectrometra de Masas.
Resultados y Discusin del Mtodo de Anlisis 169

1 3 4
1~

4
Figura 4.1. Cromatograma tipo de la reaccin de esterificacin entre el cido oleico y el alcohol oleico.

lbbla 4.5. Tiempos de retencin de las especies de reaccin en la esteriflcacn del cido
oleico con alcohol oleico.

PICO TIEMPO RETENCION (mm) COMPUESTO1


1 Disolvente
2 13.728 Alcohol Oleico
3 19.981 Acido Oleico
4 32.557 Desconocido
170 Mtodos de Anlisis

1 2 3 4

e-

Figura 4.2. Cromatograma tipo de la reaccin de esterificacin entre el cido oleico y el alcohol
cetlico.

Tabla 4.6. Tiempos de retencin de las especies de reaccin en la esterificacin del cido
oleico con alcohol cetflico.

PICO TIEMPO RETENCION (mm) COMPUESTO

1 Disolvente
2 12.012 Alcohol Cetlico
19.982 Acido Oleico
4 30.176 Desconocido
Resu1t~os y Discusin del Mtodo de Anlisis 171

1 3

e.

Figura 4.3. Cromatograma tipo de la reaccin de esterificacin entre el cido oleico y el alcohol
isoproplico.

Tabla 4.7. Tiempos de retencin de las especies de reaccin en la esterificacin del cido olelen
con alcohol isopmplico.

PICO TIEMPO RETENCION (mm) COMPUESTO

1 Disolvente
2 25.752 Acido Oleico
3 28.957 Desconocido
172 Mtodos de Anlisis

o-
o

Figura 4.4. Cromatograma tipo de la reaccin de esterificacin entre el cido palmtico y el


alcohol isoproplico.

Tabla 4.8. Tiempos de retencin de las especies de reaccin en la esterificacin del cido
palmtico con alcohol isopropflico.

PICO TIEMPO RETENCION (mm) COMPUESTO

1 Disolvente
2 18.528 cido Palmtico
3 20.311 Desconocido
Resultados y Discusin del Mtodo de Anlisis 173

Figura 4.5. Cromatograma tipo de la reaccin de esterificacin entreel cido mirstico y el alcohol
mirstico.

Ibbla 4.9. Tiempos de retencin de las especies de reaccin en la esterificacin del cido
mirstico con alcohol inirstico.

PICO TIEMPO RETENCION (mm) COMPUESTO

1 Disolvente
2 6.635 Alcohol Mirstico
3 8.469 Acido Mirstico
4 22.395 Desconocido
174 Mtodos de Anlisis

3
1

o-

Figura 4.6. Cromatograma tipo de la reaccin de esterificacin entre el cido 2-metil-butrico y el


alcohol oleico.

Tabla 4.10. Tiempos de retencin de las especies de reaccin en la esterificacin del cido 2-
metil-butfrico con alcohol oleico.

PICO TIEMPO RETENCION (mm) COMPUESTO


1 Disolvente
2 16.757 Alcohol Oleico
3 19.466 Desconocido
Resultados y Discusin del Mtodo de Anlisis 175

Del anlisis realizado empleando la tcnica de Cromatografa de Gases-Espectrometra de

Masas, se obtuvieron los correspondientes espectros en trminos de abundancias relativas de cada

fragmentacin en relacin al pico base.

En las Figuras 4.7,4.8,4.9,4.10,4.11 y 4.12 se muestran, los espectros correspondientes a las

muestras de reaccin analizadas. Analizando los espectros de masa correspondientes a los productos

mayoritarios de los seis tipos de muestra de reaccin, se pudo comprobar que los compuestos

desconocidos correspondan a los steres objeto de sntesis.

En la Ibbla 8 se recogen los tiempos de retencin de los picos desconocidos en cromatografa

de gases, as como la masa molecular a la que corresponden dichos compuestos segn el anlisis de

los espectros obtenidos por espectrometra de masas, lo que conduce a la identificacin de los

compuestos en cuestin.

Tabla 4.11. Interpretacin de los espectros. Identificacin delios productos de reaccin.

SISTEMA TIEMPO MASA COMPUESTO


RETENCION (u.m.a.)
REACCION (mm)

cido oleico Oleato de


alcohol oleico 32.557 532 oleilo
cido oleico Oleato de
alcohol cetnico 30.176 506 Cetilo
cido oleico Oleato de
alcohol isopropllico 28.957 Isopropilo
cido palmtico Palmitato de
alcohol isopropffico 20.311 298 Isopropilo
cido mirstico Miristato de
alcohol mirlstico 22.395 424 lvliristio
cido 2-metil-butrico 2-metil-butirato
19.406 352 oleilo de
alcohol oleico
176 Mtodos de Anlisis

E x
u1 (e
~ O
_______ u O
u 1
____________0~
a
m
1- _______a O
a m
a O
~p j~ 5

-~ -o

- ,~>
e 6
O
1

o
m
u, z
rS -<

6 m
e (J)
-t
m
uY
II.->
e

b a
e ,-
u
-<u
a

-ea
<.,, a
u
u
u
o
ru
o
<U

Figura 4.7. Espectro de masas correspondiente a una muestra de la reaccin de esterificacin de


cido oleico con alcohol oleico.
Resultados y Discusin del Mtodo de Anlisis 177
-e
Lb
II,
a
e- u
u,
:mn
e
06
u
-e
.4 u
u,- -Ib
Ce> 0>
e
6
w o,
1- Ce>
u, I6
w CI
a
Cg
<4
-J
CC e
.3~~
1, u, <4
w e,-
o CC <4
04.~
CC e
-e -
r -I .e4
MCe> -
o
u,
o .4: u
-u,
-0
o u,-
L

5
z -0 4 -
e u
w .4 -a
o
w e,
0% A
o a
e
a
1-
o Ii,
O u ~1
h
t
o-> u 4
.1 ~4
Figura 4.8. Espectro de masas correspondiente a una muestra de la reaccin de esterificacin de
cido oleico con alcohol cetffico.
-
178 Mtodos de Anlisis

Figura 4.9. Espectro de masas correspondiente a una muestra de la reaccin de esterificacin de


cido oleico con alcohol isopropilico.
Resultados y Discusin del Mtodo de Anlisis 179
e -e
0%
04 e
Ce,
e
Ib Ib
a <4
e
~li
e -Ib
04
CI
0% 04\
04
CC-
04
Ce>
04
u,
o:
w -4
1-
Co .4
w .4
-J
r .4
-u,
e
w e, .4
-J
r 0%
1-
w .4
.4-
<e>
e .4
o- <4
.3
e
5 .4 ~ .4
CC ~
o ~
e
~\O%
a
-
-:
z e,__________________
CC
(-3 a
w -I
o a
o e
e 4
1 .4
Figura 4.10. Espectro de masas correspondiente a una muestra de la reaccin de esterificacin de
cido palmtico con alcohol isopropilico.
180 Mtodos de Anlisis

E s
4 mi
NC e> rn
u
u
.4
m
o
0-
z
O
e,
Ne o
a o
e -4
o
-o
1~
ti> -l
0- m
u,. u
eE -I

m
0-
o
<U.
a r
0%
e.
u m
o,
-I

a
o
ti>
u. C
e 0~

ti>
e
u

o
It
u

ib: ib
u
u. <U

u--
Figura 4.11. Espectro de masas correspondiente a una muestra de la reaccin de esterificacin dc
cido mirstico con alcohol inirstico.
Resultados y Discusin del Mtodo de Anlisis 181
-ee
CI
04
Ib~ -66
o, -
CI-
Ni
<e

e
Ib -e
u. e,
04
r-4
a 04~
04
u e
n.= -u,
w Cg <4
1-
CI,
w 04.
-J 04
z e
w CI -e
ci 0%- 04
w .4
o a-
CC a
1-
ci
O 04 e
a) .4 16
-4
e
o u. .4
5 e
CC .4 .4
ci .4
1~ e
-e
.4
0%
nl
e .0~
-J a
r flr
(6 CI u
u,
1- 06 Ib
w
u e> CtE
4
e 1..
C4 .4 x
Figura 4.12. Espectro de masas correspondiente a una muestra de la reaccin de esterificacin de
cido 2-metil-butrico con alcohol oleico.
182 Mtodos de Anlisis

Habida cuenta de la necesidad de cuantificar las especies existentes en el medio de reaccin,

una vez identificadas dichas especies, as como sus correspondientes tiempos de retencin en

Cromatografa Gas-Lquido, se procedi al clculo de las rectas de calibrado para los diferentes cidos

grasos empleados como productos de partida en la reaccin de esterificacin con isopropanol.

Dichas rectas de calibrado, se han obtenido relacionando la razn entre el peso de cido graso

y el peso de la sustancia patrn, con la razn entre las reas de cido graso y de sustancia patrn

correspondientes a dichos pesos, cuyo valor se ha mantenido dentro del intervalo que cabe ser esperado

para cada una de las muestras de reaccin.


5. ELECCION DEL CATALIZADOR
Eleccin del Catalizador 185

Con el fin de conocer el comportamiento de los diferentes sistemas estudiados frente a los

diferentes sistemas catalticos disponibles, se llevaron a cabo una serie de experimentos previos que

se detallaran en el presente capitulo. Los sistemas catalticos empleados a tal fin estn constituidos por

una sal metlica, cloruro de estao (II) pentahidratado, cuatro formas comerciales de la lipasa de Mucor

mieliel y tres formas comerciales de la lipasa de Candida antarctica.

Para cada uno de los sistemas de reaccin planteados, se realizaron los experimentos

correspondientes, uno por cada tipo de catalizador. Las condiciones de operacin para cada serie de

experimentos se fijaron inicialmente, teniendo en cuenta las limitaciones planteadas en el capitulo tres.

Obviamente, es necesario mantener dichas condiciones de operacin constantes durantela reaccin para

que los experimentos sean comparables desde el punto de vista de la actividad cataltica. En este

sentido, la validez de cada una de las especies catalticas propuestas se comprob midiendo la

conversin del cido graso de partida en el ester buscado, a lo largo del tiempo de reaccin.

Como se ver a continuacin, la eleccin del catalizador se realiz teniendo en cuenta tanto

la conversin como la selectividad de los diferentes sistemas catalticos.


186 Eleccin del Catalizador

51 ESTERIFICACION DE ACIDO OLEICO CON ALCOHOL OLEICO

Con el fin de cumplir los objetivos propuestos se realizaron ocho experimentos, cuyas

condiciones de operacin se resumen en la tabla 5.1. En todos los casos los reactivos de partida fueron

el cido oleico y el alcohol oleico.

Tabla 5.1. Resumen de los experimentos previos para la sntesis de Oleato de Oleilo.
REACCION TIPO DE R. MOLAR ( P (
CATALIZADOR AC:AL__1 (0C)
(0C) j_(mm Hg)_j (%)
POOI Lipozyme 1M20 1:1 70 60 5
P002 Lipozyme 11450 1:1 70 60 5
P003 Lipozyme IM 1:1 70 60 5
P004 Lipozyme 10.000 1:1 40 710 5
P005 SP 435-A 1:1 70 60 5
P006 SP435-L 1:1 70 60 5
P007 Novozym 435 1:1 70 60 5
P008 SnCl
2.5H20 1:1 180 60

El tiempo de reaccin total fue de tres horas para todas las reacciones, salvo en el caso en que

el catalizador empleado es cloruro de estao, donde el tiempo total de reaccin fue de siete horas. En

el primer caso se pudo comprobar que las variaciones en la conversin de cido en ster a partir de

las dos horas de reaccin era en todos los casos inferior al 2%, por lo que se puede considerar que para

dicho tiempo de reaccin se ha alcanzado el equilibrio.

En la figura 5.1 se representan las diferentes conversiones alcanzadas a las dos horas de

reaccin para los diferentes sistemas catalticos. Como puede observarse, se dan dos casos en los que

la conversin est muy por debajo del valor medio obtenido con los dems sistemas catalticos. El

primer caso corresponde a la lipasa de Mucor miehei en disolucin, en el que la conversin obtenida
Esterificacin de Acido Oleico con Alcohol Oleico 187

a las dos horas es del 30.05%. Este valor tan bajo puede deberse a dos factores: Por una parte, la

temperatura de trabajo es muy inferior por motivos de estabilidad de la propia lipasa, lo que influye

directamente sobre el salto energtico necesario para que la reaccin tengalugar. Por otra parte, al estar

la lipasa en disolucin, existe una concentracin de agua en el medio de reaccin que le es

desfavorable al equilibrio de formacin de productos, por lo que la conversin en ester se ve

notablemente disminuida, aunque podra mejorarse aumentando el tiempo de reaccin.

Xac (1)
95.8
96.6 94.1 90.7 92.01
100- SL1

so
51.7
so

40 80.05

20

o
1/
1
ql
1

POO1 P002 POOS P004 P005 POOS P007 POOS


1

Figura 5.1. Conversiones en oleato de oleilo a las dos horas de reaccin.

Cuando la conversin a las dos horas slo alcanza el 5 1.7%, el catalizador empleado es cloruro

de estao. En este caso, la conversin obtenida a las siete horas de reaccin casi alcanza el 80%, sin

embargo, la temperatura necesaria es de 1800C, lo que da lugar a la aparicin de reacciones secundarias


de oxidacin y polimerizacin, por lo que este sistema cataltico tampoco es adecuado para nuestros

objetivos, ya que sera necesario someter el producto a operaciones de purificacin.


188 Eleccin del Catalizador

En cuanto al resto de los sistemas catalticos emplearlos, puede observarse que las conversiones

obtenidas con lipasas inmovilizadas de Mucor miehel son ligeramente superiores a las obtenidas con

las lipasas inmovilizadas de Candida antaretica, lo que indica que aunque los dos tipos de lipasas

presentan una actividad similar hacia ambos sustratos, los catalizadores constituidos por la primera de

ellas son ms adecuados para esta sntesis. De los tres sistemas catalticos elegidos, puede observarse

que la menor conversin obtenida, 94.9% se obtiene cuando el catalizador es el sistema Lipozyme IM-

50 que, curiosamente, es el que mayor actividad nominal presenta en las especificaciones. Esto indica

que la especificidad de los catalizadores no slo depende de la cantidad de enzima inmovilizada sobre

el soporte en cuestin, sino que tambin depende de los parmetros caractersticos de dicho soporte.

Si comparamos la superficie especfica de los catalizadores, podemos observar que tanto para

la lipasa Lipozyme IM, como para la Lipozyme IM-50, el valor observado es del mismo orden de

magnitud, 60 m~/g, mientras que para la lipasa Lipozyme IM-20, el valor obtenido es casi la mitad,

35.8 m2/g. Como para los preparados INI e IM-20, las conversiones son muy similares, esto indicarla
que la conversin no se ve afectada por este parmetro en las condiciones de reaccin fijadas.

Sin embargo, si comparamos los valores del dimetro medio de poro, podemos ob~ervar que

en el caso del sistema Lipozyme IM-50, el valoi obtenido, 243.4 A, es mayor que en los otros dos

casos, 142.1 A para el sistema Lipozyme IM-20 y 175.9 A para el Lipozyme IM. Esto se traduce en

un aumento de la conversin a medida que el dimetro de poro medio disminuye.

A la vista de estos resultados, puede decirse que la reaccin tiene lugar exclusivamente en la

superficie, puesto que de no ser as, al disminuir el dimetro medio de poro la conversin disminuira,

ya que tanto los reactivos como los productos encontraran una mayor resistencia en las posibles etapas

de difusin interna, llegando al bloqueo de los canales porosos en los casos extremos. No obstante esta

etapa no tiene lugar, puesto que no se ha apreciado muestra alguna de desactivacin.


Esterificacin de Acido Oleico con Alcohol Cetilico 189

5.2 ESTERIFICACION DE ACIDO OLEICO CON ALCOHOL CETILICO

La eleccin de catalizador para esta sntesis se llev a cabo de forma anloga. Los reactivos

de partida fueron cido oleico y alcohol cetlico. Las condiciones de operacin para estos experimentos

previos se fijaron segn la metodologa descrita en el captulo tres. En la tabla 5.2 se resumen las

condiciones de operacin para dicho sistema de esterificacin.

Tabla 5.2. Resumen de los experimentos previos para la sntesis de Oleato de Cetilo.

REACCION [_E~ATALIZADOR R.MOLAR


Q
QC) (
(mm Hg)
w1
(%)

POC Lipozyme 1M20 1:1 75 60 5


POC2 Lipozyme IMSO 1:1 75 60 5
POC3 Lipozyme IM 1:1 75 60 5
POC4 Lipozyme 10.000 1:1 55 710 5
POC5 SP 435-A 1:1 75 60 5
POC6 SP435-L 1:1 75 60 5
POC7 Novozym 435 1:1 75 60 5
POC8 SnCl2.5H20 1:1 180 60 1

A excepcin de las reacciones en las que se emplea como catalizador cloruro de estao y

Lipozyme 10.000, cuyo tiempo total de reaccin fue de siete horas, en el resto de los experimentos el

tiempo total de operacin fue de tres horas, aunque no se obtuvieron variaciones importantes en la

conversin a partir de las dos horas de reaccin.

En la figura 5.2 se muestra el valor de la conversin obtenido a las dos horas de reaccin para

los ocho sistemas catalticos probados. Como puede observarse la conversin obtenida empleando

cloruro de estao como catalizador alcanza el 43.5%, mientras que para las siete horas de reaccin se

llega hasta un 81.2%. Al igual que en caso anterior se observa un pardeo importante, tpico de la
190 Eleccin del Catalizador

oxidacin de la mezcla de reaccin, as como una disminucin en la selectividad del catalizador, puesto

que aparecen productos indeseables en el medio de reaccin procedentes de reacciones secundarias que

deben eliminarse va purificacin para que el producto final cumpla especificaciones.

Xac (1)

100 - 87.8 91.01


78.1
80-
82.05 ~.
60-
43.5
40

15.31

0
POC1 POC2 POCO POC4 POCO POCO POC7 POCO

Figura 5.2. Conversiones en oleato de cetilo a las dos horas de reaccin.

Como puede observarse, la actividad de los sistemas catalticos constituidos por la lipasa de

Candida antarcilca frente a los reactivos de partida es muy superior a la observada en los sistemas

enzimticos obtenidos a partir de la lipasa de Mucor miehei. Lo que indica que esta ltima se ve

parcialmente inhibida por la presencia del alcohol cetlico.

En cuanto a los catalizadores de Candida antarcilca, podemos decir que para el preparado de

mayor actividad cataltica nominal, SP-435 A, se obtiene una menor conversin (78.1%). Esto significa

que las caractersticas de los soportes juegan un papel relativamente importante. El soporte del
Esterificacin de Acido Oleico con Alcohol Cetlico 191

catalizador SP-435 A presenta una superficie especfica de 29.17 m2/g, menos de la mitad que el
sistema cataltico SP-435 L, 67.23 m2/g, y menos de una tercera parte de la superficie especfica del

preparado Novozym 435, 95.50 m2/g. En estos dos ltimos casos, se observa un aumento de la

conversin hasta un 87.3% en el primero y hasta un 91.01% en el segundo.

Por otra parte, el dimetro medio de poro aumenta desde 179.2 A en el sistema Novozym 435

hasta 210.1 A para el sistema SP-435 L, y 291.7 A para el catalizador SP-435 A. Segn estos valores,

puede decirse que el rendimiento del proceso se mejorarla empleando sistemas enzimticos procedentes

de lipasa de Candida antarctica inmovilizada sobre soportes con elevada superficie especfica y

pequeo dimetro de poro medio.

El aumento de la conversin con el aumento de la superficie especfica, puede explicarse

teniendo en cuenta que la formacin de enlaces entre los centros activos de la lipasa y los

correspondientes sustratos tiene lugar en la superficie del soporte, lo que indica tambin que la lipasa

debe inmovilizarse por adsorcin, puesto que la cantidad de enzima que no se encuentre en la

superficie del catalizador no va a ser efectiva para que la reaccin tenga lugar.

Por otra parte, un aumento de la conversin con la disminucin del tamao de poro medio

implica que los reactivos no es necesario que se de un transporte de los reactivos a travs de los poros

del soporte, puesto que si friese as, bien los reactivos, bien los productos de reaccin bloquearan

dichos canales, con la consiguiente desactivacin del sistema cataltico.

Este hecho confirma que la reaccin tiene lugar en la superficie externa del catalizador y que,

por tanto, interesa emplear sistemas con superficie externa elevada y dimetro de poro medio mnimo.

Por eso el sistema cataltico elegido, fue el preparado Novozym 435, por ser este el que mejores

condiciones rene para este sistema de reaccin.


192 Eleccin del Catalizador

5.3 ESTERIFICACION DE ACIDO MIRISTICO CON ALCOHOL MIRISTICO

Los reactivos empleados en este grupo de experimentos previos frieron cido mirstico y

alcohol mirstico en todos los casos. Al igual que en los casos anteriores las condiciones de operacin

se fijaron teniendo en cuenta el razonamiento propuesto en el captuio tres de este trabajo. En la tabla

5.3 se muestran dichas condiciones de operacin.

Tabla 5.3. Resumen de los experimentos previos para la sntesis de Mristato de Miristilo.

TIPODE (mm1Hg)
R.MOLAR ( W1
REACCION 1_CATALIZADOR_1__AC:AL__1 (0C) (%)

PMMI - Lipozyme 1M20 1:1 70 60 5


PMM2 Lipozyme INISO 1:1 70 60 5
PMM3 Lipozyme INI 1:1 70 60 5
PMM4 Lipozyme 10.000 1:1 60 710 5
PMM5 SP 435-A 1:1 70 60 5
PMM6 SP 435-L 1:1 70 60 5
PMM7 Novozym 435 1:1 70 60 5
PMMS SnCI
2iH2O 1:1 180 60 1

Como en los casos anteriores, el tiempo de reaccin se fij en tres horas, observndose que

transcurridas dos horas puede considerarse que se ha alcanzado el equilibrio. bmbin se mantuvieron

operando los reactores durante siete horas para las reacciones catalizadas por cloruro de estao y

Lipozyme 10.000, En estos dos ditimos casos, la conversin aument en las cinco horas siguientes

desde 38.7% a 65.2% y de 6.51% a 8.25% respectivamente. Lo que indica que en ninguno de los dos

casos el sistema cataltico sea competitivo frente a los dems sistemas empleados. Puesto que en el

primer caso se produce una notable coloracin debida a las reacciones secundarias, mientras que en

el segundo se produce una cada de la conversin considerable, probablemente por el valor en el que

se ha fijado la temperatura de operacin para mantener los reactivos en estado lquido.


Esterificacin de Acido Mirstico con Alcohol Mirstico 193

En la figura 5.3 se muestran valores obtenidos para la conversin de cido en ster a las dos

horas de reaccin para los diferentes sistemas catalticos empleados.

Figura 5.3. Conversiones en miristato de miristilo a las dos horas de reaccin.

En este caso tambin se observa un mayor rendimiento por parte de los catalizadores

constituidos por la lipasa de Candida antarcilca. Esto indica una disminucin considerable en la

selectividad de la lipasa de Mucor miehel frente a este tipo de reactantes, que puede estar justificada

por sus respectivos puntos de fusin, ya que tanto los pesos moleculares como la longitud de la cadena

de ambos es menor que en los casos anteriores, hechos que, en un principio, podran favorecer un

aumento de la actividad enzimtica, as como de su selectividad.

La disminucin en la conversin en cuanto a los catalizadores constituidos por la lipasa de

Candida antarctica tambin aumenta con respecto a los anteriores sistemas de reaccin, lo que indica
194 Eleccin del Catalizador

que la naturaleza de los reactivos de partida influye negativamente en el proceso de reaccin. Dentro

de este grupo de catalizadores, de nuevo se observa que el valor mnimo de la conversin se obtiene

para el sistema cataltico de mayor actividad nominal, SP-435 A (10.200 PLU), lo que supone una

dependencia de la conversin de cido graso en ester con la naturaleza de los soportes sobre los que

se encuentra inmovilizada la lipasa.

La diferencia de conversiones obtenidas entre estos tres catalizadores es similar a la observarla

en e] sistema de reaccin cido oleico-alcohol cetlico. Esto significarla que los efectos ejercidos por

los valores de superficie especficay dimetro medio de poro de los soportes son bsicamente idnticos

a los ejercidos en el sistema anterior. Por lo tanto, en este caso tambin el proceso se ve favorecido

por sistemas de la lipasa de Candida antarcUca inmovilizada sobre soportes con superficie especfica

elevada y dimetro medio de poro mnimo.

Una vez ms se confirma que la reaccin tiene lugar en la superficie externa del catalizador

y que a medida que el dimetro de poro aumenta, se favorece un transporte de molculas a travs de

los porosdel catalizador que setraduce bien en un ensuciamiento del mismo, bien en un fenmeno de

inhibicin de la enzima, por lo que, en ambos casos, la actividad cataltica se ve parcialmente

dismiinuidi

Segn los valores obtenidos para la conversin de cido mirstico en miristato de miristilo,

63.5%, 86.1% y 95.1% paralos tres sistemas catalticos procedentes de lalipasade Candida antarctica,

SP-435 A, SP-435 L y Novozym 435 respectivamente, puede decirse que el catalizador ms adecuado

para la reaccin objeto de estudio es este ltimo, puesto que ofrece, dentro del intervalo de operacin,

las mejores posibilidades.


Esterificacin de Acido Oleico con Isopropanol 195

5.4 ESTERIFICACION DE ACIDO OLEICO CON ISOPROPANOL

Para la eleccin del sistema cataltico ms adecuado para esta reaccin de esterificacin, se

llevaron a cabo ocho experimentos previos, en los que las condiciones de operacin se fijaron en base

a las caractersticas y especificaciones de los componentes del medio de reaccin (capitulo tres). En

este caso las condiciones de operacin vienen impuestas, principalmente por la naturaleza del alcohol

de partida, isopropanol. En la tabla 5.4 se hace un resumen de dichas condiciones de operacin.

Tabla 5.4. Resumen de los experimentos previos para la sntesis de Oleato de Isopropilo.

TIPODE R.MOLAR ( ( w1
REACCIQN CATALIZADOR 1__AC:AL (0C) (mm Hg) (%)

PIPOl Lipozyme 1M20 1:1 70 710 5


PIPO2 Lipozyme 1M50 1:1 70 710 5

PIPO3 Lipozyme 1kM 1:1 70 710 5


PIPO4 Lipozyme 10.000 1:1 40 710 5
PIPOS 5P435-A 1:1 70 710 5
PIPO6 SP435-L 1:1 70 710 5
PIPO7 Novozym 435 1:1 70 710 5
PIPOS SnCl
2.5H20 1:1 70 710 1

El tiempo de reaccin se fij en tres horas, observndose que transcurridas dos horas puede

considerarse que se ha alcanzado el equilibrio, puesto que el aumento en la conversin es prcticamente

despreciable en la ltima hora de reaccin. Excepto para las reacciones catalizadas por cloruro de

estao y Lipozyme 10.000, cuyo tiempo de reaccin total fu de siete horas. En estos dos ltimos

casos, la conversin pas de un valor de 62.3% y 5.33% a las dos horas de reaccin a tomar valores

de 80.2% y 6.31%, a las siete horas, respectivamente. Cuando el catalizador es cloruro de estao, el

medio de reaccin se oscurece, al igual que suceda en los sistemas anteriores debido a posibles

reacciones de oxidacin o de fonnacin de polmeros, lo que hace necesario un tratamiento de


196 Eleccin del Catalizador

purificacin tanto para eliminar dichos productos secundarios como para eliminar los metales pesados

provenientes del propio catalizador, ya que se requiere que el producto fina] sea inocuo.

En cuanto a los resultados obtenidos, cuando se emplea como catalizador la lipasa en

disolucin, puede decirse que dejan mucho que desear, ya que las conversiones son ridculas en

comparacin con los dems sistemas empleados. En la figura 5.4 se representan las conversiones

obtenidas al cabo de las dos horas de reaccin con los diferentes sistemas catalticos empleados.

Xaa (1)

loo-
x 92.2
98.1

so -

Sta

60-
86.2 87.7
40-

20 10.1
5.38

0-

PIPOI PIPO2 PIPOS PIPO4 PIPOS PIPOS PIPO? PIPOS

Figura 5.4. Conversiones en oleato de isopropilo a las dos horas de reaccin.

En este caso tambin puede observarse claramente una mayor reactividad dada por el empleo

de lipasas de Candida antarctica inmovilizadas, obtenindose conversiones en oleato de isopropio

superiores al 90% en los tres casos en los que el catalizador est constituido por este tipo de lipasa.

Por el contrario, cuando el sistema cataltico lo conforma la lipasa de Mucor miehei, las conversiones
Esterificacin de Acido Oleico con Isopropanol 197

alcanzadas a las dos horas de reaccin no llegan al 40% en los casos ms favorables, cayendo, incluso,

hasta un 10.1% cuando el catalizador empleado es el sistema Lipozyme IM-20 que presenta un soporte

con baja superficie especfica, 35.8 m2/g, pequeo dimetro medio de poro, 142.1 A y baja actividad
cataltica nominal, 31 BIU. No obstante, si comparamos los resultados con el primer sistema de

reaccin estudiado, se puede observar que la presencia de alcohol isopropflico ejerce una inhibicin

importante sobre el sistema enzimtico, probablemente debida a la colocacin del grupo hidroxilo en

la posicin dos de la cadena. Puesto que la lipasa es especfica para las posiciones uno y tres de los

triglicridos, podra suponerse que sucede un fenmeno similar en el caso de otros sustratos, lo que

se traduce en una disminucin clara de la conversin.

Cuando se emplean sistemas catalticos constituidos por la lipasa de Candida antaretica, los

resultados obtenidos son mucho mejores. Esto puede ser debido tanto a la naturaleza de los reactivos

como a la no especificidad de la propia lipasa, estando, en cualquier caso, favorecida la formacin del

complejo activo enzima-sustrato que va a dar lugar a la formacin de oleato de isopropilo.

La variacin de la conversin al emplear estos tres catalizadores sigue un camino similar al

observado en los casos anteriores. Las conversiones obtenidas son del 90.1%, 92.2% y 98.1% para los

tres catalizadores, SP-435 A, SP-435 L y Novozym 435, siendo este ltimo el que menor actividad

nominal presenta segn las especificaciones, 7000 PLU. Este hecho demuestra, de nuevo, que la

actividad cataltica real dependeadems de las caractersticas del soporte sobreel que est inmovilizada

la lipasa, consiguindose mayores niveles de actividad cuando la superficie especfica del mismo

aumenta y su dimetro medio de poro disminuye.

Segn esto, el catalizador ms adecuado para llevar a cabo la reaccin de esterificacin entre

el cido oleico y el alcohol isoproplico, debido tanto a sus caractersticas, como a los niveles de

conversin que proporciona, es el denominado Novozym 435.


198 Eleccin de] Catalizador

5.5 ESTERIFICACION DE ACIDO PALMITICO CON ISOPROPANOL

Para conocer como se comporta el sistema cido palmtico-alcohol isoproplico frente a los

diferentes catalizadores serealizaron otros ocho experimentos previos. Segn lo expuesto en el capitulo

tres, las propiedades que tienen un mayor peso a la hora de elegir las condiciones de operacin en que

se va a llevar a cabo la reaccin, son las correspondientes al cido palmtico y al isopropanol. En la

tabla 5.5 se presenta un resumen de dichos experimentos, as como de las condiciones en las que se

van a llevar a cabo los mismos.

Tabla 5.5. Resumen de los experimentos previos para la sntesis de Palmitato de Isopropilo.

_________

TIPO DE R. MOLAR ( H (
REACCION CATALIZADOR AC:AL (C) 1_(mm Hg) (96)

PIPP1 Lipozyme 11v120 1:1 70 710 5


PIPP2 Lipozyme 1M50 1:1 70 710 5
PIPP3 Lipozyme IM 1:1 70 710 5
PIPP4 Lipozyme 10.000 1:1 65 710 5
PIPPS SP 435-A 1:1 70 710 5
PIPP6 SP435-L 1:1 70 710 5
PIPP7 Novozym 435 1:1 70 710 5
PIPPS SnCI2.5H20 1:1 70 710

El tiempo de operacin se fij, al igual que en los casos anteriores, en tres horas para todos

los experimentos, menos para los casos en los que se emplean cloruro de estao y lipasa en disolucin,

que fue de siete horas. En estos dos casos se obtienen similares a las del sistema anterior, siendo las

conversiones alcanzadas de 4.13% y 47.2% a las dos horas de reaccin y de 5.25% y 53.27% a las

siete horas. Tambin en este caso, ambos catalizadores quedan descartados para nuestros propsitos,

por razones obvias: coloracin del producto final debido a la aparicin de reacciones secundarias y

necesidad de emplear procesos de purificacin en el caso de emplear cloruro de estao, y conversiones


Esterificacin de Acido Palmtico con Isopropanol 199

pequeas, probablemente al nivel de temperatura empleado para mantener el cido palmtico en estado

lquido, al emplear la lipasa en disolucin como sistema cataltico. En la figura 5.5 se pueden observar

las conversiones obtenidas a las dos horas de reaccin para los diferentes sistemas catalticos

empleados.

Xao <1>

100-
x
80- 64.8
68.81
60 47.2

40-
16.01
20 5.81 C71 7.66
V27Z3I ti,

o- ~ ~PIPtP2pppg PIPP4 pppg rPs PPP7 rnp~s

Figura 5.5. Conversiones en palmitato de isopropio a las dos horas de reaccin.

Como puede observarse en la figura, hay una clara disminucin de la conversin en todos los

casos con respecto al sistema anterior, lo que se traduce en una disminucin global por parte de la

reactividad del cido palmtico, as como de la propia actividad enzimtica. Los casos ms favorables

se dan cuando los catalizadores empleados son SP-435 L y Novozym 435, ambos obtenidos por

inmovilizacin de la lipasa de Candida antarcilca que, como es notorio, presenta una mayor

selectividad y actividad frente a este tipo de sustratos, en comparacin con la lipasa obtenida a partir

de las cepas de Mucor miehei.


200 Eleccin del Catalizador

Para los catalizadores constituidos por esta ltima lipasa, el aumento de conversin resultante

sigue el camino esperado. As la conversin a las dos horas de reaccin pasa de 5.81% a 12.03% y

15.01% para los sistemas catalticos Lipozyme IM-20, Lipozyme IM-50 y Lipozyme IM,

respectivamente. Lo que indica que para actividades nominales similares, el rendimiento cataltico

aumenta con la superficie especfica del catalizador y disminuye a medida que el dimetro medio de

poro de las partculas catalticas es mayor

En cuanto a los catalizadores obtenidos por inmovilizacin de la lipasa dc Candida antaretica,

el efecto ejercido por la naturaleza y propiedades fsicas del soporte se observa de una forma ms

acusada en el caso del catalizador 5P435 A. En el que, a pesar de presentar la actividad nominal ms

elevada, 10200 PLU, tiene la superficie especfica mis pequea, 29.17 m2/g, y el dimetro medio de
poro ms elevado, 291.7 A, por lo que la conversin obtenida, 7.65%, es muy inferior a la observada

en los otros dos catalizadores procedentes de la misma lipasa, 58.31% y 64.8% para las especies

catalticas SP-435 L y Novozym 435.

Esta disminucin en la conversin de cido en ster, con respecto al sistema cido oleico-

alcohol isoproplico, lgicamente se debe a la presencia de cido palmtico en el medio, que es en este

caso el sustrato principal. Aunque la propia naturaleza qumica del cido palmtico pueda dar lugar a

una disminucin en el rendimiento de la reaccin, tambin es probable que tenga lugar la formacin

de complejos indeseables con el propio sistema enzimtico, lo que se traduce en un fenmeno de

inhibicin enzimtica con respecto a la formacin del complejo principal.

A la vista de los resultados obtenidos, el sistema cataltico elegido para esta sntesis ha sido

correspondiente al experimento siete, es decir Novozym 435, por ser este con el que mejoresresultados

se han obtenido.
Esterificacin de Acido 2-Metil-Butrico con Alcohol Oleico 201

5.6 ESTERIFICACION DE ACIDO 2-METIL-BUTIRICO CON

ALCOHOL OLEICO

Para este sistema de esterificacin se han llevado a cabo ocho experimentos previos, tomando

como reactivos iniciales cido 2-med-butrico y alcohol oleico. Los catalizadores empleados fueron

los mismos que en los casos anteriores, y las condiciones de operacin se fijaron segn lo expuesto

en el captulo tres, siendo la especie ms decisiva el catalizador. En la tabla 5.6 se hace un resumen

de los experimentos planificados, as como de las condiciones de operacin en las que se llevaron a

cabo las diferentes reacciones.

Tabla 5.5. Resumen de los experimentos previos para la sntesis de Palmitato de Isopropilo.

R.MOLAR ( P1
REACCION J_C4TALIZADOR_J__AC:AL (0C) nmHg) (%)1

PMBO1 Lipozyme 1M20 1:1 70 60 5


PMIBO2 Lipozyme 1M50 1:1 70 60 5
PMBO3 Lipozyme IM 1:1 70 60 5
PMBO4 Lipozyme 10.000 1:1 40 710 5

PMIBO5 SP 435-A 1:1 70 60 5


PMIBO6 5P435-L 1:1 70 60 5
PMBO7 Novozym 435 1:1 70 60 5
PMBO8 SnCl
2.5H20 1:1 100 60 1

El tiempo de operacin se fij, al igual que en los casos anteriores, en siete horas para las

reacciones en las que el catalizador fue cloruro de estao o Lipozyme 10.000 y en tres horas para el

resto de los experimentos, observndose que a partir de la segunda hora de reaccin, las variaciones

en la conversin eran inferiores al 2% de su valor. El valor de conversin obtenido cuando se emplea

la lipasa en disolucin fue de un 2.16% a las dos horas de reaccin, alcanzndose a las siete horas un
202 Eleccin del Catalizador

valor similar, lo que indica que sistema cataltico no es adecuado para nuestro proceso, ya que la lipasa

no presenta, prcticamente actividad alguna frente al sustrato cido.

Los resultados obtenidos para el cloruro de estao son similares a los del primer sistema de

esterificacin, oleato de oleilo, presentndose los mismos problemas que en casos anteriores: aparicin

de productos secundarios debidos a reacciones colaterales de oxidacin y polimerizacin, con el

consiguiente aumento de costes de purificacin para que el producto final cumpla las especificaciones

de mercado, lo que es prohibitivo desde el punto de vista industria]. En la figura 5.6 se muestran las

conversiones obtenidas a las dos horas de reaccin para los diferentes sistemas catalticos probados en

el sistema de reaccin con el fin de llevar a cabo un anlisis discriminatorio que nos permita elegir el

ms adecuado para nuestros propsitos.

Xmo (1)

100-

so- 7t71

60- 80.8

40J
12.42
20- 7.41
4 IWZ?1I VAYA 1 2.16
-

0- 1 1

PMBPI PMBO2 PMBO8 PMBO4 PMBOS PMBOS PMBO7 PMBOS


-

Figura 5.6. Conversiones en 2-metil-butirato de oleilo a las dos horas de reaccin.


Esterificacin de Acido 2-Metil-Butrico con Alcohol Oleico 203

De dichafigura se deduce el claro descenso en la conversin si comparamos los resultados con

los obtenidos en el primer sistema de reaccin estudiado. Obviamente, el empleo de cido 2-med-

butrico en sustitucin del cido oleico es el responsable de esta situacin. La lipasa de Mucor miehel

es prcticamente inactiva frente a este sustrato, por lo que las conversiones obtenidas no alcanzan el

16%, quedando descartadas para su empleo en este sistema. No obstante, la variacin de conversin

sigue el camino esperado, es decir mejores conversiones para soportes con mayor superficie especfica

y menores valores de dimetro de poro medio.

En cuanto a los sistemas catalticos formados porla lipasa de Candida antarctica inmovilizada,

puede decirse que las variaciones observadas en la conversin tambin corresponden a lo sperado,

siendo los valores obtenidos de 69.35%, 72.71% y 75.7% para las especies catalticas SP-435 A, SP-

435 L y Novozym 435 respectivamente. Estos valores corroboran, una vez ms, que la actividad del

catalizador no slo depende de la actividad nominal de la especie enzimtica, sino que tambin

dependen de las propiedades de los soportes sobre los que se hallan inmovilizadas. Por lo que la

reaccin se ve favorecida cuando los soportes presentan una elevada superficie especfica y un valor

bajo del dimetro de poro medio.

Por tanto para este proceso de esterificacin, el sistema cataltico que mejores resultados

proporciona, dentro del intervalo considerado para las condiciones de operacin, es el que corresponde

con el valor mximo de conversin obtenido, Novozym 435.

Con el fin de conocer, a grandes rasgos, el comportamiento de las lipasas frente a diferentes

tipos de sustrato, a continuacin se comentar brevemente como influye el empleo de los diferentes

sustratos involucrados en los procesos objeto de estudio, sobre las especies enzimticas empleadas

como catalizador de los mismos.


204 Eleccin del Catalizador

5.7 IMPORTANCIA DEL TIPO DE SUSTRATO

Si comparamos los resultados obtenidos en estas seis series de experimentos previos, para cada

una de las especies enzimticas que constituyen los diferentes sistemas catalticos, podremos conocer

como vara la actividad enzimtica de dichas especies en funcin de los reactivos presentes en el medio

de reaccin. Para realizar este estudio comparativo, se han considerado conjuntamente por una parte

los tres catalizadores comerciales obtenidos por inmovilizacin de la lipasa de Mucor miehel (Lipozyme

IM-20, Lipozyme fM-SO y Lipozyme Pv!) y por otra los tres catalizadores obtenidos por inmovilizacin

de la lipasa de Candida anrarctica (SP-435 A, SP-435 L y Novozym 435). El catalizador Lipozyme

10.000, constituido por la lipasa de Mucor miehel en disolucin, no se ha tenido en cuenta en este

anlisis, ya que en algunos experimentos ha sido necesario trabajar a temperaturas superiores a la

temperatura ptima de trabajo de la lipasa, para mantener los reactivos en estado liquido y que el

sistema se comportase como un sistema pseudohomogneo.

Si comparamos las conVersiones obtenidas con los diferentes cidos grasos de partida, podemos

observar que cuando la especie cataltica es la lipasa de Mucor mniehel, el valor medio de conversin,

considerando los tres tipos de reaccin en los que el cido de partida es el cido oleico, es de un

58.3%, tomando un valor medio en la sntesis de oleato de oleilo deI 95.3% y un valor mximo del

95.5%. Los valores obtenidos para la sntesis de oleato de cetilo revelan un valor medio para la

conversin de un 51.6%, siendo el valor mximo de un 60.6%. Mientras que el valor medio obtenido

en la sntesis de oleato de isopropilo disminuye hasta un 28%, y el valor mximo alcanzado

corresponde a un 37.7%.

Por otra parte el valor medio obtenido para la sntesis de palmitato de isopropilo, empleando

la misma lipasa de Mucor miehei, alcanza el 11%, siendo el valor mximo obtenido del 15%; mientras

que en las sntesis de miristato de miristilo y 2-metil-butirato de oleilo, los valores medios y mximos
Importancia del Tipo de Sustrato 205

obtenidos para la conversin son de un 41.1% y 50.2% para el primero y 11.66% y 15.16% para el

segundo.

En lo que a la reactividad de los sistemas catalticos obtenidos por inmovilizacin de la lipasa

de Candida antarctica, se refiere, los resultados obtenidos revelan una situacin similar a la anterior,

desde el punto de vista cualitativo. El valor medio de la conversin de cido oleico, teniendo en cuenta

conjuntamente las tres reacciones en que este se emplea como sustrato toma un valor del 89.75%.

Concretamente, para la sntesis de oleato de oleilo el valor medio obtenido es del 90.27%, alcanzndose

un valor mximo del 92.01%. En cambio, el valor medio de conversin obtenido en la sntesis de

oleato de cetilo disminuye hasta un 85.47%, siendo el mximo alcanzado de un 91.01%; mientras que

los valores medio y mximo a los que se llega en la sntesis de oleato de isopropilo son del 93.5% y

el 98.1% respectivamente.

En cuanto a los valores obtenidos para los dems sistemas de esterificacin estudiados,

palmitato de isopropilo, miristato de miristilo y 2-metil-butirato de oleio, los valores de conversin

media y conversin mxima obtenidos corresponden a niveles de conversin de 43.6% y 64.8%, 81%

y 95.1%, y 72.59% y 75.7% respectivamente. Lo que supone un apreciable aumento con respecto a

los valores obtenidos al emplear catalizadors constituidos por la lipasa de Mucor miehei, hecho que

confirma la existencia de una mayor selectividad de esta ltima por el tipo de cido graso empleado

como sustrato, con respecto a la lipasa de Candida antardilca, que es mucho menos especfica.

Por otra parte, puede comprobarse que, para las dos lipasas, la reactividad con respecto de los

cidos grasos probados, aumenta cuando el cido graso es insaturado (caso del cido oleico), mientras

que cuando los cidos grasos empleados son insaturados (palmtico y mirstico), la reactividad del

sistema enzimtico es menor. Tambin puede observarse que para un mismo tipo de cadena, la

reactividad, con respecto del cido graso, disminuye al aumentar la longitud de la cadena principal.
206 Eleccin del Catalizador

Segn esto, la reactividad del cido 2-med-butrico debera ser superior a la observada, sin embargo,

la presencia de un grupo metilo en la posicin altli, da lugar a una disminucin drstica de la

reactividad, que en este caso se ve compensada por la longitud de la cadena del cido butrico.

Haciendo el anlisis desde el punto de vista de la reactividad de los alcoholes empleados, puede

observarse que la situacin que se presenta es similar a la anterior. En general, la reactividad aumenta

al disminuir el nmero de tomos de carbono que constituyen la cadena de alcohol. Sin embargo,

cuando el alcohol es insaturado, la reactividad es superior que cuando no lo es, mientras que en el caso

en el que el alcohol es secundario, alcohol isoproplico, la reactividad disminuye, hecho que se observa

de forma ms marcada cuando se emplea la lipasa de Mucor miehei, como catalizador.


6. RESULTADOS EXPERIMENTALES
Resultados Experimentales 209

Teniendo en cuenta los experimentos previos expuestos en el captulo anterior, se llevaron a

cabo series de experimentos para cada uno de los steres objeto de estudio, con el fin de alcanzar los

objetivos propuestos en este trabajo. Los experimentos realizados se han planificado con el fin de

obtener tanto los mecanismos y modelos cinticos de las reacciones de esterificacin cataltica entre

los cidos y alcoholes propuestos, como la influencia de las variables de operacin sobre cada proceso

de obtencin, empleando como catalizador la lipasa inmovilizada elegida para cada caso.

En primer lugar, se llev a cabo un estudio dirigido hacia el conocimiento de la influencia que

ejercen las diferentes variables de operacin sobre las reacciones para los procesos de sntesi~

propuestos. Para ello, se realizaron series de experimentos fijando, en cada una de ellas, todas las

variables de operacin excepto una de ellas. Variando esta ltima para cada experimento, se pudo

observar el comportamiento del sistema de reaccin en cuestin, as como el efecto producido por la

modificacin de dicha variable. Las variables estudiadas son las que, segn los estudios encontrados

en la bibliografa y la experiencia del grupo investigador, influyen ms significativamente en este tipo

de sistemas. Dichas variables corresponden a la temperatura de operacin, presin de trabajo,

concentracin inicial de catalizador, relacin molar de reactivos y velocidad de agitacin.

Las variables presin, temperatura y concentracin inicial de catalizador se modificaron en cada

experimento comparativo, atendiendo a los intervalos fijados en un principio, teniendo en cuenta tanto

la naturaleza de los reactivos y productos como las especificaiones impuestas por los diferentes

catalizadores empleados.
210 Resultados Experimentales

La velocidad de agitacin se fijo para todos los experimentos realizados en 700 rpm. por ser

esta una velocidad adecuada para nuestros propsitos de considerar un comportamiento homogneo de

la mezcla de reaccin, haciendo que el sistema se comporte de manera tal que los fenmenos

involucrados en la etapa constituida por la reaccin qumica controlen el proceso global.

La relacin molar cido/alcohol se modific en las siguientes series de experimentos, dirigidos

principalmente hacia el estudio cintico del proceso. En este segundo grupo de experimentos se

tuvieron en cuenta dos posibilidades, segn el tipo de producto a obtener. La primera posibilidad est

basada en el hecho de poder desplazar el equilibrio hacia la formacin de productos, eliminando uno

de ellos del medio de reaccin a medida que esta va teniendo lugar y, logrando as, que el sistema se

comporte como irreversible. Esto puede conseguirse trabajando a presin reducida, disminuyendo as

la presin de vapor de las especies constituyentes del medio de reaccin, consiguiendo que slo uno

de los productos (el agua) pase a la fase vapor y pueda eliminarse continuamente del medio,

permaneciendo en el mismo los reactivos de partida y el otro producto de reaccin (el ster). Esto es

viable en todos los casos ensayados, excepto cuando uno de los reactivos de partida es el alcohol

isopropiico, cuya presin de vapor es siempre menor que la del agua.

La segunda posibilidad consisti en trabajar a presin atmosfrica o, lo que es lo mismo,

trabajar en condiciones tales que el sistema de reaccin se compone como reversible, lo que es viable

para los seis sistemas de reaccin considerados en este trabajo.

Como se ha indicado anteriormente, los procesos estudiados en la presente memoria de

investigacin han sido los de obtencin de oleato de oleilo, oleato de cetilo. miristato de miristilo,

oleato de isopropilo, palmitato de isopropilo y 2-med-butirato de oleilo. Para ello se han considerado

los datos experimentales conversin-tiempo o velocidad de reaccin-concentracin. Los datos de

velocidad de reaccin se han obtenido como derivada del nmero de moles con respecto del tiempo,

mediante un soporte informtico basado en el algoritmo de Stirling, capaz de derivar grficamente los

valores experimentales y obtener los valores de derivada en cada punto.


Sntesis de Oleato de Oleilo 211

6.1 SINTESLS DE OLEATO DE OLEILO

Para estudiar la influencia de las variables de operacin sobre la reaccin de esterificacin para

la sntesis de oleato de oleio, se realizaron experimentos fijando la velocidad de agitacin en 700 rpm

y la relacin molar cido/alcohol en 1/1. El catalizador empleado en esta serie de experimentos fue el

elegido segn los experimentos previos: Lipozyme IM-20, constituido por la lipasa de Mucor miehei

inmovilizada sobre una resma de intercambio aninico. Los efectos estudiados fueron los

correspondientes a la variacin de temperatura, presin y concentracin de catalizador.

Algunos de estos experimentos tambin se incluyeron dentro del estudio realizado con una

segunda serie de experimentos, que se ver ms adelante, cuyo objetivo es el de obtener algunos

parmetros cinticos para modelar el sistema En la tabla 6.1 se muestran los experimentos realizados

para conocer la influencia que ejercen las variables de operacin sobre la conversin.

Tabla 6.1. Experimentos realizados para conocer la influencia de las variables sobre la reaccin
de sntesis de Oleato de Oleilo.

N0 EXPERIMENTO TEMPERATURA PRESION CATALIZADOR1


(C) (mmHg)

001 60 60 3
002 60 60 5
003 60 60 7
004 70 60 3
005 70 60 4

006 70 60 5
007 70 60 7
008 80 60 3
009 80 60 5

0010 80 60 7
212 Resultados Experimentales

Taha 6.1 (Continuacin). Experimentos realizados para conocer la influencia de las variables
sobre la reaccin de sntesis de Oleato de Oleilo.

TEMPERATURA PRESION CATALIZADOR


N0 EXPERIMENTO (0C) (mmflg) (%)

0011 60 710 3 -
0012 60 710 5
0013 60 710 7
0014 70 710 3
0015 70 710 5
0016 70 710 7
0017 80 710 3
0018 80 710 5
0019 80 710 7

6.1.1 INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA

Para conocer como vara la conversin de cido en ster con la temperatura de operacin, se

representaron los resultados experimentales en grficos de conversin frente a tiempo de operacin,

para los casos comparables, es decir, manteniendo constantes las dems variables de reaccin. En todos

los casos pudo observarse que la conversin obtenida a lo largo del tiempo de reaccin aumentaba con

la temperatura de operacin.

A modo de ejemplo, en la figura 6.1 se muestran las representaciones correspondientes a la

evolucin de la conversin de cido oleico en oleato de oleio para las tres temperaturas ensayadas,

600C, 700(2 y 800(2, habiendo fijado la presin en 6OmmHg, la concentracin inicial de catalizador en

un 5%, la relacin molar cido oleico/alcohol oleico en 1 y el tiempo total de reaccin en 3 horas.

Como puede observarse en dicha figura, el aumento de la temperatura de reaccin favorece un

incremento en la conversin de cido oleico en oleato de odo.


Sntesis de Oleato de Oleilo 213

Al aumentar la temperatura de 60 a 70~C, el aumento de la conversin para un tiempo de

reaccin de ISOmin es tan slo de un 4%, mientras que al pasar de 70 a 80~(2, el aumento de la

conversin tiene lugar en un 8.54%.

Converelon de moldo
1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.6
0.4
0.8
0.2
0.1

0 60 100 160 200


Tiempo (mA)
Oleato de Odio
Pu SOmmNg CatalIzador: 6% Aa/Ah 1/1

Figura 6.1. Influencia de la temperatura en la sntesis de Oleato de Oleio.

6.1.2 INFLUENCIA DE LA PRESION

De forma anloga se llevaron a cabo las correspondientes representaciones conversin-tiempo,

fijando los valores de las variables para las diferentes presiones de operacin ensayadas. Los resultados

obtenidos al comparar dichas representaciones fueron los esperados para este tipo de reacciones, en los

que la presin de operacin tiene una influencia negativa sobre el nivel de conversin obtenido,

independientemente de la variacin de las dems variables de operacin.


214 Resultados Experimentales

En la figura 6.2 se muestra la representacin correspondiente al valor superior del intervalo de

temperatura fijado, 80~C, y al valor superior para la concentracin inicial de catalizador, 7% en peso.

siendo la relacin molar cido/alcohol de 1.

Converalon de moldo
1
0,9
0,8
0,7
0.6
0,5
0.4
0.3
0.2
0.1

0 50 100 180 200


Tiempo <mm>
Oleato de Olello
Ti aro catalIzador: 7% Lo/Al: 1/1

Figura 6.2. Influencia de la presin en la sntesis de Oleato de Odo.

Como puede observarse, al aumentar la presin de 6OmmHg a 7lOmmHg, presin atmosfrica,

la conversin de cido oleico en oleato de oleilo pasa de un valor de 0.96 a 0.845 para un tiempo de

operacin de 180mb>., lo que indica un descenso de casi un 13%.

Dicho descenso corresponde a un comportamiento normal del sistema, ya que al aumentar la

presin de trabajo para una temperatura de operacin fijada, la presin de vapor del agua que se va

formando a medida que tiene lugar la reaccin tambin aumenta, por lo que al no pasar al estado de

vapor no puede ser eliminada del medio de reaccin, evitando as que el equilibrio se desplace hacia
Sntesis de Oleato de Oleilo 215

la formacin de productos y, por tanto, el equilibrio de reaccin se obtiene para niveles de conversin

ms pequeos, justificndose as la disminucin de la misma.

6.1.3 INFLUENCIA DE LA CONCENTRACION INICIAL DE CATALIZADOR

Representando las curvas conversin-tiempo de cido oleico en oleato de oleilo, para una

misma temperatura, presin y concentracin inicial de reactivos, pudo observarse que al variar la

concentracin inicial de catalizador, la conversin obtenida aumentaba cuando se incrementaba la

concentracin de catalizador para cualquier tiempo de reaccin fijado. Dicho efecto es el que, por otra

parte, se observa en la mayora de los procesos de esterificacin, puesto que se produce un aunento

de la velocidad de reaccin.

Figura 6.3. Influencia de la concentracin inicial de catalizador en la sntesis de Oleato de Oleilo.


216 Resultados Experimentales

Este fenmeno puede observarse claramente en la figura 6.3, en la que se representan las curvas

correspondientes a una temperatura de 800(2, presin inferior a la atmosfrica (6OmmHg) y relacin

molar cido/alcohol con un valor de 1. El incremento experimentado en la conversin de cido oleico

para un tiempo de reaccin de 1 Sflmin., al aumentar la concentracin inicial de catalizador de un 3%

a un 5%, supone un 14.75% con respecto al valor inicial; siendo dicho incremento de un 14.58%,

cuando la concentracin inicial de catalizador pasa de ser un 5% a un 7%. Dichos resultados suponen

que la dependencia de la conversin con respecto a la concentracin inicial de catalizador, viene dada

por una variacin, a simple vista, lineal. Con el fin de comprobar esta suposicin, se tomaron valores

de la conversin de cido para diferentes tiempos de reaccin, a diferentes valores de presin y

temperatura, con una relacin molar cido/alcohol fija. En las figuras 6.4 y 6.5 se muestran dichas

representaciones, en las que, puede observarse el hecho anteriormente expuesto.

CoEvegslom de aaldo
0.8

0.7 -

~B tSOmIn
# tBSmlu
-* tl2OmIn

0.4
2 3 4 5 6 7 8
Catalizador (*)
Oleato de OleD.
Ti 7OC 1: 11uflg AciAl: 111

Figura 6.4. Sntesis de Oleato de Oleilo. Variacin conversin-concentracin-tiempo. P: 7lOmmHg.


Sntesis de Oleato de Oleilo 217

En la figura 6.4, se muestra esta dependencia de la conversin con la concentracin de

catalizador cuando la reaccin se lleva a cabo en condiciones de reversibilidad, presin atmosfrica,

mientras que en la figura 6.5 se considera el proceso en condiciones de irreversibilidad o a presin

reducida, 6OmmHg. En ambos casos se observa que la variacin es lineal a lo largo de los diferentes

tiempos de reaccin ensayados.

Conveuuion de nido
1

0.9

0.8

0.7

0.6

0.4
2 1 4 5 6 7 8

Catalizador <5>
Oleato de Oleilo
Y: 10C Fa dOmuHg DalAI: LI

Figura 6.5. Sntesis de Oleato de Oleio. Variacin conversin-catalizador-tiempo. P: 0mniHg.

A la vista de los resultados obtenidos para las tres temperaturas de reaccin ensayadas, as

como para los dos valores de la presin, puede decirse que la variacin de la conversin de cido

oleico en ster con la concentracin inicial de catalizador es lineal, y que, por tanto, la velocidad de

reaccin responde a una cintica de primer orden con respecto a la concentracin de catalizador, no

observndose en ningn caso discontinuidad alguna ni saturacin por parte de la concentracin de

catalizador, al menos dentro del intervalo fijado para este estudio.


218 Resultados Experimentales

6.1.4 INFLUENCIA DE LA RELACION MOLAR ACIDO/ALCOHOL

Para el estudio de la influencia de este parmetro se han llevado a cabo varios experimentos

en exceso de cido y en exceso de alcohol. Este segundo grupo de experimentos se llev a cabo de

forma que la informacin obtenida a partir de ellos sirviese para el anlisis cintico correspondiente.

Teniendo esto en cuenta, se consider la relacin molar cido/alcohol como variable independiente de

la experimentacin, fijndose el resto de parmetros para una misma serie de experimentos. De este

modo se realizaron varias series de experimentos, una para cada uno de los valores de temperatura. En

la tabla 6.2 se muestra un resumen de este segundo grupo de experimentos, que podra denominarse

como grupo de experimentos cinticos.

Esta serie de experimentos se llev a cabo fijando la presin de operacin en su valor mnimo,

60mmHg, es decir en condiciones de irreversibilidad; mientras que la concentracin inicial de

catalizador empleada se fij en el valor medio del intervalo propuesto, es decir en un 5% de la masa

total de reaccin.

Tabla 6.2. Experimentos cinticos para la sntesis de Oleato de Oleilo.

NUMERO DE TEMPERATURA CATAL. PRESION R. MOLAR


EXPERIMENTO (0C) (%) (mmlig) ACIDO/ALCOHOL

0020 60 5 60 0.066
0021 60 5 60 0.1
0022 60 5 60 0.2
0023 60 5 60 0.5
0024 60 5 60 II
0025 60 5 60 2
0026 60 5 60 5
0027 60 5 60 10
0028 60 5 60 15
Sntesis de Oleato de Oleilo 219

Tabla 6.2 (continuacin). Experimentos cinticos para la sntesis de Oleato de Oleilo.

NUMERO DE TEMPERATURA CATAL. PRESION R. MOLAR1


EXPERIMENTO (0C) (%) (mmHg) 1_ACIDO/ALCOHOL_1

0029 70 5 60 0.066
0030 70 5 60 0.1
0031 70 5 60 0.143
0032 70 5 60 0.2

0033 70 5 60 0.333
0034 70 5 60 0.5
0035 70 5 60

0036 70 5 60 2
0037 70 5 60 3
0038 70 5 60 5
0039 70 5 60 7

0040 70 5 60 10
0041 70 5 60 15
0042 80 5 60 0.066
0043 80 5 60 0.1

0044 80 5 60 0.2
0045 80 5 60 0.5
0046 80 5 60 1
0047 80 5 60 2
0048 80 5 60 5
0049 80 5 60 10
0050 80 5 60 15

A partir de los resultados obtenidos en estos experimentos, se han realizado representaciones

grficas de velocidad de reaccin frente a nmero de moles de cido, cuando se trabaja en exceso de

alcohol y de velocidad de reaccin frente a nmero de moles de alcohol, cuando se trabaja en exceso

de cido. Dichas representaciones se agruparon en series en funcin de la temperatura de operacin


220 Resultados Experimentales

fijada en cada experimento, quedando fijas el resto de las variables que influyen en el proceso de

esterificacion.

En la figura 6.6 se muestra, a modo de ejemplo, las representaciones correspondientes a una

temperatura de 600(2, 5% de concentracin inicial de catalizador y 6OmmHg para el estudio de la

concentracin de cido oleico, ya que el alcohol oleico est en exceso. Como puede observarse, la

velocidad de reaccin aumenta al aumentar el nmero de moles de cido, como es lgico, ya que a

medida que uno de los reactivos se agota se va alcanzando la conversin de equilibrio y, por tanto la

velocidad de reaccin tiende a cero para tiempos largos.

VELOCIDAD DE REACCION <nimol/min)


45
40

30
30

25

20
15

10
5

0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3


N MOLES DE CIDO <mal)
TUIPIO DE LA CONCENTRACION DE CIDO
P: GOmsEg CetaIlsadon 51 T WC

Figura 6.6. Sntesis de Oleato de Oleilo. Influencia de la relacin molar cido/alcohol.

Por otra parte, puede observarse que al aumentar el exceso de alcohol o, lo que es lo mismo,

al disminuir la relacin molar cido/alcohol, la velocidad de formacin de productos aumenta para


Sntesis de Oleato de Oleilo 221

excesos moderados de alcohol. Sin embargo, cuando el exceso de alcohol es tan elevado, que la

concentracin de alcohol puede considerarse como infinita con respecto a la concentracin de cido

oleico, la velocidad de reaccin es ms pequea de lo que correspondera a un tiempo de reaccin

determinado. Esto, sin duda, se debe a las posibles reaccionesde inhibicin por parte del alcohol.

Algo parecido sucede al comparar los resultados obtenidos para el estudio de la concentracin

de alcohol, que se presentan en la figura 6.7 y que, en este caso, corresponden a una temperatura de

8~C, 5% de concentracin inicial de catalizador y una presin de trabajo dc 60mnHg.

VEWCIDAD DE REACCION (mmol/min)


SO

40

30

20

la

0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3


N MOLES DE ALCOHOL (mal)
ESTUDIO DE LA CONCENTEACrON DE ALCOHOL
1: BOnnBg Catallzadcn 5% L Orc

Figura 6.7. Sntesis de Oleato de Oleio. Influencia de la relacin molar cido/alcohol.

Como puede observarse, la variacin de la velocidad de desaparicin de reactivos con el

nmero de moles de alcohol se comporta de la manera prevista para una reaccin de esterificacin. En

cambio, al aumentar la relacin molar cido/alcohol se comprueba, como en el caso anterior, que para
222 Resultados Experimentales

un exceso de cido oleico muy pronunciado (concentracin de cido oleico infinita con respecto a la

concentracin de alcohol oleico), se produce una disminucin prematura de la velocidad de reaccin,

con respecto a la tendencia clsica para los procesos de esterificacin. Este fenmeno se aprecia, as

mismo, aunque menos marcadamente, al comparar las curvas con una relacin molar cido/alcohol de

2 y 5, donde, para tiempos largos de reaccin la velocidad de reaccin cae ms rpidamente cuando

el exceso de cido oleico es superior.

Este electo se debe, sin duda, a una inhibicin producida por un exceso de cido oleico en el

medio de reaccin, lo que supone que habr que tenerlo en cuenta a la hora del modelado cintico, ya

que influye sobre la velocidad de desaparicin de los reactivos.

6.1.5 ESTUDIO DE LA CONCENTRACION DE ESTER EN EL MEDIO DE REACCION

Habida tuenta de los resultados obtenidos en el apartado anterior se procedi al estudio de la

influencia ejercida por la concentracin de ster> oleato de oleio, en el medio de reaccin, ya que la

concentracin del otro producto de reaccin, agua, se anula cuando trabajamos en condiciones de

presin inferiores a la atmosfrica (6OmmHg).

En la tabla 6.3 se hace un resumen de los experimentos realizados para conocer la influencia

ejercida por la adicin de ester en el medio de reaccin. Este grupo de experimentos se llev a cabo

manteniendo todas las variables de operacin constantes, y tomando como variable independiente el

nmero inicial de moles de ester adicionados al comienzo de la reaccin. La relacin entre el nmero

de moles de cido y el nmero de moles de alcohol se mantuvo equimolecular, mientras que la

concentracin inicial de catalizador se fij en el valor medio del intervalo, es decir un 5% en peso de

la masa total de reaccin.


Sntesis de Oleato de Oleilo 223

Tabla 6.3. Experimentos cinticos, con adicin de ster, para la sntesis de Oleato de Oleilo.

NUMERO DE 1 TEMPERATURA CATAL. 1 PRESION 1 N~0


0C) j (%) j__(mmllg)__1 (Moles)
EXPERIMENTO_j (
0051 60 5 60 0.177
0052 60 5 60 0.354
0053 70 5 60 0.071

0054 70 5 60 0.118
0055 70 5 60 0.177
0056 70 5 60 0.354
0057 80 5 60 0.177
0058 80 5 60 0.354

En la figura 6.8 se muestran, a modo de ejemplo, las curvas tiempo-conversin de cido

obtenidas para una temperatura de 700(2, un 5% de catalizador y una presin de 6OmmHg. En todos

los casos se ha mantenido la relacin molar cido/alcohol de uno.

Conversian de anido
1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1

0 60 100 150 200


Tiempo (mm>
Oleato de Odio
P: SOmml4g CatalIzador: 5% 7: 70C

Figura 6.8. Sntesis de Oleato de OdIo. Estudio de la concentracin inicial de ster.


224 Resultados Experimentales

Como puede observarse, al aumentar a concentracin inicial de oleato de oleilo adicionado

inicialmente a la mezcla de reaccin, la conversin de cido obtenida a lo largo del tiempo va

disnnuyendo drsticamente. Este efecto es ms marcado para adiciones pequeas, advirtindose una

menor disminucin a medida que nos acercamos a la concentracin de saturacin de ster. As, para

una adicin d 0.0708 moles de ster, lo que representa una cantidad inferior al 15% del nmero de

moles total presentes en el medio, se produce una disminucin en la conversin de casi un 33%,

mientras que en las subsiguientes adiciones, la cada de la conversin se va atenuando progresivamente.

Este fenmeno demuestra que tiene lugar una inhibicin enzimtica por parte del producto de reaccin,

lo que habr que tener en cuenta a la hora del modelado cintico.

6.1.6 ESTUDIO DE LA CONCENTRACION DE AGUA EN EL MEDIO DE REACCION

Un efecto similar pudo observarse cuando se adicion un exceso de agua en el medio de

reaccin. En la tabla 6.4 se muestran los experimentos realizados para conocer la influencia del

segundo producto de reaccin sobre el proceso global de reaccin.

Tabla 6.4. Experimentos cinticos, con adicin de agua, pan la sntesis de Oleato de OdIo.

NUMERO DE TEMPERATURA CATAL. PRESION


EXPERIMENTO (0(2) (Ve) (mniHg) (Moles)

0059 60 5 710 0.177


0060 60 5 710 0.354
0061 70 5 710 0.177
0062 70 5 710 0.354
0063 80 5 710 0.177
0064 80 5 710 0.354

En la figura 6.1 se muestran los resultados obtenidos para una temperatura de 700(2, habiendo

fijado previamente la concentracin de catalizador en un 5% y la presin de operacin en 7lOmmHg


Sntesis de Oleato de Oleilo 225

para evitar que el agua presente en el medio de reaccin se elimine a medida que la reaccin va

teniendo lugar. Los resultados se comparan con la reaccin correspondiente en la que no hay adicin

de agua. En todos los casos se ha mantenido la relacin equimolecular de cido y alcohol oleico.

Converelon de acdo
1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.6
0.4
0.3
0.2
0.1

0 60 100 150 200


Tiempo (mm)
Oleato de Cicilo
Pu 7lOmmHg CatalIzador: 6% Tu 70C

Figura 6.9. Sntesis de Oleato de Oleio. Estudio de la concentracin inicial de agua.

Como puede observarse, al igual que cuando se trabaja con un exceso de ster, en este caso

tambin se produce una disminucin drstica en la conversin de cido oleico en oleato de oleio,

aunque menos marcada. En cualquier caso, el efecto producido, adems de deberse al desplazamiento

ejercido sobre el equilibrio de reaccin hacia la formacin de reactivos, puede deberse tambin a una

inhibicin del catalizador por la presencia de un exceso de agua. Por tanto tambin ser necesario

incluir este fenmeno dentro del estudio del modelado cintico de la reaccin cuando el proceso se

lleve a cabo en condiciones de presin que permitan la presencia de agua en el medio de reaccin.
226 Resultados Experimentales

6.2 SINTESIS DE OLEATO DE CETILO

La planificacin de experimentos para este segundo sistema se llevo a cabo de manera anloga

a la del caso anterior. Por una parte se realiz un grupo de experimentos para conocer como afecta la

modificacin de las condiciones de operacin sobre el rendimiento obtenido en el sistema. Dentro de

este grupo, la primera serie de experimentos se llev a cabo en condiciones de irreversibilidad, fijando

la presin de trabajo en 6Omml-Ig. En la segunda serie de experimentos se fij la presin en 7lOmmlIg,

es decir, los experimentos se realizaron en condiciones de reversibilidad. Para las dos series de

experimentos se fijaron la velocidad de agitacin y concentracin relativade los reactivos, cido oleico

y alcohol cetlico, de forma equimolecular, siendo el catalizador empleado la forma comercial

Novozym 435 constituido por la lipasa de Candida anarerica. En la tabla 6.5 se muestran los

experimentos realizados para conocer las influencias ejercidas por la temperatura, presin y

concentracin de catalizador. El segundo grupo de experimentos se realiz para conocer la influencia

de la concentracin de las diferentes especies presentes en el medio, que se vern ms adelante.

Tabla 6.5. Experimentos realizados para conocerla influencia de las variables de operacin sobre
la reaccin de sntesis de Oleato de CeUlo.

N> EXPERIMENTO TEMPERATURA PRESION CATALIZADOR

(0C) (mmHg) (Ve)

001 70 60 3
0C2 70 60 5
003 70 60 7
004 75 60 3
005 75 60 5
006 75 60 7
0(27 80 60 3
0(28 80 60 5
009 80 60 7
221
Sntesis de Oleato de Cetilo

Tabla 6.5 (Continuacin). Experimentos realizados para conocer la influencia de las variables
sobre la reaccin de sntesis de Oleato de Cetilo.

TEMPERATURA PRESION CATALIZADOR


N0 EXPERIMENTO <0(2) (mmHg) (Ve)

OCIO 70 710 3
0(211 70 710 5

0(212 70 710 7
0(213 75 710 3
0(214 75 710 5
0(215 75 710 7
0(216 80 710 3

0(217 80 710 5
0(218 80 710 7

6.2.1 INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA

A partir de los resultados obtenidos en los experimentos cuyas variables de operacin se

mantuvieron fijas, a excepcin de la temperatura, que se tom como variable independiente, se llevaron

a cabo las correspondientes representaciones grficas de tiempo frente a conversin en oleato de cetilo.

En todas las representaciones realizadas se observ la misma tendencia, la conversin aumenta con la

temperatura, lo que coincide con la interpretacin esperada para este tipo de procesos.

En la figura 6.10 se muestra una de estas representaciones. En concreto, se trata de la serie de

experimentos realizados a presin atmosfrica, empleando una concentracin inicial de catalizador del

5% en peso y habiendo fijado la relacin molar cido/alcohol en la unidad. A partir de los resultados

obtenidos, se ha podido observar que para un tiempo de reaccin de 120 mm., cuando se aumenta la

temperatura de 70V a 750(2, el incremento en la conversin es de un 5.42%, mientras que al elevar


228 Resultados Experimentales

la temperatura de 750(2 a 800(2 el aumento de conversin es de un 7.34%. Lo que indica, como en el

caso anterior, que la variacin de conversin por efecto de la temperatura es siempre positiva.

independientemente de la dems variables de operacin.

Coawenloa de moMo
1
0.9
0.8
0.7
o.
03
0.4
ej
0.2
0.1

0 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo <sin)
ChaU Ge CetUe
2: 710 nHg Catalladen 5% Aa/Al: 111

Figura 6.10. Influencia de la temperatura en la sntesis de Oleato de Cetilo.

6.2.2 INFLUENCIA DE LA PRESION

Representando las cunas tiempo-conversin de cido fijando como variable independiente la

presin, los resultados comparativos indican que un aumento de la presin de operacin da lugar a una

disminucin de la conversin en ster, lo que demuestra que al trabajar a vaco en. el intervalo de

temperaturas establecido, el agua formado durante el transcurso de la reaccin pasa a la fase vapor y

se elimina continuamente del sistema, desplazndose as el equilibrio favorecindose la formacin de

los productos de reaccin.


Sntesis de Oleato de Cetilo 229

En la figura 6.11 se representan las curvas correspondientes a una temperatura de operacin

de 750(2, una concentracin inicial de catalizador del 5% y una relacin molar cido/alcohol de uno.

De dicha representacin se desprende que un aumento de la presin desde 60 mmflg hasta 710 mmlzlg

supone, para un tiempo de reaccin de 120 mm., una disminucin de la conversin del 7.4%. Lo que

indica que la reaccin se ve favorecida a presiones inferiores a la atmosfrica.

C.msrsion de nido
1
0.9
0.8
0.7
o.
0.8
0.4
0.8
0.2
0.1

0 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo (ala)
Olean 4* Ceda
Ti ?SC CSajlader: SS ABIAb 1)1

Figura 6.11. Influencia de la presin en la sntesis de Oleato de Cetilo.

6.2.3 INFLUENCIA DE LA CONCENTRACION INICIAL DE CATALIZADOR

Para estudiar la influencia de la concentracinde catalizador sobre la reaccin de esterificacin

propuesta, se emplearon los experimentos cuyas condiciones de operacin coincidan, tomando como

variable independiente la variable objeto de estudio en este apartado. En la figura 6.12 se muestra una

de estas representaciones.
230 Resultados Experimentales

En este caso corresponde a las reacciones realizadas a presin atmosfrica, con una temperatura

de 70~C y una relacin molar cido/alcohol de 1; en las un aumento de la concentracin inicial de

catalizador del 2% dan lugar a un aumento medio de la conversin de entorno a un 7%.

Comvermioa de asido
1
0.,
0.8
0.7
o.
03
0.4
0418
0.2
0.1

0 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo (ala)
Olee de Cetilo
T: 1@C 1: 710 mmlig AIAJi 111

Figura 6.12. Influencia de la concentracin inicial de catalizador en la sntesis de Oleato de Cetilo.

Con el fin de conocer como deba ser tenida en cuenta la concentracin inicial de catalizador

dentro del modelado cintico, se llevaron a cabo representaciones de la concentracin de catalizador

frente a la conversin de catalizador para diferentes tiempos de reaccin, teniendo en cuenta los tres

niveles de temperatura y los dos niveles de presin ensayados. A ttulo ilustrativo, se muestran las

figuras 6.13 y 6.14, las cuales coinciden que la variacin de la conversin con la concentracin inicial

de catalizador son lineales para un tiempo de reaccin fijado. Dicha variacin mantiene una relacin

lineal, independientemente del valor del resto de las variables que influyen sobre el proceso de

esterificacin.
Sntesis de Oleato de Cetilo 231

La figura 6.13 representa los resultados obtenidos al variar la concentracin de catalizador

cuando la presin de trabajo es la atmosfrica, siendo la temperatura de reaccin de 700(2 y la relacin

cido/alcohol equimolecular.

Couwvuion da nido
0.9

G t30m1s
0.5 - o teo~.

0.4
2 3 4 5 6 7 8
CatalIzador (%)
Olas, de Cutile
Tu 7OC 2: 7lOsmHg AciAl: 111

Figura 6.13. Sntesis de Oleato de Cetilo. Variacin convrsin-concentracin-tiempo. P: 7lOmmHg.

Anlogamente, en la figura 6.14 se muestran las representaciones obtenidas cuando la presin

de trabajo es de 6OmmHg, situndose el valor de la temperatura en el punto medio del intervalo fijado

para la reaccin de obtencin de oleato de cetilo. En ambos casos puede observarse la que la

dependencia de la conversin de cido oleico es de primer orden con respecto a la concentracin inicial

de catalizador empleada para diferentes tiempos de reaccin.

Por otra parte, aparentemente, no se aprecian efectos de saturacin de la concentracin de

catalizador en ninguno de los casos, lo que indica que la dependencia de la velocidad de reaccin con
232 Resultados Experimentales

la concentracin de catalizador permanece constantemente lineal, al menos dentro de los intervalos

estudiados en esta memoria.

Comverslon da asido
1

e.
6 tSOmIn
o., * tGOmfa
*r tI2Oaim
0.4
2 3 4 5 6 7 8
Catalizador <i
Oleata de CotO.
T: IOC 1: dOuaE AciAl: Ji

Figura 6.14. Sntesis de Oleato de Cetilo. Variacin conversin-catalizador-tiempo. P: 6OmmHg.

6.2.4 INFLUENCIA DE LA RELACION MOLAR ACIDO/ALCOHOL

De cara a un posterior anlisis cintico, se realiz un segundo grupo de experimentos variando

la relacin molar cido/alcohol. Dicho grupo de experimentos se dividi en dos series, la primera de

ellas se llev a cabo en exceso de alcohol para estudiar la variacin de la velocidad de reaccin con

la concentracin de cido oleico. En la segunda serie de experimentos se trabaj con exceso de cido

oleico, para estudiar la variacin de la velocidad de reaccin con la concentracin de alcohol cetlico.

En ambos casos el estudio se hizo fijando la presin de operacin en 6OmmHg, y la concentracin de

catalizador en un 5% en peso, en relacin con la masa total de reaccin.


Sntesis de Oleato de Cetilo 233

En la tabla 6.6 se resumen los experimentos realizados para dicho estudio, en el que se han

tenido en cuenta tres niveles de temperatura.

Tabla 6.6. Experimentos cinticos para la sntesis de Oleato de Cetilo.

NUMERO DE TEMPERATURA CATAL. PRESION R. MOLR

EXPERIMENTO (0(2) (Ve) (mmHg) ACIDO/ALCOHOL

0(219 70 5 60 0.1
0(220 70 5 60 0.143
0(221 70 5 60 0.2
0(222 70 5 60 5
0(223 70 5 60 7
0(224 70 5 60 10
0(225 75 5 60 0.1
0(226 75 5 60 0.143

0(227 75 5 60 0.2
0(228 75 5 60 5
0(229 75 5 60 7
0(230 75 5 60 10
0(231 80 5 60 0.1
0(232 80 5 60 0.143
0(233 80 5 60 0.2

0(234 80 5 60 5
0(235 80 5 60 7
0(236 80 5 60 10

A partir de los resultados obtenidos con estos experimentos, se compararon las diferentes

curvas de velocidad de formacin de ster frente a la concentracin del reactivo en defecto, tomando

como variable independiente la relacin molar cido oleico/alcohol cetflico. En la figura 6.15 se

muestran las representaciones correspondientes a una concentracin de cido oleicoen defecto. Dichas

representaciones corresponden al nivel inferiortomado para elintervalo depresin estudiado, 6OmmHg,


234 Resultados Experimentales

un nivel de temperatura intermedio para el intervalo fijado, 750(2, y un valor medio para el intervalo

fijado en cuanto a la concentracin inicial de catalizador, 5%.


VELOCIDAD DE mccio~ (mmol/min)

3.6

LS

1.5

0.5

0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3


NUMERO DE MOLES DE CIDO (mal)
01MAYO DE CETILO
P BOnZg Cat*IISSOr 8X Tu TVC

Figura 6.15. Sntesis de Oleato de Cefilo. Influencia de la relacin molar cido/alcohol.

(2omo se desprende de esta representacin, Ja velocidad de obtencin de oleato de cetilo

aumenta cuando la concentracin de cido oleico aumenta, independientemente de cual sea la

concentracin de alcohol cetilico, hasta que la concentracin de cido oleico llega a un nivel de

concentracin correspondiente a 0.O5moles. A partir de ese nmero de moles, se observa que cuando

la concentracin de cido contina disminuyendo, la velocidad de reaccin disminuye, dependiendo

del exceso de alcohol cetlico presente en el medio de reaccin.

Este hecho se debe a que, si bien en un principio el sistema responde a un comportamiento

clsicamente termodinmico debido a un desplazamiento del equilibrio qumico; para tiempos

moderadamente largos de reaccin, tienen lugar efectos de inhibicin del sistema cataltico que fuerzan
Sntesis de Oleato de Cetilo 235

al comportamiento del equilibrio a una aceleracin en la disminucin de la velocidad de reaccin. Este

comportamiento indica que habr que tener en cuenta un factor de inhibicin en la expresin de

velocidad de reaccin, por parte de la concentracin del alcohol cetilico presente en el medio de

reaccin. Como puede observarse para las realaciones molares 1/7 y 1/10, en la velocidad de reaccin

es menor que para las relaciones molares 1/1 y 1/5 a partir de un nmero de moles inferior a 0.05

moles de cido oleico.

Por otra parte, en la figura 6.16 se muestra una situacin similar para la representacin de las

correspondientes curvas de concentracin de alcohol cetflico frente a velocidad de reaccin, cuando se

opera en exceso de cido oleico.

VELOCIDAD DE REACClON (mmal/mln)


3

2.5

1.5

0.5

0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3


NUMERO DE MOLES DE ALCOHOL (mal)
OlEATO lE CUTiD
1>: SOmmUg Catalizador 6% T: WC

Figura 6.16. Sntesis de Oleato de Cetilo. Influencia de un exceso de la concentracin de cido oleico.

Las condiciones de operacin para esta representacin son las mismas que las detalladas en la

figura anterior, siendo el efecto observado similar al anterior, aunque ms atenuado, lo que indica que
236 Resultados Experimentales

que cuando la concentracin de alcohol cetflico se encuentra en valores por debajo de 0.05 moles, la

disminucin de la velocidad de reaccin es mayor que la que correspondera a algunas relaciones

molares cido/alcohol. Este efecto indica la existencia de una inhibicin por parte de la presencia de

cido oleico.

6.2.5 ESTUDIO DE LA CONCENTRACION DE PRODUCTOS EN EL MEDIO DE REACCION

Para conocer la influencia de los productos obtenidos a medida que va teniendo lugar la

reaccin de esterificacin, se llevaron a cabo dos series de experimento. La primera en exceso de oleato

de cetilo, y la segunda en exceso de agua En la tabla 6.7 se muestran los experimentos realizados para

conocer dichas influencias.

Tabla 6.7. Experimentos cinticos, con adicin de pmductos, para la sntesis de Oleato de Cetilo.

NUMERO DE TEMPERATURA CATAL. PRESION N~ (

EXPERIMENTO (<C) (Ve) (mmHg) (Moles) (Moles)

0(237 75 5 60 0.118 0
0(238 75 5 60 0.354 0
0(239 75 5 710 0 0.118

0(240 75 5 710 0 0.354

A fin de comparar el efecto producido por un exceso de la concentracin de cualquiera de los

dos productos de reaccin presentes en el medio, se compararon dichos experimentos con los

experimentos correspondientes a las mismas condiciones de operacin, pero sin adicin inicial alguna.

En este caso, se representaron las curvas tiempo-conversin para los diferentes casos. En las figuras

6.17 y 6.18 se representan ambas series. (2omo puede observarse, se denotan efectos de inhibicin tanto

por la presencia de un exceso de oleato de cetilo como por la de un exceso de agua, ya que en los dos

casos se produce una drstica cada de la conversin. Este hecho pone de manifiesto el efecto negativo

de la concentracin de ambas especies, en cuanto a la velocidad de reaccin se refiere.


Sntesis de Oleato de Cetilo 237

ConverSan de saldo
1.1
1
0.9
0.8
0.7
0.8
0.6
0.4
0.3
0.2
0.1

o 50 100 150
Tiempo (mm>
Oleato de CeUta
P: OOmmHg Catatlzador: 5% Tu rsc

Figura 6.17. Sntesis de Oleato de Cetilo. Estudio de la concentracin inicial de ster.

Converelan de saldo

1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1

o 50 100 150
Tiempo <mm)
Oleato de Cetila
P: TlOmmIIg CatalIzador: 5% Tu WC

Figura 6.18. Sntesis de Oleato de Cetilo. Estudio de la concentracin inicial de agua.


238 Resultados Experimentales

6.3 SINTESIS DE MIRISTATO DE MIRISTILO

Para el estudio del sistema formado por cido mirstico y alcohol mirstico, en presencia del

sistema cataltico comercial Novozym 435, constituido por la lipasa de Candida antarcilca inmovilizada

sobre un soporte macrorreticular, se llevaron a cabo dos grupos de experimentos. Al igual que en los

sistemas anteriores, el primer grupo de experimentos est dividido en varias series dirigidas hacia el

conocimiento de la influencia de las variables de operacin, presin, temperatura y concentracin de

catalizador; mientras que las series realizadas en el segundo bloque de experimentos est dirigida hacia

la obtencin de resultados que, adems de permitirnos conocer el comportamiento del sistema en

funcin de las especies qumicas presentes en el medio, permita obtener datos para el posterior

mpdelado cintico del sistema. En la tabla 6.8 se resumen los experimentos correspondientes al primer

grupo, en el que se ha fijado una relacin molar cido mirstico/alcohol mirstico 1:1, as como la

velocidad de agitacin para todos los experimentos pertenecientes a este grupo.

Tabla 6.8. Experimentos realizados para conocerla influencia de las variables de operacin sobre
la reaccin de sntesis de Miristato de Milistilo.

TEMPERATURA PRESION CATALIZADOR1


N0 EXPERIMENTO (minHg) (Ve)

MM1 60 60 5
MM2 70 60 3
MM3 70 60 5
MM4 70 60 7
MM5 80 60 5
MM6 60 710 5
MM7 70 710 3
MM8 70 710 5
MM9 70 710 7
MMIO 80 710 5
Sntesis de Miristato de Miristilo 239

6.3.1 INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA

Con vistas a conocer la influencia ejercida por la temperatura sobre el proceso de esterificacin,

se tomaron los resultados obtenidos en las reacciones con una misma concentracin de catalizador, 5%

en peso, y una misma presin de operacin, llevndose a cabo representaciones conversin-tiempo en

miristato de miristilo, con lo que se obtuvieron dos series de experimentos vlidos, para presiones de

6OmmHg y 7lOmmHg respectivamente.

Couwnlos de asido
1
0.9
0.8
0.7
0.4
0.8
0.4
0.8
0.2
0.1

0 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo (mii)
Muhlatate de MIutstila
P: ES mmflg Catalladar: 5* AciAl: lii

Figura 6.19. Influencia de la temperatura en la sntesis de Miristato de Miristilo.

En la figura 6.19 se representa una de estas series, la correspondiente a una presin reducida,

relacin molar cido/alcohol de uno y concentracin de catalizador de un 5%. En ella puede observarse

que un incremento de la temperatura da lugar a un aumento de la conversin de cido ntrstico en

miristato de miristilo. As para un tiempo de reaccin de dos horas, al pasar de 600(2 a 700(2, la

conversin aumenta entorno a un 2%, mientras que al aumentar la temperatura desde 700(2 a 800(2, el
240 Resultados Experimentales

aumento de conversin se sita en algo ms de un 3%; lo que indica en ambos casos que un aumento

de la temperatura favorece la conversin.

Este hecho es, si cabe, algo ms acentuado cuando se trabaja a presin atmosfrica, por lo que

puede afirmarse que el efecto de la temperatura de operacin es el esperado para nuestros propsitos,

al menos dentro del intervalo estudiado, al aumentar la temperatura se produce un aumento de la

conversin.

6.3.2 INFLUENCIA DE LA PRESION

Siguiendo una metodologa similar, se obtuvieron las curvas comparativas tomando la presin

como variable independiente. La figura 6.20 muestra las curvas correspondientes a una temperatura de

700(2 y un 5% de. catalizador, aunque el efecto observado para las dems temperaturas es el mismo.

Al trabajar a presin reducida, se favorece el equilibrio de formacin de miristato de miristilo,

puesto que puede eliniinarse el agua en continuo. Lo que indica que un aumento de la presin de

operacin ejerce un efecto negativo sobre el proceso de esterificacin, al menos dentro del intervalo

estudiado en esta memoria.

De la figura aqu presentada, se desprende que, si bien, para tiempos de reaccin cortos, el

valor de la presin de trabajo no ejerce variaciones apreciables en la conversin, a partir del primer

cuarto de hora de reaccin los resultados obtenidos son ms interesantes desde el punto de vista de la

produccin trabajando a presin reducida, llegndose a observar alas dos horas de reaccin un aumento

en la conversin de cido en ster, al disminuir la presin de trabajo hasta 6OmmHg, que supera el 6%

de la obtenida cuando se opera en condiciones de presin atmosfrica, conservndose constantes el

resto de las condiciones de operacin.


Sntesis de Miristato de Miristilo 241

Cosnnios de nido
1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.8
0.2
0.1

0 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo (mm)
Miulatate de MfrtatIls
It: WC CSalld.r: 5% AcIAL JI

Figura 6.20. Influencia de la presin en la sntesis de Miristato de Miristilo.

6.3.3 INFLUENCIA DE LA CONCENTRACION INICIAL DE CATALIZADOR

Tomando los resultados obtenidos, tanto en condiciones de irrevesibiidad como en condiciones

depresin atmosfrica, se procedi a representar las curvas conversin-tiempo, obtenindose dos series

de curvas para una temperatura de 700(2 y un una relacin equimolecular de cido y alcohol mirstico.

La figura 6.21 muestra, a ttulo ilustrativo, las representaciones correspondientes al comportamiento

del sistema en condiciones de presin reducida, 6OmmHg.

A partir de los primeros lsmin. de reaccin comienza a observarse que la tendencia de las

curvas viene dada por un efecto positivo de la concentracin de catalizador. Por lo que un aumento

de la concentracin inicial de catalizador produce en todos los casos un aumento de la conversin en

miristato de utiristilo.
242 Resultados Experimentales

Figura 6.21. Influencia de la concentracininicial de catalizador en la sntesis de Miristato de Miristilo.

El anlisis comparativo de estas curvas lleva a la consideracin de que la variacin de la

conversin en funcin de la concentracin de catalizador es lineal, ya que el aumento de la

concentracin de catalizador en un 2%, da lugar a un aumento en la conversin de casi un 4% en los

dos casos.

Las figuras 6.22 y 6.23 confirman este hecho. En la primera se representan datos en

condiciones de presin reducida, mientras que en la segunda, los datos corresponden a presin

atmosfrica. En ambos casos puede observarse que la variacin de la conversin en ester con la

concentracin de catalizador puede considerarse de primer orden para las condiciones ensayadas.
Converuion de nido
Sntesis de Miristato de Mirislo 243

0.9

0.8
-B-~ tSOmIa
O tGOaIm
-*~ 1120u1a
0.7
2 3 4 5 6 7 8
Catalizador (%)
Mirlutato de MUlitilo
Itt 70C P: EOuaHg Ac/Al: 1/1

Figura 6.22. Variacin de la conversin con la concentracin de catalizador. P: 6OmmHg.

Coanruiou de nido
1

6 tSOmIa
0.6 - ~ g~omia
*- tfllOala
0.5
2 3 4 5 6 7 a
Catalizador (%)
MIrAste de MirlItIlo
Tu 70C P: flOmaHg Aa/Al: 1)1

Figura 6.23. Variacin de la conversin con la concentracin de catalizador. P: llOmmHg


244 Resultados Experimentales

6.3.4 INFLUENCIA DE LA RELACION MOLAR ACIDOIALCOHOL

Siguiendo la metodologa propuesta al principio de este captulo, se realiz un segundo grupo

de experimentos para conocer como se ve influenciado el sistema al variar la relacin molar de los

reactivos de partida, sobre el medio de reaccin. A fin de aprovechar estos experimentos para un

anlisis desde el punto de vista cintico, se llevaron a cabo varias series de experimentos fijando

sistemticamente las condiciones de operacin de los mismos. En la tabla 6.9 se muestran los

experimentos pertenecientes a este grupo.

Tabla 6.9. Experimentos cinticos para la sntesis de Miiistato de Mijistilo.

NUMERO DE TEMPERATURA CATAL. PRESION R. MOLAR


EXPERIMENTO__j (<C) (Ve) (mmHg) ACIDO/ALCOHOL
MMI1 60 5 60 0.1
MMI2 60 5 60 0.143
MM13 60 5 60 0.2

MM14 60 5 60 5
MMI5 60 5 60 7
MM16 60 5 60 10
MMI? 70 5 60 0.1

MMI8 70 5 60 0.143
MMI9 70 5 60 0.2
MM2O 70 5 60 5
MM2I 70 5 60 7
MM22 70 5 60 10.
MM23 80 5 60 0.1
MM24 80 5 60 0.143
MM25 80 5 60 0.2

MM26 5
MM27 7
MM28 10
Sntesis de Miristato de Miristilo 245

Tomando como base los experimentos incluidos en el primer bloque, correspondientes a una

concentracin equimolecular de cido mirstico y alcohol mirstico, a presin reducida y con un 5%

de catalizador, se representaron las correspondientes curvas que relacionan la velocidad de obtencin

de miristato de miristilo con la concentracin del reactivo en defecto, tomando como variable

independiente la relacin molar cido/alcohol.

VELOCIDAD DE mcCION (xnmol/mln)


6

O 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3


NUMERO DE MOLES DE CIDO (mal)
HIDrATO DE HIBErnO
P: 60 namffg Catalizador: 53 T 80C

Figura 6.24. Sntesis de Miristato de Miristilo. Influencia de la relacin molar cidolalcohol.

La figura 6.24 muestra las cunas obtenidas cuando se trabaja en exceso de alcohol mirstico

a una temperatura de 800(2. De ella se desprende que, si bien un aumento de la relacin molar

cido/alcohol provoca un aumento de la velocidad de reaccin para tiempos conos, cuando la

concentracin de cido mirstico est por debajo de la correspondiente a 0.1 moles del mismo, la

velocidad de reaccin comienza a caer de forma drstica, llegndose a obtener valores inferiores a los

correspondientes a una relacin equirnolecular de reactivos. Esta aparente contradiccin de las leyes
246 Resultados Experimentales

de equilibrio es debida al exceso de la concentracin de alcohol que, sin duda, ejerce un efecto de

inhibicin cataltica frente a la reaccin de formacin del complejo principal, lo que habr de tenerse

en cuenta para el posterior modelado cintico de la sntesis enzimtica.

VELOCIDAD DE BECCION (nmal/ndn)

O 0.06 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3


NUMERO DE MOLES DE ALCOHOL <mal)
MIESTATO DE MIEISTRO
P: so mmNg Catalizador 51 T WC

Figura 6.25. Sntesis de Miristato de Miristilo. Influencia de la relacin molar cido/alcohol.

Un efecto similar se observa en la figura 6.25, en la que se presentan los resultados

correspondientes a las reacciones llevadas a cabo en exceso de cido mirstico en las mismas

condiciones de operacin que en el caso anterior; siendo el efecto debido al exceso de cido ms

marcado, al menos aparentemente, que el debido al exceso de alcohol.

En cualquier caso, cabe esperar una disminucin, contrastada para los otros dos niveles de

temperatura ensayados, para la velocidad de reaccin, debida a un efecto de inhibicin cataltica por

parte del cido mirstico sobre el mecanismo de la reaccin enzimtica.


Sntesis de Miristato de Miristilo 247

6.3.5 ESTUDIO DE LA CONCENTRACION DE PRODUCTOS EN EL MEDIO DE REACCION

Continuando con el estudio de la influencia ejercida por las especies qumicas presentes en el

medio de reaccin se llev a cabo una nueva serie de experimentos cinticos, esta vez en exceso de

los productos de reaccin correspondientes a dicho proceso de esterificacin. Este ltimo bloque de

experimentos se indican en la tabla 6.10, donde se resumen las condiciones de operacin fijadas en este

estudio.

Tabla 6.10. Expedinentos con adicin de pmductos para la sntesis de Miuistato de Miristilo.

NUMERO DE TEMPERATURA CATAL. PRESION N~0 N~0


EXPERIMENTO (C) (Ve) (mmHg) (Moles) (Moles)

MM29 70 5 60 0.118 0
MM3O 70 5 60 0.354 0

MM3I 70 5 710 0 0.118


MM32 70 5 710 0 0.354

Teniendo en cuenta las reacciones realizadas en las mismas condiciones de operacin pero en

ausencia de productos, se representaron las correspondientes cunas conversin-tiempo de cido,

tomando como variable independiente el nmero de moles de la especie adicionada en cada

experimento. En las figuras 6.26 y 6.27 pueden observarse las curvas de los experimentos con adicin
0C y con un 5% de
de miristato de miristilo y de agua, respectivamente; ambas realizadas a 70
catalizador, manteniendo fija y equimolecular la relacin molar cido/alcohol.

Como puede observarse, los resultados obtenidos son anlogos a los de los sistemas anteriores.

La cada en la conversin al aumentar la concentracin del producto en cuestin indica, en ambos

casos, la presencia de un efecto de inhibicin cataltica por parte tanto del miristato de miristilo como

del agua presentes en el medio de reaccin.


248 Resultados Experimentales

ConverSan de EGida

1.1
1
0.9
0.8
0.7
0.0
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1

O 60 100 160
Tiempo <mm>
Mirletato de Mirletlo
P: SOmmMg CatalIzador: 6% Tu 70C

Figura 6.26. Sntesis de Miristato de Miristik. Estudio de la concentracin inicial de ster.

Converelon de saldo

1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.6
0.4
0.8
0.2
0.1

o 60 100 160
Tiempo <mlii)
Mirletato de Mirletilo
Pu 7lOmmtlg Cataglzador: 6% Tu TOC

Figura 6.27. Sntesis de Miristato de Miristilo. Estudio de la concentracin inicial de agua.


Sntesis de Oleato de Isopropilo 249

6.4 SINTESIS DE OLEATO DE ISOPROPILO

La experimentacin realizada para el estudio de este sistema se realiz, como en los casos

anteriores, considerando dos grupos de experimentos. La diferencia con respecto a los sistemas ya

considerados reside en la imposibilidad de operar en condiciones de presin reducida, puesto que la

naturaleza del alcohol isopropilico da lugar a que la presin de vapor de este reactivo sea inferior a

la que presenta el agua formada en el medio de reaccin, para cualquier temperatura de operacin

fijada.

Este hecho supone un impedimento para desplazar el equilibrio de reaccin mediante la

eliminacin continua del agua producida, por lo que todos los experimentos se llevaron a cabo en

condiciones de presin atmosfrica. Los reactivos de partida fueron cido oleico e isopropanol, siendo

el sistema cataltico empleado Novozym 435, constituido por la lipasa de Candida anrarclca

inmovilizada.

Tabla 6.11. Experimentos para el estudio de la influencia de las variables de operacin sobre la
reaccin de sntesis cataltica de Oleato de Isopmpilo.

TEMPERATURA PRESION CATALIZADOR

N0 EXPERIMENTO (0C> (mmHg) (Ve)


IiPOl 65 710 5
1P02 70 710 3
1P03 70 710 5
1P04 70 710 7
1P05 75 710 5

En la tabla 6.11 se muestra un primer grupo de experimentos, realizados para determinar el

comportamiento del sistema frente a las variables de operacin en que se lleva a cabo la reaccin, que

en este caso sern nicamente la temperatura y la concentracin de catalizador, mantenindose


250 Resultados Experimentales

constante y equimolecular la relacin molar cido/alcohol. El efecto producido por la variacin de la

concentracin de las diferentes especies presentes en el medio de reaccin se considerar en un segundo

grupo de experimentos, llevados a cabo desde el punto de vista de la obtencin de informacin de cara

a modelar la cintica que gobierna el proceso de esterificacin.

6.4.1 INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA

Los experimentos empleados para conocer la influencia de la temperatura, fueron los

correspondientes amia concentracin inicial de catalizador del 5%. (2on los datos de estos experimentos

se construyeron las curvas conversin-tiempo de cido oleico en oleato de isopropilo, manteniendo las

dems variables de operacin constantes. En la figura 6.28 se muestran las curvas correspondientes a

las tres temperaturas ensayadas.

(2omo se desprende de dicha representacin, la influencia debida al aumento de la temperatura,

supone un incremento de la conversin en oleato de isopropilo. Para tiempos conos de reaccin, el

efecto observado es similar para las tres temperaturas probadas, pennaneciendo este casi inalterable

hasta los veinte primeros minutos de reaccin para las temperaturas media y superior. A partir de este

momento, las diferencias comienzan a hacerse nis notorias, llegndose a alcanzar a las dos horas de

reaccin un incremento en la conversin del 3.01% al pasar de 650C a 700(2, y un aumento del 2.32%

cuando se aumenta la temperatura desde 700(2 a 750(2

Estos hechos pueden explicarse teniendo en cuenta que, si bien, para tiempos cortos de

reaccin, la velocidad de reaccin se ve poco influenciada por la temperatura durante el primer cuarto

de hora de reaccin, durante el cual la reaccin transcurre a elevada velocidad. A partir de dicho

perodo de tiempo, la temperatura ejerce un efecto ms marcado, lo que indica que, al menos dentro

del campo de experimentacin definido, la temperatura no juega un papel definitivo con respecto a la
Sntesis de Oleato de Isopropilo 251

naturaleza y la concentracin de las especies presentes en el medio de reaccin.

Figura 6.28. Influencia de la temperatura en la sntesis de Oleato de Isopropilo.

6.4.2 INFLUENCIA DE LA CONCENTRACION INICIAL DE CATALIZADOR

En cuanto a la concentracin del catalizador Novozym 435 empleado para este sistema de

reaccin, se ensayaron los niveles de concentracin de 3%, 5% y 7%, fijando las dems variables de

operacin en 700(2 para la temperatura y relacin equinolecular de reactivos, llevndose a cabo las

reacciones en condiciones de presin atmosfrica. A partir de los experimentos correspondientes, se

representaron las curvas caractersticas de variacin de la conversin de cido oleico con el tiempo

transcurrido durante la reaccin, para cada uno de los tres niveles de concentracin de catalizador

fijados segn las especificaciones de la lipasa de Candida anrarctica comercial. La figura 6.29 muestra

comparativamente elesperado aumento global de la conversin producido por un aumento de la especie


252 Resultados Experimentales

cataltica presente en el medio de reaccin.

Coaveruioa de aSE,

0.8

0.6

0.4

0.2

0 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo <mi.>
Oled. de Iepnptb
T: WC Pi fl0usug Aa/Alt LI

Figura 6.29. Influencia de la concentracin inicial de catalizador en la sntesis de Oleato de Isopropio.

A la vista de este grfico, puede confirmarse la dependencia de la conversin con la

concentracin de catalizador, como sucede en los sistemas considerados anteriormente. Sin embargo,

el aumento producido en la conversin cuando la concentracin de la especie cataltica se aumenta

desde el nivel medio al nivel superior de concentracin esta por debajo del que, en un principio, cabra

esperar. Sin duda, esto se debe a que estamos operando en unas condiciones muy prximas al valor

de concentracin para el cual se alcanzara la saturacin de la especie cataltica en el medio de

reaccin. No obstante, la variacin de la conversin con la concentracin de catalizador puede

considerarse todava de primer orden con respecto a la cantidad de catalizador, ya que se ha observado

que la desviacin puede despreciarse para los diferentes tiempos de reaccin. As, en la figura 6.30

pueden observarse las representaciones correspondientes a los tres tiempos de reaccin para los que se
Sntesis de Oleato de Isopropilo 253

han tomado valores, pudindose considerar una trayectoria lineal, siendo las rectas que describen dicha

variacin casi paralelas.

convonion de nido

6 tflmtn
* tdCmtm
~* tllOmtS
027
2 3 4 5 6 7
Catalidar (U)
ales. 6. lm,prcpflB
1: 7BC P: ltOmHg AciAl: 1/1

Figura 6.30. Variacin de la conversin con la concentracin de catalizador. P: 71 Ommflg

6.4.3 INFLUENCIA DE LA EFLACION MOLAR ACIDO/ALCOHOL

El estudio de la influencia debida a la relacin molar de los reactivos de partida en la reaccin

de esterificacin entre el cido oleico y el alcohol isopropilico se llev a cabo a partir de un grupo de

experimentos en los que se mantuvieron constantes todas las condiciones de operacin, excepto la

relacin molar cido/alcohol. En la tabla 6.12 se hace un resumen de los experimentos realizados desde

un punto de vista cintico, con el fin de obtener informacin til, junto con los correspondientes

experimentos realizados con una concentracinequimolecular de reactivos, para el posterior modelado

cintico de la reaccin de esterificacin.


254 Resultados Experimentales

Tabla 6.12. Experimentos cinticos para la sntesis de Oleato de Isopropilo.

NUMERO DE TEMPERATURA CATAL. PRESION R. MOLAR1


EXPERIMENTO (0(2) (Ve) (mmlig) ACIDO/ALCOHOL
1P06 65 5 710 0.1
1P07 65 5 710 0.143

IPOS 65 5 710 0.2

1P09 65 5 710 5
IPOIO 65 5 710 7

IPOII 65 5 710 10
1P012 70 5 710 0.1
1P013 70 5 710 0.143
1P014 70 5 710 0.2

IPOiS 70 5 710 5
1P016 70 5 710 7
IPOl? 70 5 710 10

1P018 75 5 710 0.1


1P019 75 5 710 0.143
1P020 75 5 710 0.2
1P021 75 5 710 5
1P022 75 5 710 7
1P023 75 5 710 10

A partir de los datos obtenidos durante el transcurso de cada una de las reacciones, se

representaron grficamente los valores de velocidad de reaccin frente al nmero de moles de reactivo,

observndose para cada una de las series representadas, para las tres temperaturas, el consiguiente

comportamiento, debido a la relacin molar cido/alcohol, que se tom como variable independiente.

En la figura 6.31 se presentan las curvas correspondientes al nivel medio fijado para la

temperatura de reaccin, 700C, en la que se estudia la variacin del nmero de moles de cido oleico,
cuando la reaccin se lleva a cabo en presencia de un exceso de alcohol isopropiico, siendo anlogos
Sntesis de Oleato de Isopropilo 255

los resultados obtenidos para los niveles de temperatura superior e inferior, cuando las dems
VELOCIDAD DEpermanecen
REACCION constantes.
(mmal/mln)
condiciones de operacin

2.5

1.5

0.5

O 0.05 O.i 0.15 0.2 0.25 0.3


NUMERO DE MOLES DE CIDO (mal)
OLEATO DE ISOPROPUO
P 710 mmHg Cataliuadon 52 T: 7~C

Figura 6.31. Sntesis de Oleato de Isopropio. Influencia de la relacin molar cido/alcohol.

Al igual que en los casos anteriores, se observa un aumento de la conversin para tiempos

cortos de reaccin, cuando la cantidad de alcohol adicionado aumenta, debido a un claro

desplazamiento del equilibrio de reaccin por la presencia de un exceso de uno de los reactivos. En

cambio, a medida que nos acercamos al equllibrio de reaccin, se observa que la disminucin de la

velocidad de reaccin es superior para una relacin molar 1:10 que cuando la relacin molar es 1:7,

por debajo de una concentracin de cido oleico igual a 0.07 moles. El mismo fenmeno se observa

para relaciones 1:5 y 1:1, cuando la concentracin de cido oleico corresponde a un valor inferior a

los 0.35 moles. En ambos casos, este descenso inesperado se debe a una misma causa: La presencia

de un exceso de isopropanol produce un efecto de inhibicin de la lipasa de Candida antarctica, debido


256 Resultados Experimentales

a la formacin de un complejo de la enzima con el alcohol, lo que se traduce en una disminucin de

la velocidad de reaccin, que presenta valores inferiores a los que, en un principio, cabra esperar.

Un fenmeno anlogo se produce al operar en exceso de alcohol oleico, donde se ha podido

observar que, para las mismas condiciones de operacin, cuando la concentracin de isopropanol est

por debajo de la correspondiente a 0.68 moles, la velocidad de reaccin sufre un descenso superior al

esperado; obtenindose valores mnimos en el caso de una relacin molar 10:1. En la figura 6.32 se

presentan las curvas que describen el comportamiento de la velocidad de reaccin. En este caso la

inhibicin producida sobre el sistema enzimtico que cataliza el proceso, se debe a la formacin de

complejos indeseables con el cido oleico. Por tanto, habr que tener en cuenta la inclusin, dentro del

modelo cintico, de trminos caractersticos de inhibicin enzimtica debida a la formacin de

complejos con los reactivos.

VELOCIDAD DE ~CCI0N (mmal/mln)


2

1.5

0.5

0 0.05 0.i 0.15 0.2 0.25 0.3


NUMERO DE MOLES DE ALCOHOL (mal)
aUllo DR ISOPEOPfl.O
P: 710 miuRa Catailsaton SN t 7OC

Figura 6.32. Sntesis de Oleato de Isopropilo. Influencia de la relacin molar cido/alcohol.


Sntesis de Oleato de Isopropilo 257

6.4.4 ESTUDIO DE LA CONCENTIlACION DE PRODUCTOS EN EL MEDIO DE REACCION

La influencia de los productos formados en el transcurso de la reaccin de esterificacin, oleato

de isopropilo y agua, se estudia llevando a cabo cuatro experimentos adicionales, cuyos resultados

fueron comparados conjuntamente con los experimentos realizados sin adicin de productos. En la tabla

6.13 se muestran las condiciones de operacin para los correspondientes experimentos, los cuales se

realizaron con una relacin molar cido/alcohol igual a la unidad.

Tabla 6.13. Experimentos con adicin de pmductos pan la sntesis de Oleato de Isopmpilo.

NUMERO DE } TEMPERATURA CATAL. PRESION N~, N1

EXPERIMENTO_1 CC) (%) (mmflg) (Moles) (Moles)_1

1P024 70 5 710 0.118 0


1P025 70 5 710 0.354 0

1P026 70 5 710 0 0.118


1P027 70 5 710 0 0.354

En las figuras 6.33 y 6.34 se presentan las curvas indicativas de la variacin de la conversin

de cido oleico en oleato de isopropio en funcin del tiempo, con adicin inicial de oleato de

isopropio y agua, respectivamente. En ambos casos puede observarse que un aumento de la

concentracin de cualquiera de los productos de reaccin produce una apreciable disminucin de la

velocidad de reaccin para cualquier tiempo de reaccin. As en la primera adicin de ster se procuce

una disminucin de la conversin de ms de un 40%; mientras que en la segunda adicin, un aumento

tres veces superior al primero, el descenso con respecto a la primera adicin es inferior a un 20%.

Algo similar sucede cuando se opera en exceso de agua, la primera adicin de agua supone un

descenso en la conversin de cido oleico de algo ms de un 30%, incrementndose este en un 15%

ms cuando la concentracin inicial de agua se multiplica por tres en la segunda adicin.


258 Resultados Experimentales

Converelon de acda
1
a..
0.8
0.7
0.6
0.8
0.4
0.3
0.2
0.1

o 50 100 150
Tiempo (mlii>
Oleato de Isoproplio
P: TlOmmMg CatalIzador: 8% T: TOC

Figura 6.33. Sntesis de Oleato de Isopropilo. Estudio de la concentracin inicial de ster.

Converelon de moldo
1
0.9
0.8
0.7
o-e
0.8
0.4
0.3
0.2
0.1

0 50 100 150
Tiempo <mini
Oleato de leoprapilo
P: 7lOmmHg CatalIzador: 8% T: 70C

Figura 6.34. Sntesis de Oleato de Isopropilo. Estudio de la concentracin inicial de agua.


Sntesis de Palmitato de Isopropilo 259

6.5 SINTESIS DE PALMHATO DE ISOPROPILO

Los experimentos realizados para el anlisis del sistema cido palmtico-alcohol isopropiico

catalizado por la lipasa comercial Novozym 435, inmovilizada sobre una resma de intercambio inico,

se llevaron a cabo en condiciones de presin atmosfrica. Al igual que para el anterior sistema, la

presencia de isopropanol en el medio que, debido tanto a su presin de vapor como a su afinidad para

formar azctropos con el agua, impide la posibilidad de trabajar a presin reducida para desplazar el

equilibrio de reaccin mediante la eliminacin en continuo del agua producida. Las condiciones de

operacin, por analoga con el caso anterior se fijaron de las misma manera, atendiendo al

razonamiento propuesto en el captulo tres de esta memoria. El primer grupo de experimentos se

planific de cara al estudio del comportamiento de la reaccin en funcin de las condiciones de

operacin, siendo las variables estudiadas la temperatura de reaccin y la concentracin inicial de

catalizador presente en el medio de reaccin; mientras que la presin y la relacin molar de reactivos

se mantuvieron constantes para todos los experimentos, siendo esta ltima la unidad. En la tabla 6.14

se hace un resumen de los experimentos realizados para tal fin, excluyndose los experimentos

realizados en un segundo grupo, cuya importancia est ms orientada hacia el estudio cintico del

proceso de esterificacin enzimtica.

Tabla 6.14. Experimentos para el estudio de la influencia de las variables de operacin sobre la
reaccin de sntesis cataltica de Palinitato de lsopmpilo.

N0 EXPERIMENTO TEMPERATURA PRESION CATALIZADOR


(0C) (mmHg) (~)
IPP1 65 710 5
IPP2 70 710 3
IPP3 70 710 5
IPP4 70 710 7
IPPS 75 710 5
260 Resultados Experimentales

6.5.1 INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA

Tomando como referencia los datos obtenidos a partir de los experimentos 1, 3 y 5, se

representaron las curvas conversin-tiempo del palmitato de isopropilo, caractersticas para cada una

de las temperaturas de reaccin. Los efectos observados son anlogos a los de los sistemas anteriores,

especialmente al de sntesis de oleato de isopropilo. Si bien los niveles de conversin obtenidos estn

muy por debajo de los del cido oleico, sin duda debido a la naturaleza del cido palmtico, la

dependencia de la conversin con la temperatura es muy parecida, como puede observarse en la figura

6.35, donde se muestran las referidas curvas comparativas.

Ceuveslea de acM.
1
0.9
0.8
0.7
o.
o.,
0.4
o.,
0.2
0.1

0 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo (ma>
PaIaifl de Im.pnptI.
9: 7lOmuJHs CataIimaIarn 5% Aa/Al, 1)1

Figura 6.35. Influencia de la temperatura en la sntesis de Palmitato de Isopropilo.

Comparando los valores de conversin obtenidos para los niveles de temperatura inferior y

medio, se observa que el incremento de la conversin en palmitato de isopropilo, correspondiente a las


Sntesis de Palinitato de Isopropilo 261

dos horas de reaccin, se traduce en casi un 6%, mientras que al aumentar la temperatura desde el nivel

medio al nivel superior de temperatura, el aumento observado en la conversin para el mismo periodo

de tiempo, se sita en tomo al 11%. Por tanto, el efecto producido por la temperatura sobre el proceso

de esterificacin es positivo. Lo que significaque obtendremos mejores resultados, desde el punto de

vista de la conversin, si operamos cercanos al nivel superior del intervalo de temperatura.

6.5.2 INFLUENCIA DE LA CONCENTRACION INICIAL DE CATALIZADOR

Siguiendo el mismo razonamiento, se tomaron los resultados experimentales obtenidos en los

experimentos 2, 3 y 4, procedindose a la construccin de las curvas conversin-tiempo para las tres

concentraciones iniciales de la lipasa empleada. En este caso los niveles de conversin obtenidos son

tambin inferiores a los alcanzados en el sistema cido oleico-isopropanol; en cambio, el aumento

producido entre los tres niveles de concentracin de lipasa, son ms uniformes. Como se desprende de

la figura 6.36, la conversin en palmitato de isopropilo crece alrededor de un 10- 12% al pasar de un

nivel de concentracin de catalizador a otro. Por tanto, la concentracin inicial de catalizador ejerce

una influencia positiva, en cuanto al nivel de conversin que se desea obtener.

La figura 6.37, presenta la variacin de la conversin en funcin de la concentracin de

catalizador aadida al medio de reaccin al comienzo de la misma. En ella slo se consideran datos

a partir de la primera media hora de reaccin, a partir de la cual puede considerarse que se ha

alcanzado el estado estacionario. Dichas variaciones revelan que la dependencia de la velocidad de

reaccin con la concentracin de catalizador puede considerarse de primer orden con respecto a esta

ltima, al menos dentro del intervalo fijado para las condiciones de operacin en esta memoria, lo que

resulta de ayuda para el posterior modelado cintico del sistema de reaccin.


262 Resultados Experimentales

Comvcrmiom de acido
1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
ea
0.2
Os

0 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo (mis)
PSalbac de hoproplio
T: 70C 1, 7IOasH Aa/Al: 1/1

Figura 6.36. Sntesis de Palmitato de Isopropilo. Influencia de la concentracin de catalizador.

Coaveruios de asido

027

a-- tsemia
0.I -- tdosim
-* t..ISOula
0.2
2 8 4 5 6 7 8
Catallador <*)
PeleleS. da hopeplie
T YSC Pi 7lOumHg Aa/Al: 1/1

Figura 6.37. Variacin de la conversin con la concentracin de catalizador. P: llOmmHg


Sntesis de Palmitato de Isopropilo 263

6.5.3 INFLUENCIA DE LA RELACION MOLAR ACIDO/ALCOHOL

De cara a describir el comportamiento del sistema frente a la variacin de la concentracin de

reactivos, se planific el segundo grupo de experimentos, tomando como variable independiente la

relacin molar cido palmtico/alcohol isopropilico. Para ello, se consideraron tres series de

experimentos en funcin de cada una de las temperaturas fijadas al comienzo de este estudio,

mantenindose constantes para las tres series tanto la presin de operacin, 7lOmmHg (atmosfrica),

como la concentracin inicial de catalizador en el punto medio del intervalo (5%).

Tabla 6.15. Expeiinientos cinticos para la sintesis de Palmitato de Isopropilo.

NUMERO DE TEMPERATURA CATAL. PRESION It MOLAR


EXPERIMENTO (C) (%) (mmllg) ACIDO/ALCOHOL_1

IPP6 65 5 710 0.1


IPP7 65 5 710 0.143
IPPS 65 5 710 0.2

IPP9 65 5 710 5
IPPIO 65 5 710 7
iPPII 65 5 710 10

IPPI2 70 5 710 0.1


IPPI3 70 5 710 0.143
IPPI4 70 5 710 0.2
IPP15 70 5 710 5
IPPI6 70 5 710 7

llP17 70 5 710 10
IPPI8 75 5 710 0.1
IPP19 75 5 710 0.143
LPP2O 75 5 710 0.2
IPP21 75 5 710 5
1PP22 75 5 710 7
1PP23 75 5 710 10
264 Resultados Experimentales

En la tabla 6.15 se detallan las condiciones de operacin fijadas al inicio de cada experimento.

Dichos experimentos, junto con los correspondientes realizados con una relacin equimolecular de

reactivos, sern la base del estudio cintico, de cara a la obtencin de algunos de los parmetros

imprescindibles tanto para el modelado cintico como para el diseo del reactor.

La representacin grfica de los datos velocidad de reaccin frente a concentracin del reactivo

en defecto nos revela la influencia ejercida por el exceso del otro reactivo. As, se llevaron a cabo las

mencionadas representaciones de velocidad de reaccin frente al nmero de moles de cido palmtico,

variando en cada caso el ndmero de moles de isopropanol adicionado en exceso, para conocer la

influencia del mismo, mientras que las representaciones de la velocidad de reaccin frente al nmero

de moles de isopropanol en defecto, nos indica la influencia del exceso de cido palmtico adicionado

en exceso.

En la figura 6.38, se muestran las curvas correspondientes a la reaccin de formacin de

palmitato de isopropio, cuando se trabaja en exceso de isopropanol a 750C. En ella puede observarse
un efecto inhibidor por parte del isopropanol, dado que la conversin de cido palmtico en palmitato

de isopropio disminuye al aumentar la concentracin de isopropanol adicionado en exceso,

aprecindose este efecto de forma ms notoria cuando se trabaja con una relacin molar cido/alcohol

1/7.

En la figura 6.39, en la que se muestran las curvas en exceso de cido palmtico a 750C, la

situacin es similar. La velocidad de reaccin aumenta con un exceso de cido palmtico para tiempos

cortos de reaccin, pero cuando el nmero de moles de isopropanol est por debajo de los 0.04 moles,

se produce una disminucin drstica de la velocidad de reaccin para una relacin molar cido/alcohol

de 10:1, lo que se debe a un efecto inhibidor por parte del cido palmtico.
Sntesis de Palmitato de Isopropilo 265

0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3


NUMERO DE MOLES DE CIDO (mal>
PALM1T&TO ilE ISOPEOPILO
P: nO maSa Catalizador liZ T: VOt

Figura 6.38. Sntesis de Palimitato de Isopropio. Influencia de la relacin molar cido/alcohol.

Figura 6.39. Sntesis de Paimitato de Isopropio. Estudio de la relacin molar cido/alcohol.


266 Resultados Experimentales

6.5.4 ESTUDIO DE LA CONCENTRACION DE PRODUCTOS EN EL MEDIO DE REACCION

De acuerdo con la metodologa empleada en este trabajo se llevaron a cabo experimentos

adicionales, con el fin de confinnar el comportamiento esperado por parte del sistema frente a la

adicin de un exceso de palmitato de isopropilo y agua, para una relacin equimolecular de cido y

alcohol. La tabla 6.16 recoge las condiciones de operacin para dichos experimentos.

Tabla 6.16. Experimentos con adicin de pmdnctos para la sntesis de Palmitato de Isopropilo.

NUMERO DE TEMPERATURA CA TAL. PRESION N1


EXPERIMENTO (C) (%) (mmHg) (Moles) (Moles)_1

1PP24 70 5 710 0.118 0


1PP25 70 5 710 0.354 0
1PP26 70 5 710 0 0.118
1PP27 70 5 710 0 0.354

De nuevo, se representaron grficamente los datos conversin-tiempo en palmitato de

isopropio, comparndolos con los experimentos sin adicin de productos. Los resultados obtenidos

inducen a pensar que la adicin de cualquiera de los dos productos de reaccin da lugar a un efecto

negativo, en cuanto a la obtencin del producto final se refiere. As, en la figura 6.40 se muestran las

curvas comparativas a 700<2 y presin atmosfrica, operando en condiciones de exceso de palmitato de

isopropilo. En ella se observa la clara disminucin de la conversin, frente a los niveles obtenidos para

una adicin de ster; traducindose esta en ms de un 25% para la primera adicin de ster, 0.118

moles, (23.6% en moles de la mezcla total de reaccin) y en un 12% ms en el caso de la segunda

adicin, 0.354 moles (70.8% en moles de la mezcla total de reaccin). En cambio, la figura 6.41

presenta las curvas correspondientes a un exceso de agua aadido al medio de reaccin; siendo el

efecto observado anlogo al anterior, slo que, en este caso, la primera adicin de agua produce un

descenso en la conversin cercano al 20%, mientras que en la segunda adicin el descenso se

incrementa en un 15% ms.


Sntesis de Palmitato de Isopropilo 267

Convermion de acudo
1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1

a 50 100 150
Tiempo <mm)
Palmitato de leopropilo
P: 7lOmmI4g Catalizador: 5% T: 700

Figura 6.40. Sntesis de Palntato de Isopropio. Estudio de la concentracin inicial de ster.

ConverSan de Baldo
1

0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1

0 60 100 150
Tiempo (mm)
Palmitato de Imoproplio
P: TlOmmI4g Catalizador: 6% T: 70C

Figura 6.41. Sntesis de Palmitato de Isopropilo. Estudio de la concentracin inicial de agua.


268 Resultados Experimentales

6.6 SINTESIS DE 2-METH4-BUTIRATO DE OLEILO

El ltimo sistema de esterificacin estudiado est constituido por cido 2-med-butrico y

alcohol oleico, en presencia del catalizador comercial Novozym 435, constituido por una lipasa de

Candida anzarezica. El planteamiento del estudio de este sistema se llev a cabo de manera anloga al

de los tres primeros sistemas estudiados, ya que se diferencia con los dos ltimos en la posibilidad de

trabajar en condiciones de presin reducida, lo que permite la irreversibilidad del sistema.

Atendiendo a esta posibilidad, el primer grupo de experimentos, destinado al estudio del

comportamiento del sistema segn las condiciones de operacin, se dividi en dos subgrupos, en el

primero de ellos la jresin de operacin se fij en GOmmHg, mientras que en el segundo se trabaj

a presin atmosfrica. Para cada uno de ellos se realizaron tres series de experimentos, segn la

temperatura de operacin, como se recoge en la tabla 6.16.

Tabla 6.16. Experimentos realizados pan conocerla influencia de las variables de operacin sobre
la reaccin de sntesis de 2-Metil-Butinto de Oleilo.

TEMPERATURA PRESION CATALIZADOR1


0 EXPERIMENTO (0C) (mmHg) (%)
N
MBOI 60 60 5
MBO2 70 60 3
MBO3 70 60 5
MBO4 70 60 7
MBO5 80 60 5

MBO6 60 710 5
MBO7 70 710 3
MBO8 70 710 5
MBO9 70 710 7
MEOlO 80 710 5
Sntesis de 2-Med-Butirato de Oleilo 269

6.6.1 INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA

La representacin grfica de los datos conversin-tiempo de los diferentes experimentos,

tomando como variable independiente la temperatura de reaccin, permiti conocer la influencia de la

misma sobre el nivel de conversin obtenido. Tanto en condiciones de reversibilidad como de

irreversibilidad, los resultados obtenidos demuestran que un amnento de la temperatura da lugar a un

efecto positivo, en cuanto al nivel de conversin se refiere. En la figura 6.42 se muestran, a modo de

ejemplo, las curvas obtenidas para el nivel superior de presin, 7lOmmHg, operando en el nivel medio

para la concentracin inicial de catalizador, 5% en peso de la masa total de reaccin.

Conversion dc alcohol
A
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1

0 20 40 60 80 100 120 140


Tlcmpo (sin)
2-MEflL-BUflRATO DE OLEILO
P: 710 mmflg CatalIzador: 5* AcIAI:1/1

Figura 6.42. Influencia de la temperatura en la sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleilo.

Dichos resultados demuestran que la variacin de la conversin con la temperatura es siempre

positiva y se produce para cualquier tiempo de reaccin, dentro de los lmites impuestos en esta
270 Resultados Experimentales

memoria para las condiciones de operacin. Como puede observarse para un tiempo de reaccin

correspondiente a dos horas, al pasar del nivel inferior de temperatura al nivel medio, el aumento

producido en la conversin es de un 11%, mientras que cuando se pasa del nivel medio al nivel

superior de temperatura, el incremento es tan solo de un 7%, lo que confirma el efecto positivo de la

temperatura, favorecindose la conversin cuando se opera en el nivel superior del intervalo.

6.6.2 INFLUENCIA DE LA PRESION

De la misma manera, se llev a cabo el estudio para conocer la influencia ejercida por parte

de la presin de trabajo. En este caso se tomaron los experimentos realizados con una concentracin

inicial de catalizador de un 5% en peso, con una relacin equimolecular de los reactivos de partida.

Los resultados obtenidos para las tres temperaturas de operacin probadas fueron similares,

aprecindose un aumento de la conversin cuando la reaccin se lleva a cabo en condiciones de

irreversibilidad; lo que supone un efectonegativo por parte de la presin de trabajo sobre la conversin

en 2-metil-butirato de oleilo.

En la figura 6.43 se muestran los resultados obtenidos operando a 700<2 de temperatura.

Comparando las dos curvas obtenidas se observa que, si bien para tiempos cortos de reaccin no existe

una diferencia apreciable desde el punto de vista de la conversin, a partir de la primera media hora

de reaccin el efecto negativo de la presin se hace ms notable, llegando a ser un ligero aumento de

la conversin a las dos horas de reaccin, cuando se opera a una presin de 6OmmHg, inferior a la

atmosfrica, lo que indica la relativa ixffluencia de la presin de operacin.

El hecho de que para tiempos conos de reaccin no se aprecie claramente el efecto de la

presin, puede deberse a que hasta la media hora de reaccin no se haya alcanzado el estado

estacionario para la misma.


Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleilo 271

Convenios de alcohol
1
0.9
0.U
0.7
o.
0.5
0.4
0.8
0.2
0.1

20 40 60 80 100 120 140


Tiempo (mis)
2-MBflL-BUTIESO DE OLBILO
Tu WC CatalIsder: 5* Aa/Al: 1/1

Figura 6.43. Influencia de la presin en la sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleilo.

6.6.3 INFLUENCIA DE LA CONCENTRACION INICIAL DE CATALIZADOR

Continuando con el estudio de las variables de operacin sobre el sistema objeto de estudio,

se procedi a construir las curvas tiempo-conversin, tomando como variable independiente la

concentracin inicial de catalizador y manteniendo constantes las dems variables de operacin. En la

figura 6.44 se muestran las curvas obtenidas para una temperatura de 700<2 y una presin de OmmHg,

aunque para presin atmosfrica se obtienen unos resultados anlogos.

De dicha representacin se desprende que la concentracin inicial de catalizador influye

positivamente sobre el proceso de esterificacin, desde el punto de vista de la conversin. As, para

un tiempo de reaccin de dos horas, se observa que el aumento producido en la conversin al pasar

del nivel inferior al nivel intermedio para la concentracin de catalizador es de un 5%, observndose
272 Resultados Experimentales

un aumento similar cuando se pasa del nivel medio al nivel superior; lo que indica que el aumento

producido puede considerarse lineal dentro del intervalo fijado para la concentracin de catalizador.

Coamuiou de alcohol
1
0.9
0.8
0.7
o.
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1

0 20 40 60 80 1W> 120 140


Tiempo (ma)
2-MEflL.UtlTIEATO DE OLE!LO
Ti WC Pi OmEg Aa/Al: 1)1

Figura 6.44. Influencia de la concentracin de catalizador en la sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleilo.

Por tanto, puede suponerse que la relacin existente entre la velocidad de reaccin y la

concentracin inicial de lipasa inmovilizada es de primer orden con respecto a esta ltima, dentro del

intervalo fijado para estas condiciones de operacin. Este hecho se ve avalado por los grficos

resultantes de representar la conversin de alcohol oleico en ster frente a la concentracin inicial de

catalizador para diferentes tiempos de reaccin. Las figuras 6.45 y 6.46 muestran las representaciones

a 700<2 de temperatura y en condiciones de presin reducida y presin atmosfrica, respectivamente.

En ambos casos se ha tomado como tiempo de reaccin infinmo, el correspondiente a la primera media

hora, ya que a partir de ese tiempo de reaccin puede considerarse que ya se ha alcanzado el estado

estacionario.
Sntesis de 2-MetihButirato de Oleilo 273

Converuion de alcohol
0.9

-~- tSOmIm

0.5 - -~- tSOIu

* tl2OaIu
0.4
2 3 4 5 7 U
Catalizador (%)
2-MEflL-UUflRATO DE
T: ?OC 1: SuaH Ac/Al: 1/1

Figura 6.22. Variacin de la conversin con la concentracin de catalizador. P: 6OmmHg.

Coanrsloa de alcohol

o..

0.7

0.6

0.5

0.4
2 a 4 5 6 7 8
Catalizador <%)
2-MBTIL-EUflEflO DE OLEILO
T: 70C Pa VIOuuH As/Al: 111

Figura 6.23. Variacin de la conversin con la concentracin de catalizador. P: 7lOmmHg


274 Resultados Experimentales

6.6.4 INFLUENCIA DE LA RELACION MOLAR ACIDO/ALCOHOL

Siguiendo la metodologa descrita a lo largo de este captulo se procedi a realizar un segundo

grupo de experimentos para evaluar el comportamiento del proceso frente a la variacin de la

concentracin de las especies qumicas en el medio de reaccin. En la tabla 6.17 se recogen las

condiciones de operacin en las que se llevaron a cabo los experimentos, que permitieron el posterior

anlisis cintico del sistema propuesto en este apanado.

Tabla 6.17. Experimentos cinticos pan la sntesis de 2-Metil-Budrato de Oleilo.

NUMERO DE TEMPERATURA CATAL. PRESION R. MOLAR


EXPERIMENTO_1 C>C) (%) (ninuflg) ACIDO/ALCOHOL

MBO1I 60 5 60 0.1
MBO12 60 5 60 0.143
MBO13 60 5 60 0.2
MBOI4 60 5 60 5
MBO1S 60 5 60 7
M8016 60 5 60 10
MBO17 70 5 60 0.1
MBO18 70 5 60 0.143
MBO19 70 5 60 0.2

MBO2O 70 5 60 5
MBO2I 70 5 60 7
MB022 70 5 60 10
MB023 80 5 60 0.1
MB024 80 5 60 0.143
MB025 80 5 60 0.2
MB026 80 5 60 5
MB027 80 5 60 7
MB028 80 5 60 10
Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleilo 275

La representacin de los datos concentracin de reactivo en defecto frente a velocidad de

reaccin para cada una de las temperaturas fijadas, permiti analizar el comportamiento del sistema

frente a la variacin de la relacin molar de reactivos. Para cada una de las series determinadas por

la temperatura de reaccin, se llevaron a cabo dos conjuntos de representaciones dependiendo del

reactivo que se encuentre en exceso.

Como ejemplo, se muestran las representaciones correspondientes a una temperatura de 600C,


una concentracin inicial de catalizador del 5% y una presin de operacin de 6OmmHg. La primera

(figura 6.47) muestra el estudio del comportamiento de la velocidad de reaccin frente al nmero de

moles de cido 2-metil-butanoico, cuando se opera con diferentes concentraciones de alcohol oleico

en exceso. La segunda representacin (figura 6.48) se realiz para conocer como afecta un exceso de

la concentracin de cido 2-metil-butrico en la evolucin de la velocidad de reaccin en funcin del

nmero de moles de alcohol oleico presentes en el medio de reaccin. En ambos casos, el nmero total

de moles presentes en la mezcla de reaccin se mantuvo en 0.5 moles.

Como puede apreciarse en los dos grficos, la evolucin de la velocidad de reaccin frente a

la concentracin del reactivo en defecto sigue un camino ascendente al aumentar la concentracin del

reactivo en exceso, para tiempos de reaccin cortos. Sin embargo, sigue teniendo lugar el mismo

fenmeno observado en los sistemas ya estudiados. As, cuando se trabaja en exceso de alcohol se

observa que para concentraciones cido inferiores a las correspondientes a 0.08 moles, la disminucin

de la velocidad de reaccin es mucho ms rpida para una relacin molar cido/alcohol 1:7, que para

una 1:10, lo que indica un efecto inhibidor de la especie cataltica por parte del alcohol.

La misma situacin se produce cuando la concentracin de alcohol oleico se sita por debajo

de O.lmoles, al trabajar con un exceso, de cido, lo que se traduce en una inhibicin de la lipasa con

respecto al cido 2-metil-butrico para tiempos largos de reaccin.


276 Resultados Experimentales

VELOCIDAD DE REACCION (mmol/mln)


3.5

2.5

1.5

0.5

0 tOS 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3


NUMERO DE MOLES DE CIDO (mal)
2METU.EIJTIEATO DE CUltO
P: BO mnlg Catalizador 5% T: 80C

Figura 6.47. Sntesis de 2-metil-butirato de oleilo. Influencia de la relacin molar cido/alcohol.

VELOCIDAD DE REACCION (mmol/min)

2.5

0.5

0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3


NUMERO DE MOLES DE ALCOHOL (mol>
2-METIL-BIJTIEATO DE OLEILO
P: 60 mnmHg Catalizador: 5% T: 60C

Figura 6.48. Sntesis de 2-metil-butirato de oleilo. Influencia de la relacin molar cido/alcohol.


Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleilo 277

6.6.5 ESTUDIO DE LA CONCENTRACION DE PRODUCTOS EN EL MEDIO DE REACCION

Para finalizar con el estudio de la influencia ejercida por las especies qumicas presentes en

el medio de reaccin se realizaron cuatro experimentos ms, esta vez en exceso de los productos de

reaccin correspondientes a dicho proceso de esterificacin. Las condiciones de operacin en las que

se llevaron a cabo dichos experimentos son las que se indican en la tabla 6.18.

Tabla 6.18. Experimentos con adicin de productos para la sntesis de 2-metil-butirato de odIo.

NUMERO DE TEMPERATURA CATAL. PRiESION N~


0 N1
EXPERIMENTO (0C) (%) (mmHg)
(Moles) (Mbles)

MB029 70 5 60 0.118 0
MBO3O 70 5 60 0.354 0
MBO3l 70 5 710 0 0.118
MB032 70 5 710 0 0.354

Teniendo en cuenta las reacciones realizadas en las mismas condiciones de operacin pero en

ausencia de adicin de productos, se representaron las correspondientes curvas tiempo-conversin en

2-metil-butirato de oleio, tomando como variable independiente el nmero de moles de la especie

adicionada en exceso en cada experimento. En las figuras 6.49 y 6.50 pueden observarse las curvas de
0C y con un
los experimentos con adicin de ster y de agua, respectivamente; ambas realizadas a 70
5% de catalizador, manteniendo una relacin equimolecular cido/alcohol.

Comopuede observarse, los resultados obtenidos son anlogos a los de los sistemas anteriores.

La cada en la conversin al aumentar la concentracin del producto en cuestin revela, en ambos

casos, la aparicin de un fenmeno de inhibicin cataltica por parte tanto del 2-metil-butirato de oleilo

como del agua presentes en el medio de reaccin cuando estos se encuentran en exceso.
278 Resultados Experimentales

Conversion de alcohol
1
0.9

0.8
0.7

0.6
0.6
0.4
0.3
0.2
0.1

O 50 loo lOO
Tiempo (mm)
Z-METfl~-BUTIRATO DE OLEILO
P GonumHg Catatlzadon 5% T: 70C

Figura 6.49. Sntesis de 2-metAl-butirato de oleio. Estudio de la concentracin de ster.

Conversion de alcobol
1
0.9

0.8
0.7
0.6
0.5

0.4
0.3
0.2
0.1

o 60 100 150
Tiempo <mm)
2-METIL-BUTIRATO DE OLEILO
P TlOmmHg CatalIzador: 5% T: 70C

Figura 6.50. Sntesis de 2-metil-butirato de oleio. Estudio de la concentracin de agua.


7. MODELADO CINETICO
Modelado Cintico 281

A fin de completar el estudio planteado en esta memoria se decidi llevar a cabo un anlisis

cintico de los steres objeto de estudio. Para ello se tomaron como base los conceptos descritos en

el captulo dos de este trabajo, los cuales penniten suponer mecanismos de reaccin que conducen al

desarrollo de modelos cinticos que penniten describir el comportamiento del sistema en trminos de

evolucin de la concentracin de las especies presentes en el medio de reaccin en funcin del tiempo

de reaccin transcurrido, lo que supone una informacin imprescindible para el posterior diseo del

reactor qumico, as como para su implantacin a escala industrial.

Naturalmente, el mecanismo de reaccin a plantear debe considerar la presencia de dos

reactivos, cido y alcohol grasos, y dos productos de reaccin, ster y agua. Por tanto estar dentro del

denominado grupo de sistemas multirreactantes y, ms concretamente, el sistema responder a un

mecanismo de reaccin Bi-Bi. Como se ha visto en el captulo dos, la deduccin del mecanismo de

reaccin puede llevarse a cabo segn tres posibles consideraciones o metodologas.

La primera de ellas supone un mecanismo de reaccin al azar, en cuanto a la formacin de

complejos enzimna-sustrato y liberacin de productos de reaccin. Esta suposicin no es vlidapara un


282 Modelado Cintico

sistema de esterificacin enzimtico, puesto que los estudios encontrados en la bibliografa demuestran

que para que la reaccin tenga lugar es necesaria la formacin del complejo enzima-cido graso, ya

que la actividad de las lipasas se justifica desde la formacin de complejos con enlaces acil-enzima.

En caso contrario, la formacin del complejo enzima-alcohol es viable, pero el cido graso slo sera

capaz de desplazar al alcohol para dar lugar a la formacin del complejo enzima-cido. Es decir, que

desde el punto de vista de la reaccin qumica, el complejo enzima-alcohol es una especie inactiva de

cara a la formacin de productos de esterificacin, siendo viable la reaccin, exclusivamente cuando

el complejo enzinia-sustrato esta constituido por la presencia de enlaces acil-enzima, lo que en el caso

de una reaccin de esterificacin directa slo es posible cuando el complejo esta constituido por la

especie enzima-cido graso, que es la forma activa para que se de la reaccin.

Segn este razonamiento, la nica explicacin posible para deducir el mecanismo de reaccin

pasa por la suposicin de considerar como primer paso del mismo la formacin de la especie

nzimtica activa, el complejo enzima-cido. Esto es nicamente posible considerando bien un

mecanismo Ping-Pong, bien un mecanismo de Reaccin ordenado.

La consideracin de un posible mecanismo Ping-Pong pasa por la suposicin de que, si bien

la primera etapa del mecanismo de reaccin vendra dada por la formacin del complejo enzima-cido,

la segunda etapa del mecanismo dara lugar a la transformacin del complejo en su forma activa. La

tercera etapa consistira en la liberacin de una molcula de agua, seguida de la cuarta etapa que estara

constituida por la adicin del alcohol al complejo activo obtenido en el paso anterior. La quinta etapa

consistira en la transformacin de este ltimo complejo ternario en otro ms inestable, que en la sexta

etapa liberara la molcula de ster formada, quedando la enzima en su forma libre, dispuesta para

comenzar, de nuevo, el ciclo; lo que supondra una etapa de liberacin de producto formado entre dos

etapas de adicin de reactivos, que es el tpico mecanismo secuencia] que caracteriza a un mecanismo

del tipo Ping-Pong.


Modelado Cintico 283

Si bien este mecanismo ha sido adoptado por algunos autores para describir este tipo de

sistemas, cabe resear que la representacin grfica de la ecuacin de velocidad linealizada debera dar

lugar a la obtencin de rectas paralelas cuando se trabaja en exceso de uno de los reactivos y se toma

como variable independiente la concentracin de este ltimo.

Sin embargo, el efecto observado para los sistemas planteados en esta memoria, cuando se

trabaja en exceso de uno de los reactivos es el siguiente: al representar la inversa de la concentracin

del reactivo en defecto frente a lainversa de la velocidad de reaccin para diferentes concentraciones

fijadas del reactivo en exceso, se obtienen rectas aparentemente paralelas, caractersticas de un

mecanismo Ping-Pong. No obstante, si se prolongan estas rectas, se puede observar que todas ellas

convergen hacia un mismo punto, definido por la inversa negativa de la constante de inhibicin

enzimtica con respecto del reactivo que se encuentra en defecto en el medio de reaccin. Este hecho

es, precisamente, el que caracteriza a los sistemas que siguen un mecanismo de reaccin Ordenado.

Segn esto, el mecanismo de reaccin Ping-Pong queda desechado para describir el comportamiento

de los sistemas aqu propuestos, siendo ms adecuado considerar, en nuestro caso, un mecanismo

Ordenado que involucre dos reactivos y dos productos en el desarrollo de la reaccin, al menos para

las lipasas empleadas como sistema cataltico en esta memona.

Teniendo en cuenta este razonamiento, el mecanismo sencillo se correspondera con un

mecanismo de reaccin ordenada, descrito en el captulo dos de esta memoria, a partir del cual pueden

deducirse, mediante el mtodo de King-Altman, las correspondientes expresiones para las diferentes

especies enzimticas involucradas en el medio de reaccin (ver ecuacin [2.11] del captulo dos), y a

partir de ellas obtener el modelo cintico sencillo que describe la velocidad de reaccin en funcin de

la concentracin de los dos reactivos de partida y los dos productos finales (ecuacin [2.121 del

captulo dos), teniendo en cuenta todas y cada una de las etapas que constituyen el sistema de

esterificacin enzimtico.
284 Modelado Cintico

Tomando como referencia la bibliografa encontrada, cl primer reactivo involucrado en el

mecanismo de reaccin propuesto sera el cido graso dando lugar a la formacin del complejo activo

enzima-cido; a continuacin se adicionara el alcohol para formar el complejo ternario alcohol-enzima-

cido. La tercera etapa del mecanismo sera en la que se produce la verdadera transformacin de las

especies qumicas, consistiendo en la transformacin del complejo obtenido en la etapa anterior en el

resultante ster-enzima-agua. La siguiente etapa vendra dada por una liberacin del ster formado,

mientras que la ltima consistida en una liberacin del agua.

Sin embargo, a estas etapas que constituyen el mecanismo de reaccin simple, habra que

aadir las correspondientes etapas colaterales debidas a la formacin de complejos de inhibicin tanto

con la especie enzimtica libre como con los otros complejos involucrados .en el mecanismo principal.

Las etapas de inhibicin ms frecuentes en este tipo de reacciones vienen dadas por la

formacin de complejos binarios con la enzima libre por parte tanto del alcohol como del ster

presentes en el medio de reaccin; as como la formacin de complejos ternarios inactivos por parte

del cido graso o el ster con el complejo enzima-cido.

Por tanto, la inhibicin va a venir dada tanto por reactivos como por productos, siendo el tipo

de inhibicin ms frecuente la denominada inhibicin competitiva En unos casos se compite por la

formacin de complejo con la lipasa libre y en otros la competencia viene dada por la formacin de

complejos temarios con el complejo ms activo, enzima-cido.

Teniendo esto en cuenta, el mecanismo general para este tipo de reacciones constara de dos

grupos de etapas, el primero constituido por las etapas principales de reaccin y un segundo grupo de

etapas de inhibicin, como se muestra a continuacin:


Modelado Cintico 285

Etapas principales:

E + Ac EAc KAC
EAc + Al EA cAl KlilA) KiAl
EA cAl EEsW Keq (ZAC,C
EEsW EW + Es
EW E + W R~ R?1~

Etapas de Inhibicin:

E+Al#.EAl
E~ Es~EEs <lEs
1
EAc + Ac EAcAC
II
EAC + Es LAcEs

Teniendo en cuenta el mecanismo global que considera todas las etapas involucradas en el

esquema de reaccin, se dedujo la ecuacin general completa para las reacciones de esterificacin

objeto dc estudio. Dicha deduccin se llev a cabo partiendo de las etapas de reaccin principales para,

despus, incluir los trminos debidos a las etapas de inhibicin. El esquema principal para la reaccin

ser el siguiente:

E + Ac EM

EW -SE +W
lcq + +
Es

kslV. 3
EAcAI .h. EEsW

Aplicando el mtodo de King-Altman, la figura sencilla a la que corresponde dicho esquema

de reaccin ser la que se muestra a continuacin:


286 Modelado Cintico

k1 NAC

k4 k4Nw k2NM

r r
k..3 NES EEsW #EAcAI

Segn dicho esquema, la concentracin total de enzima presente en el medio de reaccin viene

dada por la ecuacin [7.1]:

ETOTAL = E + EAC + LAcAJ + EWES + EW [7.1]

Cada una de las especies enzimticas se deducen de la figura de King-Altman, segn la

ecuacin [7.2]:

E - k4k1k2 +k 2k 314)< k2NAIk4k2 +k3&k1


EWTAL

EAc - k4klNA~2+klNA2k3N~+k4NftK2k3N~+k3k4klNAc
E~rAL

EAcAl +EWEs - k4klNA)C2NAJ+klNAc<&3NE)C2NM+k2NAIk~4Np,1%NEs+klk4Nwk3NEs

____ - k2k<k4NW+klNA)c3k2NM +k2NAIk 4N~k3 +k1k3k4N~


[7.2]

Segn esto, la suma de todas las especies enzimticas ser:


Modelado Cintico 287

= (k4k1k2 +k3k4k1) + (k4k1k2 +k3k4kl)NA + (k2k4k)NAI +

+ (k2k3k1)N~ + (k2k1k4+k1k3k4)N~ + (k4k1Ayk1k3k4)N~fl~1 +

+ (kIk2k3)NACN~ + (k2&4k3)NNW +
[7.3]
+ (klk3k.~)NACN/sJ~ + (tk4k3)NMN&NW

Por otra parte, la ecuacin de velocidad de desaparicin de cido graso, vendr dada por la

ecuacin [7.4]:

(rA) = kI.E.NAC k1.EAc [7.4]

Donde:

ICI.E.NAC = k1k IkZNAC +k1k 2k 3k NE~NAC+kltk}c4NY,+ktk k N

k4.Fc = k 1k4k1k 2NC+k&lkk VMNE,+&l~2~3k 4NaNW+klkk.k4NAC [7.5]

Sustituyendo en la ecuacin [7.4] y multiplicando y dividiendo dicha expresin por la

concentracin total de enzima:

(rC) =
nUNCNI - n#TFSNW
[7.6]

Siendo:

nl = E~.Mktk,ksk4

= E~.Lklk.Jq.sk4

nl [7.7]
t4

Multiplicando y dividiendo por n1, la ecuacin de velocidad quedar:


288 Modelado Cintico

NACN - NEftW
(rAC) = _________________
ETO TAL [7.8]
nl

Por otra parte, las velocidades iniciales vendran dadas por las expresiones [7.9] para la

reaccin directa, con concentraciones de agua y ster igual a cero, y (7.10] para la reaccin inversa,

considerando la concentracin de cido y alcohol igual a cero:

ti
k1k,k4+k11c2k3

d E~Lk3k4
(~re)i,, = _________ [7.9]
k3 +k4

n2
(rC)~ = d(rAC)

dNE?NW k2k3k4+k1k3k4

E~.AL&lk2
[7.10]
k~1 +k2

Multiplicando y dividiendo la ecuacin de velocidad de reaccin por el producto de la

velocidad mxima directa y la velocidad mxima inversa se llega a la ecuacin [7.11].


NEIVW

(-rAC)~(-rC)~,(NACNAL - K

= ( r)mn(r)mn 04
[7.11]

Si ahora sustituimos el trmino correspondiente a la concentracin total de enzima presente en

el medio de reaccin como la suma de concentraciones de todas las especies en las que est presente

la enzima, bien en su forma de enzima libre, bien formando complejos binarios o temarios con otras

especies se llega a la ecuacin [7.12]:


Modelado Cintico 289

(rAC),.
8X (rAC)~X(NAftAl

<rAC) t~K 2AC 1<~7A1 + (rAc) ~ Ir~I NAC + (rAC) t~K ~AC NAl +

<rAC) ,g.~xK
5N~5 <rAC) ~KmNw
+ + +

(rAC) ~XKnMNAftES
+ (XAC> r~IaXNACNAI + + [7.12]
KeqKl

(rAC) 4~axKmACNANw
+ (rAC) ~.XNES.NW + +
Keq 1< 1%

+ <YAc> tRaXNACNAINES + (rAC> LNMNESI~TW


K. ES KjK0q

Donde:

k3k4 = k4 (k2+k3
k1(k3+k4)
k2(k3+k4)

k1k2 (k1k2k4+k1k3k4
kmEs =
k1k2k4<k1+k2)

k [7.13]
k.:Ac =~j: kAI 1<2

- 1<3+1<4 1< -
lcr
4

El siguiente paso para completar la ecuacin de velocidad ser tener en cuenta las etapas de

inhibicin debidas a la formacin de complejos binarios y temarios tanto con reactivos como con

productos de reaccin. Dichas etapas se consideran de inhibicin competitiva.

En el caso de la etapa de inhibicin con respecto al alcohol, se produce la formacin del

complejo enzima-alcohol, por lo que la ser necesario introducir en la ecuacin de velocidad un nuevo
290 Modelado Cintico

trmino de resistencia que se suman al denominador de la ecuacin principal y que tienen en cuenta

la formacin de dicho complejo. Dicho trmino viene dado por la ecuacin [7.14].

= ( rAc),ax(KiAcKIn~41 + a4~NAJ . ~ [7.14]


<iAl

En cuanto a la inhibicin debida a la formacin del complejo ternario enzima-cido-cido, la

resistencia vendr dada por la ecuacin [7.15], trmino que habr que sumar al denominador de la

ecuacin principal:

= (rAc)rnnNAcK,n,~l. 1/ [7.15]
<IAC

Cuando la inhibicin se produce por formacin de complejos con el ster producto de reaccin,

pueden formarse dos tipos de complejos. Cuando el complejo es binario, enzima-ster, el trmino de

resistencia que hay que aadir al denominador de la ecuacin de velocidad, vendr dado por la

ecuacin [7.16]; mientras que si el complejo que se fonnaes temario, enzima-cido-ster, el trmino

de resistencia vendr dado por la ecuacin [7.17].

= ( rAC)Jfl,<(<IACI&t,.JI1 + KD..A~.NA)) . ~ [7.16]


<lEs

= < YAjrna.,c<n,.41NAC. 1~ .N~5 [7.17]

Donde las constantes de inhibicin respecto de cada una de las especies involucradas en cada

etapa, vendrn dadas por los trminos de la ecuacin [7.18].


Modelado Cintico 291

1<5
<6

1< [7.18]
1<
1<iEs -

Sustituyendo los trminos en la ecuacin principal y reorganizando los mismos se llega a la

expresin final que viene dada por la ecuacin [7.19]:

<rAC),
5X(rAC)fl.X (NACN4I NESNW

4aaxKtfrran <1 + (rAC)t~KffiN~C <1 +


NAC
Km
(XC) -r
KA,
+
ES
(rAC) L~KNNss
+ ( rAC)UflKJflNM(1 + N
-fi 4-
1<125 +

(rAC> ~XKI,,NW
+ + (rAC) ~NAftAI +

(rAC> AaKmNAO<NES +
+
KQI<J 1<eq

(rAC> ~XKmN)JNW
+ + (rAC> 4OXN
K 4CNAINES +
-fu

+ (rAC> LNAINESNW
KjK0q

[7.19]
292 Modelado Cintico

7.1 MODELADO DE LA SINTESIS DE OLEATO DE OLEIILO

Teniendo en cuenta que la reaccin de esterificacin de cido oleico con alcohol oleico puede

llevarse a cabo en condiciones termodinmicas opuestas, en cuanto a la reversibilidad del sistema se

refiere, dependiendo de la presin de operacin fijada, se procedi al estudio cintico para ambas

situaciones; ya que, si bien, el anlisis completo del sistema exige un estudio en condiciones de

reversibilidad, el anlisis en condiciones de irreversibilidad es mucho ms atractivo desde el punto de

vista industrial, puesto que el nivel de conversin alcanzado permite obtener un producto final con una

calidad superior.

Por otra parte, el estudio del sistema en condiciones de presin reducida simplifica bastante

el modelo cintico, facilitando as la resolucin del mismo y la obtencin de los parmetros cinticos,

que posteriormente pueden simplificar el tratamiento matemtico del modelo global en condiciones de

presin atmosfrica. Es por ello, que en primer lugar se estudiar el sistema en condiciones de

irreversibilidad o presin reducida, para despus considerar su comportamiento en condiciones de

reversibilidad o presin atmosfrica.

7.1.1 ESTUDIO DEL SISTEMA EN CONDICINES DE IRREVERSIBILIDAD

Cuando se fuerza al sistema a trabajar en condiciones de irreversibilidad, el mecanismo de

reaccin se ver modificado, puesto que la concentracin de agua presente en el medio valdr cero y,

por tanto, no cabe considerar condicin de equilibrio alguna en cuanto a las etapas que constituyen la

reaccin principal se refiere. En este caso el mecanismo de reaccin permanecer inalterable, en cuanto

a las etapas de inhibicin competitiva debidas a la formacin de complejos con respecto tanto a

reactivos como a productos se refiere; vindose modificadas las etapas de reaccin de la manera que

se indica a continuacin:
Modelado de la Sntesis de Oleato de Oleilo 293

Etapas de reaccin en condiciones de irreversibilidad:

E Ac . EAC
+ ~Krc KIAC
E.4c + Al RAcA.!
EA cAl -. E + Es + w <rAC) maz

Segn esto la ecuacin de velocidad de reaccin se ver modificada de la siguiente manera:

(rAC) = <YAc,) n,aXNAOWAI


41<m <~ + + KmN>.~(1 + /1
+
1
KB [7.20]
NE
+14 BI~ (1 4. ~
Kj4j King

Cuando se trabaja con exceso de cido o con exceso alcohol, la ecuacin se reduce todava ms

tomando la forma [7.21] para exceso de alcohol y la forma [7.23] para exceso de cido.

NAC
(rAC) =
4A1 [7.21]
Jc~(1+ + NAC(1 +
KmACNAI

Cuando la concentracin de alcohor en exceso tiende a infinito, la expresin se transforma en:

(rAC) ________
[7.22]
4Ac~Ac

Anlogamente para un exceso de cido:

(-ru) =
+ 1<mAC) 17.23]
.~4AI<1 +
NAO
294 Modelado Cintico

Cuando la concentracin de cido en exceso tiende a infinito, la expresin se transforma en:

PTAI
<DIAl + ~A1 Ff24]

A partir de los resultados experimentales obtenidos cuando se opera a una presin de 6OmmHg,

y teniendo en cuenta la forma matemtica de las ecuaciones obtenidas, se llevaron a cabo las

representaciones de los datos inversa de la concentracin del reactivo en defecto frente a la inversa de

la velocidad de reaccin, tomando como variable independiente la concentracin de reactivo en exceso.

Dichas representaciones se llevaron a cabo, fijando la concentracin inicial de catalizador en un 5%,

para las tres temperaturas de reaccin que determinan nuestro intervalo de operacin. Dichas

representaciones estn basadas en el bien conocido mtodo de las velocidades iniciales, que permite

obtener infonnacin sobre algunos de los parmetros cinticos que posteriormente conducirn a la

obtencin del modelo global que explica el comportamiento cintico del sistema.

En la figura 7.1 se muestra la representacin correspondiente a las reacciones llevadas a cabo

con un exceso de alcohol oleico, por tanto se representa la inversa de la velocidad de formacin de

oleato de oleio frente al nmero de moles de alcohol, para cada una de las relaciones molares fijadas,

siendo la temperatura de operacin de 700C y la presin de trabajo de 6OmmHg.

A partir de las pendientes de las rectas obtenidas, y de sus correspondientes ordenadas en el

origen, se procedi a construir los grficos que relacionan dichos parmetros frente a Ja inversa del

nmero de moles de alcohol oleico, que como puede observarse en las figuras 7.2 y 7.3, tambin dan

lugar a la obtencin de rectas, cuyos parmetros (ordenada en el origen y pendiente) relacionan tres

constantes caractersticas: velocidad mxima de reaccin, constante de Michaelis Menten con respecto

al cido oleico y constante del equilibrio de inhibicin del alcohol correspondiente a la segunda etapa

del mecanismo de reaccin.


Modelado de la Sntesis de Oleato de Oleilo 295

1/<rae)

0.8

0.4

0.2

o
6 o 6 ID 15 20
1/Nec
OLEATO DE OWU.O
P: BOmmEg Catallzaton St t 70C

Figura 7.1. Representacin 1/(-r0J frente a liNa,,. Exceso de alcohol oleico.

Orden.&. .1 Oripn P.ndi.at.


049 0.C

04

0.00 os

0.00 0.016

0.04 0.01
a 4 6 1 5 3 5
1/Ns 1/14.1
alo i SS = =0
t . 02 t WC - 0.t t WC

Figura 7.2. Ordenada en el origen frente a l/Nm. Figura 7.3. Pendiente frente a 1/Nt
296 Modelado Cintico

De manera anloga se llevaron a cabo las correspondientes representaciones. en el caso en que

se opera en condiciones de trabajo tales que el exceso de reactivo viene dado por la concentracin de

cido oleico. As en la figura 7.4, pueden observarse las tendencias que resultan de representar la

inversa de la velocidad de reaccin frente a la inversa del nmero de moles de alcohol oleico, siendo

dichas tendencias convergentes hacia un mismo punto; lo que demuestra que el mecanismo de reaccin

elegido es el adecuado.

Tomando como nuevos datos los cortes de las rectas con el eje de ordenadas y el valor de la

pendiente de cada una de las rectas obtenidas, se procedi a representar grficamente dichos valores

frente a la inversa del nmero de moles del reactivo en exceso, cido oleico (figuras 7.5 y 7.6). De las

ordenadas en el origen y pendientes obtenidas en estas dos nuevas rectas, se obtuvieron la relacin

entre algunas constantes cinticas: velocidad mxima de reaccin, constante de Michaelis Menten con

respecto al alcohol oleico y constante de inhibicin del cido oleico correspondiente al primer paso del

mecanismo principal de reaccin.

Dichos parmetros se obtuvieron, siguiendo el mismo mecanismo de representacin grfica y

clculo, para las tres temperaturas ensayadas. En la tabla 7.1, se resumen los valores de dichos

parmetros, en la que puede observarse que todos los parmetros disminuyen al aumentar la

temperatura, a excepcin de la velocidad mxima de reaccin.

Tabla 7.1. Parmetros cinticos experimentales para la sntesis de oleato de oleilo.

TEMPERATURA (-rAJ,,JW K~m


(0C) 1_(mol/min.g)_1 (nol) (mol) (mcl) (mol)

60 1.73x102 1.65x10 1.98xl0~ 5.02x103 1.09x103


70 2.66x10~ 1.l7x10~ 1,31x10 1.07x103 9.01x104
80 4.22xl0~2 i.OlxlO 8.51x102 7.01x104 4.84x104
Modelado de la Sntesis de Oleato de Oleilo 297

0.26 1/<ra!)

0.2

0.16

0.1

0.06

0 20
o 6 10 16
1/NS
OIZATO DE 0IBUO
P: GOmnEg Catllzadon 5% Ti WC

Figura 7.4. Representacin 1/(-r~) frente a l/N~. Exceso de cido oleico.

Pediste
0.~
0.011

0.045 os.

0.005 0.W-

0.S 0.004

0.015 -s
2 a 4 6 1 4 3 4 6
1/Nao 1/Nec
.5mw u
p ng V.jh.r a ~I4 52 WC

Figura 7.5. Ordenada en el origen frente a 1/Ns,,. Figura 73. Pendiente frente a 1/Nc.
298 Modelado Cintico

A fin de calcular los dems parmetros, se procedi a poner la ecuacin de velocidad en

funcin de la conversin en ster, considerando una relacin molar cido:alcohol 1:1. para, a

continuacin, poner la ecuacin cintica en su forma integral, llegando a obtener una expresin en

funcin del tiempo y de la conversin (ecuacin [7.25]).

ta .~FAXA+yLn 1 -~-8 (1XAC)


1
(1XA9 [7.25]

Donde:

flACKmA.2 K.CKII.~J
1E3 < rAC)
NACO < rAC> ,a~<

= NAco + 1<~ftACo _ K,.~NACO


(rAC) mat <iAl (.rAC) nax T<ES (rAC> mx

1<,~ + K,,.~ + K~ NACO - K~J>~, KLAYIT,>J


&~XAc> tDD2C (rAC) nmx <lEs (X~
4) <L, < rAC) ,~,, <L (r4~)

4tAl<iAc
8 = N~~o<IAC<mAl
(rAC) nax <%~ < ~XAc)

La solucin de esta ecuacin se llev a cabo comparando los datos tiempo-conversin mediante

regresin lineal mltiple y regresin no lineal por el mtodo de Marquardt. A partir de los valores de

los coeficiente obtenidos, y teniendo en cuenta los valores de las constantes calculados empleando el

mtodo grfico anteriormente expuesto, se plantearon cuatro sistemas de ecuaciones con cuatro

incgnitas, y solucionndolo se obtuvieron los correspondientes valores de los parmetros cinticos

restantes para completar el modelo cintico que describe el proceso en condiciones de irreversibilidad.

En la tabla 7.2, se muestran los valores de las constantes cinticas calculadas siguiendo este

procedimiento. En ella puede comprobarse que los parmetros calculados disminuyen su valor al

aumentar la temperatura de operacin, lo que demuestra que para temperaturas elevadas, dentro del
Modelado de la Sntesis de Oleato de Oleilo 299

intervalo propuesto, disminuye el fenmeno de la inhibicin debida a las especies involucradas en el

medio de reaccin.

Tabla 7.2. Parmetros cinticos calculados para la sntesis de oleato de oleilo.

TEMPERATURA KIEs K~~1

(0C) (mol) (mol) (mol) (mol)

60 2.91x102 7.29x104 l.30x103 1.OlxlW


70 1.80x102 6.01x104 l.03x103 8.52x104
80 9.OlxltY3 4.25x104 9.63x104 6.OSxlOt

7.1.2 ESTUDIO DEL SISTEMA EN CONDICIONES DE REVERSIBILIDAD

Cuando el sistema opera en condiciones de reversibilidad, es necesario considerar el modelo

cintico completo, que viene dado por la ecuacin [7.19]. Considerando que la relacin molar de

reactivos es la unidad, se procedi a poner la velocidad de reaccin en funcin de la conversin en

oleato de oleio, para su posterior solucin. Al igual que para el modelo que representa el

comportamiento del sistema en condiciones de irreversibilidad, la solucin de este modelo pasa por la

transfonnacin del mismo en su forma intgral; es decir, reordenando los trminos de la forma integral

del modelo, se obtuvo una relacin del tiempo de reaccin en funcin de la conversin. La forma de

dicha expresin viene dada por la ecuacin [7.26].

Dicha ecuacin slo depende de la conversin y de la constante de equilibrio, que permanece

invariable con el tiempo de reaccin, y slo depende de la temperatura a la que tiene lugar el proceso

de esterificacin; presentando cinco coeficientes que engloban trminos constantes de cada uno de los

pasos del mecanismo de reaccin, concentracin inicial de reactivos y concentracin inicial de

catalizador, pudiendo englobarse dos de estos coeficientes en uno solo a efectos de clculo, ya que los
300 Modelado Cintico

trminos que acompaan a los coeficientes ~ y m pueden agruparse en un mismo trmino constante

de la expresin mostrada en la ecuacin [7.26], detallndose los coeficientes en la ecuacin [7.27].

t = eLn (vW~ 1> <XAc<l/R~ + 1)


(XAC(v/R~ 1) +

-4. 6Ln(X~2 <q 1) 2KeqXAO + Keq) 4

[7.26]
+IZLn +~Ln< +X><
+ 1> eq Ac

A partir de los resultados experimentales obtenidos trabajando a presin atmosfrica para la

reaccin de esterificacin entre el cido oleico y el alcohol oleico, y teniendo en cuenta los parmetros

calculados cuando el proceso se lleva a cabo en condiciones de presin reducida, se procedi a

solucionar el modelo propuesto. Para ello, se procedi a calcular los coeficientes del modelo mediante

clculo numrico, empleando mtodos de regresin lineal mltiple y mtodos de regresin no lineal,

basados en el algoritmo de Marquard de algunos paquetes de software informtico.

A partir de los coeficientes calculados para cada una de las temperaturas que cubren nuestro

intervalo de operacin se obtuvieron los parmetros cinticos que se muestran en la tabla 7.3; y que,

junto con los obtenidos en el apartado anterior (tablas 7.1 y 7.2) nos definen el modelo cintico

completo para este sistema de operacin, cuando opera en condiciones de reversibilidad.

Tabla 7.3. Parmetros cinticos para la sntesis de oleato de dello a presin atmosfrica.

TEMPERATURA xc Kwg:. ( KIL (


(0C) ~q (mol) (mol) (mol) (niol)

60 26.5689 1.1O2xlO5 1.551x103 1.120x103 1.10x102


70 37.5420 9.070x106 l.223xl~Y3 9.20hl0~4 9.90x1U3
80 112.0802 5.252x106 9.I7OxlOA 7.01x104 8.50xl0~

Modelado de la Sntesis de Oleato de Oleilo 301

W(-r~j~4~,KgK<q(K~<2Kmw+N
4) ~-K~N,,t,)+KUI(Nno~2Kmw)+KmRklAco
E = +

2I4~,W~
j/~c)LKq(K4wUQJKI&+2NArO) K/t~fico) .K~ (K~JQ,-N~) +

= J 2<-r~LKk4~(I4q(I4jKmw.-N
4~4 +ICm~I)-KM~Kmw
2(-r)~KM/-rLNW(J%-1)

$KettcLKJw<Km4Y~n +N~) +K~JQ/I<~w4N,,~

= (-r)L.I~K4t~r~)L.Kq-1) [7.27]

= ~ K~~N~jj~ +Ki4/N4co~2Kmw) .K~t,2 +

2(-rK~Kg4~(-r43,JT4~(K -9

2(-rK1g-rflK -19

2(-r)KUR.J<-rMLNJK -19

K~(-r~)LJ4CL(J4LK~(e,+N~) +14&14.4AJ4W4NCt
2(-rM)~KUK4t-r~~)L.XN,,~<K -9

(c)L4i4(Keq(4<Kmw+N4c.? +KmwN4co) KJ<.w

)
302 Modelado Cintico

7.2 MODELADO DE LA SINTESIS DE OLEATO DE CETILO

Al igual que en el caso del oleato de oleilo, en este caso tambin puede llevarse a cabo la

reaccin de esterificacin tanto en condiciones de reversibilidad como en condiciones de

irreversibilidad. Lgicamente, desde un punto de vista de la conversin convendra trabajar a presin

reducida; sin embargo se han considerado, adems, las condiciones de presin atmosfrica, con el fin

de obtener todos los parmetros cinticos que conducen a la ecuacin cintica completa.

Por tanto, para el estudio cintico de la reaccin de esterificacin de cido oleico con alcohol

cetlico, empleando como catalizador comercial, la lipasa inmovilizada de Candida antarctica,

Novozym 435; en primer lugar se consideraron los resultados experimentales obtenidos en la

experimentacin correspondiente a una presin de 60 mml-lg para, a continuacin, completar el estudio

cintico a partir de los resultados experimentales considerando las reacciones realizadas a presin

atmosfrica.

7.2.1 ESTUDIO DEL SISTEMA EN CONDICIONES DE IRREVERSIBILIDAD

A partir de los experimentos realizados a presin reducida, OmmHg, se llev a cabo el estudio

cintico del sistema en condiciones de irreversibilidad. Al igual que en el caso anterior, el esquema

bsico del mecanismo de reaccin vendr dado por dos grupos de etapas. En el primer grupo se

resumen los pasos correspondientes a las etapas de la reaccin propiamente dicha; mientras que el

segundo grupo de etapas est constituido por los posibles pasos debidos a fenmenos de inhibicin

competitiva, producidos por la formacin de complejos de reactivos y productos con la enzima libre

o con complejos intermedios de las etapas principales de reaccin. Segn esto, el esquema de reaccin

que rige el proceso de esterificacin planteado en este apartado, es el que se muestra a continuacin,

que tambin coincide con el propuesto para la sntesis de oleato de oleio.


Modelado de la Sntesis de Oleato de Cetilo 303

E+AcEAc u K~,, K~,,


E4c+AI.EAcAL .~. IQ K~,
RAcA! E + Es
- W ~- .~. (t~c)max

Dichas etapas de reaccin, junto con las correspondientes etapas de inhibicin conducen a la

obtencin del modelo cintico descrito por la ecuacin [7.20], cuya solucin se ver a continuacin.

Siguiendo la metodologa descrita en el punto anterior, se procedi a la obtencin de algunos

de los parmetros cinticos, empleando para elio el mtodo de las velocidades iniciales. En primer

lugar se consideraron los experimentos realizados en exceso de alcohol cetilico, por lo que la ecuacin

principal se reduce a la ecuacin [7.21], la cual se transforma en la ecuacin [7.22] cando la

concentracin de alcohol cetffico tiende a infinito, desapareciendo as los trminos de inhibicin.

Segn esto, se procedi a representar la variacin de las velocidades de reaccin con el nmero

de moles de cido oleico presentes en el medio, para las diferentes relaciones molares cido:alcohol

fijadas, que dan lugar a un exceso del alcohol cetlico. As en la figura 7.7 se presentan, a modo de

ejemplo, las representaciones para una temperatura de 750C y una concentracin inicial de catalizador
del 5% en peso. Como puede observarse, se obtienen variaciones lineales, cuyas pendientes aumentan

al disminuir la concentracin de alcohol cetffico en exceso.

Los parmetros caractersticos de estas rectas, ordenadas en el origen y pendientes, se

representaron posteriormente frente al nmero de moles de alcohol cetffico, obtenindose dos nuevas

rectas que se muestran en las figuras 7.8 y 7.9, cuyos parmetros caractersticos relacionan algunos de

los parmetros cinticos buscados, como son la velocidad mxima de reaccin, la constante de

Michaelis Menten con respecto al cido oleico y la constate de inhibicin del alcohol oleico debida al

equilibrio de formacin del complejo de dicho alcohol con el complejo enzima-cido.


304 Modelado Cintico

1/(rac)

0.7

0.6

0.6

0.4

0.3

0.2

0.1

o
10 6 0 6 10 16 20
1/Nsc
OIIATO DE crril.0
P:BOmn2Bg Cmtalizador.5Z blM

Figura 7.7. Representacin l/(-r frente a 1/Nc. Exceso de alcohol cetflico.

0.15
2 3 4 5
1/rial
a
S520
p, i~sm~ c.taUSAS SE t~ WC

Figura 7.8. Ordenada en el origen frente a l/N~. Figura 7.9. Pendiente frente a 1/N~.
Modelado de la Sntesis de Oleato de Cetilo 305

Continuando con la metodologa propuesta. se procedi a obtener la informacin

correspondiente a los experimentos realizados en condiciones de irreversibilidad, pero trabajando con

un exceso de alcohol oleico en el medio de reaccin. As se representaron los grficos caractersticos

de variacin de la inversa de la velocidad de reaccin frente a la inversa del nmero de moles de

alcohol cetlico, cuando la relacin molar cido oleico/alcohol cetlico es superior a la unidad, para las

tres temperaturas de reaccin propuestas en esta memoria.

En este caso, las ecuaciones matemticas que gobiernan el proceso, sern las ecuaciones [7.23]

y [7.24], cuando la reaccin se lleva a cabo en exceso de cido oleico y cuando la concentracin del

mismo es tan elevada en el medio de reaccin, que puede considerarse que esta tiende a infinito y que,

por tanto, la variacin de la misma es despreciable con respecto a la concentracin inicial aadida al

comienzo de la operacin.

La figura 7.10 muestralas representaciones de los datos experimentales cuando se opera a una

temperatura de 750C y una concentracin inicial de catalizador correspondiente a la definida por el


punto central del intervalo. De nuevo, se aprecia una variacin lineal de primer orden respecto de la

funcin inversa del nmero de moles alcohol cetlico, al emplear este mtodo grfico de las velocidades

iniciales, tambin conocido como mtodo grfico de Lineweaver-Burk.

Representando los valores del corte de la ordenada en el origen y la pendiente de cada una de

las rectas obtenidas, frente a la funcin inversa de la concentracin de cido oleico en exceso, se

obtuvieron dos nuevas rectas, cuyos parmetros nos relacionan tres parmetros cinticos, como son la

velocidad mxima de reaccin, la constante de Michaelis Menten para el alcohol cetlico y la constante

de inhibicin con respecto del cida, debida esta ltima a la primera etapa del mecanismo que

constituye la reaccin principal: formacin del complejo binario cido-enzima. Dichos grficos se

corresponden con las figuras 7.11 y 7.12, respectivamente.


306 Modelado Cintico

0.7

0.6

0.6

0.4

0.3

0.2

O..1

o
10 6 0 6 10 15 20 26
111Na1
OLEATO DE CULtO
P: BOmnBg CatSIuadon 5% Tt 75C

Figura 7.10. Representacin 1/(-r,) frente a 1/N~. Exceso de cido oleico.

Figura 7.11. Ordenada en origen frente a l7N,~. Figura 7.12. Pendiente frente a l/N~.
Modelado de la Sntesis de Oleato de Cetilo 307

En la tabla 7.4 se recogen estos parmetros cinticos obtenidos a partir de la representacin

grfica de los datos experimentales, para las tres temperaturas de operacin.

Tabla 7.4. Parmetros cinticos experimentales para la sntesis de oleato de cetilo.

Para completar el modelo propuesto para el sistema que opera en condiciones de

irreversibilidad, se procedi a linealizar la ecuacin [7.20], obtenindose un modelo con cuatro

coeficientes que agrupan las constantes cinticas involucradas en el esquema de reaccin planteado,

que viene dado por la ecuacin [7.25],y que relaciona el tiempo de reaccin con la conversin en

oleato de cetilo, teniendo en cuenta las etapas descritas en los pasos de inhibicin.

La solucin del modelo se llev a cabo ajustando los datos tiempo-conversin obtenidos para

las tres temperaturas de reaccin, operando a presin reducida y con concentraciones equimolares de

cido oleico y alcohol cetlico, e introducindo en las expresiones de los coeficientes las constantes

cinticas obtenidas al operar en exceso de reactivos. Para ello se emplearon mtodos de clculo

numrico basados en los algoritmos de mnimos cuadrados y Marquardt incluidos en los paquetes de

software de algunos programas de soporte informtico.

La tabla 7.5 recoge los valores de las cuatro nuevas constantes calculadas, para las diferentes

temperaturas que cubren nuestro intervalo de operacin. En ella puede observarse, que tambin en este

caso, los fenmenos de inhibicin por parte tanto de los reactivos como del oleato de cetilo, se ven

favorecidos con una disminucin de la temperatura.


308 Modelado Cintico

Tabla 73. Parmetros cinticos calculados para la sntesis de oleato de cetilo.

7.2.2 ESTUDIO DEL SiSTEMA EN CONDICIONES DE REVERSIBILIDAD

Empleando los datos experimentales de las reacciones realizadas a presin atmosfrica, y

teniendo en cuenta los parmetros cinticos calculados cuando el sistema opera en condiciones de

irreversibilidad, se procedi a dar solucin al modelo cintico representado por la ecuacin [7.19],

deducida a partir del siguiente esquema de reaccin:

Etapas principales:

E ~Ac-EAc Kl
mAC L4c
RAe 4- Al RACA! K~ KM
EMA! EEsW
1m&11RT
EE.sW-EW+Fs 1K
EW-E+W mV, 1W
Etapas de Inhibicin:

E + A! EA! KL
E+Es-EEs KL
RAe + Ac EAcAc
EAc + Es E,4 cEs KL

Sustituyendo en dicho modelo cintico, el nmero de moles de las diferentes especies presentes

en el medio por sus correspondientes valores en funcin de Ja conversin en ster, e integrando dicha

expresin con respecto de la conversin, se obtiene una ecuacin que relaciona el tiempo de reaccin

con la conversin existente en el medio de reaccin. Reorganizando los trminos de dicha expresin
Modelado de la Sntesis de Oleato de Cetilo 309

se obtiene un modelo, que viene representado por la ecuacin [7.26], que consta de cinco trminos, de

los cuales, dos de ellos son constantes a lo largo del tiempo de reaccin.

La solucin de dicho modelo reside, lgicamente, en la obtencin del valor de los coeficientes

de la expresin, los cuales relacionan todas las contantes caractersticas resultantes del esquema de

reaccin propuesto para esta sntesis. Para ello se emplearon mtodos de clculo numrico basados en

el anlisis de los datos experimentales mediante regresin mltiple y regresin no lineal.

Resolviendo el sistema de ecuaciones que se plantea al igualar las expresiones que determinan

los coeficientes con su valor calculado, se obtienen los valores de las constantes cinticas que

completan el estudio del esquema de reaccin global, junto con las correspondientes etapas de

inhibicin. La tabla 7.6 recoge los valores as obtenidos.

Tabla 7.6. Parmetros cinticos para la sntesis de oleato de cetilo a presin atmosfrica.

TEMPERATURA e KL

(0C) eq (mol) (inol) (nol) (mu)


70 13.3310 1.367x104 2.212x104 3.929x103 2.74x1O~2

75 30.6467 7.679x10~ l.825x103 3.019xl0~ 1.92x102


80 50.8381 4.542x105 l.019x10~3 2.215x103 1.67x102

Como se desprende de dichos valores, un aumento de la temperatura de reaccin da lugar a una

disminucin del valor de las constantes obtenidas, excepto para el caso de la constante de equilibrio. Esto

supone que trabajando en el nivel superior del intervalo fijadopara la temperatura de operacin se consigue,

por una parte un aumento de la conversin de equilibrio de cido oleico en oleato de cetilo y, por otra una

disminucin de la formacin de complejos resultantes de las etapas de inhibicin. Lo que implica, en

principio, que los mejores niveles de conversin se obtendrn para dicha temperatura, ya que la actividad

enzimtica se ve favorecida.
310 Modelado Cintico

7.3 MODELADO DE LA SNTESIS DE MIRISTATO DE MIRISTILO

El modelado de la sntesis de miristato de miristilo, se llev a cabo considerando los

experimentos realizados con el sistema de esterificacin entre anido mirstico y alcohol mirstico

catalizado por la lipasa de Candida antarctica inmovilizada.

Las caractersticas de dicho sistema, as como las propiedades fsicas y qumicas de las especies

constituyentes del mismo, permiten operar de manera que el agua presente en el medio de reaccin

pueda eliminarse continuamente trabajando a presin reducida, desplazando as el equilibrio qunico

hacia la formacin de productos. Por ello, tambin en este caso, el estudio cintico del sistema se llev

a cabo tanto en condiciones de reversibilidad, como de irreversibilidad.

723.1 ESTUDIO DEL SISTEMA EN CONDICIONES DE IRREVERSIBILIDAD

Cuando la reaccin de esterificacin se lleva a cabo a presin reducida, puede considerarse que

el sistema opera en condiciones de irreversibilidad, ya que la desaparicin del agua del medio de

reaccin impide que tenga lugar la reaccin inversa. Segn esto, el esquema de reaccin en estas

condiciones estar constituido por tres etapas de reaccin, siendo la etapa de formacin de miristato

de miristilo irreversible. Adems habr que tener en cuenta las etapas que contemplan las posibles

formaciones de complejos producto de los fenmenos de inhibicin por parte tanto de reactivos como

de productos, por lo que el esquema de reaccin ser el siguiente:

Etapas de Reaccin:

E+AcE4c 2.

RAe + Al RAcA! .t 1Q1 K~


BAcA! E + Es + W ..
Modelado de la Sntesis de Miristato de Miristilo 311

Etapas de Inhibicin:

E+AIRAl ... KL
R+EsEEs .,.

BAc + Ac RAcAe ..

RAe + Es EAeRs .t

Por lo tanto, la expresin matemtica que describe el sistema vendr dada por la ecuacin

[7.20], cuya solucin vendr por el clculo de los parmetros cinticos caractersticos. Para ello, se

procedi a aplicar el mtodo de las velocidades iniciales, para lo cual fue necesario trabajar con exceso

de reactivos, a fin de calcular la velocidad mxima de reaccin.

En primer lugar se consideraron los experimentos realizados en exceso de alcohol miristico,

con una concentracin inicial de catalizador de un 5%. En esta situacin, la ecuacin principal toma

la forma de la ecuacin [7.21], convirtindoseen la ecuacin [7.22] cuando la concentracin de alcohol

es tan elevada que puede considerarse constante durante el tiempo que dura la reaccin.

Construyendo las representaciones de Lineweaver-Burk para las tres temperaturas que cubren

el intervalo de operacin de este sistema, se obtuvieron variaciones de primer orden para las relaciones

existentes entre la inversa de la velocidad de reaccin con la inversa del nmero de moles de cido

presente en el medio.

Tomando los parmetros caractersticos de estas rectas, se procedi a llevar a cabo sendas

representaciones de los mismos frente a la inversa del nmero de moles iniciales de alcohol mirstico,

obtenindose as los valores de los cortes con el eje de ordenadas y pendientes, los cuales relacionan

la velocidad mxima de reaccin, constante de Michaelis Menten para el cido miristico y la constante

de inhibicin enzimtica debida al equilibrio de formacin del complejo enzima-cido-alcohol miristico.


312 Modelado Cintico
1/<no)

0.3

0.25

0.2

0.16

0.1

0.05

0
10 5 o 6 10 15 20 25
1/Nao
MflilS1t120 DE SISTILO
P: OOmmHg Catalizadart 5% T: 70C

Figura 7.13 Representacin 1I(-r~) frente a 1/Ns. Exceso de alcohol mirstico.

o.
Peadiata

042

0.1

0.06

0.06

0.04
2 3 4 5 2 5 5
1/Ns] 1/Ns]
no A o u ama
Pt 02g 111. St 1 TSt ~ lOsaBa bUfllr 65 1 15<

Figura 7.14. Ordenada en el origen frente 1/1% Figura 7.15. Pendiente frente a 1/N~.
Modelado de la Sntesis de Miristato de Miristilo 313

Las figuras 7.13, 7.14 y 7.15 muestran las representaciones obtenidas cuando se trabaja a 7~C

con un exceso de alcohol mirstico, cuando la presin de trabajo es de OmmHg y la concentracin

inicial de catalizador se encuentra en el punto medio del intervalo.

Operando de forma anloga cuando se trabaja en exceso de cido mirstico, se procedi a

constniir los grficos de Lineweaver-Burk caractersticos para las tres temperaturas de operacin, as

como sus correspondientes representaciones de las ordenadas en el origen y pendientes frente a la

inversa del nmero de moles inicial de cido.

Al trabajar con exceso de cido en el medio de reaccin, la ecuacin que gobierna el proceso

global en condiciones de irreversibilidad, ecuacin [7.20],se reduce a la ecuacin [7.23],llegndose

a la ecuacin [7.24]cuando la concentracin de cido mirstico tiende a infinito.

En este caso, los parmetros obtenidos eronlas constantes de inhibicin con respecto al cido

mirstico y de Michaelis Menten con respecto al alcohol mirstico, as como la velocidad mxima de

reaccin. En la tabla 7.7 se muestran los parmetros cinticos obtenidos hasta ahora.

Tabla 7.7. Parmetros cintcos experimentales para la sntesis de mniristato de miristilo.

En la figura 7.16, 7.17 y 7.18 se presentan las representaciones de Lineweaver-Burk y de los

parmetros obtenidos de dichas rectas frente a la inversa del nmero inicial de moles de cido, al

trabajar con un exceso de alcohol, a una temperatura de 700C.


314 Modelado Cintico

1/<nl)

0.7

0.6

0.6

0.4

0.3

0.2

0.1

o
10 5 o 5 10 15 20
1/Nal
MIRISTATO DE M~ISTILO
P: BDmmBg Catallzadan 5% Tt 7WC

Figura 7.16. Representacin l/(-r01) frente a 1/1%. Exceso de cido mirstico.

Pendiente
0.019

0.007
h
0.015

0.013

0.011

0.009

0.007
2 5 4 5
1/1I.o
BW 01 ema
Pi aaB~ ~*IIadr St ~ 70~c

Figura 7.17. Ordenada frente a l/N~. Figura 7.18. Pendiente frente a l/N~.
Modelado de la Sntesis de Miristato de Miristilo 315

Para calcular los parmetros correspondientes a los pasos de inhibicin incluidos dentro del

esquema de reaccin propuesto, se procedi a transformar la ecuacin principal en una funcin del

tiempo y la conversin en ster. Para ello, se sustituy el nmero de moles de las especies en IXincin

de la conversin y, a continuacin se integr la ecuacin, obtenindose la forma lineal del modelo, que

viene representada por la ecuacin [7.25].

Al igual que en los casos anteriores, se obtuvieron los coeficientes de dicho modelo ajustando

los datos experimentales tiempo-conversin obtenidos para los experimentos realizados con relacin

equimolar de reactivos, empleando para ello las correspondientes regresiones militiples y no lineales.

A partir de los valores de dichos coeficientes, se calcularon las constantes de inhibicin

representativas, las cuales se muestran en la tabla 7.8.

Tabla 7.8. Parmetros cinticos calculados para la sntesis de miristato de miristilo.

(0C) I___________
TEMPERATURA (mol) (mol) (mol)

60 6.33x102
70 3.19x102
2.17x102
9.07xlfY3
2.17x103
3.05x1&3
3.91x103
2.01x103
80 l.23x102 7.16x103 4.18x103 1.02x103

7.3.2 ESTUDIO DEL SISTEMA EN CONDICIONES DE REVERSIBILIDAD

Cuando el sistema opera a presin atmosfrica, se presenta un componente ms en el medio

de reaccin y todas las etapas de reaccin pasan a ser reversibles, por lo que habr que tener en cuenta

las constantes de Michaelis Menten de los dos productos de reaccin y las constantes de inhibicin

debido a las dos nuevas etapas reversibles que aparecen en el mecanismo de reaccin. Por este motivo,
316 Modelado Cintico

el mecanismo de reaccin cuando se opera en condiciones de reversibilidad vendr dado, al igual que

en los casos anteriores, por el siguiente esquema:

Etapas de Reaccin:

E+AcEAc ,. K,~ K~
EAc+A1~kFcAl .. IQ, 1Q1
LAcAl EsW K~q (-rC)tX (rAC)L

EEsW-EW~Es .. K~R~
4w
EWE 4- W .. Kw
Etapas de Inhibicin:

E+AIEAl .. <fil
E+EsEEv
RAe Ac EAcAc
-~- ..

Ec+EsRAc& ..

Por tanto, el modelo cintico que gobiernael proceso de esterificacin objeto de estudio en este

caso, vendr dado por la expresin [7.19],la cual, una vez integrada y linealizada, se transforma en

la ecuacin [7.26]. Aplicando el mismo tratamiento matemtico, que en los casos anteriores, se

obtuvieron los coeficientes de dicha ecuacin y, a travs de ellos, las constantes cinticas que

completan el modelo cintico global, junto con las calculadas cuando el proceso se comporta en

condiciones de irreversibilidad. La tabla 7.9 muestra dichas constantes cinticas, junto con las

correspondientes constantes de equilibrio, para ls tres temperaturas ensayadas.

Tabla 7.9. Parmetros cinticos para la sntess de miristato de miristilo a presn atmosfrica.

TEMPERATURA I<,,.w
(0C) Keq (niol) (mcl) (mol) (mcl)
60 24.1185 1.377x10A 2.075xl~V 5.331x102 4.llxl&2

70 42.4947 9.226x1fl5 9.092x103 l.117x102 2.Slxl&2

80 69.6516 7.018x105 6.166x103 6.022x103 l.62x1&2


Modelado de la Sntesis dc Oleato de Isopropilo 317

7.4 MODELADO DE LA SINTESIS DE OLEATO DE ISOPROPILO

La caracterstica fundamental que presenta el sistema de esterificacin entre el cido oleico y

el alcohol isoproplico catalizado por la lipasa de Candida antarctica inmovilizada, Novozym 435, y

que lo diferencia de los sistemas estudiados hasta ahora, es que la naturaleza del isopropanol. Debido

a las propiedades fsicas y qumicas de este alcohol, el proceso de esterificacin no puede llevarse a

cabo en condiciones de presin reducida, puesto que dicho alcohol forma azetropos con el agua

formada en el transcurso de reaccin, impidiendo as que dicho producto de reaccin pueda eliminarse

del medio evitando la eliminacin del alcohol.

Debido a esto, el equilibrio de reaccin no puede desplazarse hacia la formacin de productos

trabajando en condiciones de vaco. Por este motivo, el estudio de este proceso de esterificacin se

llev a cabo exclusivamente en condiciones de reversibilidad; es decir a presin atmosfrica.

En una primera aproximacin se supuso que el esquema de reaccin caracterstico del sistema

vendra dado por el modelo supuesto en los casos anteriores cuando se operaba en condiciones de

reversibilidad; cuya expresin matemtica caracterstica se corresponde con la ecuacin [7.19].

Linealizando esta ecuacin, mediante integracin y sustitucin del nihnero de moles de cada especie

en funcin de la conversin, se procedi al ajuste de los datos experimentales tiempo-conversin para

las diferentes temperaturas de reaccin.

Curiosamente, los parmetros estadsticos que cuantifican la bondad de los respectivos ajustes

obtenidos para las diferentes series de datos comprobados, concluan en la evidencia de que el modelo

supuesto no era el adecuado en ninguno de los casos.


318 Modelado Cintico

Por otra parte, los valores de las constantes de equilibrio de las reacciones, obtenidos para las

tres temperaturas de reaccin probadas, 650C, 700C y 750C, a partir de las correspondientes
conversiones de equilibrio obtenidas experimentalmente, tomaron valores de 2.8x102, l.5x103 y 2.5x105

respectivamente. Dichos valores de las constantes de equilibrio tan elevados, llevaron a pensar que la

velocidad con la que se produce la reaccin inversa del proceso es despreciable frente a la velocidad

con que tiene lugar la reaccin directa; por lo que el proceso se comporta como si de una reaccin

irreversible se tratase.

Dicha suposicin se vio respaldada, al comprobar que los ajustes obtenidos empleando el

correspondiente modelo cintico representado porla ecuacin [7.26],eran lo suficientemente adecuados

como para dar cuerpo a esta hiptesis. Por lo tanto, el modelo cintico supuesto en este caso fue el

correspondiente a la ecuacin [7.20], deducida del esquema de reaccin supuesto para estas

condiciones:

Etapas de Reaccin:

EAc+AI-FcA .~. K4 KM
R.4cAlE+Es+ W .~.

Etapas de Inhibicin:

E+Es-~EEs <ira
4c~Ac.EAcAc ...

E.4c + Es E
14 cEs ...

Modelo que presenta cuatro etapas de inhibicin por fonnacin de complejos enzimticos con

el cido oleico, alcohol isopropllico y oleato de isopropilo, y tres etapas de reaccin, siendo la etapa

de liberacin de los productos finales de reaccin, una etapa irreversible; por lo que desaparecen las

constantes de Michaclis Menten e inhibicin en el equilibrio de los productos de reaccin.


Modelado de la Sntesis de Oleato de Isopropilo 319

Para calcular los parmetros cinticos, se procedi a aplicar el mtodo de las velocidades

iniciales trabajando primero con adicin de alcohol isoproplico, y despus con exceso de cido oleico.

Al igual que en los casos anteriores, cuando se opera con un exceso de isopropanol, la ecuacin

cintica que describe el proceso viene dada por la expresin [7.21], la cual se transforma en la ecuacin

[7.22], cuando el exceso de isopropanol es tal que la concentracin del mismo puede considerarse

invariable con respecto a la concentracin de cido oleico.

En estas condiciones, se llevaron a cabo las representaciones de Lineweaver-Burk de inversa

de velocidad de reaccin frente a la inversa del nmero de moles de cido, para las tres temperaturas

ensayadas, obtenindose variaciones de primer orden con respecto a la inversa del nmero de moles

de cido oleico, tal y como se desprende de la figura 1.19, correspondiente a las representaciones de

los datos obtenidos en las reacciones realizadas a 700(2 de temperatura y con un 5% de concentracin

inicial de catalizador.

Tomando los valores de ordenadas en el origen y pendientes obtenidos de la representacin de

Lineweaver-Burk, se procedi a la representacin de las mismas frente al inverso del nmero de moles

iniciales de alcohol isopropiico, obtenindose las correspondientes rectas (figuras 7.20 y 7.21), de

cuyos parmetros se obtuvieron los valores de velocidad mxima de reaccin, constante de Michaelis

Menten con respecto al cido oleico y constante de inhibicin con respecto al isopropanol.

De manera anloga se analizaron los datos obtenidos, cuando el sistema operaba con un exceso

de cido oleico; llevndose a cabo las representaciones de Lineweaver-Burk para las tres temperaturas

de reaccin, con la inversa de la velocidad de reaccin frente a la inversa del nmero de moles de

isopropanol, cuando la relacin molar cido/alcohol es superior a la unidad. Obtenindose, en este caso

figuras anlogas a las representadas. por las figuras 7.22, 7.23 y 7.24, las cuales se construyeron

teniendo en cuenta los datos de las reacciones realizadas a 700(2.


320 Modelado Cintico

1/(rac)

1.6

1.4

1.2

0.8

0.6

0.4

0.2

o
5 0 5 10 15 20 25
1/Nao
OLEATO DE isopnopn.o
P: 710 mnflg CatalIzador: OX TTrC

Figura 7.19 Representacin 1/(-r0~) frente a 1/Nr. Exceso de isopropanol.

Pendiente

3 5
1/74.1
0fl~ ~flto
pi mg c.t.a..ea, .2 7

Figura 7.20. Ordenada en el origen frente lIN~1 Figura 7.21. Pendiente frente a l/N~,.
Modelado de la Sntesis de Oleato de Isopropilo 321

1.0 11<rs

1.4

1.2

0.8

0.6
0.4

0.2

o
5 0 5 10 15 20 25
1/Nal
OLEATO DE rsopnopn.o
P: 7IOmmEg CatalIzador 5% T 70C

Figura 7.22. Representacin 1/(-r.1) frente a 1/Ni. Exceso de cido oleico.

Ordenad, a .1 OrIgen
Padiat.
LS

Os

0.5

0-48

o.

0.5,

2 3 4 8 1 8 8 4
t/Nto 1/74to
e ,* fha PA= U
P~ ?t~Ng ~I !~ O

Figura 7.23. Ordenada frente a uN0,. Figura 7.24. Pendiente frente a 1/Ni.
322 Modelado Cintico

Teniendo en cuenta las representaciones obtenidas cuando se trabaja en exceso de cido oleico,

se obtuvieron los correspondientes parmetros cinticos. La tabla 7.10 muestra los parmetros

calculados hasta el momento, empleando el mtodo de las velocidades iniciales. En ella puede

observarse que todas las constantes disminuyen al aumentar la temperatura, excepto en el caso de la

velocidad mxima de reaccin, lo que indica que un aumento de la temperatura favorece la conversin

de cido en ster y dificulta la formacin de complejos resultantes de ls etapas de inhibicin.

Tabla 7.10. Parmetros cinticos experimentales para la sntesis de oleato de isopropilo.

Las dems constantes se calcularon a partir de los parmetros obtenidos al ajustar los datos de

las reacciones realizadas con una relacin molar cido oleico:isopropanol igual a la unidad, al modelo

propuesto inicialmente, ecuacin [7.20]. En la tabla 7.11 se recogen dichas constantes, que

corresponden a las etapas de inhibicin debidas a la formacin de complejos enzimticos entre la

enzima libre o el complejo principal enzima-cido oleico con los reactivos o con el producto principal

de reaccin.

Tabla 7.11. Parmetros cinticos calculados para la sntesis de oleato de isopropilo.

rt TEMPERATURA 65
(mu)

l.02xlCY2
jEs

9.12x103
(mol)
K.
9.09xl0~
(mu)

l.20x101
70 6.19x103 5.22x103 7.l5xlOA 8.12x102
75 l.13x103 2.18x103 5.22x104 6.03x102
Modelado de la Sntesis de Palmitato de Isopropilo 323

7.5 MODELADO DE LA SINTESIS DE PALMITATO DE ISOPROPILO

La sntesis de palmitato de isopropio va esterificacin cataltica entre el cido palmtico e

isopropanol, utilizando como catalizador comercial la lipasa de Candida antarchlca inmovilizada

(Novozym 435), se llev a cabo nicamente a presin atmosfrica; ya que la naturaleza del isopropanol

impide operar en condiciones de vaco que pennitiran la eliminacin de agua en continuo y el

consiguiente desplazamiento del equilibrio qumico hacia la formacin de productos.

Al igual que en el caso del oleato de isopropilo, en un principio se intentaron ajustar los datos

de las reacciones realizadas con una relacin equimolar de reactivos, empleando para ello el modelo

correspondinte a una cintica reversible que considera los posibles pasos de inhibicin, en su forma

polinmica, descrito por la ecuacin [7.26].

No obstante, los resultados obtenidos en este ajuste no fueron lo suficientemente satisfactorios,

ya que los parmetros estadsticos resultantes de dicho ajuste indicaban una desviacin importanteentre

los modelos obtenidos y los valores experimentales. Por este motivo, se modific la ecuacin de

partida, mediante la eliminacin de algunos de sus tArminos, haciendo los coeficientes que los

acompaaban igual a cero.

flas sucesivas comprobaciones, se lleg a la conclusin de que uno de los trminos del modelo

deba ser despreciable frente a los dems para que los datos experimentales verificasen la ecuacin. El

trmino despreciable en este caso fue el que acompaa al coeficiente E, lo que indica que el modelo

cintico planteado no es vlido para este sistema de esterificacin, debiendo ser modificado el esquema

de reaccin planteado en un principio. Segn este planteamiento, habra que comprobar las etapas

supuestas, para conocer a que parmetros es debido el trmino despreciable en el modelo cintico

general.
324 Modelado Cintico

Dicho trmino de integracin, es debido a las etapas de inhibicin que tienen en cuenta la

formacin de los complejos enzima-ster y cido-enzima-ster. Por lo tanto habr que considerar que

esas etapas no se verifican en el seno de la reaccin o que, al menos, son despreciables frente a las

otras etapas consideradas en el esquema de reaccin.

Teniendo esto en cuenta, el esquema de reaccin se vera modificado con respecto al esquema

general supuesto al principio de este capitulo, quedando de la siguiente manera:

Etapas de reaccin:

E+Ac.&EAc ~ <1k,
4c+AI-.EAcAl .t K~ K~
EAcAI EEsW . K<q (-rA4~ (-~A~
EEsW.~EW+Es .. K~ K~
2WE + W <m4 <w
Etapas de Inhibicin:

E+ALEM .~. 4,
BAc + Ac EAcAc

La desaparicin de dichas etapas de inhibicin es debida a la fuerte afinidad de los reactivos

tanto por la enzima libre y como por el complejo enzima-cido, lo que demuestra una vez ms que el

tipo de inhibicin que tiene lugar en el proceso corresponde a un fenmeno de inhibicin competitiva

Segn esto, en la competicin por la formacin de complejos con la enzima libre, debido a la

naturaleza de las especies presentes en el medio, se ve favorecida la formacin de complejos con los

reactivos, por lo que el modelo cintico que corresponde a este esquema de reaccin vendr dado por

la siguiente ecuacin:
Modelado de la Sntesis de Palmitato de Isopropilo 325

K
(rC) 4

(r4c);,,aKi K (1 +
~ + (rC),,flK,NC(1 +
AJ O) +
&4c

+ (rC),flK74AL(1 + ~M (~rc)~KmN& + -

+ _______________
1C
<Al

(rc)mnKmNw + (r3JVMNI +

+ K [7.28]
24 4~,flN,,NW
+ (~rc)~,nKmNcN~, + (r +

<24

(-rc)~,,nKmNNw (-r~<c),,nN~.NNra
4 + +
K. K.
tw k

+ (rc)flmNLN&NW

Una vez determinado el modelo cintico, se procedi al clculo de los diferentes parmetros

que integran el mismo. Para ello se aplic, como en casos anteriores, el mtodo de las velocidades

iniciales, haciendo que el sistema se aproxime a un comportamiento de primer orden en ausencia de

productos.

Para ello, en primer lugar se tuvieron en cuenta las reacciones realizadas con exceso de

isopropanol, llevndose a cabo las correspondientes representaciones de Lineweaver-Burk de la inversa

de la velocidad de reaccin frente a la inversa del nmero de moles de cido palmtico. La ecuacin

[7.21],ser la expresin que describe el sistema en estas condiciones, transformndose en la ecuacin

lineal [7.29]para dichas representaciones, donde el nmero de moles de isopropanol se considera

constante en estas condiciones de operacin.

KmAc KL4CRPaALl i1 KniAl


(1 _________

(r
0) (rC),,,~, <mA CNALP{40 (r4~), (1 +
~AI ) [7.29]
326 Modelado Cintico
1/<no)

0.3

0.26

0.2

0.15

0.1

0.06

o
6 o 5 10 16 20 26
1/Nao
PLMITATO DE isopuo~n.o
P: 7lGmnnBg Cataflzadart 5% T~ 7~C

Figura 7.25 Representacin l/(-rJ frente a 1/Ns. Exceso de isopropanol.

2 8 5
i/flaa
PAISfl?O Iii n.n.,S
Pl laEg C.i.. t~ WC

Figura 7.26. Ordenada en el origen frente 1/N~~ Figura 7.27. Pendiente frente a l/N~.
Modelado de la Sntesis de Palmitato de Isopropilo 327

En la figura 7.25 se muestran las representaciones correspondientes a un exceso de isopropanol,

cuando la temperatura de operacin es de 700(2. Representando, por una parte, las diferentes ordenadas

en el origen frente a la inversa del nmero de moles iniciales de isopropanol y, por otra, las diferentes

pendientes frente a la misma variable, se obtuvieron los grficos que se muestran en las figuras 7.26

y 7.27. De la ordenada en el origen y la pendiente de esas dos representaciones se obtuvieron las

correspondientes constantes cinticas: velocidad mxima de reaccin, constante de Michaelis-Menten

con respecto al cido palmtico y constante de inhibicin con respecto al isopropanol.

Operando de fonna anloga con los datos obtenidos cuando la reaccin se lleva a cabo en

exceso de cido palmtico, se llevaron a cabo las representaciones de Lineweaver-Burk de inversa de

la velocidad de reaccin frente a la inversa del nmero de moles de isopropanol presentes en el medio

de reaccin (figura 7.28). En este caso la ecuacin que define el sistema ser la [7.23], la cual

transformada en su forma lineal se convierte en la ecuacin [7.31].

<W<mAc)I K
1 - <mAl 4- 1 (1 + ~ mA [7.30]
___ (1+

Tomando las ordenadas y pendientes de estas rectas se llevaron a cabo las correspondientes

representaciones frente a la inversa de la concentracin inicial de cido palmtico, obtenindose los

grficos que se muestran en las figuras 7.29 y 7.30; las cuales responden a las ecuaciones [7.31]y

[7.32].

1 <mAc 1
ORDENADA = ____ + ______

PENDIENTE = <mAl + <LSmAc 1 [7.32]


328 Modelado Cintico
1/<-ra

1.2

0.8

0.6

0.4

0.2

o
6 0 6 10 15 20 26
1/Nal
PLMiTATO DE ISOPROPfl.0
P: TlOunmEg Catallzadon OX T: WC

Figura 7.28 Representacin l/(-r~) frente a im~. Exceso de cido palmtico.

Ordenda en .1 Origen
0.6

0.031
0.4

0.025

0.8
0.021

0,3
0.016

0.t 0.511
1 2 3 4 . 5 1 2 3 4 5
1/N.a 1/Nsc
flImn~ = 5a0 u
PAIa,At0 sn
ii 712 ~J*nA.., St Ti WC ~, ?1a3. aaI.dct U Ti ~GC

Figura 7.29. Ordenada en el origen frente 1/N~ Figura 7.30. Pendiente frente a l/N~.
Modelado de la Sntesis de Palmitato de Isopropilo 329

En a tabla 7.12 se muestran los parmetros cinticos calculados hasta ahora, empleando para

ello el mtodo de las velocidades iniciales cuando se trabaja bien en exceso de cido palmtico. bien

en exceso de isopropanol.

Tabla 7.12. Parmetms cinticos experimentales para la sntesis de palniitato de isopmpilo.

(0C) (nxol/min.g) (mol)


m (mal) nial)
TEMPERATURA (-r4~,~,/W K~
0 mM KC
3 8.51xl02 2.07x10 1.62x102 4.16x104
65 6..21x10
70 8.75x103 5.12x1fr2 l.62x10 l.30x102 9.92x105
75 1.02x102 8.51x104 1.31x10 1.08x1& 6.62x1fr5

Las dems constantes se calcularonlinealizando la ecuacin [7.28],para lo cual se sustituyeron

las variables de nmero de moles en funcin de la conversin de cido palmtico en palmitato de

isopropio y se procedi a la integracin de dicha ecuacin de velocidad, llegndose a una ecuacin

en funcin del tiempo y de la conversin [7.33],cuyos coeficientes se muestran en la ecuacin [7.34].

t=OLfl(X&2(K.q -

+ mis 1) + UflKeq + AX
4~, [7.33]
qr+l)

Sustituyendo los datos experimentales tiempo-conversin en dicho modelo, y aplicando un

mtodo numrico de regresin mltiple en primer lugar y regresin no lineal despus selleg a obtener

los coeficientes de dicho modelo para las diferentes temperaturas de reaccin, y empleando diferentes

concentraciones iniciales de catalizador. A partir de dichos coeficientes y teniendo en cuenta los


330 Modelado Cintico

calculados anteriormente, se obtuvieron los valores de las constantes cinticas. En la tabla 7.13 se

muestran dichos valores para las diferentes temperaturas de reaccin.

1-
Tabla 7.13. Parmetros cinticos calculados para la sntesis de palmitato de isopropilo.

(0C)
65 2.1584 l.30x103
(mu)
1.62x10
KIflE.

(mcl)
9.36x105
(mu)
7.19x103
(mol) (mol)
6.31x105 3.17x102
70 3.3011 9.59xlW 1.31x101 6.09x105 4.21x103 3.47x105 l.92x10-2
75 6.3561 7.02x10 9.27x102 9.10x106 1.17x103 l.92x105 l.O1xlO~

2(r
4~)LK~,K,~K~( r4,nN&o(Keq 1)

14q ~)
2(-r)~KK~A< TAC)m*XNACO(

= ~ +K~/K~.N~)-K(K
1-K~,ft,4 - [7.341
2(-rC)~KMK4~,/-rM)~NCK - 1)2

9
~Q(rK(K~KM~(K~R,N4CJJ)) ~k/Krn~KmA+Wco)
2(-rk)ZK4t-r)UNKq -19
Modelado de la Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleilo 331

7.6 MODELADO DE LA SINTESIS DE 2-METIL-BUTIRATO DE OLEILO

En el caso de la reaccin de esterificacin entre el cido 2-metil-butrico y el alcohol oleico,

empleando el catalizador comercial Novozym 435, constituido por la lipasa de Candida anrarcnica

imnoviizada, el hecho de que las propiedades de las especies presentes en el medio de reaccin

pennitan trabajar en condiciones de vaco, desplazando as el equilibrio hacia la fonnacin de productos

por eliminacin de agua en continuo, hacen posible el estudio cintico del sistema tanto en condiciones

de reversibilidad como de irreversibilidad.

El estudio cintico de este sistema se llev a cabo de forma anloga al anterior. As, en un

principio se tomaron los datos correspondientes a las reacciones de esterificacin con relacin

equiniolar de feactivos, realizadas a presin atmosfrica y en los tres niveles del intervalo de

temperaturas, y se procedi a operar con ellos pra ver si verificaban el modelo global representado

por la ecuacin [7.19].Los parmetros estadsticos, as como los Indices de correlacin de los ajustes

realizados, denotaban que el modelo pmpuesto o era adecuado para correlacionar los datos

experimentales; producindose una situacin similar a la obtenida en el caso del tratamiento matemtico

de los resultados experimentales obtenidos en la sntesis de palmitato de isopropio.

Por esta razn, el esquemade reaccin se modific de forma anloga, suponiendo que las dos

etapas de inhibicin que tienen en cuenta la formacin de complejos enzimticos secundarios con el

ster formado en el transcurso de la reaccin, eran etapas despreciables; considerndose que la

inhibicin competitiva esta favorecida respecto de la formacin de complejos en Ja que intervienen las

especies reactivas de partida, cido 2-metil-butfrico y alcohol oleico.

Por tanto, el mecanismo de reaccin se ver modificado como se muestra a continuacin,

respondiendo al modelo definido por la ecuacin [7.33]


332 Modelado Cintico

Etapas de reaccin:

E+Ac-EAc -~- <mAc <~


BAc +AIEAcAi .-. IQ, K~,
BAcAL EEsW ... <~Q (-r~IL~ (r)~

EEsW-EW+E.s .~. K~ ~
EW-E + W .- Kn~,R~w.
Etapas de Inhibicin:

BAc + Ac EAcAc

Aprovechando la posibilidad de poder operar en condiciones de irreversibilidad, se procedi

a valorar cinticamente el sistema en estas condiciones, por cuanto que la obtencin de parmetros

cinticos se simplifica bastante en comparacin con el anlisis de las reacciones realizadas a presin

atmosfrica.

7.6.1 ESTUDIO DEL SISTEMA EN CONDICIONES DE IRREVERSIBILIDAD

Cuando se fuex-za al sistema a trabajar en condiciones de presin reducida, el mecanismo de

reaccin se ver modificado, en el sentido de que la concentracin de agua presente en el medio ser

nula y, por tanto, los trminos debidos a las posibles etapas que constituyen la reaccin de hidrlisis

desaparecen del mecanismo.

Por otra parte, ya se ha comentado anterionnente que el mecanismo de reaccin, en cuanto a

las etapas de inhibicin competitiva debidas a la formacin de complejos, se ver modificado, ya que

dos de estas etapas, bien no son representativas dentro del sistema, bien no tienen lugar debido a que

tanto las especies constituidas por la enzima libre, como las correspondientes al complejo enzima-cido,

presentan una mayor reactividad hacia la fonnacin de nuevos complejos con los reactivos presentes

en el medio de reaccin; siendo el esquema de reaccin el que se muestra a continuacin.


Modelado de la Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleilo 333

Etapas de reaccin:

E+AcEAc <~~C ~
E4c+AlEAcA <mAl <Al
d
EAcAI - E 4- Es~ W .~.

Etapas de Inhibicin:

E+AIEAI ... 4
BAc + Ac EAcAc :. KL

Teniendo en cuenta, el nuevo esquema de reaccin propuesto, la ecuacin de velocidad de

reaccin, caracterstica del sistema en condiciones de irreversibilidad, adquirir la forma siguiente:

(TC) = ___________________________________________

KKl + i1~I) + <mc


~A(~ +
~) +
<Al <k, [7.35]

+ <mCN4I(
1 + Al +

<Al

Cuando se trabaja con un exceso de cido o con un exceso alcohol, tales que la concentracin

de uno de los dos sea tan elevada que pueda considerarse infinita con respecto a la del reactivo en

defecto, la ecuacin se simplifica, transformndose en la [7.36]para un exceso de alcohol y en la

ecuacin [7.38]para un exceso de cido.

IV
(rC) = Ac
<A c<mAl
<nAc( + ) + Ac(~ + mAl) [7.36]
<mAYAL IVAI
Cuando la concentracin de alcohol en exceso tiende a infinito, la expresin se transforma en:

(rC) = <mAc 4-~c [7.37]


Anlogamente para un exceso de cido:

= NM <mA

+ a) NJJJ + [7.38]
334 Modelado Cintico

Cuando la concentracin de cido en exceso tiende a infinito, la expresin se transforma en:

N
Al [7.391
mAl

A partir de los resultados experimentales obtenidos cuando se opera a una presin de OmmHg,

y teniendo en cuenta la forma matemtica de las ecuaciones obtenidas, empleando el mtodo de las

velocidades iniciales, se llevaron a cabo las representaciones de Lineweaver-Burk de los datos inversa

de la concentracin del reactivo en defecto frente a la inversa de la velocidad de reaccin, tomando

como variable independiente la concentracin de reactivo en exceso. Dichas representaciones se

llevaron a cabo, fijando la concentracin inicial de catalizador en un 5%, para las tres temperaturas de

reaccin que determinan nuestro intervalo de operacin.

As en la figura 7.31 pueden observarse las representaciones de Lineweaver-Burk a 7Q0(2 de

temperatura, variando el nmero de moles en exceso de alcohol oleico. Como en los casos anteriores,

se obtienen variaciones lineales de la inversa de la velocidad de reaccin con respecto a la inversa del

nmero de moles de cido 2-metil-butrico.

A partir de los parmetros obtenidos de las referidas rectas, se realizaron las representaciones

de ordenada en el origen y pendiente frente a la inversa del nmero de moles iniciales de alcohol

oleico, obtenindose dos rectas, de cuyosparmetros se obtuvieron algunas de las constantes cinticas,

como son la velocidad mxima de reaccin, la constante de Michaelis-Menten con respecto al cido

2-metil-butrico y la constante de inhibicin respecto del alcohol oleico.

Dichas representaciones grficas son similares para las tres temperaturas de reaccin ensayadas.

A modo de ejemplo, en las figuras 7.32 y 7.33 se muestran las correspondientes a 700C, en las que
puede observarse la tendencia lineal de los datos.
Modelado de la Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleilo 335

1/(rac>

0.8

0.4

0.2

o
6 0 6 10 16~ 20 26
1/Nao
2..IWFflrBhlTIRATO DE OIEW
P: GDmmEg CataiIzadon 5% Ti WC

Figura 7.31. Representacin 1/(-rJ frente a l/N~. Exceso de alcohol oleico.

Padi.nt.

1 9 8 4 5 1 a 3 4
I/N.I 1/Sai
u si -S-s!mM~ U 314
niSD< ~ Ti VV ni ~t ~, St Ti

Figura 732. Ordenada en el origen frente l/N,~ Figura 7.33. Pendiente frente a l/N~.
336 Modelado Cintico

El mismo tratamiento se sigui para los datos procedentes de las reacciones realizadas con

adicin de cido 2-met-butrico, solo que en este caso las representaciones de Lineweaver-Hurk se

construyeron teniendo en cuenta la inversa del nmero de moles de alcohol oleico, mientras que las

representaciones de ordenadas en el origen y pendientes se hicieron frente a la inversa del nmero de

moles de cido 2-metil-butrico (ver figuras 7.34, 7.35 y 7.36).

Los valores de las constantes obtenidas empleando el mtodo de las velocidades iniciales,

cuando el sistema opera en condiciones de irreversibilidad, se muestran en la tabla 7.14 para los tres

niveles que definen el intervalo de temperaturas lijado en este estudio.

Tabla 7.14. Parmetros cinticos experimentales para la sntesis de 2-metil-butirato de oleilo.

El modelo cintico propuesto para el sistema que opera en condiciones de irreversibilidad, se

complet mediante el clculo de las dems constntes cinticas, para lo cual se procedi a linealizar

la ecuacin [7.35],obtenindose un modelo con cuatro coeficientes que agrupan las constantes cinticas

involucradas en el esquema de reaccin planteado, que viene dado por la ecuacin [7.40], y que

relaciona el tiempo de reaccin con la conversin en 2-metil-butirato de oleilo, teniendo en cuenta las

etapas descritas en los pasos de inhibicin.

1
t=a+PXC+yLn (
t<)
1 (lX) [7.40]

Donde los coeficientes que acompaan a cadauno de los trminos de dicho modelo, se detallan

en la ecuacin [7.41].
1/(ral) Modelado de la Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleilo 337

0.8

0.6

0.4

0.2

o
6 0 6 10 16 20 - 26
1/Nal
2nnLBlJTm&TO DE OLEUO
P: BOmmEg Cetallxadan 5% T: 70C

Figura 7.34 Representacin l/(-r61) frente a l/N~. Exceso de cido 2-metil-butrico.

0.254

0.284

0.244

0.224

0.204
1 2 a 4 5 1 2 8 4 5
1/Sao 1/Sso
Sflr8fl0 n urna U SSO
Pl 2 Catad. SI Ti WC t ~ ~t*Ns- St ~ WC

Figura 735. Ordenada en el origen frente 1fN~ Figura 7.36. Pendiente frente a 1/Ns.
338 Modelado Cintico

KACKmAL
a
NCO( iAC)max

= N~ + <m4YAcO
_____

Y- _____
____ + <~
____ <<mAl
______ [7.41]

8 = <C4L41

La solucin del modelo se llev a cabo ajustando los datos tiempo-conversin obtenidos para

las tres temperaturas dc reaccin, operando a presin reducida y con una relacin equimolar de

reactivos, e introduciendo en las expresiones de los coeficientes las constantes cinticas obtenidas al

operar en exceso de reactivos. Para ello se emplearon mtodos de clculo numrico basados en los

algoritmos de mnimos cuadrados y Marquardt informatizados.

La tabla 7.15 recoge los valores de las constantes cinticas calculadas, para las diferentes

temperaturas que cubren nuestro intervalo de operacin. En ella puede observarse, que los fenmenos

de inhibicin se ven favorecidos con una disminucin de la temperatura.

Tabla 7.15. Parmetros cinticos calculados para la sntesis de 2-metil-butirato de oleilo.

TEMPERATURA
QC) (mu) (mol)

60 2.08x103 8.26x103
70 9.67x04 4.92x103

80 7.21x104 1.23x103
Modelado de la Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleilo 339

7.6.2 ESTUDIO DEL SISTEMA EN CONDICIONES DE REVERSIBILIDAD

Empleando los datos experimentales de las reacciones realizadas a presin atmosfrica, y

teniendo en cuenta los parmetros cinticos calculados cuando el sistema opera en condiciones de

irreversibilidad, se procedi a dar solucin al modelo cintico completo representado por la ecuacin

[7.33],deducida a partir del esquema de reaccin supuesto al principio del punto 7.6.

Sustituyendo en dicho modelo cintico, el nmero de moles de las diferentes especies presentes

en el medio por sus correspondientes valores en funcin de la conversin en ster, e integrando dicha

expresin con respecto de la conversin, se obtiene una ecuacin que relaciona el tiempo de reaccin

con la conversin existente en el medio de reaccin. Reorganizando los trminos de dicha expresin

se obtiene un modelo, que viene representado por la ecuacin [7.33],que consta de cuatro trminos,

de los cuales, dos de ellos son constantes a lo largo del tiempo de reaccin.

Resolviendo el sistema de ecuaciones que se plantea al igualar las expresiones que determinan

los coeficientes con su valor calculado, se obtienen los valores de las constantes cinticas que

completan el estudio del esquema de reaccin global, junto con las correspondientes etapas de

inhibicin. La tabla 7.16 recoge los valores as obtenidos.

Tabla 7.16. Parmetros para la sntesis de 2-metil-butirato de oleilo a presin atmosfrica.

TEMPERATURA K K~
6 ~mw Kw
(0C) (mol) (mu) (mol) (mu)
4 1.502x102 9.589x103 4.72xl0~
70 3.4795 l.709x10
75 5.2915 l.425x104 1.182x1&2 6.317x103 2.46x102
80 12.7179 1.079x104 8.093x103 1.196x103 l.75x102
340 Modelado Cintico

7.7 EFECTO DE LA TEMPERATURA

El estudio termodinrnico de los diferentes sistemas de esterificacin plateados, un

conocimiento de los cambios energticos que tienen lugar en la reaccin, as como de las condiciones

en las que se alcanza el equilibrio; siendo la temperatura, desde este punto de vista, el parmetro que

juega uno de los papeles fundamentales, si no el ms importante.

Ser, pues, de gran intersconocer algunos de los parmetros termodinmicos involucrados en

el cambio energtico del sistema, como son la Energa Libre de Gibbs, a Entalpa de reaccin, la

Entropa y la Energa de activacin.

El cambio de energa libre standard de reaccin, vendr dado por la expresin [7.42],en

relacin a la constante de equilibrio, mientras que su relacin con el cambio de entalpia standard y con

la variacin de entropa standard, vendr dada por la ecuacin [7.43].

hG0 = -2.3R7TogK~ [7.42]

hG0 = AH0 - TAS0 [7.43]

Combinando ambas ecuaciones se obtiene la ecuacin [7.44], a partir de la cual se pueden

obtener los parmetros caractersticos, empleando datos experimentales, de temperatura y constante de

equilibrio.

-1ogK~ = M101 AS0 [7.44]


2.31<
Efecto de la Temperatura 341

Por otra parte, el efecto producido por la variacin de temperatura sobre la constante de

equilibrio, va a venir dado por la ecuacin de Vant Hoff:

dhbt - AH0
dT RT2 [7.45]

Dicha ecuacin integrada entre los lmites de K~ y K~, y T


1 y TQ se transforma en una

expresin, a partir de la cual puede obtenerse tambin el cambio entlpico:


0 ~
AH [7.46]
ql R T~T
1

En cuanto a la obtencin de la Energa de Activacin para cada una de las reacciones, la

ecuacin ms usualmente empleada es la fonnulada empricamente por Arrhenius, que indica que la

constante cintica de una reaccin qumica varia exponencialmente con la inversa de la temperatura.

Dicha ecuacin puesta en forma lineal es la que se expresa a continuacin

.E
O R T [7.47]

Teniendo en cuenta tales expresiones, se calcularon los diferentes parmetros termodinmicos

para los diferentes sistemas de esterificacin considerados en esta memoria.

Tabla 7.17. Parmetros termodinmicos, Factores preexponenciales y Energas de activacin.

SISTEMA (KcaIIrnol) (cal/rnol.IC) (mol/min.g) (KcaI/mol)


4 10.43
Oleato de Oleilo 16.73 56.49 2.002x10
OJeato de Cetilo 32.24 99.23 2.849x102 23.84
Miristato de Miristilo 12.36 43.47 23.880 6.76
Oleato de Isopropilo 158.02 477.59 2.171x105 12.25
Pabuitato de Isopropilo 25.22 76.06 3.673x1(? 11.66
2-Metil-Butirato de Odo 15.08 47.62 1.162 2.67
342 Modelado Cintico

De manera anloga, se llev a cabo un estudio de la variacin de las dems constantes de

equilibrio, caractersticas de cada una de las etapas involucradas en el mecanismo de reaccin

correspondiente, dependiendo del valor de la temperatura. Para ello, se emple la ecuacin de Vant

Hoff, ajustndose a ella los valores de las constantes obtenidas para cada temperatura.

7.7.1 EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE Km

En la tabla 7.18 se muestran los valores de entalpa standard y entropa standard calculados

para cada una de las constantes de Michaelis-Menten obtenidas anteriormente, tanto para reactivos

como para productos, en los diferentes sistemas de esterificacin enzimtica planteados en esta

memoria

Tabla 7.18. Parmetros termodinmicos correspondientes a las constantes de Michaelis-Menten.

K~ <~ Krnw
=9
SISTEMA MC AS MC AS MC A5 AH AS

(KcaJ/mol) (calhnoLK) (Kcalhnol) J (calhnol.K) <Kcalhnol) (caihnol.K) (KcaI/mol) (cal/n,oI.IC)

00 9.89 24.80 5.76 12.67 8.63 1.88 6.14 4.57


OC 15.57 40.61 15.04 39.11 26.69 57.92 18.78 41.19
MM 13.68 32.47 15.11 37.10 7.86 4.54 14.12 32.15
IPO 15.56 41.77 9.55 24.14 . - -

IPP 21.66 57.30 9.89 25.21 54.62 138.97 42.28 111.92


MEO 6.64 16.08 5.24 11.04 5.39 1.95 7.24 12.22

En las figuras 7.37, 7.38, 7.39 y 7.40 se muestran las representaciones correspondientes a las

constantes de Michaelis-Menten para cada uno de los reactivos y productos frente a la inversa de la

temperatura
Efecto de la Temperatura 343
in KmAo

1
2.8 2.9 e 3.1
lAxES (1/E)

e ~ OC * MM ~ PO IP? -4-- MEO

Figura 7.37. Influencia de la temperatura sobre K~0.

-In KmM
6

1.
2.8 LO 8 tI
it xIS (1/E)

a 00 -~ OC --~ MM -~ PO --~ PP -4-- MEO

Figura 7.38. Influencia de la temperatura sobre K.,~.


344 Modelado Cintico
In KznEs

14

13

12

11

lo

a
2.8 2.9 3 3.1
r~n (i/~

e-- ~ --~ OC ~ MM -~ WP +- MEO

Figura 7.39. Influencia de la temperatura sobre K,,,~.

-in RaY
9

3
2.8 2.9 3 tI
1/TrES (11K)

e ~ ~ OC ~ MM ~ PP --4- lIBO

Figura 7.40. Influencia de la temperatura sobre K,,,~.


Efecto de la Temperatura 345

7.7.2 EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE K1

El efecto de la temperatura sobre las constantes de inhibicin es similar al observado en el caso

anterior. As una disminucin de la temperatura de reaccin produce un aunento de las constantes de

inhibicin, lo que supone un desplazamiento de dicho equilibrio hacia la formacin de complejos

estables, en detrimento de la fonnacin de complejos intermedis, que posteriormente dan lugar a la

formacin de los productos deseados.

En las tablas 7.19 y 7.20, se muestran los parmetros termodinmicos correspondientes a las

constantes de inhibicin respecto de los reactivos, cido y alcohol, y respecto de los productos de

reaccin, ster y agua. Dichos parmetros corresponden a la entalpa standard y entropa standard de

cada uno de los equilibrios de formacin de los complejos correspondientes.

Tabla 7.19. Parmetros termodinmicas correspondientes a las constantes de Inhibicin con


respecto a los reactivos.

K. KV.

SISTEMA (KcI/mol) (caIhnoLK)


AS MC (cajl.K) (Kcsihnol>
fl (calhnol.K)
( (KcaI/mol>
nO <caIlmoI.K>
1
(KeaIhnoI)
00 23.11 54.60 9.45 13.36 5.98 3.30 3.50 3.35
OC 42.91 110.28 18.37 43.08 25.64 60.21 46.23 121.74
MM 9.53 18.16 23.44 60.60 7.69 10.91 12.83 28.51
IPO 54.63 139.57 57.75 151.23 12.90 23.19 16.15 42.18
IPP 10.80 2283 42.89 107.42 14.35 28.04 13.03 35.23
MRO 26.49 60.01 12.79 22.86 7.87 8.62 4.58 1.63

En las figuras 7.41, 7.42, 7.43 y 7.44, est representada la variacin de las constantes de

inhibicin de los reactivos frente a la inversa de la temperatura, para los diferentes sistemas de

esterificacin considerados.
346 Modelado Cintico

Tabla 7.20. Parmetros termodinmicos correspondientes a las constantes de Inhibicin con


respecto a los productos de reaccin.

SISTEMA =-
AH AS AH AS AH 1 AS AH 1
1AS
<XcaIhuoI) (cal/moLK) (KcaIhnoI> (caJhnoI.K) (Kcallniol)j (calhnol.K) (KcaL/mo) (caL/mol.K)

00 549 207 301 0.42 13.65 31 73 6.285 3.50

OC 13.90 28.38 12.00 26.78 32.86 88.50 11.96 24.78

MM 22.34 56.69 10.87 24.42 19.22 49.04 12.83 28.51

PO - - - - 50.43 136.23 32.89 85.30


PP 24.69 82.88 26.75 28.04 - - - -

MBO 26.26 96.97 11.55 26.55 - - - -

Las figuras 7.45, 7.46, 7.47 y 7.48 muestran la variacin de las constantes de inhibicin con

respecto a los productos de reaccin frente a la inversa de la temperatura de operacin, para cada uno

de los sistemas de esterificacin estudiados.

Desde el punto de vista cintico, el sistema ms favorecido es el correspondiente a la sntesis

de 2-metil-butirato de oleilo, ya que el salto energtico necesario para vencer su energa de activacin

es el ms bajo de los seis sistemas estudiados. Sin embargo, es la sntesis de oleato de cetilo la menos

favorecida desde el punto de vista cintico, por cuanto que la energa de activacin necesaria para que

la reaccin comience es la ms elevada.

Por otra parte, teniendo en cuenta que la constante de Michaelis-Menten da una idea de la

concentracin necesaria en el medio de reaccin de la especie a la que est referida, para que la

velocidad de reaccin sea la mitad de la velocidad mxima; puede decirse que los sistemas ms

favorecidos, desde el punto de vista del salto energtico necesario, son los de obtencin de oleato de

oleio y sntesis de 2-metil-butirato de oleilo, si tenemos en cuenta tanto los reactivos como los

productos de reaccin.
Efecto de la Temperatura 347

la KIAc
12
11

la
9
a
7
e
6
4
3
2.8 2.9 3 3.1
JrxEa (1/K)

e- 00 --~ OC * MM ~ FO ~ PP -4-- MEO

Figura 7.41. Influencia de la temperatura sobre K~.

-1nKIA1
12
II
10
9
a

7
e
6
4
3
2
1
o
2.8 2.9 3 3.1
1/TxES (1/K)

e 00 ~ OC 316-- MM -~ ro y PP 4 no

Figura 7.42. Influencia de la temperatura sobre K~.


la KUc
348 Modelado Cintico

6
2.8 2.9 8
3.1
1/TrES (1/K)
e-- 00 a ~ ~~-- MM a-- u ~p -4 mo

Figura 7.43. Influencia de la temperatura sobre K~0.

-In rin
a
7

e
6


3
2

1
0
2.8 2.0 3 8.1
1/TxES (1/K)

~ 00 OC * MM ~ PO 4- PP 4 MEO

Figura 7.44. Influencia de la temperatura sobre K~.


-InKiW Efecto de la Temperatura 349

2
2.8 2.9 3 tI
1/TxES (1/E)

a-- ~ OC ~6- MM -~ PP --+ MEO

Figura 7.45. Influencia de la temperatura sobre K~.

la DE.
12
II
lo
9
8
7
e
a
4
3
2
2.8 2.9 3 3.1
1/liES <1/E)

~G 00 ~ OC 4*-- MM -~4- PP --4-- MEO

Figura 7.46. Influencia de la temperatura sobre K~.


350 Modelado Cintico

-la KiEu

1
2.8 2.9 a 3.1
i/TxES (1/E)

e ~ -~ OC * MM ~ PO

Figura 7.47. Influencia de la temperatura sobre K1~.

la K9Es
a

3
2.8 2.9 3 tI
I/T xiS <1/E)

0 00 ~ OC * MM ~ 11>0

Figura 7.48. Influencia de la temperatura sobre ~


Efecto de la Temperatura 351

Sin embargo, el sistemas ms desfavorecido, en cuanto al salto energtico necesario para la

constante de Michaclis-Menten, es la sntesis de palmitato de isopropilo para los productos de reaccin

y para el cido palmtico. No obstante, las sntesis de oleato de cetilo y miristato de miristilo, son las

ms desfavorables, si se tiene en cuenta el salto energtico necesario para alcanzar la concentracin de

alcohol cetlico o alcohol miristico necesarias para que la velocidad de reaccin sea la mitad de la

velocidad de reaccin mxima correspondiente.

En cuanto a los fenmenos de inhibicin se refiere, pueden considerarse dos grupos de

equilibrios: equilibrios de inhibicin debido a la formacin de complejos con reactivos y complejos de

inhibicin en los que intervienen los productos de reaccin. Dentro de los reactivos, si se considera el

cido graso de partida, la tendencia a fonnar complejos indeseables es mayor para la sntesis de

miristato de miristilo y palmitato de isopropilo para el complejo binario principal, siendo en este caso

los de menor inhibicin los sistemas de obtencin de oleato de isopropilo y oleato de cetilo.

En cambio, cuando el complejo de inhibicin obtenido es temario para el cido de partida, los

sistemas con mayor tendencia a la fonnacin de dicho complejo son los de sntesis de oleato de odo

y 2-metil-butirato de oleio, estando menos favorecida esta inhibicin para el sistema de obtencin de

oleato de cetilo.

Cuando la inhibicin est referida al alcohol, la formacin de complejos indeseables est

favorecida paralos sistemas cido oleico/alcobol oleico y cido 2-metil-butrico/alcohol oleico; mientras

que los sistemas menos inhibidos son los de sntesis de oleato de isopropio, palntato de isopropilo

y oleato de cetilo.

Por otra parte, la inhibicin debida al agua presente en el medio de reaccin est

energticamente favorecida para la sntesis de oleato de odo, siendo ms desfavorable para la sntesis
352 Modelado Cintico

de palmitato de isopropilo. En cambio, aunque la inhibicin debida al ster formado es ms favorable

para el sistema cido oleico-alcohol oleico, los sistemas que presentan un mayor impedimento hacia

la formacin de complejos de inhibicin con el ster son los de sntesis de palmitato de isopropilo, 2-

metil-butirato de oleilo y oleato de isopropilo.

Estos resultados confirman que los fenmenos de inhibicin se ven favorecidos cuanto mayor

es la longitud de la cadena de los reactivos de partida, vindose disminuida la inhibicin a medida que

los reactivos son de menor peso molecular. Sin embargo, esto no significa que los rendimientos

alcanzados en ster sean mejores cuando los reactivos de partida son de menor peso molecular, sino

que, el nivel de conversin obtenido va a depender de la naturaleza y la reactividad de las especies de

partida, adems del factor trmico.


8. SIMULACION TEORICA COMO BASE PARA LA

OPTIMACION Y CAMBIO DE ESCALA DEL

PROCESO DE ESTERIFICACION
Simulacin Terica como base para la Optimacin y Cambio de Escala 355

A fin de conocer hasta que punto los resultados obtenidos en el modelado cintico representan

adecuadamente los datos obtenidos experimentalmente, se decidi llevar a cabo la simulacin

matemtica de las reacciones de esterificacin estudiadas con diferentes condiciones de operacin, para

despus compararlos entre s y dar una idea de la bondad de los modelos desarrollados. La importancia

de dicha simulacin reside en la posible prediccin de la evolucin de la conversin de reactivos en

productos a lo largo del tiempo de reaccin.

Los experimentos comprobados cxi esta simulacin fueron los realizados para los seis sistemas

de esterificacin enzimtica, con una relacin molar cido/alcohol de 1/1. Para cada sistema de reaccin

se valoraron los datos experimentales obtenidos a las tres temperaturas de operacin que cubren el

intervalo fijado para dicha variable.

Tambin se tuvo en cuanta la variacin de la concentracin inicial de catalizador y, por ltimo,

la simulacin se llev a cabo tanto en condiciones de irreversibilidad (presin reducida) en los casos

en los que fue posible la experimentacin en estas condiciones, como en condiciones de reversibilidad

(presin atmosfrica), en todos los casos.


356 Simulacin Terica como base para la Optimacin y el Cambio de Escala

8.1 SIMULACION DE LA SINTESIS DE OLEATO DE OLEILO

A partir de los resultados obtenidos para la sntesis de oleato de oleilo en el captulo anterior,

se procedi a comprobar los modelos cinticos. As en las figuras 8.1 a 8.10 se muestran los resultados

de la simulacin del sistema en condiciones de presin reducida.

Como puede observarse, los resultados obtenidos empleando el modelo cintico calculado se

ajustan razonablemente a los resultados experimentales. Prueba de ello es que en la mayora de los

casos, el error no sobrepasa el 15%. Dicho error se ha calculado mediante un anlisis de residuos, en

el que se representa la diferencia entre la conversin obtenida experimentalmente y la conversin

calculada, referida-a la primera, frente a la propia conversin experimental.

As, en la figura 8.11, se presenta el anlisis de residuos para los resultados obtenidos en las

reacciones realizadas en rgimen irreversible, es decir a presin reducida. Dicha figura demuestra que

el error cometido al aplicar el modelo matemtico obtenido no sobrepasa el 20% en la mayora de los

casos; siendo el error medio obtenido de un 12.37%, y la distribucin de los valores de los errores

obtenidos no presenta tendencias significativas.

Dichos resultados demuestran que la aplicacin del modelo desarrollado, para la reaccin de

esterificacin entre el cido oleico y el alcohol oleico catalizada por la lipasa comercial de Mucor

miehei, Lipozyme IM-20, cuando se opera en condiciones de vaco, permite unareproduccin adecuada

de los datos experimentales.

Esto indica que el modelo desarrollado puede aceptarse como modelo cintico del sistema

propuesto, al menos dentro de las condiciones de operacin fijadas, siempre y cuando se elimine en

continuo el agua fonnada en el medio de reaccin.


Simulacin de la Sntesis de Oleato de Oleilo 357

Figura 8.1. Sinmlacin 01: Sntesis de Oleato de Oleio, 6OmmHg, 600C, 3% catalizador.

oonvere36 n
1
0.0
0.8
0.7 * * * *--- *
0.6
*
0.5
0.4 O

0.3 g

*
0.2 -J
- Cataulada
0.1 * xperlmental

0 50 100 150 200


Tiempo <mm)
Oleato de Odio Catailzadosa 6%
Y. era Ps 00 .nmHg Aa/Ah 1/1

Figura 8.2. Simulacin 02: Sntesis de Oleato de Oleio, 6OmmHg, 600C, 5% Catalizador.
358 Simulacin Terica como base para la Optimacin y el Cambio de Escala

1 Conversin
0.0
0,8
0,7
0.6
0.5 E

0.4
0.8
0.2 -j

- - Calculada
0.1 4.
* Expeseulmental

O 50 100 150 200


Tiempo <mm>
Oleato de Odio CatalIzador: 7%
Ti eoc Pi GO mmHg Aa/Ab 1/1

Figura 8.3. Simulacin 03: Sntesis de Oleato de Oleio, 6OmmHg, 600C, 7% catalizador.

Conve re36n
1
0.B
0.8
0.7
0.6 - * * 1* *
045 *~ -
*
0.4 --
0.3 e
0.2
Calculada
0.1 * Experimental
o
0 50 100 150 200
Tiempo <mm>
Oleato de Odio CatalIzador 3%
Y: WC Pi 00 mmHg Aa/Ah 1/1

Figura 8.4. Simulacin 04: Sntesis de Oleato de Oleio, 6OmmHg, 700C, 3% Catalizador.
Simulacin de la Sntesis de Oleato de Oleilo 359

Convereln
1
0.9
0.8
0.7 *
0.6
0.5 **

0.4 O

*
0.3 O

0.2 j

[ouad1
0.1 Experimental

O 50 100 150 200


Tiempo (mini
Oleato de Odio CatalIzador: 4%
1: WC Pi SO muHa Aa/Al: 1/1

Figura 8.5. Simulacin 05: Sntesis de Oleato de Oleilo, 6OmmHg, 700C, 4% catalizador.

CannraIOn
1
O.,
0.8
0.7 ~
3%- -
0.6 -
0.5
0.4 *
0.3 *
0.2 - - ambulada

0.1 * ExperImental
O
0 50 100 150 200
Tiempo <mini
Oleato de Odio Catalizador: 5%
7: ?~C Pa SouHo Aa/Ab III

Figura 8.6. Simulacin 06: Sntesis de Oleato de Oleilo, 6OmmHg, 700C. 5% Catalizador.
360 Simulacin Terica como base para la Optimacin y el Cambio de Escala

1 Conversin - -* * -

0.0
0.8 ~ 1*

0.7 *
o.,
0.6
0.4
0.8 O

0.2 -

- - Catou lada
0.1 * Experimental
0~
o 50 100 150 200
Tiempo (mm>
Oleato de 01db Catalizador 7%
7: ?00 Ps 60 nimHg Aa/Al. 1/1

Figura 8.7. Simulacin 07: Sntesis de Oleato de Oleio, 60mmHg, 700C, 7% catalizador.

Conversin
1
o..
0.8
0.7 ~-*-- - - - * * 1*-~ ---1%
0.6 *~*~ - -
0.5
*
0.4
0.8 *
*
0.2~ II
$ Caloulada
0.1
O
0 50 100 150 200
Tiempo <mm>
Oleato de Odio CatalIzador: 8%
7: 800 Ps 00 mmHg Aa/Ms 1/1

Figura 8.8. Simulacin 08: Sntesis de Oleato de Oleio, 6ommiHg, 800C, 3% Catalizador.
Simulacin de la Sntesis de Oleato de Oleilo 361

Conversin
1
0.9
0-8 * * * * *
0.7 *
0-6
0.5 -

0.4
0.8 -

0-2 Calculada
0.1 * Experimental
ffl
o 50 100 150 200
Tiempo <niln)
Oleato dd Odio Catalizador: 5%
T. rc Pm SOmnmHg Aa/Al: 1/1

Figura 8.9. Simulacin 09: Sntesis de Oleato de Oleio, 6OmmHg, 800C, 5% catalizador.

Conversin
1
os ~~--*~ *~-.- 4* --ilE. le *
ajar
0.7
0.6
0.5*
04
08
0.2
0.1

0 50 100 150 200


Tiene (ma>
Oleato dd OdIo Catalizador 7%
T: ero Pa 80 mmMg Aa/Al. 1/1

Figura 8.10. Simulacin 010: Sntesis de Oleato de Oleilo, onnnHg, 8~C, 7% Catalizador.
362 Simulacin Terica como base para la Optimacin y el Cambio de Escala

-~

o o o o o o
o
9

9
+ o
o
N)

1
1~
o
U>

~
00
.4
2
o

Figura 8.11. Anlisis de residuos para la sntesis de Oleato de Oleilo en condiciones de


irreversibilidad.

;
Simulacin de la Sntesis de Oleato de Oleilo 363

1 Conversin
0,9
0.8 -

0,7 -

0,6
0.5
0,4
0.8
0,2 -A * Experimental
0,1 .1
Calculada

o 50 100 150 200


Tiempo (mm>
Oleato de OdIo Catallzadoru 8%
T. 60C P. 710 mmHm Aa/Al: 1/1

Figura 8.12. Simulacin Ol: Sntesis de Oleato de Oleilo, 7lOmmHg, 600C, 3% catalizador.

Conversin
1
Olla
0.8
0.7
0.6
0.8
0,4
0,3
0,2 * ~imen~7
0,1 I--CalouladaI
LJ
o-
o 50 100 150 200
Tiempo (mm>
Oleato de OdIo CatalIzador 5%
Tu SOC Pu 710 mmHu Aa/Mi 1/1

Figura 8.13. Simulacin 012: Sntesis de Oleato de Oleilo, 7lOmmHg, 6mC, 5% Catalizador.
364 Simulacin Terica como base para la Optimacin y Cambio de Escala

Conversin
1
0.0
0.8 -

0.7 - * *
O.. - A

0.5 O

0.4 E

0.8
0.2
[mentV1
o.iJ A- Calculada

o 50 100 150 200


Tiempo <mini
Oleato de Odio Catailzadon 7%
Tu WC Pi ?1O mmMg Aa/Al: 1/1

Figura 8.14. Simulacin 013: Sntesis de Oleato de Odo, 7lOmmHg, 600C, 7% catalizador.

Converaln
1
0.9
0.8
0.7
0.6 - - -* *
0.5 -*

0.4 -
0.8k
0.2 * Experimental
0.1 - - Calou lada

o
0 50 100 150 200

Tiempo <mini

Oieato de Odio Catailzadon 3%


Ti ?0C Ps 710 umHg Lo/Al, 1/1

Figura 8.15. Simulacin 014: Sntesis de Oleato de Oleilo, 71OmmHg, 700C, 3% Catalizador.
Simulacin de la Sntesis de Oleato de Oleilo 365

Converaln
1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.6
0.4
0.8
*
0.2 [~~rmentaV1
0.1
w
o 50 100 150 200
TIempo <mm)
Oleato de 01db CatalIzador, 5%
Tu 70C Pu 710 mmHg Aa/Al: 1/1

Figura 8.16. Simulacin 015: Sntesis de Oleato de Oleilo, 71OmmHg, 7mC, 5% catalizador.

ConversIn
1-
0.9
0.8 -
0.7-
0.6 -

0.6 /
-

0.4 1 -

0.8 * -

0.2 -

0.1
o-:.
0 80 100 50 200
Tiempo <mm)
Oleato de Odio Oatallzadoru 7%
Ti 700 Pu 710 mmHg Aa/Mu (/1

Figura 8.17. Simulacin 016: Sntesis de Oleato de Odo, 7lOmmHg, 700C, 7% Catalizador.
366 Simulacin Terica como base para la Optimacin y Cambio de Escala

Conversin
1
0.9
0,8 -

0,7
0,6 * * *

0(05
*
0.4 e
0,8 * -

0,2 O [Y~mentaV1
0.1

o 50 100 150 200


Tiempo <mm>
Oleato de Odio CatalIzador: 8%
Tu 80C Pu TO mmHg Aa/Al: 1/1

Figura 8.18. Simulacin 017: Sntesis de Oleato de Oleio, 71OmmHg, 800C, 3% catalizador.

Conversin
1
0.9
0.8
0.7 - *~*
0.6 -#
0.5
A

0.4
0.8
0.2 II
*Experlmental
0.1 1
o
0
50 100 150 200
Tiempo <mm>
Oleato de Odio CatalIzador: 5%
Ti S~C Pi 710 mmNg Aa/Al: 1/1

0C, 5% Catalizador.
Figura 8.19. Simulacin 018: Sntesis de Oleato de Oleio, 7lOmmHg, 80
Simulacin de la Sntesis de Oleato de Oleilo 367

Convereln
1
- ~ ..-*.. * * -*

0.7-
0-6
0.O
0.4
*
0.8 ~
0.2 4 * Ixpeuimental
0.1 -- Calculada

0 50 100 150 200


Tiempo <mn>
Oleato de 01db Cat.llzadoru 7%
T. sra Ps 710 mm>lg Lo/Al; 1/1

Figura 8.20. Simulacin 019: Sntesis de Oleato de Oleilo, 7IOmmHg, 800C, 7% Catalizador.

En las figuras de la 8.12 a la 8.20, se representan las curvas de simulacin obtenidas mediante

la aplicacin del segundo modelo propuesto. Dichas curvas indican un bondad del modelo aceptable,

comparadas con los resultados obtenidos experimentalmente.

Al igual que en el caso anterior$ se llev a cabo un anlisis de residuos, referido a la

conversin experimental. La figura 8.21 muestra dicho anlisis. En ella puede observarse que en la

mayora de los casos el error cometido no sobrepasa el 20%, siendo el error medio del 10.41%, lo que

da una idea de la exactitud del modelo a la hora de reproducir los resultados experimentales.

Por tanto puede suponerse que el modelo matemtico obtenido se ajusta razonablemente a la

ecuacin cintica de la sntesis de oleato de oleio cataflzada por Ja lipasa comercial Lipozyme IM-20,

cuando el sistema opera a presin atmosfrica.


368 Simulacin Terica como base para la Optimacin y Cambio de Escala

1 1
N) O> -~ CP
0 O 0 000000
o
9

9
u
2 Ps)

-4
2
ca

.8~.

2 SG.
o,
SS
2
o>
o
*
9
4.

9 00

2
CD

Figura 8.21. Anlisis de residuos para la sntesis de Oleato de Odo en condiciones de


reversibilidad.

;
Simulacin de la Sntesis de Oleato de Cetilo 369

8.2 SIMULACION DE LA SINTESIS DE OLEATO DE CETRO

Al igual que para el sistema anterior, para la sntesis de oleato de cetilo se procedi a realizar

la simulacin de experimentos a partir de los modelos matemticos desarrollados. As en las figuras

de la 8.22 a la 8.26, se presenta la simulacin de los experimentos correspondientes al sistema

operando en condiciones de irreversibilidad, mientras que en las figuras de la 8.27 a la 8.31 se

muestran los experimentos realizados en condiciones de presin atmosfrica. -

A fin de cuantificar la bondad del modelo, se llev a cabo el anlisis de residuos

correspondiente a cada uno de los datos experimentales medidos en las diferentes reacciones. Para ello

se llev a cabo la diferencia relativa existente entre el valor de conversin experimental y el valor de

conversin calculado, referida a la conversin experimental, frente a los valores de la misma.

Los resultados de dicho anlisis se muestran en la figura 8.32, revelndose en la mayora de

los casos un error no superior al 20% y una distribucin de dichos residuos sin tendencias aparentes,

lo que supone un ajuste razonable de los modelos propuestos. Concretamente, el error medio obtenido

para todos los experimentos es del 12%, siendo para los experimentos realizados cuando el sistema

opera en condiciones de irreversibilidad del 11%, mientras que cuando se trabaja en condiciones de

presin atmosfrica, el error medio alcanza el 12%.

Estos resultados indican que los modelos obtenidos pueden considerarse como ecuaciones

cinticas para el sistema de esterificacin entre el cido oleico y el alcohol cetlico catalizado por la

lipasa inmovilizada de Candida antarctica, Novozym 435, por cuanto que los errores cometidos a la

horade predecir la conversin en funcin del tiempo de reaccin no son representativos desde el punto

de vista tanto del comportamiento del sistema de reaccin como del clculo de parmetros de diseo

del reactor.
370 Simulacin Terica como base para la Optimacin y Cambio de Escala

Conversin
1
0.9
0.8 -
O -o

0.7 - o--~ ti-

0.6
0.5 1
E

0.4 -D
O
0.3
O
0.2 O o Experimental
0.1 - - Calculada

o 30 60 90 120
Tiempo <man)
Oleato de Cetilo CatalIzador: 8%
Tu WC Pu GO mmHg Aa/ah 1/1

Figura 8.22. Simulacin Cl: Sntesis de Oleato de Cetilo, 6OmmHg, 700C, 3% catalizador.

Conversin
1
0.9
0.6 o O O El

0.7 -

0.6 o
o

0.5 o

0.4
0.8
0.2 0 Experimental

0.1 - - Calculada

O
0 30 60 <mm>
Tiempo 90 120

Oleato de Catulo CatalIzador: 5%


Y. WC Pu 60 mmHg Aa/al. 1/1

Figura 8.23. Simulacin C2: Sntesis de Oleato de Cedio, 6Omml-lg, 700C, 5% Catalizador.
Simulacin de la Sntesis de Oleato de Cetilo 371

Conversin
1
0.S
0.8 - ..o. a.-..

0.7
1
0.6
1

0.5
/
0.4 -

0.8
0.2 O Experimental
0.1 u- Calculada
u
o 80 60 90 120
Tiempo <mm>
Oleato de GatIto Oatallzadcrs 7%
Tu 700 Pm 50 mmHg Aa/al. 1/1

Figura 8.24. Simulacin C3: Sntesis de Oleato de Cetilo, 6OmmHg, 70C, 7% catalizador.

Conversin
1
0.9
E- ~ o- - o
0.8
0.7 - A
0.6 -

0.5
0.4 -

0.8 u
0.2 42 [~rm.ntaV1
0.1 u-
nl
o 30 60 90 120
Tiempo <mm)
Oleato de Cetlo Catallzadon 5%
Tu7SO P. 50 mmHg Lo/Alu 1/1

Figura 8.25. Simulacin C4: Sntesis de Oleato de Cetilo, 6OmmHg, 750C, 5% Catalizador.
372 Simulacin Terica como base para la Optimacin y Cambio de Escala

Conversin
1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5 - 9--
0.4
0.8
0.2
O Experimental
0.1 - - Calou lada
OD
O 30 60 90 120
Tiempo (mm)
Oleato de Cetilo Catalizador: 5%
Y. 80 O Ps SO mmHg Aa/Ah 1/1

Figura 8.26. Simulacin C5: Sntesis de Oleato de Cetilo, 6OmmHg, 800C, 5% catalizador.

Comversin
1
0..9
0.8
0.7 o- - o E

0.6
A1;-
0.4 ,
A
0.3 o
0.2 A It3Bzpedmeatall
II
0.1
e
0 20 40 so mo iso no 140
tiempo (ma>
Oleas de Celle CagaIlador: 8%
T: WC P: 710 nlig Aa~A1s 111

Figura 8.27. Simulacin C: Sntesis de Oleato de Cetilo, 7lominiHg, 700<2, 3% Catalizador.


Simulacin de la Sntesis de Oleato de Cetilo 373

Con,eruldn
1
0.9 -

0.8 -

ej -
a .......~

0.5- 7cl
~0
os-~
0.2 jI ~

Calculada

0 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo (sin>
Oleat. de Cetile Catelisdon 5%
Tu WC Fm nO aHg AciAl: 111

Figura 8.28. Simulacin C7: Sntesis de Oleato de Cetilo, 7lOmnmHg, 70C, 5% catalizador.

CouieraL~
1

os -

0.8 -

07 -e-

,~ 7

0.4-7
o
ej
0.2
-i 0
011 ~--- Calsulada

g~l u
0 20 40 60 80 100 120 140
Tiempo (iSa>
Oleato de Cetilo Catallmderm 7%
b 7OC P: 710 mmz AciAl: 111

Figura 8.29. Simulacin <28: Sntesis de Oleato de Cetilo, 71 OmmHg, 7mC, 7% Catalizador.
374 Simulacin Terica como base para la Optimacin y Cambio de Escala

Convermi6n
1
0.9
0.8 -

0.7
0.6
0-
0.5
0.4 - o

0.3 - o

0.2 ~00
o Expertmeatal
0.1 - - - Calulada

o 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo (mix>
Oleato d. Cetilo Catallsdon 5%
Ti WC Pi 110 maflg AciAl: 1/1

Figura 8.30. Simulacin <29: Sntesis de Oleato de Cetilo, 7lOmmHg, 750<2, 5% catalizador.

Conves ui6a
1
03 ~.---o----O o
o.s
o.?
1

0.6
0.5
0
0.4 o

0.2 0 Expertaestal
0.1 - Calculada
o

20 40 60 80 100 120 140


Tiempo (ma)
Oleato de CMII. Calalladon SU
Ti SOC Pu 710 mmHg AiAJs 1/1

Figura 8.31. Simulacin <210: Sntesis de Oleato de Cetilo, 7lOmmHg, 800C, 5% Catalizador.
Simulacin de la Sntesis de Oleato de Cetilo 375
o
a
o
ci
-3<
Co o
ci
-ti, c
o
ci 344
e
o
ci u
-a-
s
-o
rr o
o o o o o
CN
1
Figura 8.32. Anlisis de Residuos para la Sntesis de Oleato de Cetilo.
376 Simulacin Terica como base para la Optimacin y Cambio de Escala

8.3 SIMULACION DE LA SINTESIS DE MIRISTATO DE MIRISTILO

Anlogamente a los casos anteriores, se llev a cabo la simulacin de experimentos para el

sistema de esterificacin entre el cido mirstico y alcohol mirstico, empleando como catalizador

enzimtico inmovilizado, la lipasa de Candida anarczica, conocida comercialmente con el nombre de

Novozym 435. Las figuras de la 8.33 a la 8.37 muestran las curvas de simulacin empleando el modelo

obtenido cuando las condiciones de operacin permiten trabajar de fonna irreversible, mientras que las

figuras de la 8.38 a la 8.42 muestran las curvas correspondientes a los experimentos realizados a

presin atmosfrica. A simple vista puede suponerse que ambos modelos predicenrazonablemente los

resultados experimentalmente obtenidos.

Dicha suposicin se ve avalada por los resultados obtenidos al realizar el correspondiente

anlisis de residuos (ver figura 8.43), mediante el cual se han calculado los errores relativos para cada

una de las conversiones obtenidas aplicando los modelos matemticos propuestos, y comparndolas con

las medidas experimentales a lo largo del tiempo del tiempo.

Como puede observarse en dicho anlisis, la mayora de los residuos no alcanzan el 20%,

siendo el valor medio de los mismos de un 9%. Si se consideran por separado los residuos calculados

para cada modelo propuesto, se observa un ligero aumento del error para el modelo que considera la

reaccin en condiciones de reversibilidad. As el error medio obtenido para el modelo que considera

presin reducida, es tan slo del 8%, mientras que cuando se opera a presin atmosfrica, el modelo

proporciona un error medio que alcanza el 9%.

Sin embargo, en ambos casos puede considerarse que los errores cometidos no representan

grandes diferencias con los resultados experimentales. Por tanto los dos modelos pueden considerarse

como suficientemente vlidos para una prediccin adecuada del campo experimental ensayado.
Simulacin de la Sntesis de Miristato de Miristilo 377

Converui6s
1
0.9
0.8

ej o
0.5 -

0.4 -/
OJ -

/
0.2 9 -
O Bzperlaental
Calculada
o.
u
0 20 40 60 80 100 120 140
Tiempo (ma>
Miristais do Mirletilo CaIalIden SU
T: 10C F 60 mmEg AciAl: 1/1

Figura 8.33. Simulacin MI: Sntesis de Miristato de Miristilo, 6OmmHg, 6mC, 5% catalizador.

C.anrSa
1
O.,
0.8 O~ -----0
0.~7 O ~~

ej - -E
-E

0.5
1
0.4 -1
0.8 /
o
0.2
0.1
Os
-E

Lzriti
0 20 40 60 80 100 120 140
Tiempo (ma>
Midatato de MIflhtil. CatalIdsn 8%
Ta ?0C Pi LS maflg AciAl: 1/1

Figura 8.34. Simulacin M2: Sntesis de Miristato de Miristilo, OmnIl-lg, 700C, 3% Catalizador.
378 Simulacin Terica como base para la Optimacin y Cambio de Escala

Couve,ui6s
1 - o o
0.9
0.8 0-
0.? 0-
0.6

0.5
o
t4+ o

ej E

0
0.2 O

0.1 -t

w
o 20 40 60 80 100 120 140
Tiempo (ma>
MidSate da Miristile Cetallador: SS
Tu 7~C Pi 40 umu talMa 111

Figura 8.35. Simulacin M3: Sntesis de Miristato de Miristilo, 6OmmHg, 700C, 5% catalizador.

Coavereidm
1
0.9 --~

0.8 -

0.7 0-A
A
0.6
A
0.5 0
0.4

0.2 0 0 Uxpertmeutal
0.1 - - Calculada
O
20 40 60 SO 100 120 140
Tiempo (ma)
Midhtate da MirtutIl. Ca*altmdon 75
Tu ?OC Pi 50 mmHg AciAl: 111

Figura 8.36. Simulacin M4: Sntesis de Miristato de Miristilo, 6OmmHg, 700<2, 7% Catalizador.
Simulacin de a Sntesis de Miristato de Miristilo 379
Conwruim

1 o
0.9 o
0.S
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2 o ~
0.1 Calculada

0 20 40 60 SO 100 120 140


Tiempo (mm>
Mirlatato de Miulatila Catmllmdon SS
7: 50C Pi 60 mmHg AciAl: 111

Figura 8.37. Simulacin MS: Sntesis de Miristato de Miristilo, GOmnMg, 800<2, 5% catalizador.

Comet6n
1
0.9
0.8 -

o.? - ~---~ --- o


0.6 -
o

0.2 O Bzperaeutal
0.1 i.7

0 40 60 80 100 120 140


Tiempo (mi.>
Mirlan de Mirtatile Catallden 5%
Y: E0C Pi 710 mH~ AciAl: lii

Figura 8.38. Simulacin M6: Sntesis de Miristato de Miristilo, 7lOmniHg, 600<2, 5% Catalizador.
380 Simulacin Terica como base para la Optimacin y Cambio de Escala

Cosverui6a
1
0.9
0.8 -
- -o. - - -~ --- o O
0.? -0~
O-.-
0.6
O-
0.5
0.4 0
,

0.3
O E

0.2 E
[~ea~7
O

<y
o 20 40 60 80 100 120 140
Tiempo (ma>
MirIsIso da MIflstIlo Catallzadon 8%
Ti 700 P: 710 maH Aa/Ah 1/1

Figura 8.39. Simulacin M7: Sntesis de Miristato de Miristilo, 7lOmmHg, 700<2, 3% catalizador.

Coavermis
1
o.,
0.8 O.~.-o----0.---,---o o
0.7
O

0.6 O

O., O

0.4
0.8 O II

0.2 Omxpeflmeatal

0.1
0<
20 40 60 80 100 120 140

Tiempo (ma>

MisJatata da Miristile CatalIden 8%


Ti 70C Pi nO meNg Ac/Al, 1/1

Figura 8.40. Simulacin M8: Sntesis de Miristato de Miristilo, 7lOmmHg, 700<2, 5% Catalizador.
Simulacin de a Sntesis de Miristato de Miristilo 381

Comrnuidn
1
0.9 ..-.o- --- O
0.8
-E-
0.? 9-

0.6 0

0.5 o,
0.4
0.3 -

0.2 - O Buperimental
03<1 Calculada
--1 0 3 -0.
VV
O 20 40 60 80 100 120 140
Tiempo (ma>
Miristata de Miristilo Cetalisda, 7%
Trn 70C Pi 715 meNg AciAl: 1/1

Figura 8.41. Simulacin M9: Sntesis de Miristato de Miristilo, 7lOmmHg, 700<2, 7% catalizador.

Coavenln
1
0.9
0.U o
0.7
0.6
o
0.5

0.4
0J
0.2 <> Esrimeatal

0.1 Calculada

5
0 20 40 60 80 100 120 140
Tiempo <sin)
Mirlutato da Mlrhtlio Cataltudsr: 5%
1: SOC P~ 710 meng AaIAt~ 111

Figura 8.42. Simulacin MIO: Sntesis de Miristato de Miristilo, 7lOmmHg, 800<2, 5% Catalizador.
382 Simulacin Terica como base para la Optimacin y Cambio de Escala

rs)
o o o o o o
o ZD

-o

(4

SG.
8
3D
a)
-ej

4
3D
CD 00
o

Figura 8.43. Anlisis de Residuos para la Sntesis de Miristato de Miristilo.


Simulacin de la Sntesis de Oleato de Isopropio 383

8.4 SIMULACION DE LA SINTESIS DE OLEATO DE ISOPROPILO

La simulacin de los experimentos realizados para a esterificacin del cido oleicocon alcohol

isoproplico, empleando como catalizador la lipasa de Candida antarceica inmovilizada, se muestra en

las figuras 8.44 a 8.48, en las que se puede apreciar una prediccin adecuada de los resultados

experimentales.

En este caso, slo se ha obtenido un modelo matemtico que contempla el sistema de reaccin

en condiciones de equilibrio reversible, puesto que la naturaleza de los reactivos impide la posibilidad

de operar a presin reducida para desplazar el equilibrio mediante la eliminacin de agua en continuo.

Sin embargo, el modelo se ha obtenido considerando que el sistema se comporta como si la reaccin

fuese irreversible, lo que significa que la reaccin inversa o de hidrlisis es despreciable frente a la

reaccin de esterificacin. Segn esto, las conversiones obtenidas concuerdan con los resultados

experimentales, dando lugar a un desplazamiento casi total del equilibrio de reaccin hacia la formacin

de los productos deseados.

La cuantificacin del error cometido al aplicar el modelo matemtico propuesto, se llev a cabo

mediante el anlisis de residuos que se presenta en la figura 8.49. En dicha figura se representa el

residuo como el valor procentual calculado como la diferencia entre el valor de la conversin

experimental y el valor de la conversin obtenida al aplicar el modelo propuesto para el mismo tiempo

de reaccin, referida al valor de la conversin experimental.

En dicho anlisis puede observarse que la mayora de los residuos estn por debajo del 15%,

obtenindose un error medio para todos los valores calculados de un 9.95%, lo que indica que la

prediccin de la conversin en funcin del tiempo mediante el modelo propuesto, tiene una validez

razonablemente buena para los objetivos perseguidos.


384 Simulacin Terica como base para la Optimacin y Cambio de Escala

Por otra parte, los resultados corroboran la posibilidad de considerar el sistema como

irreversible, al menos dentro de los intervalos fijados para las condiciones de operacin que gobiernan

el proceso.

Segiln esto, el modelo matemtico propuesto describe adecuadamente los datos experimentales,

por lo que puede ser considerado como vlido como modelo cintico para la reaccin de esterificacin

entre cido oleico e isopropanol catalizada por el sistema comercial Novozym 435.

Por lo tanto, el modelo podr aplicarse desde el punto de vista cintico, como base para el

diseo del reactor donde se vaya a llevar a cabo la reaccin, as como una fuente fiable de datos a la

hora de disear y predecir su comportamiento, desde el punto de vista de la instnimentacin y el

control del sistema.

Carusida
1
0.9
0.S
0.?
0.6
03
0.4
0.8

20 2da ~:mpo <uit> 1


100 120 140

IaePr.pIb Catali~or: 5%
Tu WC Pi nO waNg AciAl, lii

Figura 8.44. Simulacin II: Sntesis de Oleato de Isopropilo, 7lOmmHg, 650C, 5% catalizador.
Simulacin de la Sntesis de Oleato de Isopropilo 385

Coanraidu
1
09
0.8 z- s- E
0.? - 1/
.4,

0.6 - /

-a
03
0.4
*
0.3
0.2
0.1
o
0 20 40 60 80 100 120 140
Tiempo (ma>
OleaS. de Isopnptlo Catalfzator: 3%
Ta 70C Pi 110 umH AaiAIt li

Figura 8.45. Simulacin 12: Sntesis de Oleato de Isopropilo, 7lOmmHg, 700<2, 3% Catalizador.

Connrsiu
1
0.9 E
0.S -. E
E
1
0.7 -

0.6 -
03 E
0.4
0.8
0.2
0.1

O 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo (mi.>
Oleato de Isopapil. CatalfaBor: 5%
Y: 70C Pi 710 nHu AciAl: lii

Figura 8.46. Simulacin 13: Sntesis de Oleato de Isopropio, 7lOmmHg, 700<2, 5% catalizador.
386 Simulacin Terica como base para la Optimacin y Cambio de Escala

Comvetuin
1
0.9
0.U
o.?
0.6
03
0.4
03
0.2
.dll

0 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo (mAn)
OleaSe Se I..pmepile CatalISarrn 7%
Tu 70C r, iae mmli AciAl: 111

Figura 8.47. Simulacin 4: Sntesis de Oleato de Isopropilo, llOmmHg, 700<2, 7% <2atalizador.

Coanzuia
1
03
0.18
0..?
ej
01.5
0.4
ej
0.2
0.1

0 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo <ma>
OlieSe leeprepile Cmtaflsdon 5%
Tu TPO Pi iie nmHg AciAl: Ji

Figura 8.48. Simulacin 15: Sntesis de Oleato de Isopropilo, llOzmnHg. 750<2 5% Catalizador.
Simulacin de la Sntesis de Oleato de Isopropilo 387
________ EN
4<4< 4<
4
4 -p
5k
-> o
-9 00
4< ci LO
4<
o
(.0
o
8 <NI
O
O
EN
ci
s
.
-o
83
0
00000000
CO EN EN CO
u u
Figura 8.49. Anlisis de Residuos para la Sntesis de Oleato de Isopropilo.
388 Simulacin Terica como base para la Optimacin y Cambio de Escala

8.5 SIMULACION DE LA SINTESIS DE PALMITATO DE ISOPROPILO

La simulacin de los experimentos realizados para la sntesis de palmitato de isopropilo,

empleando como catalizador la lipasa de Candida anzarcrica se recoge en las figuras de la 8.50 a la

8.54. En ellas puede observarse que las curvas dadas por la aplicacin del modelo matemtico

desarrollado se ajustan convenientemente a los puntos experimentales representados, lo que indica que

el modelo puede emplearse como ecuacin cintica del sistema, al igual que en los casos anteriores.

Por otra parte, el anlisis de residuos presentado en la figura 8.55, confirma las hiptesis

supuestas, por cuanto que los valores de los residuos calculados se distribuyen al azar sin presentar una

tendencia definida, y sin alcanzar el 15% en la mayora de los casos, siendo el error medio obtenido

de tan slo un 9%

Counrsidu
1
0.9
0.8
0-ir
0.6 Aa- -

oes-
0.4-
4-
0.3 -

0.2 ~, SS-. - a Buperimeatal


0.1 -~ - - calculada
e-
0 20 40 60 80 100 120 140
Tiempo (sin>
Palaltata de Isepapile CatalIader: 5%
Tu <PC Pi nO waNg AciAl: Sil

Figura 8.50. Simulacin Pl: Sntesis de Palmitato de Isopropilo, YlOmmHg, 650C, 5% catalizador.
Simulacin de la Sntesis de Palmitato de Isopropilo 389

Conversin
1
0.9
0.8
0.?
ej
03
0.4
0.3
0.2
0.1

0 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo (mis>
PalmAn de I..pzopilo Cataltadcrz 8%
Tu 7OC Pi iie umH AciAl: lii

Figura 8.51. Simulacin P2: Sntesis de Palmitato de Isopropilo, 7lOmmHg, 70<C, 3% Catalizador.

Conversin
1
0.9
0.8
0.7
ej
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1

0 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo (mis>
ImImItate de Iapnplle CataliSern 5%
Tu ?OC Pi ?IS mmHg AciAl: Sil

Figura 8.52. Simulacin P3: Sntesis de Palmitato de Isopropio, 7lOmmHg, 700<2, 5% catalizador.
390 Simulacin Terica como base para la Optimacin y Cambio de Escala

Convenida
1
0.9
0.8-
0.? K -a--a A
0.6-
0.5
Ar
0.4
4v
0.I
0.2 ~AAA A Nzpetiueatal
A
04 - - Calculada
A

o 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo (ma>
Pele tala de leopnpile CetalImSon 7%
Y: ?OSC Pa 710 nHg AciAl: iii

Figura 8.53. Simulacin P4: Sntesis de Palmitato de Isopropilo, 7lOnunHg, 70~C, 7% Catalizador.

Comverui6a
1
0.9
0.8
o.? A A--
0.6 a--
A -
0.5
0.4
A
0.3
A
0.2 A lixpeuimeatal
0.1 [111111]
- - Calculada
O
0 20 40 60 SO 100 120 140
Tiempo (mi.>
PalmitaS Se Imeproptle CatalIzador: SS
Y: WC Pi 710 waNg AciAL VI

Figura 8.54. Simulacin PS: Sntesis de Palmitato de Isopropio, 7lOmmHg, 750<2, 5% Catalizador.
Simulacin de la Sntesis de Paiimitato de Isopropilo 391
00
ci
o
O E
o
ID Cc,
4<
Li
e ci
e O
EJ o
1
u
o-
E
st
~~1~~
o
a
EN 4,
e 8
4<
~0
e
+
hl
e ci
O
+
+
-o
o
o o o o o o
EN E
EN COu
Figura 8.55. Anlisis de Residuos para la Sntesis de Palmitato de Isopropilo.
392 Simulacin Terica como base para la Optimacin y Cambio de Escala

8.6 SIMULACION DE LA SINTESIS DE 2-METIL-BUTIRATO DE OLEILO

La simulacin de experimentos para la reaccin de esterificacin entre el cido 2-Metil-Butrico

y alcohol oleico catalizada por la lipasa de Candida aniarcca inmovilizada, Novozym 435, se llevo

a cabo de acuerdo con los modelos matemticos obtenidos, los cuales dependen de la presin a la que

tiene lugar la reaccin.

En las figuras 8.56 a 8.60 se muestran las curvas de simulacin junto con los datos

experimentales, para las reacciones realizadas a presin reducida (comportamiento irreversible),

mientras que en las figuras 8.61 a 8.65 se representan las curvas de simulacin del segundo modelo

propuesto, que considera que el comportamiento reversible del sistemas.

En ambos casos, la simulacin de los resultados experimentales puede considerarse como

satisfactoria, puesto que la desviacin de los mismos es relativamente pequea. As el anlisis de

residuos, obtenido mediante la representacin del error relativo de la conversin calculada frente a la

conversin experimental, muestra una desviacin inferior al 15% en la mayora de los casos.

El error medio obtenido considerando todos los experimentos realizados es de un 7%, siendo

nicamente del 6.35% al aplicar el modelo propuesto para el sistema en condiciones de irreversibilidad,

mientras que cuando el sistema opera a presin atmosfrica, el error medio alcanza un valor del 8%.

En ambos casos dicho error puede considerarse razonable, si se tiene en cuenta que puede caer

dentro del propio error experimental, lo que implica que los modelos pueden aceptarse como ecuacin

cintica y, por tanto, aplicndolos segn la presin de trabajo, sern capaces de predecir la conversin

alcanzada en funcin del tiempo de reaccin, de la temperatura de operacin y de la concentracin de

catalizador.
Simulacin de la Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleilo 393

Convenida
1
0.,
0.8 -

0.7 -

0.6
0.5
0.4 .4,
4,

01.3 -

0 O Expertmea tal
-5
1
Calculada
t u u

o 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo (ma>
Z-Metil.Butlretc de OSlo
Y: SUC Pu SO sHu AciAl: 111
CatalIzador: 5%

Figura 8.56. Simulacin B 1: Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleilo, 6OmmHg, 600C, 5% catalizador.

Convenida
1
o.,
0.8
0.7 -. .Q .

0.6 -

0.5 -g
0.4
0.8 /6
0.2k
0.1
1
o
0 20 40 60 lO 100 120 140
Tiempo (mis>
2-MetIl-EutfraS. de Oleilo
Y: WC Pi 60 Hu AciAl, 1)1
CataII~ar: 8%

Figura 8.57. Simulacin B2: Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleio, 6OmmHg, 700<2, 3% Catalizador.
394 Simulacin Terica como base para la Optimacin y Cambio de Escala

Conversin
1
0.9
0.8 -

0.? -

ej
03
-e- - - o- - - -G - - -

0.4
o
0.3 1

0.2 -O O Bupertmeatal
0.1 A - - Calculada

o 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo (ma)
2-Metil-Butirata de Olelle
Y: 70C Pu 60 mmHu AciAl: lI
CatalIzador: 1%

Figura 8.58. Simulacin B3: Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleilo, 6OmmHg, 700<2, 5% catalizador.

Conversin
1
0.9
0.8
0.? - - 0- - - -G - - - -- -

0.6
03 A
0.4 A ~
0.3 ~
0.2 O Bupertmeatal
0.1 - - Calculada

o
0 20 40 60 80 100 120 140

Tiempo (ma)

2-Metil-ButIrata de Oleile
Tu 10C Pu SO msflg AciAl: VI
Catalmadcn 7%

Figura 8.59. Simulacin B4: Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleilo, 6OmmHg, 70~<2, 7% Catalizador.
Simulacin de la Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleilo 395

Convenida

0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1

0 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo <mis>
3-Metil-Butlrato de 0151.
Tu 30C Pu SO amE AciAl: III
CSaII~oru 5%

Figura 8.60. Simulacin B5: Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleio, 6OmmHg, 800<2, 5% catalizador.

Convenida
1
0.9
0.8
0.7
0.6 ~-U
0.5
0.4
0.8
A
0.2 pr O Ezpeulsmutal
A
0.1 ~ - Calculada
o
0 20 40 60 80 100 120 140
Tiempo (mis>
2-Mctil-Butfratc de OSlo
Tu WC Pu 710 meNg AcIAL III
CatalIeu: 5%

Figura 8.61. Simulacin B6: Sntesis de 2-Metil-Hutirato de Oleilo, 7lOinmHg, 600<2, 5% Catalizador.
396 Simulacin Terica como base para la Optimacin y Cambio de Escala

1 Convenida
0.9
0.8
0.? L
0.6 L ~- ~ -0
0.5
0.4 O
0.3 -o
0.2 - O Expuimeatal
0.1 -4 - - Calculada

o 20 40 60 so 100 120 140


Tiempo (mAn>
2-MetIl-Butirato de Oleile
Tu 70C Pu 710 UmHu Miis 111
CaSallador: 8%

Figura 8.62. Simulacin B7: Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleio, 7lOmmHg, 700<2, 3% catalizador.

Convenida
1
0.9
0.8
0.7 ~ o
0.6 o.. - -
0.5
O-
0.4 QA
0.3
O
0.2 0 Expeuimeutal
0.1 - - Calculada

o
0 20 40 60 80 100 120 140

Tiempo (mi.>
2-MetU-aattreSc de Oleile
Tu 70C Pu 710 waNg Miis lii
Cetallaedon 5%

Figura 8.63. Simulacin B8: Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleilo, 7lOmmHg, 700C, 5% Catalizador.
Simulacin de la Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleilo 397

Coavergi6n
1
0.9
0.8 -

0.7
ej .9 ~ e- ~ - e
0.5
-A
4,~~

0.4
0.3 -r5

0.2 o Experimeatal
Calculada
0.1 4

nr
0 20 40 60 10 100 120 140
Tiempo (mis>
2-MetIl-Butlreto de OSlo
T: 71C Pi 71U Hg AciAl: lii
Catalizader: 7%

Figura 8.64. Simulacin B9: Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleio, YlOmmHg, 700<2, 7% catalizador.

Convcrcldn
1
0.9
0.8
o-..
0.7

0.6 x
0.5 0
0.4 o
0.3 o
0.2 - O Expelm.mtal
0.1 CaIoIada
0~

0 20 40 60 80 100 120 140


Tiempo (mli>
2-MattI-Uutlrato de 01.11.
Tt IhC P: 710 auEg letAl: 1/1
CatalIdor: SU

Figura 8.65. Simulacin BlO: Sntesis de 2-Metil-Butirato de Odo, 7lOmmHg, 800(2, 5% Catalizador.
398 Simulacin Terica como base para la Optimacin y Cambio de Escala

-~N)CO4~
000000000
0


o,
N)
rNa
o

-1- ~=~


o,
-ej

1.

o,
00
o
o,
Co
o a>
o,
o

Figura 8.66. Anlisis de Residuos para la Sntesis de 2-Metil-Butirato de Oleilo.


9. RESUMEN Y CONCLUSIONES
Resumen 401

9.1 RESUMEN

En la presente memoria de investigacin se exponen los resultados obtenidos a partir del

estudio de procesos de esterificacin cataltica entre cidos y alcoholes grasos de bajo, medio y alto

peso molecular, a fin de obtener compuestos de qumica fina, de aplicacin industrial directa e

inmediata.

Dichos compuestos son, en algunos casos, sustitutos de ceras naturales y, en otros, ceras

sintticas de inters industrial, considerados como fundamentales en la formulacin de productos cuyo

campo de aplicacin se desarrolla principalmente en el mbito de la industria cosmtica, aunque

tambin se aprovechan para la produccin de compuestos de aplicacin farmacolgica, alimentaria y

en la industria de lubricantes.

La instalacin experimental empleada est constituida por un reactor tipo tanque agitado

discontinuo que permite operar controlando la presin del sistema, la temperatura de operacin y la

velocidad de agitacin. Dicha instalacinse ve modificada en funcin de la presin de operacin, as


402 Resumen y conclusiones

cuando el sistema opera a presin reducida, es necesario acoplar al reactor una bomba de vaco con

el correspondiente sistema de control de presin. mientras que cuando la reaccin se desea realizar en

condiciones de presin atmosfrica, el sistema de control de presin se sustituye por un refrigerante

de reflujo que impide que las sustancias ms voltiles escapen al exterior al pasar al estado de vapor

por accin de la temperatura.

La solucin del anlisis qumico de las especies presentes en el medio de reaccin de cada uno

de los sistemas estudiados en esta memoria, se llev a cabo empleando la tcnica de cromatografa

liquido-gas; para la cual, se desarrollaron los mtodos de anlisis correspondientes en funcin de cada

una de los diferentes medios de reaccin empleados. La cuantificacin de dichas especies se realiz

mediante el anlisis de los resultados obtenidos referidos a un patrn interno, tambin fijado en funcin

del tipo de muestra. Basndonos en el mtodo de anlisis desarrollado, la identificacin de las especies

qumicas se realiz empleando para ello diferentes sustancias patrn y la tcnica de espectrometra de

masas.

Mediante el estudio del comportamiento de los diferentes sistemas de reaccin frente al tipo

de catalizador se ha elegido, en cada caso, el sistema cataltico ms adecuado, el cual result ser en

todos los casos un catalizador de tipo enzimtico:As mismo, se ha podido comprobar la conveniencia

del empleo de lipasas inmovilizadas para acelerar la conversin de reactivos en productos, sin riesgos

de favorecer una prdida de selectividad.

Una vez conocidos tanto el mtodo de anlisis como el sistema cataltico ms adecuado para

cada sistema de reaccin, se llev a cabo un estudio de la influencia de cada una de las variables de

operacin sobre los procesos de esterificacin objeto de estudio en este trabajo, en base a una

planificacin de experimentos en la que se fijaron los lmites superior e inferior de los valores de cada

una de las variables, atendiendo a los datos encontrados en bibliografa, a la experiencia del grupo
Resumen 403

investigador, a la naturaleza y propiedades de reactivos y productos, y a las especificaciones

comerciales de los mismos.

Teniendo en cuenta los resultados obtenidos en el estudio de la influencia de las variables

representativas sobre cada sistema de reaccin, se ha propuesto una metodologa de planificacin e

interpretacin de experimentos que concluye en concretar el anlisis cintico de las reacciones de

esterificacin, dependiendo de la modificacin de las diferentes condiciones de temperatura, presin,

concentracin de catalizador y relacin molar cido:alcohol.

Dicho estudio se ha realizado considerando dos posibilidades, en los sistemas en que ha sido

posible, proponindose dos modelos cinticos para un mismo sistema dependiendo de las condiciones

de operacin, lo que permite analizar el sistema tanto en condiciones de reversibilidad como en

condiciones de irreversibilidad.

El desarrollo de los modelos se llev a cabo en base a la proposicin de posibles mecanismos

de reaccin que responden a un mecanismo de reaccin ordenado para dos reactantes y dos productos,

en los que se incluyen tanto etapas de reaccin como etapas de inhibicin debidas a la formacin de

complejos de carcter enzimtico por competicin entre las especies presentes en el medio de reaccin.

La discriminacin de los modelos cinticos propuestos, as como la estimacin de los

parametros se ha realizado empleando diferentes paquetes de software diseados para sistemas IBM,

que contemplan mtodos numricos basados en los algoritmos matemticos de Newton, Runge-Kutta,

mnimos cuadrados y Marquard, aplicados a regresiones sencillas, mltiples y no lineales a partir de

los resultados experimentales.

El estudio de la variacin de temperatura en cada uno de los sistemas permiti conocer la


404 Resumen y conclusiones

influencia de dicha variable sobre cada uno de los parmetros caractersticos de los mismos. As se

obtuvieron las energas de activacin en funcin de la temperatura y los trminos de entalpa y entropa

para cada una de las constantes de equilibrio de las diferentes etapas que presentes en el medio de

reaccin.

La comparacin de los modelos cinticos se llev a cabo mediante la simulacin de las curvas

de reaccin empleando el modelo matemtico calculado y comparndolo con los resultados reales

obtenidos del anlisis de la reaccin para diferentes tiempos transcurridos.

La validez y fiabilidad de los modelos cinticos propuestos se ha estimado empleando la

tcnica del anlisis de residuos, en la cual se representan la diferencia entre el valor experimental y el

valor calculado referida al valor experimental, frente al propio valor experimental, obtenindose as el

error cometido a lo largo del tiempo en el que transcurren las reacciones correspondientes.

9.2 CONCLUSIONES

Como resultado del presente trabajo de investigacin y, teniendo en cuenta tanto las exigencias

de mercado, as como la normativa vigente para productos de qumica fina, especialmente para los de

uso cosmtico y farmacutico, se han podido deducir las siguientes conclusiones:

1.- El empleo de enzimas inmovilizadas como sistemas catalticos en los procesos de obtencin

de steres de bajo, medio y alto peso molecular, presenta una serie de ventajas frente a otros

sistemas catalticos que, generalmente, sondecarcter cido. Dichas ventajas estn constituidas

bsicamente por una serie de mejoras tanto en la selectividad como en el rendimiento, si bien

cabe destacar un importante ahorro econmico desde el punto de vista energtico, de las etapas

de purificacin y de los sistemas de preservacin del medio ambiente.


Conclusiones 405

2.- Los productos obtenidos poseen propiedades fsicas y qumicas adecuadas para su aplicacin

industrial directa, por cuanto que cumplen las especificaciones de calidad exigidas por los

mercados demandantes, as como un elevado nivel de inocuidad imprescindible segn las

imposiciones de la normativa vigente para productos de aplicacin y consumo humano. Por

tanto, los productos obtenidos pueden emplearse para tales aplicaciones y, en los casos que

proceda, pueden sustituir a sus homlogos naturales.

3.- A partir de las propiedades de reactivos y productos, as como de las especificaciones de las

especies catalticas comerciales, los intervalos de trabajo recomendados para las variables de

operacin, cuando se trabaja en un reactor discontinuo tipo tanque agitado con control de

presin, temperatura y velocidad de agitacin, son los siguientes:

3.1.- Para la sntesis de Oleato de Oleilo, 2-Metil-Butirato de Oleio y Miristato de Miristilo,

el intervalo de temperatura puede fijarse entre 600(2 y 800<2, el intervalo de presin

entre 6OmmHg y 7lOmmHg, y la concentracin de catalizador entre el 3% y el 7%,

siendo recomendable trabajar con una relacin molar de reactivos fijada en la unidad,

velocidad de agitacin superior a 400rpm y presin reducida.

3.2.- En el caso de la sntesis de Oleato de Cetilo, es recomendable fijar el intervalo de

temperatura de operacin entre ~70oCy 800<2, el intervalo de presin entre 6OmmHg y

la presin atmosfrica, y la concentracin de catalizador entre 3% y 7%, siendo

especialmente eficaz operar a temperaturas superiores a 750(2, concentraciones de

catalizador no inferiores al 5% y presin reducida, manteniendo la relacin

equimolecular de reactivos y la velocidad de agitacin por encima de las 400rpm.


406 Resumen y conclusiones

3.3.- Los lmites de operacin para la sntesis de Oleato de Isopropilo y Palmitato de

Isopropio pueden fijarse entre 650(2 y 750<2 para la temperatura, y 3% y 7% para la

concentracin inicial de catalizador, siendo preferible operar a presin atmosfrica, con

una relacin equimolar de reactivos y velocidad de agitacin superior a 400rpm.

4.- Segn los resultados obtenidos en los experimentos realizados para la seleccin del catalizador

se ha observado que, entre los sistemas estudiados, el compuesto Lipozyme IM-20, constituido

por la lipasa de Mucor miehel inmovilizada sobre resinas de intercambio aninico, es el ms

adecuado para llevar a cabo la sntesis de Oleato de Oleilo. Sin embargo, cuando se pretende

obtener Oleato de Cetilo, Miristato de Miristilo, Oleato de Isopropilo, Palmitato de Isopropilo

o 2-Metil-Butirato de Oleilo, el sistema ms adecuado ser el catalizador Novozym 435,

constituido por la lipasa de Candida anbarcjea inmovilizada sobre resinas de intercambio

aniomco.

5.- As mismo, se ha podido comprobar que la actividad cataltica de las lipasas empleadas, se ve

favorecida por una disminucin de la cadena de tomos de carbono y por la presencia de

dobles enlaces en dicha cadent Sin embargo, la presencia de cadenas ramificadas resulta

contraproducente desde el punto de vista de la selectividad y la reactividad enzimtica.

6.- El mecanismo general correspondiente a los sistemas de esterificacin considerados en esta

memoria se corresponde con un mecanismo enzimtico ordenado con dos reactivos y dos

productos de reaccin, y est basado en la formacin de un complejo binario lipasa-cido

graso, qumicamente activo, a partir del cual se desarrollan las siguientes etapas de reaccion.

Dicho mecanismo puede considerarse globalmente dividido en dos grupos de etapas. El primer

grupo corresponde a las denominadas etapas de reaccin, que contemplan la formacin de

complejos binarios y ternarios en el sentido de la obtencin de los productos deseados, y las


Conclusiones 407

correspondientes etapas inversas, consideradas como de inhibicin competitiva. El segundo

gmpo de etapas son las denominadas de inhibicin competitiva, propiamente dichas, que

corresponde a la formacin de complejos enzimticos con reactivos y productos, tanto binarios

como ternarios, siendo dichos complejos qumicamente inactivos, al menos desde el punto de

vista de la reaccin qumica.

7.- Cuando es viable operar en condiciones depresin reducida y el equilibrio qumico se desplaza

hacia la formacin de productos mediante la eliminacin del agua formada en continuo, el

mecanismo de reaccin general se ve modificado en el sentido de que la reaccin puede

considerarse como irreversible, mientras que cuando la reaccin se lleva a cabo a presin

atmosfrica.

8.- En el caso de que el sistema de reaccin venga dado por la sntesis de Oleato de Isopropilo,

aunque la presin de operacin impuesta sea la atmosfrica, el comportamiento de dicho

sistema puede considerarse como irreversible, debido a que los valores obtenidos para las

constantes de equilibrio a diferentes temperaturasson tan elevados que la reaccin de hidrlisis

no es representativa frente a la reaccin de esterificacin. Por tanto, en este caso no pueden

considerarse las constantes propias de las etapas en las que el equilibrio est desplazado hacia

la formacin del complejo o el producto en cuestin; es decir desaparecen las constantes de

Michaelis Menten y las de inhibicin debidas al equilibrio, con respecto a los productos de

reaccin, ster y agua. Por tanto, la reaccin de esterificacin entre el cido Oleico y el alcohol

Isopropiico puede considerarse como un sistema irreversible desde el punto de vista cintico,

al menos cuando se trabaja con el sistema cataltico elegido y segn las condiciones de

operacin fijadas en esta memoria.


408 Resumen y conclusiones

9.- En cuanto a las etapas de inhibicin se refiere, pueden considerarse cuatro equilibrios de

inhibicin competitiva de forma general:

a) Formacin del complejo binario lipasa-alcohol, a partir de ambos.

b) Formacin del complejo binario lipasa-ster, a partir de ambos.

c) Formacin del complejo ternario cido-lipasa-cido, a partir del cido graso y del

complejo lipasa-cido.

d) Formacin del complejo ternario cido-lipasa-ster, a partir del ster formado y del

complejo lipasa-cido.

A partir de estas etapas generales de inhibicin competitiva, el mecanismo se ver modificado,

en funcin del tipo de sistema considerado:

9.1.- Cuando se consideran los sistemas de esterificacin de Oleato de Oleilo, Miristato de

Miristilo, Oleato de Isopropilo y Oleato de Cetilo, tienen lugar las cuatro etapas de

inhibicin anteriormente definidas, independientemente de que el sistema se lleve a

cabo a presin atmosfrica o a presin reducida.

9.2.- Cuando se consideran los sistemas de sntesis de 2-Med-Butirato de Oleilo y Palmitato

de Isopropilo, el nmero de etapas de inhibicin se ve reducido a la mitad, teniendo

lugar nicamente las correspondientes a la formacin del complejo binario entre el

alcohol con la enzima libre, y a la formacin del complejo ternario constituido por el

cido graso y el complejo binario principal cido graso-enzima. Este hecho se debe,
Conclusiones 409

probablemente, a la presencia de ramificaciones en la cadena larga del ster, que

actuara como posibles competidores por el complejo binario principal y por la enzima

libre, frente al alcohol y al cido graso, respectivamente.

10.- Cuando se trabaja en exceso de uno de los reactivos, la velocidad de reaccin responde a un

modelo de tipo Michaelis Menten de primer orden con respecto al reactivo en defecto,

incluyndose una serie de trminos en el denominador que constituyen las etapas de resistencia

a la reaccin qumica. Lo mismo sucede cuando se considera la reaccin inversa, la variacin

de los velocidad de reaccin en funcin de la concentracin de ster y de agua, tambin ser

de primer orden con respecto a cada uno de ellos, por lo que en el modelo cintico global, se

puede considerar que la variacin de la velocidad de reaccin en funcin de la concentracin

de cada una de las especies presentes en el medio, tambin es de primer orden con respecto

de cada una de ellas.

11.- El empleo de los modelos cinticos propuestos permite simular adecuadamente los

experimentos correspondientes a los seis sistemas de esterificacin planteados con un error

mximo relativo del 20%, y un error medio de entorno a un 10% global, siempre y cuando se

mantengan las condiciones de operacin dentro de los lmites establecidos en esta memona.

Por tanto, este estudio puede tomarse como base cintica para el diseo del reactor, as como

para una posterior puesta en planta de procesos de esterificacin de steres de alto, medio y

bajo peso molecular, catalizados por enzimas inmovilizadas.

12.- Teniendo en cuenta los resultados obtenidos en este trabajo de investigacin, el mecanismo

anteriormente expuesto concluye en un modelo matemtico general, que puede particularizarse,

dependiendo de que el sistema se comporte como reversible o como irreversible y estos, a su

vez, se particularizan para cada sistema de reaccin estudiado. Por tanto, el modelo matemtico
410 Resumen y conclusiones

general que gobierna los procesos de esterificacin entre los cidos alcoholes grasos mediante

catlisis enzimtica con las mencionadas lipasas, responden a ecuaciones cinticas de tipo

Michaelis Menten, deducidas a partir de un mecanismo de reaccin ordenado, particularizado

para cada caso, que permiten predecir la conversin, en los steres correspondientes, en funcin

de las condiciones de operacin, presin, temperatura, concentracin inicial de catalizador,

relacin molar cido/alcohol y del tiempo de reaccin. Dicho modelo es el que se muestra a

continuacin:

ea E-
(rAC) = + + + (-r,~,)~,j<~N~ 0c1 + + N80> +

(rAC),flflKII4,.(1
K.w Ej, Kn~ E-18,

+
1
(rAC),flK.NM(1 N~ _ >+
N,, (-r,~>~K
x m~N884
R{~g 4~ sg
+ (-rAC>LcK8~N~ + < ZAO) maxATAcNn +

E-ea

+ ~1 + +
E-sg

(rAC> ~ _________________ +
+ ~1~ <rAC> LCNAftA~?NRB
E-1

+ (rAC> ~axN.uNx,Nw
E-1 E-sg
10. NOMENCLATURA
Nomenclatura 413

ABREVIATURAS, ACRONIMOS Y SIMBOLOS

Ac: Acido graso.

Al: Alcohol graso.

BIU: Batch Interesterification Unit. Se define como el nmero de jimoles de cido palmtico

convertidos con trioleina por minuto, segn los test especficos del catalizador.

[A]: Concentracin del compuesto A (mol/l).

da: Dimetro del agitador (m).

d~: Dimetro del reactor (m).

E: Enzima libre.

E-A: Complejo binario enzima-sustrato A.

E-A.B: Complejo temario sustrato A-Enzima-sustrato B.

E8: Energa de activacin (cal/mol) (KcalIKmol) (Kcal/mol).

Es: Ester.

G: Energa libre de Gibbs (cal/mol).

H: Entalpia (cal/mol).

Ii: Altura de lquido en el interior del reactor (m).

IPO: Oleato de isopropilo.

IPP: Palmitato de isopropilo.

k: Constante cintica de velocidad de reaccin <mo.g2.miif).


1.&2.nnn-).
K0: Factor preexponencial de la ecuacin de Arrbenius (mor
Constante de equilibrio de reaccin.

K.~: Constante de inhibicin referida al componente A (mol).

K.: Constante de Michaelis Menten referida al componente A (mol).

LU: Lipase Unit. Cantidad de lipasa necesaria para liberar un pimol por minuto de cido butrico a

partir de una emulsin de glicerol-tributirato en agua, operando en condiciones standard.


414 Nomenclatura

MBO: 2-med-butirato de oleilo.

MM: Miristato de miristilo.

n: Orden cintico de reaccin.

NA: Nmero de moles del componente A (moles).

NAO: Nmero de moles iniciales del componente A (moles).

OC: Oleato de cetilo.

00: Oleato de oleilo.

P: Presin (mm Hg).

PLU: Propyl Laurate Units. Cantidad de lipasa necesaria para esterificar un mmol por minuto de

laurato de n-propio, partiendo de cido ladrico y 1 -propanol, en condiciones de presin y temperatura

standard.

R: Constante de los gases prefectos (cal.moU.K).

(--~J: Velocidad de desaparicin del componente A (mol.miiV1).

(-r)~: Velocidad de desaparicin mxima del componente A (mol.miff).

5: Entropa (cal.moF1.K).

t: Tiempo (mm).

T: Temperatura (0(2) (1<).

W: Agua.

w: Cantidad de catalizador (g)

XA: Conversin del componente A.

XACq: Conversin de equilibrio del componente A.


ANEXO 1: ESTUDIO PARA LA PUESTA EN PLANTA

DE UN PROCESO DE ESTERiIFICACION
Anexo 1: Estudio para la puesta en planta de un proceso de esterificacin 417

A titulo ilustrativo, se ha incluido este anexo en la presente memoria con el fin de mostrar, si

cabe, un carcter ms prctico del trabajo de investigacin considerado hasta ahora. En las prximas

pginas se tratar de corroborar la validez de los resultados experimentales, as como la de los

tratamientos matemticos y los mecanismos de reaccin propuestos para abordar el estudio cintico de

los sistemas de esterificacin directa catalizados por enzimas inmovilizadas, desde el punto de vista

de su futura puesta en planta.

Para ello, se ha considerado el sistema constituido por el cido mirstico y el alcohol

isopropflico catalizado por la lipasa comercial Novzym 435 que, como se ha descrito anteriormente,

es una triacilglicerol hidrolasa procedente del cultivo de la especie fngica de Candida anrarctica,

convenientemente modificada e inmovilizada sobre una resma macroporosa en los laboratorios de la

empresa Novo Nordisk Bioindustries.

El estudio realizado para la referida sntesis de miristato de isopropilo, se ha llevado a cabo

teniendo en cuenta las necesidades y limitaciones de la propia planta industrial y con la finalidad de

optimar tanto las variables de operacin como el tiempo de reaccin necesario para alcanzar la
418 Anexo 1: Estudio para la puesta en planta de un proceso de esterificacin

conversin en ster requerida. Por otra parte, dicha investigacin exiga un coste mnimo tanto de las

materias primas necesarias, como de los servicios generales, mano de obra y tiempo de duracin

puestos en juego. Por lo tanto, dicha investigacin persigue conseguir un mximo de informacin

requerida, con un mnimo nmero de experimentos que miiinice el coste de la misma.

Atendiendo a dichos requerimientos, la experimentacin se llev a cabo persiguiendo dos

objetivos fundamentales. En primer lugar se trataba de optimizar el proceso de esterificacin que se

iba a llevar a cabo en un reactor discontinuo de capacidad fija, encontrado los valores ms adecuados

de las variables de operacin para maximizar la produccin. Y en segundo lugar, aunque no menos

importante, se trataba de discernir sobre el modelo cintico que describa adecuadamente la reaccin

de esterificacin, de modo que pudiese llevarse a cabo una simulacin fiable de la variacin de la

concentracin de las especies presentes en el reactor con el tiempo de reaccin transcurrido durante el

perodo total necesario para obtener el producto de calidad deseada.

Dicha informacin es de vital importancia tanto para la obtencin de Jos niveles de calidad

exigidos por el mercado, como para la instrumentacin y el control del proceso de esterificacin que

est directamente relacionado con el buen funcionamiento de la instalacin. A continuacin se describe

parte de la investigacin realizada en la puesta tn planta de la sntesis enzimtica de miristato de

isopropilo.

Li ESTUDIO PARA LA OPTIMACION DEL PROCESO

En este apanado se ha pretendido realizar el planteamiento y desarrollo de los experimentos

que conducen a la optimacin del proceso cataltico que nos ocupa. Para ello, se han empleado las

tcnicas del diseo factorial de experimentos. Segn estas tcnicas, los pasos a seguir son los

siguientes:
Estudio para la optimacin del proceso 419

(a) Eleccin de las respuestas a medir.

(b) Eleccin de las variables objeto de estudio.

(c) Eleccin del intervalo de valores para dichas variables.

(d) Realizacin de experimentos y recogida de datos.

(e) Realizacin de un ajuste a un modelo de primer orden.

(O Estudio de la mxima pendiente (en el caso de que tenga lugar el ajuste al modelo de primer

orden).

(g) Ajuste a modelos de orden superior a uno (cuando el ajuste a un modelo de primer orden no

describa el proceso adecuadamente).

(h) Anlisis de los resultados obtenidos y construccin de las superficies de respuesta (si procede).

LI.1 ELECCION DE LA RESPUESTA A MEDIR

Debido a que el proceso objeto de estudio es una esterificacin cataltica, la respuesta elegida

para medir es el porcentaje de cido convertido en ster a las dos horas de reaccin, ya que para dicho

tiempo de reaccin se considera que se ha alcanzado el estado estacionario del proceso, o lo que es lo

mismo, se han alcanzado las condiciones de equillbrio cuando el proceso es un sistema reversible.

LX.2 ELECCION DE LAS VARIABLES DE OPERACION

El estudio bibliogrfico realizado indicaque las variables que ms influyen sobre la conversin

resultante en el proceso son las siguientes:

- Presin. - Relacin molar cido/alcohol.

- Temperatura. - Velocidad de agitacin.

- Cantidad de catalizador.
420 Anexo 1: Estudio para la puesta en planta de un proceso de esterificacin

La velocidad de agitacin se ha mantenido constante en todos y cada uno de los experimentos

realizados, de forma que esta fuese lo suficientemente elevada como para que no tengan lugar las

posibles limitaciones de transferencia de materia en el medio de reaccin, con lo que eliminamos los

efectos de difusin (tanto interna como externa), y la nica etapa controlante es la reaccin qumica.

As mismo, se ha mantenido constante durante la experimentacin la razn molar cido/alcohol

(1/1). Esto se ha hecho con el fin de mantener la relacin estequiomtrica y evitar el desplazamiento

del equilibrio hacia la formacin de especies prioritarias, con la consiguiente problemtica que presenta

la purificacin de la masa de reaccin.

L1.3 ELECCION DE LOS INTERVALOS DE OPERACION PARA CADA UNA DE LAS

VARIABLES DE OPERACION

Segn las variables que influyen en el proceso (presin, temperatura y cantidad de catalizador),

se han elegido los intervalos de operacin ms convenientes, en funcin de la perniisibilidad del equipo

y los reactivos empleados. Los intervalos de operacin propuestos son los que se muestran a

continuacin:

- Presin.

Como se ha mencionado en la presente memoria, la presin de operacin est sujeta a las

propiedades fsicas y qumicas de los reactivos y productos que se ponen en juego en el proceso de

esterificacin. Si bien, la formacin de ster est favorecida a presiones reducidas que faciliten la

eliminacin continua del agua formada durante el proceso de esterificacin, en este caso la presencia

de isopropanol como reactivo impide trabajar a presin reducida, ya que debido al valor de su presin

de vapor forma azctropo con el agua. Por este motivo, toda la experimentacin se llev a cabo a

presin atmosfrica.
Estudio para la optimacin del proceso 421

- Tempeatum.

Tanto los datos bibliogrficos encontrados como las especificaciones de los reactivos y

catalizador empleados, imponen las condiciones lmite de operacin para la temperatura de operacin.

El lmite inferior para la temperatura viene impuesto por la drstica disminucin de la actividad

cataltica de la enzima, que tiene lugar cuando la temperatura es inferior a los 600C. Sin embargo,
debemos considerar que uno de los reactivos empleados es slido a temperatura ambiente (cido

mirstico). Por lo que teniendo en cuenta el punto de fusin del mismo, se decidi fijar el lmite

inferior de temperatura en 650<2. -

El lmite superior de temperatura tambin vendra impuesto por la prdida de actividad de la

enzima cataltica, que a temperaturas superiores a os 80~C comienza a desactivarse por accin del

fenmeno de desnaturalizacin trmica. No obstante, la presencia del otro reactivo (isopropanol), que

presenta un punto de ebullicin cercano a este lmite, dio lugar a que el lmite superior de temperatura

se fijase en 750(2

- Concentracin de catalizador.

Segn la informacin bibliogrfica tecogida y las especificaciones comerciales del catalizador

que se emplea, para alcanzar la mxima conversin en ster, en las condiciones correspondientes al

estado estacionario, la cantidad de catalizador es de tg por cada 0.025 moles de cido mirstico y por

cada 0.025 moles de alcohol isoproplico. De manera que cuando la razn molar cido/alcohol deseada

es 1/1, si empleamos 0.25 moles de cido y 0.25 moles de alcohol, el limite superior para la cantidad

de catalizador es del 7% en peso de la masa de reaccin. Teniendo en cuenta el mismo razonamiento,

el lmite inferior se ha fijado en un 3% en peso, para la relacin molar 1/1 mencionada anteriormente.
422 Anexo 1: Estudio para la puesta en planta de un proceso de esterificacin

Por lo tanto las variable que se van a tratar de optimar en este apartado van a ser la

temperatura de reaccin y la concentracin de catalizador presente en el medio de reaccin,

permaneciendo fijas en todo momento la presin de operacin, la velocidad de agitacin del sistema

y la relacin molar cido mirstico/ alcohol isopropilico.

L1.4 PLANIFICACION DE EXPERIMENTOS

La experimentacin correspondiente a esta parte del trabajo, se ha planificado de acuerdo con

las caractersticas de un diseo factorial de experimentos. Segn esto, los experimentos se pueden

agrupar en las dos etapas correspondientes al diseo:

- (a) Diseo factorial: 2k experimentos.

(b) Repeticin de experimentos en los puntos centrales: cuatro experimentos.

La primera etapa (diseo factorial), se desarrolla considerando las variables indicadas

anteriormente: temperatura y concentracin de catalizador (k = 2). Por tanto, la realizacin del

diseo factorial implica la necesidad de hacer cuatro experimentos. En la tabla .1 se muestran los

valores de los niveles de cada uno de los factores planificados para ci presente estudio; mientras que

en la tabla 1.2 se muestra la matriz representativa del diseo factorial realizado, en la que los signos

positivos representan el lmite superior para cada variable y los signos negativos el limite inferior de

las variables.

Tabla 1.1. Niveles para las variables objeto de estudio.

VARIABLE NIVEL-i-1 NIVELO NIVEL-11

TCC) 70
Estudio para la optimacin del proceso 423

Tabla 1.2. Experimentos cowespondientes al diseo factorial.

N0 EXPERIMENTO ORDEN J_TEMPERATURA_J CATALIZADOR

1 4

2 2 +
3 3 +
4 1 + +

El modelo matemtico para los dos factores (T y (2), al que se desean ajustar los resultados

experimentales, viene dado por la sigulente expresin:

Y= %+a.XT+a
2. XC+aI2.XT.XC

Siendo Y el rendimiento en miristato de isopropilo, XT la influencia de la temperatura y X<

a influencia debida a la concentracin inicial de catalizador.

L1.5 RESULTADOS DE LA OPTIMACION DEL PROCESO

La respuesta a medir elegida, ha sido la conversin de cido en ster a las dos horas de

reaccin, obtenindose unos valores determinados para los experimentos correspondientes al diseo

factorial de experimentos. El nmero de experimentos necesarios, segn el diseo factorial es de cuatro

experimentos, mientras que para el estudio de los puntos centrales necesitamos cuatro experimentos

adicionales.

Teniendo en cuenta este razonamiento, la matriz experimental para la optimacin del proceso

de esterificacin entre el cido mirstico y el isopropanol deber incrementarse. En la tabla 1.3 se

resumen los experimentos que se han tenido en cuenta, la respuesta medida a las dos horas y la

influencia de cada uno de los factores (temperatura y concentracin inicial de catalizador).


424 Anexo 1: Estudio para la puesta en planta de un proceso de esterificacin

Tabla 1.3. Experimentos empleados para la optimacin del pmceso.

N0 EXPERIMENTO ORDEN XT 6 (%)

4 - 60.96
2 2 + 68.42
3 3 + - 75.53

4 1 + + - 77.55

5 5 0 0 71.01

6 6 0 0 72.15
7 7 0 0