Rev Peru Med Exp Salud Publica. 2008; 25(3): 298-301.

artculo original

ACTIVIDAD ANTIMICTICA IN VITRO Y METABOLITOS DEL ACEITE ESENCIAL

DE LAS HOJAS DE Minthostachys mollis (MUA)
1,a 1,a 2,b 2,b
Carlos Cano , Pablo Bonilla , Mirtha Roque , Julio Ruiz

RESUMEN
Objetivos. Demostrar la actividad antimictica in vitro y la elucidacin de algunos de los metabolitos del aceite esencial de hojas de Minthostachys
mollis (mua) proveniente del distrito de Huacrapuquio (2700 msnm), Junn. Materiales y mtodos. El aceite esencial se obtuvo por el mtodo de
destilacin por arrastre de vapor de agua. Este fue sometido a anlisis fsico-qumico y determinacin de la composicin qumica mediante
cromatografa de gases. Mediante el mtodo de agar en difusin se evalu la inhibicin del crecimiento fngico de Candida albicans y tambin por
el mtodo de dilucin en tubo para Trichophytun tonsurans, Trichophytun mentagrophytes, Microsporun canis. Resultados. Se encontraron los
siguientes monoterpenos: pulegona, mentona, limoneno y mirceno. El aceite esencial de mua inhibi completamente el desarrollo de T. tonsurasn,
T. mentagrophytes y M. canis con ambos mtodos de evaluacin y dosis, para C. albicans se logr un halo de inhibicin de 30 mm para el aceite
esencial al 100% y de 35 mm al 50%. Conclusiones. Se demostr la actividad antimictica del aceite esencial de mua, probablemente por la
accin de los monoterpenos encontrados.

Palabras clave. Fitoterapia; Aceites voltiles; Dermatofitos; Monoterpenos (fuente: DeCS BIREME).

IN VITRO ANTIfungal ACTIVITY AND METABOLITES OF THE ESSENTIAL OIL OF Minthostachys

mollis (MUA) LEAVES

ABSTRACT

Objectives. Demonstrate the antifungal activity in vitro and elucidation of some metabolites of the essential oil of Minthostachys mollis
(mua) leaves from the Huacrapuquio district (2700 m), Junn (Central Peruvian Andes). Material and methods. The essential oil was
obtained by the distillation method by drag of water vapor. This was performed to physical-chemical analysis and identification of the
chemical composition by gas chromatography. By agar diffusion method was evaluated inhibition of fungal growth of Candida albicans
and by tube dilution method to Trichophytun tonsurans Trichophytun mentagrophytes and Microsporun canis. Results. The following
monoterpenes were found: pulegone, menthone, limoneno and myrcene. The mua essential oil completely inhibited T. tonsurasn, T.
mentagrophytes and M. canis with both evaluation methods and doses, to C. albicans was a inhibition zone diameters of 30 mm for the
essential oil to 100 % and 35 mm to 50%. Conclusions. We showed the antifungal activity of mua essential oil, probably by the action
of the monoterpenes found.
Key words: Phytotherapy; Oils; volatile; Dermatophytes; Monoterpenes (source: MesH NLM).

INTRODUCCIN crece entre 2500 y 3500 msnm, donde existe en abundancia.

El Per presenta una riqueza y megadiversidad de plantas
medicinales nativas, que es uno de los pilares de la
etnofarmacologa y la medicina tradicional, desde la poca del
Incanato hasta la actualidad. Siendo estas utilizadas en forma
emprica por sus bondades teraputicas en el cuidado y
restauracin de la salud (1).
Dentro de este contexto, los aceites esenciales (AE) son productos
naturales de gran valor e importancia econmica (2). La bioactividad
de los AE se investiga a partir de los efectos farmacolgicos que
son producidos por sus metabolitos, los
cuales son obtenidos por diferentes tcnicas fisicoqumicas a
partir de las hojas (3).
Son pocas las plantas peruanas que han validado su uso
tradicional, una de estas es la Minthostachys mollis, conocida
popularmente como mua, la cual es usada para el tratamiento de
dolencias de vias respiratorias y digestivas (4). La mua habita en
los diferentes pisos ecolgicos de nuestra serrana,
Es una planta hemicriptfila que durante el invierno fro y
seco desaparecen sus hojas para brotar nuevamente con las
primeras lluvias de la primavera (5).
Diversos estudios han mostrado su efecto antibacteriano (5-7) e
insecticida (8), otros han explorado que metabolitos estn
presentes en su aceite esencial (9-11). Sin embargo, poco se ha
explorado sobre su efecto antimictico, lo cual fue objeto de
nuestro estudio.
MATERIALES Y MTODOS
RECOLECCIN DE LA MUESTRA
La planta fue recolectada entre septiembre y octubre del 2005
(perodo de floracin) en el distrito de Huacrapuquio (2700
msnm), ubicado a 10 km al sur de la provincia de Tarma,
departamento de Junn; fueron cortadas con una hoz a unos 10
cm por encima de la superficie del suelo de las laderas de

1 Instituto de Ciencias Farmacuticas y Recursos Naturales Juan de Dios Guevara, Facultad de Farmacia y Bioqumica, Universidad Nacional
Mayor de San Marcos. Lima, Per.
Recibido: 13-08-07 Aprobado: 15-02-08

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los cerros y zonas pedregosas. Luego se separaron las hojas y
fueron estabilizadas por 24 horas. La muestra fue reconocida
como Minthostachys mollis (Kunt/rises) segn el sistema de
clasificacin de Engler & Prantil modificado por Melchor por el
Museo de Historia Natural de la Universidad Nacional Mayor de
San Marcos (UNMSM) en Lima, Per.
EXTRACCIN DEL ACEITE ESENCIAL
La extraccin del aceite esencial de mua se realiz con el mtodo
de arrastre con vapor de agua (3,5) en el Laboratorio de
Qumica Orgnica de la Facultad de Qumica de la Universidad
Nacional de Ingeniera (Lima, Per) en noviembre de 2005,
obtenindose 21 mL de aceite esencial despus de procesar 10
kg de mua.
Para ello se coloc 1,5 kg de mua en cada canastilla de una
autoclave, asegurando que no est en contacto directo con el agua;
luego, se calent hasta el desprendimiento de vapor de agua
conteniendo el aceite esencial a travs de los refrigeran-tes de
vidrio, siendo recolectados en una pera de decantacin; se dej en
reposo hasta observar la separacin del agua y del aceite,
procedindose luego a su decantacin. El aceite obte-nido fue
sometido a desecacin con sulfato de sodio anhidro; luego fue
filtrado con ayuda de una bomba de vaco, finalmente el aceite se
deposit en frasco oscuro cerrado hermticamente que fue
almacenado en refrigeracin hasta su uso.
ANLISIS CROMATOGRFICO DE GASES
El aceite esencial obtenido fue analizado en marzo de 2006 en el
Laboratorio de Investigacin y Qumica Aplicada de la Facultad de
Ingeniera Qumica de la Universidad Nacional de Ingeniera, por
cromatografa de gases, basado en el tiempo de retencin de
algunos de los componentes, luego mediante estndares conocidos
se determin la composicin cuali-cuanti centesimal de cuatro
monoterpenos (limoneno, mentona,
pulegona y mentol) del aceite esencial de la mua.
el agar selectivo para dermatofitos (DTM) segn la frmula de
Taplin. Se prepararon las suspensiones de los dermatofitos a partir
de la mezcla resultante de conidias y fragmentos hifales de cultivos
obtenidos en cultivos previos, que fueron mezclados con 10 mL de
agua destilada, se les separ de las partculas pesadas por
sedimentacin y fueron homogeneizadas con un mezclador de
vrtice. Su densidad fue ajustada con un espectrofotmetro en una
longitud de onda de 530 nm para obtener inculos estandartizados
(0,6 a 3 x 106 UFC/mL).
Las diluciones se prepararon usando 5 y 50 L del aceite
esencial de mua diluido en 10 mL del agar DTM fundido e
inoculado con el dermatofito de prueba. La lectura de la prueba
fue medida segn la presencia o ausencia del crecimiento de
los hongos. Las pruebas se realizaron por triplicado y con un
grupo control (alcohol).
RESULTADOS
CARACTERSTICAS Y METABOLITOS DEL ACEITE ESEN-
CIAL DE MUA
El rendimiento del proceso de extraccin del aceite esencial de
mua por el mtodo de arrastre con vapor de agua, fue de
0,19% p/p. Las caractersticas organolpticas y propiedades
fisicoqumicas se detallan en la tabla 1. Por el anlisis de
cromatografa de gases se encontr en mayor proporcin
pulegona, luego mentona y limoneno, sin encontrarse mentol
(Tabla 2).
Tabla 1. Caractersticas organolpticas y propiedades fisicoqumicas del
aceite esencial de mua.
Caractersticas organolpticas
Color Ligeramente verde amarillento

Olor Aroma agradable (similar al mentol)

DETERMINACIN IN VITRO DE LA ACTIVIDAD ANTIFNGICA
DEL ACEITE ESENCIAL DE Minthostachys mollis Sabor Picante fresco, no persistente

Aspecto Lquido fluido y transparente

Se us cepas de Microsporum canis, Trichophyton mentagro-
phytes, Trichophyton tonsurans obtenidas de muestras clnicas Propiedades fisicoqumicas
y proporcionadas por el Departamento de Micologa del Institu- Densidad relativa (25 C) 0,9189
to de Medicina Tropical Daniel A. Carrin de la UNMSM; as
ndice de refraccin (20 C) 1,4727
como la cepa Candida albicans ATCC 32148 proporcionada por
el Instituto de Microbiologa Simn Prez Alva de la Facultad Rotacin especfica (20 C) +3 45
de Farmacia y Bioqumica de la UNMSM. Solubilidad en etanol 95%

Agar en difusin (6). Con este mtodo se ensayaron las cuatro

cepas fngicas. Se us 20 ML de agar dextrosa Sabouraud fundido
a 45 C que fueron aspticamente mezclados con 1 mL de la Tabla 2. Porcentaje de terpenoides obtenidos en la muestra del aceite

suspensin fngica (1 x 104 UFC/mL) en placas petri de 100 mm x esencial de Minthostachys mollis (hojas) por cromatografa de gases.

15 mm. Luego se hizo pozos de 11 mm de dimetro donde se

inocul 0,1 mL del aceite esencial de mua (al 50 100% segn Metabolito Tiempo de retencin (min) Composicin
corresponda). Se dej reposar por 30 minutos a temperatura
Pulegona 13,20 36,68
ambiente y se incub a 28 C de 14 a 21 das segn el hongo en
evaluacin, luego se realiz la lectura, registrando el dimetro de Mentona 11,09 24,24
los halos de inhibicin. Las pruebas se realizaron por triplicado y
Limoneno 5,32 0,77
con un grupo control (alcohol).
Mirceno Trazas
Dilucin en tubo (12,13). Con este mtodo se ensayaron las Mentol 12,80 No detectable
cepas de M. canis, T. mentagrophytes y T. tonsurans. Se us

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Figura 1. Efecto antimictico in vitro del aceite esencial de Minthostachys mollis (AEMM). (a) Halo inhibitorio del AEMM al 100% sobre el desarrollo de
C. albicans con el mtodo de agar difusin; (b) A la derecha se observa el crecimiento de M. canis en el grupo control, a la izquierda no hay desarrollo
del hongo en toda la placa a ambas dosis de AEMM; con el mtodo de dilucin en tubo se evidencia crecimiento fngico en los tubos control (derecha)
a diferencia de los tubos con AEMM (izquierda), tanto para (c) M. canis; (d) T. tonsurans y (e) T. mentagrophytes.

ACTIVIDAD ANTIMICTICA El aceite esencial de mua present efectos antimicticos

frente a cepas de Candida albicans a las concentraciones de
C. albicans. Se observ un halo inhibitorio de 30 mm con el 50 y 100% y frente a los dermatofitos: (Microsporum canis,
aceite esencial de mua al 100% y de 35 mm al 50%. No se Trichophyton mentagrophytes y Trichophyton tonsurans) son
observ halo en las placas control. sensibles tambin en los volmenes ensayados de 5 y 50 L.

T. tonsurans, M canis y T. mentagrophytes. No se observ
crecimiento fngico en todo el dimetro de las placas con aceite
esencial de mua al 50 y 100% para todos los dermatofitos
ensayados con la prueba de difusin de agar. Las placas controles
no presentaron halo inhibitorio. Para la prueba de dilucin en tubo
no se evidenci crecimiento en ambas dosis (5 y 50 L) para todos
los dermatofitos (Figura 1).
Se reconoce que los AE dependen de sus propiedades lipoflicas o
hidroflicas. Los terpenoides pueden servir como un ejemplo de
agentes liposolubles, los cuales afectan la actividad de las enzimas
catalizadoras a nivel de membrana, por ej. ciertos componentes del
AE pueden actuar como desacopladores, los cuales interfieren en
la translocacin de protones sobre la
membrana y subsecuentemente interrumpir por la fosforilacin
del ADP (14).

DISCUSIN En la accin antimictica de los metabolitos secundarios,

Por los resultados de la densidad y el ndice de refraccin del aceite
esencial de mua podra preverse que est conformado por
sustancias oxigenadas aromticas o alicclicas (9,13), resul-tados
que fueron corroborados por la cromatografa de gases
identificando principalmente tres monoterpenos: pulegona,
mentona y limoneno que han sido previamente identificados en
otros estudios (10,11).
interviene el carcter lipoflico e hidroflico de sus grupos
funcionales y a la polaridad que poseen, para poder tener
propiedades antispticas, antimicrobianas y antimicticas,
siendo esta actividad biolgica de mayor a menor en fenoles,
aldehdos, cetonas, alcoholes y teres. Los esfuerzos para
encontrar una correlacin entre la composicin y bioactividad
de los aceites esenciales no han sido totalmente dilucidadas.
Se presume que la actividad biolgica de estos AE no esta

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determinada por la cantidad de monoterpenos, sino ms bien 8. Banchio E, Zygadlo J, Valladares GR. Quantitative variations in
(14,15) the essential oil of Minthostachys mollis (Kunth.) Griseb. in response
por su tasa de proporcionalidad . to insects with different feeding habits. J Agric Food Chem. 2005;
Se han reportado que algunos aceites esenciales pueden ser ms 53(17): 6903-6.
9. Fuertes CM, Mungua Y. Estudio comparativo del aceite esencial
efectivos que los agentes sintticos (antimicticos) (15,16), aspecto
de Minthostachys mollis (Kunth) Griseb Mua de tres regiones
que podra ser motivo de una futura investigacin, comparando el
peruanas por cromatografa de gases y espectrometra de masas.
AE de mua frente a antimicticos comerciales incluyendo un mayor
Ciencia e Investigacin (Lima). 2001; 4(1): 23-39.
nmero de repeticiones por ensayo.
10. Malagon O, Vila R, Iglesias J, Zaragoza T, Caigueral S.
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La naturaleza es, y seguir siendo la fuente de una amplia
Ecuador. Flavour Fragr J. 2003; 18(6): 527-31.
variedad de molculas bioactivas que podran ser utilizadas
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(lamiaceae): an Ecuadorian mint. Econ Bot. 1994; 48(1): 60-64.
generaciones de medicamentos con el fin de solucionar
diversos problemas de salud. El objetivo de esta bsqueda 12. Fenner R, Sortino M, Rates SM, DallAgnol R, Ferraz A, Bernardi
AP, et al. Antifungal activity of some Brazilian Hypericum species.
debe ser el descubrimiento de frmacos con mayor espectro,
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menos efectos adversos y menor costo que los existentes.
13. Fernndez-Torres B, Cabaes FJ, Carrillo-Muoz A, Esteban A,
Las dermatomicosis son un problema frecuente en la poblacin Inza I, Abarca L, et al. Collaborative evaluation of optimal antifungal
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2002; 40(11): 3999-4003.
terapetica; sin embargo, an se requieren estudios que
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concentraciones de AE (25% - 50%) y en animales de essential oils. Curr Med Chem. 2003; 10(10): 813-29.
experimentacin (19,20), para luego poder validar su posible uso 15. Mesa Arango AC, Bueno Snchez JG, Betancur Galvis LA.
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Correspondencia: Carlos A. Cano Prez
antimicrobiano del aceite esencial de Minthostachys mollis Direccin: Av. Aurelio Garca y Garca 1206, Urb. Los Cipreses, Lima 1.
combinado con inactivacin trmica, sobre cepas de Listeria Telfono: (511) 564-3235.
monocytogenes y Bacillus cereus [Tesis de bachiller]. Bogot: Correo electrnico: alfcanpe@hotmail.com
Pontificia Universidad Javeriana; 2007.

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