BIOQUMICA BSICA

1 CUATRIMESTRE 2 GRADO EN FARMACIA

TEMA 5: HEMOGLOBINA Y MIOGLOBINA

1. La Hemoglobina y la Mioglobina: Dos protenas evolutivamente relacionadas que transportan y

almacenan oxgeno.
2. Semejanzas estructurales y funcionales.
3. El grupo hemo.
4. La hemoglobina experimenta un cambio de conformacin al unirse al oxgeno.
5. La unin del oxgeno a la hemoglobina es cooperativa.
6. Moduladores de la unin del oxgeno a la hemoglobina: El efecto Bohr.
7. El papel que juega el 2,3 difosfoglicerato.
8. Hemoglobinas anormales: La anemia falciforme.

1. La Hemoglobina y la Mioglobina: Dos protenas evolutivamente relacionadas que transportan y

almacenan oxgeno.
Las funciones de muchas protenas implican la unin reversible de otras molculas. Una molcula unida
de manera reversible por una protena se conoce con el nombre de ligando, que puede ser cualquier tipo
de molcula (incluido una protena). El ligando se une a un lugar de la protena llamado sitio de fijacin,
que es complementario al ligando en tamao, forma, carga y carcter hidroflico o hidrofbico. Adems, la
interaccin es especfica. La adaptacin estructural que se produce entre la protena y el ligando se llama
encaje inducido.
La hemoglobina y mioglobina son protenas transportadoras de oxgeno en clulas eucariticas. Fueron las
primeras protenas de las que se determin su estructura tridimensional.
Son dos protenas muy parecidas y a la vez muy diferentes. La mioglobina no solo est en los hemates;
sino que estn en todas las clulas (sobre todo, en las clulas musculares) y la hemoglobina est en los
hemates.
El oxgeno no es muy soluble en agua y no puede transportarse a los tejidos en cantidad suficiente por
simple disolucin en el suero sanguneo. La difusin del oxgeno a travs de los tejidos es tambin
insuficiente a distancias superiores a unos pocos milmetros. La evolucin de animales multicelulares
grandes dependi de la evolucin de protenas que pudiesen transportar y almacenar oxgeno. Sin
embargo, ninguna de las cadenas laterales de los aminocidos proteicos est preparada para la unin
reversible de molculas de oxgeno. Este papel es desempeado por ciertos metales de transicin, entre
ellos el hierro y el cobre, que tienen una fuerte tendencia a unir oxgeno. No obstante, el hierro libre
provoca la formacin de especies altamente reactivas del oxgeno. En los organismos multicelulares, el
hierro suele estar incorporado a un grupo prosttico unido a una protena llamado grupo hemo.
La mioglobina es una protena de unin a oxgeno relativamente simple que est presente en casi todos
los mamferos, principalmente, en el tejido muscular. Es particularmente abundante en el msculo de los
animales que se sumergen, tales como focas y ballenas que deben almacenar suficiente oxgeno para
estancias prologadas bajo el mar.
2. Semejanzas estructurales y funcionales.
1. Estructura: En cuanto a la estructura cuaternaria La mioglobina no tiene (es un nico polipptido
de 153 aminocidos que est formado por ocho segmentos -helicoidales conectados por giros) pero la
hemoglobina s tiene estructura cuaternaria; est constituida por 4 subunidades iguales 2 a 2 a las que
llamamos -1, -2, -1 y -2. La estructura terciaria es similar en ambos casos; ambas estn constituidas
exclusivamente por -hlice. En cuanto a estructura secundaria, las dos son muy parecidas. La secuencia
de aminocidos (estructura primaria) no es semejante; lo nico que tienen igual son unos aminocidos
relacionados con su funcin, que estn conservados (en ambas protenas son iguales). Ambas poseen el
grupo prosttico hemo. Las dos protenas fijan oxgeno en dicha estructura; es el lugar donde tanto la
hemoglobina como mioglobina fijan el oxgeno. Como la mioglobina es solo 1 subunidad; fija 1 molcula de
oxgeno; como la hemoglobina tiene 4 subunidades; fija 4 molculas de oxgeno.
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2. Funcin: Las dos protenas son capaces de llevar oxgeno consigo (fijar). El oxgeno es un ligando.
*La albmina no tiene ligando porque transporta sustancias indistintamente, pero la hemoglobina tiene
ligando porque transporta el oxgeno de una manera especfica. La hemoglobina es semejante a las
enzimas alostricas y fija el oxgeno de forma cooperativa; mientras que la mioglobina no. En
consecuencia, la hemoglobina libera mejor el oxgeno en los tejidos que la mioglobina.
La hemoglobina es ms o menos esfrica, con un dimetro de casi 5,5 nm. Es una protena tetramricas
que contiene cuatro grupos prostticos hemo, uno asociado a cada una de las cadenas polipeptdicas. La
hemoglobina de un adulto contiene dos tipos de globina, dos cadenas (de 141 residuos cada una) y dos
cadenas (de 146 residuos cada una). A pesar de que menos de la mitad de los residuos de aminocidos
de las secuencias polipeptdicas de las subunidades y son idnticos, las estructuras tridimensionales
de los dos tipos de subunidades son muy similares. Adems, sus estructuras son muy similares a la de la
mioglobina a pesar de que las secuencias de los tres polipptidos son idnticas en tan solo 27 posiciones.
Los tres polipptidos son miembros de la familia proteica de las globinas. La convencin para nombrar las
hlices descrita en el caso de la mioglobina es tambin aplicable a los polipptidos de la hemoglobina,
excepto que la subunidad carece de la corta hlice D. La bolsa de unin del grupo hemo est formada
principalmente por las hlices E y F.

3. El grupo hemo.
El grupo hemo tiene una estructura de anillo orgnico complejo, la protoporfirina, al cual est unido un
nico tomo de hierro e su estado ferroso (Fe2+). El tomo de hierro tiene seis enlaces de coordinacin,
cuatro con tomos de nitrgeno que forman parte del sistema del anillo de porfirina, que es plano, y dos
perpendiculares a la porfirina. Los tomos de nitrgeno coordinados evitan la conversin del hierro hemo
al estado frrico. El hierro en estado Fe2+ une oxgeno de manera reversible, mientras que el estado Fe3+
no une oxgeno. El grupo hemo se encuentra en una serie de protenas transportadoras de oxgeno, como,
por ejemplo, los citocromos. La reaccin simultnea de una molcula de O2 con dos molculas hemo
libres pueden dar lugar a la conversin irreversible del Fe2+ a Fe3+. En las protenas que contienen el
grupo hemo, esta reaccin se evita secuestrando el grupo hemo dentro de la estructura proteica, en un
lugar suficientemente profundo donde el acceso a los dos enlaces de coordinacin abiertos est
restringido. Uno de esos enlaces de coordinacin est ocupado por un nitrgeno de la cadena lateral de un
residuo de His.
Est constituido por 4 anillos pirrlicos (anillo de la prolina). Los 4 nitrgenos se unen al hierro; pero el
hierro adems de tener esos 4 electrones de valencia, tiene 2 posibilidades ms de unin: 1 de ellos est
unido al oxgeno y el otro a un aminocido (histidina proximal conservada) de la cadena polipeptdica. A
su vez, el oxgeno se une a otra histidina que se llama histidina distal.
Algunas molculas
como el monxido de
carbono y el xido
ntrico pueden
coordinarse con el
hierro del grupo hemo
con mayor facilidad
que el O2.
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4. La hemoglobina experimenta un cambio de conformacin al unirse al oxgeno.

La interaccin protena-ligando se ve afectada por la estructura proteica y suele ir acompaada de
cambios conformacionales. Por ejemplo, el Co se une unas 20.000 veces mejor que el O2 a las molculas
libres de grupo hemo, pero se une tan solo unas 200 veces mejor cuando el grupo hemo est unido a la
mioglobina. La diferencia se explica, en parte, por un impedimento estrico. Cuando el O2 se une al grupo
hemo libre, el eje de la molcula de oxgeno forma un ngulo respecto al enlace Fe-O. Por el contrario,
cuando el CO se une al grupo hemo libre, los tomos de Fe, C y O se sitan en lnea recta. La rpida
flexin molecular de las cadenas laterales de los aminocidos provoca la formacin de cavidades
transitorias en la estructura de la protena.
Prcticamente todo el oxgeno transportado por la sangre en los animales es unido y transportado por la
hemoglobina de los eritrocitos (glbulos rojos sanguneos). Los eritrocitos humanos normales son discos
bicncavos pequeos. Se forman a partir de clulas madre precursoras llamadas hemocitoblastos. Los
eritrocitos son clulas vestigiales incompletas, incapaces de reproducirse y, en los humanos, destinadas a
sobrevivir durante unos 120 das. Su principal funcin es transportar hemoglobina, la cual est disuelta en
su citosol a una concentracin muy alta (aproximadamente un 34% de su peso).

Presin parcial de oxgeno frente a saturacin

La mioglobina, en cuanto haya poca presin de oxgeno, se llena

enseguida (se satura). La hemoglobina se comporta de manera
completamente distinta: La hemoglobina a presiones altas de
oxgeno, est saturada al 100%; pero a presiones bajas no se
satura tan fcilmente.
En la sangre arterial que pasa de los pulmones a travs del
corazn para ir a los tejidos perifricos, la hemoglobina est
saturada con oxgeno en un 96%. En la sangre venosa que
vuelve al corazn, la hemoglobina est saturada solo en un 64%.
La mioglobina, con su curva hiperblica, es relativamente
insensible a pequeos cambios en la concentracin del oxgeno
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disuelto y por lo tanto funciona bien como una protena de almacenamiento de oxgeno. La hemoglobina,
con sus mltiples subunidades y sitios de fijacin de O2, est mejor preparada para el transporte de
oxgeno.
La hemoglobina tiene dos niveles de fijacin distintos (una a presin baja de oxgeno y otra a altas
presiones Cooperatividad), y la mioglobina solo tiene uno a cualquier presin parcial de oxgeno.
*Representacin de la estructura tridimensional de la subunidad de la Mioglobina y una subunidad de la
Hemoglobina: Tienen las dos alfa-hlices. Son parecidas en estructura secundaria y constan de grupo
Hemo.
*Representacin de las cuatro subunidades de la Hemoglobina: Son variadas. Cada subunidad tiene su
grupo Hemo. Hay una especie de cavidad.
Consecuencias de la fijacin de oxgeno: La protena mioglobina sin hierro se llama desoximioglobina y
con hierro se llama oxiglobina (del mismo modo para la hemoglobina). Cuando el oxgeno se fija, la
protena sufre un cambio conformacional discretamente (suficiente para ser visible).

*Fijacin de oxgeno a la Mioglobina. La P50 se encuentra a la presin de 2 torr (1 torr = 1 mm de Hg):

Representara cmo se satura la Hemoglobina en presencia de oxgeno. A mucho oxgeno, la protena
est completamente saturada; pero tiene una particularidad: desde el principio tiende a saturarse. Para
medir la cantidad de oxgeno o ligando que una protena tiene se llama P50 Cantidad de oxgeno que
da la mitad de la saturacin total. La Mioglobina, cuanto haya, 2 torr est saturada a la mitad; esto quiere
decir que tiene mucha afinidad por el oxgeno.
*Fijacin de oxgeno a la Hemoglobina la P50 se encuentra a 26 torr.
La hemoglobina, a presin de oxgeno baja, pierde el oxgeno. La mioglobina a esa presin, o incluso
inferior, est saturada a la mitad (no lo transporta como debera). La mioglobina es un almacn de oxgeno
y la hemoglobina es un transportador.
La fijacin del oxgeno produce cambios en la estructura cuaternaria de le hemoglobina.
1. La fijacin de oxgeno al hierro en la desoxi Hb empuja al tomo de hierro hacia el plano del hemo y
a la histidina unida al hierro (HIS proximal F8)
2. Este cambio de transmite a travs del esqueleto pptico resultando en una alteracin significa de
la estructura terciaria de la subunidad a la que se ha fijado el oxigeno
3. Se rompen puentes salinos (que hacen de cross-link) entre las subunidades de la hemoglobina y se
forman nuevos enlaces de Hidrgeno e interacciones hidrofbicas originando un conjunto diferente de
interacciones entre las subunidades adyacentes, por tanto, una nueva estructura cuaternaria
5. La unin del oxgeno a la hemoglobina es cooperativa.
El anlisis por rayos X ha revelado que existen dos conformaciones principales de la hemoglobina: el
estado R y el estado T. A pesar de que el oxgeno se une a la hemoglobina en cualquiera de estos dos
estados tiene una afinidad considerablemente mayor por la hemoglobina en estado R. Cuando el oxgeno
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est ausente experimentalmente, el estado T es ms estable y es entonces la conformacin predominante

de la desoxihemoglobina. Los estados T y R fueron denominados originalmente tenso y relajado debido
a que el estado T est estabilizado por un mayor nmero de pares inicos. La unin del O2 a una
subunidad de hemoglobina en el estado T promueve un cambio conformacional hacia el estado R. Max
Perutz propuso que la transicin T R est provocada por cambios en las posiciones de cadenas
laterales de aminocidos clave que rodean al grupo hemo. En el estado T la porfirina est ligeramente
curvada, provocando que el hierro hemo sobresalga ligeramente hacia la His proximal (His F8). La unin
del O2 hace que el grupo hemo adquiera una conformacin ms plana, cambiando la posicin de la His
proximal de la de hlice F unida.
Si una subunidad pierde el oxgeno, las dems subunidades tienden a perderlo tambin.
Teora del alosterismo Las protenas que tienen cooperatividad, entre ellas la hemoglobina, tienen 2
estados conformacionales que se representan por la letra R (relajado) y T (tenso). En el caso de la
hemoglobina, en la forma R, capta oxgeno con ms facilidad. Cuando la hemoglobina llega a zona donde
el oxgeno es ms escaso, se convierte en la forma T y pierde el oxgeno. La mioglobina no tiene esta
propiedad porque no es cooperativa.
Modelo concertado: Todas las unidades se encuentran en uno u otro estado. Dependiendo de la cantidad
de oxgeno se establece un equilibrio entre ambos. El oxgeno desva esos equilibrios y el estado R tiene
mayor afinidad por el oxgeno.
La hemoglobina tiene subunidades y tiene dos maneras de fijar el oxgeno. Para captarlo es necesario una
afinidad alta, que la tienen tanto la hemoglobina como la mioglobina. Para ceder oxgeno es necesario una
baja afinidad porque si no, como le pasa a la mioglobina, se queda con l (no sera buen transportador).
Solo la tiene la hemoglobina. La hemoglobina es una protena alostrica (hay una accin a distancia que
se aplica a las enzimas que son reguladas por molculas que no son el sustrato). La mayora de las
enzimas lo que necesitan para actuar es un sustrato; pero hay otras que adems de activarse por sustrato,
se activan por otras molculas que no son el sustrato; por tanto, para la hemoglobina el sustrato es el
oxgeno, aunque tambin, hay otras molculas que se adhieren a la protena. El oxgeno en s mismo no
regula la actividad de la protena. La hemoglobina tiene dos estados de conformacin: Estado T La
hemoglobina tiene poca afinidad al oxgeno; por lo que lo cede. La hemoglobina es un tetrmero formado
por dos dmeros. En la estructura tridimensional de la protena hay una cavidad que es ms grande en el
estado T. Estado R La hemoglobina tiene mucha afinidad al oxgeno; por lo que lo capta.
Transicin del estado T al estado R

Tenemos 3 curvas que nos explican cmo pasamos de

un estado a otro. Est representado a presin parcial
de oxgeno frente a la saturacin. Si la Hemoglobina
tiene 4 sitios, puede tener 3 llenos y 1 vaco y as
sucesivamente Nunca se vaca completamente en
vivo (nos quedaramos sin oxgeno en nuestras
clulas). La curva del medio es la curva normal de la
hemoglobina en forma de S no muy marcada; pero no
es una forma hiperblica, se llama sigmoide; y
representa que, a poca presin de oxgeno, la
hemoglobina tarda en llenarse. Necesitamos un 40%
para que llegue a la mitad. La curva de la lnea
discontinua representa el estado de ms afinidad
Estado R (nos recuerda a la de la mioglobina). Esta,
aunque haya poca presin parcial de oxgeno, no lo
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cede. La lnea inferior representa el estado T; muy poca afinidad al oxgeno.

Los modelos tericos tratan de decirnos cmo funciona la cooperatividad: Las 4 subunidades son iguales y
se van llenando de oxgeno progresivamente. Se van convirtiendo en las 4 subunidades concertadas. Las
subunidades cuadradas representan el estado T (ms rgido) mientras que las subunidades redondas
representan el estado R (ms flexibles). Estos son interconvertibles. En el caso 1, el estado T est
favorecido (la conformacin redonda es inexistente) y as sucesivamente. Cuando el oxgeno aumenta, las
flechas se van equiparando. Los dos estados coexisten y la hemoglobina estar saturada a la mitad.
Cuando la fecha que va hacia abajo, el estado R es el que est fuertemente favorecido.

Por el contrario, el modelo secuencial dice: La hemoglobina est en estado T, pero la presencia de
oxgeno hace que la primera subunidad cambie la conformacin tridimensional e induce a que la segunda
subunidad cambie la suya; y as sucesivamente hasta que la hemoglobina quede totalmente saturada
Estado R.
El primer modelo, llamado modelo concertado, supone que las subunidades de una protena con unin
cooperativa son funcionalmente idnticas, que cada subunidad puede existir en (como mnimo) dos
conformaciones y que todas las subunidades experimentan la transicin de una conformacin a otra de
manera simultnea. En este modelo, ninguna protena tiene subunidades con conformaciones diferentes.
Las dos conformaciones estn en equilibrio. El ligando puede unirse a cualquiera de ellas, aunque con
diferente afinidad. La unin sucesiva de molculas de ligando a la conformacin de baja afinidad (la cual
sera ms estable en ausencia de ligando) hace ms probable la transicin a la conformacin de alta
afinidad.
En el segundo modelo, el modelo secuencial, la unin del ligando puede inducir un cambio de
conformacin en la subunidad individual. Un cambio conformacional en una subunidad provoca un cambio
similar en la subunidad adyacente y tambin hace ms probable la unin de una segunda molcula de
ligando. Hay ms estados intermedios potenciales en este modelo que en el modelo concertado. Los dos
modelos no son mutuamente excluyentes: el modelo concertado puede verse como un caso limitante de
todo o nada del modelo secuencial.
La cooperatividad de la hemoglobina aumenta la capacidad de ceder al oxgeno a los tejidos
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Tanto la mioglobina como la hemoglobina se saturan al

100% en los pulmones donde la presin parcial de
oxgeno es muy grande. En general, en los tejidos del
cuerpo, la presin parcial es aproximadamente 20 torr: La
hemoglobina se satura y en cuanto llega a los tejidos, en
poca presin parcial de oxgeno, ella cede el suyo. La
mioglobina se satura igual en los pulmones y cuando
llega a los tejidos, est saturada prcticamente al 85%;
es decir, no ha cedido el oxgeno a los tejidos (mala
transportadora). La hemoglobina desde la saturacin
completa hasta los tejidos cede un 66% de su saturacin,
pero la mioglobina solamente cede un 7%. La
hemoglobina es mejor transportadora porque, aunque se
satura igual, pierde con fcilmente el oxgeno.
La hemoglobina debe unir oxgeno eficientemente en los
pulmones, donde la pO2 es aproximadamente 13,3 kPa, y liberar oxgeno en los tejidos, donde la pO2 es
de unos 4 kPa. Una protena que una O2 con una alta afinidad lo unira eficientemente e los pulmones,
pero no liberara gran parte de l en los tejidos. Si la protena uniese oxgeno con una afinidad
suficientemente baja para liberarlo en los tejidos, no recogera demasiado oxgeno en los pulmones.
Una protena de una sola subunidad con un nico sitio de fijacin a sustrato no puede tener una curva de
unin sigmoidea debido a que cada molcula de ligando se une independientemente y no podra afectar a
la unin de otra molcula. En cambio, la unin del O2 a las subunidades individuales de la hemoglobina
puede alterar la afinidad para el O2 de las subunidades adyacentes. La primera molcula que interacciona
con la desoxihemoglobina se une dbilmente, debido a que se une a una subunidad en estado T. Sin
embargo, esta unin conduce a unos cambios conformaciones que son comunicados a las subunidades
adyacentes, haciendo ms fcil la unin de molculas de O2 adicionales. En efecto, la transicin T R se
produce ms rpidamente en la segunda subunidad una vez que el O2 se ha unido a la primera
subunidad. La ltima molcula de O2 (la cuarta) que se une al hemo lo hace a una subunidad que ya est
en el estado R y por tanto se une con una afinidad mucho mayor que la de la primera molcula.
*La Hemoglobina cede ms oxgeno al msculo en ejercicio: En el msculo en descanso, la presin parcial
de oxgeno sera de 40 torr y en el msculo en ejercicio sera aproximadamente la mitad. La hemoglobina
pierde un 21% de su oxgeno y cuando llega al msculo en ejercicio, pierde el 45% restante. A quin le
pasa el oxgeno? A la mioglobina (La hemoglobina cede y la mioglobina capta).

6. Moduladores de la unin del oxgeno a la hemoglobina: El efecto Bohr.

Una protena alostrica es aquella en la que la unin de un ligando a un sitio afecta a las propiedades de
unin de otro sitio de la misma protena. Las protenas alostricas son aquellas que tienen otras formas o
conformaciones inducidas por la unin de ligandos conocidos como moduladores. Los cambios
conformacionales inducidos por el/los modulador(es) interconvierten formas ms activas y menos activas
de la protena. Los moduladores de las protenas alostricas pueden ser activadores o inhibidores. Cuando
el ligando normal y el modulador son idnticos la interaccin se denomina homotrpica. Cuando el
modulador es una molcula diferente del ligando normal la interaccin es heterotrpica. Algunas
protenas tienen dos o ms moduladores y por lo tanto pueden tener interacciones homotrpicas y
heterotrpicas.
Adems de transportar casi todo el oxgeno necesario para las clulas de os pulmones a los tejidos, la
hemoglobina transporta dos productos finales de la respiracin celular (H+ y CO2) de los tejidos a los
pulmones y riones, donde son excretados.
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Reguladores alostricos de la hemoglobina:

O2
2,3-BPG (2,3-bifosfoglicerato): es una molcula fisiolgica normal. Es un metabolito y su
concentracin en los hemates es muy alta (porque tienen como nica va metablica viable la
glicoltica y produce mucho 2,3-BPG). Ese compuesto, como significa su nombre, 2,3
bifosfoglicerato, bifosfo En condiciones fisiolgicas est ionizado y como hay dos fosfos habr
varias cargas negativas. Y, por lo tanto, se unir obligatoriamente a la hemoglobina donde haya
muchas cargas positivas; es decir, en la hendidura (entre las 2 subunidades ), pues hay muchos
aminocidos que tienen carga positiva en sus cadenas laterales a pH fisiolgico (histidina, lisina
Carga positiva de mayor o menor intensidad). Afecta el 2,3-BPG a la fijacin del oxgeno a la
protena? Como se fija preferentemente al estado T, hace que el oxgeno salga de la hemoglobina;
es decir, facilita la liberacin del oxgeno. No tiene que ver nada con su fijacin.
H+: Los protones se fijan al grupo hemo? Cmo podran hacerlo? Deberan fijarse otro grupo.
Quin permite captar o ceder protones a pH fisiolgico? La histidina Permite actuar como un
tampn a pH fisiolgico.
CO2: es un gas de desecho. Tiene la capacidad de reaccionar con el agua Bicarbonato (txico
para las clulas porque puede provocar la acidosis metablica).
CO2 + H2O H+ + HCO3-
La mayor parte del CO2 (El 85% aproximadamente es eliminado de nuestro cuerpo a travs de este
mecanismo; catalizado por una enzima que se llama anhidrasa carbnica, muy abundante en los
eritrocitos). El dixido de carbono no es demasiado soluble en solucin acuosa y, de no ser
convertido en bicarbonato, se formaran burbujas de CO2 en los tejidos y en la sangre. El
bicarbonato es excretado por el rin. El resto del CO2 se va a unir a la hemoglobina por el amino
terminal de cada una de las cadenas. Se une de una manera que nos recuerda a un enlace
peptdico Carbamato o carba-amil-hemoglobina. Esto sucede en las 4 subunidades de la
hemoglobina. Es mucho ms rpida la reaccin que la fijacin.

La hidratacin de CO2 provoca un aumento de la concentracin de H+ (un descenso de pH) en los

tejidos. La hemoglobina transporta alrededor del 40% total de H+ y del 15% al 20% de CO2 formado
en los tejidos hacia los pulmones y riones (el resto de H+ es absorbido por el tampn bicarbonato
del plasma; el resto del CO2 se transporta en forma de HCO3- y CO2 disueltos). La unin de H+ y
CO2 est inversamente relacionada con la unin de oxgeno. Con un pH relativamente bajo y altas
concentraciones de CO2 en los tejidos perifricos, la afinidad de la hemoglobina por el oxgeno
disminuye a medida que se unen H+ y CO2 y se libera oxgeno a los tejidos. A su vez, a medida que
se excreta CO2 en los capilares pulmonares y aumenta consecuentemente el pH de la sangre, la
afinidad de la hemoglobina por el oxgeno aumenta y la protena une ms O2 para su transporte a
los tejidos perifricos.

*Participacin del CO2 en el descenso del pH: El CO2 va por la sangre de dos maneras: 1.
Hemoglobina (no nos interesa, es un regalador alostrico. El CO2 se une a los carboxilos
terminales). 2. Mecanismo: Mecanismo mayoritario (85% del total) Tejido Membrana; El CO2
producido por el metabolismo debe salir por los pulmones; el CO2 se puede unir a la hemoglobina o
convertirse en cido carbnico y en bicarbonato. El CO2 es un gas (difunde muy rpidamente a los
hemates y como hay una enzima muy potente y no est en la misma clula con la misma potencia;
los hemates son los que reciben el CO2 de desecho). El CO2 va en forma de bicarbonato en el
suelo. Cuando se eleva el CO2, aumentan los protones; el CO2 y los protones deben estar
relacionados.
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*Efecto del CO2 sobre la afinidad de la Hemoglobina por el oxgeno: En lugar de tener 2 curvas,
tenemos 3 La figura dice que en condiciones normales la Hemoglobina se satura; cede su
oxgeno de una manera normal. Si el pH baja, pero no hay un
exceso de CO2, se tendran las dos curvas anteriores; pero si
adems de haber aumentado los protones, aumenta el CO2 el
oxgeno se cede con mayor facilidad.

El bicarbonato se intercambia por el cloruro; el bicarbonato sale

de los hemates y el cloruro entra Se mantiene la osmoralidad.

El CO (monxido de carbono) se une al mismo sitio que el

oxgeno, desplaza el equilibrio hacia el estado R e impide la
liberacin de oxgeno en los tejidos. El CO es un gas muy txico
(tan txico que mata a las personas si estn expuestas). Este
CO sale de la combustin mala (parcial) del carbn. No tiene olor
ni hay ningn signo de que ese gas existe. La razn es el CO se fija a la hemoglobina; es el nico
que se fija al mismo sitio que el oxgeno. El CO se fija al grupo hemo. Pero se fija a este grupo con
una afinidad tal que no permite que se fije el oxgeno y l no se libera nunca. La afinidad del CO
por la hemoglobina es mayor que la del oxgeno por el de la hemoglobina. Cmo se quita
entonces? Podemos tolerar cierta carga de CO en la hemoglobina. En realidad, no se transporta,
sino que se fija y no se libera nunca; a no ser que estn sometidos en una atmsfera hiperbrica.
Es un txico brutal. No es un ligando fisiolgico, sino que es una molcula que se fija con mucha
afinidad a la Hemoglobina.
El pH afecta a la afinidad de la Hemoglobina por el oxgeno: El efecto Bohr
La variable es el pH. A pH 7,2 significa que hay ms
protones. Cul est saturada a la misma presin parcial de
oxgeno? La roja. Cul es el efecto del pH? Al aumentar el
pH, la hemoglobina gana oxgeno. Cuando el pH del medio
disminuye, la curva se desplaza a la derecha con respecto
de la roja; adems, est menos saturada cuando el pH es
ms bajo. Los protones lo que hacen es ayudar a la
hemoglobina a ceder el oxgeno. El pH afecta a cmo se
conserva el oxgeno o se cede en presencia de ms
protones; el oxgeno se cede ms fcilmente y por eso se
oxigenan los tejidos perifricos (ms cidos). Los protones
son otro regulador alostrico. A este efecto de que los
protones facilitan la liberacin de oxgeno se le llama efecto
Bohr.
El equilibrio de unin de la hemoglobina y una molcula de
oxgeno puede describirse por la reaccin:
Hb + O2 HbO2
Que no es una expresin completa, pues tenemos que tener en cuenta el efecto de la concentracin de
H+ sobre este equilibrio de unin:
HHb+ + O2 HbO2 + H+
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Donde HHb+ designa la forma protonada de la hemoglobina. Tanto el O2 como el H+ son unidos por la
hemoglobina, aunque con afinidades inversas. Cuando la concentracin de oxgeno es alta, como
ocurre en los pulmones, la hemoglobina une O2 y libera protones. Cuando la concentracin de oxgeno
es baja, situacin que se da en los tejidos perifricos, el O2 liberado y se une H+.
El oxgeno y el H+ no se unen a los mismos sitios de la hemoglobina. El oxgeno se une a los tomos
de hierro de los grupos hemo, mientras que el H+ se puede unir a diversos residuos de aminocido de
la protena. La His146 (His HC3) de las subunidades realiza un aporte fundamental al efecto Bohr.
La hemoglobina une CO2 de modo inversamente proporcional a la unin de oxgeno. El dixido de
carbono se une en forma de grupo carbamato al grupo -amino del extremo amino-terminal de cada
cadena de globina, formando carbaminohemoblogina. Esta reaccin produce protones y contribuye al
efecto Bohr. Los carbamatos unidos tambin forman puentes salinos adicionales que ayudan a
estabilizar el estado T y favorecen la liberacin de oxgeno.
Cuando la concentracin de dixido de carbono es alta, tal como ocurre en los tejidos perifricos, se
une algo de CO2 a la hemoglobina y la afinidad por el O2 disminuye, haciendo que este se libere. Por el
contrario, cuando la hemoglobina llega a los pulmones, la alta concentracin de oxgeno favorece la
unin de O2 y la liberacin de CO2.
La unin del oxgeno a la Hemoglobina pura difiere a la unin de la Hemoglobina que se
encuentra en el interior de los hemates
La Hemoglobina pura significa que no tiene unido 2,3-BPG
Solo se puede quitar en el laboratorio y haciendo un
experimento de comparacin se vio que la hemoglobina pura
capta el oxgeno de la misma manera; sin embargo, lo libera
de la forma distinta la que no tiene 2,3-BPG (tarda mucho ms
en cederlo). Representacin de variable de presin parcial de
oxgeno y la saturacin de la protena: 1. Hemoglobina pura 2.
Hemoglobina tal cual se encuentra en los hemates. Las dos
curvas no son iguales; sino que una a la misma presin parcial
de oxgeno tienen distinta ordenada; el 2,3-BPG ayuda que la
Hemoglobina transporte el oxgeno.

Afinidad de los hemates fetales por el oxgeno

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Por qu el oxgeno fluye desde la sangre materna a la

fetal y no viceversa? Cuando una mujer est embarazada y
tiene una anemia intensa, el feto sufre; pues si no tiene
oxgeno suficiente no se desarrolla adecuadamente. Si la
curva de la hemoglobina materna es la azul y la fetal es la
roja; evidentemente estas dos curvas dibujadas en paralelo
dicen que la hemoglobina de la madre est menos saturada
que la del feto. Esto quiere decir que la sangre va de madre
a feto; y por tanto el oxgeno. Por qu sucede esto?
Podramos pensar que la hemoglobina es idntica a la
madre; sin embargo, la hemoglobina del feto no es idntica.
La hemoglobina de la madre es adulta y se llama HbA.
Tiene 2 cadenas y 2 cadenas ; pero la hemoglobina fetal
se representa HbF: Tiene dos cadenas y 2 cadenas (no
son mutantes) La cadena tiene una serina (aminocido
polar sin carga) mientras que la cadena materna tiene una histidina (aminocido polar con carga). Esa
diferencia hace que el 2,3-BPG se fije muy bien a la hemoglobina de la madre y se fije mucho peor a la
hemoglobina del feto. Esta ltima tiene menos 2,3-BPG; por tanto, retiene el oxgeno y no pasa del feto a
la madre. La histidina tiene mucha importancia en la hemoglobina.
*Cambios qumicos responsables del efecto Bohr: Ejemplo para entender por qu molecularmente los
protones hacen eso. Si aumentan los protones: La hemoglobina tiene una cadena 1 y 2, que tienen 146
aminocidos cada uno; y el aminocido que ocupa el lugar 146 es una histidina; la histidina 146 y el
asprtico 94 de la misma cadena, estn juntos en virtud de la cadena tridimensional. Al protonarse la
histidina (ha bajado el pH) el protn aadido permite que forme un enlace inico entre ese protn y un
oxgeno del carboxilo Ese y otros puentes salinos favorecen la formacin del estado T (que tiene poca
afinidad al oxgeno; se libera). La concentracin de protones en exceso permite la formacin de puentes
salinos que, casi siempre, estn formado por cargas positivas de la histidina y cargas negativas del
asprtico.
7. El papel que juega el 2,3 difosfoglicerato.

La interaccin del 2,3-bifosfoglicerato (BPG) con la hemoglobina proporciona un ejemplo de modulacin

alostrica heterotrpica.
El BPG est presente en concentraciones relativamente altas en los eritrocitos. Cuando se asla, la
hemoglobina contiene una cantidad significativa de BPG unido, cuya eliminacin completa resulta difcil.
El BPG se une a un lugar alejado del sitio de fijacin para el O2 y regula la afinidad de unin de la
hemoglobina para el O2 en relacin a la pO2 en los pulmones. El BPG juega un importante papel en las
adaptaciones fisiolgicas a la menor pO2 disponible a grandes alturas.
Para un ser humano sano que se pasee a nivel del mar, la unin de oxgeno a la hemoglobina est
regulada de manera que la cantidad de O2 liberada a los tejidos equivale aproximadamente del 40% del
mximo que poda ser transportado por la sangre. Imaginemos que la misma persona se traslada
rpidamente a un lugar montaoso a 4500 m de altura, donde la pO2 es considerablemente menor. La
liberacin de O2 a los tejidos se ve ahora reducida. Sin embargo, despus de unas pocas horas de
permanencia a gran altitud, la concentracin de BPG en sangre ha empezado a aumentar, conduciendo a
una disminucin de la afinidad de la hemoglobina por el oxgeno. Este ajuste del nivel de BPG tiene solo
un efecto pequeo sobre la unin de O2 en los tejidos. Como resultado, la liberacin de oxgeno en los
tejidos vuelve a ser casi el 40% del que puede ser transportado por la sangre. La situacin se invierte
cuando la persona vuelve al nivel del mar. La concentracin de BPG en los eritrocitos tambin aumenta en
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las personas que sufren hipoxia, una disminucin en la oxigenacin en los tejidos perifricos debida a un
funcionamiento inadecuado de los pulmones o del sistema circulatorio.
El BPG se une a la hemoglobina en la cavidad existente entre las subunidades en el estado T. Esta
cavidad est tapizada con residuos aminocidos cargados positivamente que interaccionan con los grupos
cargados negativamente del 2,3-bifosfoglicerato. A diferencia del O2, solamente se une una molcula de
BPG a cada tetrmero de la hemoglobina. El BPG disminuye la afinidad de la hemoglobina por el oxgeno
al estabilizar el estado T. La transicin al estado R provoca un estrechamiento de la bolsa de unin a BPG,
impidiendo la unin del BPG. En ausencia de BPG, la hemoglobina pasa ms fcilmente al estado R.
La regulacin de la unin de oxgeno a la hemoglobina por el BPG juega un papel importante en el
desarrollo fetal. La hemoglobina fetal debe tener una mayor afinidad por el O2 que la hemoglobina
materna debido a que el feto debe extraer el oxgeno de la sangre de su madre. El feto sintetiza
subunidades en lugar de las , formndose la hemoglobina 22. Este tetrmero tiene una afinidad por el
BPG mucho menor que la de la hemoglobina adulta normal y por lo tanto una mayor afinidad por el
oxgeno.
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8. Hemoglobinas anormales: La anemia falciforme.

Mutaciones en los genes que codifican las subunidades de la Hemoglobina: La mutacin puede afectar a
su funcin. La mutacin ms relevante desde el punto de vista histrico es la que conocemos como
anemia falciforme: Enfermedad con la que se vive (muy mal) (tambin se llama anemia drepanoctica). Es
la primera enfermedad molecular que se describi.
La Hemoglobina de esta enfermedad se llama HbS(ickle); los hemates tienen forma anormal. La describi
por primera vez Linus Pauling (propuso que la enfermedad estaba causada por un defecto en la
estructura) y Vernon Ingram demostr, 7 aos despus, que la prediccin de Pauling era cierta
Descubri un aminocido alterado, en la cadena ; un glutmico que se sustitua por una valina. Ese
hecho es capaz de causar una enfermedad molecular.
Vernum rompi la hemoglobina en sus aminocidos e hizo una cromatografa en papel y vio cmo se
movan los aminocidos en papel; y ese aminocido en la hemoglobina A estaba en una posicin y en la
Hemoglobina S est en otro lugar. Se debe a una sustitucin de un aminocido por otro. Se observan los
hemates con forma de hoz.
La anemia falciforme est causada por un defecto en la hemoglobina. Ese defecto es una mutacin. Esta
mutacin sucede en el gen de la Globina Cadenas . Esas cadenas tiene un aminocido que es el
cido glutmico (que tiene carga negativa) y es sustituido por una valina (sin carga). 2 cidos glutmicos
menos, por tanto, nueva hemoglobina S tendr otras caractersticas de la hemoglobina A. Las propiedades
fsicas de la hemoglobina S cambiaran; por ejemplo, al hacer una electroforesis, nos indicaran que
emigrar menos. La prdida de dos cargas negativas por dos sin cargas, afectar a su punto elctrico
(carga neta se encontrar en otro punto).
*Identificacin de la anemia falciforme mediante cromatografa en capa fina de los aminocidos de la
Hemoglobina: Las consecuencias de esta alteracin gentica es que los hemates estn modificados (son
anormales). Se demostr que no era un problema del hemate sino de la Hemoglobina.
Cmo repercute esto en la forma tridimensional de la protena? Al haber una valina en la posicin 6 de la
cadena; las cadenas se van enganchando porque se forma un bolsillo hidrofbico; permite que otra
molcula de hemoglobina se fije a ella formando una especie de filamento (estructura tridimensional
filamentosa) Hace que la protena sea alargada y fibrosa. Esto le ocurre principalmente a la
desoxihemoglobina. El resultado es una molcula de hemoglobina que tiene una estructura bidimensional.
Es una enfermedad importante? S. En Europa no tanto, pero en EEUU y en frica tiene una gran
importancia.
*Relacin entre anemia falciforme y malaria: La anemia falciforme es una enfermedad hereditaria, recesiva
(hay que tener los dos alelos del gen mutado para que la enfermedad se manifieste; por tanto, podemos
tener personas que tengan un solo alelo y no tendrn la enfermedad, pero sern portadores). El tener
un gen mutado ayuda a que esa persona no contraiga una malaria grave; el tener un alelo mutado en las
cadenas beta de las hemoglobinas impide que el parsito desarrolle la enfermedad. Esto se asocia
geogrficamente la presencia de mayores portadores con el menor nmero de casos de malaria. La
hemoglobina mutada impide que el parsito se desarrolle rpidamente y produce una malaria menos
grave. No existe un tratamiento eficaz para la enfermedad. La investigacin sobre la persistencia de un
alelo con efectos negativos tan evidentes en los individuos homocigotos llev al descubrimiento de que
este alelo aporta una pequea pero importante resistencia, en individuos heterocigotos, a formas letales de
la malaria. La seleccin natural ha dado como resultado una poblacin de alelos que compensan los
efectos negativos del estado homocigoto frente a la resistencia de la malaria que aporta el estado
heterocigoto.
Expresin de los genes de la globina humana en diferentes momentos del desarrollo
La expresin de los genes de las Globinas (familia de genes que se expresan o no) Se manifiestan sus
efectos o no. Se representa el % de la sntesis total de las Globinas Meses/Nacimiento. Esta grfica nos
indica cules son los genes que se expresan dependiendo del momento de la vida del individuo. Los
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genes de las Globinas no se expresan por igual a lo largo de la vida de un individuo; hablamos de otra
hemoglobina fetal (HbF). Las cadenas se expresan muy pronto en la poca de embarazado (prenatal) y
se mantienen todo el tiempo as; las cadenas se expresan desde el principio y no cambian con la edad
pre y postnatal. Las cadenas se empiezan a expresar muy despacio durante la poca prenatal. Durante
la poca prenatal no es capaz de llevar a cabo la funcin de la hemoglobina porque se expresa en muy
poca cantidad. La sustituye una cadena de la hemoglobina distinta de la pero que tiene la misma funcin
Cadena . La Hemoglobina fetal tiene una cadena diferente que se mantiene durante toda la poca fetal
y en el nacimiento empieza a declinar (ya no se expresa) y la cadena empieza a subir y a los pocos
meses despus del nacimiento son las cadenas y las que son las responsables de mantener la funcin
por el resto de la vida. Su expresin es diferencial.
Uno de los tratamientos que se estn utilizando para tratar la anemia falciforme trata de reactivar la
cadena fetal que ya est inactiva; como no est mutada (pues afecta a las cadenas ) y podra sustituir a
las cadenas con cierto xito. Se est poniendo en marcha.
*Efecto de las mutaciones por cambio de sentido de la hemoglobina: Mutaciones conocidas existentes en
la hemoglobina. Hay muchas mutaciones. Los cambios son de glutmico a valina, en el caso de la anemia
falciforme, pero hay otro tipo de sustituciones.
La anemia falciforme es una enfermedad hereditaria humana. Se conocen ms de 500 variantes genticas
de la hemoglobina en la poblacin humana; con muy pocas excepciones, se trata de variantes muy raras.
La mayora de estas variantes se deben a las diferencias en un nico aminocido. Los efectos sobre la
estructura y funcin de la hemoglobina suelen ser muy pequeos, aunque a veces pueden llegar a ser
extraordinarios. A cada variante de un gen se le llama alelo. Debido a que los humanos poseen en general
dos copias de cada gen, un individuo puede tener dos copias de un alelo o una copia de cada uno de los
alelos diferentes.
La anemia falciforme es una enfermedad gentica en la cual un individuo ha heredado el alelo para esta
enfermedad de ambos progenitores. Los eritrocitos de estos individuos son anormales y menos
numerosos. Adems de haber un nmero elevado de clulas inmaduras, la sangre contiene muchos
eritrocitos alargados, delgados y con forma de media luna que asemejan a la hoja de una hoz. Cuando se
desoxigena la hemoglobina de las clulas falciformes esta pasa a ser insoluble y forma polmeros que se
agregan en fibras tubulares. La hemoglobina normal sigue siendo soluble cuando se desoxigena. Las
fibras insolubles de la hemoglobina S desoxigenada son las responsables de la deformacin en forma de
hoz de los eritrocitos y la proporcin de clulas falciformes aumenta en gran medida cuando se
desoxigena la sangre. Las propiedades alteradas de la hemoglobina S son el resultado de la sustitucin de
un nico aminocido, una al en lugar de un Glu en la posicin 6 de las dos cadenas . El grupo R de la
valina no posee carga elctrica, mientras que el Glu tiene una carga negativa a pH 7,4. Por lo tanto, la
hemoglobina S tiene dos cargas negativas menos que la hemoglobina A, una por cada una de las cadenas
. La sustitucin del Glu por la Val crea un punto de contacto hidrofbico pegajoso en la posicin 6 de la
cadena , que se sita en la superficie exterior de la molcula. Estos puntos hidrofbicos hacen que las
molculas de desoxihemoglobina S se asocien anormalmente entre ellas formando los largos agregados
fibrosos caractersticos de esta enfermedad.
Los individuos que reciben el alelo de uno solo de sus progenitores y que por tanto son heterocigotos
sufren una enfermedad ms leve llamada rasgo de la anemia falciforme; en estos casos solo un 1% de sus
eritrocitos son falciformes en estado de desoxigenacin.
La anemia falciforme es una enfermedad dolorosa y que puede ser mortal. Los enfermos sufren crisis
recurrentes provocadas por el ejercicio fsico. Se sienten dbiles, tienen vrtigo y les falta el aire, adems
de sufrir un aumento del pulso y soplos cardiacos. El contenido en hemoglobina de su sangre es solo la
mitad de lo normal, de 14 a 16 g/100 mL, debido a que los eritrocitos falciformes son muy frgiles y se
rompen con facilidad. Una consecuencia grave es que los capilares quedan obturados por los eritrocitos
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alargados y con formas anormales, provocando un dolor e interfiriendo en las funciones normales de los
rganos, siendo esta una de las causas principales que provocan la muerte temprana.
Las personas con anemia falciforme suelen morir durante la infancia si no reciben tratamiento mdico.