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correctamente solamente cuando las condiciones bajo las cuales se ha recogido la sangre u otras
muestras, estn adecuadamente identificadas y normalizadas, o cuando se reconoce y se tiene en
cuenta la carencia de normalizacin para validar una muestra. Mientras los especialistas del laboratorio
clnico conocen los conceptos de variacin biolgica- farmacolgica y sean aplicables estos podran
validar la toma de producto para ser procesado.
La flebotoma constituye una de las etapas ms importantes en el trabajo del laboratorio clnico. Por una
parte representa el primer contacto entre el laboratorio y sus pacientes y desde el punto de vista de la
muestra sangunea, la enorme importancia que conlleva una muestra apropiadamente colectada, la
seguridad de su origen y el correcto envasado y transporte, constituyen factores fundamentales en la
evaluacin e informe de los exmenes a realizar.
El personal que ha de realizar la coleccin de la muestra sangunea, debe tener presente que en el
trato correcto del paciente, su orientacin y la habilidad para realizar su trabajo, est la Cara del
Laboratorio Clnico, ante la comunidad que ha de servir.
Es necesario garantizar una buena calidad en la fase preanaltica que incluye la preparacin y la
obtencin de las muestras. En caso contrario, no servir de nada la inversin de recursos durante las
fases analtica y postanaltica. Garantizar la calidad de la fase preanaltica es mucho ms difcil de
conseguir, ya que en esta fase hay una serie de factores que la dificultan considerablemente.
Intervienen en la misma muchas personas que, a veces, son ajenas al laboratorio y tambin algunos
procedimientos que se hacen fuera del laboratorio y son difciles de controlar.
El transporte de las muestras desde el mdulo hasta el laboratorio clnico procesador tiene que regirse
por una normativa tcnica que garantice la estabilidad de las propiedades biolgicas.
Independientemente del medio de transporte, es necesario que los sistemas y las empresas de
transporte estn autorizadas en funcin de los tipos de materiales a transportar. Todo el personal que
participe en los diferentes procesos referidos al transporte tiene que disponer de la formacin,
habilidades y experiencia necesarias para ejecutar las actividades requeridas. Tambin hay que
asegurar que sean conscientes de la relevancia e importancia de sus actividades y sepan que
contribuyen a la obtencin de los objetivos de la calidad.
En definitiva, tenemos que considerar que todos los implicados en la fase preanaltica tienen que
participar y trabajar conjuntamente para conseguir los objetivos de la calidad.
EL PERSONAL DE LABORATORIO ESTA CAPACITADO PARA VALIDAR LAS MUESTRAS
CLNICAS, ANTES DE ENTRAR A SER PROCESADAS EN EL LABORATORIO.
Es importante tener presente que existen muchos factores que pueden afectar las pruebas de
laboratorio, algunos de los cuales pueden ser evitados con una adecuada orientacin al paciente y una
correcta tcnica de extraccin sangunea. A continuacin enumeraremos algunos de estos factores y
recomendaciones al respecto.
1. La ansiedad y la tensin mental o fsica puede afectar los niveles de muchos componentes
sanguneos. Tal es el caso de las concentraciones de Prolactina, Cortisol, Catecolamina, Aldosteronas
y Renina. Tambin puede elevar la cuenta de leucocitos.
2. Se recomienda evitar ejercicios fsicos vigorosos durante 3 das previos a la toma de muestra, ya
que pueden alterar los niveles de CPK, LDH, AST Potasio, Glucosa, Lactato, Prolactina y Cortisol.
3. El ritmo diurno de algunos fluidos corporales muestran fluctuaciones durante el da. Por ejemplo los
niveles de Cortisol son altos en la maana, pero decrecen en la tarde. Los niveles de hierro tienden a
caer durante el da.
4. La situacin diettica del paciente puede ser importante para ciertas pruebas. Tal es el caso de las
variaciones en la concentracin de lpidos despus de una comida grasosa. El suero sanguneo
muestra una apariencia lechosa debido a la presencia de triglicridos y Quilomicrones. Estos sueros
hiperlipidmicos influyen en las mediciones, por lo que se recomienda tomar muestra despus de un
periodo de ayuno, usualmente de toda la noche.
5. La ingestin de etanol induce cambios en la composicin de los lpidos corporales. De particular
inters son las enzimas hepticas, como la Fosfatasa Alcalina, Transaminasas, Gama Glutamil
Transferasa y otros componentes como la Glucosa, Triglicridos, Uratos y Lactato.
6. El fumar puede producir variaciones en los resultados de algunos componentes como la Lipasa,
Amilasa, Colesterol, Glucosa e igualmente afecta la absorcin gstrica en la prueba de tolerancia a la
Glucosa.
7. La ciruga y la inyeccin intramuscular provoca un aumento en la concentracin de creatin cinasa.
8. La exploracin rectal o la manipulacin prosttica, puede causar un aumento en la concentracin del
antgeno prosttico especfico.
9. Los anticonceptivos orales afectan profundamente la actividad estrognica y conducen al aumento
de muchas protenas como la tiroxina, Cortisol y las hormonas sexuales.
10. Medicamentos como barbitrico y Fenitoina, inducen enzimas hepticas con valores elevados.
11. Evite extraer sangre arriba de una inyeccin intravenosa previa, ya que las concentraciones de
muchos compuestos pueden resultar errneamente altos o bajos.
12. Evite provocar hemlisis durante el proceso de extraccin o llenado de los tubos, lo cual afectar
algunas pruebas relevantes. La hemlisis puede ocurrir tambin por exceso de residuos del alcohol
utilizado durante la desinfeccin del sitio a puncionar. Tambin puede ser debido a un incremento en la
fragilidad capilar y alto volumen de clulas empacadas, especialmente en recin nacidos.
13. Evite agitar con fuerza los Microtainers para microcoleccin de muestra, ya que puede provocar su
hemlisis, este tipo de muestras generalmente son pedriaticas.
14. Evite puncionar en un rea con hematoma, fstulas, quemaduras, escoriaciones de la piel, cicatrices
o del costado en que se ha realizado mastectoma reciente.
15. Verifique condiciones de ayuno para las pruebas que lo requieran.
16. Las pruebas seriadas como curvas de tolerancia, post-prandial, post-ejercicios,etc deben
monitorearse en el tiempo adecuado, por lo que tienen prioridad.
17. En el caso de las pruebas seriadas, deben rotularse los tubos con la hora de toma de la muestra.
18. Es recomendable preguntar al paciente si existen restricciones para la flebotoma (Mastectoma,
etc.).
19. Colocar la firma responsable a todos los formularios.
INTERFERENCIAS:
Los tubos con anticoagulante deben invertirse suavemente y colocarlos en posicin vertical, para
evitar el contacto prolongado con el tapn de caucho.
Algunos compuestos se pueden adsorber al tubo. Tal es el caso de la hormona ACTH y la
Paratiroidea que se adsorben al vidrio con facilidad, por lo que se recomienda tubos de plstico.
Los separadores de suero se utilizan para separar el suero libre del cogulo de sangre. Estos
pueden ser de gel de silicn, poliester o perlas de vidrio. En algunos casos debido a problemas en la
centrifugacin y a altas temperaturas, pueden quedar gotas de gel dentro del suero. Se ha demostrado
que estas gotas de gel pueden interferir con algunas mediciones. Es conocido que la progesterona se
reduce apreciablemente cuando se almacena sobre gel por varios das. Igualmente ocurre con la
Lidocaina, Fenobarbital, Fenitoina y Carbamazepina.
Algunas hormonas polipeptdicas de bajo peso molecular, como la ACTH, Glucagn, Gastrina y
otras hormonas intestinales, se destruyen rpidamente por enzimas presentes en la sangre. Por lo que
es necesario centrifugar la muestra a baja temperatura, 10 minutos despus de la toma y almacenar el
suero o plasma inmediatamente a 20 C.
Aquellos tubos con anticoagulantes deben ser llenados exactamente hasta la marca, cualquiera sea
el mtodo que se utilice para extraer la sangre, para evitar que la concentracin del anticoagulante sea
demasiada alta, tal que afecte el sistema de medicin.
La sangre recolectada en los tubos de muestras, debe ser llenada en un orden especfico para evitar
contaminacin cruzada de aditivos entre los tubos. El orden recomendado es el siguiente:
Las influencias intrnsecas tales como raza, gnero y edad pueden afectar las magnitudes bioqumicas
y hematolgicas. Estas variables son caractersticas individuales y, por tanto, no sujetas a cambios.
Muy frecuentemente, los factores intrnsecos y externos son difciles de distinguir.
EDAD
La edad puede afectar las concentraciones de ciertos componentes de la sangre y de la orina despus
del nacimiento, durante la adolescencia o en la vejez. La concentracin de eritrocitos en la sangre y, por
tanto, la concentracin de hemoglobina son mucho ms altos en los neonatos que en los adultos.
Durante los primeros das siguientes al nacimiento, el incremento de la presin parcial de oxgeno
arterial provoca la degradacin de los eritrocitos. El aumento resultante en la concentracin de
hemoglobina en el plasma conduce a su vez a concentraciones elevadas de bilirrubina en el plasma.
Dado que la funcin del hgado (aqu en particular la glucuronizacin) no est totalmente establecida en
los neonatos, se observan concentraciones de bilirrubina en el plasma aumentadas.
GNERO
Al igual que en muchos aspectos macroscpicos y patrones hormonales especficos del gnero, pueden
encontrarse diferencias en las magnitudes bioqumicas y hematolgicas. En pacientes mayores de 65
aos desaparecen las diferencias, debidas al gnero, en las concentraciones de hierro en el suero.
Otros ejemplos de diferencias debidas al gnero son las concentraciones de creatina- cinasa y
creatinina en el plasma. Estas concentraciones dependen de la masa muscular que es, en general,
mayor en los varones. Ciertas actividades atlticas que den como resultado un aumento de masa
muscular pueden limar esta diferencia.
EJERCICIO:
La actividad muscular tiene tanto efectos transitorios como de larga duracin sobre diversos
parmetros qumicos clnicos. Las variaciones bioqumicas transitorias de los constituyentes del plasma
inducidas por el ejercicio incluyen una disminucin inmediata y el posterior incremento en la
concentracin de cidos grasos libres, un fuerte aumento en la concentracin del aminocido alanina y
un notable incremento en la de lactato. Las variaciones transitorias observadas durante el ejercicio
estn relacionadas con la mayor actividad metablica por motivos energticos y queden corregidos a
los niveles correspondientes a los de antes del ejercicio o poco despus de su interrupcin.
Los efectos duraderos del ejercicio consisten en incrementos de las actividades de las enzimas
musculares medidas en el suero, por ejemplo Creatin Cinasa, Aldolasa, Aspartato-Aminotransferasa,
Lactato-Deshidrogenasa.
AYUNO PROLONGADO:
Si bien se ha recomendado que el paciente se encuentre en ayunas antes de ser sometido a puncin
venosa, con el fin de asegurar que las determinaciones analticas sean compatibles con los valores de
referencia, el ayuno prolongado, es decir, aquel que supere las 24 horas, puede dar lugar a resultados
inesperados. Dicho ayuno se ha visto asociado al aumento de la concentracin de bilirrubinas srica,
triglicridos, glicerol y cidos grasos libres plasmticos, sin modificar de modo significativo la
concentracin de colesterol plasmtico.
DIETA:
Los efectos fisiolgicos de una comida incluyen aumentos de la concentracin plasmtica de potasio y
de triglicridos. Los cambios que tienen lugar in vivo dependen del tipo y cantidad de alimentos
ingeridos, as como la cronologa de la venopuncin con respecto a la ingesta.
ETANOL:
Los cambios inmediatos inducidos por el etanol incluyen incrementos en la concentracin plasmticos
de lactato, cido rico, y metabolitos del etanol, principalmente del Acetaldehdo y del Acetato. En
alcohlicos crnicos se observan concentraciones plasmticas de HDL-colesterol superiores a los de
individuos no alcohlicos. As mismo los alcohlicos muestran niveles aumentados de Gamma Glutamil
Transferasa srica y cido rico srico, as como un volumen corpuscular medio, superior al normal.
TABACO:
El consumo de tabaco produce un incremento en el porcentaje de los valores de Carbixihemoglobina
sangunea. En fumadores consumados que han inhalan siempre el humo de los cigarrillos es frecuente
detectar valores de Carboxihemoglobina de hasta un 8%, muy superiores a los registrados en los no
fumadores, que son del orden de 1%.
Los efectos agudos del consumo de tabaco incluyen aumento en las Catecolaminas plasmticas, as
como el aumento del Cortisol srico. Las alteraciones de estas hormonas tambin tienen efectos
importantes en el recuento leucocitario perifrico; se produce una notable reduccin en la cifra de
Eosinfilos, aumentando los Neutrofilos y los Monocitos. Los cambios de los valores hormonales
tambin originan un incremento en los cidos grasos no esterificados del plasma.
Los efectos agudos del tabaco deben diferenciarse de los efectos crnicos. Estos ltimos comprenden
un aumento de los valores de hemoglobina sangunea, aumento del volumen corpuscular medio e
incremento del recuento leucocitario perifrico.
En ciertas muestras, como las de plasma y suero, los cristales de hielo que se forman producen efectos
de cortes lesivos para la estructura molecular, especialmente para aquellas molculas grandes como
las protenas; la congelacin lenta permite que se formen cristales de mayor tamao, cuyos efectos
degradativos son ms graves. En consecuencia, para que la estabilidad sea ptima se prefiere la
congelacin rpida.
Los residuos en los tubos utilizados en la recogida de los especmenes pueden contaminar las
muestras con fsforo inorgnico. La presencia de plastificantes en los tubos y en los tapones se han
implicado en la creacin de picos falsos en los mtodos basados en sistemas de cromatografa gas-
lquido. Adems, los tapones de corcho y algunos tubos de vidrio pueden liberar calcio al ser expuesto a
la accin de la sangre y dar lugar, por tanto, a una concentracin de calcio srico falsamente
incrementada. La orina recogida para cualquier tipo de anlisis de metales raros exige la utilizacin de
recipientes lavados con cidos libres de contaminantes. Cuando se obtienen biopsias hepticas para
anlisis de metales, el investigador debe considerar la contaminacin procedente del metal de la aguja.
HEMLISIS:
La hemlisis denota la lisis anormal de los eritrocitos. La hemlisis puede producirse antes de la
venopuncin o durante el procedimiento analtico. Los factores que contribuyen a la hemlisis in vitro
durante la toma de muestra de sangre en tubos al vaco incluyen la fuerte expansin de la sangre en el
tubo evacuado o la mezcla de la sangre con el anticoagulante de oxalato, o ambas cosas.
LIPEMIA:
Los alimentos interfieren a veces en los mtodos de estudio, por lo que antes de las pruebas en
necesario conocer la dieta del paciente y programar las mismas despus de un periodo de ayuno
nocturno de 8 a 12 horas. La concentracin de casi todos los constituyentes de la sangre no cambian
despus de una comida, pero se hace ayunar al paciente porque la sangre reunida poco despus de la
ingestin de alimentos suele ser turbia por el incremento temporal de los niveles de triglicridos, los
cuales interfieren a veces en muchas determinaciones qumicas.
Es frecuente encontrar un suero o plasma lechoso o lactescente en muestras obtenidas de 1 a 2 horas
despus de una comida rica en grasas, o en pacientes con ciertas enfermedades metablicas. Esto
interfiere en las determinaciones espectrofotomtricas.
La turbidez provocada por una concentracin alta de triglicridos en el suero provocar resultados
aparentemente altos para todas las sustancias cuyas determinaciones se basan en la absorbancia a las
mismas longitudes de onda en que las partculas de lpido tambin absorben la luz.
ICTERICIA:
La hiperbilirrubinemia constituye el sustrato humoral de toda ictericia y tiene lugar siempre que se libere
un exceso de hemoglobina o se retenga la bilirrubina formada en proporcin normal por insuficiencia
funcional heptica o por un obstculo en las vas biliares. La bilirrubina puede interferir en las
determinaciones de albmina, en los ensayos donde se utilizan reactivos de cloruro frrico, en las
determinaciones de glucosa basadas en el mtodo de o-toluidina y en la protena total por biuret.
TRANSPORTE DE LOS ESPECMENES (MUESTRAS) AL LABORATORIO:
Debe considerarse diversos aspectos para una transportacin adecuada de los especmenes
sanguneos al laboratorio, los criterios establecidos se determinan con base en las distancias y la
estabilidad del espcimen. Algunos aspectos de transportacin en el sitio son:
TIEMPO: Los especmenes deben ser transportados al laboratorio en el menor periodo de tiempo
posible, especialmente si la temperatura del rea de recoleccin es superior a los 22C.
Los tubos con sangre deben mantenerse en posicin vertical con el tapn hacia arriba; esta posicin
promueve la formacin del cogulo y reduce la agitacin del contenido del tubo, la cual a su vez reduce
la posibilidad de hemlisis.
El manejo suave, evitando la agitacin de los especmenes, ayuda a minimizar el dao de los
eritrocitos. Cuando hay una hemlisis moderada ( 1.0%), el suero es rojo a la vista las pruebas
seriamente afectadas (todas ellas aumentadas) son: LDH, AST, potasio; notablemente afectadas: hierro
(aumentado), ALT (aumentado),T4 (disminuido), y ligeramente afectadas son (todas aumentadas):
fsforo, protenas totales, albmina, magnesio, calcio, y fosfatasa cida.
Debe evitarse la exposicin a la luz para los analitos sensibles a la luz solar (ultravioleta) o
artificiales durante cualquier periodo de tiempo; esto es particularmente importante para la bilirrubina
cuando se est monitoreando a un recin nacido ictrico. Estos especmenes de deben cubrir con papel
aluminio o un equivalente. Tambin se sugiere el uso de tubos color mbar.
PREVENCIN DE ERRORES DURANTE LA TOMA DE SANGRE.
CAUSAS DE LA HEMOCONCENTRACIN:
a) Aplicacin prolongada del torniquete. La presin hidrosttica causa que algo de agua y elementos
filtrables escapen al espacio extracelular. Esto tiene efectos tambin sobre el empaque celular.
b) Masaje vigoroso del sitio a puncionar.
c) Esclerosis u obstruccin venosa.
CENTRIFUGACIN.
La centrifugacin de la sangre coagulada para obtener suero debera realizarse despus de haberse
asegurado de que la sangre ha coagulado. Normalmente, el tiempo de espera para que la sangre
coagule es aproximadamente de 30 min. Sin embargo, los pacientes que estn con una terapia
anticoagulante, o aquellos con deficiencias en la coagulacin tendrn una coagulacin retrasada. La
centrifugacin de sangre coagulada para obtener suero o de sangre anticoagulada para obtener plasma
se realiza tpicamente entre 1000 y 1200 g (3,500RPM) durante 15 minutos. Despus de la
centrifugacin, las muestras se envan a cada rea de proceso.
PROCEDIMIENTO DE RECEPCIN DE LAS MUESTRAS
El laboratorio clnico procesador tiene que aplicar los procedimientos necesarios para preservar la
calidad y la inalterabilidad de las muestras, desde el momento de su llegada a la recepcin.
Al llegar las muestras al laboratorio, se tienen que clasificar y preparar para ser centrifugadas si lo
requieren.
Las muestras que llegan refrigeradas tienen que mantenerse a esta temperatura hasta el momento de
ser centrifugadas. El laboratorio clnico procesador de las muestras tiene que disponer de un listado que
defina unos criterios de aceptacin que permitan rechazar la muestra cuando stos no se cumplan.
BIBLIOGRAFA: