12.

Cara mendeteksi mikroba pada Makanan

Terdapat banyak metode untuk mendeteksi keberadaan mikroorganisme pada sampel, namun
penyiapan sampel pada umumnya sama. Sejumlah sampel makanan (10 atau 25 gram)
diambil dan ditambahkan ke pencair yang cocok (Ringers solution atau air pepton 0,1%)
yang selanjutnya melibatkan proses pencampuran mekanis. Metode lainnya adalah sampel
ditumbuk bersama pencair dalam kantung plastik steril dengan paddles di dalam
stomacher. Volume pencair biasanya 3 kali lipat berat sampel ( 25 gram sampel untuk 225
mL pencair) sehingga didapatkan hasil homogenasi 10-1. Dari larutan ini, bida didaptkan hasil
10-2, 10-3, 10-4, dan setersunya.

Total Viable Count/ Standard Plate Count

Larutan sampel ditaruh di media agar yang penuh dengan nutrisi untuk perkembangan
mikroba, dengan pH yang dijaga sekitar 7-7,4. Sejumlah sel bakteri dimasukkan ke
media lalu diinkubasi. Setelah diinkubasi, koloni mikroba dapat terlihat lalu dapat
dihitung. Suhu inkubasi beragam, 55o C untuk bakteri termofil, 35-37oC untik bakteri
mesofil, 20-30oC untuk bakteri pencemar (spoilage), 5O C untuk bakteri psikotrop.

Metode Pour Plate

Beberapa cawan petri diinkubasi dengan 1 mL bagian dari larutan makanan. Beberapa
nutrient cair (10-15 ml) agar atau mediumlain didinginkan pada suhu 45oC lalu
dimasukkan ke setiap cawan dan dicampur. Setelah agar memadat, cawan diinkubasi
selama 102 hari pada suhu 37o C, 3-4 hari untuk suhu 20oC, dan 2-10 hari untuk suhu
5oC. Setelah diinkubasi, cairan berisi 30-300 koloni dihitung per gramatau per cm2.

Metode Spread Plate

Medium dituang ke cawan petri dan dibiarkan menjadi padat, lalu 0,1 ml larutan
makanan disebarkan di permukaan medium menggunakan L-shaped glass rods.
Cawan lalu diinkubasikan seperti metode sebelumnya.

Metode Spiral Plate

Metode ini menggunakan mesin yang memutar cawan selama inkubasi. Jadi koloni
mikroba akan bergerak dari tengah ke pinggir cawan dalamtrek spiral selama
inkubasi. Penghitungan bisa menggunakan counting grid atau laser-based automatic
colony counters.