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TESIS
Hidrobiologa y Pesquera
AUTOR
Lima-Per
2012
UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS
(Universidad del Per, DECANA DE AMRICA)
Presentado por:
Asesores:
Lima - Per
2012
A mis padres Willy y Gladys, no hay palabras que
iii
AGRADECIMIENTOS
A mi asesor Mag. Mauro Mariano Astocondor por su gran apoyo desde que era
estudiante de pre-grado y ahora como egresada.
A la Ing. Lili Carrera Santos por la oportunidad brindada para realizar mi tesis como
parte del Proyecto FINCyT Produccin de semilla del lenguado: I Mejoramiento de la
calidad y cantidad de desoves y por su amistad, consejos y apoyo.
A los integrantes del mencionado proyecto, en especial al Mag. Carlos Espinoza Pardo
por la colaboracin brindada en la revisin de este trabajo.
A los integrantes del C.I.A. Von Humboldt en especial al Dr. Enrique Mateo del
laboratorio de Patobiologa Acutica por permitirme el uso de sus equipos y a las
integrantes de dicho laboratorio por brindarme un tiempo de utilizacin. Adems a los
integrantes del laboratorio de Cultivo de Peces y Biotecnologa Acutica por toda su
colaboracin y amistad.
Al Instituto del Mar del Per (IMARPE) por ser el primer lugar donde me desarrolle
profesionalmente y por brindarme la oportunidad de continuar hacindolo.
A mis amigos tesistas, Ana Cure y Jacinto Paredes, con los cuales pase muy buenos
momentos aprendiendo y desarrollando nuestros trabajos.
Y gracias a todas las personas que me quieren y que de alguna manera me apoyaron
en este camino, sobre todo a mis amigos de la universidad y a ti mi corazn Edgar.
iv
NDICE GENERAL
v
TOTALES
2.10 TALLA DE PRIMERA MADUREZ GONADAL 20
2.11 EVALUACIN DE OTROS PARMETROS
INDICADORES DEL DESARROLLO GONADAL 20
2.12 ANLISIS ESTADSTICO 21
V. RESULTADOS 23
1. NDICES MORFOMTRICOS 23
2. MORFOLOGIA DEL SISTEMA REPRODUCTOR
FEMENINO 23
2.1 MORFOLOGA MACROSCPICA 23
2.2 MORFOLOGA MICROSCPICA 25
3. MORFOLOGIA DEL SISTEMA REPRODUCTOR
MASCULINO 26
3.1 MORFOLOGA MACROSCPICA 26
3.2 MORFOLOGA MICROSCPICA 27
4. CARACTERIZACION DEL DESARROLLO DE LOS
GAMETOS 31
4.1 DESARROLLO OVOCITARIO 31
4.2 FOLCULO POST-OVULATORIO 37
4.3 ATRESIA 38
4.4 DESARROLLO ESPERMATOGNICO 39
5. HOMOGENEIDAD DEL OVARIO 43
6. CARACTERIZACIN MORFOMTRICA DE LAS
POBLACIONES OVOCITARIAS 44
7. ESCALAS DE MADUREZ GONADAL 45
7.1 ESCALA MICROSCPICA DE MADUREZ GONADAL 45
7.1.1 Hembras 45
7.1.2 Machos 48
7.2 ESCALA MACROSCPICA DE MADUREZ 53
GONADAL 53
7.2.1 Hembras 57
7.2.2 Machos 63
8. CICLO DE MADURACIN GONADAL
9. PROPORCIN SEXUAL POR GRUPOS DE 64
LONGITUDES TOTALES 65
10. TALLA DE PRIMERA MADUREZ GONADAL
66
vi
11. DISTRIBUCIN ESTACIONAL DE LOS DIFERENTES
ESTADIOS DE MADUREZ GONADAL DURANTE EL
ESTUDIO
12. EVALUACIN DE OTROS PARMETROS
INDICADORES DEL DESARROLLO GONADAL 68
12.1 NDICE GONADOSOMTICO 68
12.2 NDICE HEPATOSOMTICO 70
12.3 FACTOR DE CONDICIN 70
13. RELACIN LONGITUD TOTAL PESO TOTAL 71
14. PRESENCIA DEL PARSITO NEMATODO Philometra
sp. EN LOS OVARIOS Y TESTCULOS 72
15. ESTADIO DE MADUREZ GONADAL DE PECES
MANTENIDOS EN CAUTIVERIO 76
VI. DISCUSIN 79
VII. CONCLUSIONES 93
VIII. RECOMENDACIONES 94
IX. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS 95
vii
INDICE DE TABLAS
viii
INDICE DE FIGURAS
ix
Figura 15: Ovocito inmaduro (OI) de Paralichthys adspersus lenguado. Escala:
100 m. Aumento: 400x. N: ncleo, n: nucleolo.
Figura 16: Ovocito pre-vitelognico (OPV) de Paralichthys adspersus lenguado.
Escala: 100 m. Aumento: 400x. GC: grnulo cortical, N: ncleo, n:
nucleolo.
Figura 17: Ovocito vitelognico (OV) de Paralichthys adspersus lenguado. Escala:
100 m. Aumento: 100x. N: ncleo, n: nucleolo, OM: ovocito maduro.
Figura 18: a) Teca, granulosa y zona radiata de ovocito maduro. Escala: 100 m.
Aumento: 400x y b) Ovocito maduro (OM) de Paralichthys adspersus
lenguado. Escala: 100 m. Aumento: 100x. GC: grnulo cortical, GV:
grnulo de vitelo, N: ncleo.
Figura 19: Ovocito hidratado (OH) de Paralichthys adspersus lenguado. Escala:
100 m. Aumento: 100x.
Figura 20: Folculo post-ovulatorio (FPO) a) FASE 0, b) FPO FASE 1 y c) FPO
FASE 2 de Paralichthys adspersus lenguado. Escala: 100 m.
Aumento: 400x. L: lumen.
Figura 21: a) Ovocitos en atresia (A) y b) Ovocitos en A en fase avanzada de
Paralichthys adspersus lenguado. Escala: 100 m. Aumento: 100x.
Figura 22: Espermatogonia (SP) y espermatocito (SPC) de Paralichthys adspersus
lenguado. Escala: 10 m. Aumento: 600x.
Figura 23: Espermtidas (SPD) y espermatozoides (SPZ) de Paralichthys
adspersus lenguado. Escala: 10 m. Aumento: 600x. E: Estroma,
SPC: espermatocito.
Figura 24: Espermatozoide (SPZ) de Paralichthys adspersus lenguado. Escala:
10 m. Aumento: 600x. E: estroma.
Figura 25: Presencia en porcentaje de los tipos de ovocitos y folculos post-
ovulatorios en cada ovario de Paralichthys adspersus lenguado. F0:
folculo post-ovulatorio FASE 0, F0+: folculo post-ovulatorio FASE 1 y/o
FASE 2, OH: ovocito hidratado, OM: ovocito maduro.
Figura 26: Presencia en porcentaje de los tipos de ovocitos y folculos post-
ovulatorios en cada parte del ovario de Paralichthys adspersus
lenguado. F0: folculo post-ovulatorio FASE 0, F0+: folculo post-
ovulatorio FASE 1 y/o FASE 2, OH: ovocito hidratado, OM: ovocito
maduro.
Figura 27: Caracterizacin morfomtrica de las poblaciones ovocitarias de los
estadios de madurez gonadal de Paralichthys adspersus lenguado.
x
Figura 28: a) Estadio inmaduro (Estadio 0), b) Estadio en maduracin (Estadio II),
c) ,d) Estadio maduro (Estadio III), e) Estadio desovante (Estadio IV)
con presencia de ovocitos hidratados, f) Estadio desovante (Estadio IV)
con presencia de folculos post-ovulatorios, g) Estadio recuperacin
(Estadio V) y h) Estadio inactivo (Estadio I) de hembra de Paralichthys
adspersus lenguado. Escala: 100 m. Aumento: 40x. A: atresia, E:
estroma, FPO: folculo post-ovulatorio, L: lamelas, OH: ovocito
hidratado, OI: ovocito inmaduro, OM: ovocito maduro, OPV: ovocito pre-
vitelognico, OV: ovocito vitelognico, P: pared, VS: vaso sanguneo.
Figura 29: a) Estadio inmaduro (Estadio 0). Escala: 100 m. Aumento: 40x, b)
Estadio en maduracin (Estadio II). Escala: 100 m. Aumento: 40x, c)
Estadio maduro (Estadio III). Escala: 100 m. Aumento: 40x, d) Zona de
crecimiento del estadio expulsante (estadio IV). Escala: 100 m.
Aumento: 100x, e) Zona de Coleccin del estadio expulsante. Escala:
100 m. Aumento: 100x, f) Zona de Crecimiento del estadio post-
expulsante (estadio V). Escala: 100 m. Aumento: 40x, g) Zona de
Coleccin del estadio post-expulsante. Escala: 100 m. Aumento: 40x y
h) Estadio inactivo (estadio I) de macho de Paralichthys adspersus
lenguado. Escala: 100 m. Aumento: 40x. E: estroma, ZC: zona de
crecimiento, ZCL: zona de coleccin.
Figura 30: a) Estadio inmaduro (Estadio 0), b) Estadio en maduracin (Estadio II),
c) Estadio maduro (Estadio III), d) Estadio desovante (Estadio IV) con
presencia de ovocitos hidratados, e) Estadio desovante (Estadio IV) con
presencia de folculos post-ovulatorios, f) Estadio recuperacin (Estadio
V) y g) Estadio inactivo (Estadio I) de hembra de Paralichthys adspersus
lenguado. Escala: 1 cm. A: orientacin anterior, O: orientacin del
oviducto, P: orientacin posterior.
Figura 31: a) Estadio inmaduro (Estadio 0), b) Estadio en maduracin (Estadio II),
c) Estadio maduro (Estadio III), d) Estadio expulsante (Estadio IV), e)
Estadio post-expulsante (Estadio V) y f) Estadio inactivo (estadio I) de
macho de Paralichthys adspersus lenguado. Escala: 1 cm. A:
orientacin anterior, DE: orientacin del ducto espermtico, P:
orientacin posterior.
Figura 32: Ciclo de maduracin gonadal de hembras de Paralichthys adspersus
lenguado.
Figura 33: Ciclo de maduracin gonadal de machos de Paralichthys adspersus
lenguado.
xi
Figura 34: Proporcin sexual por grupos de longitudes totales de Paralichthys
adspersus lenguado. Regin sombreada en gris: crecimiento favorable
de la proporcin de hembras.
Figura 35: Talla de primera madurez gonadal de hembras de Paralichthys
adspersus lenguado.
Figura 36: Nmero de hembras de Paralichthys adspersus lenguado por estadio
de madurez gonadal segn las estaciones. 0: inmaduro, II: en
maduracin, III: maduro, IV: desovante, V: recuperacin, I: inactivo.
Figura 37: Nmero de machos de Paralichthys adspersus lenguado por estadio
de madurez gonadal segn las estaciones. 0: inmaduro, II: en
maduracin, III: maduro, IV: desovante, V: recuperacin.
Figura 38: ndice gonadosomtico (IGS) promedio para cada estadio de madurez
gonadal de hembras (0) y machos (1) de Paralichthys adspersus
lenguado. Las barras indican el error estndar y las letras las
diferencias estadsticas. 0: inmaduro, II: en maduracin, III: maduro, IV:
desovante o expulsante, V: recuperacin o post-expulsante, I: inactivo.
Figura 39: ndice hepatosomtico (IHS) promedio para cada estadio de madurez
gonadal de hembras de Paralichthys adspersus lenguado. Las barras
indican el error estndar y las letras las diferencias estadsticas. 0:
inmaduro, II: en maduracin, III: maduro, IV: desovante, V:
recuperacin, I: inactivo.
Figura 40: Relacin longitud total peso total de hembras y machos de
Paralichthys adspersus lenguado.
Figura 41: Prevalencia de Philometra sp. en hembras, machos y total de peces
analizados de Paralichthys adspersus lenguado.
Figura 42: Observacin macroscpica de Philometra sp. en a) Ovarios y b)
Testculos de Paralichthys adspersus lenguado. A: orientacin anterior,
DE: orientacin del ducto espermtico, O: orientacin del oviducto, P:
orientacin posterior.
Figura 43: Observacin microscpica de Philometra sp. en a) Ovarios maduros
(Estadio III) y b) Testculos en maduracin (Estadio II) de Paralichthys
adspersus lenguado. Escala: 100 m. Aumento: 40x. Ph: Philometra
sp.
Figura 44: Prevalencia de Philometra sp. para cada estadio de madurez gonadal
en hembras de Paralichthys adspersus lenguado. 0: inmaduro, II: en
maduracin, III: maduro, IV: desovante, V: recuperacin, I: inactivo.
xii
Figura 45: Prevalencia de Philometra sp. para cada estadio de madurez gonadal
en machos de Paralichthys adspersus lenguado. 0: inmaduro, II: en
maduracin, III: maduro, IV: expulsante, V: post-expulsante.
Figura 46: Estadio inactivo (Estadio I) de hembra de Paralichthys adspersus
lenguado mantenida en cautiverio. Escala: 100 m. Aumento: 40x. E:
estroma, P: pared, Ph: Philometra sp.
Figura 47: Estadio expulsante (Estadio IV) de macho de Paralichthys adspersus
lenguado mantenido en cautiverio. Escala: 100 m. Aumento: 40x. E:
estroma, ZC: zona de crecimiento, ZCL: zona de coleccin.
Figura 48: Nmero de peces por estadio de madurez gonadal segn sexos de
Paralichthys adspersus lenguado mantenidos en cautiverio de octubre
del 2009 hasta la fecha de su sacrificio (entre noviembre del 2009 y
marzo del 2011).
Figura 49: Prevalencia de Philometra sp. en hembras, machos y total de peces
analizados de Paralichthys adspersus lenguado mantenidos en
cautiverio de octubre del 2009 hasta la fecha de su sacrificio (entre
noviembre del 2009 y marzo del 2011).
xiii
RESUMEN
Paralichthys adspersus lenguado, especie endmica de las costas de Per y Chile,
es muy valorada comercialmente y los estudios demuestran la factibilidad de su
cultivo. En tal sentido, la clasificacin del desarrollo gonadal en escalas de madurez,
viene a ser una fuente de informacin para conocer el ciclo reproductivo de esta
especie y necesario para el manejo de los recursos en el medio natural as como en
cautiverio. Los 162 individuos utilizados en la presente tesis, fueron adquiridos de
capturas realizadas en la costa central del Per. Los peces se evaluaron biomtrica y
biolgicamente. Se analizaron y procesaron histolgicamente 96 ovarios y 66
testculos. Se realiz la caracterizacin del desarrollo de los gametos y de las gnadas
microscpica y macroscpicamente; adems se evalu la homogeneidad del ovario, la
caracterizacin morfomtrica de las poblaciones ovocitarias en cada estadio de
madurez gonadal, la proporcin sexual por grupos de longitudes totales, la talla de
primera madurez gonadal y otros parmetros indicadores del desarrollo gonadal. Del
grupo evaluado, las hembras representaron el 59,3% mientras que los machos el
40,7%. La caracterizacin de los ovocitos permiti clasificarlos en: Inmaduro, Pre
vitelognicos, Vitelognicos, Maduro e Hidratado y de las clulas espermatognicas
en: Espermatogonia, Espermatocito, Espermtida y Espermatozoide. Adems, se
observ Folculos Post-ovulatorios (FPO) y Atresia ovocitaria. Se tuvo en cuenta en
este estudio, en el caso de las hembras, la no existencia de diferencias significativas
en el desarrollo ovocitario en cualquier parte de la gnada; y en el caso de los machos,
la diferenciacin de una Zona de Crecimiento (ZC) y de Coleccin (ZCL). Se clasific
microscpicamente y macroscpicamente a los ovarios en los siguientes estadios de
madurez gonadal: Inmaduro, En maduracin, Maduro, Desovante, Recuperacin e
Inactivo; y a los testculos en: Inmaduro, En maduracin, Maduro, Expulsante, Post-
expulsante e Inactivo. En la proporcin sexual de los peces se observ un crecimiento
favorable de las hembras hacia mayores longitudes. La mayor parte de las capturas
estuvo representada por peces maduros, desovantes o expulsantes en los meses que
comprenden las estaciones de primavera y verano. El IGS e IHS son buenos
indicadores del desarrollo gonadal en el caso de las hembras; contrariamente, el K no
es un buen indicador en ninguno de los dos sexos. La prevalencia del parsito
nematodo Philometra sp. fue de 19,14% y mayor en hembras, no se observ
anormalidades producidas por la infeccin ni efectos en la maduracin gonadal. La
comparacin de las caractersticas macro y microscpicas de las gnadas de peces
sometidos al cautiverio no mostraron ninguna diferencia con respecto a las gnadas
de los peces silvestres.
xiv
PALABRAS CLAVES: Paralichthys adspersus, lenguado, ovocitos, clulas
espermatognicas, madurez gonadal.
ABSTRACT
Paralichthys adspersus "fine flounder is endemic specie from the coasts of Peru and
Chile. This specie is valuable and highly commercially and studies show the feasibility
of its culture. The gonadal development classification in maturity scales, is a source of
information to understand the specie reproductive cycle, necessary for resource
management in wildness and in captivity. In this study 162 fishes caught from the
central coast of Peru were used. The fishes were biometric and biologically evaluated.
Ninety six (96) ovaries and sixty six (66) testes, were analyzed and processed
histologically.
xv
I. INTRODUCCIN
excelente calidad de su carne, alto valor nutritivo y a los buenos precios que alcanza
cautiverio (Silva y Flores, 1989; Miranda y Rojas, 1993; Silva y Flores, 1994;
Chinchayn et al., 1997; Cisneros et al., 1999; Silva, 1999; Silva, 2001; Silva et al.,
2001; Carrera, 2006; Carrera y Santos, 2007; Piaget et al., 2007; Silva y Oliva, 2010;
Carrera et al., en prensa). Sin embargo, estudios sobre aspectos reproductivos de esta
gnadas, son de gran importancia debido a que nos dan un amplio panorama de la
as como en cautiverio.
desde Paita en el Per hasta la localidad de Lota e Islas Juan Fernndez en Chile
1
(Acua y Cid, 1995; Chirichigno, 1998). Es un pez bentnico que presenta
aplanamiento del lado derecho de su cuerpo con la previa migracin del ojo derecho
hacia el lado izquierdo en las primeras etapas de vida. Esta metamorfosis, permite
Castro, 2002).
desembarques generalmente involucran otras especies; sin embargo, los datos nos
principales desembarques por aos, existiendo incrementos desde 1950 hasta 1995 y
Castaeda, 1999).
Del mismo modo, se confirma que periodos posteriores a El Nio, tienen influencia
hace que sea depredada por la pesca artesanal (Samam y Castaeda, 1999).
3500
3000
Desembarque (TM)
2500
2000
1500
1000
500
0
1950 1955 1960 1965 1970 1975 1980 1985 1990 1995 2000 2005 2010
Ao
2
Las caractersticas reproductivas varan de una especie a otra, por eso es necesario
establecer el desarrollo gonadal para cada especie de pez (Ferreira, 1986 en Bazzoli,
(Tresierra et al., 2002); sin embargo, este tipo de aproximaciones son consideradas
Por lo tanto, la presente tesis tiene por objetivo principal establecer la escala de
3
II. MARCO TERICO
1. POSICIN TAXONMICA
- Reino: Animalia
- Phylum: Chordata
- Clase: Actinopterygii
- Orden: Pleuronectiformes
- Suborden: Pleuronectoidei
- Familia: Paralichthyidae
- Gnero: Paralichthys
2. DISTRIBUCIN Y HBITAT
En el pacfico sudeste su distribucin es desde Paita (Per) hasta Lota e Islas Juan
3. CARACTERSTICAS MORFOLGICAS
Kong y Castro (2002) nos describen a P. adspersus como de cuerpo es alto y elptico,
Lnea lateral fuertemente curvada en su porcin inicial, se contina casi en lnea recta
hacia la regin posterior. Cabeza grande y con el perfil casi recto; hocico un poco ms
4
grande que el dimetro del ojo. Boca grande y oblicua. Branquiespinas cortas. Las
narinas ubicadas en la lado ocular son de tamao pequeo y situadas una al lado de la
otra cercanas al perfil de la cabeza, similar a las narinas del lado ciego. Aleta dorsal
alargada sin espinas, se inicia por encima o a nivel de la mitad del ojo; aletas
sobre el lado ciego; la base de las aletas plvicas es corta y casi simtrica.
4. ALIMENTACIN
Es una especie depredadora cuyo principal alimento son los peces costeros que
estaciones (Kong et al., 1995). Por ejemplo Talledo (1985) en Ilo - Per reporta como
principal presa a Scartichthys gigas pez borracho; Kong et al. (1995), en el norte de
5. CARACTERSTICAS REPRODUCTIVAS
longitudes que los machos; adems, se observa en las hembras, el poro genital detrs
del ano en el lado ciego a diferencia de los machos que presentan un poro urogenital
en el lado ocular, lo que permitira diferenciarlos por sexos (ngeles y Mendo, 2005).
43,1 cm para machos. Sus ovocitos maduros presentan un dimetro entre 665 y 805
5
6. SISTEMA REPRODUCTOR DE HEMBRAS DE TELESTEOS
Est constituido por ovogonias, ovocitos, clulas foliculares (granulosa y teca) que
Tres tipos de ovarios han sido clasificados de acuerdo al patrn del desarrollo de los
desarrollo, este tipo se produce en las especies que desovan muchas veces durante
Ovognesis
En esta fase las ovogonias entran en mitosis sufriendo varias divisiones celulares y se
momento, cuando los ovocitos, a diferencia de los gametos masculinos, entran en una
fase de crecimiento, que vara segn las especies, pero que en general se debe a la
6
maduracin. Esta fase viene acompaada de diferentes cambios en el ncleo y el
citoplasma del ovocito. El ncleo del ovocito (vescula germinal) comienza una
migracin desde una posicin central hasta su periferia en el polo animal donde se
sita el micropilo. Una vez completada la migracin hacia el polo animal, la membrana
del ncleo se rompe y el nucleoplasma no puede ser distinguido del citoplasma. Los
momento de la fertilizacin.
Cuando los ovocitos son ovulados, en muchos telesteos marinos, hay un aumento
pronunciado en los peces que desovan huevos pelgicos, los cuales flotan en el agua
(cuerpo lteo). Los nuevos folculos son fcilmente identificables, pero degeneran
rpidamente.
La poca del ao en que se produce esos eventos y la duracin de cada una de estas
Atresia
desarrollo son reabsorbidos en el ovario. Pueden observarse en todos los estadios del
el periodo post-desove. La atresia se produce sobre los ovocitos que tras la puesta no
han ovulado, pero puede afectar a los que estn en desarrollo. Se divide en cuatro
etapas (Hunter y Macewicz, 1985): alfa (), beta (), gamma () y delta (). El trmino
ovocito atrsico es reservado solo para los que se encuentran en la etapa , que
7
las etapas subsecuentes son pasos en la reabsorcin del folculo remanente
por un septo o independientes entre ellos, unidos a la pared dorsal del cuerpo. Un
separados entre ellos por una membrana basal. En el compartimento germinal, las
pueden establecer dos tipos segn la organizacin del tejido germinal: en telesteos
tipo lobular se compone de numerosos lbulos separados entre ellos por una fina capa
de tejido conectivo. Durante la maduracin, todas las clulas germinales del cisto son
8
Espermatognesis
llegar a espermatozoides.
Durante la espermatognesis, las clulas germinales masculinas pasan por tres fases
formar espermatocitos primarios), meiosis (la primera divisin meitica produce dos
huevo directamente por una abertura, el micropilo, por la cual penetra un nico
citoplasmticas.
1982).
9
El conocimiento de la actividad reproductiva en los peces, constituye uno de los
aspectos de mayor importancia biolgica, debido a que es una de las columnas del
escalas empricas, las que han sido elaboradas en base a las caractersticas
morfolgicas externas de las gnadas, tales como: apariencia general, tamao relativo
madurez, las que pueden aplicarse con ligeras modificaciones en diferentes especies.
Tambin existen varias escalas de madurez gonadal que han sido relacionadas con el
ciclo reproductivo particular de cada especie; es decir estn referidas a aquellas que
poseen una bien definida y corta estacin de desove, as como a peces que desovan
Los estudios histolgicos son actualmente una opcin valiosa para validar las escalas
de madurez gonadal, as como para observar los cambios estructurales de los ovarios
y de los testculos.
10
menudo confusa debido a las diferencias terminolgicas entre los autores. En este tipo
principales problemas.
III. OBJETIVOS
Objetivo general
Objetivos especficos
11
IV. MATERIALES Y MTODOS
1. MATERIAL BIOLGICO
como red cortina, trasmallo y en su gran mayora trinche y atarraya (Figura 3).
12
Figura 3: Captura de ejemplares de Paralichthys adspersus lenguado utilizando atarraya.
2. MTODOS
Este estudio fue realizado en las instalaciones del laboratorio de Biologa Reproductiva
electrnica de marca METTLER TOLEDO (capacidad: 3 kg; precisin: 0,1 g). Luego
Las gnadas de machos y hembras fueron colectadas y fijadas con formol bufferado al
13
2.3 PROCESAMIENTO HISTOLGICO DE LAS GNADAS
de aluminio, con su respectiva etiqueta de datos, dentro de una rejilla utilizada por el
Deshidratacin
crecientes de alcohol durante una hora (Figura 5). La utilizacin del procesador
Aclaracin
durante un tiempo total de 6 min, para las hembras y 12 min para los machos. Si el
14
Imbibicin en parafina
Seccionamiento
LEICA. Previamente las muestras de tejido gonadal en los bloques se enfriaron para
un mejor seccionamiento.
Coloracin
Montaje final
El montaje de las lminas fue con gotas de la solucin entellan y colocando encima
15
Figura 4: Flujograma de la tcnica de infiltracin en parafina.
16
1: FORMOL BUFFERADO
10%
2: AGUA
10 min
3: ALCOHOL 70%
1 hora
4: ALCOHOL 80%
1 hora
5: ALCOHOL 90%
1 hora
DESHIDRATACIN
6: ALCOHOL 90%
1 hora
7: ALCOHOL 100%
1 hora
8: ALCOHOL 100%
1 hora
9: XILOL 1
ovarios 3 min, testculos 6 min
ACLARACIN
10: XILOL 2
ovarios 3 min, testculos 6 min
11: PARAFINA 1
1 hora
INFILTRACIN
12: PARAFINA 2
1 hora
17
2.4 CARACTERIZACION DEL DESARROLLO DE LOS GAMETOS
Caracterizacin de ovocitos
Tamao: Dimetro promedio de dos ejes perpendiculares de 100 ovocitos de cada tipo
de ovocito (West, 1990). Solo los ovocitos que sean seccionados a travs del ncleo y
microscopio ptico NIKON Eclipse 90i con una cmara digital y el programa de
hidratados y atresia, por las irregularidades que muestran los ovocitos producto del
procesamiento histolgico.
Morfolgicas y cromticas.
18
Localizacin en los lbulos seminferos.
ptico NIKON Eclipse 90i con una cmara digital incorporada y el programa de
gonadal entre las partes anterior, media y posterior de los ovarios derecho e izquierdo.
(F0= FPO FASE 0, F0+=FPO FASE 1 y/o FASE 2), fueron comparadas usando un test
de chi cuadrado.
19
eferentes y caractersticas particulares del estroma; evaluados en 1 a 4 campos
visuales (40x, 100x, 200x, 600x) del corte histolgico de los testculos.
intervalo de longitudes totales de 5 cm. Se utiliz una media mvil para visualizar la
decir con actividad madurante (Estadio III, Estadio IV y Estadio V), para cada longitud.
Los puntos reales fueron ajustados con el Mtodo de Ajuste de Curva Logstica a
GONADAL
20
La estimacin del IGS fue calculado a partir de la siguiente frmula:
para las estaciones del ao y la distribucin porcentual del dimetro de los ovocitos
Las variables de los parmetros IGS, IHS, K son presentadas como promedios con su
desviacin estndar (DS). Los cambios del IGS e IHS en los diferentes estadios de
21
madurez gonadal fueron analizados usando el anlisis de varianza (ANDEVA) y la
Cuando fueron necesarios los datos fueron logaritmizados con el fin de cumplir con la
normalidad que requieren los test paramtricos, la cual fue probada por el test de
Kolmogorov - Smirnov.
Para todas las pruebas estadsticas se utiliz un nivel de significancia de 0,05 y los
22
V. RESULTADOS
1. NDICES MORFOMTRICOS
representaron el 59,3 % mientras que los machos el 40,7 %. La longitud total de los
individuos fluctu de 19 a 55 cm; las hembras tuvieron una longitud total promedio de
34 6,5 cm, y los machos de 31 3,7 cm. El peso total de los individuos fluctu de
superior de la fila: promedio DS, Parte inferior de la fila: rango (R) y nmero de
muestra (NM).
Hembras Machos
Longitud total 34 6,5 31 3,7
(cm) R: 20 55; NM: 96 R: 19-39; NM: 66
Peso total (g) 583,8 379,87 380,1 123,55
R: 76,4 2170; NM: 95 R: 68,7 697,4; NM: 66
travs del poro genital, localizado en el lado ciego cerca a las aletas plvicas, posterior
al ano (Figura 6). Los ovarios estn localizados en la cavidad peritoneal, posteriores a
la masa visceral y ventralmente a la porcin final del rin (Figura 7 a). Para estudiar
la estructura de este rgano, se dividi en tres partes: parte anterior, media y posterior
(Figura 8). La parte anterior es aplanada y de mayor tamao, con una proyeccin
orientada hacia la porcin final del rin, de esta manera adopta una forma triangular.
Los dos ovarios se encuentran unidos en la parte anterior por tejido mesentrico. La
23
parte media y posterior adoptan una forma tubular, se extienden hacia la regin caudal
ovarios estn separados por la porcin central del esqueleto (Figura 7 b).
24
Figura 7: a) Localizacin del ovario. Escala 1 cm y b) Porcin
lenguado.
oviducto, AD: parte anterior derecha, MD: parte media derecha, PD: parte posterior
derecha, AI: parte anterior izquierda, MI: parte media izquierda, PI: parte posterior
izquierda.
fibras musculares lisas cubiertos por mesotelio. De esta pared varias prolongaciones
denominadas lamelas, que estn cubiertas en su superficie por epitelio germinal, crece
hacia el extremo contrario de la pared dejando espacios entre ellas (lumen) (Figura 9).
Las lamelas estn sostenidas por el estroma (tejido conectivo vascular, rico en tejido
elstico y muscular) que tambin se proyecta desde la pared del ovario. En el epitelio
post-ovulatorios.
25
Figura 9: Proyeccin de lamelas del ovario de Paralichthys
formar el ducto espermtico, el cual se abre al exterior a travs del poro urogenital
(Figura 10 a), localizado en el lado ocular cerca a la aleta plvica izquierda. Los
final del rin (Figura 10 b). Gran parte de los testculos estn divididos por la porcin
central del esqueleto, a excepcin de la base anterior de los testculos triangulares por
donde se encuentran unidos por tejido mesentrico. Uno de los vrtices de los
26
Figura 10: a) Poro urogenital y b) Localizacin del testculo y porcin
una de estas (Figura 11 a). A travs de estos anlisis se observ una delgada pared,
conformada por tejido conectivo y fibras musculares lisas cubierta por mesotelio. Se
27
de Crecimiento presenta los lbulos seminferos que se proyectan desde la Zona de
Coleccin y a lo largo de las paredes de estos lbulos estn localizados los cistos
(Figura 13). El examen microscpico revela que los lbulos seminferos y el sistema de
ductos estn sostenidos por el estroma (tejido conectivo vascular) que se proyecta
en tal sentido, en este trabajo se realiz slo cortes medios de esta gnada (derecha o
izquierda).
28
Figura 11: a) Partes y localizacin de los cortes de los testculos. b) Zona de Crecimiento (ZC) y de
orientacin posterior, DE: orientacin del ducto espermtico, AD: parte anterior derecha, MD: parte
media derecha, PD: parte posterior derecha, AI: parte anterior izquierda, MI: parte media izquierda,
29
Figura 12: a) Cistos de clulas espermatognicas y b) Estroma del testculo
Figura 13: Esquema del sistema reproductor masculino de Paralichthys adspersus lenguado.
30
4. CARACTERIZACIN DEL DESARROLLO DE LOS GAMETOS
En las lminas histolgicas de los ovarios, se observaron ovogonias (O) y varios tipos
Presencia de Presencia
grnulos de zona Zona
Tamao
Tipo Ncleo Nucleolo corticales o radiata o radiata
(m)
grnulos o granulosa (m)
placas de vitelo o teca
Ocupa mayor
volumen que el
citoplasma.
Ovogonia No
< 11,42 Central. Contiene
(O) distinguible
grnulos de
cromatina
dispersos
Ocupa mayor
Inmaduro 11,42 - volumen que el Destaca uno
(OI) 86,75 citoplasma. o dos
Central
Ocupa menor
Pre- Zona
64,91 - volumen que el Grnulos
vitelognico Numerosos radiata y 2,02 0,46
250,94 citoplasma. corticales
(OPV) granulosa
Central
Ocupa menor Grnulos Zona
Vitelognico 131,67 - volumen que el corticales y radiata,
Numerosos 4,04 0,93
(OV) 346,05 citoplasma. grnulos de granulosa y
Central vitelo teca
Ocupa menor
volumen que el
Grnulos Zona
citoplasma.
Maduro 279,54 - corticales y radiata,
Central y en fases Numerosos 5,58 1,13
(OM) 480,96 grnulos de granulosa y
avanzadas
vitelo teca
migracin hacia el
polo animal
Grnulos
Hidratado
Disuelto corticales y
(OH)
placas de vitelo
Ovogonias (O)
Las ovogonias tienen forma esfrica, un ncleo que ocupa un mayor volumen que el
de cromatina dispersos (Figura 14). Las ovogonias pueden medir 11,42 m o menos y
se observan en grupos.
31
Figura 14: Ovogonias (O) de Paralichthys adspersus lenguado. Escala: 10 m. Aumento: 600x.
Los ovocitos inmaduros tienen forma esfrica, un citoplasma con pequeo volumen en
ubican hacia el lado interno de la membrana nuclear (Figura 15). El tamao de los
ovocitos de este tipo vara de 11,42 a 86,75 m, con un promedio de 39,53 14,96
m.
nucleolo.
32
Ovocito Pre - Vitelognico (OPV)
ubican desde las zonas distales del citoplasma hacia la periferia del ncleo. En cuanto
a las envolturas del ovocito, se pueden observar claramente en fases avanzadas del
clulas aisladas de afinidad basfila que formarn la granulosa (Figura 16). Los
33
Figura 16: Ovocito pre-vitelognico (OPV) de Paralichthys adspersus
n: nucleolo.
esfrica, con un ncleo central y numerosos nucleolos ubicados, la gran mayora cerca
a los mrgenes internos del ncleo. La afinidad cromtica del citoplasma basfilo
observa otra capa de tejido conectivo vascular, denominada teca de afinidad basfila.
La zona radiata asume una apariencia estriada, con un grosor promedio de 4,04 0,93
m (Figura 17). Ovocitos de este tipo miden de 131,67 a 346,05 m, con un promedio
de 252,70 51,93 m.
34
Ovocito Maduro (OM)
Mantienen su forma esfrica, con un ncleo central y con numerosos nucleolos, de los
margen interno del ncleo. Los grnulos corticales, mayormente visibles alrededor del
a), sta ltima incrementa su grosor (promedio 5,58 1,13 m). El ovocito de este tipo
avanzadas hay migracin del ncleo hacia el polo animal, por esta razn se
35
Figura 18: a) Teca, granulosa y zona radiata de ovocito maduro. Escala: 100 m.
Escala: 100 m. Aumento: 100x. GC: grnulo cortical, GV: grnulo de vitelo, N:
ncleo.
Los ovocitos en este estadio se observan como una masa homognea de afinidad
Durante este estadio ocurre la disolucin del ncleo, los grnulos de vitelo comienzan
a unirse para formar placas de vitelo, los grnulos corticales visibles alrededor del
36
ncleo, se fusionan para formar las gotas de aceite que persisten hasta la fase de
Figura 19: Ovocito hidratado (OH) de Paralichthys adspersus lenguado. Escala: 100 m. Aumento: 100x.
presentan un lumen y una pared conformada por la granulosa y teca que quedan
irregular con muchos pliegues. Se presentaron tres tipos de FPO, clasificados segn
el espacio del lumen es menor al igual que el espacio entre la granulosa y teca pero
identificables; FPO FASE 2 (Figura 20 c), con una evidente disminucin del tamao,
37
lumen ausente al igual que el espacio entre la granulosa y teca, se presentan
L: lumen.
38
ovocitos vitelogenados, actan principalmente sobre el vitelo observndose una masa
Aumento: 100x.
39
Tabla 3: Tipos y caractersticas de clulas espermatognicas de
eosina.
Afinidad
Tamao cromtica
Tipo Ncleo Localizacin
(m) del
citoplasma
Posicin central, ocupa Periferia de los
Espermatogonia Levemente
5,77 1,12 mayor volumen en lbulos
(SP) basfilo
relacin al citoplasma seminferos
Posicin central, ocupa
mayor volumen en Periferia de los
Espermatocito Levemente
3,70 0,46 relacin al citoplasma y lbulos
(SPC) basfilo
contiene cromatina en seminferos
forma de grumos
Posicin central, ocupa Periferia de los
Espermtida Levemente
3,01 0,44 mayor volumen en lbulos
(SPD) basfilo
relacin al citoplasma seminferos
Lumen de los
lbulos
Espermatozoide 1,84 0,43 Conforma la cabeza del No visible
seminferos y en
(SPZ) (cabeza) espermatozoide con H-E
el sistema de
ductos eferentes
Espermatogonia (SP)
Las espermatogonias son clulas esfricas que adquieren las mayores dimensiones
Suelen ser visibles grnulos de cromatina en el ncleo. Los cistos con este tipo de
Espermatocito (SPC)
con poca afinidad cromtica (ligeramente basfilo) y un gran ncleo central con
40
Figura 22: Espermatogonia (SP) y espermatocito (SPC) de Paralichthys adspersus
Espermtidas (SPD)
41
Figura 23: Espermtidas (SPD) y espermatozoides (SPZ) de Paralichthys adspersus lenguado.
Espermatozoides (SPZ)
Los espermatozoides poseen dos partes una cabeza y una cola (Nagahama, 1983). La
42
Figura 24: Espermatozoide (SPZ) de Paralichthys adspersus lenguado.
gonadal entre los ovarios derecho e izquierdo (p>0,05) (Figura 25) y entre las partes
parte del ovario derecho o izquierdo; sin embargo, se eligi la parte anterior por
100%
90%
80%
70%
Presencia (%)
60%
F0+
50%
F0
40%
30% OH
20% OM
10%
p=0,968
0%
Derecho Izquierdo
Ovario
43
Figura 25: Presencia en porcentaje de los tipos de ovocitos y folculos post-ovulatorios
0, F0+: folculo post-ovulatorio FASE 1 y/o FASE 2, OH: ovocito hidratado, OM: ovocito
maduro.
100%
90%
80%
70%
Presencia (%)
60%
F0+
50%
F0
40%
30% OH
20% OM
10% p=0,954
0%
Anterior Medio Posterior
Parte del ovario
cada parte del ovario de Paralichthys adspersus lenguado. F0: folculo post-ovulatorio
FASE 0, F0+: folculo post-ovulatorio FASE 1 y/o FASE 2, OH: ovocito hidratado, OM:
ovocito maduro.
OVOCITARIAS
cada estadio de madurez gonadal. En los peces inmaduros (Estadio 0), se observa
(Estadio II), se observa ovocitos hasta 480 m y un porcentaje menor, que el estadio
dimetros, sin embargo aumenta en los mayores dimetros, observndose hasta 490
m. Los peces desovantes (Estadio IV) muestran un patrn similar a los maduros. El
(Estadio V) y se puede observar ovocitos hasta 170 m. Los peces en estadio inactivo
44
10%
15%
20%
25%
30%
35%
0%
5%
10%
15%
20%
25%
30%
35%
0%
5%
10%
15%
20%
25%
30%
35%
0%
5%
0 -10 0 -10 0 -10
21-30 21-30 21-30
7.1.1
41-50 41-50 41-50
61-70 61-70 61-70
81-90 81-90 81-90
101-110 101-110 101-110
121-130 121-130 121-130
141-150 141-150 141-150
161-170 161-170 161-170
181-190 181-190 181-190
Hembras
201-210 201-210 201-210
221-230 221-230 221-230
241-250 241-250 241-250
261-270 261-270 261-270
281-290 281-290 281-290
lenguado.
301-310 301-310 301-310
321-330 321-330 321-330
(Maduro)
481-490 481-490 481-490
Estadio 0
Estadio V
Estadio III
(Inmaduro)
0%
5%
10%
15%
20%
25%
30%
35%
0%
5%
0 -10
10%
15%
20%
25%
30%
35%
0%
5%
21-30 0 -10
41-50 21-30 0 -10
61-70 41-50 21-30
de
121-130
141-150 121-130 101-110
las
181-190 161-170 141-150
201-210 181-190 161-170
221-230 201-210 181-190
241-250 221-230 201-210
241-250 221-230
se observa una distribucin continua del dimetro de los ovocitos.
261-270
281-290 261-270 241-250
301-310 281-290 261-270
321-330 301-310 281-290
poblaciones
341-350
361-370 341-350 321-330
381-390 361-370 341-350
Rango de dimetro de ovocitos (m)
(Inactivo)
Estadio IV
481-490
(Desovante)
ovocitos en menores intervalos es mayor que en los otros estadios excepto que en el
estadio inmaduro y se observa ovocitos hasta 190 micrmetros. En todos los estadios
45
(Estadio I) presentan una mayor frecuencia entre 41 50 m, adems el nmero de
(En maduracin)
La caracterizacin histolgica de la gnada en general y de cada tipo de ovocito
presente.
Vasos
Pared del sanguneos Tipos de
Estadio Lamelas FPO Atresia
ovario en el ovocitos
estroma
Inmaduro O, OI y
+ * A A A
(Estadio 0) OPV
En
O, OI, OPV
maduracin ++ ** A A A
y OV
(Estadio II)
O, OI,
Maduro
++ *** A OPV, OV y A A
(Estadio III)
OM
O, OI,
Desovante
+ ** P OPV, OV, P P
(Estadio IV)
OM y OH
O, OI,
Recuperacin
+++ ** P OPV, OV y A A
(Estadio V)
OM
Inactivo O, OI y
+++ * A A A
(Estadio I) OPV
+ = Pared del ovario delgada * = Lamelas poco proyectadas
++ = Pared del ovario gruesa ** = Lamelas medianamente proyectadas
+++ = Pared del ovario muy gruesa *** = Lamelas muy proyectadas
Inmaduro (Estadio 0)
El estroma ocupa pocos espacios, las lamelas muestran claramente sus proyecciones
vitelognicos, en algunos casos, estn presentes cubriendo las lamelas (Figura 28 a).
46
ovogonias, ovocitos inmaduros y en su mayor proporcin, pre-vitelognicos y
ovocitos con ncleo migratorio. La pared se encuentra estirada por el aumento del
mayor volumen. Las lamelas no son fciles de visualizar porque se muestran bien
Recuperacin (Estadio V)
47
Inactivo (Estadio I)
7.1.2 Machos
48
Figura 28: a) Estadio inmaduro (Estadio 0), b) Estadio en maduracin (Estadio II), c), d) Estadio
maduro (Estadio III), e) Estadio desovante (Estadio IV) con presencia de ovocitos hidratados, f)
Estadio desovante (Estadio IV) con presencia de folculos post-ovulatorios, g) Estadio recuperacin
49
Escala: 100 m. Aumento: 40x. A: atresia, E: estroma, FPO: folculo post-ovulatorio, L: lamelas, OH:
ovocito hidratado, OI: ovocito inmaduro, OM: ovocito maduro, OPV: ovocito pre-vitelognico, OV:
Inmaduro (Estadio 0)
50
Expulsante (Estadio IV)
Post-Expulsante (Estadio V)
Inactivo (Estadio I)
cautiverio.
51
Figura 29: a) Estadio inmaduro (Estadio 0). Escala: 100 m. Aumento: 40x, b) Estadio en maduracin
(Estadio II). Escala: 100 m. Aumento: 40x, c) Estadio maduro (Estadio III). Escala: 100 m. Aumento:
40x, d) Zona de crecimiento del estadio expulsante (estadio IV). Escala: 100 m. Aumento: 100x, e) Zona
de Coleccin del estadio expulsante. Escala: 100 m. Aumento: 100x, f) Zona de Crecimiento del estadio
52
post-expulsante (estadio V). Escala: 100 m. Aumento: 40x, g) Zona de Coleccin del estadio post-
expulsante. Escala: 100 m. Aumento: 40x y h) Estadio inactivo (estadio I) de macho de Paralichthys
adspersus lenguado. Escala: 100 m. Aumento: 40x. E: estroma, ZC: zona de crecimiento, ZCL: zona
de coleccin.
7.2.1 Hembras
A partir de las caractersticas macroscpicas del ovario, las cuales fueron validadas
Pared
Tamao Color del Consistencia Vascularizacin
Estadio del Ovocitos
del ovario ovario del ovario del ovario
ovario
Rosado a
Inmaduro
+ naranja * Delgada A
(Estadio 0)
claro
En
maduracin ++ Naranja * Delgada - P
(Estadio II)
Maduro
++ Naranja Delgada -- P
(Estadio III)
Desovante
con OH +++ Naranja Delgada -- P
(Estadio IV)
Desovante
con FPO +++ Naranja *** Delgada --- P
(Estadio IV)
Recuperacin Naranja
++ ** Gruesa - P
(Estadio V) claro
Inactivo Naranja
+ * Gruesa A
(Estadio I) claro
+ = Ovarios pequeos * = Ovarios poco flcidos - = Ovarios con leve
vascularizacin
++ = Ovarios medianos ** = Ovarios medianamente flcidos - - = O. con vascularizacin media
+++ = Ovarios grandes *** = Ovarios muy flcidos - - - = O. con mayor vascularizacin
Inmaduro (Estadio 0)
53
simple vista (Figura 30 a). Los ovarios en este estadio pueden pesar de 6,5 g a menos
El tamao del ovario se incrementa con respecto al estadio anterior y el color se torna
(ovocitos vitelognicos) a simple vista. Las partes media y posterior no son muy
grandes (Figura 30 b). Los ovarios pesan de 7,9 a 14,5 g. Los individuos en este
abdominal extendindose hasta casi dos tercios del cuerpo. La coloracin es naranja.
(ovocitos maduros) son visibles a simple vista (Figura 30 c). Los pesos presentados
ms.
post-ovulatorios:
54
los ovocitos blanquecinos. A pequea presin la pared puede romperse y los
(Figura 30 e).
El peso en este tipo de ovario vari de 8,5 a 44,9 g y corresponde a individuos que
miden 32 cm o ms.
Recuperacin (Estadio V)
Se observa una reduccin del tamao de los ovarios, al igual que la intensidad de la
por las irregularidades presentadas en sus bordes (Figura 30 f). Estos ovarios pesan
Inactivo (Estadio I)
ms. Los ovarios quedan listos para retornar a una nueva maduracin.
55
56
Figura 30: a) Estadio inmaduro (Estadio 0), b) Estadio en maduracin (Estadio II), c) Estadio
maduro (Estadio III), d) Estadio desovante (Estadio IV) con presencia de ovocitos
orientacin posterior.
7.2.2 Machos
ausente, P: presente.
Tamao Turgencia
Color del Consistencia Vascularizacin
Estadio del del Semen
testculo del testculo del testculo
testculo testculo
Inmaduro Rosado a
+ A
(Estadio 0) naranja claro
En Turgente
maduracin ++ Crema en la parte P
(Estadio II) central
Fluye ante
Maduro
+++ Crema * Turgente P la presin
(Estadio III)
(stripping)
Menor
Expulsante presin
+++ Crema *** Turgente P
(Estadio IV) provoca
liberacin
Post-
Crema a
expulsante ++ * P
naranja claro
(Estadio V)
Inactivo
+ Naranja claro P
(Estadio I)
+ = Testculo pequeo * = Testculo poco flcido
++ = Testculo mediano ** = Testculo medianamente
flcido
+++ = Testculo grande *** = Testculo muy flcido
Inmaduro (Estadio 0)
Testculos pequeos, de color rosado a naranja claro y son firmes. No hay presencia
57
este tipo de testculo son de 0,4 g a menos, correspondientes a individuos que miden
21 cm o menos.
Coleccin (Figura 31 b). Los testculos pesaron de 1,3 a 6,6 g, cuyas longitudes
Producto de la madurez los testculos ocupan una gran parte de la cavidad abdominal,
testculos una forma cnica. La coloracin se torna blanco cremoso. Presenta flacidez.
Tiene un desarrollo vascular mayor que los estadios anteriores. El aspecto turgente de
este estadio es igualmente notorio. Frente a la presin abdominal liberan con facilidad
el semen (Figura 31 c). Los pesos presentados por este tipo de testculo variaron de
cualquier movimiento fluye con facilidad (Figura 31 d). Los pesos variaron de 1,7 y 9,5
58
Post-expulsante (Estadio V)
relacin al estadio anterior (Figura 31 e). Estos testculos pesaron de 2,3 a 4,8 g y
Inactivo (Estadio I)
En este estadio el tamao del testculo puede alcanzar al testculo en estadio II, el
vascularizacin superficial (Figura 31 f). Los pesos presentados por este tipo de
59
Figura 31: a) Estadio inmaduro (Estadio 0), b) Estadio en maduracin (Estadio II), c) Estadio
maduro (Estadio III), d) Estadio expulsante (Estadio IV), e) Estadio post-expulsante (Estadio
posterior.
60
Tabla 8: Estadios de madurez gonadal de hembras del lenguado Paralichthys adspersus. A: Atresia, FPO: folculo post-ovulatorio, O: ovogonia, OH: ovocito hidratado,
OI: ovocito inmaduro, OM: ovocito maduro, OPV: ovocito pre-vitelognico, OV: ovocito vitelognico.
ESTADIO DE
MADUREZ MICROSCPICAMENTE MACROSCPICAMENTE
GONADAL
Ovarios pequeos, de coloracin rosada a naranja claro. Pueden
El estroma ocupa pocos espacios, las lamelas muestran claramente
ser firmes o ligeramente flcidos. La pared es delgada y no hay
INMADURO sus proyecciones, observndose un gran lumen. Presentes O, OI y
presencia de vascularizacin superficial. No se visualiza ovocitos a
OPV.
simple vista.
El tamao del ovario se incrementa y el color se torna ms oscuro.
La pared aumenta su grosor. El estroma ocupa mayores espacios. La ligera flacidez contina. La pared es delgada con signos de
EN MADURACIN Las lamelas alcanzan mayor proyeccin. El lumen se reduce. vascularizacin superficial. Se puede observar unos pocos ovocitos
Presentes O, OI, OPV y OV. blanquecinos a simple vista.
La pared se encuentra estirada por el aumento del volumen del Los ovarios continan incrementando su tamao, ocupando gran
ovario. El estroma ocupa mayor volumen. Las lamelas no son parte de la cavidad abdominal extendindose hasta casi dos tercios
MADURO fciles de visualizar porque se muestran bien compactas. El lumen del cuerpo. La coloracin es naranja. Firmes al tocarlos. La pared
es poco visible. Presentes O, OI, OPV, OV y OM. Adems, pueden presenta una visible vascularizacin. Ovocitos blanquecinos son
ser observados OM con ncleo migratorio. visibles a simple vista.
61
Tabla 9: Estadios de madurez gonadal de machos del lenguado Paralichthys adspersus. SP: espermatogonia, SPC: espermatocito, SPD: espermtida, SPZ:
espermatozoide, ZC: zona de crecimiento, ZCL: zona de coleccin.
ESTADIO DE
MADUREZ MICROSCPICAMENTE MACROSCPICAMENTE
GONADAL
En la ZC observamos lbulos seminferos con cistos de SP, SPC y
SPD. En la gran mayora de los lmenes de cada lbulo se Testculos pequeos, de color rosado a naranja claro y son firmes.
INMADURO
observan pocos SPZ. En la ZCL hay presencia de SPZ en los No hay presencia de vascularizacin superficial. Translcidos.
ductos eferentes en pequeas cantidades.
Los testculos adquieren un mayor tamao. El color se torna por lo
Los lbulos seminferos contienen cistos en diferentes grados de
general cremoso. Son firmes. La vascularizacin es posible
desarrollo espermatognico en sus paredes y SPZ en su lumen. La
EN MADURACIN observarla. Presentan una pequea turgencia debido al aumento de
ZCL igualmente muestra un crecimiento de la cantidad de SPZ en
la cantidad de SPZ en la ZCL
relacin al estadio anterior. El estroma alcanza un mayor volumen
El lumen de los lbulos seminferos se encuentra ocupado Producto de la madurez los testculos ocupan una gran parte de la
totalmente por SPZ dndole el aspecto de turgencia. Los cistos de cavidad abdominal, el lbulo de la parte posterior se proyecta hacia
diferentes tipos de clulas espermatognicas pueden ser la regin caudal adoptando los testculos una forma cnica. La
MADURO observados en la periferia de cada lbulo. En los ductos eferentes coloracin se torna blanco cremoso. Presenta flacidez. Tiene un
los SPZ incrementan grandemente su densidad. El estroma alcanza desarrollo vascular mayor que los estadios anteriores. El aspecto
un gran desarrollo en volumen siendo posible observar la turgente de este estadio es igualmente notorio. Frente a la presin
vascularizacin. abdominal liberan con facilidad el semen
62
8. CICLO DE MADURACIN GONADAL
Hembras
Los estadios de maduracin gonadal para hembras descritos en este trabajo siguen el
ciclo de la figura 32. Una vez que los peces inmaduros (Estadio 0) pasan al estadio en
maduracin (Estadio II) no retornan al estadio inmaduro, en tal sentido, atraviesan por
(Estadio IV) al estadio maduro (Estadio III) y viceversa; es decir, que despus de un
desove, los peces pueden presentar ovocitos maduros que desovarn en una
siguiente camada.
63
Machos
Los estadios de maduracin gonadal para machos descritos en este trabajo siguen el
ciclo de la figura 33. Una vez que los peces inmaduros (Estadio 0) pasan al estadio en
maduracin (Estadio II) no retornan al estadio inmaduro, en tal sentido, atraviesan por
expulsar espermatozoides varias veces durante una poca reproductiva, por tal motivo
observamos el ciclo interno del estadio expulsante (Estadio IV) al estadio maduro
(Estadio III) y viceversa; es decir que despus de una expulsin, la Zona de Coleccin
las hembras hacia mayores longitudes totales (regin sombreada en gris), agrupadas
64
en intervalos de 5 cm. No obstante se observa limitaciones del nmero de machos en
1,00
0,90
0,80
Proporcin sexual
0,70
0,60
Proporcin
0,50
0,40 2 per. media mvil
(Proporcin)
0,30
0,20
0,10
0,00
19-23 24-28 29-33 34-38 39-43 44-48 49-53 54-58
Grupos de longitudes totales (cm)
Figura 34: Proporcin sexual por grupos de longitudes totales de Paralichthys adspersus
La talla o longitud de primera madurez gonadal para las hembras, es decir la longitud a
la cual el 50 % de los peces han madurado por primera vez (L50) fue de 32,32 cm 32
cm (Figura 35). No se realiz este anlisis en los machos por la menor frecuencia de
longitudes.
65
1,00
0,90
0,80
Proporcin
0,70 Y = a/1+b Exp-c*x
0,60 a = 1.00134
b = 2.9E+11
0,50 c = 0.9179
r = 0.99557
0,40 s = 0.04516
n = 79
0,30
L 50 = 32.32 ~ 32 cm
0,20
0,10
0,00
20 21 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 37 38 39 40 41 42 43 44 54 55
Figura 35: Talla de primera madurez gonadal de hembras de Paralichthys adspersus lenguado.
Hembras
Las condiciones reproductivas de las hembras del presente estudio segn las
66
18
16
14
12
Nmero de peces
0
10 II
8 III
IV
6
V
4 I
0
Primavera Verano Otoo Invierno
Estaciones
Machos
Las condiciones reproductivas de los machos del presente estudio segn las
las estaciones de primavera y verano; el estadio maduro (Estadio III) en todas las
67
18
16
14
12
Nmero de peces
0
10
II
8 III
6 IV
V
4
0
Primavera Verano Otoo Invierno
Estaciones
Figura 37: Nmero de machos de Paralichthys adspersus lenguado por estadio de madurez
gonadal segn las estaciones. 0: inmaduro, II: en maduracin, III: maduro, IV: desovante, V:
recuperacin.
GONADAL
El IGS promedio mostr un mayor valor para las hembras que para los machos, con
de muestra (NM).
Hembras Machos
2,0 1,38 0,9 0,45
IGS
R: 0,14 - 6,03; NM: 90 R: 0,12 - 2,65; NM: 65
1,5 0,47
IHS
R: 0,55 - 3,68; NM: 94
1,2 0,13 1,1 0,15
K
R: 0,69 - 1,64; NM: 95 R: 0,26 - 1,38; NM: 66
68
Hembras
Los promedios de IGS para los estadios 0 (Inmaduro), II (En maduracin), III (Maduro),
Machos
Los promedios de IGS para los estadios 0 (Inmaduro), II (En maduracin), III (Maduro),
dems estadios.
5 b
4
b
IGS (%)
0
3
c c 1
2
b b b a
a b
1
a
0
0 II III IV V I
Estadio de madurez
lenguado. Las barras indican el error estndar y las letras las diferencias
69
12.2 NDICE HEPATOSOMTICO (IHS)
siendo los valores promedios por estadio de 1,3 % (Estadio 0); 1,5 % (Estadio II); 1,7
% (Estadio III); 1,9 % (Estadio IV); 1,2 % (Estadio V) y 1,3 % (Estadio I) (Figura 39).
2 bc
ab
ac
IHS (%)
a ac
0
0 II III IV V I
Estadio de madurez
Figura 39: ndice hepatosomtico (IHS) promedio para cada estadio de madurez gonadal de hembras de
Paralichthys adspersus lenguado. Las barras indican el error estndar y las letras las diferencias
estadsticas. 0: inmaduro, II: en maduracin, III: maduro, IV: desovante, V: recuperacin, I: inactivo.
El valor de K vari para las hembras de 0,69 a 1,64 %, con un promedio de 1,2 0,129
%; y para los machos de 0,26 a 1,38 %, con un promedio de 1,1 0,147 % (Tabla 11).
70
Tabla 11: Mximo valor, mnimo valor y promedio del factor de condicin (K)
adspersus lenguado.
hembras y machos. Se observa un crecimiento similar entre ambos sexos hasta los 39
cm, que fue la longitud mxima de los machos. Las constantes de las respectivas
sexos fue alta, lo cual fue evidente en el valor del coeficiente de determinacin (R2):
71
3000
2500
y = 0,0042x3,3054
2000 R = 0,9745
Peso Total (g)
1500
Hembras
Machos
1000
y = 0,0072x3,1486
R = 0,9579
500
0
0 10 20 30 40 50 60
Longitud Total (cm)
Figura 40: Relacin longitud total peso total de hembras y machos de Paralichthys adspersus
lenguado.
TESTCULOS
parsitos frecuentes de diversos tejidos del cuerpo y las cavidades de los peces de
agua dulce y marinos. En este trabajo tuvo una prevalencia en las gnadas de
72
100%
90%
80%
40% Ausente
30%
20%
10%
0%
Hembras Machos Total
posterior.
73
Microscpicamente, Philometra sp. ocupa un espacio entre las lamelas de los ovarios
Philometra sp.
gonadal de ambos sexos. En las hembras (Figura 44) se observ en todos los estadios
74
menos en el desovante (Estadio IV), destacando en el estadio en maduracin (Estadio
III). En los machos (Figura 45), se observ en los estadios II (En maduracin), IV
100%
90%
80%
Nmero de peces (%)
70%
60%
50%
40% Presente
30% Ausente
20%
10%
0%
0 II III IV V I
Estadio de madurez
Figura 44: Prevalencia de Philometra sp. para cada estadio de madurez gonadal en hembras de
Paralichthys adspersus lenguado. 0: inmaduro, II: en maduracin, III: maduro, IV: desovante, V:
recuperacin, I: inactivo.
100%
90%
80%
Nmero de peces (%)
70%
60%
50%
40% Presente
30% Ausente
20%
10%
0%
0 II III IV V
Estadio de madurez
75
Figura 45: Prevalencia de Philometra sp. para cada estadio de madurez gonadal en machos de
Paralichthys adspersus lenguado. 0: inmaduro, II: en maduracin, III: maduro, IV: expulsante, V: post-
expulsante.
CAUTIVERIO
noviembre del 2009 y marzo del 2011), no variaron con los individuos silvestres lo que
Philometra sp.
76
Figura 47: Estadio expulsante (Estadio IV) de macho de Paralichthys adspersus lenguado mantenido en
cautiverio. Escala: 100 m. Aumento: 40x. E: estroma, ZC: zona de crecimiento, ZCL: zona de coleccin.
(Estadio II), maduro (Estadio III), expulsante (Estadio IV) e inactivo (Estadio I). La
los testculos, condiciones dadas por encontrarse los peces en proceso de adaptacin
25
20
Nmero de peces
15
Hembras
10
Machos
5
0
0 II III IV I
Estadio de madurez
Figura 48: Nmero de peces por estadio de madurez gonadal segn sexos de
77
2009 hasta la fecha de su sacrificio (entre noviembre del 2009 y marzo del
2011).
cultivados, con una prevalencia de 13,16 %, 5,88 % y 10,91 % para hembras, machos
100%
90%
80%
Nmero de peces (%)
70%
60%
50% Presente
40% Ausente
30%
20%
10%
0%
Hembras Machos Total
octubre del 2009 hasta la fecha de su sacrificio (entre noviembre del 2009 y
78
VI. DISCUSIN
NDICES MORFOMTRICOS
hembras ha sido igualmente descrita por Acua y Cid (2005), al respecto poco se sabe
de sus causas. Se podra asumir que los machos se acercan ms a la costa slo en el
el arte de pesca y la distribucin batimtrica que posee este recurso en las zonas de
pesca para este estudio pueden producir sesgos y llevar a malas interpretaciones.
hembras.
Las longitudes totales registradas por individuo muestran que los mayores valores son
que verifica el dimorfismo sexual respecto al crecimiento, donde los machos son de
2005).
79
Las longitudes mximas de las hembras (55 cm) y los machos (39 cm) son
Los ovarios y testculos de P. adspersus tienen una forma particular comparados con
otras especies de peces telesteos (Tresierra et al., 2002). As, los ovarios en su parte
anterior son de forma triangular para luego conforme se aproxima a la regin caudal
ocular y lado ciego, diferencia reportada en el lenguado Solea solea (Ramos, 1982)
donde el crecimiento de la gnada del lado ciego es mayor que la del lado ocular.
tiene continuidad con el oviducto (Hoar, 1969 en Bazzoli, 2003); adems, se observ
que el lumen se extiende hasta la parte posterior de los ovarios, indicndonos que
distal de la gnada (posterior) hasta llegar al poro genital para ser desovados.
casos mayor tamao el testculo del lado ocular. En contraste, diferencias significantes
80
de mayor tamao (Garca-Lpez et al., 2005); resultado contrario al observado en
al., 2005) y en otras especies de telesteos citadas en este ltimo trabajo (Lophiomus
Las ovogonias y los ovocitos inmaduros fueron observados en los ovarios durante todo
el periodo de estudio, resultado similar a todas las especies de los reportes en general
corticales que son precursores de los alveolos corticales. El contenido de estas dos
81
o en la periferia interna del ovocito (vesculas corticales); sin embargo, la
Los estadios finales de maduracin de los ovocitos son a menudo difciles de observar
proceso; adems, los ovocitos ovulados pueden perderse del lumen ovrico durante la
preparacin inicial del tejido (West, 1990). Dada esta literatura, las medidas de los
82
Los dimetros de los ovocitos inmaduros, pre-vitelognicos, vitelognicos y maduros
sin embargo este autor registr medidas de los ovocitos hidratados (hasta 600 m)
150 - 550 m y maduros: 470 - 1400 m) (Hunter et al., 1992) son superiores a los
clasificaciones se basan en los criterios utilizados por cada uno de ellos; por ello, las
otras, la clasificacin fue en pocas divisiones comparadas con otros trabajos (Macchi y
adems de un lumen (Drummond et al., 2000 en Bazzoli, 2003). Los nuevos folculos
velocidad en que los folculos se degeneran no es conocida, por lo tanto los FPO no
83
Daz, 1996). En este trabajo, las caractersticas observadas de los FPO son similares
Se encontr diferentes tipos de atresia pero no han sido materia de este estudio su
aspectos del proceso de atresia (Miranda et al., 1999). Aunque la atresia es definida
(Witthames y Greer, 1995), sin embargo De Vlaming (1983) (Miranda et al., 1999)
peces. Las caractersticas de atresia son similares a las observadas en otras especies
de peces (Miranda et al., 1999; cnc y Cakc, 2009). Tambin se observ que la
DESARROLLO ESPERMATOGNICO
84
seminferos, este tipo de distribucin corresponde al irrestricto (Grier, 1981 en Billard
et al., 1982).
del mismo tipo de clulas espermatognicas. Segn Mattei et al. (1993) (Garca-Lpez
0,43 m) con las observadas por Garca-Lpez et al. (2005) en Solea senegalensis
(espermtidas: 2,31 0,50 m y cabezas de los espermatozoides: 1,04 0,04 m), las
tamaos.
POBLACIONES OVOCITARIAS
entre las partes anterior, media y posterior de cada uno de ellos, nos indican el
homogneo desarrollo gonadal del ovario. Se decidi realizar los cortes para el
85
procesamiento histolgico de la parte anterior, ya que presenta una mayor cantidad de
tejido y por lo tanto permite una mejor observacin. Comparaciones similares han sido
realizadas por Witthames y Greer (1995) en Solea solea, pero con respecto a la
determinar la madurez gonadal (Hunter et al., 1992); adems, proporciona una visin
(West, 1990). En tal sentido, en este trabajo se observ que P. adspersus posee un
ovario de tipo asincrnico, ya que present ovocitos en todas las etapas de desarrollo
Un mtodo utilizado para medir a los ovocitos es el dimetro promedio de dos ejes
Adems para evitar no tomar el dimetro ms largo de los ovocitos, solo los ovocitos
86
Las gnadas de P. adspersus mostraron cambios en el tamao y aspecto durante su
Uno de los aspectos utilizados para clasificar a los ovarios fue en base a la presencia
cada tipo de ovocito (West, 1990). Como no existe ninguna indicacin de cul de estos
identificar los estadios de madurez gonadal (Hunter y Macewicz, 1985; West, 1990) y
un mtodo para establecer un periodo reproductivo y una talla de primera madurez con
mayor precisin.
(1924) para esta especie, sin embargo la gran cantidad de estadios dificultan su uso.
macroscpica utilizada por Ramos (1982) en Solea solea (inmaduro, reposo sexual,
parece ser la adecuada por el uso del trmino puesta que no se refiere a
87
caractersticas de la gnada si no a su funcin. Otras escalas utilizadas en otros
Fabr et al., 2001; Dias et al., 2005) presentan diferencias en la ausencia del estadio
recuperacin y/o inactivo, que lo agrupan en algunos casos como inmaduro, la divisin
madurez gonadal de los testculos es ms difcil que en los ovarios debido a que
lbulos seminferos y ductos eferentes, los que permiti tener criterios para clasificar
utilizar la histologa, esta escala ser una herramienta til en los muestreos de
88
variacin en el desarrollo de las gnadas; sin embargo otros autores argumentan que
la reportada por Zuiga (1988) de 21 cm sin especificar sexo (Silva y Oliva, 2010). En
este trabajo se observ una longitud de 32 cm slo para hembras ya que en los
machos no se pudo realizar este anlisis; sin embargo, es considerable pensar que la
longitud de primera madurez es menor en los machos que en las hembras. La longitud
de primera madurez nos indica que a partir de ese punto se puede considerar a los
peces como adultos, en tal sentido a pesar de no ser objetivo de este trabajo se
y Mendo, 2005).
89
EVALUACIN DE OTROS PARMETROS INDICADORES DEL DESARROLLO
GONADAL
En las hembras el valor del IGS vari de 0,1 a 6,0 %, valores bajos comparados con el
machos el valor del IGS vari de 0,1 a 2,7 %, tambin valores bajos comparados con
Pleuronectes platessa (Rijnsdorp, 1989) que llega hasta 17 %, pero mayores a los
Los menores valores del IGS observados en los machos se relaciona con los menores
El IGS es un buen indicador del desarrollo gonadal de los ovarios; sin embargo, da
et al., 2005), es por ello que tiene que ser utilizado como un complemento a la
machos, la comparacin del IGS entre los estadios de madurez gonadal muestra la
El IHS, tambin puede ser utilizado como un indicador del desarrollo gonadal pero slo
en el caso de las hembras donde el hgado tiene un papel importante como rgano
precursor de los componentes del vitelo. En las hembras, el IHS mostr mayores
90
porcentaje de ovocitos llenos de vitelo en la fase temprana de este estadio y por ende
(Ramos, 1982), pero este no fue el caso en este trabajo, observando similares valores
parmetros en la relacin longitud total (LT) versus peso total (PT), a pesar del
sexos a partir de los 40 cm; la mxima longitud de los machos capturados en este
trabajo fue de 39 cm, por esta razn no se observ en la curvas de las relaciones el
todos los peces (hembras y machos) indican un crecimiento isomtrico segn Froese
(2006). Este ltimo autor destaca que slo cuando todas las estimaciones de la
conjunto basado en la media b; por lo tanto, el valor de b solo es vlido para esta
situacin de estudio.
TESTCULOS
mayora de los meses del perodo de estudio y en mayor porcentaje en las hembras.
91
las gnadas. Oliva et al. (1996) encontraron una prevalencia de Philometra sp. de 17,6
% en lenguados del norte de Chile, resultados similares a los nuestros (19,14 %);
hembras que en machos. Este autor seala que las diferencias de la infeccin entre
dieta entre machos y hembras. Por lo tanto, las distintas fisiologas entre ambos sexos
podra ser la principal causa. En este estudio se observ los mayores tamaos de los
prevalencia de Philometra sp. en hembras por la mayor superficie donde alojarse que
A travs de los cortes histolgicos, observamos que este parsito solo ocupa un
espacio en el lumen de los ovarios y entre los ductos eferentes de los testculos; en tal
madurez. Sin embargo, como no fue objetivo de este estudio, se requiere profundizar
ms en el tema.
confinamiento (Miranda et al., 1999); sin embargo, esto no se observ en las muestras
92
VII. CONCLUSIONES
parte anterior estn unidos por un solo oviducto y son de forma triangular y van
Atresia.
Espermatozoide.
Recuperacin e Inactivo.
expulsante e Inactivo.
La talla o longitud de primera madurez gonadal para las hembras fue de 32 cm.
93
La prevalencia del parsito nematodo Philometra sp. fue de 19,14 % y mayor
VIII. RECOMENDACIONES
94
IX. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
oogenesis in ten Brazilian fish species. European Archives of Biology, 1990, vol.
101, p. 399-410.
CARRERA, L.; COTA, N.; MONTES, M.; MATEO, E.; SIERRALTA, V.; CASTRO, T.;
Journal.
95
CARRERA, L. Y SANTOS, C. Cultivo de Lenguado Paralichthys adspersus
(Steindachner, 1867) en Cautiverio. Informe Tcnico Anual Instituto del Mar del
Per, 2007.
controlado. Informe progresivo Instituto del Mar del Per, 1997, vol. 64, p. 34-51.
CHIRICHIGNO, N. 1998. Clave para la identificacin de los peces marinos del Per.
CISNEROS, R.; BAUTISTA, J.; CARRERA, L.; SILVA, I.; PAURO, J., Y SANTOS, C.
controlado. Informe Interno Instituto del Mar del Per, 1999, vol. 48.
http://www.fishbase.org/Summary/SpeciesSummary.php?ID=10573&genusname
=Paralichthys&speciesname=adspersus&AT=Paralichthys+adspersus&lang=Spa
nish.
96
FLORES, S. Y HIRT, L. Biologa reproductiva de las hembras de Hemiodus orthonops
FROESE, R. Cube law, condition factor and weightlength relationships: history, meta-
241253.
1179-1189.
So Francisco river, Minas Gerais, Brazil. Brazilian Journal of Biology, 2006, vol.
66, p. 513-522.
HUMASON, G. L. Animal tissue techniques. 4th ed. USA, Ed. W. H. Freeman Co.,
1979, 661 p.
97
JOHANSEN, A. C. On the Summer and Autumn Spawning Herring of the North Sea.
http://www.produce.gob.pe/RepositorioAPS/3/jer/DESEMSUBMENU02/2010/pdf/
01_13.pdf
MIRANDA, A.C.L.; BAZZOLI, N.; RIZZO, E. Y SATO, Y. Ovarian follicular atresia in two
teleost species: a histological and ultrastructural study. Tissue and Cell, 1999,
98
PHAM, K.; AMANO, M.; AMIYA, N.; KURITA, Y. Y YAMAMORI, K. Changes in brain
and pituitary GnRH levels during ovarian maturation in wild female Japanese
PIAGET, N.; VEGA, A.; SILVA, A. Y TOLEDO, P. Effect of the application of -glucans
p. 35-43.
286.
departamento de Lambayeque. Boletn Instituto del Mar del Per, 1999, vol. 18,
n 1-2, p. 15-48.
99
SILVA, A. Y FLORES, H. Consideraciones sobre el desarrollo y crecimiento larval del
100
WITTHAMES, P.R. Y GREER WALKER, M. Determinacy of fecundity and oocyte
atresia in sole (Solea solea) from the Channel, the North Sea and the Irish Sea.
101