Orbital: The Electronic Journal of Chemistry

journal homepage: www.orbital.ufms.br

ISSN 1984-6428
Vol 6 No. 4 October-December 2014
Full Paper

Actividad Biolgica de Combretum laurifolium

Ismael F. Montero*a,c, Francisco S. Silvab, Habdel Nasser R. Costac, Antnio A. Melo Filhoc,
Ricardo C. Santosd, Gilzonia V. Costad, Carlos Alberto C. Limae

a
Programa Intercambio Santander: Universidad de Extremadura (Espaa) y Universidade Federal de Roraima
(Brasil).
b
Programa Graduacin en Qumica, UFRR. Av. Cap. Ene Garcez, 2413, Bairro Aeroporto. CEP: 69310-000.
Boa Vista, RR, Brasil.
c
Programa Post-Graduacin en Qumica, UFRR. Av. Cap. Ene Garcez, 2413, Bairro Aeroporto. CEP:
69310-000. Boa Vista, RR, Brasil.
d
Programa Post-Graduacin en Recursos Naturales (PRONAT), UFRR. Av. Cap. Ene Garcez, 2413, Bairro
Aeroporto. CEP: 69310-000. Boa Vista, RR, Brasil.
e
Instituto Federal de Cincia e Tecnologa de Roraima, IFRR. Av. Cap. Ene Garcez, 2413, Bairro Aeroporto.
CEP: 69310-000. Boa Vista, RR, Brasil.

Article history: Received: 30 August 2014; revised: 14 November 2014; accepted: 15 November 2014. Available online: 30
December 2014.

Abstract: In this paper, we conducted various phytochemical studies of the species Combretum laurifolium
Mart. in the region of the city of Amajari in Roraima, Brazil, aiming to study the biological properties such as
antibacterial activity, and inhibition of acetylcholinesterase activity. The results were interesting to the
antimicrobial activities against S. typhimurium, E. coli, S. Sanguinis, S. aurus, C. albicans and
acetilcolesterasa, the phytochemical prospecting is present tannins, flavonoids, steroids, triterpenes and
saponins in the species.

Keywords: acetilcolinesterasa; antimicrobial agents; phytochemical prospection

1. INTRODUCCIN
Especies pertenecientes al gnero Combretum estudiar sus propiedades para combatir enfermedades
presentan gran cantidad de metabolitos secundarios. neurodegenerativas como el Alzheimer.
Este gnero, es el mayor de la familia Combretaceae
y se encuentra distribuido en las regiones tropicales y
subtropicales [1]. 2. MATERIALES Y MTODOS

As, el gnero Combretum, se destaca por estar Obtencin de los extractos

constituido por amplias clases de compuestos y En primer lugar se realiz la colecta de las
actividad biolgica, tales como actividad hojas de C. laurifolium, en la regin del municipio de
antibacteriana, anticancergenos, citotxica, Amajar, posteriormente, fueron secadas, pesadas,
analgsica, antiinflamatorio, actividades molidas e liofilizadas. Los extractos fueron
hepatoprotectora y antiviral [2]. preparados para la realizacin de los estudios
El primer objetivo de este estudio, es llevar a fitoqumicos usuales [3]. El material recolectado fue
cabo estudios preliminares para determinar la 10,2 kg, incluyendo las hojas, flores, fruto y semilla.
presencia de los distintos metabolitos secundarios en De ah se separaron las distintas partes y slo se us
la planta, efectuar estudios fitoqumicos de las las hojas. La cantidad de material fue preparada para
fracciones etanlicas y hexanoicas de las hojas de la extraccin en fro, maceracin, con hexano y
Combretum laurifolium Mart., en la regin del despus con etanol. Dichos extractos fueron
municipio de Amajar, en Roraima, Brasil, as como concentrados en el rotavapor tras la eliminacin del
bioensayos de inhibicin de acetilcolinesterasa, para solvente, y por ltimo fueron pesados y guardados

*
Corresponding author. E-mail: ismofe04@alumnos.unex.es
 Montero et al.
para estudios fitoqumicos posteriores.
Para los estudios fitoqumicos, se tom con
esptula una pequea cantidad de la fraccin etanlica
de las hojas de C. laurifolium, y se colocaron en un
erlenmeyer de 125 mL adicionndose 30 mL de
etanol y agitando hasta que la disolucin es
homognea, resultando una coloracin amarillo-
verdosa.
Los ensayos fitoqumicos para fenoles, taninos,
flavonoides, flavonas, xatonas, esteroides y
triterpenoides fueron realizados segn los mtodos
descritos por Matos [4].
Cromatografa en capa fina
Las placas cromatogrficas en capa fina
(CCF), fueron preparadas en el Laboratrio de
Qumica de Productos Naturales de la Universidade
Federal de Roraima, UFRR, con un espesor de 1 mm
de slica de marca Merck sobre lmina de vidrio. La
lmpara de revelado empleada fue una lmpara de luz
ultravioleta (= 254 nm, revelador de enlaces dobles
conjugados y reveladores qumicos tales como vapor
de iodo, solucin de p-anisaldehdo (como revelador
universal) y vainilina/cido sulfrico calentado
lentamente a 110C.
Cromatografia em columna del extracto etanlico de
las hojas de C. laurifolium
Las extracciones en cromatografia en coluna
(CC) fueron llevadas a cabo en columnas de vidrio
con elucin a presin atmosfrica con hexano,
diclorometano, cloroformo, acetato de etilo, etanol y
metanol, en orden creciente de polaridad, usando
como fase estacionaria, slica gel 60 (70 a 230 Mesh-
ASTM, Merck). Del extracto etanlico, fueron
tomados 3.500 gramos y mezclados con slica gel y
posteriormente colocado en una columna de
separacin filtrante de 1000 mL sobre una capa de
empaquetamiento cromatogrfico de slica gel.
Bioensayo de mnima concentracin inhibitoria
(MIC) para bacterias gram-positivas, gram-
negativas y hongo
Las bacterias gram-positivas utilizadas en el
test fueron Staphylococcus aureus (ATCC 25923) y
Staphylococcus Sanguinis (ATCC 49456), las
bacterias gram-negativas fueron Escherichia coli
(62517) y Salmonella triphymurium (42122) y el
234
Full Paper
hongo Candida albicans.
Las muestras fueron pesadas y solubilizadas en
dimetilsulfxido (DMSO), preparando una disolucin
con concentracin de 50 mg/mL de extractos y 12,5
mg/mL de sustancias puras. Se pipetearon 40 L de
esta disolucin a un tubo de ensayo que contena 960
L de medio de cultivo BHI como solucin de
trabajo. Por otra parte, se prepar una pre incubacin
en la que las bacterias (levaduras) guardadas en tubos
de ensayo conteniendo 3,0 mL de medio de cultivo
BHI (Brain Heart Infusion, infusin de cerebro y
corazn). A continuacin, los tubos fueron incubados
en estufa a 37C durante 18 horas. Con la ayuda de
una micropipeta, 500 L de las bacterias pre
incubadas fueron transferidas a tubos de ensayo
conteniendo 4,5 mL de agua destilada. Los tubos
fueron homogeneizados y la concentracin que
contena cada tubo fue comparada con el tubo de 0,5
en la escala Mc Farland de turbidez patrn (10 8
UFC/mL), obtenindose as los incubados bacterianos
utilizados en el test.
Los test fueron realizados en placas de 96
microporos por duplicado. En cada cavidad, fueron
adicionados 100 L del medio de cultivo BHI. En la
cavidad primera, fueron adicionados tambin 100 L
de la solucin de trabajo. Se homogeneiz la
disolucin y 100 L fueron transferidos para la
siguiente cavidad y as sucesivamente, desprecindose
los 100 L finales. Fueron probadas ocho
concentraciones de cada muestra: concentracin 01
(500 g), 02 (250 g), 03 (125 g), 04 (62,5 g), 05
(31,25 g), 06 (15,625 g), 07 (9,375 g), 08
(3,90625 g). Despus, 100 L de los
microorganismos incubados, fueron adicionados en
cada pozo. Fueron realizados dos controles, uno para
el control de crecimiento del microorganismo, en el
cual no hubo adicin de la disolucin de trabajo, para
verificar, as la viabilidad celular y el blanco, al que
no se le adicion la incubacin bacteriana, para
eliminar el efecto de la coloracin de la solucin de
trabajo. Una placa de control que contiene 100 L del
medio de cultivo BHI y 100 L de agua destilada,
fueron adicionados al experimento como control de
esterilidad del medio de cultivo BHI.
Las microplacas fueron sometidas a una
primera lectura en el lector de placa de Elisa (492
nm), inmediantamente despus de la realizacin del
experimento (lectura a 0 h). Posteriormente, fueron
incubadas en estufa a 37C y despus de 24 horas fue
realizada una nueva lectura de las mismas cerrando
as el test.
Orbital: Electron. J. Chem. 6 (4):233-239, 2014
 Montero et al.
Bioensayo para hongos filamentosos Aspergillus
flavus y Fusarium proliferatum
El solvente utilizado en la preparacin de este
tipo de muestras es dimetilsulfxido, cuyas
concentraciones de las muestras en el test es de 250
g/mL. El medio utilizado para el crecimiento de los
microorganismos es el caldo Sabouraud, empleando
una concentracin de esporas de 5.10-5 esporas/mL,
siendo el tempo de incubacin de las muestras de 48
horas.
Los datos de las medidas de las lecturas fueron
realizadas en un lector de placas de microtitulacin,
empleando una longitud de onda de 490 nm.
Para el tratamiento de resultados, empleamos
el test de Outlier y dentro del mismo aplicamos el test
de Grubbs para un nivel de significancia del 95 %.
siendo EC a absorbancia del test, CC la absorbancia
de control de la muestra, CH la absorbancia de control
del hongo e CM la absorbancia de control del medio
de cultivo.
Bioensayo de inhibicin de acetilcolinesterasa
Para llevar a cabo dicho ensayo se tomaron 25
L de la solucin de trabajo (muestra disuelta en
Tabla 1. Prospeccin fitoqumica de los constituyentes en el extracto etanlico
Compuestos Fenoles Taninos Flavonoides
Hojas 0 +++
0 = no se encuentran en la muestra; +++ = Se encuentran en concentracin alta; ++ = se encuentran en baja concentracin.
Dichos metabolitos secundarios estn de
acuerdo con los constituyentes aislados mediante
otros estudios fitoqumicos para esta planta [2].
Una vez visto que los ensayos de prospeccin
fitoqumica presentaban resultados positivos para los
taninos, flavonoides, esteroides y saponinas, as se
inici el fraccionamiento, se procedi a recoger en un
Erlenmeyer de 125 mL la solucin de la columna,
eliminndose el solvente en el rotavapor. Las
fracciones se recogieron en distintos frascos y se le
hizo una cromatografa en capa fina, para verificar
qu sustancias son semejantes de acuerdo con el rf
para continuar con el fraccionamiento y purificacin
del extracto de las hojas de C. laurifolium
recogindose once fracciones diferentes extradas con
235
Full Paper
DMSO 10 mg/mL) y se colocan en las cavidades de
una placa Elisa para hacer los test de control positivo
y negativo. En las cinco primeras cavidades de la
columna de control positiva, se adicionaron 25 L de
la solucin de eserina (10 mg/mL en tampn Tris/HCl
pH 8,0). Se adicionaron a cada cavidad, 25 L de la
solucin de yoduro de acetilcolina (ATCI), 125 l de
la solucin de DTNB (5,5-dithio-bis-(2-
nitrobenzoate, Sigma), y 50L de Tris/HCl (50mM)
con albmina srica bovina. La absorbancia fue
medida a 405 nm en intervalos de 1 minuto durante 8
minutos. Se adicionaron 25 L de la solucin de
AChE (0,226 U/mL) en Tris/HCl a cada cavidad y se
midi la absorbancia a 405 nm durante 10 minutos [5-
6].
3. RESULTS AND DISCUSSION
Anlisis preliminar de los ensayos fitoqumicos
Los anlisis fitoqumicos fueron realizados
conforme a Matos [4] para intentar verificar los
constituyentes qumicos en las hojas de las planta. Al
no tener estudios qumicos sobre la especie en que se
inici el estudio, se recogen en la Tabla 1 de forma
cualitativa, los grupos de metabolitos secundarios
relevantes presentes en la planta.
Esteroides Triterpenos Saponinas
+++ ++ +++ +++
distintas proporciones de hexano y triclorometano en
orden de polaridad creciente.
Anlisis de los ensayos biolgicos
Al analizar los procedimientos de los ensayos
de prospeccin fitoqumica, se verific la presencia de
metabolitos secundarios importantes como fenoles,
esteroides, taninos, triterpenos alcaloides y saponinas.
Partiendo de estos datos, se seleccionaron las
fracciones que contenan mayor cantidad de eluato y
adems las de mayor pureza, observndose sus
manchas en cromatografa de capa fina, son los
subgrupos 3, 5 y 8.
Las levaduras que pertenecen al gnero
Orbital: Electron. J. Chem. 6 (4):233-239, 2014
 Montero et al.
Full Paper

Candida son las responsables de causar varias que las infecciones causadas por la especie C.
infecciones en su husped cuando no se han tomado albicans, son principalmente en la piel, uas,
excesivos cuidados higinicos, atacando a individuos mucosas, tracto intestinal e urinario [6].
que tengan principalmente una baja inmunidad, por lo

Tabla 2. Resultados de MIC (% de inhibicin) para C. albicans.

C. albicans
% de inhibicin Subgrupo 5 Subgrupo 8 Subgrupo 3 Miconazol Nistanina
01 (500 g) 90,8 92,2 90,2 92,3 93,3
02 (250 g) 90,6 91,3 91,1 91,0 90,7
03 (125 g) 91,4 91,1 90,9 90,7 90,1
04 (62,5 g) 91,3 91,9 90,7 90,5 90,2
05 (31,25 g) 91,3 91,6 91,5 91,1 90,9
06 (15,625 g) 91,9 92,2 92,1 91,6 91,5
07 (9,375 g) 92,3 91,9 92,3 91,5 91,3
08 (3,90625 g) 92,0 93,8 92,6 91,3 91,4

Como puede observarse en la Tabla 2 el
subgrupo 8 fue el que present mayor porcentaje de
inhibicin alcanzando un total del 93,8%, con un
valor de menor concentracin inhibitoria de 3,9065
g y comparando con los patrones de Miconazol e
Nistanina, la misma presenta un porcentaje de
inhibicin superior. Krieg, Chan e Michael [7],
afirman que la primera exigencia para un buen
antimicrobiano es aquella que posee la capacidad de
inhibir o matar microorganismos. Teniendo este
compuesto qumico una baja concentracin y
poseyendo un amplio espectro de actividad, es decir,
puede actuar matando o inhibiendo los ms variados
tipos de microorganismos.
Todava se observa, que tanto el subgrupo 3 y
el subgrupo 5, tambin presentan un porcentaje de
inhibicin para la C. albicans elevado con relacin a
los antimicrobianos ya utilizados en el mercado,
presentando as la oportunidad descubierta de este
potente antimicrobiano.
Al analizar la Tabla 3, se puede verificar que el
antibitico ampicilina todava es bien eficiente para S.
aureus y que las fracciones de C. laurifolium
presentan un porcentaje de inhibicin inferior al 50%,
pudindose verificar que las bajas concentraciones de
las fracciones presentan resultados prximos a los de
ampicilina, principalmente en el subgrupo 8, para las
concentraciones de porcentaje de inhibicin 06
(15,625g). Souto [11], constat que el extracto bruto
etanlico de partes areas de C. laurifolium (Loefl)
Stuntz, presenta un porcentaje de inhibicin bien
prximo al utilizado como control.

Tabla 3. Resultados de MIC (% de inhibicin) para S. aureus.

S. aureus
% de inhibicin Subgrupo 5 Subgrupo 8 Subgrupo 3 Miconazol
01 (500 g) 38,7 31,4 1,6 104,6
02 (250 g) 32,1 28,6 10,8 106,0
03 (125 g) 30,4 31,4 32,3 105,5
04 (62,5 g) 18,8 28,4 23,4 104,1
05 (31,25 g) 14,1 25,7 17,7 101,9
06 (15,625 g) 12,6 24,7 17,6 86,7
07 (9,375 g) 16,2 21,7 15,2 34,7
08 (3,90625 g) 6,9 8,3 8,3 14,8

Por otra parte, el gnero Staphylococcus, posee
varias bacterias patgenas en los seres humanos y en
los dems mamferos, una de ellas es la S. aureus, que
puede ella capacidad de causar diversas infecciones,
de varios niveles de gravedad [8]. Dentro de ellas
pueden ser citadas, heridas infecciosas, fiebres e
infecciones alimentarias [9]. Es importante observar
que las cepas de esta bacteria son en la mayora de las
veces muy resistentes a los antibiticos. El primer
utilizado fue la penicilina, pero los mismos pasaron
por un proceso de mutacin y no son ms vulnerables
a ella [10]. As el descubrimiento de nuevos
antibiticos lo hace de suma importancia.
Por otra parte, en la garganta se encuentra una

Orbital: Electron. J. Chem. 6 (4):233-239, 2014

236
 Montero et al.
Full Paper

variada concentracin de microorganismos, que [12]. Para la S. sanguinis, se verifica en la Tabla 4,

poseen unas condiciones favorables para el que el subgrupo 8 fue el que present mayor
crecimiento de los mismos. As, las bacterias se porcentaje de inhibicin.
forman en los restos de alimentos que quedan
En la Tabla 5, se verifica que el porcentaje de
concentrados entre los dientes. Dentro de los
inhibicin para E. coli, ms significativo, fue el
principales grupos de microorganismos estn los
subgrupo 5, que fue del 42,754% para concentracin
hongos, protozoos, bacterias y virus. Dentro de las
de 500 g, resultando relevante una vez verificado
bacterias podemos encontrar Actinomyces,
que las bacterias estn en contactes mutaciones y se
Lactobacillus, Streptococcus, Neisseria y Veillonella.
vuelven cada vez ms resistentes a los antibiticos.

Tabla 4. Resultados de MIC (% de inhibicin) para S. sanguinis.

S. sanguinis
% de inhibicin Subgrupo 5 Subgrupo 8 Subgrupo 3 Miconazol
01 (500 g) 49,9 54,2 13,4 102,9
02 (250 g) 47,8 26,6 18,6 3,2
03 (125 g) 14,1 26,6 31,2 2,7
04 (62,5 g) 15,8 25,5 24,5 0,0
05 (31,25 g) 21,0 23,7 25,6 0,0
06 (15,625 g) 19,7 23,0 23,9 0,0
07 (9,375 g) 30,0 29,4 33,2 0,0
08 (3,90625 g) 20,7 23,7 31,5 0,0

Tabla 5. Resultados de MIC (% de inhibicin) para E. coli.

E. coli
% de inhibicin Subgrupo 5 Subgrupo 8 Subgrupo 3 Miconazol
01 (500 g) 42,8 21,9 39,8 186,9
02 (250 g) 27,3 15,7 22,1 140,9
03 (125 g) 15,4 12,6 13,4 118,6
04 (62,5 g) 16,9 7,7 10,5 104,9
05 (31,25 g) 16,4 14,7 15,2 96,2
06 (15,625 g) 20,6 20,3 18,9 95,4
07 (9,375 g) 16,9 22,1 21,9 94,6
08 (3,90625 g) 26,6 21,8 23,6 79,6

La especie E. coli pertenece al gnero
Escherichea y la familia Enterobacteriaceae [13], una
bacteria gram-negativa, anaerbica facultativa [14].
Debido al uso indiscriminado de antibiticos,
por largo perodo de duracin, y hasta el mismo falso
concepto de seguridad en relacin a la eficacia de
estos, muchos patgenos estn sufriendo mutaciones y
se vuelven ms resistentes a los antibiticos. Factores
como estos, facilitan las infecciones hospitalarias
causadas por microorganismos, tales como S. aureus,
E. coli y Pseudomonas, que cuando actan en
conjunto provocan infecciones urinarias, quemaduras,
infecciones respiratorias y cirrgicas. [15].
El resultado de MIC para la bacteria S.
tiphymurium sigue la Tabla 6, donde se destaca
resultados satisfatrios. Se define la S. tiphymurium,
como bacilos gram-positivos, anaerbicos
facultativos, fermentadores y oxidantes negativos
[16]. Se verifica que despus de la ingestin y/o
contaminacin por bacterias del gnero Salmonella, el
husped pasa a sentir nuseas, cefalea, vmitos y
diarrea. Cuando se trata del intestino delgado,
generalmente ocurren lesiones inflamatorias, siendo
este caso tratado en un perodo de 2 a 3 das [17].
Al analizar la Tabla 6, se verifica que las tres
fracciones presentan un porcentaje de inhibicin bien
satisfactorio, destacando que para el subgrupo 5 que
inhibi el 100% en concentracin de 500 g,
mostrando ser una sustancia bastante eficaz contra
este tipo de bacteria.
Los hongos son microorganismos eucariotas,
no fotosintticos que son saprofitos y parsitos. En los
ms diversos ambientes es comn la existencia de
hongos, pero en determinadas situaciones, pueden
dejar de ser saprfitos y se transforman en patgenos,
en la mayora de las veces, causando cuadros clnicos

Orbital: Electron. J. Chem. 6 (4):233-239, 2014

237
 Montero et al.
Full Paper

variables, desde procesos febriles benignos y algunas generalmente, los pacientes se encuentran
veces fatales [18]. Muchos factores estn ligados al hospitalizados por un perodo largo, pacientes con
ataque de hongos que van desde los cuidados con la tratamiento quimioterpico, pacientes con HIV, son
higiene en los ambientes donde el husped se los casos de pacientes ms vulnerables y favorecen
encuentra as, como el estado del mismo, los hongos saprfitos pasen a ser patgenos [19].

Tabla 6. Resultados de MIC (% de inhibicin) para S. tiphymurium.

S.tiphymurium
% de inhibicin Subgrupo 5 Subgrupo 8 Subgrupo 3 Miconazol
01 (500 g) 105,8 31,4 59,3 228,4
02 (250 g) 87,8 30,9 46,6 180,0
03 (125 g) 78,5 38,7 45,5 142,1
04 (62,5 g) 65,6 54,4 60,1 123,3
05 (31,25 g) 58,5 45,2 44,8 102,1
06 (15,625 g) 43,9 40,0 27,1 101,2
07 (9,375 g) 69,9 63,5 54,1 108,6
08 (3,90625 g) 60,6 62,8 22, 100,932

El A. flavus produce toxinas y puede provocar como el Alzheimer.

aspergilose pulmonar alrgica o dolencia diseminada
Extractos que presentan un porcentaje de
[20].
inhibicin enzimtica 50% pueden ser aislados como
Analizando la Tabla 7 se verifica nuevamente sustancias potencialmente inhibitorias de AChE [22].
que el subgrupo 8, presenta un porcentaje de Los extractos que presentan inhibicin >50% son
inhibicin del 28,42%, siendo este el mejor de los tres considerados potentes, inhibidores moderados 30-
tanto para A. flavus y para F. proliferatum. 50% de inhibicin e inhibidores dbiles <30% de
inhibicin [23].
En la Tabla 8, se recogen los datos del test de
inhibicin de acetilcolinesterasa nuevamente para los
subgrupos 5, 8 y 3 respectivamente, donde se observa
4. CONCLUSIONES
un porcentaje de inhibicin bueno, especialmente la
muestra del subgrupo 3. La prospeccin fitoqumica present resultados
positivos para algunas sustancias presentes en las
hojas de C. laurifolium, se verific que el extracto
Tabla 7. Resultados de la inhibicin sobre A. flavus y bruto etanlico de la planta, posee en su constitucin
F. proliferatum. sustancias como: taninos, flavonoides, esteroides y
A. flavus F. proliferatum saponinas.
% inhibicin % inhibicin
Subgrupo 5 2,21 5,26 En cuanto a los resultados indican que las
Subgrupo 8 28,42 26,14 fracciones de C. laurifolium estudiados, contienen
Subgrupo 3 13,34 6,51 compuestos de accin fungicida y se verifica que el
subgrupo 8 que present en la mayora de los ensayos
biolgicos un potencial de inhibicin bien elevado en
Tabla 8. Resultados de los testes de inhibicin de
diferentes concentraciones.
acetilcolinesterasa.
% Inhibicin Acetilcolinesterasa
Subgrupo 5 65,2
Subgrupo 8 42,8 5. AGRADECIMIENTOS
Subgrupo 3 46,3
Galantamina* 90,31 Agradecemos a la profesora Jacqueline
Aparecida Takahashi del Departamento de Qumica
* Medicamento de uso clnico
de la Universidade Federal de Minas Gerais (Belo
La acetilcolinesterasa, es una enzima crucial Horizonte, Minas Gerais, Brasil), la realizacin de los
que juega un importante papel fisiolgico en la ensayos microbiolgicos y de inhibicin del
sinapsis interneuronal del sistema nervioso [21], por acetilcolinesterasa que se muestran en este trabajo.
lo que se pone de manifiesto que C. laurifolium, Por otra parte, hemos de agradecer tambin al Banco
puede ser empleado para combatir enfermedades Santander, CAPES, CNPq, UFRR y al Ncleo de

Orbital: Electron. J. Chem. 6 (4):233-239, 2014

238
 Montero et al.
Full Paper

Pesquisa e Ps-Graduao em Cincias e Tecnologia [12] Souto, A. L. Constituintes qumicos de Combretum

frutcosum (Loefl.) Stuntz (combretaceae). 2011. 151p.
(NPPGCT). Dissertao (Ps-graduao em produtos naturais e
Sintticos Bioativos) - Universidade Federal de Paraba,
Joo Pessoa, Paraba, 2011.

6. REFERENCIAS Y NOTAS [13] Burton, R. W. B.; Engelkirk, P.G. Microbiologa para as

cincias da sade, 1998.
[1] Pietrovski, E. F.; Rosa, K. A.; Facundo, V. A.; Rios, K.;
Marques, M. A. C.; Santos, A. R. Pharmacol. Biochem. [14] Bier, O. Microbiologia e Imunologia. So Paulo:
Be. 2006, 83, 99. [CrossRef] Melhoramentos, 1994.

[2] Rodrigues, M. G.; Praxedes, S. I.; Dutra, C. M.; Taveira, J. [15] Kaper, J. B; Nataro, J. P.; Mobley, H. L. T. Nat. Rev.
N.; Souza, F. H.; Barbosa, F. J.; Guedes, S. A.; Lopes, S. Microbiol. 2004, 2, 123. [CrossRef]
A.; Fechine, T. J.; Batista, L. M. Molecules 2012, 17, [16] Burton, R. W. B.; Engelkirk, P. G. Microbiologa para as
9142. [CrossRef] cincias da sade, 1998.
[3] Kulisic, T.; Radonic, A.; Katalinic, V.; Millos, M. Food [17] Murray, P. R. Microbiologia Mdica. 4 ed. Rio de Janeiro:
Chem. 2004, 85, 663. [CrossRef] Guanabara Koogan, 2004.
[4] Matos, F. J. A. Introduo Fitoqumica Experimental. 2 [18] Brooks, G. F.; Butel, J. S.; Morse, S. A. Microbiologia
Ed - Fortaleza: UFCE, 141 p., 1997. Mdica. 21 ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2000.
[5] Frank, B.; Gupta, S. Ann. Clin. Psychiatry 2005, 17, 269. [19] Lacaz, C. S.; Porto, E.; Martins, J. E. C.; Heins-Vaccari, E.
[CrossRef] M.; De Melo, N. T. Tratado de Micologia Mdica. So
[6] Ellman, G. L. Biochem Pharmacol. 1961, 7. Paulo: Sarvier, 2002.

[7] Burton, R. W. B.; Engelkirk, P. G. Microbiologa para as [20] Schaechter, M.; Engleberg, N. C.; Eisenstein, B. I.;
cincias da sade, 1998. Medoff, G. Microbiologia: Mecanismos das Doenas
Infecciosas. 3 ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan,
[8] Michael J. Pelczar J. R., M. J.; Chan, E. C. S.; Krieg, N. R. 2002.
Microbiologia, conceitos e aplicaes. Makron Books, 2
ed., vol. 2, 1997. [21] Fisher, F.; Cook, N. B. Microbiologia: Fundamentos e
diagnsticos. Rio de Janeiro: Revinter, 2001.
[9] Burton, R. W. B.; Engelkirk, P. G. Microbiologa para as
cincias da sade, 1998. [22] Trevisan, M. T. S.; Macedo, F. V. V. Qum. Nova 2003,
26, 301. [CrossRef]
[10] Jawetz.; Melnick.; Adelberg. Microbiologa mdica.
LANGE, 1998. [23] Vinutha, B.; Prashanth, D.; Salma, K.; Sreeja, S. L.;
Pratiti, D.; Padmaja, R.; Radhika, S.; Amit, A.;
[11] Shiota, S.; Shimizu, M.; Mizushima, T.; Ito, H.; Hatano, Venkateshwarlu, K.; Deepak, M. J. Ethnopharmac. 2007,
T.; Yoshida, T. Biol. Pharm. Bull. 1999, 22, 12. 109, 359. [CrossRef]
[CrossRef]

Orbital: Electron. J. Chem. 6 (4):233-239, 2014

239