Laboratorio de Integracin II: Bacteriologa Mdica

Dra. Maritza Lizeth lvarez Ainza

Prctica No. 2
Cultivo de catter por la tcnica de Maki

Objetivo: Semi-cuantificar un cultivo de la punta de catter por la tcnica de Maki.

Introduccin:
La tcnica de cultivo semicuantitativo de la punta del catter fue descrita por primera vez por Maki
y cols. en 1977. Este mtodo cultiva la superficie externa de la punta del catter. La tcnica consiste
en rodar tres o cuatro veces sobre la superficie de una placa de agar sangre, con la ayuda de unas
pinzas estriles, el segmento intravascular del catter (3-4 cm del extremo distal). Cuando en el
cultivo crecen 15 Unidades formadoras de colonias (UFC) por placa, se considera que el catter
est colonizado. El criterio de positividad (15 UFC) fue elegido porque la mayora de los pacientes
con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccin, mientras que todos los casos
que cursaban con bacteriemia tuvieron recuentos superiores a 15 UFC y con frecuencia las colonias
fueron incontables. La especificidad de sta tcnica fue del 76%. Este mtodo, por su sencillez ha
sido aceptado por la mayora de los laboratorios de microbiologa y es la tcnica de referencia. Sin
embargo, tiene algunas limitaciones, ya que la mayora de los catteres utilizados en estos estudios
fueron catteres perifricos y por otra parte es imposible calcular la sensibilidad de la tcnica ya
que las definiciones de IRC, de bacteriemia relacionada con catter (BRC) y de funguemia
relacionada con catter (FRC) exigen un cultivo positivo de la punta del catter. Diversos estudios
con CVC han demostrado la existencia de casos de sepsis asociados a recuentos inferiores a 15 ufc
o incluso negativos por esta tcnica, particularmente si la sepsis es de origen endoluminal. La
disminucin del criterio de positividad de 15 a 5 ufc puede mejorar la sensibilidad de la prueba, pero
disminuye su especificidad. Un cultivo de catter positivo por la tcnica de Maki tiene escaso valor
predictivo positivo (VPP) de BRC. Dicho valor slo puede ser aumentado si se seleccionan catteres
de pacientes con sospecha clnica de BRC. Aunque la simplicidad tcnica de esta prueba diagnstica
ha generalizado su uso, no hay que olvidar que existe alrededor de un 15% de bacteriemias de origen
endoluminal, especialmente en catteres de larga duracin, que podran no ser diagnosticadas si
slo se realiza el cultivo semicuantitativo

Material:
Cajas Petri con agar sangre, con agar sal manitol, con agar MacConkey
Pinzas
Tubos con TSA 3 mL (agar tripticasa soya)
Pruebas bioqumicas Citrato (4 mL), TSI (4 mL), MIO (3 mL), RM-VP (3 mL, 1.5 mL), coagulasa (0.5
mL de caldo BHI y 0.5 mL de plasma).

Procedimiento:
1.- Rodar tres o cuatro veces sobre la superficie de una placa de agar sangre, con la ayuda de unas
pinzas estriles, el segmento intravascular del catter (3-4 cm del extremo distal)
2.- Se incuban a 37C por 24 h con placa invertida.
3.- realizar tincin Gram, catalasa, oxidasa
4.- en base a los resultados de la tincin y pruebas hacer las pruebas bioqumicas
correspondientes.

Lectura de la placa e interpretacin de los resultados:

 Cuando en el cultivo crecen 15 ufc por placa, se considera que el catter est colonizado
El criterio de positividad (15 ufc) fue elegido porque la mayora de los pacientes con
recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccin, mientras que todos los
casos que cursaban con bacteriemia tuvieron recuentos superiores a 15 ufc y con
frecuencia las colonias fueron incontables.

Tarea:

1. Cules son los microrganismos frecuentemente asociados en las infecciones por

catteres?
2. Qu otros mtodos existen para la determinacin de infecciones en catteres?