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Liboria Matinella*
* Biologa MSc. Jubilada del Ministerio del Poder Popular Para la Salud, adscrita a la Direccin
General de Salud Ambiental, Maracay, estado Aragua.
Versin digital
Depsito legal: lfi 22320146303872
ISBN: 978-980-318-298-4
Versin impresa
Depsito Legal:
ISBN
Prlogo .................................................................................................................... 9
Introduccin .................................................................................................................... 11
CAPTULO I
Generalidades sobre malacologa...................................................................................... 15
La Malacologa............................................................................................................. 15
Conquiologa................................................................................................................ 15
Uso de los moluscos.................................................................................................... 15
Uso y aporte de las conchas ....................................................................................... 15
Morfologa externa de la concha.................................................................................. 16
Principales formas de conchas..................................................................................... 17
Discoidal................................................................................................................. 17
Helicoidal................................................................................................................ 17
Pateliforme.............................................................................................................. 17
Orientacin de la concha................................................................................................. 17
Medicin de la concha..................................................................................................... 17
Nociones sobre bionoma de las especies...................................................................... 18
Clasificacin taxonmica de B. glabrata.......................................................................... 18
Descripcin de la subclase Prosobranchia ..................................................................... 19
Familia Ampullariidae.............................................................................................. 19
Familia Neritidae .................................................................................................... 19
Familia Melaniidae.................................................................................................. 19
Familia Hidrobiidae................................................................................................. 20
Descripcin de la subclase Pulmonada........................................................................... 20
Familia Ancylidae.................................................................................................... 20
Familia Physidae.................................................................................................... 20
Familia Lymnaeidae................................................................................................ 20
Familia Planorbidae................................................................................................ 20
Gneros de la familia Planorbidae................................................................................... 20
Drepanotrema................................................................................................... 21
Helisoma........................................................................................................... 21
Antillorbis.......................................................................................................... 21
Biomphalaria..................................................................................................... 21
Descripcin conquiliolgica del gnero Biomphalaria...................................................... 21
B. glabrata........................................................................................................ 21
B. straminea .................................................................................................... 21
B. kuhniana....................................................................................................... 21
B. havanensis................................................................................................... 22
B. prona............................................................................................................ 22
B. obstructa...................................................................................................... 22
B. schrammi...................................................................................................... 23
Distribucin geogrfica de Biomphalaria glabrata en Venezuela..................................... 23
rea endmica................................................................................................. 23
rea no endmica............................................................................................ 23
CAPTULO II
Anatoma funcional de los moluscos pulmonados........................................................... 25
Sistema reproductor............................................................................................... 26
Sistema digestivo.................................................................................................... 26
Sistema respiratorio................................................................................................ 26
Sistema nervioso.................................................................................................... 26
Sistema excretor..................................................................................................... 26
Sistema muscular podal......................................................................................... 26
Sistema circulatorio................................................................................................ 26
rganos genitales del gnero Biomphalaria (Pulmonata)............................................... 27
Cresta Renal........................................................................................................... 27
Vagina .................................................................................................................... 27
Sistema peneano.................................................................................................... 27
Canal deferente...................................................................................................... 27
Prstata.................................................................................................................. 28
Diferencias morfolgicas ms notables entre B. straminea y B. kuhniana............. 28
B. straminea..................................................................................................... 28
B. kuhniana....................................................................................................... 28
Mtodos de diagnstico malacolgico............................................................................. 28
Estudio de las partes blandas................................................................................. 29
rganos femeninos................................................................................................ 29
rganos masculinos............................................................................................... 29
Diseccin de caracoles........................................................................................... 31
Tcnica con anestesia...................................................................................... 31
Tcnica sin anestesia....................................................................................... 31
Morfologa externa de la concha............................................................................ 16
Estudio morfomtrico.............................................................................................. 32
Marcadores ecolgicos........................................................................................... 32
Morfologa de los dientes de la rdula.................................................................... 32
Claves para caracoles vivos y conchas vacas...................................................... 32
Anlisis molecular o bioqumico............................................................................. 32
Tcnicas de preservacin................................................................................................ 32
Conservacin de la rdula...................................................................................... 33
Conservacin directa.............................................................................................. 33
Relajacin............................................................................................................... 33
Congelacin............................................................................................................ 34
Fijacin y preservacin........................................................................................... 34
Almacenamiento..................................................................................................... 34
Coloracin............................................................................................................... 34
Preparacin de soluciones............................................................................................... 34
Anestsicas para caracoles.................................................................................... 35
Conservadoras para caracoles............................................................................... 35
CAPTULO III
Ciclo de vida de un Biomphalaria.................................................................................... 37
Oviposicin ............................................................................................................ 37
Perodo embrionario .............................................................................................. 37
Crecimiento............................................................................................................. 37
Madurez sexual...................................................................................................... 38
Mortalidad .............................................................................................................. 38
Longevidad y longitud del ciclo biolgico................................................................ 38
Conducta en el hbitat..................................................................................................... 38
Proceso reproductivo.............................................................................................. 38
Alimentacin........................................................................................................... 39
Locomocin............................................................................................................ 40
Caractersticas del hbitat............................................................................................... 40
Medio acutico........................................................................................................ 40
Composicin del agua............................................................................................ 40
El fondo................................................................................................................... 40
Movimiento del agua............................................................................................... 40
Profundidad............................................................................................................ 41
La luz .................................................................................................................... 41
Altura .................................................................................................................... 41
Temperatura............................................................................................................ 41
Mantenimiento de caracoles en condiciones de laboratorio............................................ 41
Elementos controlados........................................................................................... 41
Complemento alimenticio para caracoles............................................................... 41
CAPTULO IV
Principales especies de Schistosomas que infectan al humano..................................... 45
Fases larvales de Schistosoma mansoni......................................................................... 46
Morfologa del huevo de S. manson....................................................................... 46
Morfologa del miracidio de S. mansoni.................................................................. 46
Morfologa de la cercaria de S. mansoni................................................................ 46
Morfologa de S. mansoni....................................................................................... 47
Evolucin de las fases larvales de S. mansoni................................................................ 48
CAPTULO V
Mantenimiento del ciclo biolgico de S. mansoni en condiciones de laboratorio............ 51
Obtencin de miracidio a partir de heces............................................................... 51
Obtencin de miracidios por hgado e intestino...................................................... 51
Infeccin de caracoles............................................................................................ 51
Doble simultnea infeccin de caracoles en gran escala....................................... 52
Materiales y equipos........................................................................................................ 52
Emisin de cercarias.............................................................................................. 52
Clculo de cercarias............................................................................................... 52
Preparacin de soluciones............................................................................................... 52
Infeccin del hospedador definitivo........................................................................ 52
Infeccin percutnea por cola.......................................................................... 53
Materiales y equipos................................................................................... 54
Infeccin percutnea por inmersin................................................................. 54
Materiales y equipos................................................................................... 54
Infeccin percutnea abdominal....................................................................... 55
Materiales y equipo..................................................................................... 55
Preparacin de anestsicos........................................................................ 55
Infeccin subcutnea........................................................................................ 56
Materiales y equipos................................................................................... 56
Infeccin por inmersin de ratones neonatos o lactantes................................ 57
Materiales y equipos................................................................................... 57
Manutencin de ratones y hmsters en el bioterio experimental..................................... 57
Formacin de S. mansoni en el organismo del hospedado definitivo.............. 57
Obtencin de la SHV para realizar la PPCO................................................................... 58
Materiales y equipos............................................................................................... 59
Preparacin de soluciones..................................................................................... 59
CAPITULO VI
Conocimientos bsicos para el desarrollo de las actividades malacolgicas .................
en el campo .................................................................................................................... 63
Definiciones .................................................................................................................... 63
Cuencas hidrogrficas convencionales.................................................................. 63
Clasificacin de las colecciones de agua............................................................... 63
Nmero de orden de las colecciones de agua....................................................... 63
Inspeccin............................................................................................................... 63
Tipos de inspecciones y siglas utilizadas......................................................... 63
Molusquicidas.................................................................................................................. 64
Actividades previas a la aplicacin molusquicida................................................... 64
Aplicacin de molusquicidas................................................................................... 64
Clasificacin de los molusquicidas......................................................................... 65
Contacto........................................................................................................... 65
Acumulativo...................................................................................................... 65
Tipos de molusquicidas.................................................................................... 65
Estrategias para el Control del molusco dulceacucola Biomphalaria glabrata............... 66
Formacin malacolgica terico-prctica......................................................... 66
Estudios hidrogeogrficos................................................................................ 66
Control del molusco hospedador intermediario................................................ 66
Diagnstico de moluscos dulceacucolas......................................................... 66
Investigacin malacolgica............................................................................... 68
Evaluacin operativa........................................................................................ 68
Acciones conjuntas de vigilancia epidemiolgica en el humano...................... 68
Aspectos a considerar para emprender actividades malacolgicas................................ 68
Implementos que debe disponer el personal de campo................................... 68
Donde buscar los moluscos............................................................................. 68
Ubicacin del hbitat........................................................................................ 69
Tcnica de recoleccin de moluscos................................................................ 69
Estimacin de la densidad poblacional de caracoles en el hbitat.................. 70
Medicin de los caracoles................................................................................ 71
Traslado de los caracoles para su identificacin............................................................. 72
Recepcin de muestras y envo de resultados................................................................ 72
Embalaje de moluscos para un traslado.......................................................................... 72
CAPTULO VII
Consideraciones sobre Bioseguridad.............................................................................. 73
Normas mnimas de bioseguridad en el laboratorio........................................................ 73
Elementos de proteccin personal................................................................... 73
Evaluacin de riesgos...................................................................................... 73
Medidas preventivas de transmisin................................................................ 74
Instalaciones de los animales........................................................................... 75
Bibliografa consultada..................................................................................................... 77
ANEXOS
Anexo 1.Tremtodos ms comunes identificados en moluscos de agua dulce.............. 82
Anexo 2. Indicadores malacolgicos............................................................................... 83
Anexo 3. Articulacin entre el Nivel Central y los Servicios Regionales.......................... 84
Anexo 4. F-LM2-01. Recoleccin de moluscos................................................................ 85
Anexo 5. F-LM13-08. Evaluacin de cursos y cuerpos de agua....................................... 86
Prlogo
Desde hace 47 aos, el doctor Przemyslaw Del mismo modo, el manual est orientado
Chrosciechowski (1966), prepar la primera al conocimiento y estudio de la familia
versin de un manual para contar con Planorbidae (Gastrpoda), con especial
una Gua de Procedimientos (volumen 1), nfasis en el caracol Biomphalaria
dirigida a los inspectores en salud pblica glabrata, especie que ocupa un eslabn
y al personal de laboratorio. La segunda preponderante en la transmisin de la
edicin actualizada en el ao 2001 conserv Esquistosomosis en Venezuela. Otras
el propsito esencial, considerando la especies, aunque no menos importantes,
importancia de los moluscos dulceacucolas se describen brevemente por cuanto forman
y la vinculacin de estos con los humanos. parte de la malacofauna venezolana.
Doce aos ms tarde se presenta un
manual ms amplio, siguiendo la pauta Adems, tiene el propsito de ser
de sus predecesores, enmarcado dentro una fuente de consulta, tanto para
del continuo avance que experimenta la profesionales especializados en el rea de
Malacologa en la actualidad. caracoles dulceacucolas, como docentes,
investigadores, estudiantes, personal que
En este manual se combina la teora como trabaja en laboratorio y campo, equipos
hilo maestro de todo conocimiento y la que conforman los Programas Regionales
prctica que corresponde a la actuacin de Salud y toda persona interesada en el
como medio de comprobacin, para rea.
facilitar a los interesados en el rea, las
herramientas que precisan saber en Es satisfactorio dedicar esta tercera
laboratorio y campo. versin al maestro Chrosciechowski, quien
me brind sus conocimientos por largos
Todo su contenido es producto de un aos y hoy es motor de este esfuerzo sin
significativo nmero de consultas y en importar mi condicin de jubilada. Como
gran parte de los estudios ejecutados su alumna, resulta grato recordar sus
en el Laboratorio Malacolgico, ubicado en firmes y orientadoras enseanzas cuando
la avenida Prez Bonalde, Urbanizacin deca: A un observador apresurado se le
Andrs Bello, sector Las Delicias, Maracay, escapan muchos detalles.
estado Aragua, articuladas con las meri-
torias investigaciones realizadas por Que sirva la presente publicacin para
Chrosciechowski, quien puso en cada uno adquirir o ampliar los conocimientos, de
de sus trabajos una destilacin de aos, quien la lea, practique o estudie y sea til
combinados con experiencia y paciencia, como ayuda en las tareas de laboratorio y
para demostrar con detalles el fascinante campo.
mundo de los caracoles dulceacucolas
venezolanos. Liboria Matinella
Nota de Agradecimiento
Los moluscos estn ubicados en el Reino Coleccionadas durante milenios, por su be-
Animalia, Subreino Metazoa Phylo Mollusca, lleza, para estudio, as como para extraor-
de los cuales existen unas 100.000 dinarias exposiciones.
especies en todo el mundo. Para facilitar
Como herramientas, debido a su gran va-
su clasificacin estn agrupados en ocho
riedad de formas.
clases: Caudofoveata, Solenogastres,
Polyplacphora, Monoplacphora, Bivalvia, En procesos industriales, como en la fa-
Scaphopoda, Cephalpoda y Gastrpoda. bricacin de cal, colorantes para telas o la
Cada una de estas clases muestran una obtencin de perlas, como el subproducto
diversidad de adaptaciones estructurales que ms codiciado obtenido de las ostras.
contribuyen al xito de su existencia, de hecho,
estn ampliamente distribuidas; habitan en el Empleadas como instrumentos musicales,
fondo de los ocanos, desiertos, aguas dulces normalmente como una especie de trom-
y saladas, trpicos hmedos y hasta en las peta.
cimas de las montaas (Brusca y Brusca,
1990). Debido a la amplitud y variedad de Contribuyeron en importantes hallazgos,
especies, muchos malaclogos han delimitado durante excavaciones arqueolgicas.
su rea de estudio en aquellos moluscos que
aportan beneficio o afectan a los humanos y Desempean un papel en la religin y la es-
animales. piritualidad. La concha del gnero Cypraea,
se consider como smbolo de la mujer, de-
bido a su forma parecida a la vagina.
Uso de los moluscos
Se atribuye el da de San Valentn a los ma-
Se utilizan como fuente de alimentacin rineros del Caribe en el siglo IXX, quienes
por muchos pueblos en distintos lugares regalaban a sus amadas cajas de madera
del mundo, representando una alternativa con conchas incrustadas en forma de co-
nutricional por su alto contenido proteico, razn.
Moluscos gasterpodos dulceacucolas de Venezuela: identificacin e importancia en salud pblica. 16
Orientacin de la concha
El ombligo en una concha discoidal se encuen-
tra en el lado derecho y el pice al izquierdo.
En las conchas discoidales es difcil distinguir
el pice del ombligo. Para determinar la direc-
cin de los giros en una concha, se debe colo-
car con el pice hacia arriba, en posicin verti-
cal y la abertura con vista hacia el observador.
Si la abertura se encuentra hacia la mano iz-
quierda las conchas son siniestras, sinistrgi-
ras o sinistrorsas, caso contrario son diestras,
dextrgiras o dextrorsas. Las primeras crecen
en sentido contrario a las agujas del reloj y las
segundas en sentido como giran las agujas
del reloj. Esta descripcin aplica a las conchas
Figura 2. Concha discoidal con pice y ombligo bien definidos; para los
Planorbdeos la orientacin de la concha se
determina colocndola en posicin horizontal.
Helicoidal: tiene forma de espiral, las vueltas
crecen una debajo de la otra y aumentan gra-
dualmente, dndole a la concha un aspecto Medicin de la concha
cnico. Algunas especies presentan ornamen-
taciones caractersticas como se seala en la La altura, el dimetro y el nmero de vueltas
Figura 3. La forma helicoidal se observa en ca- son medidas que en una concha no slo dan el
racoles de las familias Physidae, Lymnaeidae valor absoluto del tamao, sino que adems,
y otras. relacionadas entre s, dan idea de su aspecto.
Moluscos gasterpodos dulceacucolas de Venezuela: identificacin e importancia en salud pblica. 18
De acuerdo a Matinella (1997), las especies Otra especie, Pomacea sp. tiene concha heli-
del gnero Biomphalaria conocidas actual- coidal de forma globosa, abertura alta, espira
mente en Venezuela, son: B. glabrata (Say, baja y sin ombligo. En cuanto a P. urceus, pue-
1818), B. straminea (Dunker, 1848), B. kuhnia- de alcanzar una altura de 110 mm, se conoce
na (Clessin, 1883), B. prona (Martens, 1873), con el nombre vulgar de guarura y en algunas
B. havanensis (Pfeiffer, 1839), B. obstructa regiones de Venezuela es comestible. En Bra-
(Morelet, 1849) y B. schrammi (Crosse, 1864) sil la especie P. lineada, se reporta como posi-
(Figura 6). ble hospedador de Angostrongylus cantonen-
sis (Carneiro y Agudo-Padrn, 2011).
Descripcin de la subclase Familia Neritidae: son caracoles marinos, la
Prosobranchia nica especie dulceacucola Neritina sp. en el
pas, se encuentra en cursos de agua a pocos
La subclase Prosobranchia incluye a los ca- kilmetros de la desembocadura del mar. Son
racoles marinos, de agua dulce y pocas espe-
conocidos como quigua y sirven de alimento,
cies terrestres, representadas por los rdenes
poseen concha robusta con espira perceptible,
Archeogastrpoda, Mesogastrpoda y Ste-
no se tienen reportes como hospedadores in-
noglossa. Esta subclase hace referencia a la
termediarios.
posicin caracterstica del rgano respiratorio
branquial, el cual se encuentra situado al fren- Familia Melaniidae: se ubican las especies
te del corazn, son caracoles operculados y Thiara granfera, T. tuberculata y una sola es-
sexos separados. pecie autctona Pachycheilus laevissimus,
las cuales poseen conchas helicoidales, sin
Las familias dulceacucolas venezolanas se
describen a continuacin: ombligo, con espira ms alta que la abertura.
La introduccin al pas del gnero Thiara trajo
Familia Ampullariidae: en esta familia se ubi- como consecuencia el desplazamiento de las
ca la especie Marisa cornuarietis, la cual po- especies autctonas, adems, tienen impor-
see espira rebajada, con ombligo en el lado tancia epidemiolgica, por cuanto son hospe-
izquierdo, por lo que es un caracol dextrorso, dadores intermediarios de Paragonimus sp.
su empleo como antagonista de B. glabrata no El humano se infecta cuando ingiere las me-
ha sido efectivo. tacercarias.
Familia Hydrobiidae: son caracoles de con- stas perecen pronto, ya que el humano es un
cha pequea aproximadamente 6 milimetros hospedador anormal.
de altura, abertura redonda u ovalada que
mide menos la mitad de la altura total, algu- Familia Lymnaeidae: se caracteriza por su
nas especies de esta familia poseen ombligos, concha dextrgira, helicoidal con abertura que
otras no. mide la mitad o ms de la altura total. Es una
familia de mucha importancia econmica, exis-
El gnero Aroapyrgus presente en el pas es ten dos especies, Lymnaea (Fossaria) cuben-
hospedador intermediario de Paragonimus sis y L. (Pseudosuccinea) columella que son
sp., afecta a 22 millones de personas en el susceptibles a la infeccin con Fasciola hep-
mundo, con focos endmicos en Asia, frica tica y F. gigantica, estn presentes en todos
y America. los continentes y producen grandes prdidas
del ganado bovino, ovino y caprino. Para pre-
venir la infeccin humana se debe evitar beber
Descripcin de la subclase agua, comer o masticar vegetacin acutica
Pulmonata cruda que crezca en el agua o terrenos hme-
dos, cerca de praderas donde pastan vacas
Esta subclase incluye caracoles de agua dul- u ovejas. El control qumico de L. (Fossaria)
ce, terrestre y pocas especies marinas, est re- cubensis y L. (Pseudosuccinea) columella no
presentada por los rdenes Stylommatophora, es efectivo en 100%, porque estos caracoles
Basommatophora y Systellommatophora. Los tienen hbitos acuticos y anfibios. Al respec-
pulmonados carecen de branquias, poseen un to, Morales et al., (1983) relacionaron las es-
saco pulmonar contrctil o pneumostoma por trategias de control de estas especies sobre la
donde circula el agua o el aire, dependiendo base de tres parmetros biolgicos, como: la
del hbitat de cada especie, no poseen opr- demanda de calcio, la edad y el tamao corpo-
culo y son hermafroditas. ral para la potencialidad vectora.
Las familias dulceacucolas venezolanas se Familia Planorbidae: son caracoles con con-
describen a continuacin: chas discoidales, sinistrorsas, cncavas en
ambos lados, con pice hundido y ombligo
Familia Ancylidae: es la nica familia con con- ms o menos profundo en el lado derecho. En
cha pateliforme, la especie Ancylus sp. tiene esta familia la mayora de las conchas son fr-
forma parecida a una carpa, con abertura elp- giles, con excepcin de la especie B. prona,
tica. Son conchas pequeas y frgiles, difciles que posee conchas bastante duras. Debido a
de divisar por un observador poco experimen- la importancia de esta familia, se describen los
tado, ya que se adhieren a cualquier objeto, cuatro gneros que la conforman, con especial
cuando se recolectan en campo se consiguen nfasis el gnero Biomphalaria.
pegadas a las conchas de otros caracoles, no
hospedan ningn parsito de importancia eco-
nmica. Gneros de la familia Planorbidae
Familia Physidae: son caracoles con concha Drepanotrema: este gnero pertenece a las es-
helicoidal, puntiaguda y de altura mayor que el pecies: Drepanotrema depressissimum, D. ana-
dimetro, por su orientacin son sinistrorsas. tinum, D. surinamensis, D. lucidum, D. cimex,
Las especies Physa sp. y Aplexa sp. presentes D. sinensis y D. aeruginosum, son autctonas,
en el territorio venezolano hospedan cercarias de conchas sinistrorsas, pequeas, frgiles y
de aves y animales silvestres, como Giganto- transparentes, cuyo dimetro alcanza 10 mili-
bilharzia sp. y Trichobilharzia sp. Estas cerca- metros. No hospedan cercarias de S. mansoni,
rias causan la dermatitis cercariana llamada pero se han observado, en el Laboratorio Mala-
prurito de nadadores, que no es una enfer- colgico de Maracay, emitiendo cercarias de la
medad sino una molestia o escozor pasajero, familia Strigeidae no patgenas al humano.
CAPITULO I. Generalidades sobre malacologa 21
Helisoma: fue introducido en el pas hace, la especie, el color cambia segn el tipo de
aproximadamente, 51 aos, probablemente a suelo del hbitat, son bicncavas, el ombligo
travs de plantas acuticas para decorar los est ubicado en el centro del lado derecho de
acuarios. Es fcil confundirlo con B. glabrata, la concha, aunque a menudo el pice se en-
debido a que el dimetro de la concha puede cuentra igualmente hundido.
medir ms de 20 milimetros, es sinistrorsa, ro-
busta y bastante alta. Las vueltas en el lado Biomphalaria glabrata: es la especie ms
izquierdo son planas con suturas superficiales. grande de la familia Planorbidae, el dimetro
En el lado derecho son redondeadas, con su- de su concha puede llegar a 40 mm. Es de for-
turas penetrantes y crecen consecutivamen- ma discoidal, sinistrorsa con ombligo al lado
te. La vuelta de cuerpo es sobresaliente, las derecho, poco profundo, es bicncava y co-
lneas de crecimiento notables, ombligo pro- mnmente es difcil distinguirlo del pice. Las
fundo y angosto, con espira aplanada, aber- vueltas son redondeadas y estn ubicadas la-
tura redonda y bastante abierta en forma de teralmente una al lado de la otra, la porcin
trompeta. Las especies presentes en el pas, final de la vuelta de cuerpo sigue el plano de la
Helisoma duryi y H. caribensis, no hospedan concha, con ligera desviacin hacia la izquier-
cercarias de S. mansoni. da (Figura 7).
de otras enzimas, como la amilasa y algunas localizan en la cabeza, pie y msculos superfi-
proteasas, probablemente producidas por las ciales sensoriales del cuerpo. Las clulas ner-
glndulas salivales. viosas de los pulmonados, al igual que otros
moluscos, tienen una composicin inica. Las
Sistema respiratorio: una de las adaptacio- variaciones de sodio (Na++), potasio (K+) y cal-
nes ms notables en los moluscos pulmona- cio (Ca++) dependen de la concentracin de los
dos que ha ocurrido en el transcurso de su mismos en las clulas nerviosas; el calcio es
evolucin, es la presencia de unos rganos el principal in interno, pero debido a la per-
parecidos a pulmones o sacos pulmonares, meabilidad inica de la membrana de rechazar
ya que es factible hayan evolucionado a par- o aceptar el in, pueden controlar la concen-
tir de mamferos terrestres (delfines, morsas y tracin inica interna.
focas). Los sacos pulmonares estn constitui-
dos por una cavidad paleal y un manto vascu- Sistema excretor: son fundamentalmente ne-
larizado, el cual es el sitio de intercambio ga- fridios, o sea, tbulos pares que estn diferen-
seoso entre el agua y la sangre circulante. La ciados en una porcin tubular y otra a manera
denominacin pulmonata es aplicable a los de vejiga. Los nefridios desembocan al exte-
moluscos gasterpodos, los cuales respiran el rior, por medio de aberturas, por donde arrojan
aire atmosfrico. los desechos solubles de la sangre y fluidos
intracelulares.
El aire disuelto en el agua se difunde a travs
de las partes blandas del caracol y ocurre un Sistema muscular podal: los pulmonados,
intercambio de oxigeno, el cual, es transpor- como otros Gastrpodos, estn adaptados
tado a la sangre tisular mediante el saco pul- para la locomocin y una gran adhesin al
monar que est conectado al exterior, por un sustrato. El pie es un rgano muscular succio-
estrecho orificio llamado Neumostoma que se nador con el cual el caracol queda adherido
abre rtmicamente. El volumen respiratorio del al sustrato. Los cilios sirven para esparcir la
saco pulmonar es variable, cuando el caracol mucosidad en el sustrato para facilitar la loco-
est fuera del agua se le calcula un volumen mocin, los moluscos acuticos slo utilizan el
de 5,7 mililitros y una reduccin del mismo de pie, sin el auxilio de los cilios, porque no nece-
0,5 mililitros cuando se retrae en su concha. sitan producir mucosidad.
El oxigeno que consumen algunas especies El sistema muscular podal est formado por un
pulmonadas se mide por sus condiciones fisio- conjunto de fibras orientadas en varias direc-
lgicas que son considerablemente variables, ciones: transversales, longitudinales y dorso-
pueden influir factores como la edad, el dime- ventrales, las dos ltimas se entrelazan para
tro, la estivacin o anabiosis, la temperatura, formar el msculo retractor anterior y posterior,
las estaciones del ao y los tratamientos de las para facilitar que la sangre se disperse lateral-
superficies de agua; todo el conjunto afecta la mente a la estructura podal.
funcin respiratoria del animal.
Sistema circulatorio: en los caracoles pulmo-
Por lo tanto, el consumo de oxigeno disminuye nados es abierto, bien desarrollado, formado
cuando aumenta el dimetro del caracol; as por un corazn contrctil y numerosos vasos
mismo, se reduce el elemento por efecto de la sanguneos, los cuales distribuyen la sangre
estivacin, esto ocurre justo durante el primer hacia los diversos rganos del cuerpo; pero
da del evento y luego sigue bajando, el gne- la sangre fluye a travs de espacios o senos,
ro Strophocheilus, cuando entra en perodo de ms que por medio de capilares.
anabiosis, permanece 48 horas sin presentar
cambios de la actividad fisiolgica y tisular. De los cuatro pigmentos respiratorios pre-
sentes en la sangre de los organismos vivos
Sistema nervioso: consiste bsicamente de (hemoglobina, clorocruorina, hemocianina y
tres pares de ganglios interconectados que se hemeritrina), slo la hemoglobina y la hemo-
CAPITULO 2. Anatoma funcional de los moluscos pulmonados 27
cianina estn presentes en los Gastrpodos Cuadro 1. Aspecto de la vagina en las diferentes
pulmonados, como en otros moluscos. La he- especies
moglobina y la hemocianina estn disueltas
Especie Aspecto de la vagina
en la hemolinfa circulante; en el ao 1869 se
detect, por primera vez, la presencia de este B. glabrata
pigmento en la sangre de la especie Planorbis B. havanensis Divertculo o bolso vaginal
corneus; lo que trajo mucha polmica para la B. prona
poca. B. straminea Corrugamiento vaginal
Corrugamiento vaginal poco
B. kuhniana
desarrollado
rganos genitales del gnero B. schrammi Superficie vaginal lisa
Biomphalaria (Pulmonata) Superficie vaginal lisa, con bolso
B. obstructa
extremadamente pequeo
Para poder identificar a un caracol, no es sufi-
ciente conocer su estructura externa, o sea, la
concha, es indispensable examinar los rga- Sistema peneano
nos internos, particularmente el sistema geni- El sistema peneano est formado por el pre-
tal, cuyo aspecto es tpico para cada especie pucio y el saco peneano, estos rganos co-
(Malek, 1985). rresponden al sistema genital masculino del
caracol, los cuales pueden variar, su aspecto,
La siguiente descripcin fue propuesta por
segn la especie, como se muestra en el Cua-
Chrosciechowski (1987), est limitada slo a
dro 2.
las partes cuyo conocimiento es imprescindi-
ble para los fines de clasificacin, sin hacer
mencin a otros detalles de importancia, pero Cuadro 2. Aspecto del sistema peneano en las
superfluos para este propsito. Las especies diferentes especies
venezolanas del gnero Biomphalaria se pue- Especie Aspecto del sistema peneano
den identificar por las caractersticas de su
morfologa interna, las cuales son de gran va- Saco peneano ms delgado que
B. glabrata
el prepucio
lor taxonmico, entre ellas:
Sistema peneano sin estrecha-
B. havanensis
miento
Cresta renal Sistema peneano fusionado y
B. prona
grueso
La presencia de la cresta renal es propia de
la especie B. glabrata, pues no aparece en Saco peneano ms delgado que
B. straminea
ninguna otra del gnero. Su aspecto es va- el prepucio
riable; a veces ocupa todo el largo del tubo Saco peneano ms delgado que
B. kuhniana
renal, en otras slo una parte. En los espec- el prepucio
menes jvenes, donde la cresta no se ha for- Saco peneano un poco ms
mado an, se observa en su lugar una cinta B. schrammi
delgado que el prepucio
pigmentada. Saco peneano estrecho, ligera-
B. obstructa
mente ms corto que el prepucio
Vagina
Canal deferente
El Cuadro 1 presenta el aspecto de la vagina,
la cual es determinante para identificar el ca- Es una estructura en forma de tubo delgado,
racol B. glabrata, as mismo las especies con- pero las especies B. prona y B. havanensis
genricas. presentan una dilatacin central ms gruesa
Moluscos gasterpodos dulceacucolas de Venezuela: identificacin e importancia en salud pblica. 28
que en sus extremos, detalle que se destaca y B. straminea, las cuales se deben considerar
muy claramente. al momento de diseccionarlas. Sin embargo,
para el mismo criterio la tcnica PCR-RFLP
(Reaccin en Cadena de la Polimerasa - Po-
Prstata limorfismo del Tamao del Fragmento de Res-
Esta estructura est formada por los divertcu- triccin) es determinante para caracterizar
los prostticos, los cuales varan en forma y especies similares, permitiendo un anlisis de-
nmero para cada especie (Cuadro 3). tallado de la expresin gnica (Caldeira et al.,
2000).
rganos femeninos
El oviducto es un canal grueso, prximo a la
glndula nidamental, sta es cilndrica de color
amarillo plido, en su interior contiene los hue-
vos que modifican considerablemente la forma
del rgano. El tero es un segmento corto y
estrecho, que se encuentra entre la glndula
nidamental y la desembocadura de la esper-
Figura 15. Estructura tpica de un caracol.
mateca. El bolso vaginal se ubica en la su-
perficie del tero cerca de la espermateca, la
vagina es la ltima porcin del rgano genital
Estudio de las partes blandas femenino, la cual es de dimetro pequeo, con
numerosas fibras musculares.
En la Figura 16 se expone el sistema genital
de un caracol Biomphalaria, en el cual se ob-
serva el rgano femenino y masculino, de igual rganos masculinos
forma se sealan las estructuras que son co-
munes para los dos sexos. La Figura 17 desta- El conducto espermtico es mucho ms fino
ca las diferencias, notables, que existen entre que el oviducto y generalmente ms largo; su
los sistemas reproductivos para cada especie trayecto es tortuoso, desemboca en el canal
del gnero Biomphalaria (Malek 1985). de la glndula prosttica, que vara segn la
Moluscos gasterpodos dulceacucolas de Venezuela: identificacin e importancia en salud pblica. 30
especie. El conducto deferente es un tubo terior al pene. El pene es un rgano que pre-
ms fino que el conducto espermtico, siendo senta diferentes proporciones dependiendo
particularmente delgado en el segmento me- de la especie. El prepucio presenta paredes
dio, con un trayecto irregular. El saco peneano espesas y musculosas, casi siempre pigmen-
es una vaina cilndrica que contiene en su in- tadas, el cual termina en el poro masculino.
Figura 17. Diferencias entre los sistemas reproductivos de las especies del gnero Biomphalaria.
CAPITULO 2. Anatoma funcional de los moluscos pulmonados 31
Al mismo tiempo, se observan unas estruc- molgica, sujetar la regin podal y separar
turas comunes para los dos sexos, como la suavemente la parte blanda de la concha.
ovotestis, que es una glndula con un canal
longitudinal recubierto en parte por la glndu- 4. Colocar la parte blanda en lquido fijador y
la digestiva; en algunas especies los divert- la concha correspondiente en otro frasco
culos pueden ser bifurcados y en caracoles con algodn. Identificar ambos frascos con
adultos presenta una coloracin amarilla. El el mismo nmero.
canal hermafrodita es fino y delgado en su 5. Estudiar las caractersticas del sistema re-
comienzo y presenta numerosas expansiones productor para identificar la especie.
irregulares, que reciben el nombre de vescu-
la seminal, en el que se alojan gran cantidad Tcnica sin anestesia: cuando no se cumple
de espermatozoides. El canal hermafrodita con la Legislacin de los Animales de Labora-
termina en un rgano llamado encrucijada, torio, Artculo 12 (citado por Molina et al., 2008).
donde comienzan los conductos masculino y
femenino separados.
Procedimiento:
quierdo, el orificio genital femenino ubicado Morfologa externa de la concha: ver pgina
tambin en el cuello en el fondo del pliegue 16.
del collar, el rin est en la pared de la ca-
vidad pulmonar y se puede observar de iz- Estudio morfomtrico: es una tcnica que
quierda a derecha. Los caracoles del gnero consiste en medir los rganos genitales y las
Biomphalaria poseen en el manto dos cres- caractersticas externas de los caracoles. El
tas paralelas al rin: la cresta dorsal y la anlisis cuantitativo de las medidas servir
cresta rectal, estas dos no deben confundir- para identificar las especies.
se con la cresta renal propia caracterstica Marcadores ecolgicos: es el estudio de un
de la especie B. glabrata (Deslandes, 1951). conjunto de factores que incluye los diferen-
tes hbitats de los caracoles, tablas de vida,
nmero de moluscos que sobreviven, huevos
viables y longevidad entre las generaciones
desarrolladas (Pointier, 1997).
Morfologa de los dientes de la rdula: es
una tcnica orientada al examen de los dientes
de la rdula para identificar los caracoles. El es-
tudio es particular para cada especie y amerita
un anlisis detallado, por cuanto hay que inves-
tigar la larga cinta que conforma la estructura.
Claves para caracoles vivos y conchas va-
cas: permiten identificar los caracoles por el
aspecto de la concha y son de gran utilidad
para el personal de salud pblica, quien debe
Figura 18. a) Posicin de la abertura femenina, conocer las caractersticas externas de los
b) rgano copulador. caracoles, principalmente de B. glabrata. Las
claves, generalmente, son sencillas y referidas
a los caracoles de cada regin, ya que las mis-
Otro aspecto a considerar, durante la disec- mas familias pueden incluir formas diferentes
cin de caracoles, es la presencia de cercarias (Chrosciechowski, 1981).
en fase de esporocistos, como se muestra en
la lmina preservada del Laboratorio Malaco- Anlisis molecular o bioqumico: esta tcni-
lgico en el ao 2001, por lo que es necesa- ca es fundamental para caracterizar moluscos
rio un examen detallado, porque los caracoles de importancia mdica (dulceacucolas, terres-
pueden estar parasitados por otros tremtodos tres y marinos), actualmente se utiliza en dife-
(Figura 19). rentes reas de investigacin y en laboratorios
clnicos, la cual permite el anlisis detallado
de la expresin gnica de clulas individuales
hasta la evolucin de las especies (Caldeira
et al., 2000). Su procedimiento es laborioso
y est restringido a laboratorios con equipos,
reactivos y soluciones especficas, las cuales
no dispone el Laboratorio Malacolgico de
Maracay, estado Aragua.
Tcnicas de preservacin
Debido a la complejidad tisular de los rganos
Figura 19. Esporocistos de Schistosoma mansoni. y el sistema del caracol se utilizan diferentes
CAPITULO 2. Anatoma funcional de los moluscos pulmonados 33
tcnicas para preservar y colorear cada una larvales de los trematodos para estudios pos-
de sus segmentos. Los estudios anatmicos teriores.
requieren de estas partes, las cuales deben
ser preservadas para posibles comparaciones
o anlisis paralelos. Por ejemplo, cuando se
quiere demostrar la efectividad del tratamiento
molusquicida, para cambiar o mantener la cla-
sificacin de los cursos y cuerpos de agua. De
all la importancia de conservar cuerpo blan-
do y conchas de los caracoles recibidos de las
diferentes regiones del pas. Igualmente, con-
servar los especmenes contribuye a enrique-
cer la sala de coleccin o conquihemeroteca.
Conservacin de la rdula
La Figura 20 muestra la cinta radular, provista
de dentculos microscpicos, los cuales pre-
sentan formas particulares para cada especie,
por lo que se considera de gran valor taxon-
mico. El procedimiento para conservar la r-
dula consiste en diseccionar la masa bucal y
sumergirla durante una noche entera en solu-
cin de hidrxido de sodio (NaOH) a 10%. De Figura 20. Rdula de un Biomphalaria e ilustracin
igual forma se puede colocar en solucin de de la nomenclatura de algunos dentculos.
hipoclorito (ClO), el cual digiere el tejido de la
rdula y mandbula en un tiempo ms corto. Relajacin: para esta tcnica se puede utilizar
Separar la rdula de la mandbula y lavar la dos o tres gotas de solucin saturada con cris-
cinta radular con agua destilada. Por medio de tales de mentol a 95% de alcohol o nembutal
un pincel fino transferir la cinta a una cpsula en agua, hasta cubrir los caracoles. Una vez
de Petri, agregando una gota de agua glice- colocados en la solucin disponible no deben
rinada, colocando los dentculos hacia arriba, ser perturbados mientras son narcotizados,
lavarla uno o dos veces con alcohol a 70% y con el propsito de mantener las estructuras
hacer el montaje de la misma mediante tcnica internas sin alteraciones.
microscpica normal. En algunas ocasiones,
es recomendable sumergir la cinta radular en Luego de seis a 48 horas, se debe verificar
solucin acuosa de Permanganato de Potasio, que los moluscos se encuentren en estado
Naranja G o Hematoxilina, antes de transferirla insensible al estmulo para ser extrados de
a la cpsula de Petri y agregar la gota de agua la concha, no es recomendable dejarlos ms
glicerinada esto con el propsito de hacer ms tiempo del estipulado en la solucin, ya que los
visible la estructura radular (Malek, 1985; Fret- tejidos pueden deteriorarse y los especmenes
ter y Peaje, 1975) con adaptaciones (Matine- no podrn ser utilizados para estudios micro
lla, 2013). morfolgicos.
Conservacin directa: esta tcnica utiliza el Una vez confirmado que los caracoles estn
cuerpo blando de los moluscos, los cuales de- totalmente relajados, se deben colocar en solu-
ben ser extrados mediante diseccin y con- cin de formalina a 5% y, despus de 24, horas
servados directamente en lquido de Bouis o se pueden transferir a una solucin de alcohol
de Carnoys; en el mismo lquido se pueden a 70%. Finalmente, los especmenes pueden
conservar las micro estructuras de las fases ser preservados en la solucin de Raillet-Henry.
Moluscos gasterpodos dulceacucolas de Venezuela: identificacin e importancia en salud pblica. 34
Congelacin: es procedente relajar los ca- del recolector, infeccin parasitaria, ecologa,
racoles antes de someter su cuerpo a con- entre otras; por cuanto el material identificado
gelacin para evitar el proceso traumtico. incompleto no tiene valor desde el punto de
El procedimiento consiste en colocarlos en el vista cientfico. El orden en que se conserve
compartimiento ordinario del congelador por el material en el rea de la conquihemerote-
una noche y al da siguiente se retiran para ca, redundar en beneficio del reducido tiempo
que ocurra la descongelacin del hielo, para que se utilizar cuando se busca una especie
ese momento los caracoles estarn completa- en particular.
mente extendidos y pueden ser sacados fcil-
mente de sus conchas (Barbosa et al., 1960). Coloracin: cuando se quieren poner en evi-
dencia algunas estructuras internas de los
Fijacin y preservacin: es un mtodo efec- caracoles es preciso elegir la coloracin ade-
tivo para fijar y preservar caracoles dulceacu- cuada para apreciarlos detalladamente. La
colas, los cuales pueden ser removidos de sus hematoxilina-eosina es la coloracin ms uti-
conchas con pinzas entomolgicas de punta lizada, la cual permite apreciar estructuras tan
fina de la manera usual, despus de ser rela- finas como las de los cromosomas (en clulas
jados en solucin mentolada por 24 horas los sexuales) o la estriacin de las fibras muscula-
caracoles de mayor dimetro deben perma- res (especialmente del corazn y la boca).
necer ms tiempo en la solucin mentolada,
seguidamente colocarlos en una solucin de La coloracin tricrmica de Mallory ha demos-
glicerina-alcohol en la cual pueden perdurar trado ser til para los tejidos del caracol, ade-
por tiempo indefinido. Este mtodo es particu- ms la tcnica de Wilder modificada ofrece
larmente til cuando se quieren preservar es- buenos resultados para el tejido reticular. La
pecmenes en masa. hematoxilina frrica se utiliza para colorear la
glndula del albumen y la glndula digestiva
Almacenamiento: los caracoles se deben al- con la tcnica de Altmann. Sin embargo, para
macenar en contenedores con tapa de rosca o las ramificaciones prostticas y la ovotestis se
de presin, esto se realiza para evitar la eva- recomienda la solucin yodada a 40% para
poracin. Los envases de metal no se deben destacar los detalles. En los moluscos la afi-
utilizar para prevenir la oxidacin, sobre todo nidad de los colorantes por determinadas es-
si en alguna etapa del proceso se utiliza for- tructuras se denomina siderofilia.
malina.
o, esta condicin la presenta los caracoles de permite que, en el curso de un ao, nazcan de
B. glabrata del estado Portuguesa. cinco a siete generaciones, siempre y cuando
las condiciones sean favorables. La vida del
Es importante destacar que durante el creci- caracol generalmente es de un ao, aunque
miento de los moluscos, se distinguen tres pe- puede vivir un tiempo mayor, dependiendo de
rodos: las colecciones de agua donde habita. Los ca-
racoles que viven en cursos y cuerpos de agua
1. En los primeros das despus de la eclo- estacionales adquieren un factor gentico de
sin el crecimiento es nulo. resistencia al desecamiento, mientras que
2. Sigue el perodo de crecimiento rpido has- aquellos que se encuentran en hbitat acu-
ta llegar a la madurez sexual. ticos permanentes no desarrollan dicho factor.
En este contexto, es oportuno mencionar algu-
3. Ya alcanzada la madurez sexual, el caracol nos factores genticos presentes en el gnero
vuelve a crecer lentamente, algunos mala- Biomphalaria, los cuales pueden variar dentro
clogos sealan que este proceso no para y de la misma especie. Estos factores genotpi-
el caracol sigue creciendo hasta que muere. cos son: resistencia al desecamiento, resisten-
cia o susceptibilidad a la infeccin, compatibili-
dad o adaptacin y el albinismo.
Madurez sexual
Al segundo mes de vida, el caracol se consi- Conducta en el habitat
dera maduro sexualmente y hace su primera
postura de huevos, pero las condiciones del
hbitat pueden retardar el proceso. Proceso reproductivo
Estudios al respecto demuestran que no es la En los cursos y cuerpos de agua, donde estn
edad sino el tamao del caracol, lo que indica presentes varios caracoles, la heterofecunda-
la llegada de la madurez sexual, o sea, cuan- cin ocurre mayormente, es decir, los huevos
do la concha alcanza un dimetro entre 7,5 y son fecundados por cpula entre dos caraco-
9 mm. Ensayos realizados en el Laboratorio les, donde uno hace el papel de hembra y otro
Malacolgico, en el ao 1994, confirman di- de macho o viceversa. Tal condicin permite a
chos resultados. un solo caracol infestar un curso o cuerpo de
agua
Mortalidad Los planorbdeos son moluscos hermafroditas
capaces de reproducirse por autofecundacin
La mortalidad es bastante elevada, sobre todo
y fecundacin cruzada. El aparato reproduc-
los primeros das de vida cuando el caracoli-
tor de estos moluscos est constituido bsi-
to todava dbil y tiene una conchita frgil. En
camente por la ovotestis, donde se producen
condiciones naturales la mortalidad es ms
los vulos y espermatozoides, seguido de un
elevada, en comparacin al laboratorio donde
canal que se divide para separar la parte mas-
recibe los cuidados necesarios. Sin embargo,
culina de la femenina, permitiendo el pasaje
el caracol puede superar estas prdidas gra-
de los espermatozoides y vulos, respecti-
cias a su gran fecundidad.
vamente. La Figura 22 de Vidigal (1995) con
adaptaciones de la autora muestra el recorrido
Longevidad y longitud de los espermatozoides introducidos durante
del ciclo biolgico la cpula en el canal genital, los cuales son
almacenados en la ovotestis y en la esperma-
El ciclo biolgico comprende desde la apari- teca. En la ovotestis ocurre la fecundacin cru-
cin del huevo hasta la primera postura, todo zada, cuando hay autofecundacin se sugiere
el perodo oscila entre los 53 a 77 das, lo que que sta acontece en la vescula seminal. Los
CAPITULO 3. Ciclo de vida de un Biomphalaria 39
Los Biomphalaria son herbvoros, aunque en Figura 22. Sistema genital de un Biomphalaria
campo se han observado alimentndose de mostrando el camino de los vulos y
cadveres de animales, heces, papel y otros. espermatozoides endgenos y exgenos.
No obstante, prefiere el alimento vegetal (le-
chuga criolla o berro), cuya cutcula no resul-
te muy dura para la rdula que le sirve para
arrancar la sustancia alimenticia. La Figura
23 muestra una vista parcial de un cuerpo de
agua con presencia de B. glabrata, durante su
alimentacin. (Foto: Laboratorio Malacolgico,
2008).
Locomocin
En una coleccin de agua los caracoles Figura 23. Vista parcial de un cuerpo de agua con
caminan contra corriente a una velocidad presencia de B. glabrata, durante su alimentacin.
de un metro por da aproximadamente. Su
constante movimiento le permite hallar ali-
mento, encontrar compaero para la cpula Otro tipo de movimiento es en sentido verti-
y expandirse por todo el reservorio de agua. cal, el caracol tiene en su cavidad pulmonar
En condiciones adversas salen del agua, sin una burbuja de aire que aumenta o disminuye
poder caminar sobre tierra seca, como por el volumen del peso especfico de su cuerpo,
ejemplo cuando se aplica una sustancia mo- condicin que le permite flotar o caer al fondo
lusquicida. del reservorio de agua. Esta conducta se mani-
Moluscos gasterpodos dulceacucolas de Venezuela: identificacin e importancia en salud pblica 40
fiesta al sentirse perturbado o por la necesidad qumicamente pura, como agua destilada no le
de renovar su reserva de aire en la superficie. favorece. Las colecciones de agua naturales
contienen materiales disueltos, como el ele-
Tambin puede desplazar cuando se introduce mento calcio que le sirve al caracol para fortale-
la red y, al ser molestados, se dejan arrastrar cer su concha. En la Figura 25 se observa que
por la corriente de agua, pero este no es un en el hbitat de B. glabrata, ocurre la descarga
medio eficiente para expandirse. Se observa de aguas servidas, la cual es estimulante para
ms efectivo el trasporte mediante los cultiva- su desarrollo (Foto: Laboratorio Malacolgico,
dores de berro, quienes inconscientemente lle- 2008), sin embargo, no tolera la contaminacin
van los huevos y caracolitos pequeos, a tra- industrial porque contiene materiales txicos,
vs de las plantas, de esta forma se instalan pero vive bien en estuarios donde la concen-
nuevos focos. tracin salina es de 25%.
Medio acutico
Habitan en colecciones de aguas dulceacu-
colas, es decir, en lagos, ros, canales ace-
quias, cinagas, entre otros. En la Figura 24 se
muestra el hbitat de B. glabrata y el contacto
humano para uso recreativo o laboral. (Foto:
Laboratorio Malacolgico 2008).
El fondo
Para realizar la digestin, el caracol necesita
comer tierra del sustrato, por eso un fondo de
pura arena, roca o piedra no le favorece.
Figura 24. Hbitat de B. glabrata, obsrvese el
contacto humano para uso recreativo o laboral.
Movimiento del agua
Prefiere aguas lnticas, con corriente no ma-
Composicin del agua yor de 0,5m/seg, pero en colecciones de agua
lticas se pueden establecer poblaciones del
El caracol necesita ciertas sustancias disuel- caracol, cuando en sus orillas se forman pe-
tas en agua para poder vivir, por eso el agua queas ensenadas, cinagas y pozos.
CAPITULO 3. Ciclo de vida de un Biomphalaria 41
Obtencin de cras
Utilizar un acuario con 10 caracoles de sie-
te a nueve milmetros de dimetro
Colocar lminas de anime o papel plstico
transparente para que en las mismas ocu-
rran las desovas.
Trasladar a una bandeja las lminas, cuan-
do se observen abundantes paquetes de
huevos, hasta que el embrin alcance su
madurez para eclosionar. Esta operacin
Figura 26. Vista parcial de acuarios en el bioterio se puede realizar semanalmente o cuando
experimental. se requiera.
CAPITULO 3. Ciclo de vida de un Biomphalaria 43
Es posible que los caracoles ovipongan so- Para caracoles infectados: en este caso,
bre la concha de otros caracoles y en las las condiciones pueden variar de acuerdo
paredes del acuario. Cuando esto sucede, con los resultados obtenidos:
se recomienda esperar que los caracolitos
sean visibles y trasladarlos de inmediato al Procurar ambientes separados para cara-
acuario que corresponda. coles infectados y sanos,
No mantener juntos los caracoles adultos y Colocar papel ahumado en las ventanas
huevos, ya que estos pueden ser comidos para evitar que la luz incida directamen-
por los adultos. te, aunque los caracoles infectados en su
hbitat natural emiten miles de cercaras,
sin recurrir a ningn artificio. Al respecto,
Nmero de acuarios con caracoles en pases donde ocurren las cuatro esta-
sanos ciones del ao los mantienen en completa
oscuridad,
Para lograr un autoabastecimiento adecua-
do de caracoles en el laboratorio se reco- Caracoles infectados mantenidos con luz
mienda tener tres acuarios por cada cepa diurna, igual a la del laboratorio, responden
(uno con adultos y dos con cras). perfectamente a la produccin de cerca-
rias, slo hay que exponer los caracoles a
Nota: La cantidad de moluscos por acuario la luz artificial o natural, en el momento de
debe ser proporcional al volumen de agua y al infectar animales.
dimetro de los mismos. Antes de colocarlos
en los acuarios deben estar limpios y observa-
dos para comprobar su negatividad a cualquier Complemento alimenticio
tremtodo (cercarias, planarias, entre otros). para caracoles
Verificar todos los das el estado de los acua-
rios y de los caracoles, mantener lleno y limpio Colocar las cscaras de huevo en estufa a
el envase con agua declorinada para cambios 40 C por 5 das (puede ser variable).
de emergencia.
Macerar las cscaras de huevo con rodillo
de madera, repetir tantas veces sea nece-
Temperatura sario, hasta convertir en harina.
Mantener la temperatura a 26 C. para que Conservar en envase de vidrio.
el ciclo biolgico de S. mansoni este a gran
escala. Destinar una esptula o cucharita exclusiva
para la alimentacin.
Iluminacin
Morfologa de la cercaria
de S. mansoni
Existen gran nmero de tremtodos, inclusive
en la familia Schistosomatidae, cuyas cerca-
rias son encontradas en moluscos planorb-
deos, physideos, lymneidos, ampullarideos,
entre otros. El anexo 1 muestra algunas cerca-
rias pertenecientes a las furcocercarias y lep-
tocercarias, reportadas por Pereira de Souza y
Figura 28. Huevo de Schistosoma mansoni. Lima (1997).
CAPITULO 4. Principales especies de Schistosomas que infectan al humano 47
Dentro de estas formas larvales algunas pre- se encuentran dos ventosas una oral y otra
sentan morfologa semejante a la cercaria de S. ventral, la parte posterior lo constituye el canal
mansoni, lo que dificulta la identificacin, la cual ginecforo de gran importancia para el aparea-
se muestra en la Figura 30 de Chrosciechows- miento, porque no posee rgano copulador, el
ki (1966) donde se caracteriza por una cola esperma es derramado en el propio canal, es-
bifurcada enrollada hacia la cabeza, ausencia parcindose por sus paredes.
de faringe y presencia de una serie de estiletes
insertos en la extremidad anterior del cuerpo. Los rganos genitales estn constituidos por
En su medio ambiente adopta una posicin ver- siete a nueve masas testiculares, variando la
tical, con el cuerpo o cabeza hacia abajo y se posicin relativa de las mismas. La hembra de
desplaza en la misma posicin durante uno o S. mansoni mide aproximadamente 12 a 15
dos segundos, seguido por unos momentos de mm de longitud por 0,16 mm de ancho. En re-
reposo y as sucesivamente. Tiene una longi- lacin con el macho es ms larga y delgada de
tud de 500 (micras) o sea medio milmetro. forma filiforme y cilndrica con las extremida-
Demuestra una ventosa anterior u oral de 60 des afiladas y su superficie corporal solo pre-
(micras) y otra posterior o abdominal de menor senta espinas muy pequeas y una muscula-
tamao. Un miracidio puede producir 17.000 tura poco desarrollada.
cercarias diarias y si estas provienen del mismo
miracidio tendrn un solo sexo. La glndula vitelina ocupa dos tercios de la
porcin posterior. El ovario est situado en la
porcin anterior del cuerpo con un tero cor-
to que contiene los huevos (dos o cuatro). Se
aparean para siempre (Figura 31). (Foto: La-
boratorio Malacolgico, 2008) y el macho alo-
ja a la hembra en el canal ginecforo, pene-
trando el esperma directamente por el orificio
vaginal. Juntos migran hacia el sistema portal
intraheptico (venas mesentricas inferiores),
donde copulan y la hembra hace su postura de
huevos.
Morfologa de S. mansoni
Es un tremtodo dioico, el macho mide aproxi-
madamente 10 a 12 mm de longitud y 1,1 mm
de ancho, es de color blanquecino y la superfi-
cie del cuerpo se encuentra cubierto por unas
prominencias o espinas con una musculatura
desarrollada, la cual le permite al verme pro-
gresar por las venas del hospedero definitivo,
tanto a favor como en contra de la corriente Figura 31. Hembra y macho de Schistosoma
sangunea. En la porcin anterior del cuerpo mansoni apareados..
Moluscos gasterpodos dulceacucolas de Venezuela: identificacin e importancia en salud pblica. 48
del intestino, dando origen a los granulomas. de S. mansoni como se muestra en la Figura
De esta manera se completa el ciclo biolgico 32 elaborada por Matinella, (2013).
Soluciones
El Cuadro 9 muestra la preparacin de solu-
Figura 33. Ratones durante el proceso de infeccin
ciones, las cuales tienen un uso especfico. En
por cola.
este caso, la solucin de yodo se utiliza para
inmovilizar las cercaras de S. mansoni, mien-
Procedimiento:
tras que la solucin salina isotnica, se emplea
para evitar la eclosin de los huevos (Cesari y 1. Exponer a la luz artificial tres o cuatro lotes
Alarcn de Noya, 1987). de caracoles infectados con cercarias de S.
mansoni.
Cuadro 9. Preparacin de soluciones
2. Considerar la cantidad de animales a infec-
Solucin Cantidad tar, de acuerdo con la emisin de cercarias,
por los caracoles positivos.
Lugol
1g
Yodo
2g 3. Lavar la cola de los ratones para despren-
Yoduro de potasio
100 ml derla de algunos elementos que puedan
H2O destilada hasta
obstaculizar la penetracin de las cercarias.
Salina Isotnica (SSI) 0,15 M NaCl 4. Utilizar pipeta serolgica o Pasteur para
NaCl 8,5 g capturar las cercarias.
H2O destilada hasta 1.000 ml
Autoclavar a 120 C por 15 minutos 5. Utilizar solucin de lugol para inmovilizar
las cercarias y facilitar el contaje de las
Mantener las soluciones a temperatura ambiente mismas.
Moluscos gasterpodos dulceacucolas de Venezuela: identificacin e importancia en salud pblica. 54
6. Colocar las cercarias ms agua declorina- 2. Proceder igual que en los pasos: 1, 2, 4 y 5
da en el tubo de ensayo. (infeccin por cola).
Procedimiento:
1. Asear los animales (ratones o hmsters) Figura 34. Ratones durante la infeccin por
por 30 minutos, en un envase con agua. inmersin
CAPITULO 5. Mantenimiento del ciclo biolgico de Schistosoma mansoni en condiciones de laboratorio 55
Materiales y equipos
Se requiere animales sanos: ratn o hm-
Figura 35. a) Aplicacin de anestsico en hmster
y b) Ratn durante el proceso de infeccin
ster, anestsico, tabla seccionada para ratn
percutnea abdominal (Laboratorio Malacolgico, y hmster, algodn, balanza para animales,
2010). lmpara de mesa cuello de cisne, bombillo
100 w (luz de nen), manta calefactora, ser-
villetas absorbentes industriales, mquina
afeitadora comercial (opcional), anillo para
Procedimiento: ratn 1,0 cm x 2,5 cm, anillo para hmster
1,5 cm x 3,0 cm jeringa con aguja de 25G
1. Pesar los animales antes de administrar el x 5/8, cinta adhesiva, pipetas Pasteur, mi-
anestsico. croscopio estereoscpico, placa de Rodac,
2. Administrar el anestsico por va intraperi- jaulas para animales, reloj temporizado, pin-
toneal (IP), lateral a la lnea media ventral zas, guantes de ltex, bebederos, lecho sa-
(Figura 35a). nitario y ratarina.
Infeccin subcutnea
Esta tcnica permite infectar diariamente a 160
ratones, con un peso de 20 a 25 gramos. El
nmero de animales a infectar puede ser ma-
yor, dependiendo de la cantidad de cercarias
emitidas por los caracoles (Figura 36. Inocula-
cin subcutnea en ratones). (Foto: Centro de
Pesquisas Ren Rachou Brasil, 1998).
Procedimiento:
5. Mantenerlos bajo estmulo de calor utilizan- Colocar los animales infectados en jaulas
do una lmpara. debidamente identificadas, con lecho seco,
suficiente agua y comida.
6. Vigilar constantemente la posicin de los
pequeos animales. Cuidar y mantener los animales hasta que
cumplan el perodo de perfusin o disec-
7. Dejar que ocurra la penetracin de las cer- cin, el cual oscila entre los 45 a 50 das.
carias por 30 minutos.
nas mesentricas, y a los 24 das despus, las zando cualquiera de las tcnicas seala-
hembras tienen huevos en el tero. Tanto hue- das.
vos como vermes pueden ser utilizados como
materia prima para las pruebas de diagnstico Mantener los elementos que integran el ci-
clo biolgico del parsito en niveles acor-
inmunolgico o cualquier otro fin deseado.
des al requerimiento y solicitud de material
biolgico.
Obtencin de la suspensin de huevos
viables (SHV) para realizar la Prueba de Sacrificar los animales a los 45 o 50 das
Precipitacin Circumoval (PPCO). posinfeccin por hiperextensin del cuello,
exponer los hgados por diseccin, extraer-
Esta prueba es altamente sensible para detec- los y colocarlos en solucin salina hipert-
tar casos activos de Esquistosomosis manso- nica por 24 horas.
ni, an cuando el paciente presente menos de Cortar el hgado en pedazos y colocarlo en
10 huevos por gramo de heces (Cesari et al., un recipiente color mbar, agregar: 5 ml de
1987). Para efectuar esta prueba, se realizan solucin de digestin (SFT) + 0,125 g de
un conjunto de actividades, las cuales se expli- Tripsina + 0,025 g de Colagenasa (cantida-
can de manera secuencial e ilustrativa, como se des para un hgado de ratn).
observa en la Figura 38 (Matinella et al., 2008).
Homogeneizar la mezcla utilizando una li-
Para la ejecucin de esta prueba, es necesa- cuadora tipo domstica.
rio la produccin de animales sanos, los cuales
Incubar en estufa por tres o cuatro horas a
son proporcionados por el Bioterio Central, as
una temperatura de 37 C en estufa. Agitar
mismo el mantenimiento del ciclo biolgico de
ocasionalmente para digerir el tejido y faci-
S. mansoni, esta a cargo del Laboratorio Mala- litar la liberacin de los huevos.
colgico que suministra la suspensin de hue-
vos viables, mientras que el diagnstico de la Pasar la mezcla por tamices de porosidad:
enfermedad en los pacientes, lo realiza el Labo- 420 m, 177 m, 144 m y 44 m.
ratorio de Diagnstico de la Esquistosomosis.
Lavar exhaustivamente con solucin salina
hipertnica, utilizando la pizeta hasta que
Procedimiento: el fluido salga limpio.
Tomar una gota (25l) y contar el nmero (Sigma R ) o tripsina 1:250 (Disco R), Cola-
de huevos en ese volumen para extrapolar- genasa (Tipo IV Sigma R), solucin de diges-
lo al volumen total de la suspensin. tin= fosfato tamponada (SFT), solucin salina
hipertnica, solucin colorante, licuadora, ta-
Verificar la viabilidad de los huevos me- mices: 420 l, 177 l, 144 l y 44 l, soporte
diante: 1) observacin de las clulas flam- Universal, dos recipientes de boca ancha, agi-
geras, 2) eclosin de los huevos y 3) tincin tador automtico, pizeta, cpsula de Petri de
vital con solucin de bromotimol. Los mira- 20 cm de dimetro, centrfuga de mesa, bao
cidios viables toman una coloracin amari- de agua a 37 C, estufa a 37 C, tubos de cen-
lla, los no viables se tornan verde. trfuga de 50 ml de capacidad, pipetas serol-
gicas, pipeta Pasteur, pipeteador automtico,
Nota portaobjeto y cubreobjeto, contador de mano,
balanza de precisin, autoclave, microscopio
Cuando en la suspensin de huevos via- estereoscpico y microscopio compuesto.
bles se observan detritos, es recomendable
pasarla nuevamente por los dos tamices de
menor porosidad (144 l y 44 l). Preparacin de soluciones
El objetivo de la prueba de viabilidad de En el Cuadro 12 se muestran tres soluciones,
los huevos consiste en evaluar el procedi- las cuales se utilizan para obtener huevos
miento de la tcnica, ya que cualquier error viables (Cesari y Alarcn de Noya, 1987). El
cometido compromete la viabilidad de los uso de la solucin salina hipertnica se utili-
miracidios. za durante todo el proceso de la tcnica, con
el fin evitar la eclosin de los huevos, hasta
Para que la suspensin de huevos sea uti- obtener el reactivo biolgico. La solucin de
lizable, la viabilidad debe ser mayor a 95% bromotimol, se puede utilizar para verificar la
(Cesari y Ramos, 1987). viabilidad de los huevos, aunque la observa-
cin de las clulas flamgeras y la eclosin de
Materiales y equipos los huevos son mayormente utilizadas, para
este propsito. La solucin fosfato tampona-
Se requiere animales infectados, equipo de di- da, se emplea para digerir el tejido heptico,
seccin, recipiente color mbar, lmpara con con la ayuda de dos enzimas como la tripsina
bombillo 100w (luz nen), tripsina pancretica y la colagenasa.
g) Mantenimiento de ratones en h) Sacrificio de ratn por hiperextensin i) Diseccin de ratn para extraccin
bioterio experimental del cuello del hgado
m)
Incubacin de la suspensin por n) Tamizado de la suspensin con o) Coleccin de los huevos de
tres o cuatros horas a temperatura SSH. Schistosoma mansoni en tamz de
37C. 44 m.
v) Suministro de la suspensin de
huevos viables para realizar la
PPCO.
Figura 38. Seguimiento ilustrativo para obtener la suspensin de huevos viables (SHV).
Captulo VI
Definiciones Inspeccin
Es la accin y efecto de inspeccionar o exa-
Cuencas hidrogrficas minar los cursos y cuerpos de agua, con el fin
convencionales de: comprobar la presencia o ausencia de B.
glabrata, conocer la efectividad de la aplica-
Se denominan cuencas hidrogrficas conven- cin molusquicida y controlar la infeccin de B.
cionales al conjunto de aguas dulceacucolas glabrata por S. mansoni.
superficiales, tributarios y emisarios de un ro
o una laguna, las cuales revisten carcter epi-
demiolgico, desde el punto de vista Malaco-
Tipos de inspecciones
lgico. y siglas utilizadas
Debido a su finalidad, se dividen en cinco tipos:
Clasificacin de las colecciones Exploracin (E): se realiza por primera vez,
de agua los datos forman la historia diagnstica de la
coleccin de agua, es importante conocerla,
Se clasifican en base a su infestacin por ca- tanto fsica como epidemiolgicamente, ejecu-
racoles B. glabrata, distinguindolas por medio tndose aguas arriba, examinando cuidadosa-
de las letras A B C y D mente lecho, orilla y mrgenes, donde se for-
A= Colecciones de agua originalmente sin B. man pozos, cinagas o estanques.
glabrata Ordinaria (O): se efecta en colecciones
B= Cursos o cuerpos de agua que tienen dos o conocidas para comprobar la presencia de B.
ms aos sin presencia de B. glabrata glabrata. Se realiza aguas arriba hasta ubicar
el ltimo criadero y para instalar la estacin
C= Cursos o cuerpos de agua con ms de 6 mvil de aplicacin molusquicida.
meses y menos de 2 aos sin presencia de
B. glabrata Postratamiento (PT): despus de aplica-
da la sustancia molusquicida, para verificar el
D= Colecciones de agua con presencia de B. alcance en metros de efectividad. Se inspec-
glabrata ciona aguas abajo. Si durante la inspeccin
se observa un trayecto del curso de agua con
caracoles, se regresa al punto de partida reins-
Nmero de orden de las colecciones peccionando y midiendo la distancia entre los
de agua dos puntos, la cual se tomar slo como efec-
tiva al tratamiento.
El nmero de orden de las colecciones de agua
es el que identifica y diferencia una de otra, en Postratamiento de Control (PTC): se efec-
una misma cuenca hidrogrfica. ta al igual que la PT y se realiza al concluir las
Moluscos gasterpodos dulceacucolas de Venezuela: identificacin e importancia en salud pblica. 64
Figura 40. Clculo del caudal por cubicacin para la aplicacin de Etanolamina de 5,2-dicloro-4-
nitrosalicilanilida.
Moluscos gasterpodos dulceacucolas de Venezuela: identificacin e importancia en salud pblica. 68
las superficies de agua dulce para localizar el chilla lentamente, desde abajo hacia arriba. En
hbitat del caracol B. glabrata. hierbas y materiales flotantes se introduce la
red por debajo y se levanta recogiendo todo
El medio ambiente ideal para el caracol B. el material que sea posible. Se aconseja to-
glabrata son las aguas estancadas lnticas o car varias veces la superficie de agua con la
con muy poca corriente, algo contaminadas red, para lavar la tierra o materiales recogidos
con aguas servidas, restos de vegetales y y que impidan la observacin de los caraco-
animales; fondo terroso con vegetacin, poca les recolectados. Esta operacin se debe rea-
profundidad y en sitios no expuestos directa- lizar cuidadosamente, con el fin de evitar que
mente a la luz solar, con temperatura entre 25 los caracoles se alejen flotando. La Figura 43
C y 30 C. muestra la red para recolectar caracoles en
Venezuela.
Estas caractersticas generales del hbitat
del hospedador intermediario B. glabrata, En el formato de trabajo F-LM2-01 (Anexo 4),
ayudan al personal de campo a ubicar y se- se anota la referencia del lugar donde se re-
leccionar lugares que deben ser inspeccio- colectaron los moluscos, el cual debe coincidir
nados, los cuales, generalmente, pueden con el lote o varios lotes de moluscos recolec-
reunir todas o algunas de las caractersticas tados en ese mismo lugar.
mencionadas.
Para evitar tocar los caracoles con las manos,
se debe utilizar pinzas para transferirlos a sus
Ubicacin del hbitat envases debidamente identificados. Los cara-
En los cursos de agua, la referencia del lugar coles capturados en un mismo lugar se acep-
se expresa en metros, a partir de la desembo- tan como representativos de un lote.
cadura del curso o del lugar que es el origen
de las medidas. Los criaderos de caracoles se Terminada la inspeccin de un curso de agua,
ubican siguiendo la orilla, a partir de un sitio es necesario lavar con firmeza la red para evi-
previamente determinado y de fcil identifica- tar trasladar huevos o pequeos caracoles de
cin, como la desembocadura de un curso de un sitio a otro.
agua o alguna obra construida cerca de la orilla
misma, entre otros. La ubicacin incorrecta de
lugares con presencia de moluscos positivos,
ocasiona falsas alarmas, dando lugar a graves
dificultades y errores. La Figura 42 muestra la
ubicacin del hbitat de B. glabrata y al perso-
nal del Laboratorio Malacolgico durante la re-
coleccin de las muestras. (Foto: Laboratorio
Malacolgico, 2006).
- Colocar el conjunto (rodillo de gasa e iden- Nota: la gasa no se debe empapar con agua,
tificacin) en un recipiente resistente, tipo basta humedecer. Esta tcnica es emplea-
caja de madera pequea. Tener cuidado de da mayormente cuando los ejemplares van a
no maltratar a los moluscos. ser transportados durante un viaje prolongado
(Laboratorio Helmintiasis Intestinales, 1998).
- No someter a los moluscos a refrigeracin
o altas temperaturas.
Captulo VII
- Descartar los guantes y lavarse las manos - Una concentracin suficiente de ste.
Moluscos gasterpodos dulceacucolas de Venezuela: identificacin e importancia en salud pblica. 74
- Una ruta de transmisin apropiada. - Conocer las leyes relacionadas con la se-
guridad biolgica.
De todos ellos, la ruta de transmisin es la me-
jor controlada y las ms comunes son la a- - Revisar peridicamente las normas de bio-
rea y la inoculacin directa; aunque la oral, la seguridad a los efectos de asegurar la ac-
percutnea y el contacto directo con la piel o tualizacin de las mismas.
las mucosas tambin son posibles (Caballero,
2005). - Seguir la reglamentacin nacional e inter-
nacional para el embalaje y transporte de
caracoles.
Medidas preventivas de transmisin
- Est prohibido donar o sustraer caracoles
La prevencin, es la mejor medida para pro- B. glabrata del laboratorio.
teger la salud de los trabajadores, as como a
los usuarios y al entorno donde est situado el - Restringir el acceso al bioterio experimental.
laboratorio. La Figura 45 muestra las medidas
preventivas para evitar el contacto directo con - Evitar el contacto con caracoles trados del
agua contaminada. campo.
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Anexos
Anexo 1
Leyenda: a) cercaria de Schistosoma mansoni, (tremtodo flia. Schistosomatidae), b) cercaria del grupo Ocellifera,
(trematodo flia. Clinostomatidae), c) cercaria Brevifurcata-apharyngeate, (tremtodo flia Shistosomatidae y Spirorchiidae),
d) cercaria Lophocercous- apharyngeate, (tremtodo flia Sanguinicolidae), e) cercaria Caratinguensis, (tremtodo
flia Strigeidae), f) cercaria Strigea, (tremtodo flia Strigeidae y Diplostomatidae), g) cercaria Vivax, (tremtodo flia.
Cyathocotylidae), h) cercaria Amplicoecata, (tremtodo flia. Shistosomatidae), i) cercaria Furcocystocercous, (tremtodo
flia. Azygiidae y Bivesiculidae, j) cercaria Bucephaloid (Gasterostome), (tremtodo flia. Bucephalidae), k) cercaria de
Fasciola heptica, (tremtodo flia. Fasciolidae), l) cercaria Echinostome, (tremtodo flia. Echinostomatidae), m) cercaria
Gymnocephalous, (tremtodo flia. Fasciolidae), n) cercaria Minensis (Xiphidiocercaria), o) cercaria Amphistome
(tremtodo flia. Paramphistomatidae), p) cercaria Monostome, (tremtodo flia. Paramphistomatidae), q) cercaria
Cystocercous, r) cercaria Santense (Xiphidiocercaria), s) cercaria Macrogranulosa (tremtodo flia. Echinostomatidae) t)
cercaria Hemiura. Fuente: (Pereira de Souza y Lima, 1997) con adaptaciones (Matinella, 2013).
Anexo 2
Indicadores malacolgicos
Abreviaturas usadas
I.I.C.A.= ndice de infestacin a cursos de agua
I.If.C.A.= ndice de infeccin a cursos de agua
I.C.P. = ndice de caracoles positivos
D.P.C. = Densidad poblacional de caracoles
I.C.A.T.M.= ndice de cursos o cuerpos de agua tratados con molusquicidas.
I.I.Hi.= ndice de infeccin del hospedador intermediario
F-LM2-01
RECOLECCIN DE MOLUSCOS
______________________________________________ ________________________________________________
Inspector de la Demarcacin, o Utocssa Recolectado por:
LABORATORIO MALACOLGICO
LOTE N _________
ESPECIES CLASIFICADAS
OBSERVACIONES_________________________________________________________________________________________________
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____________________________________________ ______________________________________________
Recibido por: Examinado por:
Formato elaborado por: Matinella, (2001)
Anexo 5