CULTIVO, NUTRIO E MEIOS DE CULTURA

UTILIZADOS NO CRESCIMENTO DE
MICRORGANISMOS
CULTIVO: CONDIES FSICAS PARA O
CRESCIMENTO MICROBIANO
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um fator limitante do crescimento microbiano.

A maioria das bactrias cresce bem em meios com pH ao
redor de 7,0
Muitas espcies tolerarem variaes de pH entre 4,0 e 9,0
Bactrias: timo de crescimento se localiza entre 6,5 e 7,5.
Poucas bactrias podem se desenvolver abaixo de pH 4,5-5,0
mas esses so os limites preferidos pelos fungos e leveduras.
Thiobacillus thiooxidans que transforma o enxofre em cido
sulfrico, e cresce bem a pH 1,0.
Vibrio comma, agente causador da clera asitica, que
desenvolve a pH 10,0.
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Meios de cultura com presses osmticas inferiores da clula: geralmente no afetam sua
viabilidade que a rigidez da parede celular impede a entrada excessiva de gua.

Meios de cultura com presses osmticas mais elevadas: causam a perda de gua
intracelular, podendo ter efeito bacteriosttico ou bactericida.
Isotnico - onde a concentrao de solutos em um meio igual quela no interior da
clula.No h movimento de gua para dentro e para fora da clula;
Hipertnico - concentrao de solutos fora da clula maior que no interior. A gua flui
parafora da clula resultando na desidratao e contrao da clula;
Hipotnico - a concentrao de soluto no interior da clula maior que fora dela. A gua
flui para dentro da clula: pode inchar e se romper plasmlise.
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Halfilos extremos ou obrigatrios:

requerem alta concentrao de sais
para que ocorra o crescimento (30%
de sal);

Halfilos facultativos: toleram altras

concentraes de sais (de 2 a 15% de
sal)
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Metade do peso seco de uma clula bacteriana tpica composta de carbono;

Constitui o esqueleto das trs maiores classes de nutrientes orgnicos: lipdeos,
carboidratos e protenas: energia e unidade bsica de biossntese;
Quimio-heterotrficos: obtm a maior parte do carbono de protenas,
carboidratos e lipdeos;
Quimioautotrficos e os fotoautotrficos: a partir do dixido de carbono;
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Constituinte de aminocidos e protenas;

Constitui 14% do peso seco da bactria;
Algumas bactrias utilizam NH4+ or NO3;
Poucas utilizam o N2 para fixao do nitrognio.
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Enxofre necessrio para biossntese dos aminocidos cistena, cistina e

metionina; vitaminas. Algumas bactrias usam SO4-2 ou H2S;
Fsforo: essencial para a biossntese de cidos nuclicos e ATP;
Tais compostos podem estar dissolvidos na gua como componentes de vrios
nutrientes ou na atmosfera gasosa do meio.
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necessrios em concentrao muito baixa (g/L);

Co, Cu, Ni, Mo, Mn, Se, Zn, Cr;

cofatores de enzimas;

geralmente no preciso adicionar: presentes na gua;

se gua desmineralizada: adicionar soluo elementos traos.

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Compostos orgnicos: vitaminas, aminocidos, purinas e

pirimidinas;
Muitas vitaminas (tiamina, biotina, cobalamina) atuam
como coenzimas;
Alguns m.o. no sintetizam os fatores que devem ser
disponveis no meio.
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O material preparado no laboratrio para o crescimento de

microrganismos.

Se desejarmos o crescimento de uma cultura de um certo

microrganismo, por exemplo de uma amostra clnica, quais critrios devero
ser considerados para o meio de cultura?

Conter os nutrientes corretos;

Quantidade de gua, pH ajustado e oxignio;
Meio deve ser estril;
Temperatura adequada.
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Caldo Simples - formulao:

Extrato de carne ............ 0,3 g

Peptona ......................... 1,0 g
Cloreto de sdio ............ 0,5 g
gua destilada .............. 100,0 ml
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Agar
Complexo de polissacardeos;
Utilizado para solidificaes de meios de cultura
Geralmente no metabolizado pelos microrganismos
Liquefaz a 100C
Solidifica a ~40C
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Meio Quimicamente Definido

aquele em que a composio qumica exata conhecida

Meio quimicamente definido para o crescimento de uma bactria

quimioautotrfica tpica como E. coli

Glicose...................................................................................... 0,3 g
Fosfato de amnia monobsico (NH4H2PO4) ......................... 1,0 g
Cloreto de sdio ...................................................................... 0,5 g
gua destilada .......................................................................... 100,0 ml
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Meio Complexo
Utilizados normalmente para trabalhos experimentais no laboratrio
ou para o crescimento de bactrias autotrficas.

Composio do Meio Agar Nutriente, um Meio Complexo para o crescimento de

Bactrias

Peptona (protena parcialmente digerida) ................................ 5,0 g

Extrato de carne........................................................................ 3,0 g
Cloreto de sdio......................................................................... 8,0 g
Agar..............................................................................................15,0g
gua.............................................................................................1 litro
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Meio para crescimento de anaerbios

Utiliza-se meios de cultivo especiais: meios redutores
(tioglicolato de sdio)
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Tcnicas Especiais de Cultivo

Capnoflicos
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Meios de Cultivo Seletivo

Favorece o crescimento de uma determinada bactria
de interesse, impedindo o crescimento de outras
bactrias.
Ex: gar Sabouraud dextrose, pH 5,6, utilizado no crescimento de fungos que so
favorecidos, em relao as bactrias, pelo baixo pH.
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Meios de Cultivo Diferencial

Utilizado para a fcil identificao da colnia da bactria
de interesse quando existem outras bactrias crescendo na
mesma placa de meio de cultura.
Ex: meio gar-sangue, utilizado para a identificao de bactrias capazes de destruir
clulas sangneas (anel claro em torno da colnia).
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Meios de Cultivo
Seletivo e
Diferencial No inoculado Staphylococcus
epidermidis

Staphylococcus
aureus

gar Sal Manitol

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Meios de Enriquecimento
Utilizado para o isolamento de bactrias presentes em
pequeno nmero junto com outras que esto em grande
quantidade (fezes e solo);
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Meio de manuteno:
Estocagem ou manuteno - utilizados para conservao de
microrganismos no laboratrio, ou seja, garantem a viabilidade
de microrganismos.

Ex: gar Conservao, Meios com leite, gar suco de tomate, gar Simples, meio semi-
slido, etc.
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Preservando culturas bacterianas

Congelamento em baixas temperaturas (meio liquido + glicerol e
congelamento rpido de -50 a -95C)

Liofilizao (rapidamente congelado, em meio lquido, sob temperaturas de -

54 a -72C e imediatamente submetido remoo de gua por vcuo)
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