INFORME DE PRCTICA DE LABORATORIO

DC-LI-FR-002

Fecha: 10-03-2015
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BIOQUIMICA
2015-01

SOLUBILIDAD Y DESNATURALIZACION DE PROTEINAS

Ana Maria Orozco Guzman, Sara Duque Moreno

Colgio Mayor de Antioquia
Facultad de Arquitectura e Ingeniera
Nana-orozco1@hotmail.com, maisaduque@hotmail.com

Resumen. Las protenas debido al gran tamao de sus molculas forman con el agua soluciones coloidales que
pueden precipitar formndose cogulos al ser tratadas con soluciones salinas, cidos, alcoholes etc. La coagulacin
de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin con los agentes indicados que al actuar
sobre la protena la desordenan por destruccin de sus estructuras secundarias y terciarias.

Abstract. The proteins due to the large size of their molecules form colloidal solutions with water that they may precipitate
forming clots when treated with salt solutions, acids , alcohols etc. the Coagulation of proteins is an irreversible Process
and is due to denaturation with the indicated agents that the act on the protein the clutter by destruction of their secondary
and tertiary structures .

Palabras clave: albumina, protenas, cidos, bases, precipitacin.

1 Introduccin cuales tienden a unirse entre s, dando lugar a grandes

Las protenas son filamentos largos de aminocidos unidos
en una secuencia especfica. Son creadas por los ribosomas
que leen codones de los genes y ensamblan la
combinacin requerida de aminocidos por la instruccin
gentica. Las protenas recin creadas experimentan una
modificacin en la que se agregan tomos o molculas
adicionales, como el cobre, zinc y hierro. Una vez que
finalice ese proceso la protena comienza a plegarse si
alterar su consecuencia (espontneamente y hay veces con
asistencia de encimas) de forma tal que los residuos
hidrfobos de la protena quedan encerrados dentro de su
estructura y elementos hidrfilos quedan expuestos al
exterior. La forma final de la protena determina su manera
de interaccionar con el entorno.
Si en una disolucin de protenas se produce cambios de
pH, alteraciones en la concentracin, agitacin molecular,
variaciones en la concentracin o variaciones bruscas de la
temperatura, la solubilidad de las protenas pueden verse
reducidas hasta el punto de verse su precipitacin. Esto se
debe a que los enlaces que mantiene la conformacin
globular se rompen y la protena adopta la conformacin
filamentosa. De este modo, la capa de molculas de agua
no recubre completamente a las molculas proteicas, las
partculas que precipitan. Las protenas que se hallan en
ese estado no pueden llevar a cabo la actividad para la que
fueron diseadas, en resumen, no son funcionales.
Esta variacin de la conformacin de las protenas se
denomina desnaturalizacin, la desnaturalizacin no afecta
los enlaces peptidicos: al volverse las condiciones
normales, puede darse el caso de que la protena recupere
la conformacin primitiva, lo que se denomina
renaturalizacion.
Son ejemplos de desnaturalizacin la leche cortada como
consecuencia de la desnaturalizacin de la casena, la
precipitacin de la clara de huevo al desnaturalizarse.
2 Materiales y equipos
Nueve tubos de ensayo.
Mechero.
Pinzas para tubo de ensayo.
Rejilla de abesto.
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Reactivos
H2SO4

HNO3

NaOH

Cloruro de Mercurio

Albmina

Nitrato de Plata

cido Ctrico

cido Tricloroacetico
Limn
Leche
4 Datos

Tubo 1-a : H2SO4 + albumina

Tubo 2-a : HNO3 + albumina
Tubo 3-a : NaOH + albumina

Tuvo HCLO + limn

Tubo 4-M : AgCl2 + albumina

Tubo 5-M : AgNO3 + albumina

Tubo 5 C6H8O7 + albumina

Tubo 6 CCL3COOH + albumina
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3 Resultados
Mtodo/
Muestra Reactivo
desnaturalizacin
Mtodo/
Muestra Reactivo
desnaturalizacin
Desnaturalizacin
Albumina AgCl2
pH extremo
Salting out Albumina H2SO4

Se observa un halo de
Se observa una reaccin burbujas y dos fases, una
exotrmica y en el medio de Observaciones
liquida (AgCl2) y una viscosa
Observaciones ambos se presenta un halo el cual (albumina).
muestra un color caf/violeta tierra
con un blanco espumoso encima

Mtodo/
Muestra Reactivo
desnaturalizacin

Mtodo/
Muestra Reactivo Desnaturalizacin
desnaturalizacin Albumina AgNO3
pH extremo
Desnaturalizacin Se observa como
Albumina HNO3
pH extremo lentamente la albumina se
va solidificando en
Observaciones
contacto con ( AgNO3)
Se observa un halo con
burbujas de color amarillo presentando un cambio de
Observaciones oscuro con blanco entre dos color transparente a blanco
fases, una liquida y otra
viscosa.

Mtodo/
Muestra Reactivo
Mtodo/ desnaturalizacin
Muestra Reactivo
desnaturalizacin

Desnaturalizacin
Desnaturalizacin Albumina C6H8O7
Albumina NaOH pH extremo
pH extremo
Se observa dos fases dado
Se observa un halo de dos que no se homogenizaron
fases, una gelica (albumina) y completamente, la albumina
Observaciones liquida (NaOH), no presento transformo en una forma
cambio de color ni Observaciones viscosa el acido ctrico. Se
temperatura. coloca en un bao mara
durante 5 minutos donde se
congela totalmente mostrando
una estructura como parafina.
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esto debido a la desnaturalizacin de la protena. Al

Mtodo/
Muestra Reactivo mezclar la albumina con el HNO3, NaOH y AgCl2 se
desnaturalizacin presenta una reaccin parecida, ya que en las tres existe la
conformacin de un halo, no presentan cambio de
Desnaturalizacin temperatura y una de las diferencias es que el HNO3 tuvo
Albumina CCL3COOH un cambio de color a blanco, esto se debe al igual que en
pH extremo
todos los procesos a la desnaturalizacin de las protenas.
Se observa dos fases ya que al Para los casos de AgNO3, C6H8O7 se produjo una
combinarse hubo una desnaturalizacin y cambio por lo tanto su conformacin
sedimentacin y un cambio de nativa, paso de ser una mezcla espesa a ser slida y tener
color a blanco, luego de 5
Observaciones
minutos en el bao mara se un cambio a color blanco.
presentaron burbujas pero su
estructura y sedimentacin
Al mezclar la leche y el HCL pudimos observar cmo se
seguan igual. mezclan totalmente y ha adquirido un color blanco, pero a
quedado menos solido en comparacin antes de calentarlo
en el bao mara, El hecho de que adopte ese color blanco
se debe a que se ha producido una desnaturalizacin
debido al cambio en el pH, puesto que el cido clorhdrico
ha hecho disminuir el pH inicial.
Mtodo/
Muestra Reactivo
desnaturalizacin 7 Profundizacin
Menciones tres mtodos para precipitar protenas:
Desnaturalizacin
Leche HNO3 -Salting Out: Cambiando la proporcin de las sales del
pH extremo
medio en que se encuentran, hasta que se precipite.
-Salting In: A bajas concentraciones de sal, la solubilidad
Se desnaturaliza la protena, de las protenas usualmente incrementa ligeramente.
se solidifica y presenta un color
Observaciones claro nata y debido a la
-Cambiando el pH: aadiendo cidos o bases.
desnaturalizacin sus Cuando una protena se desnaturaliza, puede seguir su
molculas de expanden.
actividad biolgica?
La protena no puede cumplir una funcin biolgica ya que
el proceso de desnaturalizacin hace que la protena llegue
a su forma nativa.
Por qu se forman grumos de la leche cuando se adiciona
Mtodo/ el limn o el HCL?
Muestra Reactivo
desnaturalizacin
Porque el acido reduce la carga de las protenas de
aglutinarse y las protenas y sus molculas de grasa
Desnaturalizacin atrapadas se rompen y flotan a la superficie, conforme las
Leche HCL
pH extremo protenas y las grasas se funden.
8 Conclusiones
Se desnaturaliza la protena,
se solidifica y presenta un color - La desnaturalizacin de una protena se puede
Observaciones blanco y debido a la realizar por muchos mtodos ya sean fsicos o
desnaturalizacin sus
molculas se comprimen.
qumicos, que de igual manera es una reaccin
reversible.

- La mayora de protenas al realizarse la

desnaturalizacin se precipitan.
6 Anlisis de Resultados
Al mezclar la albumina con el H2SO4 se produjo una
reaccin exotrmica y un cambio de color caf, violeta
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Referencias
GARCIA, ARCESIO R, Y UBADL, AQUILINO A. Hacia
La Qumica 2, primera Edicin revisada. Editorial Temis
S.A. Santa Fe de Bogot. 1985.

ROBERT HORTON. Principles of biochemestry. Cuarta

edicin. Editorial: Prentencen hall. 2006.

Gua de laboratorio: Solubilidad y Desnaturalizacin de

protenas.