RESULTADOS

1. Clculos previos para elaboracin de la curva tipo.

Se prepar en 250 mL una solucin madre de 50 ppm de riboflavina en distintos

disolventes como: agua bidestilada, HCl 0.1 M, cido actico 0.9 M, NaOH 0.1 M. Sin
embargo los clculos fueron los mismos para cada uno.

50 mg ------ 1000 mL
X ------ 250 mL
(50 )(250 )
= = 12.5
(1000 )

Se disolvi primero los 12.5 mg de riboflavina en 30 mL del disolvente empleado a una

temperatura entre (55-65C), posteriormente se aforo a 250 mL, empleando el mismo
disolvente.

Despus se transfirieron 10 mL a un matraz aforado de 50 mL y se complet el volumen a

un aforo con el mismo disolvente que se utiliz desde un principio. Esta solucin tendr
una concentracin de 10 ppm.

Tabla 1. Preparacin de la curva de calibracin de Riboflavina empleado distintos

disolventes: Agua bidestilada, HCl 0.1 M (cido mineral pH 1), cido actico 0.9 M (cido
orgnico pH 4), NaOH 0.1 M (Base fuerte pH 13).
Matraz Riboflavina, 10 ppm Disolvente Concentracin final
(mL) empleado (mL) de Riboflavina
1 1.0 9.0 1.0
2 2.0 8.0 2.0
3 3.0 7.0 3.0
4 4.0 6.0 4.0
5 5.0 5.0 5.0

2. Lecturas en Fluorometro.

Se ley la intensidad de emisin (fluorescencia) de cada matraz, y de un blanco de

reactivos, empleando filtros de excitacin y emisin, adecuados para la riboflavina,
adems de determinar la intensidad de fluorescencia de las soluciones de 10 ppm y 50
ppm.
 Tabla 2. Resultados de la curva de calibracin de Riboflavina en diferentes medios.

Riboflavina Intensidad de Intensidad de Intensidad de Intensidad de

(ppm) fluorescencia fluorescencia fluorescencia fluorescencia
en Agua en HCl 0.1 M en cido en NaOH 0.1 M
bidestilada actico 0.9 M
0.0 4.98 4.97 4.96 4.96
1.0 6.10 5.13 5.52 15.27
2.0 6.82 5.30 6.01 4.98
3.0 8.02 5.46 6.50 4.99
4.0 8.96 5.59 6.93 5.01
5.0 9.79 5.47 7.63 5.01
10.0 13.30 6.23 9.54 5.05
50.0 17.92 7.08 15.92 5.10
pH 5.0 1.0 4.0 13

Intensidad de fluorescencia en Agua bidestilada

Intensidad de fluorescencia en HCl 0.1 M
Intensidad de fluorescencia en cido actico 0.9 M
17
16
15
14
13
Concentracin de Riboflavina (ppm)

12
11
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0
0 1 2 3 4 5
INTENSIDAD DE FLUORESCENCIA (RFU)
k
Grafico 1. Intensidad de fluorescena (RFU) a concentraciones de 0 a 5 ppm de Riboflavina.
 Tabla 3. Resultados de la curva de calibracin de Riboflavina en diferentes medios,
restando error en la intensidad de cada disolvente de acuerdo al resultado del blanco.

Riboflavina Intensidad de Intensidad de Intensidad de Intensidad de

(ppm) fluorescencia fluorescencia fluorescencia fluorescencia
en Agua en HCl 0.1 M en cido en NaOH 0.1 M
bidestilada actico 0.9 M
0.0 4.98 4.97 4.96 4.96
1.0 1.12 0.16 0.56 10.31
2.0 1.84 0.33 1.05 0.02
3.0 3.04 0.49 1.54 0.03
4.0 3.98 0.62 1.97 0.05
5.0 4.81 0.5 2.67 0.05
10.0 8.32 1.26 4.58 0.09
50.0 12.94 2.11 10.96 0.14
pH 5 1 4 13

Intensidad de fluorescencia en Agua bidestilada

Intensidad de fluorescencia en HCl 0.1 M
Intensidad de fluorescencia en cido actico 0.9 M
Intensidad de fluorescencia en NaOH 0.1 M
13

12

11

10

0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52 54

Grafico 2. Intensidad de fluorescena (RFU) a concentraciones de 0 a 50 ppm de Riboflavina.