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Mac Conkey Agar.

Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fcil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos.
Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clnicas, de agua y alimentos. Todas las especies de la
familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.

Fundamento
En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato
de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo
de gran parte de la flora Gram positiva.
Por fermentacin de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH
(rojo neutro), la absorcin en las colonias, y la precipitacin de las sales biliares.
Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras.

Frmula (en gramos por litro) Instrucciones


Peptona 17.0
Pluripeptona 3.0
Lactosa 10.0 Suspender 50 g del polvo por litro de agua destilada.
Reposar 5 minutos y mezclar hasta uniformar.
Mezcla de sales biliares 1.5
Calentar suavemente y hervir 1 a 2 minutos hasta
Cloruro de sodio 5.0
disolver. Esterilizar en autoclave a 121C durante 15
Agar 13.5 minutos.
Rojo neutro 0.03
Cristal violeta 0.001
pH final: 7.1 0.2

Siembra
- Sembrar en superficie.
- Utilizando la tcnica de Pour Plate: sembrar 1 ml de muestra y agregar aproximadamente 15 ml de medio de cultivo
fundido y enfriado a 45-50 C.

Incubacin
Durante 18-48 horas, a 35-37 C, en atmsfera aerbica

Resultados

Microorganismos Colonias
Escherichia coli ATCC 25922 Rojas con halo turbio
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Rosadas mucosas
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Incoloras, transparentes
Shigella flexneri ATCC 12022 Incoloras, transparentes
Proteus mirabilis ATCC 43071 Incoloras, transparentes
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Diminutas, incoloras, opacas

Caractersticas del medio


Medio preparado: rojo prpura

Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.

Presentacin
x 100g :Cdigo: B02-114-05 x 500g :Cdigo: B02-114-06
E.M.B. Agar.
Este medio (tambin denominado E.A.M.) es utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos Gram negativos de rpido
desarrollo y escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas las especies de la familia Enterobacteriaceae.

Fundamento
Este medio combina las frmulas de Holt-Harris y Teague con la de Levine, para obtener un mejor rendimiento en el
aislamiento selectivo de enterobacterias y otras especies de bacilos Gram negativos. La diferenciacin entre organismos
capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, est dada por los indicadores eosina y
azul de metileno; stos ejercen un efecto inhibitorio sobre muchas bacterias Gram positivas. Muchas cepas de Escherichia
coli y Citrobacter spp. presentan un caracterstico brillo metlico. Las cepas que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con
periferia azulada o rosada, mientras que las que no lo hacen son incoloras. Este medio permite el crecimiento de Candida
spp. como colonias rosadas y puntiformes; la siembra en profundidad permite el desarrollo de clamidosporas en C. albicans.
Enterococcus spp. crece en este medio como colonias puntiformes y transparentes, mientras que Acinetobacter spp. y otras
bacterias oxidativas pueden dar colonias de color azul lavanda; esto puede ocurrir aunque las cepas no sean capaces de
acidificar a partir de lactosa al 0.5% y ello se debe a la incorporacin de azul de metileno a sus membranas. En este medio
se obtiene adems, un buen desarrollo de especies de Salmonella y Shigella.

Frmula (en gramos por litro) Instrucciones


Peptona 10.0
Lactosa 5.0 Suspender 36 g del polvo en un litro de agua
Sacarosa 5.0 destilada. Reposar 5 minutos; mezclar,
calentando a ebullicin durante 1 o 2 minutos
Fosfato dipotsico 2.0
hasta su disolucin. Esterilizar en autoclave a no
Agar 13.5 ms de 121C durante 15 minutos. Enfriar a
Eosina 0.4 45C y distribuir agitando suavemente.
Azul de metileno 0.065
pH final: 7.2 0.2

Siembra
En superficie, por estriado a partir de un inculo poco denso, para obtener colonias aisladas.
En profundidad, para favorecer el desarrollo de clamidosporas.

Incubacin
De 24 a 48 horas a 35-37 C, en aerobiosis.

Resultados

Microorganismos Tipo de Colonia


Escherichia coli ATCC 25922 Verdosas con brillo metlico y centro negro azulado
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Mucosas, rosa prpura, confluentes
Proteus mirabilis ATCC 43071 Incoloras
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Incoloras, pequeas, puntiformes
Shigella flexneri ATCC 12022 Incoloras
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Incoloras

Caractersticas del medio:


Placas preparadas: color prpura.

La esterilizacin del medio de cultivo reduce el azul de metileno al color naranja. El color prpura se restaura por agitacin.
La presencia de un precipitado en el medio esterilizado es normal y no debe ser removido, ya que es parte esencial del
mismo.

Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.

Presentacin
x 100g :Cdigo: B02-101-05 x 500g :Cdigo: B02-101-06 6 x 50 ml: B04-101-84
Salmonella Shigella Agar.
Medio de cultivo utilizado para el aislamiento de Salmonella spp. y de algunas especies de Shigella spp. a partir de heces,
alimentos y otros materiales en los cuales se sospeche su presencia.

Fundamento
Es un medio de cultivo selectivo y diferencial.
La selectividad, esta dada por la sales biliares y el verde brillante, que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas, de
la mayora de los coliformes y el desarrollo invasor del Proteus spp.
Es diferencial debido a la fermentacin de la lactosa, y a la formacin de cido sulfhdrico a partir del tiosulfato de sodio.
Los pocos microorganismos fermentadores de lactosa capaces de desarrollar, acidifican el medio haciendo virar al rojo el
indicador de pH, obtenindose colonias rosadas o rojas sobre un fondo rojizo.
Salmonella, Shigella y otros microorganismos no fermentadores de lactosa, crecen bien en el medio de cultivo, y producen
colonias transparentes.
La produccin de cido sulfhdrico se evidencia como colonias con centro negro debido a la formacin de sulfuro de hierro.
Para aumentar la selectividad, se recomienda incubar previamente la muestra en Selenito caldo (B02-120-05).

Frmula (en gramos por litro) Instrucciones


Pluripeptona 5.0
Extracto de carne 5.0
Lactosa 10.0
Suspender 60 g del polvo por litro de agua destilada.
Mezcla de sales biliares 8.5 Reposar 5 minutos y mezclar hasta homogeneizar.
Citrato de sodio 8.5 Calentar a ebullicin durante 2 o 3 minutos. NO
Tiosulfato de sodio 8.5 ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE. Enfriar a 45-50C y
Citrato frrico 1.0 distribuir unos 20 ml por placa. Secar la superficie
del medio unos minutos en la estufa.
Agar 13.5
Verde brillante 0.00033
Rojo neutro 0.025
pH final: 7.0 0.2

Siembra
Sembrar por estriado la superficie del medio de cultivo.
Recomendaciones, se aconseja sembrar en forma conjunta una placa de agar E.M.B. (B02-101-05) o de agar Mac Conkey
(B02-114-05).

Incubacin
Durante24-48 horas a 35-37 C, en aerobiosis.

Resultados

Microorganismos Colonias
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Transparentes, centro negro
Shigella flexneri Incoloras
Shigella sonnei Incoloras
Proteus mirabilis ATCC 43071 Transparentes, centro negro
Escherichia coli ATCC 25922 Rosadas a rojas
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Rosadas cremosas y mucosas
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Incoloras, de muy escaso crecimiento

Caractersticas del medio


Medio preparado: rojo naranja.

Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 C.

Presentacin
x 100g :Cdigo: B02-138-05 X 500g :Cdigo: B02-138-06
Agar XLD

http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_Agar_XLD.pdf
Verde Brillante Agar.

Medio de enriquecimiento altamente selectivo para el aislamiento de Salmonella spp., excepto S. typhi y S.
paratyphi, a partir de muestras clnicas, alimentos, y otros materiales de importancia sanitaria. No se recomienda para el
aislamiento de Shigella spp.
Es de un valor excepcional cuando se investiga un gran nmero de muestras de heces o alimentos, por su alta capacidad de
diferenciacin de las colonias sospechosas.

Fundamento
En el medio de cultivo, la pluripeptona y el extracto de levadura, constituyen la fuente de nitrgeno, vitaminas y minerales.
La lactosa y la sacarosa son los hidratos de carbono fermentables, el rojo fenol es el indicador de pH, que vira al amarillo
cuando hay produccin de cido a partir de la fermentacin de azcares, el cloruro de sodio mantiene el balance osmtico, y
el verde brillante acta como agente selectivo.

Frmula (en gramos por litro) Instrucciones


Pluripeptona 10.0
Extracto de levadura 3.0
Cloruro de sodio 5.0 Suspender 58 g de polvo por litro de agua destilada.
Reposar 5 minutos y mezclar calentando a ebullicin
Lactosa 10.0
durante 2 o 3 minutos. Distribuir y esterilizar en
Sacarosa 10.0
autoclave a 118-121C durante 15 minutos. Secar la
Rojo fenol 0.08 superficie del medio por unos minutos en la estufa.
Verde brillante 0.0125
Agar 20.0
pH final: 6.9 0.2

Siembra
Sembrar en superficie por estriado a partir de una dilucin del material a investigar o de un cultivo previo en un medio de
enriquecimiento selectivo, como Selenito caldo (B02-120-05) o Tetrationato caldo (B02-145-05).
Para el tratamiento de materia fecal se recomienda hacer cultivo primario en medios menos selectivos, como Salmonella
Shigella agar (B02-138-05), o Mac Conkey agar (B02-114-05).

Incubacin
Incubar 24 horas a 35-37C.

Resultados

Microorganismos Caractersticas de las colonias


Escherichia coli ATCC 25922 Amarillo-verdosas sobre fondo amarillento
Salmonella enteritidis ATCC 13076 Rosas, blancas o transparentes sobre fondo rojo
Salmonella typhi Crecimiento inhibido
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Rosas, blancas o transparentes sobre fondo rojo
Shigella flexneri. ATCC 12022 Crecimiento inhibido
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Crecimiento inhibido

Caractersticas del medio


Medio preparado: verde.

Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.

Presentacin
x 100g :Cdigo: B02-124-05 x 500g :Cdigo: B02-124-06
Agar Sulfito de Bismuto

http://www.condalab.com/uploads/media/1011__AGAR_BISMUTO_SULFITO_REv_0_Abril_2010_
01.pdf

http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/sulfitobismuto.pdf
TCBS Medio
MEDIO SELECTIVO para el aislamiento y cultivo de Vibrio cholerae, Vibrio parahemolyticus y otras especies de
Vibrio a partir de heces, agua y alimentos contaminados.
Tambin es conocido como Agar Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa, o como Agar Selectivo para Vibrios.

Fundamento
En el medio de cultivo, el extracto de levadura, la peptona de carne y la triptena aportan nutrientes para el desarrollo
bacteriano. Es este, el medio selectivo ms adecuado para el aislamiento de las especies de Vibrio, e inhibidor para la
mayora de las enterobacterias. Esta inhibicin se basa en las altas concentraciones de tiosulfato y citrato, la presencia de
bilis y un pH fuertemente alcalino. La degradacin de la sacarosa es variable entre las especies de Vibrio y las colonias son
verdes para las cepas que no la utilizan y amarillas para aquellas que producen cido a partir de este azcar. Esto es debido
al viraje del color de los indicadores de pH azul de timol y azul de bromotimol, del color azul al amarillo en medio cido. Es
importante tener en cuenta, que la proporcin de sacarosa en el medio est equilibrada de forma tal que no inhiba el
crecimiento bacteriano por exceso de cido.
El cloruro de sodio favorece el crecimiento de microorganismos. El tiosulfato de sodio aporta azufre y junto con el citrato
frrico permiten la deteccin de produccin de cido sulfhdrico.
Aumentando la concentracin de cloruro de sodio y disminuyendo la temperatura de incubacin, pueden aislarse especies
marinas sin importancia sanitaria.

Frmula (en gramos por litro) Instrucciones


Extracto de levadura 5.0
Peptona de carne 5.0
Triptena 5.0
Citrato de sodio 10.0
Tiosulfato de sodio 10.0 Suspender 89 g del polvo en un litro de agua
Bilis de buey 8.0 destilada. Calentar hasta ebullicin y hervir de 1 a 2
Sacarosa 20.0 minutos. NO AUTOCLAVAR. Distribuir en placas de
Cloruro de sodio 10.0 Petri estriles.
Citrato frrico 1.0
Azul de bromotimol 0.04
Azul de timol 0.04
Agar 15.0
pH final: 8.6 0.2

Siembra

1-Materiales clnicos:
a-materia fecal: suspender 1 gramo de heces o el contenido del hisopo en 10 ml de Agua Peptonada Alcalina (B02-159-05,
B02-159-06) e incubar de 6 a 8 horas a 35-37C, en aerobiosis.
b-materiales provenientes de infecciones extraintestinales: no es necesario realizar enriquecimiento previo en Agua
Peptonada Alcalina.

2-Agua: Filtrar de 1 a 10 litros (el volumen deseado) de agua con membrana de 0.22.Colocar la membrana en un
recipiente conteniendo Agua Peptonada Alcalina e incubar de 6 a 8 horas a 35-37C, en aerobiosis.

3-Alimentos: Licuar 25 g de la muestra con 225 ml de Agua Peptonada Alcalina (B02-159-05, B02-159-06) e incubar de de
6 a 8 horas a 35-37C, en aerobiosis.

En todos los casos sembrar una alcuota del caldo de enriquecimiento en la superficie de una placa de TCBS, por
estriado, para el aislamiento de colonias.

Incubacin
En aerobiosis, durante 18-24 horas a 35-37C.

Resultados

Microorganismo Crecimiento Caractersticas de las colonias


Amarillas de 2-3 mm de dimetro, de
Vibrio cholerae Bueno
borde traslcido
V. parahaemolyticus Bueno Centro verde azulado, borde traslcido
V. alginolyticus Bueno Amarillas grandes
Aeromonas spp. Inhibido --
E. coli Inhibido --
Caractersticas del medio
Medio preparado: verde azulado.

Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.

Presentacin
x 100g :Cdigo: B02-167-05 x 500g :Cdigo: B02-167-06
GC Agar Base.
Medio de cultivo empleado como medio basal para la preparacin del medio Thayer-Martin original o modificado, y como
agar chocolate con o sin enriquecimiento.
Es til para la recuperacin de N. gonorrhoeae, N. meningitidis y otros microorganismos exigentes en sus requerimientos
culturales.

Fundamento
Es un medio altamente nutritivo. La pluripeptona (es una mezcla en partes iguales de peptona de carne y peptona de
casena) es la fuente de nutrientes para el desarrollo de microorganismos, el almidn soluble absorbe sustancias txicas
indeseables para el desarrollo de ciertos microorganismos, las sales de fosfato forman un sistema buffer y el cloruro de
sodio mantiene el balance osmtico.
Este medio de cultivo, puede ser suplementado con otros nutrientes o con antimicrobianos, logrndose un medio mas
enriquecido o selectivo segn el aditivo.
El agar base GC, en combinacin con hemoglobina y el suplemento estril de enriquecimiento Britalex (B03-600-21), se usa
para el aislamiento de microorganismos exigentes.
Si se desea un medio selectivo para N. gonorrhoeae, se puede adems aadir mezcla antimicrobiana VCNT (B03-605-21)
para inhibir el desarrollo de microorganismos Gram positivos y Gram negativos, excepto N. gonorrhoeae.

Frmula (en gramos por litro)


Pluripeptona 15.0
Almidn soluble 1.0
Fosfato dipotsico 4.0
Fosfato monopotsico 1.0
Cloruro de sodio 5.0
Agar 15.0
pH final:7.2 0.2

Instrucciones
Preparar agar base GC doble concentracin, suspendiendo 8,2 g del polvo en 100 ml de agua destilada usando un
erlenmeyer de 500 ml. (Si a partir del medio deshidratado se desea preparar Thayer Medio modificado, es necesario agregar
1 g de agar y 0,3 g de glucosa.) Mezclar suavemente. Calentar con agitacin peridica y dejar hervir durante un minuto
para asegurar la disolucin completa del medio. Suspender 2 g de hemoglobina en polvo en 100 ml de agua destilada de la
siguiente manera: mezclar 2 g de hemoglobina con 2 o 3 ml de agua destilada caliente hasta la formacin de una pasta
uniforme. Agregar gradualmente y agitando agua destilada hasta completar los 100 ml, quedando as una solucin
homognea. Esterilizar el Agar Base GC y la hemoglobina al 2% por autoclave 15 minutos a 121C. Enfriar las soluciones
estriles a 50C. Luego, segn el medio de cultivo que se desee preparar, proceder de la siguiente manera:

-Para preparar el medio de cultivo Thayer Martin: reconstituir el Britalex y el V.C.N.T. agregando 2.1 ml de solvente
estril a cada frasco ampolla. Adicionar aspticamente la solucin de hemoglobina, 1 ampolla de V.C.N.T. y otra de Britalex
al medio base GC doble concentracin; mezclar suavemente y distribuir en placas de Petri u otros recipientes estriles.

-Para preparar agar chocolate: agregar al medio base GC doble concentracin,el suplemento Britalex reconstituido con
2.1 ml de solvente estril y la solucin de hemoglobina, mezclar suavemente y distribuir en placas de Petri u otros
recipientes estriles.

Siembra
Directa, sobre la superficie del medio de cultivo.

Incubacin
El tiempo, la temperatura, y la atmsfera de incubacin, depender del microorganismo que se quiera aislar.

Resultados
De acuerdo al protocolo del CDC el control de calidad del medio Thayer Martin para productores de medios de cultivo el
ensayo que efecta Laboratorios Britania, es el siguiente:

a-Cultivos para demostrar inhibicin del crecimiento por los antimicrobianos presentes en el medio:
GC Agar Base suplementado con Hemoglobina 2%, VCNT y Britalex:

Microorganismos Crecimiento
N. gonorrhoeae ATCC 49226 Bueno-excelente
N. meningitidis Bueno-excelente
P. mirabilis ATCC 43071 Inhibicin total o parcial
E. coli ATCC 25922 Inhibicin total o parcial
S. epidermidis ATCC 14990 Inhibicin total o parcial
N. sicca Inhibicin total o parcial
C. albicans ATCC 10231 Inhibicin parcial

b-Cultivos para demostrar crecimiento:


GC Agar Base suplementado con Hemoglobina 2% y Britalex:

Microorganismos Crecimiento
P. mirabilis ATCC 43071 Bueno-excelente
E. coli ATCC 25922 Bueno-excelente
S. epidermidis ATCC 14990 Bueno-excelente
C. albicans ATCC 10231 Bueno-excelente
N. gonorrhoeae ATCC 49226 Bueno-excelente
N. meningitidis Bueno-excelente
H. influenzae ATCC 49247 Bueno-excelente

Caractersticas del medio


Medio preparado: color chocolate.

Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.

Presentacin
x 100g :Cdigo: B02-157-05 x 500g :Cdigo: B02-157-06
Manitol Salado Agar.

Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y diferenciacin de estafilococos.


Es recomendado para el aislamiento de estafilococos patognicos a partir de muestras clnicas, alimentos, productos
cosmticos y otros materiales de importancia sanitaria.
Tambin, este medio puede utilizarse para el cultivo de especies halfilas de Vibrio, si no se dispone de medios apropiados
(TCBS Medio, Medio Marino, etc.), aunque algunas especies pueden no desarrollar.

Fundamento
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracin salina. Los estafilococos coagulasa positiva
hidrolizan el manitol acidificando el medio; las colonias aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante. Los estafilococos
coagulasa negativos, presentan colonias rodeadas de una zona roja o prpura. Las colonias sospechosas, se repicarn en un
medio sin exceso de cloruro de sodio para efectuarles, posteriormente, la prueba de la coagulasa.
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, constituyen la fuente de carbono, nitrgeno, vitaminas y
minerales, el manitol es el hidrato de carbono fermentable, el cloruro de sodio (que se encuentra en alta concentracin) es
el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora acompaante, y el rojo fenol es el indicador de pH.
Las bacterias que crecen en un medio con alta concentracin de sal y fermentan el manitol, producen cidos, con lo que se
modifica el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo.
Los estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no fermentar el manitol.
Los estafilococos coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de una zona del
mismo color.
Los estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como colonias rojas, rodeadas de una zona del mismo color o
prpura.

Frmula (en gramos por litro) Instrucciones


Extracto de carne 1.0
Pluripeptona 10.0 Suspender 111 g de polvo por litro de agua
destilada. Reposar 5 minutos y mezclar calentando a
d-Manitol 10.0
ebullicin durante 1 o 2 minutos. Distribuir y
Cloruro de sodio 75.0
esterilizar en autoclave a 118-121C durante 15
Agar 15.0 minutos.
Rojo de fenol 0.025
pH final: 7.4 0.2

Siembra
Sembrar en superficie un inculo denso de la muestra.

Incubacin
De rutina: durante 18-24 horas a 35-37 C, en aerobiosis.
La American Public Health Association (A.P.H.A) recomienda la incubacin durante 3 das a 32 C, en aerobiosis.

Resultados

Microorganismos Crecimiento Caractersticas de las colonias


Staphylococcus aureus ATCC 25923 Excelente Amarilla
Staphylococcus epidermidis ATCC 14990 Bueno Roja
Escherichia coli ATCC 25922 Inhibido Inhibido
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Inhibido Inhibido

Caractersticas del medio


Medio preparado: rojo

Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.

Presentacin
x 100g :Cdigo: B02-118-05 x 500g :Cdigo: B02-118-06
Sangre Agar Base
Medio para propsitos generales, para el aislamiento y cultivo de numerosos microorganismos.
Con la adicin de sangre, el medio es til tanto para el aislamiento y cultivo de microorganismos aerobios y anaerobios
nutricionalmente exigentes a partir de una gran variedad de muestras, como para la observacin de reacciones de
hemlisis.
Tambin, este medio de cultivo, puede utilizarse como medio base para preparar el medio agar chocolate.

Fundamento
La infusin de msculo de corazn y la peptona, otorgan al medio un alto valor nutritivo, que permite el crecimiento de una
gran variedad de microorganismos, an de aquellos nutricionalmente exigentes. El cloruro de sodio mantiene el balance
osmtico.
El agregado de sangre al medio de cultivo, en concentracin final de 5-10 %, aporta nutrientes para el crecimiento
bacteriano, y permite detectar hemlisis.

Frmula (en gramos por litro)


Infusin de msculo de corazn 375.0
Peptona 10.0
Cloruro de sodio 5.0
Agar 15.0
pH final: 7.3 0.2

Instrucciones
Suspender 40 g del polvo en un litro de agua destilada. Dejar reposar 5 minutos y mezclar perfectamente hasta obtener una
suspensin homognea. Calentar con agitacin frecuente y hervir 1 minuto. Esterilizar 20 minutos a 121C. Enfriar a 45-
50C agregar sangre desfibrinada al 5%. Homogeneizar y distribuir en placas.

Preparacin de la placa de Agar Sangre: aadir en forma asptica un 5% de sangre estril desfibrinada a temperatura
ambiente, el agar debe estar a 45C.

Preparacin de Agar Chocolate: despus de aadir la sangre y agitando frecuentemente se mantiene el medio de cultivo a
80C por 10 minutos hasta que adquiera un color pardo chocolatado.

Siembra
Por inoculacin directa del material en estudio, sobre la superficie del medio de cultivo.

Incubacin
El tiempo, temperatura y atmsfera de incubacin, dependern del microorganismo que se quiera aislar.

Resultados

Microorganismos Crecimiento Hemlisis


E. coli ATCC 25922 Abundante --
S. aureus ATCC 25923 Abundante Beta
S. pyogenes ATCC 19615 Abundante Beta
S. pneumoniae ATCC 6305 Abundante Alfa
S. pneumoniae ATCC 49619 Abundante Alfa

Limitaciones
-Las reacciones hemolticas de muchos microorganismos son diferentes al usar sangre de caballo respecto a la sangre de
carnero, tal es el caso de algunas cepas de estreptococos grupo D, que producen beta hemlisis en el agar suplementado
con sangre de caballo pero no en agar suplementado con sangre de carnero, y son mal clasificados como Estreptococos
Grupo A al usar sangre de caballo.

Caractersticas del medio


Medio preparado: mbar.
Medio preparado con 5% de sangre de carnero: rojo cereza.

Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.
Presentacin
x 100g :Cdigo: B02-149-05 x 500g :Cdigo: B02-149-06 6 x 50 ml: B04-149-84

AGAR DE DEXTROSA Y PAPA

Descripcin del producto


Medio de cultivo Agar de Dextrosa y Papa es de la marca DIBICO, y es conocido
como PDA por sus siglas en ingles, tiene la infusin de papa como fuente de
almidones y la dextrosa son la base para el crecimiento de hongos y levaduras. El
bajo pH (3.5) evita el crecimiento de las bacterias. Cuando se va a usar para el
recuento de hongos y levaduras, agregar al medio de cultivo una vez esterilizado y
enfriado aproximadamente a 45C, 14 ml de una solucin estril de cido tartrico
al 10% para obtener un pH aproximado de 3.5. Sembrar el medio de cultivo por
estra en la superficie o adicionar la muestra para la tcnica de vaciado en placa.
Incubar hasta 7 das a temperatura ambiente. P
REPARACION AGAR DE DEXTROSA Y PAPA: Rehidratar 39 g del medio en un
litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos. Calentar agitando
frecuentemente hasta el punto de ebullicin durante 1 minuto para disolverlo por
completo. Esterilizar en autoclave a 121C (15 lbs de presin) durante 15 minutos.
Enfriar aproximadamente a 45C. Vaciar de acuerdo a la tcnica a seguir en cajas
de Petri estriles. Cuando se requiera el medio inclinado en tubo, distribuirlo antes
de esterilizar. Si se acidifica el medio, no sobrecalentar y fundir solo una vez, para
evitar la hidrlisis del agar.
Presentacin de 500 gr.
Para cultivo y recuento de hongos y levaduras en productos lcteos, bebidas
embotelladas y alimentos. Como medio preparado (Catlogo 1059-P) para la cuenta de
hongos y levaduras en lquidos.
FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA: Agar 15.0, Dextrosa
20.0, Infusin de papa 4.0 (pH 5.6 0.2).
CONTROL DE ACTIVIDAD MICROORGANISMO: Candida albicansColonias crema,
lisas, Saccharomyces cerevisiaeColonias crema, lisas, Trichophyton
mentagrophytesColonias blancas, reverso blanco a marrn, algodonosas, Aspergillus
nigerColonias de apariencia lanosa de blanco a negro, reverso amarillo.

Papa Glucosado Agar.


Medio de cultivo utilizado para el aislamiento y recuento de hongos y levaduras en muestras clnicas, alimentos, cosmticos
y otros materiales.

Fundamento
Tanto la glucosa presente como la infusin de papa favorecen el desarrollo exuberante de hongos y levaduras, mientras que
el desarrollo bacteriano es inhibido con el agregado de cido tartrico luego de la esterilizacin hasta alcanzar un pH: 3.5
0.2. Una vez agregado el cido no se puede recalentar ya que el agar se hidroliza.

Frmula (en gramos por litro) Instrucciones


Infusin de papa 4.0 Disolver 39 g de polvo en un litro de agua destilada.
Glucosa 20.0 Dejar reposar 5 minutos. Calentar hasta ebullicin
con agitacin continua. Esterilizar a 121C durante
15 minutos. Si se desea ajustar el pH a 3.5 agregar
Agar 15.0 aproximadamente 14 ml de una solucin estril de
cido tartrico al 10 %, cuando el agar se encuentra
entre 45-50 C.
pH final: 5.6 0.2

Siembra
- Tcnica De Pour Plate: sembrar 0.1 o 1 ml y agregar 15 ml del Papa Glucosado Agar fundido y enfriado
a 45-50 C
- En superficie: por estriado

Incubacin
En aerobiosis, a 22-25 C 30-32 C segn el mtodo seguido, durante 5 das o mayor tiempo.

Resultados

Microorganismos Crecimiento
Aspergillus niger Bueno
Candida albicans Bueno
Sacharomyces cerevisiae Bueno

Caractersticas del medio


Medio preparado: mbar claro ligeramente opalescente.

Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.

Presentacin
x 100g :Cdigo: B02-166-05 x 500g :Cdigo: B02-166-06
AGAR DEXTROSA SABOURAUD

Descripcin del producto


Su pH cido de 5.6 favorece el crecimiento de hongos, especialmente dermatofitos
y ayuda en la inhibicin de flora contaminante. Georg y Col., recomiendan agregar
aspticamente cicloheximida, penicilina y estreptomicina antes de usarlo,
inhibiendo de esta forma la flora contaminante.
La adicin de antibiticos de amplio espectro inhibe una amplia gama de bacterias
Gram positivas y Gram negativas.
PREPARACION
Rehidratar 65 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos.
Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullicin durante 1 minuto
para disolverlo por completo. Esterilizar en autoclave a 121C ( 15 lbs de presin)
durante 15 minutos. Enfriar aproximadamente a 45C. Vaciar en cajas de Petri
estriles. Cuando se requiera el medio en tubo de ensayo, distribuir el volumen
requerido antes de esterilizar y posteriormente enfriar en posicin inclinada.
Conservar en refrigeracin de 2 a 8C.
*Presentacin de 500 grs.*Para cultivo y conservacin de hongos patgenos y no
patgenos, particularmente dermatofitos, levaduras y microorganismos acidricos
a partir de diversas muestras. *FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA
DESTILADA: Agar 15.0, Dextrosa 40.0, Peptona especial 10.0, pH 5.6 0.2.
*CONTROL DE ACTIVIDAD POR MICROORGANISMO: Candida albicansBueno,
Trichophyton mentagrophytesBueno, Trichophyton rubrumBueno.

http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_AgarSabouraudD
extrosa.pdf
AGAR MICOSEL.
http://www.bd.com/europe/regulatory/assets/ifu/hb/ce/pa/es-pa-
254417.pdf

http://www.bd.com/europe/regulatory/Assets/IFU/US/L007479%2808%29
%280107%29_ES.pdf