AO DEL BIEN SERVICIO AL CIUDADANO

TEMA:

TINCIN GRAM

CARRERA : CIENCIAS DE LA SALUD

ESPECIALIDAD : ENFERMERIA (SUPERATE I)

INTEGRANTES :

QUISPE RONCAL, MAGALI

JANTO GUZMAN, LEYDY
CONTRERAS ROS, DEYSI
NINANYA RAMOS, ALAN E.
SANCHEZ MEBDOZA, MILAGROS

HUANCAYO-PER-2017
TEMA:
TINCIN GRAM

OBJETIVOS:

Aprender a desarrollar de manera adecuada la Tincin Gram.

Observar y diferenciar bacterias Gram positivas y Gram
negativas.
Estudiar las caractersticas morfolgicas de diferentes gneros
de bacterias.
Determinar la reaccin Gram positivo y negativo de bacterias.
Conocer las tcnicas de preparacin y observacin microscpica
de bacterias.
FUNDAMENTO TERICO

Con el constante inters de estudio y anlisis de las bacterias se han

desarrollado tcnicas para visualizar cada una de ellas con sus
respectivas morfologas, pero se descubri que con adicionar
colorante a las mismas se podan apreciar an ms cada una de sus
estructuras y caractersticas de acuerdo al color que cada bacteria
retenga en su membrana externa, con esto descubrimiento se
desarroll el siguiente concepto:

Tincin: Es una tcnica auxiliar utilizada en microscopa para mejorar

el contraste en la imagen vista al microscopio. Los diferentes
colorantes pueden ser utilizados para aumentar la definicin y
examinar grandes cortes de tejido, poblaciones celulares o incluso
para resaltar organelas dentro de clulas individuales.

Los fundamentos de la tcnica se basan en las diferencias entre las

paredes celulares de las bacterias gram positivas y gram negativas

La pared celular de las bacterias gram positivas posee una gruesa

capa de peptidoglicano, Adems de dos clases de cidos teicoicos:
anclado en la cara interna de la pared celular y unido a la membrana
plasmtica, se encuentra el cido lipoteicoico, y ms en la superficie,
el cido teicoico que est anclado solamente en el peptidoglicano
(tambin conocido como murena).

Por el contrario, la capa de peptidoglucano de las bacterias gram

negativas es delgada, y se encuentra unida a una segunda membrana
plasmtica exterior (de composicin distinta a la interna) por medio de
lipoprotenas. Tiene una capa delgada de peptidoglicano unida a una
membrana exterior por lipoprotenas. La membrana exterior est
hecha de protena, fosfolpido y lipopolisacrido.

Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se tien diferencialmente debido

a estas diferencias constitutivas de su pared. La clave es el
peptidoglicano, ya que es el material que confiere su rigidez a la pared
celular bacteriana, y las gram positivas lo poseen en mucha mayor
proporcin que las gram negativas.

La diferencia que se observa en la resistencia a la decoloracin se

debe a que la membrana externa de las bacterias gram negativas es
soluble en solventes orgnicos, como por ejemplo la mezcla de
alcohol/acetona.

IMPORTANCIA
La tincin de Gram es til para diferenciar dos tipos de bacterias, las
que son positivas y las que no.
Las Gram positivas constan de una pared celular gruesa de mureina
(es un peptidoglicano) caracterstico de las bacterias. Se tien con el
colorante cristal violeta (colorante primario) y se ven obviamente
violetas.
Las Gram negativas se diferencian en que no toman esta coloracin,
dado que fuera de la capa de mureina (es ms delgada en estas
bacterias) existe una membrana externa de otra composicin qumica
que no permite la toma del color cristal violeta usado en la tcnica.
Toman en colorante secundarios que es la safranina y se ven de color
rosado.
USO DE LA TINCIN DE GRAM
Le pueden hacer este examen para diagnosticar una infeccin
causada por bacterias. Tambin puede identificar el tipo de
bacteria causante de la infeccin.
Usada con frecuencia para examen microscpico directo de
muestras y subcultivos

Este examen puede ayudar a encontrar la causa de diversos

problemas de salud, como:

Enfermedad o infeccin intestinal.

Enfermedades de transmisin sexual (ETS).
Dolor articular o hinchazn inexplicables.
Signos de una infeccin cardaca o acumulacin de lquido en el
saco delgado que rodea el corazn (pericardio).
Signos de infeccin del espacio alrededor de los pulmones
(espacio pleural).
Tos que no desaparece o si est expectorando material con un
mal olor o un color raro.
lcera cutnea infectada.
METODOLOGIA

1. Recoger muestras para ubicarlas en el microscopio.

2. Hacer el extendido con un palillo de madera.
3. Dejar secar a temperatura ambiente o fijarlas utilizando un
mechero.
4. Fijar la muestra con metanol durante un minuto o al calor
(flameado tres veces aproximadamente).
5. Agregar azul violeta (cristal violeta o violeta de genciana) y
esperar un minuto.
6. Enjuagar con agua no directamente sobre la muestra
7. Agregar lugol y esperar un minuto aproximadamente.
8. Agregar alcohol acetona y esperar entre 5 y 30 segundos segn
la concentracin del reactivo (parte crtica de la coloracin). (las
gram - se decoloran, las gram + no)
9. Enjuagar con agua.
10. Tincin de contraste agregando safranina o fucsina bsica
y esperar un minuto. Este tinte dejar de color rosado-rojizo las
bacterias gram negativas.
11. Lavar levemente con agua.

12. Para observar al microscopio ptico es conveniente hacerlo

a 100x con aceite de inmersin.
CONCLUSIONES:
Luego de haber finalizado este laboratorio podemos concluir lo
siguiente:
1. Tanto las bacterias Gram positivas como las Bacterias Gram
negativas se presentan morfolgicamente como cocos o bacilos,
sin embargo al ejecutar tincin de Gram en estas para identificar
su grupo taxonmico, las Gram positivas se tien de color violeta
mientras que las Gram negativas se tien de color rosado.

2. La tincin de Gram permite conocer la morfologa celular, el

tamao, la forma y su clasificacin taxonmica (Gram positivos o
Gram negativos) de acuerdo al color que tornan las bacterias
despus de la tincin, sin embargo no permite conocer la especie
o gnero de la bacteria al cual pertenece.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1. Gonzlez Juan. Definicin de peptidoglicano, cido teicoico y
lipopolisacridos [En lnea]. Disponible:
http://www.ehu.es/biomoleculas/hc/sugar35b.htm#lp. Citado:
19/10/2013.

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Disponible: http://es.scribd.com/doc/52811425/Tinciones-en-
Microbiologia-Seminario. Citado: 19/11/2013

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5. Forbes. B. A. (2009). Diagnostico Microbiolgico. Medica
Panamericana

6. Sgaard, M.; Nrgaard, M.; Schnheyder, H. (2007): First

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Gram stain report, artculo en la revista Journal of Clinical
Microbiology, 45: pg. 1113; (2007).
7. Lpez Tvez, Leonor (2006). Comportamiento de las bacterias
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8. Cavallini, E.R. (2005) Bacteriologa General: Principios Y

Practicas de Laboratorio.

Costa Rica: Universidad de Costa Rica.

9. EUNED (2004). Introduccin a la microbiologa. Reverte.

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11. Madigan, M. T; Martinko J., Parker J. (2004): Brock biology

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edicin, (2004).

12. Bergey, David H.; Holt, John G.; Krieg, Noel R.; Sneath,
Peter H. A. (1994): Bergey's manual of determinative
 bacteriology. Lippincott Williams & Wilkins, novena edicin,
(1994.)

13. Gram, C. (1884). The differential staining of Schizomycetes

in tissue sections and in dried preparations. Fortschritte der
Medizin, 2, 185-9.

PRODUCTO FINAL
La tincin Gram.- nos sirve para determinar los Gram positivos y negativos en la
carrera de enfermera.

La coloracin de Gram, es una de las ms empleadas en el diagnstico de enfermedades

infecciosas, es una tincin completa en el cual intervienen dos colorantes, un primario
(cristal violeta) y otro secundario o diferencial (safranina). A esta tincin tambin se le
llama diferencial debido a que permite diferenciar a las bacterias en dos grandes grupos:

Bacterias Gram positivas: se tien de color morado oscuro (azul).

Bacterias Gram negativas: se tien de color rosa.

No obstante, algunas bacterias tienen la capacidad de colorearse o no colorearse con el

colorante primario (cristal violeta), es decir pueden presentarse como Gram positivas y
Gram negativas, a ellos se les denomina Gram Variables.
En el siguiente cuadro podemos observar lo siguiente:
SINDROMES CLINICOS
LOCALIZACIN ENFERMEDAD EDAD TPICA

Ap. Respiratoria Faringoamigdalitis Escolares(esp.5-12)

Nasofaringitis Febril <3aos
Adenitis cervical 3-8aos
< 10 aos todas las
edades
Imptigo <5 aos
Piel y Tej. Blandos Erisipela <2aos
Celulitis perianal 2-8 aos
Fascitis necrosan te Todas las edades
Mediados por toxinas Escarlatina 5-11
Shock toxico Todas las edades.
estreptoccico

ANEXOS:

FARINGOAMIGDALITIS AGUDA
Es la infeccin respiratoria ms frecuente producida por S. pyogenes, tambin
presente en casos de otitis media y sinusitis, pude provocar secuelas no
supurativas: Fiebre reumtica y glomrulo nefritis.
IMPTIGO (< 6 AOS)
Puede ocurrir sobre piel sana o como complicacin (sobreinfeccin) de
picaduras, erosiones o heridas
Etiologa: EBHGA y S. Aureus.
Contagiosidad elevada.