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UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL DEL TAcH IRA

VICERRECTORADO ACADEMICO
DECANATO DE DOCENCIA
DEPARTAMENTO DE INGENIERIA DE PRODUCCION ANIMAL
ul I

BIOLO1A

r. Zuleirna Valduz C.

Reimpresin, Septiembre, 2006


Biologic, Prc floes de Laboroforio
LE T

INTRODUCCION

Al iniciar el siglo XXI debemos refiexionar sobre las innegables contribuciones de la


Biologla al mundo moderno. Conforme el hombre ha estudiado la vida, hemos adquirido
mayor comprensin de los procesos vitales y nos hemos hecho ms concientes de la
interdependencia con la gran diversidad de seres vivos con los que compartimos el
planeta.

La presente Gula constituye el soporte didctico de las actividades contempladas en


el Laboratorio de Biologla. Este es el primer curso de Laboratorlo relacionado con las
Ciencias Biolgicas al que asistes en la carrera universitaria que apenas micas. Aun
cuando probablemente en tus estudios de bachillerato cursaste Biologia, quizs te
preguntes que es, especIficamente, lo que vers.

Sabemos que la Biologia es el estudlo de los seres vivos: microorganismos, plantas


y animales. Para poder estudiarlos, durante el curso reafirmaras tus conocimientos
generales de la Biologla y adquirirs destrezas y conocimientos que permiten y facilitan su
estudlo: manejo de microscopios Opticos; la tcnica de la micrometrIa; diferentes tcnicas
de estudios celulares e histolgicos; haremos especial nfasis en corroborar la Teoria
celular al tratar con cierto grado de detalle aspectos relevantes de la 'Citologla" (estudio
de las clulas) y de la "Histologia" (estudlo de los tejidos); de la divisin celular, proceso
vital para la vida misma; de la inmensa diversidad de seres vivos, incluido el sistema
actual su clasificaciOn y los diferentes mecanismos de reproduccin, que permitn la
continuidad de las diferentes especies.

En resumen, este curso prctico te permitir, establecer las bases fundamentales


que, en gran medida, te aseguraran el xito, como estudiante de Ingenierla de Produccin
Animal, en la mayorIa de las asignaturas de los semestres inmediatos.
Biologla, Prcticas de Laboratorio
U -r

CONTENIDO

INTRODUCCION

NORMAS GENERALES ........................................... .............................. iii

PRACTICA NO I Microscopio ................................................................... I

PRACTICA No 2 MicrometrIa ................................................................... 14

Estudio de la clula vegetal utilizando tcnicas


PRACTICA NO 3
de estudio in Vivo ...........................................................18

Estudio de la clula animal utilizando las Tcnicas


PRACTICA NO 4 26
In Vivo y Post-mortem .....................................................

Preparacin de Lminas Permanentes para el estudio Post


PRACTICA NO 5
mortem de celulas y tejidos ...............................................30

PRACTICA NO 6 El Ciclo Celular y la Mitosis ..............................................35

PRACTICA NO 7 HistologIa Animal ........................................................... 43

PRACTICA NO 8 Clasificacin de Organismos (I Pane) ................................. 49

PRACTICA NO 9 Clasificacin de Organismos (II Pane) ................................ 56

PRACTICA N 10 Reproduccin de Organismos...........................................57

GLOSARIO DE TERMINOS

BIBLIOGRAFIA
A
ft
Biologic, Prcticos de Laboratorio

NORMAS GENERALES PARA EL TRABAJO Y SEGURIDAD EN EL LABORATORIO


El Laboratorlo, como su nombre Jo indica, es un lugar de trabajo, y la eficiencia y
seguridad en el mismo depender de tu responsabilidad.
Cualquier actividad en un laboratorio tiene riesgos, por Jo que debes estar alerta y
evitar que ocurran accidentes. Si acatas unas pocas reglas bsicas, puedes evitarlos.
Tambln ten presente que la funcin del Profesor y del personal de apoyo es
supervisar y guiar el trabajo y en algunos casos, ejecutar demostraciones; no debe
esperarse que realicen el trabajo P01 Ii..
A continuacin, se especificarn algunas de las normas y requisitos que deben
seguirse a Ia hora de realizar el trabajo de laboratorio:

1. El uso de la bata es estrictamente obligatoria.


2. Se exige puntualidad en la hora fijada para el cornienzo de la prctica.
3. La asistencia es obtigatoria. En todo caso, el alumno podr faltar un maxima de dos
prcticas durante el semestre, siempre y cuando la inasistencia a esta haya sido
justificada por escrito, pero ello no implica que podr recuperar los quinces
correspond ientes.
4. El laboratorio no es un lugar para corner, beber, correr y bromear. Tmalo en serb!
5. En el transcurso de la prctica no se permitir la salida del laboratorio sino por
motivos especiales y previa autorizacin del profesor.
6. Lee el marco terico, objetivos, materiales y procedimiento de la prctica a realizar
antes de entrar al laboratorio y revisa de nuevo las instrucciones para una
determinada actividad antes de realizarla.
7. Al estar realizando el trabajo de laboratorio propiamente dicho, observe con
precisiOn y cuidado, utilizando todos sus sentidos. Anote cuidadosamente sus
observaciones y saque conclusiones de las mismas.
8. Lave el material de su equipo de trabajo tan pronto como termine de utilizarlos.
9. Mantn el area de trabajo limpia: sin libros, morrales, papeles, ni equipo alguno
innecesario: En el mesOn de trabajo solo debe tenerse la Gula de "Biologla -
Prcticas de Laboratorlo" y el material necesarlo para la realizaciOn del
correspondiente trabajo prctico.
10. No tire las toallas usadas, papeles u otros desechos al piso; use el recipiente
destinado como papelera.
11. Antes de abandonar el laboratorio compruebe que el mesOn y los fregaderos estn
limpios, el material y equipo est ordenado y completo.
12. En caso de rotura o prdida de material, notifiquelo de inmediato.
13. Acostimbrese a seguir las instrucciones de la GuIa de Prcticas. No pregunte a sus
compaeros ni establezca tertulias. Ante cualquier duda consulte al Profesor, a!
Tcnico o al Preparador.

III
Biologic, Practices de Laboratorio

UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL DEL TAcHIRA


VICERRECTORADO ACADEMICO
DECANATO DE DOCENCIA
DEPARTAMENTO DE INGENIERIA DE PRODUCCION ANIMAL
LABORATORIO DE BIOLOGIA

.Prctica N I
MICROSCOPIO

INTRODUCCIN

El microscopio es un instrumento que permite observar ampliados objetos u


organismos minCisculos o detalles muy pequeos de los mismos, los cuales no podrIan
ser detectados por el ojo humano.

El descubrimiento del microscopio a finales del siglo XVI e inicios del XVII seala el
iniclo de la Biologla moderna. Los grandes microscopistas del siglo XVII, Grew,
Leeuwenhock y Swammerdam impulsaron el conocimiento y revelaron a sus
contemporneos el universo de lo infinitamente pequeo. En el siglo XIX, el microscopio
lleg a perfeccionarse de tal manera en su parte mecnica y ptica, que los cientificos,
con ayuda de las tcnicas de coloracin que desarrollaron, lograron observar e identificar
estructuras importantes de la clula. El descubrimiento de la organizaciOn y de la
universalidad de la clula fueron las consecuencias lgicas y fructIferas.

A travs del tiempo, no solo se ha ido perfeccionando el diseo de los microscopios


y de sus lentes, sino que, aplicando los conocimientos que se tienen sobre la naturaleza
de la luz, se fabrican diferentes microscopios Opticos acordes a las diferentes
necesidades y caracterIsticas de la investigacin cientIfica.

El tipo de microscopio ms utilizado es el microscopio Optico, que se sirve de la luz


visible para crear una imagen aumentada del objeto. El microscopio ptico ms simple es
el estereoscOpico que consiste de una lente convexa doble con una distancia focal coda,
las cuales pueden aumentar un objeto hasta 40 veces. Los ms utilizados son los
microscopios compuestos, que disponen de varias lentes con las que se pueden
conseguir aumentos de un objeto por encima de las 2.000 veces.

Hay diversos microscopios pticos para funciones especiales: microscopio


estereoscpico, microscopio de campo claro, de campo oscuro, de luz polarizada, de luz
ultravioleta, de contraste de fases, de campo cercano, etc. Sin embargo, estos
microscopios pticos, debido a la misma naturaleza de la luz y de sus longitudes de onda,
no pueden superar cierto poder de resolucin.

For esto el descubrimiento de la mecnica ondulatoria y de las propiedades de los


electrones hizo posible el nacimiento y desarrollo de la microscopia electrnica. El
microscopio electrnico utiliza electrones para iluminar un objeto; dado que los electrones

1
A
ffis
,
81010gb. Prcticos de Loboratorio

tienen una longitud de onda mucho menor que la de la luz, pueden mostrar estructuras
mucho ms pequeas.

La microscopia electrnica ha proporcionado un medio eflcaz para conocer los


mecanismos propios de la vida, pero no sustituye a la microscopia ptica sino que la
complementa y la prolonga. El microscopio electrnico no permite observar 'tln Vivo", pero
muestra la ultra estructura de las bacterias, de las clulas y sus constituyentes.

OBJETIVOS

1. Adquirir conocimientos y destrezas en el uso del microscopio.

2. Conocer algunos tipos de microscopios pticos, determinando sus usos particulares


y sus limitaciones.

MATERIALES
Microscopio compuesto, microscopio estereoscpico (microscopio simple), lminas porta
y cubreobjetos, aceite de inmersin, papel toallIn, goteros, agujas de diseccin, material
vegetal y animal, agua estancada, solucin de levaduras.

MARCO TEORICO Y PROCEDIMIENTO

A. MICROSCOPIO ESTEREOSCOPICO (MICROSCOPIO SIMPLE)

Es un instrumento de uso verstil en las ciencias biolgicas; se utiliza comnmente


para observaciones macroscpicas. Tiene ciertas ventajas sobre otros tipos de
microscopios pticos: Hace posible la vision tridimensional de los objetos, se utiliza para
disecciOn y/o observaciOn de objetos opacos y relativamente grandes que no se
observarlan completos en el microscopio complejo ni siquiera empleando el objetivo de
menor aumento. Su aumento habitual varla de 4 a 40X.

En los aparatos sencillos (las conocidas lupas) poseen una sola lente convergente
que se interpone entre el ojo y la muestra a observar y en los microscopios
estereoscpicos presenta dos lentes convexas (convergentes) reunidas en un sistema
que da una imagen tridimensional.

El microscopio EstereoscOpico o Simple presenta dos sistemas principales: el


sistema de iluminacin y el sistema ptico.

a. SISTEMA PTIc0: Conformado p01: a) oculares mviles, b) el cuerpo central de


observacin, c) el botn de control de aumento (Zoom) y d) el botn de enfoque.

b. SISTEMA DE ILUMINACI6N: Compuesto por: a) la base con el bombillo, b) la


plataforma de observaciOn, c) el botn de encendido yd) el botn de cambio de
iluminacin.

2
UNCT
T Biologic', Prcticos de Lcborotorio

MANEJO DEL MicRoscoPlo ESTEREOSCOPICO

1. Enchufe el cordon elctrico y hunda el botOn de encendido del sistema de


iluminaciOn.

2. Ajuste la distancia interpupilar, acercando o alejando los oculares entre Si, haciendo
a la vez la observaciOn hasta que yea un solo circulo completo de luz.

3. Sittie la muestra en la plataforma de observacin y dentro del cIrculo de luz.

4. Coloque el botn de control de aumento (Zoom) en Ia posicin de mayor aumento.

5. Enfoque la muestra mirando por los oculares y manipulando el botOn lateral de


enfoque.

6. Una vez realizado el enfoque utHice la iluminaciOn mas adecuada a Ia muestra


empleando el botn de camblo de iluminacin.

7. Emplee el botOn de aumento de mayor a menor para observar total o parcialmente


a muestra. No es necesario manipular el botOn de enfoque una vez realizado el
enfoque.

8. Cuando termine de usar el microscopio estereoscOpico, coloque el botOn de


aumento en su menor valor y el botOn de enfoque en Ia posiciOn ms baja; apague
el sistema de iluminaciOn y limpie la plataforma de observaciOn.

B. MJCROSCOPJO COMPUESTO

El microscopio compuesto est constituido por tres sistemas: a) El sistema ptico,


conformado por los objetivos y los oculares. b) El sistema mecnico, constituido por una
serie de piezas en las que van instaladas las lentes y que permiten el movimiento para el
enfoque y c) El sistema de iluminacin, compuesto por aquellas partes que reflejan,
transmiten y regulan la cantidad de luz necesaria para efectuar la observacin a travs del
microscopio. A continuacin describiremos cada uno de estos sistemas.

a. SISTEMA OPTICO

Es el encargado de reproducir y aumentar las imgenes mediante el conjunto de


lentes que lo componen. Est formado por los oculares y los objetivos., colocados de
modo que sus ejes Opticos sean coincidentes, formndose as[ la imagen ampliada.

- Oculares: Es un tubo corto constituido por dos lentes sencillas. El poder ampliador
se expresa por medlo de nmeros, por ejemplo lOX, 12,5X, iSX. Dicho valor est
directamente relacionado con el aumento del ocular.

- Objetivos: Es la parte ms importante del microscopio. Cada objetivo est


compuesto de varias lentes, montadas sobre un tubo o cilindro ms o menos corto,
generalmente cromado; que crean una imagen real aumentada del objeto

3
ig 810/0gb, Prcticos de Laboratorio

examinado. Cuando se mira a travs del ocular se ye una imagen virtual aumentada
de la imagen real.

Se distinguen dos clases de objetivos: objetivos secos y objetivos de inmersin.


Los "objetivos secos" se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre la
lente frontal del objetivo y la preparacin. Los aumentos de los objetivos secos ms
frecuentemente utilizados son: 4X, lox y 40X. Los "objetivos de inmersin" estn
compuestos por un complicado sistema de lentes. Para observar a travs de este
objetivo es necesario colocar aceite de cedro entre el objetivo y la preparacin, de
manera que la lente frontal quede incluida dentro del aceite. Generalmente estos
objetivos son de IOOX y se distinguen internacionalmente por la palabra "oil" y un
cIrculo o anillo de color negro que rodea su extremo inferior.

Tanto los objetivos secos como los de inmersin llevan en la cara externa una serie
de indices que indican: el aumento que producen, la abertura numrica y otros
datos. Por ejemplo: si un objetivo tiene estos datos: 40X10.65 y 160/0.17, significa
que su aumento es de 40X y su abertura numrica 0.65, calculada para una longitud
de tubo de 160 mm y un espesor del cubreobjeto de 0.17mm. El nt:imero de
objetivos varla con el tipo de microscopio y el uso a que se destina.

Actualmente se usan objetivos parafocales, es decir, que cuando el microscopio


est enfocado con un objetivo, si se desea observar con otro objetivo de diferente
aumento, no se pierde el enfoque del objeto que se est observando.

b. SISTEMA DE ILUMINACIN

Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz de tal manera que ilumine la
preparacin u objeto que se va a observar. Comprende los siguientes elementos:

- Condensador: Est formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar


la iluminacin sobre la preparacin. Se encuentra debajo de la platina y puede
deslizarse mediante un tornillo de forma ascendente o descendente.
- Diafragma: Generalmente, el condensador est provisto de un diafragma-iris, que
regula su abertura y controla la cantidad de luz que debe pasar a travs del
condensador.

- Fuente de luz: Actualmente se emplea luz elctrica, en forma de Imparas de


fllamento metlico.

C. SISTEMA MECANICO

Conformado por aquellas partes que sostienen los componentes pticos y de


iluminacin, adems de aquellas que permiten los desplazamientos necesarios para el
enfoque del objeto. Son estos:

2
810/0gb, Prcticos de Loboroforio

- El tubo ocular: Tiene forma cilIndrica e internamente est barnizado de negro para
evitar que se desvIen los rayos de Iuz. Lleva en su extremo superior al ocular u
oculares; en el extremo inferior, Ileva incorporado el revolver.

- El revOlver: Es una pieza giratoria, situada en la parte inferior del tubo, en Ia que se
enroscan los objetivos.

- La columna: Llamada tambin "asa", "mango" o "brazo" es una pieza colocada en


la parte posterior del aparato. Sostiene en su porcin superior al tubo y por el
extremo inferior se adapta al pie.

- La platina: Es una pieza metlica plana, cuadrada, rectangular o circular, sobre la


cual se coloca la preparacin u objeto que se va a observar. En el centro posee un
orificlo circular, alineado con el eje Optico del tubo, por donde pasan los rayos
luminosos a la preparacin.

- Carro: Es un dispositivo colocado sobre la platina que permite deslizar la


preparacin de adelante hacia atrs y de derecha a izquierda.

- Tornillo Macromtrico y Tornillo Micromtrico: Ambos garantizan el enfoque de


la imagen microscOpica. Son accionados por una cabeza de tornillo (botones),
ubicados a ambos lados del microscopio. Este botn posee un mecanismo de
movimiento rpido (tornilo macromtrico) y de movimiento lento (tornilo
micromtrico) que permiten variar la altura de la platina para realizar y afinar el
enfoque de la imagen observada, es decir, alcanzar la completa nitidez.

PROPIEDADES DEL MicRoscoPlo COMPUESTO

1. Distancia Focal: Es la distancia entre el foco y el centro de las lentes del objetivo.

2. Distancia Frontal: Es la distancia comprendida entre la lenta frontal del objetivo y el


preparado enfocado.

3. Apertura Numrica (A.N): Es la capacidad del objetivo de utilizar un mayor o menor


nmero de rayos luminosos en la formacin de la imagen microscpica. De el
depende el poder de resolucin del objetivo.

4. Poder de ResoluciOn o Poder de Separacin: Es una cualidad del microscopio,


tan importante como el aumento y se define como "la minima distancia entre dos
puntos prOximos para que puedan verse separados" o como "la capacidad del
instrumento para dar imgenes bien definidas de puntos situados muy cerca el uno
del otro".

5. Poder de PenetraciOn: Es la propiedad del objetivo que permite observar varios


pianos del preparado con una misma posicin de enfoque.

6. Poder de DefiniciOn: Se refiere a la nitidez de las imgenes obtenidas, sobre todo


respecto a sus contornos.
Biologla, Prcticas de Laboratorio
UNET

7. Poder de Aumento del Microscoplo: Esta determinado por la combinacin de


oculares-objetivo. Basta multiplicar el aumento de los oculares por el aumento del
objetivo. Por ej., si estamos utilizando oculares de lox y un objetivo de 45X, el
aumento at que estaremos observando la imagen ser de 450X.

8. Campo del Microscopio: Se denomina asI at "cIrculo visible que se observa a


travs del microscopio". Tambin podemos definirlo como "la porcin visible
obseivada a travs del microscopio". A medida que aumenta el poder de los
objetivos disminuye el dimetro del campo, to cual quiere decir que el campo es
inversamente proporcionat at aumento del microscopio.

Con el microscopio ptico podemos distinguir las estructuras ms


grandes dentro de las clulas eucariticas y tambln clulas
procariticas individuales. Sin embargo, no podemos observar la Ojo
estructura interna de las clulas procariticas ni distinguir entre las
estructuras ms finas de las clulas eucariticas. 4 Lente ocular
En el microscopio ptico la formacin de una imagen con un
contraste perceptible exige que diferentes partes de la clula difieran
en su transparencia at haz de rayos de luz. Las partes del
Lente objetivo
espcimen que permiten el paso de la luz o de los electrones
aparecen brillantes, mientras que las partes que bloquean el paso "uestra
del haz de i!uminacin aparecen oscuras.

Las clulas vivas y sus partes componentes son, no obstante, casi z de luz
completamente transparentes a la luz porque el 70% del peso de las nte
clulas, aproximadamente, corresponde at agua, a travs de la cual )ndensador
a luz pasa fcilmente. Para crear suficiente contraste cuando se usa
el microscopio ptico, las clulas deben ser tratadas con colorantes (7) Fuentede
iluminacin
u otras sustancias que se adhieran diferenciatmente a cornponentes
subcelulares especIficos, o reaccionen con ellos, produciendo
regiones de opacidad diferente.

MANEJO y CUIDADOS EN EL Uso DEL MicRoscoPlo COMPUESTO

El microscopio, como instrumento de alta precision Optica, es deticado y costoso,


por to que exige que se le maneje cuidadosamente. Su eficiencia y conservaciOn depende
bsicamente, de las precauciones que adoptemos para su manejo y de la timpieza de sus
partes Opticas, de iluminaciOn y mecnicas.

1. El microscopio debe estar protegido del polvo, humedad y de otros agentes que
pudieran daarlo. Por ello, mientras no se encuentre en uso, debe guardarse en un
estuche o estante respectivo o cubrirlo con un forro de tela, preferiblemente negra.

6
A
RM
Biologi'o, Prcticas de Laboratorlo

2. Nunca se debe tocar con los dedos las lentes del ocular, de los objetivos o del
condensador, a fin de evitar dejar huellas digitales. Estas perjudican la visibilidad y
una vez secas, son difIciles de eliminar.

3. Antes de guardar el microscoplo, despus de haberlo utiHzado, se deben limpiar las


partes mecnicas y pticas. Para ello se requieren precauciones especiales:
V Las partes mecnicas deben limpiarse con un pao suave. En algunos casos,
este se puede humedecer con alcohol para disolver manchas de grasa, aceite
de cedro, etc., que hayan caido sabre estas partes.
V Las lentes no deben limpiarse con papel toallIn. De igual manera,
inmediatamente despus de utilizar el objetivo de inmersin, debe eliminarse el
aceite de cedro que queda impregnado sabre la lente frontal.
4. Al transportar el microscopia se recomienda utilizar las dos manos: sujetndolo por
a columna con una mano y sostenindolo por la base con la palma de la otra mano,
llevndolo siempre en posicin vertical.

5. Colocarlo sabre la mesa a no ms de 5-10 cm. del borde de la mesa. El observador


ha de sentarse en una posicin tal que obtenga la mayor comodidad.

6. Iniciar siempre la observacin con el objetivo de menor aumento.

ENFOQUE CON LOS OBJETIVOS DE MENOR AUMENTO (4X - lOX)

1. Encienda el sistema de ituminacin, ajuste la distancia interpupilar y mantenga el


diafragma a 1/3 de su maxima intensidad.

2. Site el condensador en la parte inferior de su recorrido.

3. Situ la muestra en el centro de la platina y fIjela con los ganchos, pues de lo


contrario al tocarlo ligeramente se pierde el cam pa que se est enfocando.

4. Con el tornillo macromtrico suba la platina al maxima.

5. Observando par los oculares, con los dos ojos abiertos, enfoque la preparacin,
hacienda descender lentamente la platina; es decir, alejndola del objetivo con el
tornillo macromtrico. Afine el enfoque utilizando el tornillo micromtrico.

6. Si existe diferencia visual entre los dos ojos, vane la posicin de uno de los oculares
hasta obtener nitidez en la imagen.

ENFOQUE CON EL OBJETIVO DE MEDIANO AUMENTO (40X)

1. Haga el cambio directo del objetivo de lox al de 40X (sin pasar par el de bOX).
2. Suba el condensador a la mitad de su recorrido y a la vez, dle mayor abertura al
diafragma sin Ilegar al maxima (aproximadamente 2/3 de su abertura total).

7
mh Biologic, Practices de Laborotorio
ftT
UWGT

3. A la vez que realiza la observaciOn a travs de los oculares, haga descender


ientamente la platina hasta obtener un enfoque perfecto (el recorrido de la platina es
mmnimo).

4. Afine el enfoque con el tornillo micromtrico.

ENFOQUE CON EL OBJETWO DE MAYOR AUMENTO (1 OOX)

1. Haga descender la platina aproximadamente un (1) cm.

2. Cambie ci objetivo de 40X por el de IOOX.

3. Ponga sobre la preparacin una pequea gota de aceite de cedro.

4. Con el macromtrico y mirando de lado, suba la platina con mucho cuidado hasta
que ci objetivo toque la gota de aceite.

5. Mirando por los oculares, maneje la iluminacin; para esto, suba y manio.bre el
condensador y el diafragma hasta que observe el campo homogneamente
iiuminado.

6. Observando por los oculares y manipulando el tornillo micromtrico, acerque


lentamente la platina al objetivo; el enfoque lo conseguir de inmediato con un
mInimo de recorrido.

Tips
( estar rea(izancfo e( enfoque d flu muestra mantenga los dos ojos aiertos. A ti flora d
c[i6ujai acostthn6rese a u.sar e( 010 izquierdo para o6servar flu muestra y e( clerec/io para
c[ifiujar i2i o6servac[o.

Si tiene thficu(tacles para enfocar c(aramente ra muestra, verjfique:


V cE.tf utec[senta6o a (a a(tura correcta?

V Est (impias (as (entes d (Os ocu(aresy/o o6jetivos?


V cEta e( concfensaior en e( recorrido ac[ecuac[O segin e(o6jetivo?
It ... e(c[iafragma muy cerrac[o? ... c e(o6jetivofuera de (ugar.2

it V cEsta sucio e(cufreojeto?

TRABAJO PRACTICO
A. MICROSCOPIO SIMPLE 0 ESTEREOSCOPICO

al. Dibuje ci microscopio estereoscpico que se Ic suministro e indique en este,


las partes que lo conforman.
A
ND
BiologIo, Prcticcis de Laborolorio

a.2. Sobre el meson de trabajo Ud., dispone de


una variedad de especImenes vegetates y
animates.

Seteccione uno de eltos para realizar et


proceso de enfoque descrito en la pagina 3.

Dibuje /0 observado.

B. MICROSCOPIO COMPUESTO

b.1. Dibuje el microscopio compuesto que se le suministro e indique en este, las


partes que to conforman.
Ai
UMET
Biologic, Prcticas de Laborotorio

b.2. CALcuL0 DEL PODER DE AUMENTO


Calcule el aumento de las diferentes combinaciones de oculares y de objetivos de
su microscoplo compuesto.

Aumento de los Oculares Aumento del Objetivo Aumento del Microscoplo

b.3. OBSERVACION DE UNA GOTA DE AGUA ESTANCADA

1. Se le suministrar un recipiente con agua estancada. Tome con un gotero una (1)
gota y colquela en el centro de un portaobjeto.

2. CUbrala cuidadosamente con un cubreobjeto.

3. Siguiendo los pasos descritos en la pgina 7, examine la preparacin; primero con


el objetivo de menor aumento, luego con el mediano aumento y por Ultimo con el de
mayor aumento (inmersin). Dibuje e identifique (segUn anexo de pgina 13) el o
los microorganismos observados.

lox 40X IOOX

b.4. OBSERVACIN DE LEVADURAS

1. Se le suministrar una solucin de levaduras, la cual se ha mantenido durante 24


horas en agua azucarada al 10%.

2. Tome con un gotero una (1) gota de esta solucin y co!quela en el centro de un
portaobjeto; cbrala cuidadosamente con un cubreobjetos. Examine la preparacin
con el objetivo de 10, 40 y 100X. Dibuje 10 observado.

10
A lI
UUET
Biologic, Prcficas de Laborotorio

lox 40X IOOX

C. IMAGENES INVERTIDAS Y NO INVERTIDAS EN LOS MICROSCOPIOS OPTICOS

1. Escriba de forma nItida, sobre un portaobjeto limpio, las letras H, A, D F.

2. Enfoque el microscopio compuesto con el objetivo de menor aumento y compare la


posicin de las letras como se yen a travs del microscoplo y a simple vista.

3. Ponga los dos pulgares en cada extremo del portaobjetos y mirando a travs del
ocular, mueva lentamente el portaobjeto hacia delante y hacia atrs. ,Qu parece
sucederle a la letra?

4. ... Mueva el portaobjeto hacia la derecha y hacia la izquierda. ,En que direccin se
desplaza la imagen?

5. Realice similares observaciones con el microscoplo estereoscpico

6. Realice sus observaciones en la siguiente tabla

M. Compuesto M. Estereoscpico

Posicin de las letras (H, A , D, F)

Movimiento de las letras (H, A, D, F) cuando


se desplaza el portaobjeto hacia adelante

Movimiento do las letras (H, A, D, F) cuando


se desplaza el portaobjeto hacia atrs

Movimiento de las letras (H, A, D, F) cuando


se desplaza el portaobjeto a la derecha

Movimiento de las letras (H, A, D, F) cuando


se desplaza el portaobjeto a la izquierda

11
Biologic, Prcticas de Laboratorio
L&
I
Ufa ET

PREGUNTAS
1. Que puede decir acerca de la posicin relativa y el movimiento de los objetos cuando
estos se ye a travs del microscoplo compuesto?

2. Que puede decir acerca de la posicin relativa y el movimiento de los objetos cuando
estos se ye a travs del microscoplo estereoscpico?

3. Por qu es ms fcil romper el cubreobjeto, el portaobjeto o la lente frontal del


objetivo, cuando se sube la platina al trabajar con el objetivo de mayor aumento?
Que debemos hacer para evitar que esto ocurra?

4. ,Cundo se debe usar el tornillo micromtrico y cuando el tornillo micromtrico??

5. Qu es un cuerpo opaco y que tipo de microscoplo permite observarlos?

6. ,Cundo y por qu se utiliza la iluminacin ms intensa?

7. ,QA finalidad cum pie el aceite de cedro?

12
Bio/ogIa, Prcticas de Laboratorio
UNT

ANEXO I

MICROORGANISMS COMUNES EN AGUA ESTANCADA

Amoeba
11 Euglena
(long. 253Oj.i)
I MN 1k

Nyctotherus
(long. 90-185ji)
(dirnetro, aprox. 600j4

1I Goleps
(long. 80-11Oj.i)
Peranerna
(long. 20-70ji)
Synura
(dimetro, 100-400p.)

-9~ - Stentor
Blepliarismna
(long. 120-180i) (long. 600-1000)
Cii ilomonas
(long. 20-40ii)

Haiteria
(long. 20-40i4 Opalina
(long. aprox. 350j.i)

Paramecium
(long. 200-350i)
Spirostomnuni
Vorticella (long. 500-800j.i)
(altura. 25-460t)

13
810/0gb, Prcticas de LaboroiDrio
&I
UD.
I

UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL DEL TAcHIRA


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LABORATORIO DE BIOLOGIA

Prctica NO 2
MICROMETRIA
INTRODUCCION
La "micrometria" es la tcnica que permite medir el tamao real de los
microorganismos, microestructuras u objetos observados a travs del microscopio. Para
realizar estas mediciones, generalmente del orden de las millonsimas de metro (micras),
se emplea comnmente el MET0D0 DE LOS MIcROMETROS.

Para realizar las mediciones se utiliza un "disco ocular micromtrico" (D.O.M),


tambin Ilamado "micrmetro ocular", el cual es un disco que lleva una escala arbitraria,
sin medida alguna, dividida en partes iguales y que debe ser calibrada para cada ocular y
cada juego de objetivos, a fin de drsele valor en micras (p) a cada division.
Para realizar la calibraciOn de la escala del disco ocular micromtrico se req ulere de
una "lmina micromtrica" (L.M), conocida tambin como "micrmetro de platina" o
"micrOmetro de objetivo", que consiste en un portaobjetos en cuyo centro se halla una
escala conocida, generalmente con separaciones entre cada division de una centsima de
milImetro (0.01 mm). Como la micra (p) es la milsima parte de un milImetro (Ip
0.001 mm), cada division de la lamina es igual a lOp.

OBJETIVOS
Al finalizar el trabajo de Laboratorio el estudiante estar en capacidad de:
1. Calibrar el disco ocular micromtrico para cada ocular y cada juego de objetivos de
un microscopio.
2. Medir diferentes protozoarios y otras microestructuras.

MATERIALES
Microscopio compuesto, disco ocular micromtrico, Imina micromtrica, lminas
preparadas, aceite de inmersin.

PROCEDIMIENTO
A. CALIBRACION DEL D.O.M
1. Retire la lente superior de uno de los oculares. lntroduzca el disco ocular
micromtrico (D.O.M) y coloque nuevamente la Jente (Figura 1). Si el disco ocular

14
BiologIc, Prcflcas de Laboroforio

est bien colocado, al observar a travs del microscopio, vera en el ocular su escala
enfocada.

HWH)
0 10 20 30 40 50 60 70

Fiqura 1. a) Disco ocular micromtrico; b) Ubicacin del disco dentro del ocular.

2. Coloque la lmina micromtrica sobre la platina del microscopio. Enfoque con el


objetivo de menor aumento, hasta que las lIneas de la escala de la lmina
micromtrica aparezcan nitidas.

3. Superponga o haga coincidir las escalas del D.O.M y de la L.M en cero (0); observe
las primeras divisiones en que una Ilnea de la lmina y una linea del disco ocular
coincidan o se superpongan exactamente; tome estas como referenda.

4. Luego con un simple clculo determine el valor en milimetros (mm) y en micras (p)
de cada divisiOn del D.O.M.

5. Ejemplo: Observe la grfica que se


muestra a continuacin:

- La escala superior
10 20 30 40
representa la del D.O.M.
y la inferior, la escala de

H HPHHHH
a L.M.

-- Se puede apreciar que


20 divisiones de la
escala de la L.M,
coinciden con 27
divisiones de la escala
del D.O.M.

- Sabemos que la \
HH W W HH W
apreciacin de la L.M. es /
igual a lOp, por lo tanto las 20
divisiones equivalen a 200p.

15
Biologia, Prcticas de Laboratorio

I div. D.O.M x 200p = 7,41 p


27 div. D.O.M

- Si hemos utilizado por ejemplo un ocular de 1 O y un objetivo de lOX, tendremos


entonces que, en esas condiciones, cada division de la escala del D.O.M
equivale a 7,41p.

6. Observe otras divisiones en las que coincidan las escalas (por lo menos 2) y anote
estos valores. Establezca la equivalencia entre las dos escalas.

7. Siguiendo similar procedimiento calibre el D.O.M., para los objetivos de 40 y 100X.


A continuaciOn realice los clculos correspondientes

lox 40X box


Divisiones D.O.M: Divisiones D.O.M: Divisiones D.O.M:
Divisiones L.M: Divisiones L.M Divisiones L.M
Apreciacin L.M: Apreciacin L.M: Apreciacin L.M:

B. MEDICION DE MICROESTRUCTURAS
1. Manteniendo el disco ocular dentro del ocular, retire la lmina micromtrica y
sustityala por la lmina con la preparaciOn suministrada.
2. Empezando con el objetivo de menor aumento, mida longitud, dimetro y/o cualquier
detalle de una de las microestructuras que observe en la lmina suministrada. Para
esto, cuente las divisiones del disco ocular micromtrico ocupadas por el objeto y
multiplIquelas por el valor de cada divisiOn de acuerdo al objetivo empleado.

1!
;K
UT
BiologIa, Prcficas de Laboratorio

.RECUERDE: &va(or, de cola c[ivision MD. O.7vt, varlapara cola o6jetivo"

3. Con los objetivos de 40 y bOX mida la misma microestructura o microorganismo


utilizado para medir con el objetivo de lOX.

'1 IC

N div. Ocupadas = N div. Ocupadas = N div. Ocupadas =

Apreciacion D.O.M. = Apreciacion D.O.M. = Apreciacion D.O.M. =


/)
>
Tamao en p = ' Tamao en p = Tamao en p =

Tamao en mm = Tamao en mm = Tamao en mm =

PREGUNTAS
1. qu es importante medir microorganismos o microestructuras?

2. ,CAI es la finalidad de realizar la calibracin del disco ocular micromtrico para


cada ocular y cada objetivo de un microscopio?

3. Mencione las diferencias existentes entre la escala del disco ocular micromtrico y
de la lmina micromtrica.

4. Al calibrar el D.O.M. para una determinada combinacin de oculares y de objetivo,


se encuentra que 20 divisiones del D.O.M. coinciden con 4 divisiones de la L.M.
Calcule el valor en p y en mm para el D.O.M.

17
BiologIc, Practices de Laborctorio

UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL DEL TACHIRA


VICERRECTORADO ACADEMICO
DECANATO DE DOCENCLA
DEPARTAMENTO DE INGENIERIA DE PRODUCCION ANIMAL
LABORATORIO DE BIOLOGIA

Prctica N 3
ESTUDIO DE LA CELULA VEGETAL
UTILIZANDO EL EXAMEN INMEDIATO 0 In Vivo

INTRODUCCIN

La teorIa celular constituye uno de los principios fundamentales de la biologla y


establece que todos los organismos vivos estn formados por una 0 ms clulas y en
general se acepta que ningtn organismo es Un ser VIVO Si no consta al menos de una
clula. Algunos organismos microscpicos, como bacterias y protozoos, son clulas
Cinicas, mientras que los animales y plantas son organismos pluricelulares que estn
formados por muchos millones de clulas, organizadas en tejidos y rganos.

Entre las clulas procariticas y eucariOticas hay diferencias fundamentales en


cuanto a tamao y organizacin interna:

Las procariticas, que comprenden bacterias y cianobacterias (bacterias


fotosintticas), son clulas pequeas, de entre 1 y 10 pm de dimetro, y de estructura
sencilla; carecen de citoesqueleto, retIculo endoplasmtico, cloroplastos y mitocondrias; el
material gentico (ADN) est concentrado en una region, pero no hay ninguna membrana
que separe esta region del resto de la clula.

Las clulas eucariticas, que forman todos los dems organismos vivos, incluidos
protozoos, plantas, hongos y animales, son mucho mayores (entre 10 y 100 pm de
longitud) y tienen el material gentico envuelto por una membrana que forma un rgano
esfrico conspicuo Ilamado nCicleo. De hecho, el trmino eucariOtico deriva del griego
'nUcleo verdadero', mientras que procariOtico significa 'antes del ncleo'.

Toda clula vegetal est encerrada por la pared celular. En el interior de Ia clula,
limitados y/o rodeados por la membrana celular a plasmalema, se encuentran los
constituyentes vivos cuyo conjunto forma el protoplasma, el cual comprende el
citoplasma con los organoides (mitocondrias, aparato de Golgi, reticulo endoplasmtico
lisa y rugoso, plastidios) y el nticleo. Las paredes y membranas clulas adyacentes estn
atravesadas par finos filamentos protoplasmticos que las interconectan; estas
conexiones son los plasmodesmos.

En el citoplasma encontramos adems de los organoides, diversas inclusiones que


contienen productos no vivos absorbidos o elaborados por la materia viva. Los ms
voluminosos son las vacuolas, inclusiones hidrOfilas que se funden en una sola, en las
clulas vegetales adultas.

":3
k I,AK~
I
81010gb, Prcticas de Loboratorio

En este trabajo de laboratorlo se estudiar la clula vegetal y aqueHos organelos e


inclusiones que normalmente son visibles al microscopio ptico: PARED CELULAR,
CITOPLASMA, NCJCLEO, NUCLEOLOS, VACUOLAS Y PLASTIDIOS.

TECNICAS DE ESTUDIO CELULAR


Cabe destacar que el estudlo microscpico de microorganismos, estructuras
celulares, tejidos y rganos (vegetales y animales), puede hacerse:

1. Sobre el organismo vivo o sobre partes aisladas que sobreviven cierto tiempo
(examen inmediato o In vivo).

2. Sobre organismos o partes de estos que han sido muertos mediante procesos de
fijacin y coloreados posteriormente (examen mediato o Post mortem).

Para el estudio de la clula vegetal utilizaremos el EXAMEN INMEDIATO o in vivo,


empleando los siguientes mtodos:

a) EXAMEN AL ESTADO FRESCO: No se emplean reactivos modificadores; los


microorganismos o estructuras deben observarse en su medio lIquido habitual, agua
o medios liquidos especialmente preparados.

b) COLORACION SUPRAVJTAL: Se ponen en contacto con un colorante vital clulas libres


o porciones de tejidos y rganos, durante el tiempo que se prolonga la vida de esos
elementos.

/
Los "coforantes" son coinpuestos _y
organicos co(oreados, que se coin6inan 7iorntes vita fes" cumplen tz
quInzica ofisicarnente COIl &25 r
ante nicion con &z ventaja
sustancias d L2s cfufas ponienc[o d cfe que WO aCtera
inanfiestoy/o resaftanclo c[etalTes d a cefu/Tar niprovo
su estructura. rte de &z cfufa. I

Para lograr una buena observacin microscpica de tejidos, bien sea con examen In
vivo o Post mortem, la muestra debe ser suficientemente delgada y estar constituida por
un nmero de clulas que sean representativas del tejido que se va a estudiar. Para eIIo,
se realizan cortes a mano utilizando un bisturI o navaja de otro tipo.

19
Biologla, Prcticas de Loborolorio
WTJ

OBJ ETIVOS

Mediante los recursos previstos, al finalizar el trabajo de laboratorio, el estudiante


estar en capacidad de:

1. Preparar lrninas para hacer observaciones rnicroscpicas inmediatas (in vivo)


utilizando el mtodo de examen all estado fresco.

2. Preparar lminas para hacer observaciones microscpicas inmediatas (in vivo)


utilizando el mtodo de coloracin supravital.

3. Comprobar que las clulas vegetales poseen pared celular, y que sta presenta
componentes quimicos que se ponen de manifiesto mediante reacciones
especIficas.

4. Observar otros componentes de la clula vegetal, tales como: plastidios, vacuolas,


nCicleo y nuclolos.

MATERIALES

Microscopio compuesto, bisturI u hojillas de afeitar, agujas de diseccin, lminas porta y


cubreobjetos, colorantes (azul de metileno y lugol), reactivo l-Kl-H2SO4, Fluroglucinol
acidificado con cido clorhIdrico, alcohol, solucin sauna, agua destilada, pinzas, papel
absorbente (toallmn), material vegetal.

PROCEDIMIENTO

A) OBSERVACIN DE PARED CELULAR, CITOPLASMA, VACUOLAS, NCJCLEO Y NUCLEOLOS EN


CELULAS DE TEJ1D0 EPIDERMICO DE CEBOLLA (Allium cepa)

1. Coloque una (1) gota de agua destilada en el centro de un portaobjetos.

2. Con una pinza, desprenda la epidermis de la superficie cncava de una capa de


cebolla. La capa epidrmica deber ser transparente.
3. Coloque un trocito de la epidermis en el portaobjetos.

4. Con una aguja de diseccin 0 Ufl mondadientes, extienda cualquier doblez de la


epidermis y cibrala cuidadosamente con un cubreobjeto.

5. Observe la preparacin en el microscopio, primero con el objetivo de menor


aumento y luego con el de mayor aumento. Dibuje e identifique 10 observado.

6. Agregue una (1) gota de soluciOn salina en un borde del cubreobjeto, de un lado de
la preparacin, para que penetre por capilaridad: La penetracin es ms rpida si
del lado opuesto a aquel donde se colocO la gota de solucin, mediante papel
absorbente (papel toallIn) se extrae el exceso de solucin. Observe con el objetivo
de mediano aumento y dibuje los cambios pro ducidos en las clulas y sus
vacuolas.

20
BiologIo, Prcticos de Loborotorio
LI El

7. Prepare una nueva muestra de epidermis de ceboUa; observe al microscopio.

8. Saque la preparacin del microscopio y coloque una (1) gota de azul de metileno
diluido o de lugol en un borde del cubreobjeto, de un lado de la preparacin, para
que 'este entre por capilaridad.

9. Observe primero con el objetivo de menor aumento y luego con el de mediano


aumento. Dibuje e identifique Jo observado.

Agua Solucin sauna Colorante

B) DETERMJNACIN DE SUSTANCIAS CONSTITUYENTES DE LA PARED CELULAR

En las plantas superiores, la pared celular puede ser fraccionada por extraccin
selectiva con diferentes solventes, en los siguientes grupos qulmicos: celulosa,
hemicelulosa, sustancias pcticas, lignina y otros compuestos menos comunes, pero no
menos importantes como son: grasas, ceras (cutina), taninos, proteinas, gomas y
mucIlagos.

Todas estas sustancias pueden ser reconocidas mediante test microqulmicos, es


decir, por reacciones que producen coloracionesque pueden ser observadas.

b.1. Celulosa

Es el principal constituyente de la pared celular, forma la estructura microfibrilar alrededor


de la cual yacen las otras sustancias.

Proceda a determinar celulosa mediante la reaccin del l-Kl-H2SO4, de la siguiente


ma nera:

1. Coloque una gota del reactivo 1-KI y otra gota de H2SO4 en la lmina portaobjeto y
sumerja una pequea porcin de algodn (tricomas seminales de Gossypium spp)
o una tira de papel. Observe que sucede.

2. Realice finos codes transversales de coqueta (Impatiems sultanii) y colquelos


sobre una lmina portaobjetos. Agregue una gota del reactivo 1-KI y una gota de
H2SO4. Observe al microscopio con el objetivo de lox.

21
a; Blob gb, Prcticas de Laboralorio

Anote los resultados:

b.2. Lignina

Esta sustancia hace posible el desarrollo de fibras y tejido vascular; despus de Ia


celulosa es el polImero ms abundante.
Determine lignina mediante la reaccin del Floroglucinol acidificado con HCI de la
siguiente manera:

1. Coloque una pequea tira de papel peridico o papel toallmn sobre una lmina
portaobjeto; agregue unas gotas del reactivo Floroglucinol y de HCI. &Qu6 sucede?

2. Realice el mismo procedimiento con virutas de madera.

Anote los resultados:

C) OBsERvAcIN DE PLASTIDIOS

Los plastidios son organoides Intimamente relacionados con los procesos


metablicos de las clulas vegetales. Existen 3 tipos de plastidios: cloroplastos,
cromoplastos y leucoplastos.

c.1. Cloroplastos

Tome una hoja de Elodea sp., colquela en un portaobjeto sobre una gota de agua y
ctbrala con un cubreobjetos; observe al microscopio con 10 y 40X. Dibuje e identifique
lo observado.

22
Biologfa, Practices de Laboratorio

c.2. Cromoplastos

Sobre portaobjetos limpios reaice macerados de pulpa de frutos de tomate


(Lycopersicum esculentum), pimentn (Capsicum annuum) y de raIz de zanahoria
(Daucus carota); coloque el cubreobjeto y observe al microscopio. DThuje e identifique Ia
observado.

Tomate Pimentn Zanahoria

c.3. Leucoplastos

De acuerdo a las instrucciones del Profesor, realice un macerado o carte de tallo de


papa (Solanum tuberosum); coloree con solucin de Yodo y observe al microscopio
con el objetivo de 10 y 40X. Dibuje e identifique Jo observado.

c.4. Compare en cuanto a forma, color y funcin los tipos de plastidios observados.

Tipo de Plastidlo Forma Color Funcin


J [ j
Cloroplastos

Cromopiastos

I Leucop/astos

23
9 BiologIa, Prcticas de Laborotorio
oreET

D) INCLUSION ES CELULARES

Dentro de estas se encuentran, entre otras, sales clcicas, las cuales aparecen
como cristales de diferente forma (rafidios, prismas, drusas y cistolitos); estos cristales
generalmente son de oxalato o carbonato de calcio.

d.1. RAFIDIOS: Coloque sobre un portaobjeto un code transversal de peciolo de coqueta


(Impatiems sultan/l) embebido en alcohol. Observe at microscopio con 10 y 40X y
dibuje los cristales que presenta.

d.2. DRUSAS Y PRISMAS: Realice finos codes transversales en peciolos o tallos de


Begonia (Begonia spp); colquelos en un portaobjeto y observe at microscopio con
10 y 40X. Dibuje e identifique los diferentes tipos de cristales que presenta.

d.3. CISTOLITOS: Realice un code transversal de la hoja de caucho (Ficus elastica);


colquelo sobre un portaobjeto; observe at microscopio con 10 y 40X y dibje los
cistotitos inmersos dentro de algunas clulas epidrmicas.

Rafidios Drusas y prismas Cistolitos

.Adems de su forma caracteristica, qu otras diferencias encuentra entre los cristales


observados?

24
BiologIa, Prcticas de Laboratorio

PREGUNTAS

1. En el siguiente Cuadro Resumen indique con una "X" que mtodo a mtodos de
Examen In viva y el nombre del material vegetal empleado para estudiar los
diferentes componentes de la clula vegetal

Mtodo de Examen In vivo Material_vegetal_utilizado


Componente Al Estado Coloracin
Nombre Comn Nombre Cientifico
Fresco Supravital

Pared celular

Celulosa

Lignina

Leucoplastos

Cromoplastos

Cloroplastos

Rafidios

Drusas

Cistolitos

Vacuolas

2. tPor qu es importante utilizar solucin de colorante, en lugar de agua, para


estudiar las preparaciones? .Justifique su respuesta.

25
Am BiologIc, Practices de Loboraforio
u,.ET

UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL DEL TA0HIRA


VICERRECTORADO ACADEM 100
DECANATO DE DOCENCIA
DEPARTAMENTO DE INGENIERIA DE PRODUCCION ANIMAL
LABORATORIO DE BI0L0GIA

Prctica NO 4
ESTUDIO DE LA CELULA ANIMAL UTILIZANDO METODOS
In Vivo Y TECNICAS SENCILLAS DE ESTUDIO POST-MORTEM

INTRODUCCION
Las clulas animates estn constituidas por el protoplasma (citoplasma con los
organoides y el nUcleo) rodeado por la membrana plasmtica. Las ctulas animales no
poseen pared celular, plastidios ni grandes vacuolas to que las diferencia de las clulas
vegetates.

Presentan diferentes formas y tamaos, dependiendo estas caracterIsticas


fundamentalmente de la funcin que cumplen. Por ejemplo, las clulas epiteliales pueden
tener una o varias de las siguientes funciones: proteccin, absorcin, secrecin y
sensacin; las clulas nerviosas intervienen en la percepciOn y conducciOn de estimulos;
las clulas sangumneas transportan oxIgeno y bixido de carbono (eritrocitos) y protegen al
organismo contra microorganismos invasores (leucocitos).

En la presente prctica se harn observaciones in vivo, con Coloracin Supravital y


se realizar estudio Post mortem al agregar fijador a las muestras sanguineas para luego
colorearlas y efectuar su observacin.

OBJ ETIVOS

Mediante los recursos previstos, al finalizar el trabajo de laboratorlo, el estudiante


estar en capacidad de:

1. Comprobar, mediante estudios In vivo y/o Post mortem, que las ctulas poseen
tamaos y formas variables y que sus tamaos y formas estn relacionados con la
funcin que cumplen.

2. Establecer diferencias entre las clulas sangumneas (eritrocitos y leucocitos


bsicamente) de mamIferos y otros vertebrados.

MATERIALES

Microscopio compuesto; palillos de dientes (mondadientes); !minas porta y cubreobjetos;


agua destilada; Metanol; Colorantes: azul de metileno, lugol y giemsa; muestras
conservadas de sangre de mamIferos y otros vertebrados; Iminas microscp icas
preparadas; papel absorbente (toatlIn).

26
ai Biologla, Prcticas de Laboratorio

PROCEDIMIENTO

A) OBSERVACION DE CELULAS EPITELIALES

1. Ponga en el centro de un portaobjeto una (1) gota de azul de metileno diluido.

2. Pase ligeramente un palillo de dientes por la parte interior de su mejilla (mucosa


bucal). No frote hacia atrs y hacia delante, sino en una sola direccin, separando el
palillo despus de cede movimiento.

Aunque no yea material en el pal/I/o habr colectado muchas ce/u/as.

3. Separe el material colectado golpeando suavemente el palillo en la gota de


colorante que est sobre el portaobjeto.

4. Con el palillo extienda el material en la gota de colorante e inmediatamente cubra la


preparacin con un cubreobjeto.

5. Seque con papel toallin la superficie airededor del cubreobjeto.

6. Examine la preparacin con el objetivo de menor aumento y luego con el de


mediano. Dibuje 10 observado.

7. Utilizando otro portaobjeto, repita el procedimiento pero esta vez, aplique una (1)
gota de Lugol en vez de la gota de Azul de metileno diluido. Dibuje Jo observado.

Azul de Metileno Lugol

B) OBsERvAcION DE CELULAS SANGUINEAS

1. Coloque una gota de sangre en el extremo de un portaobjetos limplo.

2. Sostenga un segundo portaobjetos entre los dedos pulgar e mndice; colquelo sobre
el portaobjetos anterior formando un ngulo de 450 con respecto a la gota de sangre
(Ver Figure 1).

27
ig
LIDO T
Biologic, Practices de Laboratorio

3. Con la ayuda de este portaobjetos extienda uniformemente la sangre sobre el primer


portaobjetos. Una capa muy delgada quedar distribuida sobre la superficie del
portaobjetos. Deje secar al aire.

4. Agregue Metanol y espere 5 minutos.

5. Coloree con Giemsa durante 20 minutos.

6. Lave el exceso de colorante con un chorro delgado de agua.

7. Cuando el frotis est completamente seco, examine at microscopio. Haga Un dibujo


de su observacin e identifique los diferentes tipos de clulas.

8. Repita el procedimiento anterior con sangre de otra clase de vertebrados que se le


suministrar.

golita de sangre
El
se desplaza hacia la
derecha hasta tacar > Sangre de mamuieros
la gota

I
yluegose
______ desliza hacia
7
la tzquierda.
0

Figura 1. Procedimiento para realizar el frotis Sangre de ayes

28
A
-1)
81010gb, Prcticos de Loboratorio

PREGUNTAS

1. Qu tcnicas de cobracin realiz para:

a) Estudiar clulas epiteliales?

b) Estudiar clulas sangulneas?

2. Investigue la composicin qulmica de los colorantes utilizados.

3. ,Con qu finalidad emple el Metanol?

4. Enumere los tipos de clulas observadas durante la prctica.

5. ,Qu diferencias observ entre los eritrocitos y leucocitos de mamIferos y los de


ayes?

6. Aunque todas las clulas siguen un mismo plan estructural, qu diferencias observ
entre estas7. ... ,A qu se deben estas diferencias?

29
Biologic, Prcticas de Laboroiorio

UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL DEL TAcHIRA


VICERRECTORADO ACADEMICO
DECANATO DE DOCENCIA
DEPARTAMENTO DE INGENIERIA DE PRODUCCION ANIMAL
LABORATORIO DE BIOLOGIA

Prctica N 5
FREPARJACION DE LAMINAS PERMANENTES PARA EL ESTUDIO
Post mortem DE CELU LAS Y TEJIDOS

INTRODUCCION

Las clulas reunidas de acuerdo a las diferenciaciones morfolgicas, fisiolgicas y


fisicoquimicas forman agrupaciones celulares que, adaptadas rigurosamente a una misma
funcin, constituyen los tejidos, los cuales se designan con distintos nombres para
diferenciarlos; en el caso de los tejidos animales: tejido epitelial, tejido conectivo, tejido
nervioso, etc.

Como ya se mencionO en prcticas anteriores, para realizar el examen mediato o


Post mortem de tejidos animales y/o vegeta!es, es necesario recurrir a mtodos ms
complejos de tincin que exigen la muerte previa de la clula.

En este sentido, es importante conocer que, el desarrollo de tcnicas de fijacin y


preparacin de material biolgico para tincin, especialmente cuando se trata de fin Isimos
codes obtenidos con el micrOtomo, ha permitido investigar las pequeIsimas estructuras
de las clulas y sus ncleos.

Aunque se han desarrollado nuevas tcnicas, mediatas o inmediatas, mediante las


cuales pueden observarse estructuras sin teir, los mtodos de tinciOn Post mortem se
usan frecuentemente en areas de la Biologla, tales como la Medicina, Fisiologia,
Patologia, etc.

Como recordaremos, "los colorantes son compuestos orgnicos coloreados, que se


combinan fIsica o quimicamente con las sustancias de las clulas, poniendo de manifiesto
y/o resaltando detalles de su estructura".

Aunque se puede usar un solo colorante, es muy comn aplicar dos o tres, cuyos
colores contrasten. Cuando se aplica una mezcla de dos o tres colorantes se denomina
"coloraciOn doble" y "coloracin triple", respectivamente; cuando se aplican
separadamente, se llama 'contratincin". La contratincin supone el cambio de un
colorante por otro: el tejido es teido inicialmente con un colorante; a continuacin se
aplica un segundo colorante que sustituye gradualmente al primero, hasta que las
diferentes estructuras celulares aparezcan con diferentes colores.

30
4; Biologia, Prcticas de Loborotorio

El mtodo de tincin comnmente usado cuando se trata de tejidos animales es el


de contratincin, que emplea, en nuestro caso, Hematoxilina y Eosina como colorantes.
La Hematoxilina colorea el ncleo de color prpura a azul y la Eosina, al citoplasma de
color rojo.

OBJETIVOS

Mediante los recursos previstos, al finalizar el trabajo de laboratorlo, el estudiante


estar en capacidad de:

1. Conocer la tcnica de preparacin de lminas permanentes para observaciones


Post mortem de clulas y tejidos.

2. Comprender el fundamento de cada una de las etapas a seguir en la preparacin de


lminas permanentes para observaciones Post mortem de clulas y tejidos.

MATERIALES

Microscopio compuesto, estufa, micrOtomo de deslizamiento, trozos de diferentes tejidos


animales ya fijados, pinzas, portamuestras, moldes para realizar los tacos de parafina,
cubetas de coloracin, bisturl u hojillas de afeitar, papel toallIn, agua destilada, alcohol en
dfterentes concentraciones, xilol, parafina, colorantes (Hematoxilina y Eosina), alcohol
acidificado, albmina de Mayer, agua amoniacal y blsamo de Canada.

PROCEDIMIENTO

Para el estudio Post mortem de tejidos animales se debe seguir todo un proceso en
lo que se refiere a la preparacin y tincin del tejido biolgico que se pretenda estudiar.
Como complemento a la demostracin y explicacin que hare el Profesor o Instructor, a
continuacin se describir la tcnica y/o procedimiento a seguir en cada una de estas
etapas; asimismo se suministra al final de la prctica un esquema general de dicha
tcnica (Anexo 1).

A) PREPARACIN DEL TEJIDO

1. Corte de la muestra: El tejido que se quiere estudiar, previo a su fijacin, deber


cortarse en pequeos trozos, de unos 15 milImetros de largo y 5-7 milimetros de
ancho (aproximadamente 1 cm').

2. Fijacin: Este tratamiento preliminar tiene varios objetivos:

a) Permite conservar las clulas y sus contenidos con aspecto y estructura similar
al que mostrarlan si estuviesen vivas;
b) Despus de fijado, el tejido puede admitir algunos colrantes riis fcilmente y,

31
Bio!ogio, Prcticas de Laboroiorio
LYMM

c) Endurecer el tejido, Jo que permite resistir mejor a los tratamientos posteriores


(deshidratacin, cortes, etc.)

Existen muchos tipos de fijadores, los cuales pueden ser gulmicos (alcohol, ter,
cido picrico, bicromato de potasio, formaldehIdo, formol a mezclas de estos) y
fisicos (calor, frIo, etc.).

La eleccin del fijador depende del tejido que se trate, de los detalles estructurales
que se desean resaltar y del colorante que se emplee. En el protocolo de esta
prctica, en el laboratorio de Biologla, se utiliza formol al 10%, durante 10 horas
como minimo.

2. Eliminacin del fijador: Despus de haber dejado durante el tiempo minima


necesario los trozos de tejido en el fijador, el exceso de este debe lavarse con agua
durante 10 a 15 minutos, a fin de que la coloracin posterior sea exitosa.

3. DeshidrataciOn: Posteriormente es necesario introducir los trozos de tejido en la


parafina para poder seccionarlos en el micrtomo en finos cortes. Pero como la
parafina y el agua contenida en los tejidos no son miscibles, estos deben primero
deshidratarse pero sin propiciar la deformacin de los tejidos, por to cual se pasan
las muestras por soluciones de concentracin creciente de alcohol IsopropIlico o
Etanol: 50%, 60%, 70%, 80%, 90% yfinalizando en alcohol de 100%.

4. lmpregnacin por un disolvente de Ia parafina: Al finalizar la deshidratacin, las


muestras se encuentran embebidas en alcohol absoluto. Como la parafina es
prcticamente insoluble (no miscible) en alcohol, es necesario reemplazar este por
un liquido intermediario, es decir, que sea miscible con el alcohol y la parafina al
mismo tiempo; llmese a este proceso "clarificacin". Para esto se deben sumergir
las muestras de tejido en xilol, toluol, benzol a cloroformo entre otros.

5. Inclusion en parafina

a. PenetraciOn de Ia parafina: Las muestras clarificadas se sumergen, tres veces


(6 horas c/u), en parafina fundida a 46 00 y se colocan en una estufa, a una
temperatura pocos grados superior a la temperatura de fusion de la parafina (56-
5700) para evitar que se cueza el tejido. En las dos primeras se logra la
evaporacin del disolvente de Ia parafina y en la tercera, la completa penetracin
de la parafina en todas las clulas del tejido.

b. Inclusion definitiva: Despus del tercer bao de parafina, los trozos de tejido
se colocan individualmente en moldes que contienen parafina fundida,
orientndolos y mantenindolos, con ayuda de una pinza, en la posiciOn
deseada hasta que la parafina se solidifique alrededor del trozo de tejido.
6. Corte y Montaje: Los cortes de 5p de espesor, de los tacos de parafina con el tejido
incluido, se realizan con el micrOtomo de deslizamiento. Al irse cortando se recogen

32
1 Biologia, Prcticos de Laborctorio
9X3

en una caja de Petri con agua caliente (56 C) y gelatina sin sabor, sobre la cual se
extendern estos codes; luego se trasladan a la superficie de un portaobjetos y se
secan entre dos hojas de papel secante. Para adherirlos mejor a la superficie del
portaobjetos se puede colocar en estos una delgada capa de Albmina de Mayer.

2. TINCION

1. Desparafinizacin: Como la parafina impide la coloracin, se procede a eliminarla,


lavndola con uno de sus disolventes: xilol, toluol, benzol, etc.

2. Eliminacin del disolvente de la parafina: El disolvente de la parafina se quita con


alcohol absoluto y de esta manera queda el code del tejido sin parafina, adherido al
portaobjeto y listo para continuar la siguiente tcnica.

3. Hidratacin: Los codes desparafinados estn completamente deshidratados. Para


colorearlos es necesario hidratarlos previamente, pasndolos primero por una serie
de alcoholes de concentracin decreciente: Alcohol IsopropIlico o Etanol al 90%,
80%, 70%, 60%, 50% y luego, lavndolos con agua destilada. Una vez hidratado el
code se procede a la coloracin propiamente dicha.

4. Tincin propiamente dicha:

a. El portaobjetos, con el code de tejido adherido se introduce en el colorante


Hematoxilina.

b. Se sumerge en un recipiente con agua amoniacal, a fin de que la Hematoxilina


tia de azul ciedas estructuras celulares, y se vuelve a lavar con agua de chorro.
Luego se elimina el exceso de este colorante introduciendo el portaobjetos en un
recipiente con agua acidificada.

c. A continuacin se lava con agua de chorro.

NOTA: Al finalizar esta etapa es recomendable examinar al microscoplo para


comprobar que el tejido ha absorbido suficiente colorante. De ser asI,
se aplica a continuacin el contracolorante (Eosina).

d. Se sumerge en un recipiente con alcohol al 95%, antes de sumergir el


portaobjeto en el contratinte Eosina.

e. Se pasa la muestra por recipientes con alcohol absoluto, alcohol-xilol, xilol, xilol.

f Se seca y se vierte un poco de Blsamo de Canada sobre la seccin de tejido,


antes de cubrirla con el cubreobjetos.

33
A , Biologla, Prcticas de Loborotorio

OBSERVACIN DE LAMINAS PERMANENTES

Muestra: Muestra: Muestra:

Muestra: Muestra: Muestra:

PREGUNTAS

1. ,Cules pueden ser las principales causas de error en la tcnica utilizada?

2. Qu funciOn cumplen cada una de las siguientes sustancias:


a) Hematoxilina?
b) Eosina?
c) Blsamo de Canada?
d) Soluciones de alcohol en concentraciones decrecientes y crecientes?
e) Xilol?
f) Agua amoniacal?

3. De acuerdo a la informacin suministrada por el Profesor o Instructor y a la tincin


por usted realizada, complete el siguiente esquema, especificando los tiempos de
exposicin en cada una de las etapas y cualquier otra observacin que considere
relevante.
BiologIa, Prcticas de Laboratorio

I. PREPARACION DEL TEJIDO

LJ LJ
Corte FijaciOn EliminaciOn del
Seleccin del tejido a estudiar (trozos de aprox. 1cm3) fijador

.56-57
CC

1FH11
500% 60% 70% 60% 90% 100%
(XiIot)
-..----
__

Penetracion de la Parafina
Deshidratacin (Alcohol) Clarificacion 3 veces en parafina a 46 c; se Iteva a estufa a 56-57 C

I 1-7

----------------- (Xilol)
lJ
(Alcohol absoluto)
Eliminacin del
Inclusion definitiva Corte y Montaje Desparafinizacion disolvente de la
pa rail na

II. T!NCION
17

800%
f 1J TJ 1J
LIJ
70% 60% 50% agua
Hematoxilina Agua Agua Agua Agua
HidrataciOn amoniacal acidificada

Alcohol Eosina Alcohol Alcohol- Xilol-Xilol Blsamo


al 95% _
absoluto XiJol de Canada

35
AD
UMET
81010 gb, Prcticos de Laboraforio

UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL DEL TACHIRA


VICERRECTORADO ACADEMICO
DECANATO DE DOCENCIA
DEPARTAMENTO DE INGENIERIA DE PRoDucc ION ANIMAL
LABORATORIO DE BIOLOGIA

Prctica No 6
EL CICLO CELULAR Y LA MITOSIS

INTRODUCCION

Robert Brown (1831) fue el primero en observar los ncleos celulares, pero el
significado y la importancia biolgica de este descubrimiento solo se pusieron de
manifiesto at descubrir Strasburger (1875). y otros investigadores que los nOcleos se
forman exciusivamente a partir de otros ncleos mediante un proceso de division al que
Fleming (1882) denominO "MITOSIS".

La mitosis constituye el proceso bsico y fundamental del crecimiento y desarrollo


de todo organismo vegetal o animal con reproduccin sexual, los cuales comienzan su
historia vital a partir de una sola clula, denominada cigoto, originada por la fecundaciOn
del gameto femenino por et masculino; de esta primera clula, por sucesivas divisiones
mitOticas, se origina todo el organismo. Tambin mediante divisiones celulares crecen y
se regeneran los tejidos con la excepciOn de las clulas nerviosas (neuronas) que no se
dividen.

El proceso de la mitosis es uniforme en todas las divisiones somticas, y sus


caracteristicas esenciales son muy sencillas: previo al proceso mitOtico, ocurre la
duplicaciOn de los cromosomas, los cuales son los portadores del material gentico: el
ADN (cido desoxirribonucleico). En Ia mitosis cada cromosoma se duplica y las replicas
se separan una de otra en la division celular, dirigindose una de ellas at ncteo de una
clula hija y su doble a la otra clula hija. Por to tanto, las clulas hijas son idnticas entre
si y a Ia clula madre en cuanto a constituciOn cromosOmica.

Este hecho es importante no solo para la vida normal del individuo, sino tambin
para sus descendientes en generaciones sucesivas. Cada una de las clulas tiene el
mismo potencial hereditarlo y, por tanto, el mismo complemento de cromosomas y genes.
La continuidad de este material hereditarlo est asegurado por el proceso mitOtico, en el
cual la divisiOn de una clula tiene lugar de un modo preciso y ordenado.

La division del ncteo celular se conoce como CARIOCINESIS. La CITOCINESIS 0


divisiOn del citoplasma, hasta cierto punto independiente de Ia cariocinesis, completa el
ciclo de divisiOn celular.

Las clulas que no estn en proceso de divisiOn celular se dice que estn en
it
estado de reposo" o "estado metabOlico".

36
MR, BiologIa, Prcflcos de Laboratorio
IA

Aunque el citoplasma es tan importante como el ncleo para el crecimiento y la


herencia, en esta descripcin nos referimos solo al ncleo pues es alil donde ocurren los
cambios visibles asociados con la division mitOtica.

EL CICLO CELULAR
El ciclo celular consiste en dos fases: interfase y mitosis.
El ciclo celular est finamente regulado. Esta regulacin ocurre en distintos
momentos y puede involucrar la interacciOn de diversos factores, entre ellos, la falta de
nutrimentos y los cambios en temperatura o en pH, pueden hacer que las clulas
detengan su crecimiento y su divisiOn.
Antes de que una
u
clula eucariOtica pueda y la
cntithd dc onthis.'
comenzar la mitosis y irimas y 01M
dividirse efectivamente, mocu1as /
debe duplicar su DNA,
sintetizar histonas y otras
protelnas asociadas con el
DNA de los cromosomas, bpiiac6n. &I
DNA. y piii.
producir una reserva asoia&s; existen
dus. cip:
adecuada de organelas dc Ia iafonth,,
gen fti=- de );-a t1l2
para las dos clulas hijas y
ensamblar las estructuras
necesarias para que se
Ileven a cabo la mitosis. cua.c necc-adas
pradks ;pkzrn
El nUrnero de veces IQS cmun-moz
epnpiezzn a cdesate
que una clula se ha
dividido anteriormente Figura l. Ciclo Celular
tambln influye en la
divisiOn celular.
Cuanto mayor edad tiene el organismo de donde se toman las clulas, menor ser
el nUmero de veces que las clulas se dividan en cultivo. A este fenOmeno se lo denomina
senescencia o envejecimiento celular.
Esta restricciOn en el nmero de divisiones se correlaciona con el acortamiento
progresivo de los extremos de los cromosomas los telmeros a lo largo de los
sucesivos ciclos celulares. Esto no ocurre en ciertos tipos celulares, como en las clulas
germinales o en algunas clulas de la sangre. En estas clulas, se encuentra activa una
enzima llamada telomerasa, que agrega continuamente DNA a los extremos de los
cromosomas, evitando su acortamiento. Esta enzima tambln se encuentra activa en
clulas cancerosas.

37
X, 81010 gb, Prcticas de Laboratorlo

A. ESTADO METABOLICO 0 INTERFASE

Tambln Ilamada Fase lntermittica". Comprende ties sub-fases: G1, S (que es el


perIodo de sIntesis o duplicacin del ADN) y G2; los perlodos Gi y G2, con retacin a Ia
sIntesis de ADN, se denominan tambin "periodo Pre y Post sinttico respectivamente".

Vistos at microscopio compuesto, en esta etapa del ciclo celular los cromosomas
que componen el ncleo no se distinguen individualmente, ni siquiera despus de su
duplicacin en la fase S porque tienen la forma de hilos extendidos, dndole at ntcleo la
apariencia de una red difusa. Cada nikleo contiene uno o ms cuerpos esfricos,
denominados nuclolos.

B. MITOSIS

PROFASE

Con este estado comienza la mitosis. Los cromosornas se hacen visibles, estando
cada uno dividido longitudinalmente en dos partes idnticas Ilamadas "cromtidas",
las cuales estn a menudo enrolladas, una alrededor de la otra. Como ya se ha
mencionado la duplicacin de los cromosomas ha ocurrido durante el periodo
metabOlico o Interfase (en la fase S). Hay una pequea region de cada cromosoma,
el "centrmero", que no se ha dividido ni se dividir en esta etapa.

Durante la Profase comienza a organizarse el huso acromtico, constituido P01


delicadas fibras orientadas paralelamente unas con otras. Estas fibras estn
conformadas por grupos de microtbulos. A medida que la Profase continua, los
cromosomas se hacen ms notables debido al complicado sistema de enrollamiento
(espiralizaciOn) que conduce a su contracciOn; el nuclolo se dispersa gradualmente
y su contenido es transferido a los cromosomas. Cuando los cromosomas alcanzan
su maxima contracciOn, la membrana nuclear desaparece y el contenido del nUcleo
se mezcla con el del citoplasma. ...Es e/ final de la Profase.

METAFASE

Los cromosomas estn ubicados en el ecuador de la clula. El centrmero de cada


cromosoma se pone en contacto con las fibras del huso; estas fibras reciben el
nombre de 'fibras cromosmicas", mientras que las que se extienden sin
interrupciOn desde un polo al otro, se denominan 'fibras continuas'. Al final de Ia
Metafase los centrmeros se dividen. ...Este cambio marca el final de la Metafase.

ANAFASE

Los centrOmeros hermanos asI formados comienzan a separarse. Las cromtidas


hermanas o cromosomas, como deben Ilamarse ahora, continan su migraciOn
hacia los polos opuestos de la clula.

38
X
mi,
BiologIc, Practices de Lcboratorio

Al final de Ia Anafase el huso se alarga y se estrecha en el ecuador, lo cual


completa la separacin de los cromosomas hermanos. ... Se Ilega asI al fin de Ia
Anafase y al pr/nc/plo de la Telofase.

TELOFASE

Los cromosomas se alargan para transformarse en largas hebras y comienza a


organizarse el nuclolo. Los cromosomas forman un tipico ncleo que entra en
estado metablico con la organizacin de una membrana nuclear. Estos cambios
ocurren simultneamente en ambos ncleos hijos.
En la clula animal en el ecuador de la clula se forma un surco de segmentacin;
este se profundiza y va cortando las fibras del huso, dividiendo finalmente la clula
en dos clulas hijas. En la clula vegetal, por el contrarlo, se va formando un tabique
entre los dos ncleos hijos, el cual posteriormente constituir la nueva pared celular.

OBJETIVOS

Durante el desarrollo de la prctica el estudiante:

1. Observar las fases de la mitosis en apices de ralces de cebolla (All/urn cepa).

2. Establecer diferencias entre las diferentes etapas de la mitosis.

MATERALES

Bulbos de cebolla (All/urn cepaJ con raicillas recin formadas (Ver Figura 1), vidrios reloj,
cpsulas de Petri, agujas de diseccin, palillos de dientes (mondadientes); lemmas porta y
cubreobjetos; agua destilada; cido actico al 45%, cido clorhidrico I N, azul de metileno,
papel absorbente (papel toallmn) y microscopio compuesto.

)olla

liIIo de dientes
Figura 1. RaIces de A/hum cepa
en crecimiento

ua

39
Biologic, Practices de Laborotorio
UT

PROCEDIMIENTO

1. Tome un bulbo de A/hum cepa de los que estn a su disposicin y colquelo en un


vidrio reloj. Con una hojilla de afeitar corte la region apical (aprox. 3mm) de 3-4
ralces.

2. Vierta en una cpsula de Petri, cido actico at 45% y en otra, cido clorhIdrico 1 N.

3. Coloque los apices de raIz en la cpsula que contiene cido actico at 45%, por 15
minutos.

4. Transfiera el pice a la cpsula con HCI 1 N, por dos (3) minutos.

5. Lave los apices con agua destilada; para ello sumrjalos en una tercera cpsula con
agua destilada.

6. Coloque un portaobjetos sobre papel toallIn y agregue, en el centro del mismo, una
gota grande de azul de metileno.

7. Transfiera los apices a la gota de colorante y con una aguja de diseccin o


mondadientes, macrelos muy bien.

8. Deje que los apices se tian durante cinco (5) minutos.

NO permita que el colorante se seque. Agregue ms colorante si es


necesario.

Mientras tine, puede preparar su microscopio.

9. Coloque el cubreobjeto sobre los apices fragmentados. Con el mango de una aguja
de diseccin golpee suavemente las zonas donde se encuentre el tjido, para
permitir una mejor separaciOn de las clulas.

10. Recubra este preparado con una toalla de papel absorbente y con el dedo pulgar
presione con fuerza directamente sobre el cubreobjeto, con cuidado de no romperlo.
Limpie con papel absorbente el exceso de colorante.

La presin sobre el cubreobjeto puede extender y separar los cromosomas,


/0 que permite observarlos mas claramente.

11. Examine el frotis al microscoplo utilizando el objetivo de menor aumento. Localice


las clulas y en estas las estructuras oscuras (cromosomas y fig uras mitOticas). Use
luego el objetivo de mediano y mayor aumento para estudiar las clulas
individual mente.

12. Identifique las diferentes fases mitOticas que vaya encontrando. Dibuje un ejemplo
de cada clula que tenga una configuraciOn cromosOmica particular. Compare sus
dibujos con los modelos existentes en el Laboratorio.

13. Trate de verificar el nimero de cromosomas, el cual es de 16 en A/hum cepa.

40
anjoi 81010gb, Prcticas de Loboratorio
ov
UT

Fase: Fase: Fase:

Ease: Fase: Fase:

Fase: Fase: Fase:

41
&M, Biologic, Practices de Loboratorio

PREGUNTAS

1. Por qu se elige para estudiar el ciclo celular mittico & tejido del extremo de la
punta de I@ raIz?

2. Describa las actividades que ocurren durante cada fase del ciclo celular y el papel
de cada fase en el proceso corn pleto de la division celular.

3. ,Por qu la duplicacin exacta de los crornosomas es el hecho ms importante de Is


divisiOn celular?

4. De qu manera difiere la division celular de las clulas vegetales de la divisiOn de


las clulas animales?

5. LQu funciOn cumplen las soluciones de cido actico al 45% y HCI iN en la


preparaciOn de los apices de raiz?

6. De acuerdo a lo estudiado del Ciclo Celular c ,cuI considers usted puede ser la
causa de la proliferaciOn descontrolada de las clulas cancerosas?

42
A
U
N~
Biologla, Prcticas de Loboroiorio

UN!VERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL DEL TACHI RA


VICE RRECTORADO ACADEMICO
DECANATO DE DOCENCIA
DEPARTAMENTO DE INGENIERIA DE PRODUCCION ANIMAL
LABORATORIO DE BIOLOGIA

Prctica NO 7
HISTOLOGIA ANIMAL

INTRODUCCION
Podemos considerar a los animales superiores, incluido el hombre, coma mquinas
vivientes. Se componen de millones de clulas que funcionan coordinadamente. Se
producen ms de 50 billones de clulas coma resultado de divisiones repetidas, a partir
del vulo fecundado, y de la especializacin de dichas clulas. A medida que ocurre el
desarrollo, se forman los tejidos. Un tejido es un grupo de clulas similares en estructura
y especializadas para una funcin particular. Los tejidos se asacian para formar rganos,
como el corazn y el estmaga. Grupos de tejidos y rganos forman los aparatos y
sistemas del cuerpo.

No existe una clasificacin nica para los tejidos animales, pero la mayarIa de los
bilogos reconocen cuatro tipos bsicos de tejidos: el epitelial, el conectivo, el muscular
y el nervioso.

MARCO TEORICO
1. El tejido epitelial est confarmado par clulas que recubren la superlicie corporal o
revisten las cavidades; canstituyen la capa externa de la piel asI coma los
rev3estimientos del tuba digestivo, las vias respiratorias y las cavidades excretoras y
reproductivas. El tejido epitelial consiste de clulas firmemente ajustadas entre si que
forman una capa continua a lamina do clulas.

Sus funciones son la prateccin, la absorcin, secrecin y sensacin. La capa epitelial


de la piel, la epidermis, cubre todo el cuerpo y lo protege de lesion mecnica, agentes
qulmicos, bacterias y prdida de liquidos. El epitelio que reviste el tuba digestivo
absorbe nutrimentos y agua en el interior del cuerpo. Algunas clulas epiteliales estn
organizadas en glndulas que secretan productos celulares como hormonas, enzimas
a sudor. Otras se especializan coma receptores quo reciben informaciOn del ambiente,
coma par ejemplo las clulas epiteliales de las papilas gustativas y nariz.

Las clulas epiteliales varlan en su forma, pudiendo ser escamosas a planas,


cUbicas y dllIndricas a columnares. De acuerdo ala numero de capas de clulas que
a componen, puede ser simple, estratificado a pseudo estratificado. El epitelio
simple esta formado par una sola capa de clulas y se localiza, por lo general, en
sitios de secreciOn, excreciOn, absorcin de sustancias o donde estas se difunden

43
Biologla, Prcticas de Laboraforio
UNET

entre compartimientos, por ejemplo el revestimiento de los tbulos renales. El epitello


estratificado, compuesto por dos o mas capas, se encuentra donde se requiere
proteccin; per ejemplo: capa externa de la piel y recubriendo la boca. Las clulas del
epitelio seudoestratificado dan falsa apariencia de formar capas; aunque toda las
clulas descansan sobre una membrana basal, no todas se extienden hacia la
superficie libre del tejido, lo que da la impresin que existen varias capas de clulas;
ejemplo: recubrim iento de vias respiratorias.

Tejidos_Epiteliales
Tipo Localizacin Funciones
Paso de materiales en sitios donde se
Sacos areos pulmonares, revestimiento requiere poca o ninguna proteccin y
Escamoso Simple
de los vasos sanguIneos donde la difusin es la principal forma
de trasporte
Revestimiento tbulos renales,
Cbico Simple Secrecin y absorcin
conductos glandulares
Revestimiento de gran pane del tubo Secrecin, especialmente de moco;
Cilindrico Simple
digestivo y las vias respiratorias absorcin, proteccin
Escamoso Piel, revestimiento de la boca,
Solo proteccin
Estratificado revestimiento vaginal
Algunas vias respiratorias, conductos de SecreciOn, proteccin, movimiento de
Pseudoestratifcado
muchas gandulas moco

2. El tejido conectivo contiene relativamente pocas clulas, las cuales estn inmersas
en una extensa sustancia intercelular consistente en fibras de colgeno, elsticas o
reticulares, en forma de hilos dispersas en una matriz secretada por las clulas.
Dichas clulas varIan en forma y estructura, asI como en el tipo de fibras y matrices
que secretan. En general, los tejidos conectivos brindan apoyo, unen, conectan y
sostienen en posicin las diferentes partes del cuerpo. Hay muchos tipos y muchas
formas para clasificarlos. Algunos de los tipos principales son:
-- Conectivo laxo: Las fibras producidas estn inmersas en una matriz semilIquida y
mezcladas con un grupo diverse de otras clulas.

- Conectivo denso: Las fibras son de co!gena; pueden hallarse dispuestas de


manera regular o irregular.
-- Conectivo elstico: Se caracteriza per la presencia de haces de fibras elsticas,
conformadas por la protelna elastina, las cuales se ramifican y fusionan entre Si y
se entremezcladas con los fibroblastos.

Conectivo Reticular: Constituido per fibras reticulares entrelazadas. Las fibras


reticulares son muy pequeas y difIcilmente pueden observarse bajo al
microscoplo ptico con tinciones ordinarias; estn compuestas de colgena y algo
de glucoproteina.

- Adiposo: Las clulas adiposas (adipositos) tienen inicialmente forma estrellada;


acumulan gotitas de grasa hasta que adquieren la forma tIpica de anillo.

MI
Biologic, Practices de Loboroforio

- Cartliago: Es firme pero elstico. Las clufas (condrocitos) estn separadas entre
si P01 la sustancia intercelular, donde ocupan lagunas. Tambin secretan fibras de
cotgeno. Este tejido caree de nervios, vasos linfticos y vasos sangulneos.

Hueso: Similar al cartuiago per consistir bsicarnente de una matriz que posee
lagunas. Las ctulas seas (osteocitos) secretan y mantienen la matriz pero a
diferencia del cartliago es un tejido con irrigacin sanguinea significativa. Los
osteocitos estn dispuestos en capas concntricas Ilamadas Iminas, secretadas
por la matriz. A su vez, las Iminas rodean canales centrales, los conductos de
Havers, por donde corren capilares y nervios.

4 Sangre y linfa: En los mamIferos, la sangre esta formada por glbulos rojos,
glbulos blancos y plaquetas suspendidos en el plasma, que es la parte liquida
acelular de la sangre. El plasma consiste en agua, protemnas, sales y sustancias
como las hormonas que trasporta de una parte el cuerpo a otra.

Tejidos Conectivos
Tipo LocalizaciOn Funciones
Donde deba combinarse sostn y
Conectivo Laxo SostBn, deposito de liquido sales
elasticidad. Por ejemplo. Capa subcutnea
Conectivo denso Tendones, ligamentos, dermis Sostn; trasmisiOn de fuerzas mecnicas
Estructuras que deben expandirse y
Conectivo Elstico recuperar su tamao original, como tejido Proporciona elasticidad
pulmonar y grandes arterias
Conectivo
Higado, ganglios linfticos, bazo Sostn
Reticular
Almacenamiento de energia, aislamiento,
Capa subcutnea, como cojinete de
Adiposo soporte de rganos como glandulas
algunos Brganos internos
mamarias y rinones
Sostn flexible y reduccin de la friccin
Cartilago Huesos, nariz, oldo externo
en superficies de rozamiento
Sostn y proteccin de organos internos,
Hueso Esqueleto deposito de calcio, sitio de insercin de
msculos esquelticos o estriados
Trasporte de oxIgeno, nutrimentos,
Sangre Dentro del corazn y vasos sangulneos
desechos y otros materiales

3. El tejido muscular esta conformado por clulas largas y delgadas que se pueden
contraero acortar y su movimiento, en algunos casos, puede cambiar la forma o la
posiciOn de las partes del cuerpo. Hay tres tipos de tejido muscular: esqueltico, liso y
cardiaco.
El misculo esqueltico esta fijado al esqueleto y es de control voluntario. Sus
clulas poseen varies nCicleos adems que presentan en su superficie, de forma
trasversal, Ilneas oscuras, estrIas o bandas claras y oscuras, razn per cual se le
conoce tambin como msculo estriado.
L&M, BiologIo, Prcticos de Laboratorio

- El mUsculo liso es el que se encuentra en los rganos internos y en los vasos


sangulneos. Sus movimientos son invotuntarios. Sus clulas tiene forma de huso,
no tienen las estrIas ni los numerosos ncleos del misculo esqueltico. Hay un
solo nUcleo en cada clula. Se 3encuentra revistiendo el estomago, el intestino, en
las paredes de los vasos sanguineos y en Ia vejiga urinaria.

4- El mUsculo cardiaco se encuentra exclusivamente en el corazn. Sus


movimientos son involuntarios. Sus clulas son codas y cilmndricas y se conectan
unas a otras para formar una red. Es estriado como el miisculo esqueltico, pero
as estrIas no son claras; cada clula posee un ncleo.

4. El tejido nervioso se compone de clulas muy especializadas en Ia conducciOn de


mensajes, denominadas neuronas y ce/u/as glia/es, que dan sostn y nutricin a las
neuronas. El cerebro, Ia medula espinal, los neR'ios y los Organos sensoriales tiene
este tipo de tejido. Las clulas nerviosas (neuronas) en los rganos sensoriales
responden a cambios del entorno y Ilevan los mensajes al cerebro o a Ia medula
espinal, donde son interpretados. Los mensajes van tambln desde el cerebro y Ia
medula espinal hasta los msculos y las glndulas. Un nervio consiste en muchas
neuronas unidas entre si por tejido conectivo.

0 BJ ETIVOS

Despus del desarrollo de Ia prctica, el estudiante deber ser capaz de:


1. Comparar Ia estructura general y las funciones de los cuatro tipos principales de
tejidos animales: epitelial, conectivo, muscular y nervioso.
2. Identificar, a partir de codes histolOgicos, diferentes tipos de tejidos epiteliales,
conectivos y musculares.

3. Identificar, en codes histolgicos, las clulas que componen el tejido nervioso.

MATERIALES

Microscopio compuesto, lminas histolgicas, material de apoyo para identificacin y


reconocimiento de los diferentes tejidos.

PROC EDI MIENTO

A partir de los montajes suministrados, observe detalladamente cada preparacin e


identifique de acuerdo a Ia forma y caracteristicas de las celulas el tejido o tejidos
presente (s).

ER
a;
EJUET
Bio!ogIa, Prcticas de Laboratorio

OBSERVACIN DE LAMINAS PERMANENTES

Tejido: Tejido:: Tejido::

Tejido: Tejido:: Tejido::

Tejido: Tejido:: Tejido

47
ig BiologIa, Prcticas de Loborotorlo

PREGUNTAS

1. De acuerdo a to visto en la asignatura hasta la presente practica, que ventajas crees


poseen los organismos mlt,celulares sobre los unicelulares?

2. Enumere los tipos de tejidos que esperarla encontrar en los siguientes rganos:

Fulmn

-- Corazn
-- intestinos

- Huesos

3. Como distingue, en observaciones microscpicas, los diferentes tipos de tejido


muscular?

4. Imagine que sbitamente desaparece todo el epitelio de cubierta de un animal


superior como el ser humano. ,Qu efectos tendrIa esto en el cuerpo y en su
capacidad de funcionar?

5. Como es la estructura del hueso? ,Del tejido adiposo? ,Del tejido conectivo denso?

6. En que difieren estructuralmente el cartIlago del tejido seo?

IM
Blo/ogia, Pra'cticas de Laboratorlo

UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL DEL TA0HIRA


VICERRECTORADO ACADEMICO
DECANATO DE DOCENCIA
DEPARTAMENTO DE INGENIERiA DE PRODUCCION ANIMAL
LABORATORIO DE BIOLOGIA

Prctica N 8
CLASIFICACION DE ORGAN ISMOS
(I Parte)

INTRODUCCION

Clasificacin, en biologla, identfticacin, denominacin y agrupamiento de


organismos en un sistema establecido.

Las numerosas formas de vida que existen deben ser nombradas y organizadas de
manera ordenada, de modo que los bilogos de todo el mundo puedan estar seuros de
que conocen el organismo exacto que es objeto de estudio. La definicin de los grupos de
organismos se basa en la seleccin de caracteristicas importantes, o rasgos compartidos,
responsables de que los miembros de cada grupo sean semejantes entre si, y diferentes de
los de otros grupos.

Hay aproximadamente un milln y medio de especies descriptas y algunos creen que


este nmero representa sOlo el 5% de las especies con las que actualmente compartimos el
planeta. Durante siglos, los naturalistas se han interesado en ordenar esta diversidad y, al
hacerlo, surgiO un patrOn jerrquico como norma de la clasificaciOn biolOgica.

Todas las ramas de la Biologla (gentica, anatomla, morfologia, embriologla,


ecologla, paleontologla, etc.) contribuyen a los estudios de clasificaciOn de organismos,
pero las especialidades que estn relacionadas directamente son la taxonomIa y la
sistemtica. La taxonomia est enfocada en Ia nomenclatura (denominaciOn) y el
establecimiento de los sistemas jerarquizados, y la sistemtica en las relaciones evolutivas
an no establecidas.

MARCO TEORICO
ClasiflcaciOn y JerarquIa

Desde Ia poca de Linneo se ha venido estableciendo un patrOn jerrquico de taXones


conio norma para la clasificaciOn biolOgica: las especies se agrupan en qrieros, los
gneros en familias, las familias en clases, las clases en rdenes, los Ordenes en
phylum, los phyla en reinos.

Para permitir mayor especificaciOn, se pueden aadir los prefijos sub- y super- a
cualquier categorIa. Adems, en clasificaciones complejas, pueden utilizarse categorlas

49
Bio/og/a, Prcticas deLaboratorio
MZ

intermedias especiales como rama (entre reino y phyla), cohorte (entre clase y orden) y
tribu (entre familia y genera).

La actual clasificacin de cinco reinos (Tabla 1) consiste en Procariota (bacterias,


algas verdeazules o cianfitas), Protoctista (algas, protozoos y otros organismos menos
conocidos), Fungi (hongos), Animalia (animales vertebrados e invertebrados) y Plantae
(musgos, helechos, coniferas y plantas con flor). Sin embargo, gran parte de la literatura
cientIfica an utiliza las denominaciones Mnera en vez de Procariota y Protista en vez de
Protoctista.
Cabe sealar y destacar que hasta hace poco tiempo (1977), el reino se consideraba
Ia categorla sistemtica ms inclusiva. Sin embargo, la secuenciacin de molculas
universales -presentes en todos los organismos- Ilevaron a Carl Woese y sus colaboradores
a la construccin de un rbol filogentico Cinico el cual permite reconocer hoy una categorla
por encima del reino, el dominio en el cual se diferencian tres linajes evolutivos principales
P01 encima del reino: Bacteria, Archaea y Eucarya.

A continuacin, las caracterIsticas que describen de forma general a los cinco reinos:

REINO - PRINCIPALES CARACTERISTICAS EJEMPLOS I


[

Procariotas unicelulares. Obtienen su alimento por absorcin o Bacterias, algas


1 Monera
med iante fotosintesis verdeazules

Eucariotas unicelulares o pluricelulares, en cuyo caso tienen sus


Protista Algas, protozoos
clulas asociadas sin formar tejidos. Realizan fotosintesis

Eucariotas hetertrofos que obtienen su alimento por absorcin. No


Hongos Levaduras, setas
reahzan la fotosintesis. La pared c&ular contiene generalmente quitina. 11

Eucariotas pluricelulares inmviles que realizan la fotosintesis. Pared Musgos, helechos,


Vegetal
celular compuesta de celulosa. Presentan tejidos diferenciados. rboles

Eucariotas pluricelulares mvites sin pared ceIuar. Ingieren el alimento.


Animal Motuscos, peces, ayes
Presentan tejidos diferenciados. Presentan tejidos diferenciados.

Debido a la gran diversidad de organismos existentes, en adelante nos dedicaremos


al estudio exclusivo y bsico del reino animal.

Al respecto, se enfatiza que los animales actuales se clasifican en unos 30 phyla.


Estos phyla agrupan a los organismos invertebrados o vertebrados. El carcter primordial
que se tiene en cuenta para separarlos informalmente en invertebrados y vertebrados,
atiende a la ausencia o presencia de esqueteto interno (seo o cartilaginoso, crneo y
columna vertebral).

Los phyla ms importantes de invertebrados son:

50
=r Biologia, Pra'cticas de Laboratorlo

PHYLUM PORIFERA

Organismos multicelulares, simples, que carecen de verdaderos rganos o tejidos. Son


ssiles, de forma variable, sin locomocin. Cuerpo de aspecto esponjoso, cubierto por
numerosos poros. Viven solitarias o en colonias, pero siempre unidos al unidos al sustrato.
La mayorIa son marinos, pero unos pocos viven en agua duice. lnciuye a las esponjas.

PHYLUM CNIDARIA

Organismos multicelulares. Cuerpo con simetria radial, blando a veces transparente


(gelatinoso), nunca de aspecto esponjoso, ssiles o mviies, de forma variable, con boca
rodeada de 4 o mas tentculos urticantes. Se distinguen do todos los otros animales por
sus clulas punzantes especiales. lncluye a las medusas, hidras, anmonas de mar y
corales

PHYLUM EQUINODERMATA (Equinodermos)- animales de "piel espinosa"


Sores marinos, algunos con tegumento consistente defendido con espinas (erizo de mar).
Estrellas de mar, ofiuroideos y holoturias (es el pepino de mar comestible, trepang, de los
malayos). Se mueven lentamente, por medlo de multitud de apndices tubulares.

PHYLUM PLATYHELMINTES (Piatielmintos) - Gusanos pianos

SimetrIa bilateral. Cuerpo blando y apianado, con apariencia de hoja o cinta,


estructuraimente simples que carecen de ano y aparato circulatorio. Son casi todos
hermafroditas. Presentan ocelos, as[ como clulas sensoriales sensibies al tacto y a varias
sustancias qulmicas. Los gusanos pianos pueden ser do vida iibre (pianarias) o parsitos
(Tenias).

PHYLUM NEMATHELMINTOS (Nemtodos) - Gusanos cilIndricos, no segmentados

Comprende gusanos alargados de forma cilindrica, no segmentados, sin ojos, con una
cubierta dura denominada cuticula. Se alimentan generalmente P01 aspiracin do liquidos, a
ingesta de particulas pequeas o materiales blandos. Se desplazan con movimientos de
ltigo caracteristicos. Son abundantes y viven en el suelo, y en sedimentos marinos y de
agua duice. La mayorIa son do vida libre, pero muchos son parsitos que causan una
variedad de enfermedades graves en piantas y animales, inciuyendo a los seres humanos.
PHYLUM ANELIDA - Gusanos cilIndricos, segmentados

Animales pertenecientes al tipo do los gusanos, quo tienen el cuerpo cilIndrico y blandos,
con anillos a piiegues transversaies externos quo corresponden a segmentos internos; a
menudo con un par de proyecciones en forma de cerdas en cada segmento, quo utilizan
como medio de locomocin. En su mayorIa viven en el mar, pero muchos residen en el
agua dulce, como la sanguijuela, o en la tierra hmeda, como la lombriz.

51
1ir Biologia, PractJcas de Laboratorlo

PHYLUM MOLLUSCA - Moluscos

Invertebrados con simetrIa bilateral, cuerpos blandos, no segmentados, generalmente


protegidos por una concha calcrea dura. En algunas formas, las conchas se han perdido
en el curso de la evolucin, como en las babosas y en los pulpos, o son de tamao
notablemente reducido e internas, como en los calamares.

PHYLUM ARTHROPODA - Artrpodos

La caracterIstica que define a los artrpodos son sus apndices articulados (de ahI el
nombre: arthron = articulacin y pods = pie). Cuerpo cubierto de un exoesqueleto duro y
articulado. En los miembros del phylum que tienen el nmero de apndices reducido stos
estn, en general, ms especializados y son ms eficientes. Particularmente entre los
insectos y crustceos, estos apndices especializados incluyen, no solo patas que usan
para caminar, sino tambin un conjunto de instrumentos adaptados a las ms diversas
funciones: mandibulas, lenguas, ovipositores, tubos chupadores, garras, antenas, remos y
pinzas. lncluye a las subdivisiones: miripodos, crustceos, arcnidos e insectos. Es es el
filo animal ms grande y se adaptan a casi todos los habitats.

VERTEBRADOS

PHYLUM CHORDATA - Cordados

lncluye a los vertebrados (animates con columna vertebral) y a algunos invertebrados


emparentados con ellos. En algn momento de su vida, todos poseen un cilindro rigido,
denominado notocorda, de posicin dorsal at intestino. En los vertebrados La notocordia
est reemplazada por una serie de huesos (vertebras).

En los diferentes tipos de animales vertebrados, este esqueleto puede presentar


modificaciones secundarias (miembros adaptados, falta de esternn, nmero de costillas,
etc.), pero nunca carecer de caja craneana ni de columna vertebral.

Los vertebrados se dividen en las siguientes clases:


V PECES: Animates de vida acutica, respiraciOn branquial, sangre de temperatura
variable (poiquilotermos) y reproduccin comnmente ovipara. Tegumento con
escamas o desnudo. Viven en todas las zonas climticas y hay formas adaptadas a
las grandes profundidades ocenicas. (Ejms. Tiburones, salmones, atunes.)
V BATRACIOS 0 ANFIBIOS: Animates con metamorfosis. Nacen comnmente de
huevos y pasan por varias formas antes de Ilagar a su completo desarrollo. Respiran
por branqulas en et periodo larval, y por putmones en estado adulto (Ejms. Ranas,
sapos, salamandras)
V REPTILES: Cuerpo cubierto de escamas, placas o caparazn. Reptan para
desplazarse, pues carecen de miembros (ofidios) o los tienen muy cortos (tortugas,

52
r Blologla, Pra'cticas de Laboratorlo
jj

saurios). Respiracin pulmonar. Reproduccin comnmente ovIpara. Algunas


especies (serpientes) son ponzonosas. (Ejms. Tortugas, cocodrilo, caimn, tagartos,
lag artijas.)
v' AVES: Cuerpo cubierto de plumas. Miembros anteriores adaptados al mecanismo del
vuelo (alas). RespiraciOn pulmonar. Sangre de temperatura constante (homeotermos).
Reproduccin ovIpara. Utiles en su casi totalidad, enemigos naturales de los insectos.
(Ejms. palomas, gallinceas, avestruces, cndores, patos, colibrIes, lechuzas.
v' MAMIFEROS: Piel generalmente con pelo. Homeotermos. Respiracin pulmonar.
Viviparos. Las hembras alimentan a la crIa con secrecin (leche) de sus glndulas
mamarias. Adaptados a la vida terrestre (la generalidad), acutica (ballenas, focas,
manati), al vuelo (murcilagos, insectIvoros, frugIvoros y mordedores), a la vida
arboricola (monos, ardillas). Hay especies Otiles, tanto domsticas (vacas, ovejas,
cabras, caballos, perros, renos, camellos, llamas, cerdos, conejos), como silvestres
(osos hormigueros, castores, lobos marinos, animales piliferos). Muchas especies de
roedores son perjudiciales (ratas, liebres, vizcachas).

0 BJ ETIVOS

Mediante los recursos previstos, al finalizar el trabajo de Iaboratorio, el estudiante


estar en capacidad de:

1. Conocer la existencia de un sistema jerarquizado que permite la clasificacin de


cualquier ser vivo.

2. Conocer los principales phyla, y sus principales subdivisiones si es el caso, del reino
animal.

3. Clasificar a nivel de phylum y clase (si es el caso), de acuerdo a la comparacin de


sus caracteristicas y la informacin suministrada, diversos especimenes animales.

MATERIALES: Microscopio compuesto, lupa estereoscpica, especimenes animales vivos,


frescos o preservados y montajes impresos.

PROCEDIMIENTO.-

Ubique en el phylum y en la clase correspondiente, de ser posible, cada uno de los


especimenes suministrados.

Realice un cuadro resumen, de la clasificacin realizada, acompaada de los dibujos


respectivos.

53
r Blo/ogia, Prct/cas de Laborator/o

Universidad Nacional Experimental del Tchira


Departamento de lngenieria de Prod uccin Animal
Laboratorlo de Biologia

PRACTICA No 9
CLASIFICACION DE LOS ORGANISMS
(PARTE II)

INTRODUCCION
Desde sus primeros intentos por conocer y aprovechar la naturaleza, el hombre sinti
a necesidad de clasificar a los organismos de su entorno. La clasificacin, como ya se ha
mencionado, es una operaciOn lgica, que consiste en agrupar objetos en clases o
conjuntos por la posesin comn do ciertas propiedades o atributos.
Segn laimportancia de los caracteres elegidos, las clasificaciones tendrn mayor o
menor grado de validez cientIfico. En general, se pueden distinguir dos grandes catgorlas:
artificiales y naturales. En las primeras se intenta reunir a los organismos de acuerdo con
algunos atributos, que el hombre les impone a su conveniencia; en las iiltimas se trata de
ordenar a los organismos en sistemas que reflejan sus relaciones de parentesco o filogenia.
El trmino taxonomla se confunde, frecuentemente, con el de sistemtica. Simpson
(1961), defini a la sistemtica como el estudio cientifico de la diversidad de los organismos
y de las relaciones filogenticos quo existen entre ellos; y a la taxonomia como la disciplina
que se ocupa do los procedimientos y byes de la clasificacin. La taxonomla y sistemtica
dentro de la clasificacin do seres vivos tienen objetivos distintos; sin embargo estn muy
relacionadas, pues las clasificaciones aumentan su exactitud cuando se dispone de
informacin sobre el hbitat y la distribucin de los organismos, al igual que cuando so
conocen algunas particularidades sobre su comportamiento.
For otra parte, todo cientIfico, en su labor cotidiana, req uiere al taxnomo, pues debe
estar seguro de conocer las especies con las cuales trata. Esta relacin se hace ms
notoria al estudiar comunidades, porque es preciso conocer especies do muy variados taxa.
En este caso, es muy importante conocer y caracterizar los componentes de la comunidad,
considerando las funciones que cada especie desempea en su ambiente, para comparar
localidades distintas, quo pudieron haber evolucionado independientemente.
Las colecciones zoolgicas sirven como referenda para la identificacin taxonmica
do los animales quo el cientIfico estudia; asI, so pude tener certoza do que los atributos
ecolgicos analizados caractorizan a las especies a las cuales so hace referencia y no a
otras.

MARCO TEORICO
La clasificacin tradicional ostaba conformada por cinco reinos consistente en
Procariota (bacterias, algas vordoazules o cianfitas), Protoctista (algas, protozoos y otros
organismos monos conocidos), Fungi (hongos), Animalia (animales vertobrados e
invortebrados) y Plantae (musgos, helechos, conIferas y plantas con flor). Sin embargo,
recientes evidencias declaran un sexto reino conform ado por los virus.

54
1, FEI-v BioIogi, Pra'cticas de Laboratorio

Debido a la gran diversidad de organismos existentes, en adelante nos dedicaremos


al estudlo bsico de los reinos Monera, Fungi y Plantae, asI como el uso y fabricacin de
rboles filogenticos.

REINO MONERA: Las bacterias forman uno de los 3 dominios en los que se dividen los
seres vivos. En los antiguos sistemas taxonmicos, las bacterias formaban un subreino del
reino Monera.

El trmino bacteria tambln se emplea para denominar a todos los organismos unicelulares
sin ncleo diferenciado que constituyen el nivel de organizacin procarionte. Los
organismos procariontes se subdividen en Eubacterias (dominio Bacteria) y
Arqueobacterias (dominio Archaea).

Son los organismos ms abundantes del Planeta y su tamao ronda entre las 0.5 y 5 pm
(micras). Pueden ser de carcter patOgeno o no. Generalmente poseen una pared celular,
similar a la de plantas u hongos, pero compuesta P01 peptidoglicanos; muchos antibiticos
son efectivos slo contra las bacterias ya que inhiben la formacion de esta pared cetular.
Muchas de ellas tambin poseen cilios o flagenlos.

Existen tres tipos fundamentales de bacterias:

Los cocos o formas esfricas:


o en grupo de dos: Diplococos
o en cadena: Estreptococos
o agrupaciones irregulares: Estafilococos
En forma de bastoncillo, son los bacilos
Formas helicoidales:
o espiroquetas
o espirilos
o vibrios

Entre las formaciones propias de la clula bacteriana destacan los flagelos y las cpsulas.
En condiciones apropiadas, una bacteria puede dividirse cada 20 minutos, y en alrededor
de 11 horas su nmero puede ascender a unos 5.000 millones (aproximadamente el
nCimero de personas que habitan la Tierra).

Clasificacin morfolgica de bacterias

Las bacterias vienen en variadas formas:


A. Forma de Caa (Bacilos)
B. Redondos o Esfricos, en lineas
(Estreptococos)
C. Redondos, en cmulos (Estafilococos)
D. Redondos, en pares (Diplococos)
E. En forma de espirales (Espirilos)
F. En forma de coma (Vibrios)

55
1F Slo/ogia Pra'ct/cas c/a Laborator/o

Coco
o Estreptococos: cocos en cadenas
o Estafilococos: cocos en racimos
o Diplococos: cocos en parejas
Bacilo
Espirilo
Vibrios

REINO PROTISTA

Reino que contiene a todos aquellos organismos eucariontes que no pueden clasificarse
dentro de alguno de los otros tres reinos eucariticos, a saber, Fungi (hongos),
AnimaIia(animales en sentido estricto) o Plantae (plantas). En el rbol filogentico de los
organismos eucariontes, los protistas forman grupos monofilticos o incluyen miembros quo
estn estrechamente emparentados con alguno de los ties reinos citados. Se les designa
con nombres quo han perdido valor en la ciencia biolgica, pero cuyo uso es imposible de
desterrar, como a/gas, protozoos o mohos mucosos.

REINO FUNGI

En biologla el trmino fungi designa un reino que incluye a los organismos celulares
hetertrofos que poseen paredes celulares engrosadas y clulas con especializacin
funcional. Tambin son Ilamados hongos.

Un hongo es un organismo eucaritico (Se dice de las clulas con ncleo diferenciado,
envuelto por una membrana y con citoplasma organizado, y de los organismos constituidos
P01 ellas) que digiere su alimento externamente y absorbe las molculas nutrientes en sus
clulas. Los hongos son muy importantes econmicamente. Los hongos son los
descomponedores primarios de la materia muerta de plantas y de animales en muchos
ecosistemas, y se yen comnmente en el pan aejo.

Caracteres diferenciales
N/vet ce/u/ar F ucariontes
Nutricfn: Absorcin
Metabolismo de/ oxIgeno: Necesario
Reproduccion y desarro/lo: Asexual. Sexual (algunos) con gametos y zigoto
Tipo de vida: Pluricelulares (mayorIa), formando un micelo. lnmviles
Estructura y funciones: Sin plasmodesmos. Unicelulares como la levadura de la
cerveza (Saccharomyces cerev/siae) o con micelio pluricelular constituido por hifas.
Con movimientos intracelulares. En las paredes hay poros. Pared celular con
quitina.

Clasificacin actual del reino Fungi


Quitridiomicotes (division Chytridiornycota).
Zigomicotes (divisiOn Zygomycota).
Ascomycotes (divisiOn Ascomycota).
Basidiomicotes (divisiOn Basidiomycota).

56
9 BioJog/a, Pra'ct/cas de Laboratorlo
9ft
REINO PLANTAE (Plantas) incluye a los organismos pluricelulares auttrofos que
presentan clulas con nCicleo, paredes celulares engrosadas, estando dichas clulas
agrupadas en tejidos con especializacin funcional.

Caracteres diferenciales de las plantas


N/ye! ce/u/ar Eucariontes
Nutricin: FotosIntesis, respiracin y transpiracin.
Metabolismo del oxIgeno: Necesario
Reproduccin y desarrollo: Asexual. Sexual, con gametos y zigoto, y con esporas
haploides (haplo-diploides)
Tipo de vida: Pluricelulares con y sin tejidos. lnmviles.
Estructura y funciones: Con plasmodesmos. Con tejidos celulares variados. Pared
celular con celulosa. Con movimiento intracelular. Se forman compuestos
secundarios metablicos: flavionas.

ClasificaciOn de las plantas


Las plantas son eucariotas que evolucionaron a partir de algas verdes del grupo
Chiorophyta durante el Paleozoico, estas algas colonizaron las zonas emergidas, gracias a
una serie de adaptaciones a la xerofilia que originaron el grupo de los Embrifitos. Los
embrifitos presentan alternancia de generaciones, son plantas adaptadas a la vida
terrestre con rganos apendiculares, tambin Ilamados cormobiontes.

Protocormfitos o brifitos (division Bryophyta), musgos, licopodios y hepticas.

Los brifitos son pequenas plantas confinadas a ambientes hmedos, adems necesitan
agua lIquida para la fecundacin. En el Silirico aparecieron nuevas formas de embrifitos,
con mejores adaptaciones a la xericidad, lo que les permiti la conquista de amplios
espacios. Esta mejora permiti una radiacin masiva en el Devnico lo que les hizo dominar
el paisaje. Este grupo presenta, tIpicamente, cutIculas resistentes a la desecacin y tejidos
vasculares, que transportan el agua a travs del organismo, lo que da origen al trmino
plantas vasculares.

CormOfitos o plantas vasculares.


a Pteridfitos (division Pteridophyta).

Las plantas vasculares incluyen, como subgrupo, a los espermatOfitos o plantas con
semillas, que se diversificaron al final del Paleozoico. En estos organismos el gametOfito
est completamente reducido y el esporOfito comienza su vida confinado en una estructura
especial: la semilla.

Plantas con semillas


EspermatOfitos (divisiOn Sperm atophyta).
Cicadofitinos (subdivisiOn Cycadice, Cycadoph vt/na es un sinOnimo) 0
gimnospermas de hoja pinnada.
Coniferofitinos (subdivision Pinicae, Coniferophytina es un sinOnirno) o
gimnospermas de hoja dicOtoma.
Angiospermas (subdivisiOn Magnolioph yt/na).

57
Biologia Pra'cticas de Laboratorlo
&FFr--

Estos grupos tambin se denominan Gimnospermas, excepto las plantas con flores, que se
denominan Angiospermas. Este, es el grupo ms numeroso de plantas, aparecieron
durante el Jursico y han Ilegado a ser completamente dominantes.

OBJ ETIVOS

Mediante los recursos previstos, al finalizar el trabajo de laboratorlo, el estudiante


estar en capacidad de:
1. Conocer los sistemas de clasificacin del reino Monera, Plantae y Fungi.
2. El estudiante a travs del manejo de claves y vIas alternas para la identificacin de
animales, establezca relaciones entre estructura y funcin, como respuesta adaptativa
de los seres vivos a los diferentes ambientes dentro de un esquema o rbol
filogentico.

MATERIALES: Microscopio compuesto, lupa estereoscpica, muestras de plantas y


hongos vivos, frescos o preservados y montajes impresos.

PROCEDIMIENTO.-
Ubique en el phylum y en la clase correspondiente, de ser posible, cada uno de las
muestras vegetales suministradas.
Realice un cuadro resumen de la clasificacin realizada, acompaada de los dibujos
respectivos.
Observacin de las caracterIsticas anatmicas de varios grupos de vertebrados, las
cuales les han permitido adaptarse a presiones selectivas semejantes.
Se suministrar una muestra de varios grupos de mamIferos, ayes, reptiles y
anfibios, que presentan distintos modos de vida: acuticos, terrestres y/o, voladores. En
cada grupo se analizarn las modificaciones morfolgicas que le permiten explotar una
cave funcional que permita determinar el modo de vida particular de cualquiera de los
grupos estudiados.

BIB LIOG RAFIA


Curtis, Helena y Barnes N., Sue. Biologia. Editorial Mdica Pan americana. 60 edicin.

Machado-Allison, A. 1987. Los peces de los Llanos de Venezuela. Universidad Central de


Venezuela. Caracas.

Ramo, C y J. Ayarzaguena. 1983. Fauna llanera. Cuadernos Lagoven. Departamento de


Relaciones Piblicas de Lagoven, Caracas.

Simpson, G.G. 1962. Principles of animal taxonomy. Columbia University Press, New York,
USA.

58
Biologia, Pra'cticas de Laboratorlo

UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL DEL TAcHIF


VICERRECT0RADO ACADEMICO
DECANATO DE DOCENCIA
DEPARTAMENTO DE INGENIERIA DE PRODUCCION ANIMAL
LAB0RATORIO DE BIOLOGIA

Prctica NO 10
REPRODUCCION DE ORGANISMS

INTRODUCC ION
Reproduccin, proceso por el cual se multiplican los organismos, procariotas o
eucariotas. Es una de las funciones esenciales de cualquier ser vivo, necesaria pars la
continuidad y la preservaciOn de las especies. La diversidad del mundo biolgico hace que,
entre otros, que no exista un patron Onico de reproducciOn de las especies y que P01 el
contrarlo existan innumerables mecanismos de reproduccin asexual y sexual.

Las poblaciones pueden ser caracterizadas por sus estrategias de reproduccin, que
son grupos de caracterIsticas coadaptadas que afectan la supervivencia reproductiva. Estas
caracterIsticas generalmente estn genticamente determinadas y por ello, sujetas a la
selecciOn natural.
En una gran variedad de organismos debe producirse, para completar su ciclo de
vida, la reproduccin asexual y la sexual = Alternancia de generacibnes. Las generaciones
alternantes presentan una forms sexuada que produce gametos (vulos y
espermatozoides) los cuales al unirse dan lugar a la generacin asexuada (2n) y cuyas
clulas reproductoras (esporas, yemas, etc.) generan nuevos individuos genticamente
idnticos. En I@ mayoria de los casos las dos generaciones son morfolOgicamente distintas.

MARCO TEORICO

REPRODUCCION ASEXUAL: Se caracteriza por la ausencia de fusiOn de clulas sexuales


especializadas, denominadas "gametos", siendo obvio que no so realice Ia fecundaciOn. La
rnultiplicacin de los individuos, pars formar dos o ms descendientes, se da a partir de un
progenitor Ilinico, siendo los caracteres hereditarios de los descendientes idnticos a los del
progenitor.

Esta reproducciOn permite a un organismo producir descendientes rpidamente sin perder


tiempo y recursos en cortejos, bsqueda de parejas y acoplamiento. Sin embargo, la falta
de variabilidad gentica en las poblaciones quo se reproducen asexualmente pueden
volverse en contra cuando las condiciones ambientales (para Is cual todos los clones estn
bien adaptados) cambian rpidamente.

59
Biologia, Prcticas de Laboratorlo

REPRODUCCION SEXUAL: Es el tipo de reproduccin que se reahza con la intervencin


de clulas sexuales especializadas o "gametos", por to general provenientes de dos
progenitores diferentes, en la cual se producen dos hechos importantes:

FECUNDACION: Proceso por el cual Se unen las dotaciones genticas de los padres
(singamia de los ncleos) produciendo una nueva combinacin gentica, se forma un
cigoto diploide.

MEIOSIS: Division celular en la cual una clula diploide (2n) forma cuatro clulas
haploides (n) equilibrando la duplicaciOn cromosOmica producida por la singamia. Este
mecanismo provee de nuevas combinaciones genticas por medio del
entrecruzamiento (crossing over) en el que se producen intercambios de porciones de
ADN entre cromosomas homlogos y Ia segregacin at azar de los cromosomas.

REPRODUCCION ASEXUAL

FISION BINARIA, BIPARTICION, 0 ESCISION: Es el mtodo ms generalizado de


reproduccin asexual entre los organismos unicelulares (bacterias y protozoos). El
organismo se divide en dos partes aproximadamente iguales; previa division de ncleo
(cariocinesis) y posterior divisiOn de citoplasma (citocinesis), por lo que la clula madre
pierde su identidad original. Cada una de estos organismos crece hasta alcanzar el tarnao
completo y el proceso puede renovarse. La fisiOn binaria puede ser transversal (se produce
a to ancho del organismo) o longitudinal (a to largo del organismo).

FISION MULTIPLE: La fisin multiple comprende varias escisiones binarias sucesivas que
tienen lugar en el interior de una cubierta, como en los esporozoos, un tipo de protozoos
parsitos; o consistir en divisiones repetidas del ncleo seguidas de la divisiOn del
citoplasma en tantas partes como ncleos existan, como en el protozoo paldico.

GEMACION: Consiste en la formaciOn, a partir de una clula madre, de un pequeo


crecimiento denominado yema la cual desarrolla Organos semejantes a los del progenitor, y
llega a hacerse independiente de l, o queda unida al mismo individuo. Es un proceso
comn en las levaduras (unicelulares) y en ciertos grupos de metazoos (animales
pluricelulares).

FRAGMENTACION 0 REGENERACION: El cuerpo vegetativo de los hongos (micelio),


algunos animates invertebrados (Ejms. Planaria (del grupo de los gusano.s piano), estrellas
de mar e hidra) y la mayor parte de los vegetates superiores, son capaces de fragmentarse
en partes y formar nuevos individuos a partir de ellas; cada una de las partes originates
regenera la secciOn perdida para formar un organismo completo. EspecIficamente, en
plantas, existen numerosos ejemplos de fragmentaciOn que son usados para su
propagaciOn: tallos, tubrculos, los bulbos, los estolones o tallos rastreros y ciertas raices.

ESPORULACION: Las esporas son clulas reproductoras asexuales que forman


numerosos hongos y plantas y algunos protozoos; se originan por divisiOn celular;, pueden
Biologia, Pra'ct/cas de Laboratorlo

producirse de forma libre, generalmente en cadenas, o dentro de una estructura Ilamada


esporanglo. Son resistentes al calor, desecamiento y otras condiciones adversas y se
mantienen en estado de reposo hasta que encuentran un medlo favorable al desarrollo o
germinacin. Cabe resaltar que en condiciones desfavorables, muchas bacterias
concentran el citoplasma y se envuelven en una cpsula; esta fase de reposo suele recibir
tambin el nombre de espora, pero no se trata de una clula reproductora y, por tanto, no
es comparable con las esporas verdaderas que forman otros organismos.

REPRODUCCION SEXUAL

SINGAMIA: Union de los gametos en la reproduccin sexual; fecundacin.

Singamia mediante fecundacin externa: Se presenta cuando la fusion de gametos


ocurre fuera del cuerpode la progenitora. Ejms. muchos invertebrados y algunos peces
marinos, las truchas y otros peces, en las ranas y sapos.

Singamia mediante fecundacin interna: Se presenta cuando la union de gametos


tiene lugar dentro del cuerpo de la hembra. Ejms. salamandra, nemtodos, algunos
moluscos y peces, artrOpodos, y en todos los reptiles, ayes y mamIferos.

Caso especial de Singamia: Hermafroditismo.- Consiste en la presencia en un


mismo individuo de Organos caracterIsticos de ambos sexos, pero los hay tambin que
sOlo poseen una glndula genital, la cual produce las clulas sexuales masculinas y
femeninas. La reproducciOn sexual en hermafroditas es un fenOmeno que anula el
concepto general de que para la reproducciOn sexual se requiere de dos progenitores.
Se presenta en algunas plantas y en diferentes grupos de animales: esponjas, ciertos
gusanos, lombrices de tierra y sanguijuelas, la mayoria de moluscos y en algunos
cordados inferiores.

CONJUGACION Forma de reproducciOn sexual ms simple. Tiene lugar en ciertos


organismos unicelulares: bacterias, algas verdes (Spirogyra) y protozoos ciliados (Ej.
Paramecium caudatum); se produce cuando dos organismos similares se unen e
intercambian material gentico contenido en su ncleo. Una vez finalizado el intercambio se
separan.

PARTENOGENESIS: Consiste en el desarrollo de un organismo a partir de un gameto,


clula sexual, Ovulo o huevo, sin fecundar. El desarrollo partenogentico de huevos se
observa en algunos animales invertebrados [caracoles, crustceos (cangrejos y langostas)
e insectos], en algunos reptiles. En las plantas, cuando ocurre, este fenOmeno recibe el
nombre de partenocarpia.

0 BJ ETIVOS

Mediante los recursos previstos, al finalizar el trabajo de Iaboratorio, el estudiante


estar en capacidad de:

61
Biologla, Prcticas de Laboratorlo
T

1. Comprobar, mediante observaciones In vivo, Post morten, microfotografias y lminas


impresos que los seres vivos presentan diversas modalidades de reproduccin sexual
y asexual.
2. Establecer diferencias entre los mecanismos de reproduccin sexual y asexual de
organismos unicelulares y los multicelulares.
3. Conocer la existencia de ambos tipos de reproduccin en diferentes grupos de
organismos (bacterias, protistas, plantas, hongos y algunos grupos animates).

MATERIALES: Microscoplo compuesto, lupa estereoscpica, preparados microscpicos,


muestras vegetates, macrofotograflas y montajes impresos.

PROCEDIMIENTO.- Observacin del material existente para:

1. FIsION BINARIA

Tipo de organismo:

Especie:

Fisin (transversal o longitudinal):_______________________________

Comentarios:

2. FIsI6N MULTIPLE

Tipo de organismo: Protista - Alga verde

Especie:

Cornentarios:

AN

62
Blo/ogia, Pr4ct/cas de Laboratorlo
LIF T

3. GEMACI6N

Tipo de organismo: Hongo - Levaduras

Especie:

Comentarios

VA

4. FRAGMENTACIN

Tipo de organ ismo: Hongo

Especie:

Comentarios

5. FRAGMENTACION EN VEGETALES

Fragmentacin de Estolones Fragmentacin de Bulbos

Muestra: Muestra:
Fragmentacion de Tubrculos Fragmentacin de TaHos (Estacas)

Muestra: Muestra:

63
Biologia, Pra'cticas de Laboratorlo

6. EsP0RuLAcI6N EN VEGETALES (HELECHOS)

MM x
Observacin a la lupa de soros y de Esporangios macerados para la observacin
esporangios en el envs de hoja de esporas

7. ESPORULACION EN HONGOS

Produccin Germinacin
Especie: Especie:
Comentarios: Comentarios:

8. CONJUGACIN EN BACTERIAS
Biolcigla, Prcticas de Laboratorlo

9. CONJUGACIN EN ALGAS VERDES (Protista - gnero Spirogyra)

10. CONJUGACION EN CILIADOS (Protista - gnero Paramecium)

ON

11. EJEMPLOS DE REPRODUCCON ALTERNANTE


11.1. En animales inferiores - Ejemplo. Medusas (Aurelia sp.)

Su ciclo de vida se caracteriza por una forma


larval, conocida como plnula, que es un
organismo pequeo, cHiado y de vida libre.
Despus de esta etapa larval, alternan la
forma plipo y medusa en su ciclo de vida.
Los espermatozoides y los vulos son
liberados por ]as medusas adultas en el agua
circundante. Ocurre la fecundacin y el
cigoto resultante desarrolla primero una
esfera hueca de clulas -la blstula- que
luego se alarga y se transforma en una larva
ciliada, llamada plnula. Despus de la
dispersion, la plnula se establece en el
fondo, y desarrolla una boca y tentculos,
transformndose asI en el estado pOlipo. El
cuerpo del pOlipo crece y, a medida que lo
hace, comienza a formar, por gemacin,
medusas apiladas unas sobre otras como
pequeos platillos, las cuales se desprenden
una tras otra y crecen hasta formar una
medusa de tamao completo.

65
Biologia, Prcticas de Laboratorlo
V

11.2. Del agente causal de la Malaria o Paludismo (Plasmodium sp)


a) Cuando una hembra de mosquito
Anopheles pica a una persona con
malaria succiona junto con la
sangre, gametas indiferenciadas del
esporozoo. b) En el tracto digestivo
del mosquito, las gametas se
diferencian; c) se unen; d) Se
forman los cigotos. e) A partir de los
cigotos se producen asexualmente,
por DivisiOn m ltiple, estructuras
multinucleadas llamadas oocistos,
que, f) en unos pocos dias, se
dividen en miles de clulas
fusiformes muy pequeas, los
esporozoltos. Estas luego migran a
las glndulas salivales del mosquito.
Cuando la hembra pica a otra
victima, g) la infecta con los
esporozoitos. Estos primero entran
a las clulas hepticas, h) donde
sufren repetidas divisiones, i). Los
productos de estas divisiones
(merozoitos) entran a los globulos
rojos, j), donde nuevamente se
dividen en forma repetida, k)
rompen los glbulos rojos, I) a
intervalos regulares de aprox. 48
horas; as!, provocan episodios
febriles recurrentes caracteristicos
de la enfermedad. Despus de un
perlodo de reproduccin asexual,
parte de los merozoitos se
transforman en gametas
indiferenciadas m) y, si son
ingeridos por un mosquito en este
estadio, el ciclo comienza
nuevamente.

.M
Slo/ogla, Pra'cdcas cia Laboratorlo
4-1
~-,

PREGUNTAS

1. Que ventajas y desventajas tiene I@ reproduccin asexual?

2. Que ventajas y desventajas tiene la reproduccin sexual?

3. Que ventaja considera usted existe en aqueHos organismos inmviles que poseen la
propiedad de reproducirse par esporas?

4. En el ciclo de vida del Plasmodium, agente causal del paludismo:

c Qu tipo de reproduccin asexual ocurre?

Que nombre reciben las clulas resultantes de la reproduccin asexual?

Donde ocurre? ... En el mosquito o una vez ha infectado al hombre?

5. Mediante lo visto en la prctica, complementado con revision bibliogrfica, realice un


cuadro sinptico de las diferentes modalidades de reproducciOn en: bacterias, algas,
protozoarios, animales y vegetales

67
BioIog/a, Prcticas de Laborator/o

GLOSARIO

Alga. (Del lat. alga). f. Cede una de las plantas talofitas, unicelulares o pluricelulares, que viven de
preferencia en el agua (dulce como marina) y que, en general, estn provistas de clorofila
acompaada a veces de otros pigmentos de colores variados que la enmascaran. El talo de
las pluricebubares tiene forma de fibamento, de cinta o de lmina y puede ser ramificado. 112.
Bot. Clase de estas plantas.

Apndice. (Del let. appendix, -icis). m. Adjunta o aadida a otra, de la cual es como parte
accesoria a dependiente. 112. Zoo!. Parte del cuerpo animal unida a contigua a otra.

Arcnido, da. adj. Zoo!. Se dice de los artrOpodos sin antenas, de respiracion area, con cuatro
pares de patas y con cefabotrax. Carecen de ojos compuestos y tienen dos pares de
apndices bucales variables por su forma y su funcin. U. t. c. s. m. 112. m. p1. Zoo!. Clase de
estos animales.

Articulado, da. (Del part. de articular). adj. Que tiene articulaciones. 112. Zoo!. Se decia del animal
cuyo exoesqueleto est formado de piezas que se articuban unas con otras y que permite el
movimiento relativa entre ellas.; como el de los insectos, los arcnidos y los crustceos.

Cefalotrax. (Del gr. cabeza y pecho). m. Zoo!. Parte del cuerpo de los crustceos y arcnidos que
est formada por la union de la cabeza y el trax.

Colonia. Biol. Hongo o animal que por proliferaciOn vegetativa, en general por gemacin, forma un
cuerpo nico de numerosos clulas unidas entre Si.

Crustceo, a. (Del lat. crusta, castra, corteza). adj. Que tiene costra. II 2. Zoo!. Se dice de los
animales artrpodos de respiraciOn branquial, con dos pares de antenas, cubiertos por un
caparazn generalmente calcificado, y que tienen un nmero variable de apndices. U. t. c.
s. 113. m. p1. Zoo!. Clase de estos animales.

Cuticula. (Del let. cuticOla). f. peilcula (II piel delgada y delicada). 112. Zoo!. Membrane formada
por ciertas sustancias que segrega el citaplasma, las cuales, acumulndose en la periferia de
la clula, constituyen una cubierta protectora de esta; p. ej., la de muchos protozoos. 11 3.
Zoo!. Capa segregada por la epidermis, ms a menos dura e impermeable, que cubre la
superficie del cuerpo de ciertos animales; p. ej., la de los anlidos y los artrpodos.

Exoesqueleto. m. Zoo!. PieI a parte de ella engrosada y muy endurecida, ya par la acumulacin de
materias quitinosas a cabcreas sobre Ia epidermis, frecuentemente en forma de conches o
caparazones, coma en los celentreos, moluscos y artrpodos, ya par haberse producido en
la dermis piezas calcificadas u osificadas, coma son las escamas de los peces y las placas
seas cutneas de muchos equinodermos, reptiles y mamIferos.

Filogenia. f. Parte de la biobogia que se ocupa de las relaciones de parentesco entre los distintos
grupos de seres vivas. 112. Biol. Origen y desarrollo evolutivo de las especies, y en general,
de las estirpes de seres vivos.

Homeotermo. Adj. Biol. Capacidad de regulacion metablica para mantener la temperature del
cuerpo constante e independiente de la temperature ambiental..

Of
It it Biologia, Pra'cticas de Laboratorlo

Hongo. (Del lat. fungus). Organismo eucariota sin clorofila, de tamao muy variado y reproduccin
preferentemente asexual, por esporas. Parsitos o Saprofitos. Su tab (cuerpo),
ordinariamente filamentoso y ramificado, con el nombre de micello, absorbe los principios
orgnicos nutritivos del medio; p. ej., el cornezuelo, la roya, el agrico, etc. 11 2. Biol. Taxn
de los seres vivos de este nombre.

Insecto. m. Artrpodo de respiracion traqueal, con el cuerpo dividido distintamente en cabeza,


trax y abdomen, con un par de antenas y tres de patas. Los ms tienen uno o dos pares de
alas y sufren metamorfosis durante su desarrollo. 112. Zoo!. Taxn de estos animales.

Larva. (Del lat. larva, fantasma). f. Zoo!. Animal en estado de desarrollo, cuando ha abandonado
las cubiertas del huevo y es capaz de nutrirse por si mismo, pero aOn no ha adquirido la
forma y la organizaciOn propia de los adultos de su especie.

Linaje. in. Ascendencia o descendencia de cualquier familia. 112. Clase o condicin de una cosa.

Mandibula. (Del lat. mandibla). f. Cada una de las dos piezas, seas o cartilaginosas, que limitan
a boca de los animales vertebrados, y en las cuales estn implantados los dientes. 11 2. Zoo!.
Cada una de las dos piezas crneas que forman el pico de las ayes. 113. Zoo!. Cada una de
las dos piezas duras que tienen en la boca los insectos masticadores y otros artrOpodos para
triturar los alimentos.

Metamorfosis. (Del lat. Metamorphosis), transformacin). Zoo!. Camblo que experimentan


muchos animales durante su desarrollo, y que se manifiesta no solo en la variaciOn de forma,
sino tambin en las funciones y en el gnero de vida.

Miripodo. (de pies innumerables). adj. Zoo!. Se dice de los animales artrpodos terrestres, con
respiracin traqueal, dos antenas y cuerpo largo y dividido en numerosos anillos, cede uno
de los cuales Ileva uno o dos pares de patas; p. ej., el ciempis. 11 2. m. p1. Zoo!. Clase de
estos animales.

Musgo. (Del lat. muscus). m. Cada una de las plantas briofitas, con hojas bien desarrolladas y
provistas de pelos rizoides o absorbentes, que tienen un tallo parenquimatoso en el cual se
inicia. una diferenciacin en dos regiones, central y perifrica. Crece abundantemente en
lugares sombrIos sobre las piedras, cortezas de rboles, el suelo y aun dentro del agua
corriente o estancada. 11 2. Conjunto de estas plantas que cubren una determinada
superficie.

Notocordlo. Anat. Cordon celular macizo dispuesto a lo largo del cuerpo de los animates
cordados, debajo de la mdula espinal, a la que sirve de sostn. Constituye el eje primordial
del neuroesqueleto y a su alrededor se forma la columna vertebral en los vertebrados.

Ocelo. (Del lat. oce!lus, ojito). m. Zoo!. Ojo simple de algunos invertebrados; cada ojo simple de los
que forman un ojo compuesto de los artrOpodos.

Oviparo, ra. (Del let. oviprus). adj. Zoo!. Se dice de los animales que ponen huevos en los que la
segmentaciOn no ha comenzado o no est todavIa muy adelantada; p. ej., las ayes,
rnoluscos, insectos, etc.

70
Biologia, Prcticas de Laboratorlo

Parsito, ta. adj. Blot. Dicho de un organismo animal o vegetal: Que vive a costa de otro de distinta
especie, alimentndose de l y debilitandolo sin llegar a matarlo.

Poiquilotermo. adj. Zoot. Animal de sangre frIa

Ponzoa. (Del lat. pontionare). f. Sustancia que tiene en si cualidades nocivas para la salud, o
destructivas de la vida.

Protozoo. (De proto- y -zoo). adj. Zoo!. Se dice de los organismos, casi siempre microscpicos,
cuyo cuerpo est formado por una sola clula o por una colonia de clulas iguales entre sI.
2. p1. Zoo!. Taxn de estos organismos.

Rizoide. (Del rizo- y -oide). adj. Bot. Pelos o filamentos que hacen las veces de ralces en ciertas
plantas que, como los musgos, carecen de estos organos, absorbiendo del suelo el agua con
las sales minerales que Ileva en disolucin.

Reptar. (Del tat. reptre). intr. Andar arrastrndose como algunos reptiles.

Saprofito, ta. adj. Blot. Se dice de las plantas y los microorganismos que se alimentan de materias
orgnicas en descomposicion. 112. Blot. Se dice de este tipo de alimentacin.

SC-sill. (Del tat. sessilis, apto para sentarse). adj. Blot. Dicho de un Organo o de un organismo
carente de rganos de locomocin: Sujeto al sustrato.

SimetrIa radial. En los organismos con simetrIa radial, cualquier piano que pase a travs del eje
central del animal divide su cuerpo en mitades iguales..

Simetria bilateral. El cuerpo se organiza a lo largo de un eje longitudinal: la mitad derecha es una
imagen especular aproximada de la mitad izquierda.

Sustrato. m. Estrato que debajo de otro y sobre el cual puede influir. 112. Blot. Lugar que sirve de
asiento a una planta o un animal fijo. 11 3. BioquIm. Sustancia sobre la que acta una enzima.

Taxn o taxon. (Palabra creada sobre taxonomla). m. Blot. Cada una de las subdivisiones de la
clasificacin biolgica, desde la especie, que se toma como unidad, hasta et filo o tipo de
organizacin.

Tegumento. (Del bat. tegumentum). m. Biol. Organo que sirve de proteccin externa at cuerpo del
hombre y de los animales, con varias capas y anejos como glndulas, escamas, pelo y
plumas. 11 2. Biol. Membrana que cubre el cuerpo del animal o alguno de sus rganos
internos.

Tentculo. (Del tat. tentactum, de tentre, tentar). m. Zoot. Cada uno de los apndices mviles y
blandos que tienen muchos animates invertebrados y que pueden desempear diversas
funciones, actuando como Organos tctiles o de prensin.

Urticante. adj. Que produce comezn semejante a las picaduras de ortiga.

VivIparo, ra. (Del lat. viviprus). adj. Anat. Dicho de un animal: Cuya hembra pare hijos en la fase
de fetos bien desarrollados; p. ej., los mamIferos.

71
Blo/ogia, Pra'ct/cas de Laboratorlo

BIBLIOGRAFIA

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Direcciones electrnicas
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CLASIFICACION ELEMENTAL DE LOS SERES VIVOS:.http://www.Monografias com.htm


CONFIGURACION DE LOS SERES VIVOS: http://www.umh.es/asignaturas/fichbsignatura.
asp?asi=6007&ARE=0050

PARA QU CLASIFICAR LOS SERES VIVOS, 0 c QUE DIABLOS ES AGRUPAR


ESPECIES?: htto:J/omeaa.ilce.edu.mx:3000/sites/ciencia/volumen2/ciencia3l095/htm/sec7. htm
TAXONOMIA: http://www. monografias.com/trabaios5/taxo/taxo.shtmi

ZOOLOGIA - Animales vertebrados: http://www.gov.ar/csnatura/zoologia/animvert.htmi


ZOOLOGIA - Clasificacin del reino animal: http://www.merian.fr.bw.schule.de/maUiq/bio
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