INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAO, CINCIA E TECNOLOGIA DE

RONDNIA CMPUS ARIQUEMES

CURSO: Biologia
INSTITUTO FEDERAL
RONDNIA
RONDNIA
DISCIPLINA: Microbiologia
Campus
Campus Ariquemes
Ariquemes
DOCENTE: Brenda Nez
PRTICA1: A dinmica populacional de microorganismos em vrios ambientes
VALOR: 4,0 GRUPO DE NO MXIMO 5 PESSOAS
Esperamos que, aps o desenvolvimento prtica, voc seja capaz de:
Demonstrar que a diversidade de populaes microbianas se desenvolve de acordo com as condies nutricionais e
fsico-qumicas (luz e temperatura) encontradas nos ambientes, ao longo do tempo.
Descrever a forma de associao que os micrbios utilizam para formar comunidades e, assim, sobreviver na
Natureza.

Introduo BIOFILMES: So
comunidades de
Agora que voc j conhece a importncia dos micrbios para a evoluo das condies de micrbios que vivem
vida na Terra, nada melhor do que criar ecossistemas que alojem diferentes microbiotas harmonicamente nos
mais variados
em funo das condies ambientais. Com isto, voc perceber, na prtica, como os ambientes. Vrias
espcies de micrbios,
micrbios foram se adaptando e modificando o ambiente no planeta, ao longo do tempo. tanto procariontes
Voc vai ver tambm que, no meio ambiente, os micrbios vivem em associaes quanto
eucariontes, habitam
chamadas BIOFILMES. um mesmo biofilme
constituindo uma
Um exemplo tpico de biofi lme na Natureza a camada de limo que cobre as pedras de comunidade ecolgica
um riacho, tornando-as muito lisas e escorregadias. ou microbiota.

Esta atividade prtica deve ser iniciada o mais rpido possvel, pois quanto maior for o tempo de observao, mais rica
a discusso. Perodos compreendidos entre trs e oito semanas so desejveis.
Pense no bairro onde voc mora e responda s seguintes questes:
Quantos tipos de seres vivos habitam nele? Onde eles podem ser encontrados? O que determina onde os seres vivos
podem sobreviver? Voc alguma vez cavou um buraco para plantar uma rvore ou enterrar algo? Por que o solo,
medida que cavamos, tem cores diferentes? H organismos vivos na gua? H organismos vivos no solo? Como as
condies fsico-qumicas do ambiente influenciam no desenvolvimento dos seres vivos, entre eles os micrbios?
Relacione todas essas questes com os diferentes nichos ecolgicos existentes na Terra (leo na frica, anta no Brasil,
canguru na Austrlia ou, nas populaes microbianas, as bactrias de gua doce e as de gua salgada, as presentes nos
poos de petrleo e aquelas que vivem nas
guas glidas dos plos).
Ao final da atividade, voc dever apresentar os resultados obtidos para serem comparados e discutidos com com os
seus colegas em sala de aula. Anote, com detalhes: os materiais utilizados, as condies de trabalho e o tempo
decorrido.
Quanto mais registros forem anotados, mais elementos voc ter para a discusso e concluses de seu relatrio e,
assim, reforar a compreenso do fenmeno que est sendo estudado. A discusso dos resultados, dever ser entregue
juntamente com fotografias detalhando sua metodologia.
Para desenvolver as duas atividades sugeridas nesta prtica, voc vai precisar dos seguintes materiais:
 fita adesiva;
uma garrafa de plstico transparente de 2 litros, para cada experimento;
caneta de retroprojetor;
uma esptula;
dois baldes pequenos;
papel-toalha;
um funil (pode ser o gargalo de uma garrafa de refrigerante);
uma xcara ou caneca;
uma colher grande ou uma p;
cinco xcaras de lama ou de terra, recolhidas de, pelo menos quatro locais diferentes, tais como lagoa, pntano, lago,
jardim, quintal ou bosque para cada garrafa;
cinco xcaras de gua, escolha (gua de chuva, lago, rio, aqurio ou gua mineral sem gs);
uma colher de sopa para medida;
um basto de madeira;
O giz (CaCO3) tem como funes
uma folha de jornal picada em pedaos bem pequenos; liberar CO2 para a sntese de
lminas para microscopia; cidos nuclicos pelos micrbios
e formar hidrxido de clcio que,
lamnulas para microscopia; com seu pH alcalino, compensar a
acidez gradativa do ambiente.
microscpio ptico;
uma colher de sopa de giz branco polvilhado.

PROCEDIMENTOS PARA REALIZAO DA PRTICA

Como medidas de precauo, use luvas de ltex ou de borracha para manipular a terra, ou lave bem as mos com
escova e sabo, depois da atividade. Fique atento ao trabalhar com terra e material cortante.
Siga as seguintes etapas:

1.1. Coloque as cinco xcaras de terra ou de lama em um balde pequeno. Cate todos os galhos, folhas e pedras.
Mexendo com o basto de madeira, acrescente gua lentamente at que a terra ou lama adquiram a consistncia de
nata grossa. Acrescente mistura o jornal picado e uma colher de sopa de giz pulverizado. Misture os contedos
suavemente. Deixe em repouso por 10 minutos para que os novos ingredientes absorvam a gua. Tenha certeza de que
a mistura possui uma consistncia que a permita passar facilmente pelo funil. Se houver necessidade acrescente mais
gua.

1.2. Faa um rtulo para a garrafa, anotando o local de origem da lama ou da terra, e a natureza da gua empregada.
Fixe o funil na boca da garrafa com fita adesiva. Segure com firmeza no lugar. V acrescentando a mistura de lama ou
terra na garrafa at atingir a altura de aproximadamente um centmetro (1cm). Bata gentilmente a base da garrafa na
mesa, uniformizando a mistura. Repita esse procedimento at a mistura alcanar quatro ou cinco centmetros antes do
topo da garrafa. Tampe-a. Veja o esquema na Figura 2.3.

1.3. Prepare outras garrafas usando lama ou terra de locais diferentes. ATENO: No esquea de que cada garrafa
deve estar corretamente rotulada. Este experimento permite inmeras variaes, tais como:
 Na composio da mistura, a lama ou terra podem ser de locais diferentes, um tipo para cada garrafa;
A gua utilizada pode ser de diferentes qualidades: mineral, de torneira, de poo, destilada;
As garrafas podem ficar expostas luz (artificial ou natural) ou no escuro; no frio ou no calor, ou combinaes entre
essas variveis;
Celulose:
Como fonte de CELULOSE podem ser usados fragmentos de papel-jornal, de Polissacardio
constitudo de
palha, ou folhas secas; molculas de glicose
As garrafas podem conter o mesmo tipo de terra ou lama, mas podem ser ligadas entre si,
presente em abundncia
divididas em dois grupos: um ir receber materiais biodegradveis, e o outro, na parede das clulas
dos vegetais.
materiais no biodegradveis.

1.4. Escolha um lugar para colocar a(s) garrafa(s) que no seja sob a luz direta do Sol ou sob calor intenso.

1.5. Mantenha a(s) garrafa(s) em uma s posio, sem mov-la(s), e observe-a(s) diariamente. Anote as suas
observaes, atentando para mudanas que ocorrem na coluna, a cada centmetro da altura da garrafa, relacionadas
cor e presena de bolhas.
Embora algumas mudanas como formao de bolhas, devido produo de gs (CO2, H2, H2S ou NH3) possam ser
vistas em poucos dias, normalmente so necessrias aproximadamente seis semanas para que ocorra mudana na cor
do ambiente que voc preparou.

A seguir algumas situaes com as quais voc pode se deparar:

As bolhas que aparecem so o resultado da formao de gs decorrente do metabolismo das clulas microbianas.
As diferentes tonalidades que aparecem no ambiente da garrafa so decorrentes da proliferao de micrbios com
diferentes pigmentos fotossintticos (clorofila=verde, ficocianina=azul e ficoeritrina=vermelha).
Se voc mantiver uma das garrafas no escuro, no haver crescimento de bactrias fotossintticas. Porm, outros
tipos microbianos podem proliferar utilizando energia a partir de compostos orgnicos ou inorgnicos.
Garrafas mantidas numa estufa com temperatura acima de 50C (120F) no apresentaro alteraes pois a maioria
dos micrbios que conhecemos no conseguem sobreviver nestas condies, a no ser que o solo que voc utilizou
seja oriundo de regies prximas s reas vulcnicas.
Garrafas mantidas em baixas temperaturas no mostraro crescimento ou este ser muito lento, demandando um
tempo muito maior, pois os micrbios tero seu crescimento bloqueado ou retardado, a no ser que a terra seja
proveniente de regies frias.
1.6. Escreva as observaes em um dirio, e faa um desenho colorido do que observar a cada semana.
Ao final desta atividade, voc ter percebido as modificaes nos solos e ter notado a importncia das condies
ambientais para a seleo da microbiota da vez, de acordo com a disponibilidade de nutrientes e as condies
climticas vigentes. Se voc extrapolar este experimento, que durou algumas semanas, para bilhes de anos, poder
fazer uma idia aproximada da importncia dos micrbios para a evoluo do planeta, alm de perceber que a seleo
ocorre naturalmente, de acordo com as condies vigentes.
Voc j se perguntou se as populaes microbianas que esto se desenvolvendo na garrafa podem ser vistas ao
microscpio? A resposta sim. Inclusive a dinmica populacional que ocorre em um nicho ecolgico pode ser
acompanhada.
Uma das formas de voc visualizar esse fenmeno executando a Atividade 2, pela qual voc poder observar a
formao de biofilme em lminas de vidro, utilizadas para microscopia.

2- Observao microscpica de lminas com biofilme.

a. No outro balde pequeno, coloque tambm cinco ou seis xcaras de terra recolhida de um local sua escolha.
Acrescente gua at alagar todo o contedo. Nessa terra alagada, enterre trs ou quatro lminas de vidro para
microscopia, conforme a Figura 2.4.
Deixe o balde guardado durante pelo menos trs semanas, adicionando mais gua, caso necessrio, para manter o
alagado.

b. Aps esse tempo, desenterre delicadamente uma das lminas. Limpe um dos lados da lmina com papel toalha, para
evitar sujar o microscpio. No outro lado, deposite cuidadosamente uma lamnula em cima e leve ao microscpio.

c. Focalize a lmina ao microscpio com objetiva de 10x ou 40x.

d. Escreva as diferentes formas de micrbios que voc observa procurando distinguir os seres procariontes,
filamentosos ou no, que coabitam com diferentes eucariontes. Fotografe ou desenhe as estruturas encontradas e as
inclua no seu relatrio.

Aps a observao dos resultados da Atividade 2, voc pode concluir que existem verdadeiras comunidades
microbianas que vivem em associaes, que do origem ao que denominamos biofilme. Desta forma, os micrbios
conseguiram colonizar os mais variados ambientes da biosfera de nosso planeta.