FACTORES QUIMICOS QUE INFLUYEN EN EL CRECIMIENTO

MICROBIANO
FACTORES QUIMICOS:
Se utilizan los agentes qumicos para controlar los microorganismos
en los tejidos vivos. Desafortunadamente son pocos los agentes
qumicos que aseguran la esterilidad; la mayor parte de ellos
simplemente reducen las poblaciones microbianas a niveles seguros
o eliminan las formas vegetativas de patgenos. Un problema
frecuente en la desinfeccin es la seleccin de un agente que mate
todos los microorganismos en el perodo ms breve de tiempo posible
sin daar el material contaminado. Al igual que no hay un mtodo fsico
para el control microbiano que pueda usarse en todas las situaciones,
no hay ningn desinfectante que sea apropiado en todas las
circunstancias.
Fuente: Introduccin a la Microbiologa; Gerard J. (1993).

A. Efecto de la Presin Osmtica sobre el Crecimiento Microbiano:

La presencia de altas concentraciones de sustancias disueltas (sales
o azcares), en un lquido da lugar a una solucin que exhibe un
marcado efecto osmtico sobre las clulas.
Muchos microorganismos, en un medio o solucin con gran cantidad
de materiales disueltos, limitan su crecimiento debido a la
deshidratacin que sufren las clulas por la tendencia que tienen a
establecer un equilibrio entre las presiones osmticas dentro y fuera
de ellas.
Sin embargo, hay algunos microorganismos capaces de tolerar altas
concentraciones de sal o azcar. Hay otros que crecen solamente en
un medio que contiene elevada concentracin de sal.
Fuente: Microbiologa General Practica de Laboratorio; Quevedo,
Fernando (1967).

B. Accin de los Agentes Qumicos (Desinfectantes) sobre el crecimiento

microbiano:
Una de las tcnicas empeladas para determinar la capacidad
antimicrobiana de los agentes qumicos es poniendo en contacto al
microorganismo con la solucin del agente qumico por un tiempo,
despus del cual se siembra a partir de la mezcla a un medio para
determinar la supervivencia del microorganismo. Por ste
procedimiento se puede evaluar la eficacia antimicrobiana de una gran
variedad de sustancias qumicas.
Fuente: Microbiologa General Practica de Laboratorio; Quevedo,
Fernando (1967).

C. Accin de los Antibiticos sobre el crecimiento microbiano:

La susceptibilidad de los microorganismos a los diferentes antibiticos
puede ser convenientemente determinada por la tcnica de la placa-
disco-cultivo.
 Este procedimiento consiste en inocular el organismo en estudio sobre
el agar, y colocando luego discos de papel conteniendo diferentes
antibiticos sobre la superficie inoculada y despus del perodo de
incubacin observar las zonas de inhibicin. El dimetro de la zona de
inhibicin es infludo por una serie de factores, como el grado de
difusin de la droga, la importancia del inculo, el grado de crecimiento
del organismo y la sensibilidad o resistencia al antibitico.
Fuente: Microbiologa General Practica de Laboratorio; Quevedo,
Fernando (1967).
- ANTIBIOGRAMA

El primer objetivo del antibiograma es el de medir la sensibilidad de una

cepa bacteriana que se sospecha es la responsable de una infeccin a
uno o varios antibiticos. En efecto, la sensibilidad in vitro es uno de los
requisitos previos para la eficacia in vivo de un tratamiento antibitico. El
antibiograma sirve, en primer lugar, para orientar las decisiones
teraputicas individuales.

El segundo objetivo del antibiograma es el de seguir la evolucin de las

resistencias bacterianas. Gracias a este seguimiento epidemiolgico, a
escala de un servicio, un centro de atencin mdica, una regin o un pas,
es como puede adaptarse la antibioterapia emprica, revisarse
regularmente los espectros clnicos de los antibiticos y adoptarse ciertas
decisiones sanitarias, como el establecimiento de programas de
prevencin en los hospitales.

Cundo realizar un antibiograma?

Siempre que una toma bacteriolgica de finalidad dagnstica haya

permitido el aislamiento de una bacteria considerada responsable de la
infeccin.

Establecer esta responsabilidad exige una colaboracin entre el

bacterilogo y el clnico. En efecto, en ciertas circunstancias, el
microbilogo no podr determinar con certeza que el aislamiento de una
bacteria exige un antibiograma, sin los datos clnicos que le aporta el
mdico. Por ejemplo, una bacteria no patgena puede ser responsable de
la infeccin de un enfermo inmunodeprimido o en un lugar determinado
del organismo. La presencia de signos clnicos puede ser tambin
determinante para la realizacin de un antibiograma (por ejemplo: la
infeccin urinaria con un nmero reducido de grmenes).
 Sensibilidad bacteriana a los antibiticos

La determinacin de la Concentracin Inhibidora Mnima (CIM) es la base

de la medida de la sensiblidad de una bacteria a un determinado
antibitico. La CIM se define como la menor concentracin de una gama
de diluciones de antibitico que provoca una inhibicin de cualquier
crecimiento bacteriano visible. Es el valor fundamental de referencia que
permite establecer una escala de actividad del antibitico frente a
diferentes especies bacterianas.

Hay diferentes tcnicas de laboratorio que permiten medir o calcular de

rutina, y de manera semicuantitativa, las CIM (mtodos manuales y
mtodos automatizados o semiautomatizados). Estos diferentes mtodos
de rutina permiten categorizar una cierta cepa bacteriana en funcin de
su sensibilidad frente al antibitico probado. Esta cepa se denomina
Sensible (S), Intermedia (I) o Resistente (R) al antibitco.

Para un determinado antibitico, una cepa bacteriana es, segn la

NCCLS:

- Sensible, si existe una buena probabilidad de xito teraputico en

el caso de un tratamiento a la doss habitual.
- Resistente, si la probabilidad de xito teraputico es nula o muy
reducida. No es de esperar ningn efecto teraputico sea cual
fuere el tipo de tratamiento.
- Intermedia, cuando el xito teraputico es imprevisible. Se puede
conseguir efecto teraputico en ciertas condiciones (fuertes
concentraciones locales o aumento de la posologa).

Fig 1: Antibiograma realizado por el mtodo de difusin en agar

Fuente : http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioAntibioticos.htm
DISCUSION
Segn el autor L. Snchez& E. Senz nos indica que : Los alcoholes (etanol o alcohol etlico,
alcohol isoproplico son compuestos orgnicos del agua, conocidos desde la antigedad, y
usados en medicina como antispticos de limpieza y desinfeccin de heridas.. Los alcoholes
habitualmente usados son el alcohol etlico o etanol y el alcohol isoproplico. Las
concentraciones varan entre el 70% y el 96% para el primero y entre el 70% y el 100% para el
segundo. Los alcoholes actan destruyendo la membrana celular y desnaturalizando las
protenas. Su eficacia est basada en la presencia de agua, ello se debe a que estos compuestos
acuosos penetran mejor en las clulas y bacterias permitiendo as dao a la membrana y rpida
desnaturalizacin de las protenas, con la consiguiente interferencia con el metabolismo y lisis
celular

- Durante la practica en el laboratorio realizamos el experimento con alcohol al 70% como

indica el autor ; obteniendo como resusltados que el microorganismo (Staphylococus
Aerus) se desarrollo solo hasta el minuto 2.5 denaturalizando sus protenias produciendo
lisis celular.

RECOMENDACIN

Mtodo de E-test

Es uno de los mtodos ms recientes que se han presentado en el mercado y

resulta de una curiosa combinacin de caractersticas de los mtodos anteriores.
Se trata de una tcnica cuantitativa en placa que permite obtener una lectura
directa de CMI en g/ml, ya que se emplean tiras plsticas impregnadas en
concentraciones crecientes de antibitico indicadas en una escala graduada
sobre la propia tira.

Una de sus grandes ventajas, dadas sus caractersticas, es que resulta un

mtodo ideal para estudiar cualquier tipo de microorganismo, aerobio o
anaerobio, incluyendo aquellos llamados "fastidiosos" o los que tengan
requerimientos especiales para crecer.

El microorganismo a investigar se inocula en una placa y sobre ella se deposita

la tira del antibitico (o antibiticos) a ensayar. Tras la incubacin de 16-24 horas
a 35C se observan las placas y se valora la zona de inhibicin, de forma elptica,
alrededor de cada tira. La CMI se lee directamente observando el punto ms bajo
de la elipse que presente crecimiento.

En esta fotografa se muestra un ejemplo de antibiograma realizado por el

mtodo de E-test.

En la fotografa de la izquierda se muestra una vista general de una placa con

crecimiento bacteriano y con dos tiras de E-test. La zona de color ms claro que
ocupa la mayor parte de la placa es el crecimiento bacteriano en las zonas no
inhibidas. Las elipses ms oscuras que rodean la parte superior de las tiras E-
test marcan las zonas en que los respectivos antibiticos han inhibido, con mayor
o menor eficacia, el crecimiento del microorganismo a estudio.

La foto de la derecha, un plano ms cercano de la mitad inferior de la placa,

permite observar con ms detalle lo sealado en el prrafo anterior. Se aprecia
perfectamente como el pico de la zona ms estrecha de la elipse en la tira de MZ
coincide, en la escala graduada, con la franja entre las marcas de 1.5 y 2, lo que
nos indicara que la CMI de este antibitico (MZ) para este microorganismo sera
de 2 g/ml.

Fig 2 : Antibiograma realizado por el mtodo de E-test

 Fuente : http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioAntibioticos.htm
BIBLIOGRAFIA
Quevedo, Fernando. Nakasone, Jos (1967) Microbiologa general prcticas de
laboratorio. Lima Per.
Microbiologa de Alimentos; W. C. Frazier (1993)
El
Antibiograma.http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioAntibioticos.
htm
ANTISPTICOS Y DESINFECTANTES.
http://sisbib.unmsm.edu.pe/bvrevistas/dermatologia/v15_n2/pdf/a02.pdf