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PRACTICA N 04
DETERMINACIN DE LPIDOS
Ayacucho Per
2013
INTRODUCCIN
Los lpidos son un grupo de substancias, que en general son solubles en solventes orgnicos, tales
como cloroformo o ter. Las grasas, junto con las protenas y los carbohidratos constituyen los
principales componentes estructurales de los alimentos. Una parte importante a considerar es el
hecho de que su caracterstica de solubilidad es nica en los lpidos.
La definicin de lpidos describe un amplio grupo de substancias que tiene las mismas
caractersticas y composicin estructural similar. No obstante que algunos lpidos, tales como los
triacil glicridos, son muy hidrofbicos, otros lpidos, tales como los di y monoacilglicridos
tienen tanto partes hidrofbicas como hidroflicas en sus molculas, lo que las hace relativamente
solubles en solventes polares. Es importante sealar que los triacilglicridos son los lpidos con
mayor incidencia en los alimentos por lo que los trminos delpidos, grasas y aceitesson usados
en forma intercambiable.
DETERMINACIN DE LPIDOS
I. OBJETIVOS
Los lpidos comestibles, tanto de origen vegetal como animal, quedan clasificados entro
de los llamados lpidos neutros debido a que su estructura qumica corresponde. Casi en
un 100% a steres del glicerol; por lo que se les denomina triglicridos o
triacylglicridos. Adems, los lpidos comestibles contienen en pequea cantidad (0,5-
2%) otros componentes de carcter liposoluble que constituyen el llamado "residuo
insaponificable"; est. formado por este) alcoholes alifticos y sus teres, pigmentos,
vitaminas liposolubles e hidrocarburos, entre los cuales interesa el escualeno: C 30H50,
abundante en los aceites de pescado y tambin de olivas.
A su vez, sus propiedades dependen tanto de la composicin de los cidos grasos que
los constituyen como de su distribucin en la molcula de la glicerina, en lo -que se basa
el actual proceso industrial de la transesterificacin
Los lpidos naturales tienden a agruparse por -medio d sus .componentes cidos, de
acuerdo a su origen biolgico. As, las grasas de los organismos ms primitivos y simples
estn formadas por una. Mezcla 'compleja del .cidos grasos, mientras que a medida en
que se asciende en la escala biolgica, la constitucin de la materia grasa llega a ser
ms sencilla.
Componentes cidos de las materias grasas de origen acutico. Todas las materias
grasas de origen acutico tienen un amplio rango de cidos grasos, principalmente de
la serie insaturada entre 16 y 22 carbono. El principal componente saturado es el cido
palmtico.
Hay ciertas familias de plantas que se caracterizan por tener un cido graso como
componente principal; es el caso de las crucferas, con el cido ercico, y de las palmas,
con el cido lurico. En general, se ha relacionado la temperatura del ambiente con la
produccin de cidos grasos saturados; a temperatura ms elevada hay mayor sntesis
de saturados, mientras que en los aceites de pescado predomina la insaturacin
(WINTON, 1958).
Leche 3.50
(COLLAZOS, 1996)
CARACTERSTICAS NUTRITIVAS
Siendo mayor el porcentaje de grasa en los helados crema (alrededor del 11%)
que en los de leche (3%). Lo mismo sucede con la energa (unas 200 Kcal/100gr
en los helados crema frente a las 137 Kcal/100 gr., aproximadamente, de los
helados de leche) (HTTP://WWW.MADRIDSALUD.ES/TEMAS/HELADOS.PHP)
hora: 12:40pm; fecha: 18 - 10 - 13
2.2 Mtodos de extraccin y cuantificacin
Es una extraccin continua por disolvente donde a la muestra se le hace pasar vapor de
disolvente y la grasa se cuantifica por prdida de peso en la muestra o por grasa
removida (NIELSEN, 1998).
Se basa en una separacin de fases entre dos disolventes no miscibles. Se sabe que la
sustancia de inters es soluble en uno de ellos. Posteriormente se separa la fase que se
sabe contiene la sustancia y se desecha la otra, se concentra y se obtiene la
sustancia.
Los butirmetros de leche deben estar completamente limpios y sobre todo libres de
restos de grasa y luego deben ser llenados siguiendo este orden; cido sulfrico, leche y
alcohol amlico. La leche y el alcohol amlico deben introducirse formando una capa
encima de la otra y no deben mezclarse antes de agitar el butirmetro. Despus de
cerrado, el contenido del butirmetro se mezcla bien agitndolo e invirtiendo el
butirmetro varias veces. Ajustar el tapn con cuidado para que se llene la escala pero
que no haya lquido en el bulbo. Centrifugar el butirmetro en la centrfuga calentada,
calentarlo durante 5 minutos en el bao mara a 65 C, ajustar la lnea divisoria entre la
mezcla de cido sulfrico y la columna de grasa en una marca de divisin entera, leer el
extremo superior de la columna de grasa en el mecanismo inferior (HART, 1958).
A) MATERIALES
Materiales:
Reactivos:
Hexano o ter.
Alcohol etlico (absoluto).
ter etlico.
ter de petrleo.
Cloroformo.
Metanol.
Etanol (absoluto).
Equipos:
Balanza analtica.
Extractor soxhlet.
Estufa a 100 105C.
Bao mara de 70 80C.
Evaporador rotatorio.
Licuadora.
Agitador magntico con su magneto.
B) MTODOS
En este mtodo es necesario usar muestras deshidratadas, usar las muestras usadas en
determinacin de humedad.
1. El baln del soxhlet debe lavarse y ponerse a secar en la estufa a 110C por
espacio de una hora, sacarlo, enfriar en un desecador y pesar (P1).
2. Pesar 3 g de muestra y empaquetarlo en papel filtro Wattman N 02 y luego
pesar (P2).
3. El paquete se coloca en el cuerpo del soxhlet.
4. Agregar n-Hexano destilado hasta que una parte del mismo sea sifoneado
hacia el matraz.
5. Conectar la cocina a temperatura baja. El hexano al calentarse se evapora (69
34.6C) y asciende hacia la parte superior del cuerpo, donde se condensa
por refrigeracin con agua y cae sobre la muestra, regresando posteriormente
al matraz por el sifn, arrastrando consigo la grasa. El cilo es cerrado y la
velocidad de goteo de la n-hexano debe ser de 30 a 40 gotas por minuto. El
proceso durante 3 horas.
6. El matraz debe sacarse del aparato cuando contiene poco hexano (momentos
antes de que ste sea sifoneado desde el cuerpo).
7. Evaporar el matraz en un desecador con silicagel o estufa a temperatura de
60C.
8. Pesar el baln que tiene grasa (P3).
9. Determinar la cantidad de grasa total en 3 g de muestra y expresarlo en
porcentaje.
Para la verificacin, el cartucho debe secarse en estufa a 100C y luego ser pesado
(P4) y comprobar:
(3 1 )
% = 100
()
IV RESULTADOS
RESULTADOS DE EXTRACCIN EN FRO:
PARA EL HELADO:
= 3.0016
1() = 31.8437
2( +) = 31.9398
(P2 P1 ) 4 100
% Lpido total =
g (muestra)
% = . %
PARA LA LECHE:
g de muestra = 3.0043 g
P1(vaso) = 31.8913 g
(P2 P1 ) 4 100
% Lpido total =
g (muestra)
% = . %
IV. DISCUSIONES
V. CONCLUSIONES
VII. CUESTIONARIO
Anlisis de Lpidos.
Los lpidos, junto con las protenas y carbohidratos, constituyen los principales componentes
estructurales de los alimentos. Los lpidos se definen como un grupo heterogneo de compuestos
que son insolubles en agua pero solubles en disolventes orgnicos tales como ter, cloroformo,
benceno o acetona. Todos los lpidos contienen carbn, hidrgeno y oxgeno, y algunos tambin
contienen fsforo y nitrgeno. Los lpidos comprenden un grupo desustancias que tienen
propiedades comunes y similitudes en la composicin, sin embargo algunos, tales como los
triacilgliceroles son muy hidrofbicos. Otros, tales como los di y monoacilgliceroles tienen
movilidad hidrofbica e hidroflica en su molcula por lo que pueden ser solubles en disolventes
relativamente polares.
El contenido total de lpidos se determina comnmente por mtodos de extraccin con disolventes
orgnicos (por ejemplo Soxhlet, Goldfish, Mojonnier), sin embargo tambin puede cuantificarse
por mtodos de extraccin que no incluyen disolventes (por ejemplo, Babcock, Gerber) y por
mtodos instrumentales que se basan en propiedades fsicas o qumicas de los lpidos (por
ejemplo, infrarrojo, densidad y absorcin es rayos X).
Mtodo de Soxhlet
Es una extraccin semi continua con un disolvente orgnico. En este mtodo el disolvente se
calienta, se volatiliza y condensa goteando sobre la muestra la cual queda sumergida en el
disolvente. Posteriormente ste es si foneado al matraz de calentamiento para empezar de
nuevo el proceso. El contenido de grasa se cuantifica por diferencia de peso.
Mtodo de Goldfish
Es una extraccin continua con un disolvente orgnico. ste se calienta, volatiliza para
posteriormente condensarse sobre la muestra. El disolvente gotea continuamente a travs de la
muestra para extraer la grasa. El contenido de grasa se cuantifica por diferencia de peso entre
la muestra o la grasa removida.
Este mtodo hace uso de la solubilidad intrnseca de la sustancia a separar; es claro que un
compuesto no polar es soluble en un disolvente no polar (Hoffman, 1989). La extraccin se
realiza en fro para evitar el dao del material lipdico y por lotes para incrementar la
eficiencia.
Mtodo de Bligh-Dyer
Mtodo de Rse-Gottlieb.
De acuerdo a este mtodo, la separacin de la grasa es lograda por amoniaco y etanol con un
posterior efecto de deshidratacin sobre los fosfolpidos. La grasa es disuelta en ter recin
destilado y se aade algo de petrleo de tal suerte que se separen algunos compuestos no
lipdicos que se puedan encontrar en la fase etrea. Esta mezcla es completamente inmiscible en
agua de manera que mediante una extraccin adecuada es simple dejar la grasa en la fase
etrea y el residuo graso es pesado. Este mtodo es particular para leche fresca que no
contiene cidos grasos libres, los cuales en disolucin alcalina forman sales de amonio y esto es
insoluble en ter. Esta es la razn por la cual esto no se aplica a quesos, los cuales si tienen
cidos grasos libres.
Mtodo de Gerber.
ste, as como los dems mtodos volumtricos presentan un carcter un tanto cuanto emprico ya
que varios factores afectan la gravedad especfica de la grasa separada, variaciones propias
de la grasa, cidos grasos presentes, solubilidad de la grasa en los disolventes, etc. Con estos
mtodos volumtricos la muestra se sita en un butirmetro y se descompone utilizando cidos o
lcalis de manera que la grasa es liberada, esta se separa por mtodos mecnicos (centrifuga)
y se colecta en el cuello calibrado.
Mtodo de Mojonnier
La grasa es extrada con una mezcla de ter etlico y ter de petrleo en un matraz de
Mojonnier, la grasa extrada se pone a peso constante y es expresada en porcentaje de grasa
por peso. La prueba de Mojonnier es un ejemplo de extraccin discontinua con disolvente. Esta
extraccin no requiere remover previamente la humedad de la muestra.
Mtodo de Soxhlet
La determinacin de grasa, o extracto etreo por el mtodo de Soxhlet, nos permite estimar el
tiempo de almacenamiento de un producto alimenticio con base en el contenido de grasa, ya
que un alimento que contenga una alta cantidad, sufre el proceso de oxidacin o acidez.
Mtodo de Goldfish
La extraccin se realiza en fro para evitar el dao del material lipdico y por lotes para
incrementar la eficiencia.
Mtodo de Bligh-Dyer
Este mtodo es particular para leche fresca que no contiene cidos grasos libres, los cuales en
disolucin alcalina forman sales de amonio y esto es insoluble en ter. Esta es la razn por la
cual esto no se aplica a quesos, los cuales si tienen cidos grasos libres.
Mtodo de Gerber.
HART F. L.; Anlisis moderno de los alimentos; Acribia. Zaragoza (Espaa), 1991.