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UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTBAL DE HUAMANGA

(Segunda Universidad Fundada en el Per)
FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA

PRACTICA DE INTERNADO : Clnica en Laboratorio Clnico (MV-625)

ALUMNO : GUZMAN SANTARIA, Cesar

LUGAR : Patovet S.A.C. - Jess Mara - Lima

FECHA DE INICIO : 03 de junio de 2016

FECHA DE TRMINO : 02 de julio de 2016

ASESOR DE LA PRCTICA : Dr. VEGA GATTI, Ivanoe

AYACUCHO - PER
2017
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ndice Pg.

I. INTRODUCCIN ................................................................................................... 5
OBJETIVOS ................................................................................................................... 5
II. MARCO TERICO ........................................................................................... 6
2.1. Laboratorio clnica ............................................................................................. 6
2.2. Organizacin de un diagnstico.......................................................................... 6
2.3. Interpretacin de los anlisis de laboratorio ..................................................... 6
2.3.1. Sensibilidad ..................................................................................................... 6
2.3.2. Especificidad ................................................................................................... 7
2.4. Pruebas de laboratorio ........................................................................................ 7
2.5. Sangre ................................................................................................................... 7
2.6. Hemograma .......................................................................................................... 7
2.7. Pautas para la interpretacin de hemogramas ................................................. 8
2.8. Recuento celular de eritrocitos ........................................................................... 8
2.9. Indices eritrociticos .............................................................................................. 9
2.9.1. Volumen Corpuscular Medio o VCM ............................................................. 9
2.9.2. Concentracin Media de Hemoglobina Corpuscular o CMHC ..................... 9
2.10. Frotis sanguneo ................................................................................................. 9
2.10.1. Tincin de GIEMSA ..................................................................................... 9
2.10.2. Tincin WRIGTH ....................................................................................... 10
2.11. Morfologa eritrocitaria................................................................................... 11
2.12. Conteo diferencial de leucocitos ..................................................................... 11
2.12.1. Leucocitos ................................................................................................... 11
2.12.2. Neutrfilos ................................................................................................... 12
2.12.3. Linfocitos .................................................................................................... 13
2.12.4. Eosinfilos................................................................................................... 14
2.12.5. Monocitos .................................................................................................... 14
2.12.6. Basfilos ...................................................................................................... 15
2.13. Evaluacin de los eritrocitos ........................................................................... 15
2.14. Recuento total de leucocitos ............................................................................ 16
2.14.1. Conteo con pipeta aforada Cuenta globulos de Neubauer .......................... 16
2.14.2. Conteo Leucocitos ....................................................................................... 16
2.15. Hematocrito ...................................................................................................... 16
2.15.1. Rutina Hematocrito por Microescala .......................................................... 17
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2.16. Protenas ........................................................................................................... 17

2.16.1. Hiperproteinema .......................................................................................... 17
2.16.2. Hipoproteinemia .......................................................................................... 18
2.17. Hemoglobina..................................................................................................... 18
2.18. Alteraciones eritrocticas ................................................................................. 18
2.18.1. Anemia ........................................................................................................ 18
2.19. Policitemia ........................................................................................................ 19
2.19.1. Policitemia relativa ...................................................................................... 20
2.19.2. Policitemia absoluta .................................................................................... 20
2.20. Trombocitos o plaquetas ................................................................................. 20
2.20.1. Trombocitosis. ............................................................................................. 20
2.20.2. Trombocitopenia. ........................................................................................ 20
2.21. Bioqumica sangunea ...................................................................................... 21
2.21.1. Glucosa ........................................................................................................ 21
2.21.2. Calcio .......................................................................................................... 21
2.21.3. Urea ............................................................................................................. 21
2.21.4. Creatinina .................................................................................................... 22
2.21.5. Alanina aminotransferasa (ALT) ................................................................ 22
2.21.6. Aspartato aminotransferasa (AST) .............................................................. 22
2.21.7. Fibringeno ................................................................................................. 23
2.21.8. Amilasa........................................................................................................ 23
2.21.9. Fosfatasa Alcalina ....................................................................................... 23
2.22. Examen de orina .............................................................................................. 23
2.22.1. Examen fsico .............................................................................................. 24
2.22.2. Examen qumico.......................................................................................... 25
2.23. Exmenes coprolgicos .................................................................................... 27
2.23.1. Mtodos de examen ..................................................................................... 28
2.24. Exmenes dermatolgicos ............................................................................... 28
2.24.1. Obtencin de la muestra .............................................................................. 29
2.25. Exmenes citolgicos ....................................................................................... 29
2.25.1. Evaluacin de extensiones citolgicas ........................................................ 29
2.25.2. Carcinomas y sarcomas ............................................................................... 30
2.26. Microbiologa ................................................................................................... 32
2.26.1. Tincin de Gram.......................................................................................... 32
2.26.2. Tincin de Shaefer- Fulton ......................................................................... 33
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2.26.3. Tincin Ziehl Nielsen .................................................................................. 33

2.27. Cultivos ............................................................................................................. 33
2.27.1. Agar Nutritivo ............................................................................................. 34
2.27.2. Agar Sangre ................................................................................................. 34
2.27.3. Agar MacConkey ........................................................................................ 34
2.27.4. Agar Salado Manitol .................................................................................. 35
2.27.5. Agar chocolate............................................................................................. 35
2.27.6. Agar glucosa de Sabouraud ......................................................................... 35
2.27.7. Caldo Tioglicolato ....................................................................................... 35
2.27.8. Agar C.L.E.D .............................................................................................. 36
2.27.9. Agar S.S. ..................................................................................................... 36
2.27.10. Agar Mueller-Hinton ................................................................................. 36
2.28. Pruebas para tipificacin bioqumica ............................................................ 37
2.28.1. Prueba de la Catalasa................................................................................... 37
2.28.2. Prueba de la Coagulasa ............................................................................... 37
2.28.3. EMB ............................................................................................................ 37
2.29. Pruebas para tipificacin bioqumica seriada ............................................... 37
III. ACTIVIDADES REALIZADAS .......................................................................... 39
3.1.- Reconocimiento de la clnica veterinaria patovet ...................................... 39
3.2. Preparacin de medios de cultivo ..................................................................... 39
3.3. Cultivo de bacterias en diferentes agares para su identificacin .................. 41
3.4. Cultivo de hongos ............................................................................................... 41
3.5. Antibiograma ..................................................................................................... 42
3.6. Examen coprolgico ........................................................................................... 43
3.6.1. Examen macroscpico................................................................................... 43
3.6.2. Examen microscpico ................................................................................... 43
3.7. Centrifugado y separacin de suero sanguneo ............................................... 44
3.8. Realizando la hematologia ................................................................................ 45
3.9. Preparacin y tincin del frotis sanguneos ..................................................... 46
3.10. Examen completa de orina .............................................................................. 47
IV. CONCLUSIONES .................................................................................................. 49
V. RECOMENDACIONES ......................................................................................... 49
VI. BIBLIOGRAFA .................................................................................................... 50
VII. ANEXOS ............................................................................................................... 52
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I. INTRODUCCIN
De acuerdo a la organizacin Panamericano de la salud (OPS -1982) los laboratorios de
diagnstico veterinario integran el llamado servicio de laboratorio de salud, ya que
acuerdo a su definicin intervienen en las actividades de medicina preventiva y curativa.
Los laboratorios de diagnstico veterinario estn dedicados al estudio integral de las
enfermedades animales mediante la aplicacin de exmenes vivos o necropsias,
procesados por diferentes tcnicas, tratando de relacionar los resultados obtenidos en el
laboratorio con las observaciones clnicas de los animales, las condiciones de manejo
del medio ambiente que rodea a los animales afectados.
Por lo expuesto resulta fcil comprender que el diagnstico de una enfermedad es la
resultante de un conjunto de acciones multidisciplinarias ejecutadas por distintas
unidades de laboratorio y campo trabajando en forma coordinada. Los laboratorios
tambin participan en los programas de proteccin de salud, y generan informacin
bsica para la planificacin de acciones de prevencin, control y tratamiento de los
animales. Tambin sus funciones aportan informacin de resultados, ellos son centros
de consulta, interpretacin y diagnostica en base a la informacin generada en la
vigilancia epidemiolgica o en otros estudios destinados a resolver los problemas de
salud animal y publica.
Los principios bajo los que cualquier laboratorio de diagnstico veterinario debera
regirse son:
Proveer servicios de diagnstico a la vanguardia.
La entrega segura y a tiempo de los resultados.

OBJETIVOS

Poner en Prctica lo aprendido en las aulas universitarias en el curso de

laboratorio clnico.
Reconocer y dar buen uso a los equipos y materiales del laboratorio clnico
veterinario.
Obtener y manejar las muestras adecuadamente en el laboratorio clnico
veterinario.
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II. MARCO TERICO

2.1. LABORATORIO CLNICO

El laboratorio clnico veterinario, es la aplicacin de los diferentes mtodos de

laboratorio y la correcta interpretacin de los resultados para un correcto diagnstico,
control, tratamiento y prevencin de enfermedades (Gmez y Col, 1992).
El laboratorio clnica como ciencia, es la que se aplica la solucin de problemas clnicos
mediante uso de los mtodos de laboratorio (hematologa, qumica sangunea, exmenes
de orina, endocrinologa clnica) basados en el estudio fsico y qumico de los lquidos
corporales (Trigo y Valero, 2002).
Debe quedar claro que la patologa clnica es un mtodo complementario de diagnstico
que de ninguna manera puede sustituir a la observacin del o los animales (Benjamn,
1991).

2.2. ORGANIZACIN DE UN DIAGNSTICO

Para llegar al diagnstico se sigue una secuencia de pasos:

Historia clnica completa (datos del paciente)
Examen fsico del paciente y obtencin de la muestra.
Anlisis de laboratorio.
La interpretacin de los resultados del laboratorio.
Diagnstico epidemiolgico.
Diagnstico final sobre la base de conocimientos y razonamientos tcnicos.
Se puede realizar otros exmenes complementarios como ser: radiografas, ecografas,
punciones, laparotomas exploratorias y anlisis de laboratorio (qumica sangunea,
examen de orina y otros), (Guzmn, 2009).

2.3. INTERPRETACIN DE LOS ANLISIS DE LABORATORIO

Esta es la parte, que mayores dificultades encuentra el clnico para llegar al diagnstico.
Se debe tomar en cuenta aspectos generales en la interpretacin de resultados de
laboratorio:
Los resultados falsos (+ o -), la comparacin de las pruebas y la interpretacin
de los resultados, conducen al tema de sensibilidad y especificidad.
2.3.1. Sensibilidad
Capacidad de una prueba para identificar correctamente los animales positivos,
utilizando como prueba de sondeo para conocer el estado de una poblacin (BPA).
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2.3.2. Especificidad
Identifican correctamente los realmente negativos, utilizando las pruebas confirmatorias
(SAT y 2-Me)
Al demorar en llegar las muestras al laboratorio, puede dar resultados
distorsionados.
Muchas veces no se obtuvo la muestra en el momento oportuno y pueden dar
resultados negativos.
El veterinario clnico tiene que conocer las enfermedades que pueden afectar a la
especie o especies animales con los cuales trabaja y actualizarse sobre las enfermedades
comunes en el medio. Es importante conocer lo fisiolgico, para entender lo patolgico,
el clnico debe tener espritu de investigador, llegando en lo posible hasta el diagnstico
final, usando los medios disponibles, lo que afianzar sus conocimientos y podr
competir en condiciones ventajosas en el mercado profesional (Guzmn, 2009).

2.4. PRUEBAS DE LABORATORIO

Los anlisis clnicos ms comunes que se realizan en el laboratorio son: hemogramas,

qumica sangunea, examen de orina y otros como los exmenes coprolgicos,
dermatolgicos, serolgicos y citolgicos (Guzmn, 2009).

2.5. SANGRE

La sangre participa directa o indirectamente casi en todos los procesos bioqumicos en

el cuerpo, sus alteraciones ayudan con frecuencia a detectar la lesin o mecanismo
existente. La defensa contra la invasin bacteriana y los mecanismos de la inmunidad
son funciones importantes de los componentes sanguneos (Medway, 1990).

2.6. HEMOGRAMA

Es un perfil de pruebas realizado sobre la sangre y el plasma. Los estudios empleados

para describir la cantidad y la calidad de los elementos celulares en la sangre y en el
plasma, vara segn el laboratorio. El hemograma ofrece la estimacin del nmero de
hemates (eritrocitos, leucocitos, plaquetas). El nmero de hemates se estima mediante
recuentos, valoracin del contenido de hemoglobina, hematocrito y protenas totales
(Medway, 1990).
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2.7. PAUTAS PARA LA INTERPRETACIN DE HEMOGRAMAS

Conocer los valores hematolgicos de referencia.

Conocer las variaciones fisiolgicas por la edad, gestacin, tipo de actividad,
raza y sexo.
Conocer el origen y funcin de los componentes celulares de la sangre.
Dominar la terminologa, reconocer las alteraciones hematolgicas y detectarlas
en los hemogramas como ser: anisocitosis, policromacia, corpsculos de howell
jolly, pilas en monedas, leucocitosis, leucopenia, anemia, policitemia,
desviacin a la izquierda, y otros.
Relacionar las alteraciones con enfermedades o estados patolgicos (Guzmn,
2009).

2.8. RECUENTO CELULAR DE ERITROCITOS

El Recuento Total de Eritrocitos nos indica cuntos eritrocitos hay en un milmetro

cbico de sangre. Su valor, al igual que el del hematocrito, puede estar aumentado,
indicndonos concretamente policitemia verdadera, o disminuido lo cual se relaciona
con anemia (Mussman y Rave, 1978).
En Mamferos requiere solucin de formaldehido-citrato preparada as: a 99 ml de agua
destilada se la adiciona 1 ml de Formaldehdo al 37 % (formalina comercial). A esta
solucin se le adicionan 3.0 gr. de Citrato Sdico (se puede reemplazar por Oxalato de
Amonio) (OPS, 1982).
Rutina Conteo de Eritrocitos o RBC: En Mamferos, Aves y Reptiles con la pipeta de
conteo para eritrocitos se toma solucin de formaldehido-citrato o solucin salina
fisiolgica hasta el aforado 101, se libera en un vidrio de reloj hasta el aforado 5 y lo
dems se desecha. Se toma sangre hasta el aforado 5 con la misma pipeta y se mezcla
con el lquido que se liber en el vidrio de reloj.
Se enjuaga la pipeta succionando y expulsando 3 veces. Se monta el hemocitmetro con
la laminilla. Se esperan 5 min. Y se cuentan las clulas presentes en cada cuadro
(Davidson y Henry, 1978).

RBC= # de clulas x 10000

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2.9. INDICES ERITROCITICOS

2.9.1. Volumen Corpuscular Medio o VCM

Indica el tamao promedio de los glbulos rojos, es muy importante porque nos dice
en trminos de tamao celular si las clulas eritrocticas son microcticas, normocticas
o normales o macrocticas, los cuales son conceptos que clasifican las anemias como
regenerativas o no regenerativas (Davidson y Henry, 1978).
El clculo se hace de la siguiente forma:

VCM = Hematocrito x 10/Total glbulos rojos

Concentracin Media de Hemoglobina Corpuscular o CMHC:

Indica la cantidad promedio de hemoglobina que tienen 100 ml sangre; es importante
porque indica la intensidad de la coloracin de los eritrocitos (Hipocrmica o poco
coloreado y Normocrmica o normalmente coloreado), los cuales son conceptos que
junto a VCM clasifican anemias (Mussman y Rave, 1978)

CMHC = Hemoglobina x 100/Hematocrito.

2.10. FROTIS SANGUNEO:

El cuadro hemtico en el CRRFS se determina con frotis sanguneos convencionales,

con las tcnicas de rutina que para laboratorio de patologa clnica describe OPS (1982).
Una vez hecho el frotis sanguneo, usualmente se colorea con cualquiera de las dos
tinciones, segn lo sugerido por Uhart y Demm (2000) usadas para distinguir las clulas
y mantener las placas en montaje permanente, estas tcnicas son:

2.10.1. Tincin de GIEMSA

2.10.1.1. Reactivos Necesarios y Preparacin:
Una solucin stock se prepara mezclando 0,75 gr de Colorante Giemsa en polvo con 65
ml. de Metanol al 97 %, completando luego a 100 ml. con Glicerol (aprox. 36 ml.). Se
agita 3 veces al da por espacio de una hora a lo largo de cuatro das consecutivos,
posteriormente se filtra y est la solucin (OPS, 1983).
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La Tincin de trabajo se prepara adicionando dos a tres gotas de la solucin madre de

Giemsa por cada ml. de Agua amortiguada; para preparar mayores cantidades
calculando para 100 ml de solucin de trabajo se adicionan. 3,5- 5 o 10 ml. de solucin
madre. Esta mezcla no se debe agitar con excesivo bro porque se corre el riesgo de que
el colorante se precipite (OPS, 1983). Solucin Buffer de Fosfatos (Agua Amortiguada):
Se mezclan 3,76 gr. de Fosfato Acido de Sodio Na2HPO4 y 2,1 g. de Fosfato diacido de
Potasio KH2PO4 en 1000 ml de Agua destilada. Ajustar pH entre 7.0 y 7.2. Guardar en
frasco mbar (OPS, 1983).
Hacer frotis.
Secar el frotis al ambiente.
Fijar en Metanol al 97 % por 3-5 min.
Secar al ambiente nuevamente.
Adicionar colorante de Giemsa al frotis por 30 min.
Escurrir la lmina.
Lavar la lmina con agua amortiguada de Fosfatos a chorro
Opcionalmente en el CRRFS montamos un cubreobjetos con Blsamo de
Canad (Uhart y Demm, 2000).

2.10.2. Tincin WRIGTH:

La Tincin de trabajo se elabora adicionando a 300 ml de Alcohol METLICO al 96%
0.5 g de Colorante WRIGTH y posteriormente se adicionan 30 ml de Glicerina Pura
(OPS, 1983).
Hacer Frotis
Secar el frotis al ambiente.
Adicionar el colorante por 3-5 min.
Adicionar agua destilada tamponada en Volumen igual
Esperar hasta aparicin de espejo metlico 5 min.
Lavar la lmina con agua amortiguada de Fosfatos a chorro.
Opcional Montar Blsamo de Canad. En el CRRFS preferimos de manera
regular esta coloracin por agilidad en el proceso (Schlam, 1985).
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2.11. MORFOLOGA ERITROCITARIA

Al ver la lmina coloreada al microscopio de manera normal, los eritrocitos en

mamferos son clulas abundantes que se deben distinguir de las dems por su
uniformidad en formas redondas y pequeas (promedio 7 micras) y enucleadas con
color eosinfilo (Banks, 1981).
Una vez coloreada la lmina existen detalles relevantes dentro de las caractersticas
histolgicas de los glbulos rojos tienen significado clnico (Mussman y Rave, 1978),
estos detalles son:
Fragmentos Nucleares: (Clulas inmaduras o Rubricitos)
Tipos de Cromasia: (Hipocrmicos, Clulas Inmaduras o Reticulocitos)
Poiquilocitosis: Como Equidnocito, Leptocito, Acantocito o Codocito
Punteados Basfilos: Procesos Txicos (Alman et al, 1997)

2.12. CONTEO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS

Con la tcnica de Coloracin no solo se tien las clulas eritrocticas, tambin lo hacen
las clulas leucocticas por lo cual se puede contar y establecer diferencialmente cuales
son las abundancias relativas o porcentuales de cada una de ellas; este conteo diferencial
se realiza de manera convencional, como lo indican los procedimientos de laboratorio
de patologa clnica bien reseados en Hill y Burdick, (1996).
Se debe tener en cuenta que en sangre se hallan dos lneas celulares y que solo los
leucocitos componen los elementos figurados que sirven para hacer el conteo
diferencial; los eritrocitos que se hallan no se cuentan aunque adicionalmente generan
informacin valiosa.
Los leucocitos tienen caractersticas histolgicas en ncleo y citoplasma que son nicas
y solo son reveladas con la tcnica de tincin expuesta; son importantes para establecer
un conteo diferencial y para derivar de un buen diagnstico paraclnico.

2.12.1. Leucocitos
Son clulas sanguneas de la serie blanca: neutrfilos, eosinfilos, basfilos, linfocitos y
monocitos. Participan en la defensa del organismo frente a diferentes agentes
infecciosos (bacterias, virus, hongos y otros), se dividen por su granulacin.
Granulocitos: Tienen grnulos en su citoplasma (neutrfilos, eosinfilo,
basfilos).
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Agranulocitos: No se observan granulaciones en su citoplasma (linfocitos y

monocitos) (Sodikoff, 1996).

2.12.1.1. Leucocitosis
Leucocitosis es la elevacin de leucocitos por encima de los valores de referencia. El
ejercicio, el estrs, la digestin, el miedo y la preez dan lugar a leucocitosis
fisiolgica. Tambin las infecciones, las neoplasias de crecimiento rpido, la hemlisis
aguda, la hemorragia, la intoxicacin, la leucemia y el traumatismo dan lugar a la
leucocitosis patolgica (Sodikoff, 1996).

2.12.1.2. Leucopenia
La leucopenia es la disminucin de las leucocitos en la sangre se presenta en algunas
enfermedades vricas (parvovirosis, coronavirus, moquillo canino, IBR, clera porcino y
otros) tambin al inicio de una infeccin bacteriana localizada de mayor duracin en el
caballo. Un valor por debajo de 800 leucocitos/ l. se considera como pronstico
reservado (Guzmn, 2009).

2.12.1.3. Recuento diferencial de leucocitos

La respuesta leucoctica y el campo del diagnstico pueden dividirse en varias
categoras diferentes de acuerdo con la cuenta leucoctica total y con el patrn celular
diferencial.
El aumento (leucocitosis) o la disminucin (leucopenia) de la cuenta leucoctica
total, as como la alteracin de un tipo de clula en particular puede ser
significativo.
Las alteraciones pueden consistir en la forma de clulas que normalmente no se
encuentran presentes en la sangre circulante, como clulas inmaduras o
anormales.
algunos estados patolgicos no producen alteracin en las cuentas leucocitarias
total o diferencial; en stos, un cuadro normal sera significativo (Benjamn,
1991).
2.12.2. Neutrfilos
La principal funcin de los neutrfilos es el de fagocitar bacterias y pequeas partculas
de materia, funciona como parte de la primera lnea de defensa (Medway, 1990).

2.12.2.1. Neutrofilia
La neutrofilia se caracteriza por una elevacin en el nmero de neutrfilos circulantes.
Es producida por infecciones agudas, intoxicaciones, hemorragias, traumas, neoplasias
malignas (Benjamn, 1991).

a) Desviacin a la derecha
Es la presencia de neutrfilos hipersegmentados o envejecidos que presentan ms de
cuatro lbulos en su ncleo en la sangre, las causas son:
Estrs prolongado.
Hipersecrecin endgena o administracin de corticoides en tratamientos
prolongados.
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Alteraciones en la glndula suprarrenal (tumores).

Sangre que se deja mucho tiempo con anticoagulante puede producir mayor
segmentacin de neutrfilos (Guzmn, 2009).
b) Desviacin a la izquierda
El termino desviacin a la izquierda indica aumento del nmero de neutrfilos
inmaduros en circulacin como las formas en banda, juvenil, mielocito (Sodikoff,
1996).
Leve: en casos de infeccin bacteriana localizada, tambin en hemorragias o
hemlisis, en la que aparecen las formas en banda por encima de los valores de
referencia.
Moderada: indica infeccin bacteriana ms grave (localizada) pero tambin
puede presentarse despus de hemorragias graves o hemlisis, se observan hasta
las formas de juvenil.
Marcada: se observa en casos de una infeccin bacteriana septicmica o en
leucemias granulocticas y pueden encontrase hasta mielocitos en la sangre
(Guzmn, 2009).

Desviacin a la izquierda regenerativa

Es la presencia de leucocitosis de moderada a marcada con presencia de formas
inmaduras de neutrfilos, que no superan al 50 % de los neutrfilos maduros. Se
presenta en infecciones bacterianas localizadas o septicmicas graves, el pronstico es
grave.

Desviacin a la izquierda degenerativa

Se caracteriza por la circulacin de una cifra de neutrfilos inmaduros que superan el 50
% al de los neutrfilos segmentados, el recuento total de leucocitos puede variar desde
leucopenia a valores normales o leucocitosis leve. Se presenta en estadios terminales de
infecciones bacterianas localizadas graves o septicmicas, en general el pronstico es
reservado (Sodikoff, 1996).

2.12.2.2. Neutropenia
La neutropenia es la disminucin de los neutrfilos circulantes en la sangre. Se presenta
en:
Algunas infecciones vricas.
Ehrlichiosis canina.
Al inicio de una infeccin bacteriana localizada o generalizada.
Al final de una infeccin bacteriana septicmica.
Toxoplasmosis sistmica aguda. (Guzmn, 2009).

2.12.3. Linfocitos
Su funcin es reconocer a las sustancias extraas al organismo (antgenos), guardar la
memoria de su paso y luchar contra ellas de dos maneras. De la inmunidad humoral son
responsables los Linfocitos B y de la inmunidad celular los Linfocitos T. Pero tambin
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se sabe que los linfocitos T son necesarios para el desarrollo de la respuesta humoral, es
decir, para la sntesis de los anticuerpos (Maco Pharma Glosarrio, 2010).

2.12.3.1. Linfocitosis
Es el aumento de linfocitos con relacin a los valores de referencia segn la especie. Las
principales causas son:
Despus de vacunaciones.
Excitacin o miedo.
En animales jvenes
Leucemia linfoctica.
Linfosarcomas leucmico
Leucosis bovina.
Enfermedades bacterianas crnicas.

2.12.3.2. Linfopenia
Es la disminucin de linfocitos con relacin a los valores de referencia segn la especie.
Las principales causas son:
Infecciones virales.
Hiperadrenocorticismo.
Estrs grave.
Administracin de corticoides.
Ehrlichiosis canina (Nez, 2007).

2.12.4. Eosinfilos
Son clulas que participan como mediadores en los procesos inflamatorios y alrgicos,
como parasiticidas y detoxificantes. Se producen en la medula sea (Guzmn, 2009).

2.12.4.1. Eosinofilia
Es el aumento de los eosinfilo en la sangre. Se presenta en parasitosis, estados
alrgicos, shock anafilctico, reaccin anafilctica en microfilariosis (Benjamn, 1991).

2.12.4.2. Eosinopenia
Es la disminucin en el nmero de eosinfilo circulantes se produce en la hiperfuncin
corticoadrenal, el estrs y la administracin de corticosteroides. Generalmente la
Eosinopenia se desarrolla en enfermedades agudas (Sodikoff, 1996).

2.12.5. Monocitos
Su funcin es de fagocitosis y remocin de partculas extraas, sintetizan factores de
complemento y participan en las reacciones inmunes. Se encuentran en menor
proporcin en el recuento diferencial, se forman en la mdula sea, se liberan a la
circulacin donde permanecen un corto tiempo y despus entran a los tejidos para
convertirse en macrfagos fijos o libres (Guzmn, 2009).
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2.12.5.1. Monocitosis
Es el aumento de los monocitos en la sangre, se presentan en:
Infecciones bacterianas localizadas crnicas a veces asociadas a neutrofilia.
Infecciones micticas difundidas.
Anemias hemolticas.
Tuberculosis, brucelosis.
Hiperadrenocorticismo.
Administracin de corticosteroides.
Estrs grave por ejemplo una pimetra
Infeccin o inflamacin aguda crnica.
Desrdenes inmunomediados.
Otros procesos que producen dao tisular y necrosis.
Durante el periodo de secado de las vacas.
Toxoplasmosis.
Algunas neoplasias.
Pimetra.
Peritonitis.
El grado de monocitosis puede indicar cun crnica es una infeccin.
Puede haber error en los recuentos automticos (Guzmn, 2009).

2.12.6. Basfilos
Son leucocitos que produce la mdula sea a partir de los hemocitoblastos
indiferenciados y tiene una vida media de 10 a 12 das. Su funcin: de formar factores
mediadores de inflamacin y producir heparina (Benjamn, 1991).

2.12.6.1. Basofilia
Es el aumento de basfilos en la sangre, se presenta en parasitosis por dirofilaria
inmitis, en la enfermedad respiratoria crnica, en Hiperadrenocorticismo,
hipotiroidismo, y leucemia basofilica. En enfermedades que afectan a tejidos que
contiene muchos, mastocitos: ejemplo: piel, tejido subcutneo, pulmn, aparato
gastrointestinal, tero y escroto (Benjamn, 1991).

2.13. EVALUACIN DE LOS ERITROCITOS

Los eritrocitos son los principales responsables del transporte de oxgeno, que va
unido a la hemoglobina. El transporte solamente es posible cuando los eritrocitos
estn intactos y llevan hemoglobina unida a ellos, la hemoglobina que se libera tras la
hemlisis de los eritrocitos es menos adecuada para el transporte de oxgeno. Los
eritrocitos se componen de:
Estructura o estroma.
Colorante de la sangre o hemoglobina.
La hemoglobina se compone:
 16

HEMO .- El colorante propiamente dicho y con un tomo de hierro bivalente

GLOBINA.- Una protena con dos pares de pptidos idnticos. (Kraft y Drr,
2000).

2.14. RECUENTO TOTAL DE LEUCOCITOS

Nos indica cuantos leucocitos hay en un mm cubico de sangre. Su valor puede estar
aumentado indicndonos concretamente leucocitosis o disminuido lo cual indica
leucopenia. Conociendo el conteo diferencial o porcentual de leucocitos, podemos
calcular el valor verdadero de cada uno de los leucocitos, es decir cuntos hay de cada
uno de ellos por mm cubico lo cual nos genera una mejor aproximacin hacia un
proceso patolgico si existe (Uhart y Demm, 2000).

2.14.1. Conteo con pipeta aforada Cuenta globulos de Neubauer

En mamferos se hace con una solucin de Tuerk previamente preparada, la cual se
elabora en dos fases:
Se disuelven 0,3 gr. de Azul de Metileno en 100 ml de Agua destilada.
En otro recipiente a 200 ml de Agua destilada se la adicionan 4 ml. de Acido.
Actico Glacial y finalmente a esta Solucin se la adicionan 10 gotas de la
mezcla (OPS, 1982)

2.14.2. Conteo Leucocitos

Con la Pipeta de conteo para leucocitos se toma Solucin de Tuerk hasta el aforado 11,
se libera en un vidrio de reloj hasta el aforado 5 y lo dems se desecha; se toma sangre
hasta el aforado 5 con la misma pipeta y se mezcla con el lquido que est en el vidrio
de reloj. Se enjuaga la pipeta succionando y expulsando 3 veces. Se monta el
hemocitmetro de Neubauer con la laminilla. Se esperan 5 min. y se lee.

Clculo = # de Clulas x 2000. (OPS, 1982)

2.15. HEMATOCRITO

Es el parmetro que mide en porcentaje todos los elementos celulares de la sangre

(leucocitos, plaquetas y hemates) (Sodikoff, 1996).
 17

Se utiliza para su determinacin el mtodo de la micro escala (OPS, 1982), el cual se

realiza con tubos capilares para maximizar la muestra y a su vez mantener la volemia
del paciente (Uhart y Demm, 2000). El resultado se expresa como porcentaje.

2.15.1. Rutina Hematocrito por Microescala

Se puede utilizar cualquier tubo capilar pero se prefieren tubos heparinizados ya que en
la centrifugacin se obtiene un valor cualitativo con la lnea blanca o leucocitaria en el
borde sobrenadante de color rojo (OPS, 1982). Se procede colocando un tubo capilar
sobre la sangre por el extremo heparinizado, crculo rojo o en los sin anticoagulante por
cualquier extremo y se procede como sigue:
Por capilaridad se deja ascender hasta las partes del capilar.
El extremo contrario se tapona con plastilina, arcilla o se sella con calor.
Se ubica el capilar en el cabezote con tubos de ensayo adaptados y se centrfuga
a 12000 rev.min-1 x 6 min.
Se lee en el dispositivo de lectura para microhematocrito con proyeccin de
lnea.

Como resultado se obtienen los siguientes tres valores que tienen gran importancia
clnica:
Del plasma: ndice Ictrico o Lipmico.
De los Glbulos Blancos: Cantidad cualitativa.
De los Glbulos Rojos: Porcentaje, el cual se obtiene como la proporcin de
clulas con relacin al plasma; si est aumentado indica policitemia, no
distinguible a simple vista si es Relativa o Verdadera y si est disminuida se
relaciona con anemia (Hill y Burdick, 1996).

2.16. PROTENAS
Se clasifican en:

2.16.1. Hiperproteinemia
Valores de protenas aumentados, sus causas son: deshidrataciones y formacin de
anticuerpos.
 18

2.16.2. Hipoproteinemia
Valores de protenas disminuidos, sus causas son: inanicin, deficiente alimentacin
con protenas, trastornos hepticos y renales (Guzmn, 2009).

2.17. HEMOGLOBINA

La hemoglobina es una sustancia mediante la cual los eritrocitos transportan el oxgeno

a los tejidos. Generalmente el recuento de eritrocitos, el hematocrito y el contenido de
hemoglobina son paralelos entre s, excepto en ciertas patologas donde existen
alteraciones en la produccin de hemoglobina donde esta proporcin se ve alterada
(Birchard, 1996).
La prueba se hace por la tcnica convencional, bien descrita en la literatura, la cual
consistente en diluir 10 microlitros de sangre en 5 ml de Solucin de Drabkin, para
posterior lectura en espectrofotmetro a 540 nm de longitud de onda (OPS, 1982). El
resultado se expresa en gr/dl y nicamente su disminucin tiene importancia clnica al
ser indicador de anemia cuando aparece junto con otras variables. Cabe anotar que el
valor puede estar aumentado, pero esto es debido a una hemoconcentracin por
deshidratacin o policitemia y no por un real incremento de la hemoglobina en la sangre
(Davidson y Henry, 1978).

2.18. ALTERACIONES ERITROCTICAS

2.18.1. Anemia
Se entiende por anemia a una reduccin de los valores de eritrocitos, la cantidad de
hemoglobina o hematocrito. La anemia no es una enfermedad, sino ms bien el reflejo
de un estado morboso, por lo tanto, debe determinarse la causa para tratar mejor el
trastorno. Pueden dividirse en tres categoras generales: por prdida de sangre, por
hemlisis y por disminucin de la produccin de eritrocitos (Birchard, 1996).
Las anemias se clasifican en:

2.18.1.1. Anemias regenerativas

Son aquellas en las que se observa signos de repuesta de la medula sea como ser:
anisocitosis, policromacia, eritrocitos con corpsculos de howell jolly o con ncleo
(Benjamn, 1991).
Las causas generales de estas anemias son:
 19

a) Hemorragias (internas o externas)

Las causas ms frecuentes son:
Por trombocitopenias, frecuente en ehrlichiosis canina.
Parsitos gastrointestinales.
Otras causas (Parvovirosis, coronavirus, tumores, fragilidad capilar,
intoxicaciones, disfunciones hepticas, etc.).
b) Hemlisis
Son causadas:
Haemoplasmosis en caninos y felinos.
Babesiosis en bovinos, ovinos, caninos, equinos y otros.
Leptospirosis en todas las especies.
Hemoglobinuria bacilar en bovinos y ovinos.
Epiritrozoonosis en porcinos, bovinos y ovinos.
Tripanosomiasis en bovinos, caninos, equinos y otras especies.
Anemia infecciosa equina (Guzmn, 2009).

2.18.1.2. Anemias no regenerativas

En estas son pocos o no hay signos de repuesta de la mdula sea frente a anemias, las
causas pueden ser:
Tumores (anemias normociticas).
Infecciones bacterianas supurativas crnicas (anemias normociticas).
Enfermedades renales crnicas (anemias normociticas).
Hemorragias crnicas (anemias normociticas).
Deficiencias de vitaminas B12 y B6 (anemias macrociticas verdaderas).
Deficiencia de Fe y Cu en lechones (anemias microciticas).
Tanto en las anemias regenerativas y no regenerativas se toma en cuenta el tamao de
los eritrocitos, observndolos en el frotis de sangre o determinado el volumen
corpuscular medio (VCM), as se puede determinar si el tamao de los eritrocitos es
normal o normociticos, aumentado macrocitico y disminuido o microcitico. La
evaluacin adecuada de una anemia se realiza mediante la determinacin de los valores
de hematocrito, hemoglobina, recuento de eritrocitos, volumen corpuscular medio
(VCM) y morfologa eritroctica (Benjamn, 1991).

2.19. POLICITEMIA

Es una alteracin opuesta a la anemia, es el aumento en los valores de hematocrito,

hemoglobina y eritrocitos por encima de los valores de referencia (Benjamn, 1991).
 20

2.19.1. Policitemia relativa

En stas la cantidad de glbulos rojos es normal pero hay una disminucin del volumen
plasmtico por lo tanto el recuento de glbulos rojos /ul est aumentado. Las causas de
policitemia relativa son:
Situaciones fisiolgicas como ser ejercicios, excitacin y miedo. (Protenas
totales del suero normales).
Situaciones patolgicas deshidratacin y pasaje de lquido al intersticio: por
hemoconcentracin. (Las protenas totales del suero estn aumentadas).

2.19.2. Policitemia absoluta

En esta policitemia la masa de eritrocitos y la concentracin de hemoglobina se
incrementan por una mayor produccin celular, las protenas totales del suero son
normales (Guzmn 2009).

2.20. TROMBOCITOS O PLAQUETAS

Tienen su origen en el tejido hematopoytico (formador de sangre) de la mdula sea,

los trombocitos o plaquetas no son clulas, son fragmentos ovoideos de citoplasma, que
se encuentran en la sangre, son irregulares, sin ncleo, tienen gran importancia en la
coagulacin sangunea por su capacidad para agregarse unas con otras en respuesta a
diversos estmulos. Forman cogulos, gracias a que poseen grnulos de sustancias
activadoras de la coagulacin (Campbell, 2008).

2.20.1. Trombocitosis.
Es el aumento del nmero de plaquetas en sangre, las causas son:
Trombocitosis reactiva es por: procesos malignos o infecciosos, deficiencia de
hierro, traumatismos, hemorragias.
Esplenectoma: en vista de que el reservorio esplnico est agotado, existe una
elevacin persistente de la cantidad de plaquetas circulantes.
Trastornos mieloproliferativos y anemias regenerativas (Guzmn, 2009).

2.20.2. Trombocitopenia.
Es la disminucin del nmero de plaquetas en la sangre. Cuentas menores de 50.000/ l.
pueden presentar hemorragias, sangrado prolongado y defectos en la retraccin del
cogulo. La trombocitopenia puede ser: heredada o adquirida.
a) Disminucin o ausencia de produccin de plaquetas pueden ser causadas por:
Supresin del funcionamiento de la mdula sea por medicamentos, por virus,
por radiacin.
 21

b) Destruccin de las plaquetas

Ehrlichiosis canina.
Hipersensibilidad.
Anemia hemoltica autoinmune, lupus eritematoso sistmico, leucemia,
transfusiones de sangre incompatible, trombocitopenia idioptica.
Aglutinacin de las plaquetas por toxinas: endotoxinas, las plaquetas se
aglutinan produciendo un trombo de plaquetas y trombocitopenia.
Coagulacin intravascular diseminada.
c) Hemorragia masiva.
Puede utilizar todas las plaquetas disponibles produciendo una reduccin severa
(Guzmn, 2009).

2.21. BIOQUMICA SANGUNEA

Los anlisis de la sangre han llegado a ser clnicamente importantes por varias razones.
La sangre es el tejido ms fcil de muestrear sin lesionar al animal, una serie de
muestras nos proporciona un cuadro dinmico de los cambios fisiolgicos y patolgicos
en secuencia durante el periodo de muestreo (Medway, 1991).
Las determinaciones ms comunes que se realizan son las siguientes:

2.21.1. Glucosa
En el perro y otras especies, una hiperglucemia marcada y persistente suele deberse a
diabetes mellitus. La liberacin de adrenalina y endgena y la recogida de muestras
despus de las comidas recientes pueden dar lugar a una hiperglucemia transitoria. Las
neoplasias pancreticas, la desnutricin, el hipoadrenocorticismo, el shock, los tumores
no pancreticos y los esfuerzos importantes pueden dar lugar a hipoglucemia (Sodikoff,
1996).

2.21.2. Calcio
El calcio es esencial en la mayora de las reacciones de la coagulacin sangunea y en la
regulacin de la excitabilidad de las fibras musculares. La hipercalcemia puede ser un
signo de una amplia variedad de enfermedades. La causa ms comn es el linfosarcoma.
La hipocalcemia se asocia con desordenes tales como hipoparatiroidismo, deficiencia de
vitamina D y mala absorcin. Los rasgos clnicos de la hipocalcemia dependen de la
causa subyacente, velocidad de desarrollo y la presencia de acidemia (Sodikoff, 1996).

2.21.3. Urea
Es un producto de la desintegracin del metabolismo de las protenas endgenas y
exgenas, su sntesis es heptica, se filtra por el glomrulo y se reabsorbe a nivel
tubular. Los factores que afectan los niveles sricos de urea son el aporte proteico de la
alimentacin, la sntesis heptica y el catabolismo proteico endgeno.
 22

2.21.3.1. Niveles bajos de urea srica

Sobre hidrataciones, insuficiencias hepticas, estados de inanicin, administracin de
anabolizantes.
2.21.3.2. Niveles altos de urea srica
a) Causas prerrenales:
Dietas muy ricas en protenas.
Fiebre, traumas, infecciones, quemaduras extensas.
Hemorragias.
Deshidrataciones acentuadas.
Menor perfusin sangunea del rin (Shock).
En estas causas se puede demostrar el incremento significativo de la urea con un
aumento claro de la densidad de la orina.
b) Causas renales:
Se presenta en casos de glomerulonefritis que reducen el ndice de filtracin
glomerular, en este caso el incremento de la urea supone que la destruccin del
parnquima renal es superior al 70%.

c) Causas post-renales:
Por obstrucciones o roturas de los conductos excretores de la orina debido a
clculos, rotura de vejiga, inflamacin de los urteres y uretra (Guzmn, 2009).

2.21.4. Creatinina
La creatinina es un producto nitrogenado del metabolismo muscular. Los niveles sricos
de creatinina se ven afectados en medida mucho menor por la dieta y el catabolismo
proteico (Sodikoff, 1996).
La creatinina aumenta en sangre cuando disminuye el ndice de filtracin glomerular
como ser: en la insuficiencia renal con uremia, nefritis agudas, nefrotoxicosis. Tambin
en caso de daos musculares extensos (Guzmn, 2009).

2.21.5. Alanina aminotransferasa (ALT)

La Alanina Aminotransferasa (ALT), est presente en grandes cantidades en el
citoplasma de los hepatocitos del perro y del gato. Dicha enzima entra en la sangre
cuando los hepatocitos resultan daados o destruidos y circula por el torrente sanguneo
durante unos das. Esta enzima es un indicador sensible de la lesin heptica activa,
pero no indica la causa o la reversibilidad del dao (Sodikoff, 1996).

2.21.6. Aspartato aminotransferasa (AST)

El Aspartato aminotransferasa (AST), es una enzima ligada a las mitocondrias. Est
presente en diversos tejidos orgnicos, sobre todo en hgado y en el msculo estriado.
 23

La actividad de la AST srica esta elevada en la necrosis del msculo esqueltico y

cardiaco y en la necrosis hepatocelular. Una elevacin de la actividad de AST srica no
acompaada de elevacin de ALT indica necrosis muscular (Sodikoff, 1996).

2.21.7. Fibringeno
Es una protena plasmtica soluble producida en los microsomas de las clulas del
parnquima heptico, es el factor de coagulacin que se encuentra en mayor
concentracin plasmtica. Normalmente no se encuentra fibringeno en el suero porque
en general se consume durante la coagulacin de la sangre normal. Precipitacin de
fibringeno al calor es el mtodo que utilizamos.
2.21.7.1. Valores aumentados:
Inflamacin: bacteriana, traumtica.
neoplsica.
2.21.7.2. Valores disminuidos
enfermedad heptica: en lesiones graves o avanzadas.
Muestras de sangre con coagulo (Benjamn, 1991).

2.21.8. Amilasa
En la inflamacin del pncreas, la necrosis o la oclusin del conducto pancretico se
libera amilasa a la sangre y a la cavidad peritoneal, incrementndose los niveles de
amilasa hasta 2-3 veces los valores normales. El aumento de absorcin debido a la
inflamacin del intestino delgado y la disminucin de la excrecin renal tambin eleva
la actividad de amilasa (Sodikoff, 1996).

2.21.9. Fosfatasa Alcalina

La fosfatasa alcalina est presente tanto en el hgado como en el tejido seo. Las
principales causas de actividad aumentada de fosfatasa alcalina srica en el perro son la
hepatopata colesttica y la administracin excesiva de corticosteroides, crecimiento
seo y tumores seos (Sodikoff, 1996).

2.22. EXAMEN DE ORINA

El anlisis de orina es importante porque nos revela alteraciones locales del tracto
urinario o enfermedades generales del organismo (Guzmn, 2009). El examen de una
muestra de orina est dirigido a demostrar la presencia de componentes anormales
(Medway, 1991). Los procedimientos, son relativamente simples que se realizan para el
anlisis de orina, se efectan en unos minutos y pueden proporcionar informacin muy
valiosa (Benjamn, 1991).
El examen de orina se realiza a travs de exmenes fsico, qumico y por observacin
microscpica del sedimento urinario. El anlisis de orina consiste en varias pruebas que
detectan deficiencias del tracto urinario y alguna enfermedades del metabolismo, as
 24

como la insuficiencia heptica. Esta serie de pruebas constituyen un mtodo rpido y

econmico de deteccin de hepatopatas, diabetes mellitas y acidosis, as como de
valorar lesiones activas del rin y de la vejiga urinaria. El anlisis de orina es ms
especfico cuando se toman muestras secuenciales mediante cistocentesis, sondaje o
miccin (Sodikoff, 1996).

2.22.1. Examen fsico

Ciertos caracteres de la orina se aprecian con la observacin de la orina en el tubo de
ensayo en el que se puede determinar:

2.22.1.1. Color
El color de la orina puede proporcionar una idea general acerca de la concentracin de
la orina. Adems se puede obtener informacin acerca de la presencia de impurezas de
origen patolgico, tanto los medicamentos como tipo de alimentacin puede influir
mucho sobre el color de la orina (Kraft y Drr, 2000).
Las orinas con hemoglobinuria se pueden observar de color normal hasta castao
oscuro. La hemoglobinuria sin hematuria se debe a la existencia de hemoglobina libre
en la sangre (Dr. Tango, 2010).

2.22.1.2. Olor
Cada especie animal tiene un olor de orina particular, influenciado sobre todo por la
cantidad y tipo de cidos grasos voltiles que contienen. Un olor amoniacal fuerte en
orina fresca podra indicar una infeccin en el tracto urinario, debido a bacterias
productoras de ureasas, que trasforman la urea en amoniaco, tambin en casos de cetosis
se produce un olor a acetona o frutas en descomposicin (Guzmn, 2009).
La cetosis es una situacin metablica del organismo originada por un dficit en el
aporte de carbohidratos, lo que induce el catabolismo de las grasas a fin de obtener
energa, generando unos compuestos denominados cuerpos cetnicos. (Kreisberg,
2006).

2.22.1.3. Transparencia
Las alteraciones segn la transparencia pueden ser:
a) Clara: Orina recin evacuada del animal normal, excepto en el caballo, en quien se
encuentra normalmente espesa y turbia debido a los cristales de carbonat de calcio y al
moco.
b) Turbia: no es necesariamente patolgica ya que muchas muestras se enturbian si se
dejan reposar, la causa de la prdida de la transparencia se determina mejor por el
examen microscpico del sedimento, pero predomina turbidez de la orina, la presencia
de sangre, bacterias, cristales, y otros (Benjamn, 1991).
 25

2.22.1.4. Densidad
Determina el grado de concentracin de la orina: es el cociente entre la masa de la
solucin a estudiar y la masa de un volumen igual de agua (al ser un cociente entre dos
magnitudes iguales no tienen unidades); o tambin se define como el grado de
reabsorcin tubular renal. Valores inferiores a 1.007 indican una incapacidad del
rin para concentrar la orina puede presentarse en procesos diabticos,
administracin o ingestin excesiva de fluidos (Guzmn, 2009).

2.22.2. Examen qumico

2.22.2.1. Protenas
Normalmente la orina no contiene protenas. La funcin normal del glomrulo depende
de la integridad del ovillo glomerular. Todo factor que aumente la permeabilidad del
glomrulo o disminuye la capacidad de reabsorcin del tbulo produce proteinuria
(Medway, 1991).
Proteinuria fisiolgica: es transitoria y se debe a un aumento temporal de la
permeabilidad glomerular debido a congestin capilar: ejercicio muscular excesivo,
convulsin, estrs emocional (Benjamn, 1991).

2.22.2.1.1. Proteinuria patolgica:

a) renal: Se debe al aumento de la permeabilidad de los glomrulos, trastorno en la
reabsorcin de las protenas, que normalmente se presenta en el filtrado glomerular por
enfermedad tubular se va dar en casos de: nefritis, glomerulitis, nefrosis: especialmente
si se debe a intoxicacin por productos qumico.
b) Post-renal: Las protenas entran en la orina despus que esta sale de los tbulos
renales por contaminacin con los exudados o sangre se presenta en: se produce cuando
hay inflamacin en el tracto urinario inferior vejiga, uretra, prstata, para diferenciarla
de la renal, adems del cuadro clnico, se puede ver que en la proteinuria post-renal,
hay tambin sangre y leucocitos en orina (Guzmn 2009).

2.22.2.2. PH
La reaccin de la orina est muy influida por la alimentacin. La orina de animales
lactantes y carnvoros presenta un ph acido, por el contrario la orina de los herbvoros es
alcalina (Kraft y Drr, 2000).

2.22.2.3. Glucosa
En la orina de los animales sanos no se encuentra glucosa, aparecer una glucosuria si
se rebasa el umbral renal de la glucosa. El nivel de este umbral renal presenta
diferencias entre especies e incluso entre individuos, normalmente la glucosa excretada
ligeramente con la orina primaria en los glomrulos se absorbe totalmente en los
tbulos, pero en cuanto la glucosa sangunea sobrepasa el lmite superior (permanente o
transitorio) se excede la capacidad de reabsorcin y aparece glucosa en la orina (Kraft y
Drr, 2000).
 26

Si aparece glucosuria y niveles de glucosa plasmticas superiores a 180-200 mg/dl

puede indicar la presencia de diabetes que excede el umbral de la reabsorcin de
glucosa del rin (Guzmn, 2009).

2.22.2.4. Cuerpos cetnicos

Los cuerpos cetnicos incluyen la acetona, un estado en el cual esta sustancia se
encuentra presentes en excesos en la sangre y orina se conoce con el nombre de cetosis.
La cetosis es frecuente en vacas lecheras de alta produccin y en ovejas con embarazo
gemelar, asociadas a raciones deficientemente balanceadas en energa para estos
animales (Benjamn, 1991; Guzmn, 2009).

2.22.2.5. Sangre
S tras centrifugar la orina se comprueba que hay eritrocitos en el sedimento indica
hemorragia o inflamacin, en el tracto urinario. Si las tiras reactivas dan positivo a
sangre debemos diferenciar entre:
Hemoglobinuria.-Se asocia con una destruccin de eritrocitos en la circulacin
sangunea, as el paciente tendr signos de anemia por ej. En casos de
hemoglobinuria bacilar, leptospirosis, babesiosis, y otros. Se observan signos de
respuesta de la medula sea frente a anemia en el hemograma.
Mioglobinuria. -Se asocia a procesos de lesin muscular, el paciente tendr
aumentada la creatinina en el plasma y signos de dao muscular.

2.22.2.6. Leucocitos
Las tiras reactivas pueden dar positivo a sangre y algunas inclusive pueden detectar
presencia de leucocitos lo que se corrobora con el examen de sedimento. Indicndonos
una infeccin bacteriana o un proceso de hipersensibilidad secundaria a depsito de
Ag.-Ac. en el rin (Guzmn, 2009).

2.22.2.7. Bilirrubina
En condiciones normales la bilirrubina se encuentra en la orina siempre en forma
conjugada. Solo en el caso de hemorragia renales pueden aparecer bilirrubina primaria,
formada en el epitelio de los tbulos a partir de la hemoglobina que se excretara con la
orina (Kraft y Drr, 2000).

2.22.2.8. Urobilingeno
La ausencia de urobilingeno en la orina junto con signos hepatopata obstructiva o
elevacin de la bilirrubina indica una obstruccin completa de los conductos biliares.

2.22.3. Examen de sedimento

El sedimento de una muestra de orina centrifugada contiene diversas cantidades de
elementos como ser: hemates, leucocitos, clulas epiteliales, cristales y cilindros.
 27

Cuando dichos elementos superan las cantidades aceptables, se considera un sedimento

activo y denota una enfermedad aguda del tracto urinario (Sodikoff, 1996).

2.22.3.1 Clulas sanguneas

Es normal encontrar de 0 a 3 eritrocitos o leucocitos por campo un nmero aumentado
sugerir hemorragia y/o inflamacin del tracto urinario.

2.22.3.2. Bacterias
En condiciones normales no aparecen si la orina ha sido obtenida aspticamente, pero si
pueden aparecer en casos donde se recolecte con catter. La presencia de bacterias en
orina recogida aspticamente indica un proceso infeccioso.

2.22.3.3. Cristales
Aunque tradicionalmente se le han dado bastante importancia, no tienen significacin
clnica clara. Se puede destacar en:
Cristales de burato amnico o uratos amorfos, pueden indicar insuficiencia
heptica.
Cristales de fosfato triple en carnvoros indican una inflamacin en el tracto
urinario.
Cristales de cistina se asocian con urolitos de cistina y metabolismo alterado de
las protenas (Sodikoff, 1996).

2.22.3.4. Cilindros
Los cilindros urinarios se forman en la luz de los tbulos dstales y en los tbulos
colectores renales, donde la orina puede alcanzar su mxima concentracin y acidez que
favorece la precipitacin de protenas, dando lugar a una variedad de cilindros. La orina
puede contener hasta uno o dos cilindros hialinos o granulares por campo a gran
aumento en condiciones normales (Sodikoff, 1996).

2.23. EXMENES COPROLGICOS

El objetivo principal de la parasitologa clnica es la determinacin del estatus

parasitario del paciente, y con ello establecer las medidas decisivas de profilaxis y
quimioterapia (Kraft, y Drr, 2000).
Mediante estos exmenes podemos determinar la presencia de parsitos, huevos de
parsitos, pigmentos biliares, bacterias, restos de alimentos sin digerir. Las heces
pueden contener tambin todo gnero de materiales indigeribles, o sin digerir. Algunos
 28

son residuos de la dieta, como fibras de cereales, otros que no son alimentos por
ejemplo pelo, papel, grasa, pueden ser comidos particularmente por animales jvenes.
Alguna de estas sustancias se puede presentar en las preparaciones de heces para el
examen microscpico (Bush, 1982).

2.23.1. Mtodos de examen

2.23.1.1. Extensin fecal directa
Es muy rpida y sencilla de hacer, siempre que los huevos de vermes y ooquistes se
encuentres en grandes cantidades pero Es posible que la pequea cantidad de heces
tomada para hacer la extensin no contenga ninguno de ellos, Por consiguiente, si este
mtodo no presenta evidencias de parasitismo es aconsejable hacer los mtodos de
concentracin (Guzmn, 2009).

2.23.1.2. Mtodos de flotacin

2.23.1.2.1. Flotacin simple
La muestra de heces se introduce en un tubo de centrfuga junto con una solucin de
flotacin, en la que los huevos ms ligeros, ayudados por el centrifugado, flotan en la
superficie. Desde ah se toman con un cubre objeto o se puede coger con un asa
metlica pasndolos a un portaobjeto.

2.23.1.2.2. Mac-master (HPG).

Esta tcnica es de uso comn para encontrar los huevos de nematodos gastrointestinales
(strongylus, strongyloides, trichuris, etc) de rumiantes y requiere una cmara de conteo
denominada cmara de Mac master. El clculo es el total de huevos encontrados
dentro de la cmara multiplicado por 100, dando el resultado de HPG (Bueno, 1970).

2.23.1.3. Sedimentacin
Los huevos de alta densidad, es decir los de los trematodos como fasciola,
paramphistomun, y cestodos como dyphyllobotrium latum, as como algunas especies
de coccidios del caballo ( eimeria leuckarti) se hunden en el agua corriente yendo al
fondo del vaso por lo tanto este mtodo es adecuado para determinar estos tipos de
huevos (Kraft y Drr, 2000).

2.24. EXMENES DERMATOLGICOS

Los problemas dermatolgicos, son variados y frecuentes. Sus causas son: caros,
hongos, bacterias, levaduras, problemas alrgicos, trastornos hormonales, tumores,
deficiencias de minerales y otros, por lo que en casos de cualquier tipo de anormalidad
 29

en este lugar, se aconseja realizar el examen microscpico correspondiente (Guzmn,

2009).

2.24.1. Obtencin de la muestra

Un raspado de piel est dirigido a detectar la causa de dermatosis. Para detectar caros y
hongos se hacen raspados profundos, incluyendo pelos y sus races, hasta que salga un
poco de sangre. Si no se presenta hemorragia, esto indica que el raspado no se ha hecho
con suficiente profundidad para garantizar que se ha recogido cualquier acaro que est
presente en la piel. Para observar el raspado de piel y detectar caros y hongos, se
coloca la muestra en un portaobjeto, se disuelve con hidrxido de sodio al 10%.

Raspados profundos de piel en algunos tipos de lesiones sirven para hacer frotis o
impresiones para estudios citolgicos y para hacer diferenciacin entre tumores y
problemas infecciosos. Para el caso de bacterias se hacen impresiones en portaobjetos
de los raspados profundos y superficiales de piel o se recogen en hisopos estriles para
realizar cultivos (Guzmn, 2009).

2.25. EXMENES CITOLGICOS

Los anlisis citolgicos de rganos y tumores es un dominio muy importante de la

actividad clnica de los veterinarios (Guzmn, 2009).

2.25.1. Evaluacin de extensiones citolgicas

La primera pregunta que el examinador se debe plantear al evaluador una extensin
citolgica de una alteracin tisular, es si las clulas observadas son de tipo tisular
normal o inflamatoria. En el segundo caso habr que especificar de qu tipo de clulas
tisulares e inflamatorias se trata:

Si las clulas son granulocitos neutrfilos la inflamacin es aguda o subaguda.

Si predominan los macrfagos o monocitos el proceso inflamatorio es crnico,
tambin pueden aparecer clulas epiteloides.
Los mtodos citolgicos solo permiten determinar en parte la intensidad del
proceso inflamatorio, aunque es mejor determinarlo, histolgica o clnicamente.
Si aparece una neo formacin tisular, los llamados criterios de malignidad
proporcionan informacin sobre una multiplicacin celular irregular e intensiva.
 30

Aunque la ausencia de criterio de malignidad en estos exmenes no siempre es

un criterio de benignidad de tejido en cuestin.
Los criterios generales de malignidad estn relacionados con:
Pleomorfismo celular (de forma celular variada pero de una misma poblacin
celular).
Macrocitosis (clulas de mayor tamao de lo normal).
Anisocitosis (marcada desigualdad de tamao celular).
Riqueza celular (clulas malignas que se desprenden ms fcilmente que las
sanas).
Macrocariosis (ncleos celulares de tamao superior).
Relacin ncleo/ citoplasma aumentado.
Anisocariosis (grandes variaciones irregulares del tamao del ncleo).
Clulas polinucleadas.
Estructura atpica de la cromatina.
Hipercroma de la pared del ncleo.
Comprensin de la pared del ncleo.
Macronucleolos.
Nuclolos atpicos.
Anisonucleosis.
Mitosis anormales.
Ritmo de mitosis.
Basofilia el citoplasma.
Vacuolizacin citoplasmtica.
Fagocitosis y canibalismo celular.

2.25.2. Carcinomas y sarcomas

Puede reconocerse una formacin tisular maligna y establecer su diagnstico en poco
tiempo, aunque no siempre se puede especificar exactamente de qu tumor se trata, pero
desde el punto de vista clnico tampoco es imprescindible, aunque en casos de duda
realizar un examen histolgico.

Los carcinomas tienen clulas grandes, redondas o polidricas, a menudo en

grupos, o en estructuras de acinos.
 31

Los sarcomas, las clulas son pequeas o de tamao medio a veces en forma de
huso, no se agrupan, son pocas, los ncleos son ovalados o alargados. En
algunos casos los tumores benignos pueden pasar a malignos.
Es importante considerar las caractersticas macroscpicas de los tumores para
relacionar con las alteraciones citolgicas.

Los tumores ms comunes de piel son:

Linfosarcoma o linfomas.
Mastocitomas.
Histiocitoma.
Fibrosarcomas o fibromas.
Lipomas.
Sarcomas de sticker.

Muchas muestras biolgicas obtenidas por biopsia o necropsia e inclusive las

secreciones obtenidas post -puncin nos pueden dan pistas por su naturaleza celular y
sobre que evento fisiolgico o patolgico est sucediendo. Para ello la Tincin rpida de
H y E debido a sus capacidades tintoriales por gradientes de pH permite establecer con
certeza la naturaleza de la muestra biolgica (Gavio, 1975). En este caso se procede
as:
Tincin general de Hematoxilina y Eosina
Poner la muestra sobre la lmina y si es necesario hacer squach
Adicionar Hematoxilina 12- 15 min.
Lavar con Agua
Adicionar Solucin Acida 15 seg. mximo
Lavar con agua
Agregar Solucin Bsica hasta que el frotis muestre un color azul.
Lavar con agua
Adicionar Eosina mximo 20 seg.
Lavar con agua.
Observar: Las estructuras acidfilas (Ncleos Celulares) se tien de color azul;
las estructuras Basfilas (Citoplasmas, Fibras y Formes) se tien de color rosado
(Gavio et al, 1975).
Melanoma, que generalmente tiende a la malignidad (Guzmn, 2009).
 32

2.26. MICROBIOLOGA

El estudio y conocimiento bsico de la microbiologa aporta en medicina veterinaria la

etiologa de las enfermedades infecciosas lo cual desencadena finalmente en la medicina
preventiva, que es el corolario de la proteccin en salud pblica.
La investigacin microbiolgica bacteriana se realiza con base en la tincin diferencial
de Gram y la taxonoma bacteriana basada en la forma (cocos y bacilos). Estas son la
base del diagnstico clnico (Koneman, 1987). Para ello se usa la Tincin de Gram se
utilizan las siguientes soluciones:
Solucin saturada de cristal violeta o violeta de genciana se prepara mezclando
4 g. de colorante en 20 ml de alcohol etlico al 95 %. Se le agrega 10 ml de
oxalato amnico al 1 %. Solucin yodada de Gram se logra mezclando 1g de
yodo con 2 g. de KI en 300 ml de agua destilada y guardar en frascos Ambar.
Solucin de alcohol-acetona se prepara mezclando 70 partes de alcohol etlico al
95 % por 30 partes de acetona.
Solucin acuosa de fuscina se logra mezclando 2 g. de colorante en 15 ml de
alcohol etlico al 95 % (OPS, 1982)

2.26.1. Tincin de Gram:

Se toma frotis y se seca al ambiente con posterior adicin de calor por 1 a 3 min
evitando quemar.
Adicionar cristal violeta por 60 seg.
Lavar con agua destilada.
Adicionar el mordiente de lugol por 1 min. Verter el exceso.
Adicionar alcohol acetona y secar por 15 seg. mx.
Lavar con agua.
Adicionar el colorante de contraste fucsina por 60 seg.
Lavar con agua
Observar morfologa y tincin de Gram: positivo color azul y negativo color
Rojo

Otras tinciones diferenciales y los reactivos que las componen son:

 33

2.26.2. Tincin de Shaefer- Fulton:

Para bacilos esporoformadores con verde de malaquita al 1% p/v en 100mol de agua
El frotis se cubre en exceso con verde de malaquita.
se calienta hasta emanacin de vapores 3 o 4 veces por 30 seg.
Se lava el exceso de colorante con agua destilada durante 30 seg.
Se la adiciona fuscina de Gram y luego lavar.
Observar bacilos esporulados con esporas de color verde y las partes vegetativas
de color rojo (Koneman et al, 1987).

2.26.3. Tincin Ziehl Nielsen

Para mycobacterium acido resistentes, requiere de:
La solucin de fuscina fenicada: se prepara mezclando 1 gr. de fuscina bsica con 10
ml de alcohol etlico al 95 % a los que se les adicionan 90 ml. de fenol o cido fnico al
5 %.
Solucin alcohol cido: Se prepara mezclando 2 ml. de HCL de alta graduacin con 98
ml de alcohol etlico al 95 %.
Solucin de azul de metileno al 5 %: Se mezclan 10 g. de azul de metileno en 100 ml.
de agua destilada.
Rutina de Coloracin:
Al frotis habitual se le adiciona la fuscina fenicada en exceso.
luego se calienta hasta produccin de vapores por espacio de 3 min.
Se decolora con solucin alcohol cido y finalmente se colorea de nuevo con
solucin de azul de metileno.
Lavar y observar. Acido resistentes positivos tien rojo y cido resistente
negativo azul (Davies, 1984).

2.27. CULTIVOS

Es necesario en el laboratorio aislar colonias bacterianas con el fin de establecer de

manera particular actividades bioqumicas de las bacterias que posteriormente permiten
hacer una aproximacin taxonmica hasta gnero (Koneman, 1987). Las normas
generales para realizar los medios de cultivo son:
El material de vidrio se esteriliza en calor seco y/o autoclave.
 34

Se preparan los agares segn las proporciones mencionadas por el fabricante en

las cantidades requeridas.
Se calienta el agua en un Erlenmeyer y se disuelve el agar.
Se esteriliza con calor hmedo o autoclave a 120 c y 15 libras de presin por
20 min. 5) Se sirve en cajas de Petri previamente esterilizadas.
Se dejan 24 horas en sensibilidad a 37 C (Koneman et al, 1987).

2.27.1. Agar Nutritivo

Es el mismo agar comn; su relacin es de 28 g / L. Este es un medio general base. All
crecen todo tipo de hongos y bacterias. Es importante conocer la morfologa de la
colonia. Si es cremosa redonda probablemente son cocos; si es seca e irregular
probablemente son bacilos. Sobre este agar se realiza el antibiograma respectivo a
travs de sensidiscos segn el antibitico (Koneman et al, 1987).

2.27.2. Agar Sangre

Se prepara inicialmente como el agar nutritivo hasta servirlo en cajas de Petri y se
calienta hasta llegar a 42 C cuando se le adiciona sangre sin anticoagulante en relacin
de 100 ml. de agar en volumen (preparado) por cada 3 ml de sangre. Es un medio
diferencial para establecer patrones de alfa-hemolisis incompleta o beta-hemlisis
completa en cepas patgenas. La hemlisis se lee como halo de transparencia alrededor
de la colonia (Koneman et al, 1987)

2.27.3. Agar MacConkey

Es un medio selectivo y diferencial utilizado para la recuperacin de enterobacterias y
bacilos Gram negativos entricos relacionados. Contiene sales biliares y cristal violeta
que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas y de algunas Gram negativas
exigentes. La lactosa es la nica fuente de carbono. El indicador es el rojo neutro. Las
bacterias fermentadoras de lactosa formas colonias de diferentes tonos de rojo. Los
fermentadores fuertes de lactosa pueden provocar la precipitacin de las sales biliares
por la gran cantidad de cidos formados, lo que se observa fcilmente en el medio por la
aparicin de zonas opacas alrededor de las colonias. Las bacterias que no fermentan la
lactosa forman colonias incoloras o transparentes (Casado C. y Torrico G., 2012).
 35

2.27.4. Agar Salado Manitol

Su relacin es de 108 g /L. Determina manitol; en cepas de estafilococos patgenas
quienes son adems halfitas. El medio preparado es de color rosado o rojizo. Las
colonias manitol se observan con halo amarillo luminoso y el manitol; son colonias
pequeas y sin brillo (Davies, 1984).

2.27.5. Agar chocolate

Este medio usa la misma base que el agar sangre. En un principio, los eritrocitos se
adicionaban a la base fundida y luego se elevaba la temperatura (alrededor de 85C)
para lisar parcialmente las clulas, lo que otorgaba al medio el color pardo-chocolate.
Actualmente, la hemoglobina y otros nutrientes presentes en los lisados de los glbulos
rojos, como hemina (factor X) y coenzima NAD (factor V), se aaden como
suplementos a un agar base muy rico. Tambin se puede agregar IsoVitaleX, un
suplemento definido que proporciona el factor V, vitaminas, aminocidos, coenzimas,
glucosa, iones frricos y otros factores que favorecen el crecimiento de especies
exigentes (Casado C. y Torrico G., 2012).

2.27.6. Agar glucosa de Sabouraud

Este medio fue desarrollado para el cultivo de hongos patgenos, especialmente de los
productores de micosis superficiales. En la actualidad se recomienda slo para el
aislamiento primario de dermatofitos, con el agregado de cicloheximida y cloranfenicol.
El pH final (alrededor de 5,6) es mucho menor que el de la mayora de los medios y
tiende a eliminar el crecimiento bacteriano. Los subcultivos de los hongos aislados
originalmente en BHI pueden presentar una morfologa ms uniforme en agar glucosa
de Sabouraud, por esto es til para la identificacin de hongos una vez aislados (Casado
C. y Torrico G., 2012).

2.27.7. Caldo Tioglicolato

Es un medio lquido de color amarillo pardo preparado con una relacin de 29 g / lt. Se
envasa en tubos de 5 ml. de capacidad y sirve como medio de transporte. Se usa para
cultivos anaerbicos al sellarlo con parafina o aceite de ricino despus del sembrado.
Hay anaerobiosis si aparecen burbujas o si hay desplazamiento del tapn de parafina
(Davies, 1984).
 36

2.27.8. Agar C.L.E.D

El medio C.L.E.D. (Cistina Lactosa Electrlito Deficiente) est recomendado para el
recuento e identificacin presuntiva de los microorganismos de las vas urinarias. Su
bajo contenido en electrolitos evita la invasin de los cultivos por Proteus. La presencia
de lactosa en su composicin le confiere el carcter de medio diferencial, aunque la
interpretacin sea diferente al anterior medio por la incorporacin de otro indicador: el
azul de bromotimol. Las colonias lactosa positivas aparecern de color amarillo y las
lactosa negativas lo harn con un color verdoso, blanco o azulado (Casado C. y Torrico
G., 2012)
2.27.9. Agar S.S.
Medio de cultivo utilizado para el aislamiento de Salmonella spp. y de algunas especies
de Shigella spp. A partir de heces, alimentos y otros materiales en los cuales se
sospeche su presencia.
Fundamento
Es un medio de cultivo selectivo y diferencial. La selectividad, est dada por la sales
biliares y el verde brillante, que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas, de la
mayora de los coliformes y el desarrollo invasor del Proteus spp. Es diferencial debido
a la fermentacin de la lactosa, y a la formacin de cido sulfhdrico a partir del
tiosulfato de sodio. Los pocos microorganismos fermentadores de lactosa capaces de
desarrollar, acidifican el medio haciendo virar al rojo el indicador de pH, obtenindose
colonias rosadas o rojas sobre un fondo rojizo. Salmonella, Shigella y otros
microorganismos no fermentadores de lactosa, crecen bien en el medio de cultivo, y
producen colonias transparentes. La produccin de cido sulfhdrico se evidencia como
colonias con centro negro debido a la formacin de sulfuro de hierro. Para aumentar la
selectividad, se recomienda incubar previamente la muestra en Selenito caldo (Casado
C. y Torrico G., 2012).

2.27.10. Agar Mueller-Hinton

El Agar Mueller Hinton es un medio utilizado para realizar las pruebas de
susceptibilidad antimicrobiana en microorganismos aerbicos por el mtodo de Bauer-
Kirby. Este medio tambin es conocido como Agar M-H. Bauer, Kirby, Sherris y Tuck
recomendaron el Agar de Mueler Hinton para llevar a cabo las pruebas de
susceptibilidad a antibiticos, utilizando un solo disco impregnado con una alta
concentracin de un antimicrobiano. El Agar Mueller Hinton cumple con los
 37

requerimientos de la Organizacin Mundial de la Salud y est especificado en la FDA.

Este medio es el seleccionado por la NCCLS (National Commitee for Clinical
Laboratory Standards) para realizar las pruebas de susceptibilidad, por su alta
reproducibilidad, su bajo contenido de substancias inhibidoras y el crecimiento
satisfactorio que presentan la mayora de los patgenos no fastidiosos. Con este medio
se han llevado a cabo una gran cantidad de estudios sobre susceptibilidad
antimicrobiana (Casado C. y Torrico G, 2012)

2.28. PRUEBAS PARA TIPIFICACIN BIOQUMICA:

2.28.1. Prueba de la Catalasa

A una colonia aislada se le adiciona una gota de H2O2 . Si hay burbujeo es catalasa y
cuando es catalasa negativo no hay cambios. El perxido de hidrogeno debe estar
preparado al 3 %.

2.28.2. Prueba de la Coagulasa:

A un frotis de una colonia aislada se le adiciona una gota de plasma sanguneo con
EDTA. Si aglutina el plasma es coagulasa y lo contrario es coagulasa negativo (Davies
et al, 1984).

2.28.3. EMB:
El medio usa una relacin de 36 g /L. Es un medio selectivo indicado para
enterobacterias en las cuales adems se puede determinar su capacidad para fermentar
lactosa, clasificndose como colonias lactosa + cuyo color es rojizo con brillo verde
metlico y lactosa negativo para colonias cuya coloracin es clara, mbar o casi
incolora. (Davies, 1984).

2.29. PRUEBAS PARA TIPIFICACIN BIOQUMICA SERIADA

Todas las pruebas bioqumicas aqu mencionadas se hacen con sistemas comerciales de
identificacin microbiana para enterobacterias, usando el Kit comercial, el cual consta
de una serie de microtbulos con 20 agares deshidratados que se reconstituyen al hacer
la respectiva siembra por inoculacin. Entre las pruebas que realiza el KIT sobresalen:
 38

2.29.1. Triple azcar hierro

Determina formacin de H2S por reduccin del tiosulfato y degradacin de azucares
por peso especfico ordenados de arriba a abajo as: Lac, Sac, Gluc. La fermentacin del
azcar especfico se detecta por viraje del color del medio de rojo fenol originalmente a
amarillo. Tambin se puede establecer la formacin de gas por desplazamiento del
medio en el tubo de ensayo.

2.29.2. Sulfuro indol motilidad (SIM)

El medio originalmente es de color amarillo. Determina la formacin de H2S por
motilidad con migracin perpendicular a la puncin. Indol se lee al agregarle 5 gotas de
reactivo de Erlich o de Kovacs, encontrando que si han degradado el triptfano y
formado en anillo de Indol se colorear el medio de color rojo.

2.29.3. Lisindescarboxilasa (LIA)

El medio preparado es de color violeta dado por el prpura de bromocresol. Si el medio
cambia a pardo es Lisin positivo, Si vira a amarillo es Lisin negativo.

2.29.4. Citrato de simons o Fermentacin del citrato

El medio es de color verde dado por el colorante purpura de bromotimol. Vira de verde
a azul cuando es citrato y no hay cambio cuando es citrato negativo.

2.29.5. Rojo de Metilo- Voges Prostkauer (MR-VP)

El medio debe hacerse en prueba doble: para MR se le adicionan 5 gotas de rojo de
metilo y vira a rojo si es MR positivo. Para VP se adiciona alfa naftol y NaOH al 40 %
.Se lee positivo por formacin del anillo de color rojo.

2.29.6. Urea
El medio es amarillo siendo ureasa positiva al virar al rojo (Koneman, 1987).
 39

III. ACTIVIDADES REALIZADAS EN LA PRCTICA

3.1.- Reconocimiento de la clnica veterinaria patovet

Se realiz un reconocimiento de la clnica patovet, todos los ambientes
correspondientes, luego se procedi a realizar las actividades encargadas. Iniciando en
el rea de microbiologa, rea de parasitologa, bioqumica sangunea, hematologa, el
rea de citologa animal y patologa.

3.2. Preparacin de medios de cultivo

El primer da el encargado del rea de microbiologa una demostracin del preparado
de los diferentes medios de cultivo as mismo medios de transporte de muestras; las
usadas en el laboratorio patovet tenemos:
Agar nutritivo:
Fue usado normalmente como rutina para todo tipo de bacteria. Es muy til porque
permanece solido incluso a relativas altas temperaturas. Adems, el crecimiento
bacteriano en este agar lo hace en la superficie, por lo que se distinguen mejor las
colonias pequeas.
Agar sangre:
Es un medio enriquecido que se utiliz adems para la investigacin de los diversos
tipos de hemlisis (, o gamma). Se utiliz para el crecimiento de estreptococos. Para
la preparacin del agar sangre se puede utilizar el agar nutritivo enriquecido con cloruro
sdico o un preparado enriquecido con otras sustancias como Columbia o el triplicase
de soja. La adicin de sangre a un medio de cultivo no proporciona las sustancias que
estn en el interior de los Hemates, pero s puede aadir factores inhibidores del
crecimiento bacteriano presentes en el suero.
Agar chocolate:
El agar chocolate se obtiene calentando la sangre antes de adicionarla a la media base.
Por esta razn el agar chocolate contiene hemoglobina, que aporta al medio un
importante elemento para el crecimiento: el factor X o hemina termoestable. El agar
chocolate es un medio destinado principalmente al aislamiento de Neisserias
(gonococos y meningococos) y Haemophilus, pero en l pueden crecer muchos otros
microorganismos exigentes.
 40

Agar MacConkey:
Es un medio utilizado para el aislamiento e identificacin de enterobacterias. Es un
medio inhibidor de los grmenes Gram positivos por su contenido en cristal violeta y
selectivo para enterobacterias por su contenido en sales biliares. En su composicin
lleva un azcar (lactosa) y un indicador (rojo de metilo) que lo convierten en un medio
diferencial. Los grmenes que fermenten la lactosa producen una acidificacin del
medio que hacen aparecer de color rojo fuerte a las colonias resultantes. Las colonias
lactosa negativas sern incoloras, apareciendo del mismo color que el medio subyacente
(naranja).
Agar Mueller-Hinton:
El Agar Mueller Hinton es un medio utilizado para realizar las pruebas de
susceptibilidad antimicrobiana en microorganismos aerbicos por el mtodo de Bauer-
Kirby. Este medio tambin es conocido como Agar M-H.
Agar manitol salino:
Es un medio de cultivo que permite el crecimiento de un determinado grupo de bacterias
mientras que inhibe el crecimiento de otras. Este medio es importante en el laboratorio
clnico debido a que es capaz de distinguir el microorganismo patognico en un corto
periodo de tiempo.
Agar sabouraud
Es un medio de cultivo muy utilizado para aislar hongos de animales. Sirve para el
aislamiento y mantenimiento de hongos en tubo inclinado. Debido a su composicin,
los hongos crecen exuberantemente y esporulan bien.
IMAGEN N 01: Preparando agar IMAGEN N 02: Preparando agar
Nutritivo sabouraud

Fuente: Elaboracin Propia

 41

3.3. Cultivo de bacterias en diferentes agares para su identificacin

El mtodo que se us por lo general fue la siembra por estras; lo cual es un mtodo ms
fcil y el ms usado, Para ello, con un asa de siembra se cogi una pequea cantidad de
muestra y a continuacin se realiz estras sobre el medio solido preparado en una placa
Petri. Conforme se hacen estras en zigzag con el asa, se flamea el asa, luego se coge la
muestra y se sigue haciendo las estras.
Si hay varias muestras, la placa se puede dividir en varios cuadrantes que sea
conveniente y cada cuadrante tiene que estar bien rotuladas.
A continuacin, las placas se incuban en un lugar adecuado, permitiendo que las
bacterias aisladas aumenten en nmero suficiente de divisiones para formar colonias
visibles y su lectura se realiza a las 24 horas post siembra.

IMAGEN N3: siembra de bacterias en los IMAGENN04: los medios de cultivos se

Medios de cultivo estn ventilando para llevar a la estufa

Fuente: Elaboracin Propia

3.4. Cultivo de hongos

El cultivo de hongos en el laboratorio de realiz en agar sabouraud, donde se cogio una

muestra con un isopo esteril y se coloco en el fondo del tubo falcon que contiene agar
sabouraud lo cual se deja 48 horas para dar la lectura correspondiente.
 42

IMAGEN N 05 Y 06: Siembra de hongos Fuente: Elaboracin Propia

3.5. Antibiograma
Se tom con una jeringa una pequea cantidad de suero fisiolgico estril (2-5 ml) y lo
vertemos en un tubo de ensayo. A partir de la placa problema, que contena colonias del
microorganismo cuya sensibilidad a los antibiticos queremos determinar, se tom una
muestra superficial de una sola colonia con un asa de siembra. Se introdujo el asa de
siembra con la muestra en el tubo y agit el asa para realizar una suspensin de las
bacterias en el suero fisiolgico. Al acabar echamos al contenedor de residuos el asa de
siembra.
Luego se introdujo un hisopo estril en el tubo, se moj el hisopo estril en la
suspensin. Se escurri el exceso de lquido contra las paredes del tubo de ensayo. Es
importante que la siembra sea superficial, sin profundizar en el medio de cultivo. Se
tap la placa y se rotul indicando el nombre de la muestra y el cdigo de la muestra.

Colocacin de los discos de antibitico

Se Tom con las pinzas y no se debe con la mano, un disco de cada uno de
los antibiticos que se facilitan (cada disco es un papel de filtro
que contiene una suspensin de uno varios antibiticos a la concentracin teraputica).
Se deposit el disco suavemente sobre la placa, sin tocar la superficie con las pinzas. Es
muy importante que el disco contacte con el medio de cultivo en un nico
sitio. Realizamos la misma operacin con los otros antibiticos, colocando los nuevos
discos separados de los anteriores, formando un hexgono. Luego de 24 horas se da la
lectura.
 43

IMAGEN N 07: Realizando antibiograma IMAGEN N 08: Realizando la lectura

Fuente: Elaboracin Propia

3.6. Examen coprolgico

3.6.1. Examen macroscpico

Por medio de la observacin macroscpica de la muestra de heces determin el color, la
consistencia, presencia de mucus, sangre, restos alimenticios o parsitos en estado
larvario. El procedimiento a se sigui es de la siguiente manera:
Se observ el color de la muestra.
Se observ la consistencia de la muestra.
Se utiliz un aplicador de madera para buscar la presencia de mucus en la
muestra.
Se observ la presencia de restos alimenticios en la muestra. Y luego todo ello
se anot.

3.6.2. Examen microscpico

Se analiz microscpicamente una muestra de heces en busca de la presencia de
leucocitos, parsitos, protozoarios y metazoarios en sus diferentes estadios. El
procedimiento que seguimos es de la siguiente manera:
Se identific la lmina porta objeto.
Se coloc en un extremo de la lmina portaobjeto una gota de lugol.
Se seleccion la parte ms representativa de la muestra (mucus o sangre, si hay
presencia de estos).
 44

Se agreg con un aplicador 1 a 2 mg de material fecal seleccionada y se

emulsion.
Se cubri la preparacin con una laminilla cubre objeto.
Se observ en el microscopio, con el objetivo 10x y luego con el 40x. y luego se
report lo observado.

IMAGEN N 09: La muestra lista para su observacin microscpica

Fuente: Elaboracin Propia

3.7. Centrifugado y separacin de suero sanguneo

Las muestras se centrifugaron a una revolucin de 2500 rpm/10 minutos; luego el suero
se utilizo sin excepcin en el calculo de la cantidad de estas sustancias qumicas que se
hizo en el suero o plasma por tcnicas espectrofotomtricas. Usualmente, se requieren
determinaciones precisas de Transaminas, Aspartato Alanino Transaminas - AST,
Alanino Transaminas ALT, Protenas Totales, Nitrgeno Urico Sanguneo - BUN,
Creatinina y Glucosa. Alanina transaminasa ALT/GPT y Aspartato transaminasa
AST/GOT, Glucosa.
 45

IMAGEN N 10: centrifugado de muestras IMAGEN N 11: separando suero

Fuente: Elaboracin Propia

3.8. Realizando la hematologia
Una vez optenido la muestra que por lo general con anticuagualnte o sin
anticuagulante (cuando es extraida en ese momento en el laboratorio); se homogeniza
lentamente y luego de ello se llevo al equipo donde el agua absorvente, absorve una
cantidad necesaria, luego en unos instantes da los resultados hematologicos. Los cuales
son reportados adecuadamente en la ficha de resultados.
IMAGEN N 12: Realizando hemograma IMAGEN N 13: Resultado de hemograma

Fuente: Elaboracin Propia

 46

3.9. Preparacin y tincin del frotis sanguneos

La finalidad de un frotis sanguneo coloreado es para el reconocimiento de los
elementos celulares de la sangre. La muestra requerida es sangre capilar o venosa recin
extrada sin anticoagulante o sangre con anticoagulante EDTA. El procedimiento que se
sigui fue:
Se coloc en el portaobjeto una pequea gota de sangre de 2 mm de dimetro a
una distancia de 2 a 3 mm del extremo del portaobjeto y se hizo rpidamente el
extendido.
Para evitar la coagulacin; se utiliz sangre con EDTA. (Siempre conviene
realizar cuando menos dos frotis).
Se puso la lmina extensora a un ngulo de 45 del portaobjeto y se movi hacia
atrs para que haga contacto con la gota, que debe extenderse rpidamente.
El extendido debe tener unos 30 mm. de largo.
Se dej secar a temperatura ambiente.
Se coloc la preparacin de sangre, completamente seca, sobre un soporte.
Se cubri todo el frotis con coloracin de Wright y dejarlo en reposo 3 minutos
(o el tiempo necesario segn la maduracin del colorante).
Se agreg una cantidad igual de buffer evitando derramar el Wright, luego se
mezcl con una perilla de hule con suavidad para asegurar una mezcla uniforme,
aparecer una pelcula verde metlico, dejarlo en reposo por 5 minutos o el
tiempo necesario segn la maduracin del Wright.
Se lav la lmina con agua de chorro hasta quitar el exceso de la mezcla.
Se limpi la parte posterior del portaobjeto con una torunda de algodn
impregnada con alcohol, para eliminar todos los restos de colorante.
Se dej secar la preparacin al aire colocando la lmina en posicin vertical en
una rejilla para portaobjeto. Una vez secado se lleva al microscopio para su
observacin y luego se report los resultados en la ficha.
 47

IMAGEN N 14: Realizando el frotis sanguneo

3.10. Examen completa de orina

3.10.1. Examen fsico de la orina
La finalidad por medio de la observacin directa de la muestra de orina es determinar el
color y el aspecto, lo cual puede sugerir una patologa del tracto urinario u otras
enfermedades que estn en diferente localizacin, pero que sus manifestaciones
secundarias son a nivel del rin. El procedimiento a seguir es de la siguiente manera:
Se verifico que el frasco est bien identificado y completamente tapado.
Se agit en forma circular sobre la mesa de trabajo.
Observar color y aspecto.

3.10.2. Examen qumico de orina

El propsito determinar las sustancias qumicas presentes en una muestra de orina, as
como su densidad y pH, a travs de las zonas de reaccin presentes en una tira
reactiva.
La muestra requerida es de 20 mL de orina. Preferible la primera de la maana. El
procedimiento a seguir es de la siguiente manera:
Ase agit la muestra de orina en forma circular sobre la mesa de trabajo.
Se verti la orina en el tubo falcon.
Se introdujo la tira reactiva en la orina.
Se elimin el exceso de orina colocando la tira sobre un papel absorbente.
Se esper el tiempo recomendado por el fabricante para su lectura. Anotar los
resultados.
 48

3.10.3. FORMA DE REPORTE

PH: de 5 a 9.
DENSIDAD: de 1.000 a 1.030.
LEUCOCITOS: 0 a 500 Leucocitos por l.
NITRITOS: Positivo o Negativo.
PROTENA: 0 a 1000 mg por dL.
GLUCOSA: 0 - 1000 mg por dL.
CUERPOS CETNICOS: de una cruz a tres cruces.
UROBILINGENO: de <1 a 12 mg por dL.
BILIRRUBINA: de una cruz a tres cruces.
SANGRE/HEMOGLOBINA: de 0 a 250 eritrocitos por L Siempre que en la tira
reactiva no se observe un cambio de color se reportar como negativo.
IMAGEN N 15: Determinando la densidad IMAGEN N 16: Cintas reactivas
con ayuda de un densmetro (combur 10)

3.11. Test para diferentes enfermedades

As el laboratorio realiza diferentes snap como son: snap parvo, snap corona snap
canino, snap felino, snap giardia, snap filaria, snap leishmania. Las cuales se realizan a
diario diferentes snap.
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IV. CONCLUSIONES

Se puso mucho en prctica los conocimientos adquiridos en las aulas; ya que los
encargados en las diferentes reas constantemente cuestionan y luego ordenan a
realizar el procesamiento de muestras.
Se reconoci los equipos y luego me ensearon el manejo adecuado para realizar
los diferentes anlisis y as mismo hice algunos anlisis de las muestras.
Se aprendi tambin el manejo adecuado de las diferentes muestras remitidas al
laboratorio clnico veterinario.

V. RECOMENDACIONES

Es necesario tener mayores prcticas relacionados al anlisis de laboratorio

clnico con casos reales viendo los resultados y brindar un tratamiento adecuado.
Debe existir un acceso a un laboratorio clnico especialista, en Ayacucho para
poder realizar prcticas durante el tiempo de clases en la universidad para as
tener mayor experiencia en el rea.
La Escuela de Formacin Profesional de Medicina Veterinaria debera de
realizar convenios con laboratorios para la realizacin del internado ya que se
hace muy difcil encontrar un centro de prcticas por el propio alumno.
 50

VI. BIBLIOGRAFA
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archivo PDF
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VII. ANEXOS

ANEXO 01: Ficha de evaluacin

ANEXO 02: certificado de prcticas de internado