BAB 3.

METODE PENELITIAN
Uji aktivitas antibakteri ekstrak
Bakteri diinkubasi selama 18-24 jam (sebelumnya diadaptasikan dahulu). Dibuat konsentrasi
ekstrak dengan mengunakan pelarut aquadest dimulai dari 10%, 15%, 20%, 25%, 30%.
Pengujian bakteri dilakukan dengan penimbangan 5,8 gram NA. Dilarutkan dalam 100 ml air
panas aduk ad homogen, ditambahkan 100 ml sisa air aduk ad homogen. Kemudian di
sterilkan dalam autoclave selama 15 menit pada suhu 121C. Setelah itu, dibiarkan dingin (
40C) kemudian ditambahkan 2 ml suspensi bakteri yang kekeruhannya sama dengan Mc.
Farland 108 CFU/ml. Gojok hingga homogen, tuang pada petri steril masing-masing 15 ml
kemudian biarkan memadat. Penempelan disk kontrol negatif (aquaest), kontrol positif
(tetrasiklin), ekstrak dari kulit kakao konsentrasi I (10%), konsentrasi II (15%) konsentrasi III
(20%), konsentrasi IV (25%), konsentrasi V (30%) dilakukan pada media agar yang sudah
ditanami bakteri masing- masing sebanyak 10 l. Selesai penempelan disk pada media segera
diinkubasi pada 37C dengan lama waktu 18-24 jam. Kadar hambat minimum ditandai
dengan tidak adanya pertumbuhan bakteri, kontrol negatif, kontrol positif.
Uji aktivitas antibakteri masker
Bakteri diinkubasi selama 18-24 jam (sebelumnya diadaptasikan dahulu). Dilakukan
penimbangan 5,8 gram NA. Dilarutkan dalam 100ml air panas aduk ad homogen,
ditambahkan 100ml sisa air aduk ad homogen. Kemudian disterilisasi dalam autoclave
selama 15 menit pada suhu 121C. Setelah itu,dibiarkan dingin ( 40C) kemudian
ditambahkan 2 ml suspensi bakteri yang kekeruhannya sama dengan Mc. Farland 108
CFU/ml. Gojok hingga homogen, tuang pada petri steril masing-masing 15 ml kemudian
biarkan memadat. Penempelan disk kontrol negatif, kontrol positif pada media agar yang
sudah ditanami bakteri masing-masing sebanyak 10 l. Penempelan disk masker ekstrak dari
kulit kakao 10%, ekstrak `15%, ekstrak 20%, ekstrak 25% dan ekstrak 30% pada media agar
yang sudah ditanami bakteri masing-masing sebanyak 125 mg ekstrak yang sudah diencerkan
dengan aquadest secukupnya. Selesai penempelan disk pada media agar segera diinkubasi
pada 37C dengan lama waktu 18-24 jam. Pembacaan/pengukuran diameter zone hambatan.