Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
Resumen
La preeclampsia es un trastorno hipertensivo caracterizado por proteinuria que se produce en el tercer trimestre del embarazo y una
de las principales causas de morbi-mortalidad materna y fetal. La ausencia de una prueba bioqumica especfica que permita su
diagnstico precoz ha propiciado la bsqueda de nuevos marcadores. En presencia de preeclampsia se ha descrito un aumento del
nmero de eritroblastos, de origen tanto materno como fetal, en sangre materna. El objetivo de este estudio es comprobar la capacidad
de un anticuerpo no comercial, desarrollado por nuestro grupo de investigacin, para detectar dicho aumento del nmero de
eritroblastos en gestantes con hipertensin inducida por el embarazo, y por tanto, riesgo de desarrollar preeclampsia, y comparar
la utilidad diagnstica del aislamiento de eritroblastos en sangre materna con respecto a las pruebas bioqumicas habituales. El
aislamiento de eritroblastos se realiz mediante separacin celular activada magnticamente (MACS), con un anticuerpo monoclonal
no comercial, 2F6.3, anti-CD71. Se revis la bioqumica solicitada al ingreso y durante el seguimiento de las gestantes, considerando
como signos bioqumicos de la enfermedad el aumento de las concentraciones de aminotransferasas o urato, o la disminucin de las
concentraciones de protena o albmina. El nmero de eritroblastos aislados en el grupo de gestantes diagnosticadas de preeclampsia
fue significativamente mayor. Con una eficacia diagnstica del 75%, el aislamiento de eritroblastos en sangre materna aporta una
mayor utilidad que las pruebas bioqumicas tradicionales para el diagnstico de la preeclampsia.
Figura 1. Diagrama de
caja que representa la Figura 2. Curva ROC que compara la eficacia diagnstica del aislamiento
distribucin del nmero de de eritroblastos en sangre materna y la bioqumica en sangre en el
eritroblastos aislados en diagnstico de preeclampsia.
sangre materna de las
gestantes hipertensas que
desarrollaron preeclamp-
sia, gestantes con hiper- Las gestantes con riesgo de padecer la enfermedad son mujeres
tensin inducida por el
con hipertensin inducida por el embarazo. Sin embargo, no todas las
embarazo que no desarro-
llaron la enfermedad y
gestantes con HTA desarrollan preeclampsia, sino que es necesaria
gestantes sin complicacio- la presencia de un aumento en la concentracin de protenas en orina
nes obsttricas. para que el diagnstico quede totalmente establecido, hecho que
Tabla I. Resultados de Bioqumica y n de eritroblastos En la bioqumica realizada al ingreso, se observ que cuatro de
obtenidos en gestantes diagnosticadas de preeclampsia. (N: las nueve gestantes diagnosticadas de preeclampsia tuvieron alte-
normal; : aumentado; : disminuido) raciones en alguna de las magnitudes que se consideran relevantes
para la valoracin de la enfermedad (AST, ALT y urato), tres de las
Caso ALT/AST Urato Protenas totales/ albmina cuales tambin presentaron valores elevados de eritroblastos en
sangre. Otras cuatro de estas nueve pacientes, que tuvieron
1 N N
2 N N bioqumicas no patolgicas, tambin superaron el umbral de 475
3 N N eritroblastos que hemos establecido en el presente trabajo como
4 N posible valor de corte para valorar el riesgo de preeclampsia,
5 N N revelando la utilidad del mtodo propuesto en comparacin con la
6 N N de las pruebas bioqumicas. Una de las gestantes no tena alteracio-
7 N N nes bioqumicas ni tampoco un nmero considerable de eritroblastos
8 N N N
en sangre materna, dado que se aislaron 135.
9 N
La revisin de las historias clnicas revel que siete de estas
nueve gestantes ya haban tenido un ingreso previo por hipertensin
normalmente no se considera como tal antes de la semana 20 del inducida por el embarazo con una edad gestacional temprana y
embarazo. En este estudio participaron 25 gestantes hipertensas, de haban sido dadas de alta con una bioqumica en sangre sin
las cuales 9 fueron diagnosticadas de preeclampsia. Se compar el alteraciones, teniendo un segundo reingreso a las pocas semanas.
nmero de eritroblastos aislados en estas gestantes respecto a un La bioqumica en sangre de los anteriores ingresos no haba sido
grupo control constituido por gestantes sin complicaciones obsttri- tampoco suficientemente sensible y fue necesaria una segunda
cas, de similar edad gestacional. Los resultados revelan un aumento hospitalizacin en la que la existencia de un aumento en la
del nmero de eritroblastos en las pacientes hipertensas respecto al concentracin de protenas en orina determin el diagnstico. Cabe
grupo control y, lo que es ms importante, un aumento del nmero destacar que una de estas siete pacientes no fue diagnosticada hasta
de eritroblastos en las gestantes que posteriormente fueron diagnos- el tercer ingreso, habiendo sido dada de alta en el segundo ingreso
ticadas de preeclampsia respecto a las que no desarrollaron la con una elevacin del urato (6,7 mg/dL) como nica alteracin
enfermedad. Estos resultados concuerdan con los publicados por bioqumica, momento en el que se realiz el aislamiento de
otros autores en los que se describe un aumento del nmero de eritroblastos obteniendo una cifra de 2206, lo que podra haber sido
eritroblastos en gestantes con preeclampsia (15,16). de utilidad de haber sido considerado como factor adicional de
Aunque se desconoce la etiologa de la enfermedad, una de las riesgo de preeclampsia.
causas probables es la presencia de un defecto en la placentacin, Al considerar la bioqumica de las gestantes con HTA que no
que se producira al inicio del embarazo. La alteracin en el trfico desarrollaron la enfermedad, una de las 16 pacientes present
celular, por tanto, podra detectarse antes de las manifestaciones una elevacin de AST ya en el momento del ingreso. En cuatro
clnicas de la enfermedad. Se ha descrito que el aumento del de las 10 pacientes en que se determinaron adicionalmente
nmero de eritroblastos en sangre materna se podra detectar a protenas totales y albmina se observaron concentraciones
partir de la 20 semana de gestacin. En este trabajo, la edad disminuidas de ambas magnitudes sin ninguna asociacin con la
gestacional de las embarazadas con HTA est comprendida entre preeclampsia.
las semanas 23 y 39 de gestacin. Se ha comprobado la existencia Los resultados obtenidos para la bioqumica en sangre no hacen
de un aumento del nmero de eritroblastos en las gestantes ms que confirmar que no existe una prueba lo suficientemente
diagnosticadas de preeclampsia, pero para averiguar si ese aumen-
to se puede utilizar como marcador pronstico de la enfermedad
sera necesario realizar un estudio con edades gestacionales ms Tabla II. Bioqumica en sangre en gestantes con hipertensin
tempranas. En un trabajo publicado por Holzgreve et al (24), en el arterial inducida por el embarazo que no desarrollaron
que participaron 100 embarazadas con una edad gestacional en preeclampsia.
torno a las 20 semanas gestacionales, se confirma ese aumento del
nmero de eritroblastos en las gestantes que posteriormente desa- Caso ALT/AST Urato Protenas totales/Albmina
rrollaron preeclampsia. 1 N N
En una segunda fase del presente estudio, se compar la eficacia 2 N N N
diagnstica del aislamiento de eritroblastos de sangre materna 3 N N
4 N N
mediante nuestro anticuerpo con respecto a las pruebas bioqumicas
5 N N
que se solicitan habitualmente ante una sospecha clnica de 6 N N
preeclampsia. En la revisin de la historia clnica de las pacientes 7 N N
se consider la evolucin de estas pruebas durante el tiempo de 8 N N
permanencia de las gestantes en el hospital, estableciendo como 9 N N N
marcadores bioqumicos de preeclampsia la elevacin de las 10 N N N
transaminasas (ALT y AST) o del urato. Estas tres magnitudes son 11 N N
12 N N N
de utilidad en la valoracin obsttrica a la hora de decidir, junto con 13 N N
los datos clnicos, si el riesgo es suficiente como para programar un 14 N N N
parto electivo. Tambin se registr, como dato adicional, la concen- 15 N N N
tracin de las protenas totales y la albmina en aquellos casos en 16 N N N
que haban sido solicitadas estas determinaciones. N: normal; : aumentado; : disminuido
sensible y especfica que permita realizar un diagnstico precoz de 13. Bischoff FZ, Sinacori MK, Dang DD, Marquez-Do D, Horne C, Lewis DE,
la enfermedad. et al. Cell-free fetal DNA and intact fetal cells in maternal blood circulation:
Sin embargo, a la vista de los resultados, el aislamiento de implications for first and second trimester non-invasive prenatal diagnosis.
14. Holzgreve W, Ghezzi F, Di Naro E, Maymon E, Gnshirt D, Hanh S.
eritroblastos de sangre materna s podra ofrecer una ayuda al Disturbed fetomaternal cell traffic in preeclampsia Obstet Gynecol 1998;
diagnstico, y dado que nuestro anticuerpo 2F6.3 ha demostrado 91:669-71.
aislar una cantidad de eritroblastos similar o mayor que el anticuer- 15. Al-Muti R, Hambley H, Albaiges G, Lees C, Nicolaides KH. Increased fetal
po comercial ms frecuentemente empleado en la bibliografa con erytrhoblasts in women who subsequently develop pre-eclampsia. Hum
el mismo fin, estos resultados nos animan a considerar su utilidad Reprod 2000; 15:1624-8.
como prueba complementaria en casos de sospecha de preeclampsia. 16. Jansen MW, Korver-Hakkennes K, van Llenen D, Visser W, int Veld PA,
de Groot CJ, et al. Significantly higher number of fetal cells in the maternal
circulation of women with pre-eclampsia. Prenat Diagn 2001; 21:1022-6.
Agradecimientos 17. Ness RB, Roberts JM. Heterogeneous causes constituting the single
Este proyecto ha sido parcialmente financiado por la red europea The Special syndrome of preeclampsia: a hypotesis and its implications. Am J Obstet
Non-Invasive Advances in Fetal and Neonatal Evaluation Network (SAFE) Gynecol 1996; 175:1365-70.
y por la fundacin Cajastur. 18. Redman CW, Sargent IL. The pathogenesis of preeclampsia. Gynecol
Agradecemos su colaboracin a todas las gestantes que han participado en el Obstet Frtil 2001; 29:518-22.
estudio. 19. lvarez FV, Olander J, Crimmins D, Prieto B, Alonso R, Porter S, et al.
Development, characterization and use of monoclonal antibodies made to
antigens expressed on the surface of fetal nucleated red blood cells. Clin
Chem 1999; 45:1614-20.
20. Prieto B, Alonso R, Paz A, Cndenas M, Venta R, Ladenson JH, et al.
BIBLIOGRAFA Optimizaron of nucleated red blood cell (NRBC) recovery form maternal
blood collected using both layers of a double density gradient. Prenat Diagn
1. Roberts JM, Redman CWG. Pre-eclampsia : more than pregnancy-induced 2001; 21:187-93.
hypertension. Lancet 1993 ;341:1447-51. 21. Prieto B, Cndenas M, Ladenson JH, lvarez FV. Comparison of different
2. Dekker GA, Sibai BM. Early detection of preeclampsia. Am J Obstet CD71 monoclonal antibodies for enrichment of fetal cells from maternal
Gynecol 1991; 165:160-72. blood. Clin Chem Lab Med 2002; 40:126-31.
3. Sociedad Espaola de Ginecologa y Obstetricia. Protocolos asistenciales. 22. Fernndez A, Prieto B, Escudero A, Ladenson JH, lvarez FV. A monoclonal
Trastornos hipertensivos del embarazo; 1993. antibody with potencial for aiding non-invasive prenatal diagnosis: utility
4. Schmorl G. Pathologisch-anatomische Untersuchungen ueber in screening of prenant women at risk of preeclampsia. J Histochem
Publereklampsie. Leizpig: Vogel, 1893. Cytochem 2005; 53:345-50.
5. Chueh J, Golbus MS. The search for fetal cells in the maternal circulation. 23. Miltenyi S, Muller W, Weichel W, Radbruch A. High gradient magnetic
J Perinat Med 1991; 19:411-20. cell separation with MACS. Cytometry. 1990;11:231-8
6. Holzgreve W, Garritsen HSP, Ganshirt-Ahlert D. Fetal cells in the maternal 24. Holzgreve W, Li JJ, Steinborn A, Kulz T, Sohn C, Hodel M, et al. Elevation
circulation. J Reprod Med 1992; 37:410-8. in erythroblast count in maternal blood before the onset of preeclampsia.
7. Bianchi DW. Fetal cells in the maternal circulation: feasibility for prenatal Am J Obstet Gynecol 2001; 184:165-8.
diagnosis. Br J Haematol 1999; 105:574-83.
8. Pertl B, Bianchi DW. First trimester prenatal diagnosis: fetal cells in
maternal circulation. Seminars in Perinatol 1999; 23:393-402.
9. Pearson HA. Life-span of the fetal red blood cell. J Pediatr 1967;70:166-71. Correspondencia
10. Bianchi DW, Lo YMD. Fetomaternal cellular and plasma DNA trafficking: Francisco V. lvarez Menndez
the yin and the yang. Ann NYAcad Sci 2001; 945:119-31. Servicio de Bioqumica
11. Lo YMD. Non-invasive prenatal diagnosis using fetal cells in maternal Hospital Central de Asturias
blood. J Clin Pathol 1994; 47:1060-5. Celestino Villamil s/n
12. Holzgreve W, Hanh S. Prenatal diagnosis using fetal cells and free DNA in 33006 Oviedo (Asturias)
maternal blood. Clin Perinatol 2001; 28:353-65. falvarez@arrakis.es