Problemas de calibrado

1-) Suponer que se lleva a cabo un procedimiento analtico para obtener una curva de
calibrado como la que se muestra en la figura 5.3. Despus que se analiza un problema y se
encuentra una absorbancia que da una concentracin negativa del analito. Que puede
significar eso? [1]
Cantidad Protena (mg) Absorbancia de muestras Absorbancias corregidas
0 0.099 0.099 0.100 -0.0003 -0.0003 0.0007

5 0.185 0.187 0.188 0.0857 0.0877 0.0887

10 0.282 0.272 0.272 0.1827 0.1727 0.1727

15 0.345 0.347 0.392 0.2457 0.2477

20 0.425 0.425 0.430 0.3257 0.3257 0.3307

25 0.483 0.488 0.496 0.3837 0.3887 0.3967

0.099+0.099+0.100
Media del Blanco= = 0.0993
3
El blanco viene a ser aquel que no tenga cantidad alguna de analito (en este caso protena).
La absorbancia corregida viene a ser la diferencia entre las absorbancias medidas y la
absorbancia media del blanco.
Realizamos un grfico entre las absorbancias corregidas frente a la cantidad de protena.
4500

4000
Absorbancias Corregidas

3500

3000

2500 y = 0.0163x + 0.0047

2000 R = 0.9978
1500

1000

500

0
0 50 100 150 200 250 300 350 400 450
Cantidad Proteina
Para una concentracin negativa, esta debe dar la absorbancia de algn blanco. Es la nica
forma que se pueda dar esto.

2-) Usando la curva de calibrado de la figura anterior, hallar la cantidad de protena en un

problema que da una absorbancia de 0.264 y el blanco da una absorbancia de 0.095. [1]
Solucin:
La absorbancia corregida es: 0.264-0.095= 0.169 ug
0.1690.0047
de protena = = 10.0798 . Por lo tanto, habr 10.0798 ug de protena
0.0163

3-) La seal medida por espectrometra de masas de la concentracin de metano patrn en

hidrogeno son las siguientes [1]:
CH4(Vol%) Seal(mV) Seal corregida
0 9.1 0

0.062 47.5 38.4

0.122 95.6 86.5

0.245 193.8 184.7

0.486 387.5 378.4

0.971 812.5 803.4

1.921 1671.9 1662.8

a) Donde la ecuacin de la recta de calibrado es Y=-22.085+869.13X

4500

4000

3500

3000 y = 869.13x - 22.085

Seal(mV)

2500 R = 0.9989

2000

1500

1000

500

0
0 50 100 150 200 250 300 350 400 450

CH4(vol%)
 Desviacin de la recta: Sy =
() 2 = 18.0527
2

Desviacin de la pendiente: S2m= S2y.n/() 2 . . = 113.178

Desviacin de la ordenada: S2b= (S2y.() 2) /() 2 . . = 80.033

b) En el problema se da seales de: 152.1; 154.9; 153.9 y 155.1 mV.

Las seales del blanco fueron respectivamente: 8.2, 9.4, 10.6 y 7.8 mV.

Seales Corregidas Cantidad de Analito

143.9 0.1910

145.5 0.1928

143.3 0.1902

147.3 0.1948

Desviacin estndar de las seales corregidas = 1.793

Media de la cantidad de analito=0.19224

c) hallar la concentracin del metano en el problema?

La concentracin de metano se halla extrapolando la recta y [CH4 (vol.%)] = 0.02541.
4-) Los datos de calibrado de la determinacin electroqumica de p-nitrofenol, que aparecen
en la tabla, cubren 5 rdenes de magnitud [1]:
P-nitrofenol (g/mL) Corriente (nA) Log (corriente nA) Log (concentracin
g/mL)
0.0100 0.215 -0.66756 -2.0000
0.0299 0.846 -0.07263 -1.5243
0.1170 2.650 0.42324 -0.9318
0.3110 7.410 0.86982 -0.5072
1.0200 20.80 1.31806 0.0086
3.0000 66.70 1.82413 0.4771
10.400 224.0 2.35025 1.0170
31.200 621.0 2.79309 1.4941
107.00 2020 3.30535 2.0294
310.00 5260 3.72100 2.4914

Si se intenta representar estos datos en un grfico lineal, que vaya desde 0 a 310 g/mL y
desde 0 a 5260 nA, la mayora de puntos se acumularan cerca del origen. Para tratar datos
con un intervalo tan grande, resulta til una representacin logartmica.

a) Grafico log(corriente) frente a Log (concentracin) en que intervalo es lineal el

calibrado Log-Log?

3.5

3
Log (corriente nA)

2.5

1.5
y = 0.9692x + 1.3389
1
R = 0.9993
0.5

0
-2.5 -2 -1.5 -1 -0.5 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3
-0.5

-1

Log (Concentracion g/mL )

Segn el grafico el intervalo en el cual se aprecia mayor la linealidad es desde -0.9318 a 2.5
en el eje Log(concentracin) y de 0.42324 a 3,721 en el eje Log (corriente).

b) Hallar la ecuacin de la recta de la forma Log(corriente) = m x Log(concentracin) +b.

Log (corriente nA) = 0.9692Log (Concentracin g/mL) + 1.3389.

c) Hallar la concentracin de p nitrofenol que corresponde a una seal de 99.9 nA.

Usando la grfica de calibracin tenemos:

concentracin del p- Nitrofenol = 4.8046 g/mL

5-) Los datos de la siguiente tabla se obtuvieron durante una determinacin calorimtrica de
glucosa en suero sanguneo [2].
Concentracin de glucosa (mM) Absorbancia (A)
0.0 0.002
2.0 0.150
4.0 0.294
6.0 0.434
8.0 0.570
10.0 0.704

a) Suponiendo una relacin lineal, calcule las estimaciones de mnimos cuadrados para
la pendiente y la ordenada en el origen.

Yi = m Xi + b

Xi Yi (Xi)2 (Yi)2 XiYi

Concentracin de glucosa (mM) Absorbancia (A)
0.0 0.002 0.0 0.000004 0.000
2.0 0.150 4.0 0.0225 0.300
4.0 0.294 16.0 0.086436 1.176
6.0 0.434 36.0 0.188356 2.604
8.0 0.570 64.0 0.32490 4.560
10.0 0.704 100.0 0.495616 7.040
 30 2.154
Sxy = ( )/ , Sxy = 15.680 - = 4.910
6

( )
2 302
Sxx = 2 = 220 - = 70
6

( )
2 (2.154)2
Syy = 2 = 1.117812 - = 0.344526
6
4.910 2.154 30
m= = 0.07014 b= 0.07014 = 0.0083
70 6 6

yi = 0.0701Xi + 0.0083.
b) Cules son las desviaciones estndar de la pendiente y la ordenada en
el origen? Cul es el error estndar de la estimacin?

Syy 2 0.344526 (0.07014)2 4.91

Sr = = = 0.283
2 4

2 0.28300
Sm = = = 0.0636
70

2 220
Sb = Sr 2 = (0.283) = 0.2048
2 ( ) 62203030

c) Determinar los intervalos de confianza para al 95% para la pendiente y

la ordenada en el origen?
m = 0.0701 (0.0636) (2.447) = 0.0701 0.1556
b = 0.0083 (0.2048) (2.447) = 0.0083 0.5011

d) Una muestra de suero dio una absorbancia de 0.350. Calcular el

intervalo de confianza al 95% para la glucosa en la muestra.

A = A0 Sc t.
A = 0.350 (4.309) (2.447) = 0.350 10.540.
Problemas de adiccin estndar
6-) En el mtodo de adicin de patrn, Porque es conveniente aadir un pequeo volumen
de patrn concentrado y no un gran volumen de patrn diluido?
Rapta: Estos es debido a que no cambia mucho la concentracin de la matriz, ya que dicha
matriz ejerce el mismo efecto sobre el mismo analito aadido que en lo que hay en la
muestra del problema.

7-) El ensayo de una sustancia x se basa en su capacidad para catalizar una reaccin que
produce la sustancia y(radiactiva). La cantidad de Y producida en un tiempo prefijado es
proporcional a la concentracin de x en disolucin, un problema que contiene x en una
matriz compleja desconocida y un volumen inicial de 50,0ml se trat con un incremento de
patrn de x [0.531]M y se obtuvieron los siguientes resultados

Volumen Aadido x (uL) Cuentas/minuto de Y radiactivo

0 1084

100 1844

200 2473

300 3266

400 4010

a) Hallar la recta de calibracin por adicin estndar

4500
4000
Cuentas/minuto

3500
3000
2500
2000
y = 7.274x + 1080.6
1500
R = 0.9989
1000
500
0
0 100 200 300 400 500

Volumen aadido
 Dnde: Vx: Volumen de la Matriz.
Cx: Concentracin del analito en la matriz.
Cs: Concentracin del patrn.
Vs: Volumen variable del Patrn.
Vt: Volumen del Matraz.

S= 1080.6+7.274Vs

Al extrapolar la recta en S= 0
Tenemos un volumen aadido negativo Vs= -148.557.
La concentracin del analito en la matriz se halla gracias a este:

Cx:

(148.557)0.531
Cx: = 7.888
10
O tambin de esta manera:

Cx:

1080.6 0.531
Cx: = 7.888
7.274 10

Por lo tanto, la concentracin de analito en la matriz viene a ser 7.888 M, esto

gracias a la extrapolacin de la recta por adicin estndar.
8-) El potasio se puede determinar por espectrometra de emisin de llama
utilizando un estndar interno de litio. Los siguientes datos se obtuvieron para
disoluciones estndar de KCl y una disolucin desconocida que contiene una
cantidad constante y conocida de LiCl como estndar interno. Las
intensidades se corrigieron al restarles la intensidad de un blanco [2].
Concentracin de K(ppm) Intensidad de emisin de Intensidad de emisin de
K Li
1.0 10.0 10.0
2.0 15.3 7.5
5.0 34.7 6.8
7.5 65.2 8.5
10.0 95.8 10.0
20.0 110.2 5.8
Desconocido 47.3 9.1

a) Represente grficamente la intensidad de emisin de K en funcin de la

concentracin y determine la linealidad a partir de los estadsticos de
regresin.
140

120
Intensidad de emision K

100

80

60 y = 5.6113x + 12.647

40
R = 0.8603

20

0
0 5 10 15 20 25

Concentracion de K (Ppm)
Esta grafica muestra la linealidad de calibrado normal y cmo podemos ver la linealidad no
es muy buena, prueba de ello es el coeficiente de correlacin de la intensidad de emisin de
K con la concentracin del mismo, es relativamente bajo y los puntos estn netamente fuera
de seguir una curva lineal como la que se muestra, adems presentan un margen de error alto.

b) Represente grficamente la relacin de la intensidad de K y la intensidad de Li en

funcin de la concentracin de K y compare la linealidad resultante con la del apartado
a). Por qu el estndar interno mejora la linealidad?
Concentracin de Intensidad de Intensidad de
K(ppm) emisin de K emisin de Li
1.0 10.0 10.0 1.0
2.0 15.3 7.5 2.04
5.0 34.7 6.8 5.103
7.5 65.2 8.5 7.671
10.0 95.8 10.0 9.58
20.0 110.2 5.8 19.0
Desconocida 47.3 9.1 5.1978

25

20
y = 3.2911x - 7.4109
15
R = 0.8843
10
Ik /ILi

0
0 1 2 3 4 5 6 7 8

-5

-10
Concentracion de K

En este grafico vemos claramente una mejora en la linealidad de los datos, ello debido a que
la adicin de un estndar compensa ciertos errores de que influyen en el analito y la especie
de referencia en la misma proporcin. Adems, el coeficiente de correlacin de las variables
de la relacin de la intensidad de emisin del K con la intensidad de emisin del Li frente a
la concentracin del K es mejor que en el grfico de linealidad del tem a), es decir hay una
mejor correlacin de las variables. Otra prueba de ello como puede verse en el grfico es que
las distribuciones de los datos tienen una mejor tendencia lineal debido a que el error de
desviacin es menor respecto al que se da en la linealidad normal.

c) Calcule la concentracin del K en la disolucin desconocida.

Esta concentracin se halla reemplazando la relacin de intensidad de emisin del K respecto

a la intensidad de emisin del Li en la recta de linealidad con la adicin estndar, y se tiene:

concentracin del potasio (Ppm) = 3.2911(5.1978) 7.4109 = 9.6956 ppm.

9-) Se determino cobre en una muestra de agua de rio por espectrometra de

absorcin atmica y el mtodo de adiciones estndar. Para la adicin, se
agregaron 100.0 L de un estndar de Cu, de 1000.0 g/mL, a 100.0 mL de
solucin. Se obtuvieron los siguientes datos [2]:

Absorbancia del blanco reactivo = 0.020

Absorbancia de la muestra = 0.520
Absorbancia de la muestra ms la adicin- blanco = 1.020

a) Calcule la concentracin de cobre de la muestra.

[]
Ecuacin de la adicin de patrn: =
[] + [] +

[] 0.520
= , Luego tenemos: [] = 53.719 g/L
(0.1 )(1000 )+(0.1)[] 1.020

 b) Estudios posteriores demostraron que el blanco reactivo usado para
obtener estos datos fue inadecuado y que la absorbancia real del blanco
fue de 0.100. Encuentre la concentracin del cobre con el blanco
adecuado y determine el error ocasionado por utilizar un blanco
incorrecto.

Absorbancia del blanco es = 0.1

Absorbancia de la muestra ms la adicin blanco = 1.00

[] 0.520
= , Luego tenemos: [] = 54.852 g/L
(0.1 )(1000 )+(0.1)[] 1.00

Error =54.852 g/L 53.719 g/L = 1,133 g/L

10-) Se puede determinar agua en muestras solidas por espectroscopia

infrarroja. Se va a medir el contenido de agua de sulfato de calcio hidratado
empleando carbonato de calcio como estndar interno para compensar algunos
errores en el procedimiento. Se prepararon una serie de soluciones estndar que
contiene sulfato de calcio dihidratado y una cantidad conocida y constante del
estndar interno. Tambin se prepar una solucin con el producto de contenido
de agua desconocido y se le puso la misma cantidad de interno. Se midi la
absorbancia del compuesto dihidratado a una longitud de onda (Amuestra) junto
con la del estndar interno a otra longitud de onda (Aestandar). Se obtuvieron los
siguientes resultados [2].
Amuestra Aestandar %de agua
0.15 0.75 4.0
0.23 0.60 8.0
0.19 0.31 12.0
0.57 0.70 16.0
0.43 0.45 20.0
0.37 0.47 Desconocida
 a) Represente grficamente la absorcin de la muestra (Amuestra) en funcin del
porcentaje de agua y determine si la representacin es lineal a partir de las
estadsticas de regresin.

0.6
y = 0.0225x + 0.044
0.5

0.4 R = 0.6312
Amuestra

0.3

0.2

0.1

0
0 5 10 15 20 25

% de Agua

Esta grafica muestra que la linealidad de calibrado normal no es muy buena, prueba de ello
es el coeficiente de correlacin de la absorbancia de la muestra frente al % de agua es
relativamente bajo y prueba de ello son los puntos, que como se ve en el grafico estn
altamente dispersos y fuera de seguir una curva lineal como la que se muestra, adems
presentan un margen de error alto.

b) Represente grficamente la relacin (Amuestra /Aestandar) en funcin del porcentaje de

agua y compare si el uso del estndar interno mejora la linealidad con respecto al
caso a). si mejora la linealidad a que se debe?

Amuestra Aestandar %de agua Amuestra /Aestanadar

0.15 0.75 4.0 0.2000
0.23 0.60 8.0 0.3833
0.19 0.31 12.0 0.6129
0.57 0.70 16.0 0.8143
0.43 0.45 20.0 0.9555
0.37 0.47 Desconocida 0.78723
 1.2

1
y = 0.0486x + 0.0106
Amuestra /Aestanadar

0.8
R = 0.9946

0.6

0.4

0.2

0
0 5 10 15 20 25

% de Agua

Al observar el grafico y compararlo con el grafico de a) vemos claramente una mejora en la

linealidad, una prueba contundente de ello es la correlacin que hay entre las variables
(Amuestra /Aestanadar) frente al % de agua, pues vemos claramente que los puntos estn
dispersos de tal forma que siguen claramente una mejor tendencia lineal y el error que se
presentaba en la linealidad normal del grafico en a) han sido compensados altamente por la
adicin del estndar.
c) Calcule el % de agua desconocido usando los datos del estndar interno.
Este valor del %de Agua lo hallamos reemplazando la relacin de Amuestra /Aestanadar
desconocidos en la recta de linealidad encontrada con la adicin del estndar segn el
grafico en b).
El % de Agua = 0.0486 (0.78723) + 0.0106 = 0.04886.

Bibliografa
[1] Daniel C. Harris. (2006). Qumica Analitica. Mxico: Editorial Reverte.
[2] Douglas A. skoog, Donald M.west , F.J. Holler, Stanley Crouch.(2004).Fundamentos
de Qumica Analtica. Mxico: 8va Edicin. Editorial Graw Hill.