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Princpios
Santa
de Maria,
biossegurana
v.43, n.1,
aplicados
p.91-99,aos
jan,laboratrios
2013 de ensino universitrio de microbiologia e parasitologia. 91
ISSN 0103-8478
Luis Antnio SangioniI Daniela Isabel Brayer PereiraII Fernanda Silveira Flores VogelI
Snia de Avila BottonI*
- REVISO BIBLIOGRFICA -
de risco, devem ser atendidos alguns requisitos de necessitam instituir procedimentos padres e BPLs
segurana, conforme o nvel de conteno necessrio. preconizados para o NB-3.
Esses nveis de conteno so denominados nveis de Em relao estrutura fsica, deve-se ressaltar
biossegurana ou de bioconteno, sendo designados que alguns laboratrios pedaggicos esto situados em
em ordem crescente (NB-1 a NB-4), pelo grau de prdios mais antigos, que inicialmente no foram
proteo proporcionado ao pessoal do laboratrio, projetados como estrutura laboratorial e antecederam
meio ambiente e comunidade (BRASIL, 2010b). Nvel os preceitos de biossegurana, revisados por PENNA
de biossegurana 1 (NB-1): necessrio em atividades et al. (2010). Todavia, devido demanda das atividades
que envolvam os agentes biolgicos da classe de risco de ensino, pesquisa e extenso, as instalaes
1. Representa um nvel bsico de conteno, que se laboratoriais tiveram que ser adequadas a essas
fundamenta na aplicao das boas prticas laboratoriais exigncias. Contudo, a fim de atender as exigncias
(BPLs), na utilizao de EPIs e EPCs e na adequao reunidas nas resolues e instrues normativas
das instalaes. Em geral, as atividades so realizadas estabelecidas pela CTNBio e, com base na Lei Nacional
sobre as bancadas. Nvel de biossegurana 2 (NB-2): de Biossegurana (BRASIL, 2005), as dependncias
exigido para as atividades que envolvam os agentes desses laboratrios devero ser revistas e readaptadas.
biolgicos da classe de risco 2. O acesso ao laboratrio De acordo com os nveis de biossegurana, as
deve ser restrito aos profissionais da rea (professores, caractersticas dos laboratrios de microbiologia e
tcnicos) e aos acadmicos que estejam desenvolvendo parasitologia esto sintetizadas na tabela 2.
atividades de ensino, pesquisa e extenso, mediante
autorizao do responsvel tcnico. Nvel de Equipamentos de segurana: EPIs e EPCs
biossegurana 3 (NB-3): aplicvel aos locais em que EPI todo o dispositivo de uso individual,
forem desenvolvidas atividades com os agentes destinado a proteger a sade e a integridade fsica do
biolgicos da classe de risco 3. Nvel de biossegurana trabalhador. A sua regulamentao est descrita na
4 (NB-4): exigido s atividades que manipulem os Norma Regulamentadora no 06 (NR-06) do Ministrio do
agentes biolgicos da classe de risco 4. Nos laboratrios Trabalho e Emprego (MTE). EPC, por sua vez, todo o
NB-3 e NB-4, o acesso dos indivduos deve ser restrito dispositivo que proporciona proteo a todos os
e utiliza-se um sistema de segurana altamente profissionais expostos aos riscos no ambiente laboral.
rigoroso. So designados aos laboratrios que Nos laboratrios de ensino superior de
desenvolvam atividades de diagnstico e pesquisa de microbiologia e parasitologia, so imprescindveis o
maior complexidade e nvel de bioconteno emprego de EPIs e EPCs e o emprego das BPLs, a fim
(ENSERINK, 2000). Um resumo dos requisitos bsicos de minimizar os riscos e desempenhar um trabalho com
exigidos em cada nvel de biossegurana laboratorial maior segurana (HIRATA & MANCINI FILHO, 2002;
est apresentado na tabela 1. MASTROENI, 2005).
Atualmente, os laboratrios de ensino de Os EPIs e EPCs bsicos recomendados para
microbiologia e parasitologia vinculados s uso nos laboratrios de ensino de microbiologia e
instituies de ensino superior no Brasil equivalem aos parasitologia devem estar em conformidade com a
NB-1 e NB-2. Nas atividades realizadas nesses Portaria MTB no 3.214, (BRASIL, 1978) e consistem em:
laboratrios, h a manipulao de micro-organismos e i. EPIs para proteo da cabea: culos de segurana
parasitas de baixo risco biolgico, estando associadas, para prevenir os respingos nos olhos, os quais possam
principalmente, ao desenvolvimento das aulas prticas, causar infeco, principalmente os provenientes das
das aes de extenso e de pesquisa. Em alguns culturas de agentes e amostras biolgicas, que possam
laboratrios vinculados s instituies que oferecem ocasionar irritao nos olhos e outras leses
servios de diagnstico e/ou pesquisa de agentes decorrentes da ao de solues e reagentes usados
patognicos, h maior risco biolgico, sendo necessrio no laboratrio; partculas que possam ferir os olhos.
adotar medidas de biossegurana mais restritas. Como Devem ser usados, tambm, protetores faciais
citado por HIRATA & MANCINI FILHO (2002), nesses destinados proteo dos olhos e da face contra leses
ambientes, podem ser manuseados agentes biolgicos produzidas por diversas partculas, respingos, vapores
classificados em nvel 3, tais como: vrus da raiva, vrus de produtos qumicos e radiaes luminosas intensas.
da encefalomielite equina, vrus da imunodeficincia Membros superiores: luvas e/ou mangas de proteo
humana (HIV), Mycobacterium tuberculosis, devem ser usados em trabalhos em que haja perigo de
Histoplasma capsulatum e outros patgenos agravos provocados por: agentes biolgicos oriundos
transmissveis por fludos corporais e sangue. Esses dos diferentes materiais biolgicos; materiais ou
laboratrios recebem a classificao NB-2, no entanto, objetos prfuro-cortantes; produtos qumicos
------------Nvel de biossegurana------------
Requisitos
1 2 3 4
Isolamento do laboratrio N N S S
Sala completamente vedada para a descontaminao N N S S
reas de escritrios designados administrao e pesquisa fora das instalaes de
N N S S
bioconteno
Local para acondicionamento de roupas e objetos pessoais fora das reas de bioconteno R S S S
Refeitrio fora da rea de bioconteno S S S S
Smbolo de risco biolgico afixado na porta de entrada e nas reas de manipulao de
N S S S
agentes biolgicos
Execuo das atividades laboratoriais em dupla N N R S
Sistema para higienizao e segurana: pias para lavagem das mos com acionamento
S S S S
mecnico ou automtico e chuveiro e lava-olhos
------------------------------------------------------------------------------Ventilao------------------------------------------------------------------------------
Aduo do ar N R S S
Sistema de ventilao controlada N R S S
Exaustor com filtros de alta eficincia (High Efficiency Particulated Air - HEPA) N N S S
Entrada com porta dupla N N S S
Sistema de portas com travamento mecnico ou automtico R R S S
Cmara de vcuo (presso negativa na rea de bioconteno) N N S S
Cmara de vcuo com ducha N N N S
Antecmara N N S
Antecmara com chuveiros/duchas N N S N
Tratamento dos efluentes R R S S
Incinerao dos resduos aps a esterilizao N N R S
------------------------------------------------------------------------------Autoclave------------------------------------------------------------------------------
In loco N R S S
Em rea separada, nas dependncias do laboratrio N N R S
Contendo duas portas N N R S
-------------------------------------------------------------Cabines de segurana biolgica (CSB) -------------------------------------------------------------
Classe I R R - -
Classe II R S S -
Classe III - - R S
Circuito interno de imagem N N R S
Registro pelas autoridades sanitrias nacionais N N S S
Roupas de proteo com presso positiva e ventilao N N N/S* S
Uso EPIs S S S S
Cumprimento das BPLs S S S S
Incinerao dos resduos aps a esterilizao N N N S
N- No mandatrio; S- Uso mandatrio; R- Uso recomendvel. *Se houver risco de produo de aerossis, exigido o uso do traje de
presso positiva e ventilao associado utilizao de CSB classe II. Fonte: Adaptado de PENNA et al. (2010).
(corrosivos, custicos, txicos, solventes orgnicos, que haja perigo de danos provocados especialmente
etc.); materiais ou objetos geradores de temperaturas por riscos de origem biolgica, qumica, fsica, tais
extremas (aquecidos ou frios). Membros inferiores: como: jalecos, aventais e macaces. Sistema
calado de proteo impermevel, solado liso e respiratrio: equipamentos de proteo respiratria
antiderrapante, sendo resistente aos agentes (EPR) so os dispositivos usados para evitar a
biolgicos patognicos; produtos qumicos; umidade; exposio aos diferentes agentes presentes nos
riscos de acidentes (escorreges, tropeos e quedas). laboratrio de microbiologia e parasitologia, em
Tronco: vestimentas de proteo para atividades em concentraes prejudiciais sade dos usurios, de
Tabela 2 - Resumo das caractersticas dos laboratrios de microbiologia e parasitologia de acordo com os nveis de biossegurana (NB).
Vrus da:
BPLs bsicas, o acesso influenza, rubola,
Cabines de segurana
ao recinto deve ser sarampo, caxumba;
Infeces no biolgica (CSB) de classe I
limitado; sinalizar as Leptospira
homem, existindo o e II para manipular os vrus
reas de risco interrogans,,
risco de ingesto e e tudo o que produzir Assim como em NB-
NB-2 biolgico; Staphylococcus
inoculao aerossis e derramamentos; 1 e autoclave.
descontaminar o lixo e aureus; Candida
percutnea e mucosa usar jalecos, luvas, proteo
resduos; instituir tropicalis, etc.
em laboratoristas. facial, dependendo da
protocolos para Em geral, os parasitas
atividade.
primeiros socorros. so classificados
como agentes NB-2.
NB-3 e: prdio
separado ou rea
isolada com entrada e
BPL empregadas no
Altamente perigosos sada de ar
NB-3 e: trocar de
ou exticos, controlada, sistema
roupas antes de entrar
transmitidos por Todos os equipamentos do de filtros HEPA, Vrus Ebola, vrus de
nas reas de risco
aerossis, NB-3, e: CSB III e/ou presso negativa, Marburg, vrus sabi,
biolgico; banho antes
NB-4 apresentando grande vestimentas (macaco) com sistema de vrus da febre
da sada do
risco de causar presso positiva em descontaminao hemorrgica Crimia-
laboratrio; todo
morte. Ainda no associao com CSB II. controlado, Congo, entre outros.
material deve ser
completamente autoclaves com dupla
descontaminado antes
caracterizados abertura e os resduos
da remoo.
depositados em
containers
especficos.
acordo com os limites estabelecidos na NR-6 do MTB efetivas em proteger o indivduo contra os aerossis
(BRASIL, 1978), incluindo: mscaras autnomas de ( h t t p : / / www. a n vi s a . gov. br / d i vu l g a / p ubl i c /
circuito aberto ou fechado para proteo das vias cartilha_mascara.pdf.). ii. EPCs: tambm devem seguir
respiratrias. As mscaras do tipo cirrgicas no so as especificaes indicadas conforme a legislao
vigente (BRASIL, 1978) e as instrues que constam quais visam a minimizar os acidentes que envolvem as
nos manuais disponveis (WHO, 2004; CDC, 2009) e atividades desempenhadas pelos laboratoristas, bem
incluem: sinalizao de segurana: nos laboratrios de como incrementam a produtividade, asseguram a
microbiologia e parasitologia, servem para indicar onde melhoria da qualidade dos servios desenvolvidos nos
h presena dos riscos. Exemplo: smbolo de risco laboratrios de ensino de microbiologia e parasitologia
biolgico afixado na porta de entrada nos locais de e, ainda, auxiliam a manter seguro o ambiente. A
manipulao e armazenamento de agentes biolgicos utilizao das BPLs requer a aplicao do bom senso e
(a partir do NB-2); smbolos de lquidos inflamveis, prudncia dos profissionais e acadmicos ao
explosivos, produto txico, veneno, etc., para indicar desenvolver cada atividade. Cabe aos coordenadores
presena de risco qumico; os smbolos de elementos e professores dos laboratrios de ensino de
radioativos, apontando para risco fsico; mapa de risco, microbiologia e parasitologia o incentivo e a
sinais para as sadas de emergncia, escadas, extintores fiscalizao da aplicao das normas e dos
de incndio, faixas de demarcao, etc. Extintor de procedimentos padres e especficos, permitindo, com
incndio: o nmero, o tipo e a distribuio desses isso, a manuteno de um ambiente seguro e confivel
extintores devem estar adequados; sua manuteno e/ a toda equipe do laboratrio. As BPLs padres nos
ou reposio devem ser peridicas, bem como o pessoal laboratrios de ensino de microbiologia e parasitologia
do laboratrio deve ser treinado para o seu uso. Capela devem ser conhecidas, aplicadas por todos os usurios
qumica: cabine construda de forma aerodinmica, de
e compreendem:
maneira que o fluxo de ar ambiental no ocasione
1. restringir o acesso de pessoas ao laboratrio,
turbulncias e correntes, reduzindo o perigo de inalao
somente os indivduos autorizados pelos
e a contaminao do operador e do ambiente. Borrifador
coordenadores e professores podem ingressar nos
de teto: sistema de segurana acionado pela elevao
ambientes laboratoriais;
de temperatura, lanando fortes jatos de gua no
2. observar os princpios bsicos de higiene, entre
ambiente. Luz ultravioleta (UV): lmpadas germicidas,
com comprimento de onda ativo de 240nm. Devem estar eles: manter as mos limpas e unhas aparadas; sempre
presentes nas cabines de segurana biolgica, tem ao lavar as mos antes e aps vrios procedimentos
efetiva por 15 minutos e o tempo mdio de uso (manuseio de materiais biolgicos viveis; uso das
aproximadamente de 3.000 horas. Pipetadores e pipetas luvas; antes de sair do laboratrio; antes e aps a
mecnicos e automticos: dispositivos de suco para ingesto dos alimentos e bebidas, etc.). Se no existirem
pipetas e ponteiras, como: pera de borracha, pipetador pias no local, deve-se dispor de lquidos anti-spticos
automtico, pipetas mono e multicanais, etc. Conteno para limpeza das mos;
para equipamentos como: homogeneizador, agitador, 3. proibir: a ingesto e/ou o preparo de alimentos e
ultrassom, etc. Equipamentos produtores de aerossis bebidas, fumar, mascar chicletes, manipular lentes de
devem ser cobertos com anteparo autoclavvel e, contato, a utilizao de cosmticos e perfumes, o
preferencialmente, abertos dentro das cabines de armazenamento de alimentos para consumo nas reas
segurana biolgica. Containers para desprezar os de manipulao de agentes biolgicos e qumicos. Em
materiais contaminados e prfuro-cortantes: precisam todos os laboratrios deve haver uma rea designada
estar disponibilizados recipientes resistentes e como refeitrio;
autoclavveis para desprezar os materiais que iro para 4. pipetar com a boca expressamente proibido e
o descarte. Conjunto (kit) de primeiros socorros: jamais se deve colocar na boca objetos de uso no
compostos por material comumente preconizado para laboratrio (canetas, lpis, borrachas, pipetas, entre
socorro imediato e antdotos especiais para produtos outros);
txicos usados nos laboratrios de ensino de 5. utilizar calados de proteo: fechados,
microbiologia e parasitologia. Chuveiro e lava-olhos: confortveis, com soldado liso e antiderrapante;
devem estar presentes em todos os laboratrios em 6. usar as luvas de procedimentos somente nas
perfeito estado de funcionamento e higienizado. A gua atividades laboratoriais e evitar tocar em objetos de
para os lava-olhos deve ser preferencialmente filtrada. uso comum;
Cabine de segurana biolgica (CSB): classes I e II 7. trajar roupas de proteo durante as atividades
(BRASIL, 2006). laboratoriais, como: jalecos, aventais, macaces, entre
outros. Essas vestimentas no devem ser usadas em
Boas prticas laboratoriais (BPLs) outros ambientes fora do laboratrio, como: escritrio,
Conforme MASTROENI (2005) e ARAJO biblioteca, salas de estar e refeitrios;
et al. (2009), as BPLs padres constituem um conjunto 8. evitar o uso de qualquer tipo de acessrios/
de normas, procedimentos e atitudes de segurana, as adornos durante as atividades laboratoriais;
9. manter os artigos de uso pessoal fora das reas microbiologia e parasitologia das universidades
designadas s atividades laboratoriais; brasileiras abrangem as diferentes reas do
10. organizar os procedimentos operacionais padres conhecimento e no seu desenvolvimento existe a
(POP) para o manuseio dos equipamentos e tcnicas presena de riscos. Esse fato demanda a necessidade
empregados nos laboratrios; de normas de segurana destinadas anlise e
11. garantir que a limpeza dos laboratrios (bancadas, desenvolvimento de estratgias para minimiz-los,
pisos, equipamentos, instrumentos e demais sendo esta a principal funo da biossegurana. A
superfcies) seja realizada regularmente antes e determinao dos nveis de conteno deve ser
imediatamente aps o trmino das atividades priorizada nos laboratrios das universidades, pois,
laboratoriais. Em caso de derramamentos, dependendo com o surgimento de novas tecnologias, os
do tipo e quantidade de material biolgico disseminado, procedimentos operacionais para a manipulao de
pode-se empregar, para a descontaminao do local: agentes biolgicos patognicos devero ser adequados
lcool a 70% ou soluo de hipoclorito de sdio, para garantir a segurana dos profissionais, acadmicos
preferencialmente, a 10%, deixando agir por 30 minutos e do meio ambiente.
e aps remover com papel absorvente; Devido ao fator humano estar implicado s
12. assegurar que os resduos biolgicos sejam causas de acidentes em laboratrios, o maior esforo
descontaminados antes de ser descartados; deve estar direcionado aos aspectos de educao em
13. manusear, transportar e armazenar materiais
biossegurana, que devem estar presentes no cotidiano
(biolgicos, qumicos e vidrarias) de forma segura para
das instituies de ensino. Salienta-se que alguns
evitar qualquer tipo de acidente. O manuseio de
indivduos tendem somente a levar em considerao a
produtos qumicos volteis, metais, cidos e bases
execuo das atividades e menosprezar os riscos, sendo
fortes, entre outros, necessita ser realizado em capela
que esta postura no pode ser admitida em qualquer
de segurana qumica. As substncias inflamveis
ambiente laboratorial. Para que um programa de
precisam ser manipuladas com extremo cuidado,
evitando-se proximidade de equipamentos e fontes educao em biossegurana seja efetivo, necessrio
geradoras de calor; que todos os usurios dos laboratrios estejam
14. usar os EPIs adequados durante o manuseio de devidamente informados acerca dos princpios de
produtos qumicos; biossegurana, bem como aptos a coloc-los em prtica
15. identificar adequadamente todos os produtos de maneira correta, a fim de manter o ambiente seguro.
qumicos e frascos com solues e reagentes, os quais
devem conter a indicao do produto, condies de REFERNCIAS
armazenamento, prazo de validade, toxidade do produto ARAJO, S.A. et al. Manual de biossegurana: boas prticas
e outros; no laboratrios de aulas prticas da rea bsica das cincias
16. acondicionar os resduos biolgicos e qumicos biolgicas e da sade. 2009. 100f. Disponvel em: <http://
em recipientes adequados, em condies seguras e www.unp.br/arquivos/pdf/institucional/docinstitucionais/manuais/
manualdebiosseguranca.pdf>. Acesso em: 23 fev. 2012.
encaminh-los ao servio de descartes de resduos dos
laboratrios para receberem o seu destino final; BRASIL. Lei no 11.105, de 24 de maro de 2005. Regulamenta
17. afixar a sinalizao adequada nos laboratrios, entre os incisos II, IV e V do 1o do art. 225 da Constituio Federal,
elas, incluir o smbolo internacional de Risco Biolgico estabelece normas de segurana e mecanismos de fiscalizao
de atividades que envolvam organismos geneticamente
na entrada dos laboratrios a partir do NB-2;
modificados OGM e seus derivados, cria o Conselho Nacional
18. instituir um programa de controle de roedores e de Biossegurana CNBS, reestrutura a Comisso Tcnica
vetores nos laboratrios; Nacional de Biossegurana CTNBio, dispe sobre a Poltica
19. evitar trabalhar sozinho no laboratrio e jornadas Nacional de Biossegurana PNB, revoga a Lei no 8.974, de 5
de janeiro de 1995, e a Medida Provisria no 2.191-9, de 23 de
de trabalho prolongadas;
agosto de 2001, e os arts. 5 o , 6 o , 7 o , 8 o , 9 o , 10 e 16 da Lei no
20. providenciar treinamento e superviso aos 10.814, de 15 de dezembro de 2003, e d outras providncias.
iniciantes nos laboratrios; Dirio Oficial da Unio, 28 de maro de 2005. Disponvel
21. disponibilizar kits de primeiros socorros e em: <http://www.planalto.gov.br/ccivil_03/_Ato2004-2006/
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