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UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTOBAL DE HUAMANGA

FACULTAD DE INGENIERIA DE QUIMICA Y METALURGIA


ESCUELA DE FORMACION PROFESIONAL DE INGENIERIA EN
INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

PRACTICA N 04
DETERMINACIN DE LPIDOS

Ayacucho Per
2013
INTRODUCCIN

Los lpidos son un grupo de substancias, que en general son solubles en solventes orgnicos, tales
como cloroformo o ter. Las grasas, junto con las protenas y los carbohidratos constituyen los
principales componentes estructurales de los alimentos. Una parte importante a considerar es el
hecho de que su caracterstica de solubilidad es nica en los lpidos.
La definicin de lpidos describe un amplio grupo de substancias que tiene las mismas
caractersticas y composicin estructural similar. No obstante que algunos lpidos, tales como los
triacil glicridos, son muy hidrofbicos, otros lpidos, tales como los di y monoacilglicridos
tienen tanto partes hidrofbicas como hidroflicas en sus molculas, lo que las hace relativamente
solubles en solventes polares. Es importante sealar que los triacilglicridos son los lpidos con
mayor incidencia en los alimentos por lo que los trminos delpidos, grasas y aceitesson usados
en forma intercambiable.
DETERMINACIN DE LPIDOS

I. OBJETIVOS

Cuantificar la cantidad de lpidos presente en un alimento.

II. FUNDAMENTO TERICO

2.1 Lpidos en los alimentos

Fuera de su aporte calrico, los lpidos cumplen importantes tareas bioqumicas:


suministro de cidos grasos esenciales y de vitaminas liposolubles y formacin
metablica de acetil coenzima A.

Los lpidos comestibles, tanto de origen vegetal como animal, quedan clasificados entro
de los llamados lpidos neutros debido a que su estructura qumica corresponde. Casi en
un 100% a steres del glicerol; por lo que se les denomina triglicridos o
triacylglicridos. Adems, los lpidos comestibles contienen en pequea cantidad (0,5-
2%) otros componentes de carcter liposoluble que constituyen el llamado "residuo
insaponificable"; est. formado por este) alcoholes alifticos y sus teres, pigmentos,
vitaminas liposolubles e hidrocarburos, entre los cuales interesa el escualeno: C 30H50,
abundante en los aceites de pescado y tambin de olivas.

A su vez, sus propiedades dependen tanto de la composicin de los cidos grasos que
los constituyen como de su distribucin en la molcula de la glicerina, en lo -que se basa
el actual proceso industrial de la transesterificacin

Los lpidos naturales tienden a agruparse por -medio d sus .componentes cidos, de
acuerdo a su origen biolgico. As, las grasas de los organismos ms primitivos y simples
estn formadas por una. Mezcla 'compleja del .cidos grasos, mientras que a medida en
que se asciende en la escala biolgica, la constitucin de la materia grasa llega a ser
ms sencilla.

Componentes cidos de las materias grasas de origen acutico. Todas las materias
grasas de origen acutico tienen un amplio rango de cidos grasos, principalmente de
la serie insaturada entre 16 y 22 carbono. El principal componente saturado es el cido
palmtico.

Componentes cidos de animales terrestres. Se observa una gran simplificacin,


comparada con el caso anterior: los cidos grasos ms importantes son oleico y
palmtico. En los rumiantes el cido esterico se encuentra como constituyente de los
glicridos en mayor proporcin, en lugar del oleico. Los otros constituyentes, en general,
pertenecen a la serie del C18.

Componentes cidos de leche de Mamferos, principalmente rumiantes. En generar,


disminuye la cantidad de los componentes C18 para dar lugar a la aparicin de cidos
grasos saturados, de bajo peso molecular (C12, C10, C8, C6, C4), que se sintetizan en su
organismo.

Componentes cidos de materias grasas vegetales. En general, se observa una


gran simplificacin de los componentes cidos; palmtico y oleico son predominantes.
Pero aqu debe mencionarse el linoleico, casi ausente en las materias grasas de origen
acutico y que en algunos lpidos vegetales sobrepasa el 50%, como en los aceites de
maz, soya, girasol, pepa de uva. La presencia de cido linoleico proporciona cierta
inestabilidad, como es el caso Ye los aceites de soya y colza o raps.

Hay ciertas familias de plantas que se caracterizan por tener un cido graso como
componente principal; es el caso de las crucferas, con el cido ercico, y de las palmas,
con el cido lurico. En general, se ha relacionado la temperatura del ambiente con la
produccin de cidos grasos saturados; a temperatura ms elevada hay mayor sntesis
de saturados, mientras que en los aceites de pescado predomina la insaturacin
(WINTON, 1958).

Tabla N01. Tabla peruana de composicin de alimentos


Alimento Grasa g/100g de porcin comestible

Leche 3.50

(COLLAZOS, 1996)

CARACTERSTICAS NUTRITIVAS

La composicin depende de la variedad de helado. Un helado por trmino medio


tiene la siguiente composicin:

VALOR NUTRITIVO POR 100 gr.


Energa 204 Kcal.
Protenas 4,5 g
Lpidos 10,1 g
Hidratos de Carbono 24,5 g
Calcio 150 mg
Hierro 0,2 mg
Magnesio 13 mg
Cinc 0,4 mg
Tiamina 0,05 mg
Riboflavina 0,14 mg
cido flico 2 mg
Vitamina A 48 mg

Siendo mayor el porcentaje de grasa en los helados crema (alrededor del 11%)
que en los de leche (3%). Lo mismo sucede con la energa (unas 200 Kcal/100gr
en los helados crema frente a las 137 Kcal/100 gr., aproximadamente, de los
helados de leche) (HTTP://WWW.MADRIDSALUD.ES/TEMAS/HELADOS.PHP)
hora: 12:40pm; fecha: 18 - 10 - 13
2.2 Mtodos de extraccin y cuantificacin

2.2.1 Mtodo de Soxhlet

Es una extraccin semicontinua con disolvente donde una cantidad de disolvente


rodea la muestra y se calienta a ebullicin, una vez que dentro delSoxhlet (Figura N 01)
el lquido condensado llega a cierto nivel es sifoneado de regreso al matraz de
ebullicin, la grasa se mide por prdida de peso de la muestra o por cantidad de
muestra removida. (NIELSEN, 1998).

Figura N 01. Esquema de extraccin Soxhlet.

2.2.2 Mtodo de Goldfish

Es una extraccin continua por disolvente donde a la muestra se le hace pasar vapor de
disolvente y la grasa se cuantifica por prdida de peso en la muestra o por grasa
removida (NIELSEN, 1998).

Figura N 02. Esquema de extraccin Goldfisch.


2.2.3 Mtodo por lotes (en batch)

Se basa en una separacin de fases entre dos disolventes no miscibles. Se sabe que la
sustancia de inters es soluble en uno de ellos. Posteriormente se separa la fase que se
sabe contiene la sustancia y se desecha la otra, se concentra y se obtiene la
sustancia.

Este mtodo hace uso de la solubilidad intrnseca de la sustancia a separar; es claro


que un compuesto polar es soluble en un disolvente polar, por tanto el otro disolvente
debe ser no polar (HOFFMAN, 1989).

2.2.4 Mtodo de Bligh-Dyer

El mtodo de Bligh-Dyer as como su modificacin por Hanson y Olley proporciona un


mtodo rpido para la extraccin de lpidos de tejidos y productos alimenticios que
contienen una cantidad significativa de agua. El mtodo se basa en la homogenizacin
de la muestra con cloroformo, metanol y agua en proporciones tales que se forme una
sola fase miscible con el agua de la muestra.
Al aadir alcuotas de cloroformo y agua se logra la separacin de fases. El material
lpidico se encuentra en la fase no acuosa, mientras que el material no lpidico se
encuentra en la fase acuosa. Los lpidos se pueden extraer de dos gramos de muestra
seca hasta veinte gramos de muestra hmeda. El contenido de agua de la muestra se
ajusta a diecisis mililitros conservar la proporcin de cloroformo, metanol y agua es
esencial si se pretende una separacin de fases y una extraccin cuantitativa d
elididos. La ventaja de este procedimiento es que las etapas de filtrado y lavado son
eliminadas. Sin embargo no es un mtodo muy cuantitativo y tiene un elevado margen
de error para muestras secas de cereales (ROSSELL Y PRITCHARD, 1991).

2.3 Butirmetro para leche.

Los butirmetros de leche deben estar completamente limpios y sobre todo libres de
restos de grasa y luego deben ser llenados siguiendo este orden; cido sulfrico, leche y
alcohol amlico. La leche y el alcohol amlico deben introducirse formando una capa
encima de la otra y no deben mezclarse antes de agitar el butirmetro. Despus de
cerrado, el contenido del butirmetro se mezcla bien agitndolo e invirtiendo el
butirmetro varias veces. Ajustar el tapn con cuidado para que se llene la escala pero
que no haya lquido en el bulbo. Centrifugar el butirmetro en la centrfuga calentada,
calentarlo durante 5 minutos en el bao mara a 65 C, ajustar la lnea divisoria entre la
mezcla de cido sulfrico y la columna de grasa en una marca de divisin entera, leer el
extremo superior de la columna de grasa en el mecanismo inferior (HART, 1958).

III. MATERIALES Y MTODOS

A) MATERIALES

Materiales:

Muestra alimenticia secada previamente: Harina.


Papel filtro.
Vaso Beaker de 100 ml.
Pipeta de 10 ml.
Bombilla de extraccin.
Peras de decantacin.
Algodn.
Embudo.
Probeta de 10 ml.
Desecadores.

Reactivos:

Hexano o ter.
Alcohol etlico (absoluto).
ter etlico.
ter de petrleo.
Cloroformo.
Metanol.
Etanol (absoluto).

Equipos:

Balanza analtica.
Extractor soxhlet.
Estufa a 100 105C.
Bao mara de 70 80C.
Evaporador rotatorio.
Licuadora.
Agitador magntico con su magneto.

B) MTODOS

Ensayo N 01 Extraccin por solventes en caliente Soxhlet. Mtodo de la


A. O. A. C.

En este mtodo es necesario usar muestras deshidratadas, usar las muestras usadas en
determinacin de humedad.

1. El baln del soxhlet debe lavarse y ponerse a secar en la estufa a 110C por
espacio de una hora, sacarlo, enfriar en un desecador y pesar (P1).
2. Pesar 3 g de muestra y empaquetarlo en papel filtro Wattman N 02 y luego
pesar (P2).
3. El paquete se coloca en el cuerpo del soxhlet.
4. Agregar n-Hexano destilado hasta que una parte del mismo sea sifoneado
hacia el matraz.
5. Conectar la cocina a temperatura baja. El hexano al calentarse se evapora (69
34.6C) y asciende hacia la parte superior del cuerpo, donde se condensa
por refrigeracin con agua y cae sobre la muestra, regresando posteriormente
al matraz por el sifn, arrastrando consigo la grasa. El cilo es cerrado y la
velocidad de goteo de la n-hexano debe ser de 30 a 40 gotas por minuto. El
proceso durante 3 horas.
6. El matraz debe sacarse del aparato cuando contiene poco hexano (momentos
antes de que ste sea sifoneado desde el cuerpo).
7. Evaporar el matraz en un desecador con silicagel o estufa a temperatura de
60C.
8. Pesar el baln que tiene grasa (P3).
9. Determinar la cantidad de grasa total en 3 g de muestra y expresarlo en
porcentaje.
Para la verificacin, el cartucho debe secarse en estufa a 100C y luego ser pesado
(P4) y comprobar:

(3 1 )
% = 100
()

Ensayo N 02 Anlisis de leche (Butirmetro).

1. Transferir 10 0.2 ml de cido sulfrico enfriado entre 15.5 y 21.1 C a un


butirmetro de Gerber.
2. Adicionar cuidadosamente 11 ml de leche a no ms de 23.9C (lentamente al
principio para evitar mezcla) y 1 ml de alcohol isoamlico. Nunca debe
adicionarse el alcohol directamente sobre el cido.
3. Inserte el tapn y sujetando el butirmetro por los extremos agitar los lquidos
totalmente evitando quemarse y especialmente con proyecciones de la mezcla
cida. Cuando la cuajada se halla disuelto por completo continuar la agitacin
por 10 a 15 segundos para asegurar la total digestin. En casi de leche
homogenizada la agitacin debe ser un 50% ms prolongada.
4. Invertir el butirmetro varias veces para mezclar el cido remanente en el
cuello.
5. Llevar los butirmetros invertidos a la centrfuga a 1000 rpm por cinco minutos.
La centrfuga debe estar calentada a no menos de 55C.
6. Remover los butirmetros y leer inmediatamente el porcentaje de grasa
haciendo coincidir la base de la columna con el cero, por medio del ajuste del
tapn.
7. Si el nmero de butirmetro es grande, se pueden colocar en bao mara a 55
60C hasta el momento de efectuar la lectura. De resultar difcil la separacin
de la grasa se recomienda calentar los butirmetros a 65C y repetir la
centrifugacin.

IV RESULTADOS
RESULTADOS DE EXTRACCIN EN FRO:

PARA EL HELADO:

= 3.0016

1() = 31.8437

2( +) = 31.9398

(P2 P1 ) 4 100
% Lpido total =
g (muestra)

(31.9398 31.8437) 4 100


% Lpido total =
3.0016

% = . %

PARA LA LECHE:

g de muestra = 3.0043 g
P1(vaso) = 31.8913 g

P2(vaso +muestra) = 31.9083 g

(P2 P1 ) 4 100
% Lpido total =
g (muestra)

(31.9083 31.8913) 4 100


% Lpido total =
3.0043

% = . %

RESULTADOS DE ANLISIS DE LECHE Y/O DERIVADOS:

Muestra de heladoA = 2.6%


Muestra de heladoB = 2.1%

Promedio de las muestras A y B = (2.6 + 2.1) %/2 = 2.35%

IV. DISCUSIONES

El valor determinado de grasa en la muestra de helado de crema (sabor vainilla


con salsa de fresa, cobertura sabor chocolate y man tostado) durante el anlisis de
lpidos de extraccin en frio fue de 12.8065% de grasa, que un porcentaje muy
similar que seala la pgina de web
http://www.madridsalud.es/temas/helados.php, alrededor de 11%, Esta
variacin de porcentaje se debi probablemente por malas mediciones y el
inadecuado empleo del mtodo.

En la determinacin de grasa de la leche por el mismo mtodo (lpidos en extraccin


en frio) nos da como resultado 2.2634 % de grasa en la leche, lo que difiere
bastante a lo sealado en la Tabla de Composicin de Alimentos de Collazos
(1996) que da como porcentaje de grasa en la leche es 3.50% esto podra
deberse a condiciones alimenticias del animal, o errores en los procedimientos de
determinacin

En la determinacin de grasas con el Butirometro se obtuvo un valor promedio de


2.35% de grasas contenidas en el helado.

V. CONCLUSIONES

Los resultados del anlisis de grasas en el helado muestra un valor de 12.8065%,


superando el valor lmite sealado por la pgina web.

Los resultados del anlisis de grasas en la leche muestra un valor de 2.2634%,


mantenindose por debajo de lo establecido por Collazos.

En la determinacin de grasas con el Butirometro se obtuvo un valor promedio de


2.35% de grasas contenidas en el helado.
VI. RECOMENDACIONES

Se recomienda utilizar normas o tcnicas establecidas, trabajando conforme se


establece en la gua de prctica.

Se recomiendo manejar con extremos cuidado los reactivos que se emplean en la


prctica para as evitar algn accidente.

VII. CUESTIONARIO

1. Explique los fundamentos de los mtodos de cuantificacin de lpido en alimentos.

Anlisis de Lpidos.

Los lpidos, junto con las protenas y carbohidratos, constituyen los principales componentes
estructurales de los alimentos. Los lpidos se definen como un grupo heterogneo de compuestos
que son insolubles en agua pero solubles en disolventes orgnicos tales como ter, cloroformo,
benceno o acetona. Todos los lpidos contienen carbn, hidrgeno y oxgeno, y algunos tambin
contienen fsforo y nitrgeno. Los lpidos comprenden un grupo desustancias que tienen
propiedades comunes y similitudes en la composicin, sin embargo algunos, tales como los
triacilgliceroles son muy hidrofbicos. Otros, tales como los di y monoacilgliceroles tienen
movilidad hidrofbica e hidroflica en su molcula por lo que pueden ser solubles en disolventes
relativamente polares.

Mtodos de extraccin y cuantificacin

El contenido total de lpidos se determina comnmente por mtodos de extraccin con disolventes
orgnicos (por ejemplo Soxhlet, Goldfish, Mojonnier), sin embargo tambin puede cuantificarse
por mtodos de extraccin que no incluyen disolventes (por ejemplo, Babcock, Gerber) y por
mtodos instrumentales que se basan en propiedades fsicas o qumicas de los lpidos (por
ejemplo, infrarrojo, densidad y absorcin es rayos X).

Mtodo de Soxhlet

Es una extraccin semi continua con un disolvente orgnico. En este mtodo el disolvente se
calienta, se volatiliza y condensa goteando sobre la muestra la cual queda sumergida en el
disolvente. Posteriormente ste es si foneado al matraz de calentamiento para empezar de
nuevo el proceso. El contenido de grasa se cuantifica por diferencia de peso.
Mtodo de Goldfish

Es una extraccin continua con un disolvente orgnico. ste se calienta, volatiliza para
posteriormente condensarse sobre la muestra. El disolvente gotea continuamente a travs de la
muestra para extraer la grasa. El contenido de grasa se cuantifica por diferencia de peso entre
la muestra o la grasa removida.

Mtodo por lotes

Este mtodo hace uso de la solubilidad intrnseca de la sustancia a separar; es claro que un
compuesto no polar es soluble en un disolvente no polar (Hoffman, 1989). La extraccin se
realiza en fro para evitar el dao del material lipdico y por lotes para incrementar la
eficiencia.

Mtodo de Bligh-Dyer

El mtodo de Bligh-Dyer as como su modificacin por Hanson y Olley proporciona un mtodo


rpido para la extraccin de lpidos de tejidos y productos alimenticios que contienen una
cantidad significativa de agua. El mtodo se basa en la homogenizacin de la muestra con
cloroformo, metanol y agua en proporciones tales que se forme una sola fase miscible con el
agua de la muestra. Al aadir alcuotas de cloroformo y agua se logra la separacin de fases.
El material lipdico se encuentra en la fase no acuosa, mientras que el material no lipdico se
encuentra en la fase acuosa. Los lpidos se pueden extraer de dos gramos de muestra seca
hasta veinte gramos de muestra hmeda .El contenido de agua de la muestra se ajusta a
diecisis mililitros para conservar la proporcin de cloroformo, metanol y agua la cual es
esencial si se pretende una separacin de fases y una extraccin cuantitativa de lpidos. La
ventaja de este procedimiento es que las etapas de filtrado y lavado son eliminadas. Sin
embargo no es un mtodo muy cuantitativo y tiene un elevado margen de error para muestras
secas de cereales.

Mtodo de Rse-Gottlieb.

De acuerdo a este mtodo, la separacin de la grasa es lograda por amoniaco y etanol con un
posterior efecto de deshidratacin sobre los fosfolpidos. La grasa es disuelta en ter recin
destilado y se aade algo de petrleo de tal suerte que se separen algunos compuestos no
lipdicos que se puedan encontrar en la fase etrea. Esta mezcla es completamente inmiscible en
agua de manera que mediante una extraccin adecuada es simple dejar la grasa en la fase
etrea y el residuo graso es pesado. Este mtodo es particular para leche fresca que no
contiene cidos grasos libres, los cuales en disolucin alcalina forman sales de amonio y esto es
insoluble en ter. Esta es la razn por la cual esto no se aplica a quesos, los cuales si tienen
cidos grasos libres.

Mtodo de Gerber.

ste, as como los dems mtodos volumtricos presentan un carcter un tanto cuanto emprico ya
que varios factores afectan la gravedad especfica de la grasa separada, variaciones propias
de la grasa, cidos grasos presentes, solubilidad de la grasa en los disolventes, etc. Con estos
mtodos volumtricos la muestra se sita en un butirmetro y se descompone utilizando cidos o
lcalis de manera que la grasa es liberada, esta se separa por mtodos mecnicos (centrifuga)
y se colecta en el cuello calibrado.

Mtodo de Mojonnier

La grasa es extrada con una mezcla de ter etlico y ter de petrleo en un matraz de
Mojonnier, la grasa extrada se pone a peso constante y es expresada en porcentaje de grasa
por peso. La prueba de Mojonnier es un ejemplo de extraccin discontinua con disolvente. Esta
extraccin no requiere remover previamente la humedad de la muestra.

2. Diferencia entre los mtodos.

Mtodo de Soxhlet

La determinacin de grasa, o extracto etreo por el mtodo de Soxhlet, nos permite estimar el
tiempo de almacenamiento de un producto alimenticio con base en el contenido de grasa, ya
que un alimento que contenga una alta cantidad, sufre el proceso de oxidacin o acidez.

Mtodo de Goldfish

El contenido de grasa se cuantifica por diferencia de peso entre la muestra o la grasa


removida.
Mtodo por lotes.

La extraccin se realiza en fro para evitar el dao del material lipdico y por lotes para
incrementar la eficiencia.

Mtodo de Bligh-Dyer

El contenido de agua de la muestra se ajusta a diecisis mililitros para conservar la proporcin


de cloroformo, metanol y agua la cual es esencial si se pretende una separacin de fases y una
extraccin cuantitativa de lpidos. La ventaja de este procedimiento es que las etapas de
filtrado y lavado son eliminadas. Sin embargo no es un mtodo muy cuantitativo y tiene un
elevado margen de error para muestras secas de cereales.
Mtodo de Rse-Gottlieb.

Este mtodo es particular para leche fresca que no contiene cidos grasos libres, los cuales en
disolucin alcalina forman sales de amonio y esto es insoluble en ter. Esta es la razn por la
cual esto no se aplica a quesos, los cuales si tienen cidos grasos libres.

Mtodo de Gerber.

Con estos mtodos volumtricos la muestra se sita en un butirmetro y se descompone


utilizando cidos o lcalis de manera que la grasa es liberada, esta se separa por mtodos
mecnicos (centrifuga) y se colecta en el cuello calibrado.

3. Ventajas y desventajas de los mtodos.


Mtodo Limitaciones Ventajas y aplicaciones
Extraccin con un solvente
Continuo (BUTT) Solventes inflamables Debe Semillas oleaginosas, cubos de caldo
trabajarse sobre muestra saborizantes.
seca o de muy baja Algunas sopas deshidratadas.
humedad, menos de 8%.
Discontinuo (SOXHLET) Extraccin incompleta, usa Algunos tipos de derivados crneos,
ter etlico, ter de petrleo, alta temperatura, no puede frutas y verduras, algunos productos
alcoholes usarse para estudio de azucarados.
Automtico (FOSS-LET FAT ANALYZER) cidos grasos. No se puede Derivados crneos
solvente Tetracloroetileno. aplicar a alimentos sometidos
a algn tratamiento trmico
ni a leche y derivados
lcteos.
Extraccin con mezcla de solventes
Hidrlisis acida previa a la extraccin No se recomienda ocupar el Mtodo rpido, de amplia aplicacin
con solventes: ter etlico, ter de extracto lipdico en el estudio en diversos tipos de alimentos. Trabaja
petrleo de cidos grasos aunque sobre muestra fresca. Debe aplicarse
algunos autores lo emplean. a todo alimento sometido a algn tipo
No recomendable en de procesamiento o tratamiento
alimentos ricos en azcares, trmico.
productos lcteos.
Hidrlisis alcalina previa a la Equipo especial con tubos y Mtodo de eleccin para leche y
extraccin con solventes: ter etlico, centrifuga adecuada. productos lcteos.
ter de petrleo. Alternativa: usar embudos de
decantacin.
Mtodo de Folch, Bligh y Dyer Cierto costo en solventes. Re- Extraccin en frio, aplicable
Cloroformo-Metanol extraccin para purificacin, prcticamente a todo alimento. El
debe conocerse el % de extracto se puede usar para
humedad Debe conocerse el determinacin de cidos grasos,
% de humedad del alimento esteroles, etc. Son mtodos rpidos.
para ajustarla al 80%.
Mtodos volumtricos
Carbonizacin selectiva con H2SO4 Equipo especial Rpido. Se us mucho para leche y
concentrado derivados lcteos.
Otros mtodos
Dispersin de la 1uz. Milkotester. Equipo especial Rpido. Leche cruda
Near Infrared Reflectance (NIR) Equipo especial de alto Cereales. Leche.
costo.
Requiere calibracin
NMR Equipo especial de alto Semillas oleaginosas. Mtodo muy
costo. Requiere calibracin rpido.
VIII. BIBLIOGRAFA

COLLAZOS, Carlos y otros, 1996. Tabla peridica de los alimentos.

HART F. L.; Anlisis moderno de los alimentos; Acribia. Zaragoza (Espaa), 1991.

PEARSON, D. 1986. Tcnicas de laboratorio en el anlisis de alimentos. Edit.


Acribia-Zaragoza-Espaa.

WINTON A.L. Y WINTON K. LV. 1958 Anlisis de alimentos Hispanoamericanas. 2


edicin.

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