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CALIBRACIN DEL MICROSCOPIO PTICO

Introduccin.
Cuando se realiza una observacin en un microscopio ptico, se puede
conocer el aumento al cual se est trabajando (aumento del objetivo x
aumento del ocular), que es el aumento del sistema ptico del microscopio.
Pero en muchas ocasiones es deseable determinar las dimensiones del objeto
de estudio y es necesario calibrar el microscopio. Para ello es necesario un
ocular micromtrico, que posee grabado en su interior una reglilla con
unidades arbitrarias y un objeto micromtrico, que es un portaobjetos
grabado con una reglilla de dimensiones conocidas. Al observar a travs de
un microscopio con estos dos aditamentos, se sobreponen las reglillas (ocular
vs objeto) y se puede estimar la longitud de las marcas de la reglilla del
ocular.

Objetivo
El alumno aprender a calibrar un microscopio ptico

Material
Microscopio de campo claro
Ocular milimtrico
Objeto milimtrico
Preparacin permanente
Papel seda
Aceite de inmersin

Mtodo.
1- Limpiar cuidadosamente el objeto y ocular milimtricos con el papel seda

2- Enfocar la preparacin permanente y realizar una correcta iluminacin con


el objetivo de menor aumento.
3- Observe las indicaciones del objeto milimtrico; determin la dimensin
de la reglilla, el nmero de divisiones que posee, y por ello la longitud de
cada divisin.

4-Sustituir la preparacin permanente con el objeto milimtrico, centrarlo y


enfocarlo.

5- Sustituir uno de los oculares por el ocular milimtrico, hacer coincidir el


inicio de la reglilla del ocular milimtrico con el inicio de la reglilla del objeto
milimtrico.

6- Observe las marcas que coinciden entre ambas reglillas. Existen otras
marcas que coinciden?, si es as, se tomar en cuenta para los clculos la de
mayor dimensin (longitud).

7- Determinar el nmero de divisiones de la reglilla del objeto milimtrico


que coincide con la divisin del ocular milimtrico. Calcule la dimensin del
total de divisiones de la reglilla del objeto milimtrico usado, por cada
divisin del ocular milimtrico.

8- Se puede usar la siguiente formula:

C= b/a donde C= factor de calibracin; b= es el nmero de divisiones


entre las marcas extremas del objeto milimtrico; a= es el nmero de
divisiones entre las marcas extremas del ocular milimtrico. Por ello, el factor
de calibracin es un factor que al ser multiplicado por las dimensiones de la
reglilla del objeto, nos dar la dimensin de la cada divisin del ocular
milimtrico. por ejemplo: si la reglilla del objeto milimtrico es de 1 mm, y
esta dividida en 10, cada dimensin es de entonces de 0.1mm; si al hacer los
pasos 1 a 8 el factor de calibracin es de 1.20, esto implica que cada divisin
o marca de la reglilla del ocular ser de 0.12 mm.

9- Realice el procedimiento 1 a 8 para cada objetivo del microscopio; ya que


este clculo no es necesario hacerlo cada vez, siempre y cuando se use el
mismo microscopio (mismos objetivos, oculares y distancia del tubo del
microscopio) es conveniente guardar los datos de calibracin para usos
futuros.

Referencias
Biologa Celular: Manual de Prcticas 2. Laboratiorio de Citologa. Facultad de
Ciencias. Universidad Nacional Autnoma de Mxico. 1985. 1985. pp: 26-32