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Documentos

ISSN 0102-0110
Julho, 2010 309

Manual de Curadores de
Germoplasma Vegetal:
Coleta de Germoplasma
Foto: Bruno M. T. Walter

Foto: Bruno M. T. Walter


Foto: Clarissa G. Fontes

Foto: Glocimar P. Silva


ISSN 0102-0110
Julho, 2010

Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria


Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia
Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

Documentos 309

Manual de Curadores de
Germoplasma Vegetal:
Coleta de Germoplasma
Bruno Machado Teles Walter

Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia


Braslia, DF
2010
Exemplares desta publicao podem ser adquiridos na:

Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia


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Supervisor editorial: Lgia Sardinha Fortes
Revisor de texto: Jos Cesamildo Cruz Magalhes
Normalizao bibliogrfica: Lgia Sardinha Fortes
Editorao eletrnica: Jos Cesamildo Cruz Magalhes
Fotos da capa: Bruno M. T. Walter, Clarissa G. Fontes e Glocimar Pereira da Silva

1 edio (on line)

Todos os direitos reservados.


A reproduo no autorizada desta publicao, no todo ou em parte,
constitui violao dos direitos autorais (Lei n 9.610).

Dados Internacionais de Catalogao na Publicao (CIP)


Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia

Walter, Bruno Machado Teles.


Manual de curadores de germoplasma Vegetal: Coleta de germoplasma. / Bruno
Machado Teles Walter. Braslia, DF: Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia,
2010.
15 p. (Documentos / Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia, 309)

Reviso tcnica: Alessandra Pereira Fvero.

1. Recursos Genticos Vegetal Conservao. 2. Germoplasma - coleta. I. Ttulo.


II. Srie.

581.15 - CDD

Embrapa 2010
Autores

Bruno Machado Teles Walter


Ph.D. em Ecologia, pesquisador da Embrapa Recursos Genticos e
Biotecnologia
bwalter@cenargen.embrapa.br
Apresentao

Desde o incio da dcada de 1970, h uma crescente conscientizao mundial sobre a


necessidade de preservao dos recursos genticos, que so essenciais para o
atendimento das demandas de variabilidade gentica dos programas de melhoramento,
principalmente aqueles voltados para alimentao.

No Brasil, esta necessidade especialmente importante, uma vez que a maioria dos
cultivos que compem a base alimentar do pas de origem extica. Observa-se, por
exemplo, que cerca de 95% dos acessos de cereais conservados em colees do Sistema
Nacional de Pesquisa Agropecuria (SNPA) so de espcies exticas. Portanto, a
manuteno e o enriquecimento contnuo da variabilidade gentica dessas colees so
prioritrios e estratgicos, considerando, ainda, as atuais restries internacionais ao
intercmbio de germoplasma.

Na dcada de 1970, a Food and Agriculture Organization (FAO), rgo das Naes Unidas,
estimulou o estabelecimento de uma rede mundial de Centros para a conservao de
recursos genticos situados em regies consideradas de alta variabilidade gentica. Em
1974, o Consultative Group for International Agricultural Research (CGIAR) criou o
International Board for Plant Genetic Resources (IBPGR), hoje transformado no Bioversity
International. No mesmo ano, a Embrapa reconheceu a importncia estratgica dos
recursos genticos com a criao do Centro Nacional de Recursos Genticos (CENARGEN),
que mais recentemente adotou a assinatura-sntese Embrapa Recursos Genticos e
Biotecnologia.

A criao da Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia e a consolidao do SNPA


estabeleceram ambiente propcio para a formatao da Rede Nacional de Recursos
Genticos. A partir de ento, paulatinamente, colees de germoplasma foram
estruturadas em diferentes Unidades Descentralizadas, predominantemente na rea
vegetal.

Em 1993, por intermdio de deliberao da Diretoria Executiva, a Embrapa formalizou,


como ferramenta de gesto das colees, o Sistema de Curadorias de Germoplasma e
definiu os papis e as responsabilidades para os diversos atores envolvidos nesse Sistema,
tais como: curadores de colees de germoplasma, Chefes de Unidades Descentralizadas
que abrigavam as colees e a Superviso de Curadorias. Os projetos em rede foram
definidos como figuras programtica e operacional, possibilitando o custeio de atividades
de coleta, intercmbio, quarentena, caracterizao, avaliao, documentao, conservao
e utilizao de germoplasma, alm da manuteno das colees. De 1993 at a presente
data, muitas colees de germoplasma foram estabelecidas e, atualmente, o Sistema de
Curadorias da Embrapa rene 209 colees, incluindo Bancos Ativos de Germoplasma
Vegetal (BAGs), Ncleos de Conservao Animal, Colees Biolgicas de Micro-
organismos e Colees de Referncia, as quais abrangem espcies nativas e exticas. Nas
demais Instituies do SNPA, estima-se que so mantidos pelo menos outros 243 Bancos
Ativos de Germoplasma Vegetal.

Como duplicata de segurana dos acessos mantidos nos BAGs, a Embrapa Cenargen
abriga a Coleo de Base (COLBASE) de germoplasma vegetal, projetada para conservar
sementes temperatura de -20C por longo perodo de tempo.

Como consequncia desses 30 anos de atividades relacionadas ao manejo dos recursos


genticos, os curadores adquiriram uma bagagem de conhecimentos prticos na rea,
conhecimentos estes que foram, em parte, sistematizados e disponibilizados para a
sociedade por intermdio da presente obra: Manual de Curadores de Germoplasma.

Esperamos que esta publicao em srie torne-se um guia para os curadores de


germoplasma no Brasil e no exterior, e que contribua efetivamente para o aprimoramento
da gesto dos recursos genticos deste pas.

Mauro Carneiro
Chefe Geral
Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia
Sumrio

Importncia e definio 08

Como realizar uma expedio de coleta 09

Como documentar o material e quem identifica as plantas 10

Quanto material deve-se coletar e quantas sementes por planta 12

O que fazer para realizar uma coleta e como proceder ao seu final 14

Referncias 15
Coleta de Germoplasma

Bruno Machado Teles Walter

Importncia e definio

Coleta de germoplasma ou, resumidamente, coleta o conjunto de atividades que visam


obteno de unidades fsicas vivas que contenham a composio gentica de um
organismo, ou amostra populacional de determinada espcie, com a habilidade de se
reproduzir (WALTER et al., 2005). Dependendo do contexto, o termo tambm pode ser
aplicado misso ou expedio de campo que busca obter essas unidades (Figura 1).
Foto: Bruno M. T. Walter

Figura 1. Veculo utilizado em misses de coleta de germoplasma.

Esta definio de coleta remete o conceito para algum tipo de unidade fsica palpvel, que
seja representativa da populao ou da espcie-alvo da ao. Sendo assim, dependendo da
espcie, o germoplasma pode ser coletado, manipulado e conservado na forma de
sementes, mudas, estacas ou por meio de cultura de tecidos (Figura 2).
Manual de Curadores de Germoplasma Vegetal: Coleta de Germoplasma 09

Fotos: Glocimar P. Silva

Figura 2. Tipo mais comum de germoplasma alvo de coleta: sementes.

Coleta de germoplasma est intimamente vinculada aos processos de conservao ex situ,


sendo uma das maneiras bsicas de se enriquecer as colees. Juntamente com a
introduo e o intercmbio, forma os pilares tradicionais do enriquecimento em recursos
genticos. Portanto, um banco ativo de germoplasma (BAG) um usurio natural que
demanda aes de coleta, objetivando o enriquecimento das colees mantidas ex situ.

Como realizar uma expedio de coleta

Cada espcie (ou produto) requer determinadas aes e procedimentos na coleta que so
particulares, quer sejam eles de planejamento, de estratgias ou de materiais e
equipamentos necessrios nas atividades de campo. Em outras palavras, as estratgias e
os procedimentos de coleta variam de espcie para espcie, de produto para produto. Em
consequncia, no h como indicar um procedimento nico, universal, aplicvel a qualquer
situao que necessite de coleta. Exemplificando, o que se demanda na coleta de espcies
florestais muito diferente das demandas para espcies herbceas, tendo em vista que a
biologia das plantas diferente.

Enquanto as primeiras so plantas perenes, altas, com ciclos reprodutivos que podem ser
longos, as espcies herbceas geralmente so anuais, baixas, com perodos de reproduo
mais curtos. Os equipamentos necessrios para a coleta de germoplasma de amendoim,
uma planta cujo propgulo (ou unidade visada) se encontra enterrada no solo, so
diferentes daqueles necessrios coleta de aroeira, uma rvore cujas sementes se
encontram em frutos dispersos pelo vento.

Contudo, possvel agrupar artificialmente as espcies (produtos) em conjuntos com


caractersticas similares, cujos princpios bsicos de coleta seguem alguns padres. Os
exemplos anteriores, florestais perenes e herbceas anuais, so dois desses grupos.
Outros incluem plantas cultivadas ou parentes silvestres; germoplasma nativo ou extico;
plantas de propagao vegetativa ou com reproduo sexuada (sementes); dentre outros.
Grupos tradicionalmente utilizados para ligar produtos baseiam-se na sua utilizao
principal e renem as espcies sob classes como alimentcias, corantes, condimentares,
florestais, forrageiras (gramneas ou leguminosas), fruteiras, laticferas, medicinais,
oleaginosas, ornamentais, palmeiras (usos mltiplos), razes e tubrculos, e at mesmo
classes heterogneas como plantas destinadas recuperao de reas degradadas.

fundamental que o coletor esteja no campo exatamente na poca de produo do


germoplasma a ser coletado. Portanto, se o objetivo coletar sementes de aroeira, deve-se
estar no campo na poca de plena frutificao da espcie, na regio escolhida para a
10 Manual de Curadores de Germoplasma Vegetal: Coleta de Germoplasma

coleta. Em um pas continental como o Brasil, dentre outros fatores relacionados


distribuio natural de uma espcie, a latitude um parmetro que afeta a fenologia e,
portanto, deve ser considerada no planejamento de uma expedio. Sendo assim, alm das
caractersticas intrnsecas da espcie visada, a regio em que as plantas ocorrem definir
uma srie de questes logsticas.

Para se acessar plantas nos principais biomas brasileiros, como o Cerrado, a Caatinga ou
os Pampas, uma caminhonete com trao nas quatro rodas geralmente o veculo mais
adequado (Figura 1). J na Amaznia, para a maioria dos produtos nativos,
imprescindvel que se conte com barcos como meio de transporte.

Em sntese, para realizar uma misso de coleta, importante considerar questes


relacionadas espcie-alvo, como sua distribuio e fenologia; ao transporte e aos meios
de acesso s populaes no campo; quantidade de germoplasma necessrio; aos
equipamentos de coleta e conservao; legislao; e onde, como e quem (equipe) sero
os responsveis pela coleta e tambm pela conservao.

H na literatura numerosas fontes bibliogrficas que informam sobre estratgias, materiais


e equipamentos necessrios para a coleta dos diferentes grupos de espcies. Para a coleta
de germoplasma, recomenda-se a consulta dos livros de Guarino et al. (1995) e Walter e
Cavalcanti (2005). Para materiais de herbrio, Mori et al. (1989) e Fidalgo e Bononi (1989)
so fontes bsicas.

Como documentar o material e quem identifica as


plantas

Todo material a ser incorporado aos BAGs deve ser adequadamente identificado e
documentado. Para a correta identificao, dispor de um voucher (amostra testemunha) de
herbrio (Figura 3) sempre recomendado em coletas de germoplasma, e isto deveria ser
regra; embora ainda no seja, este um quadro que vem mudando ultimamente.
Foto: Bruno M. T. Walter

Figura 3. Coleta de espcime botnico (voucher) para herbrio.


Manual de Curadores de Germoplasma Vegetal: Coleta de Germoplasma 11

O voucher uma amostra da espcie-alvo que deve conter um ramo com material
reprodutivo, preferencialmente flores (ou idealmente flores e frutos), que deve ser
prensado e desidratado em um processo denominado herborizao (Figuras 3 e 4). Pelo
menos quatro amostras (duplicatas) podem ser feitas por nmero de coleta (ou por
voucher), sendo que uma delas deve ser destinada ao especialista na taxonomia do grupo
botnico. Detalhes deste tema so encontrados em Mori et al. (1989), Fidalgo e Bononi
(1989) e Walter e Cavalcanti (2005).

Preferencialmente, a identificao taxonmica deve ser feita por especialistas ou, ao


menos, por botnicos treinados, tendo o suporte tcnico de um herbrio (Figura 4).
Entretanto, no campo, mateiros ou tcnicos de campo geralmente fornecem informaes
de identificao muito teis. Para recursos genticos, o Herbrio CEN (Figura 5)
referncia em amostras de plantas de interesse econmico e pode ser indicado para o
depsito de duplicatas associadas s coletas de germoplasma.
Fotos: Bruno M. T. Walter

Figura 4. Atividades de identificao de espcimes botnicos (vouchers) em herbrio.

Tanto para os vouchers de herbrio quanto para os acessos (ou amostras da populao),
as primeiras informaes que podem ser obtidas sobre qualquer material a ser incorporado
a uma coleo so (ou deveriam ser) obtidas na coleta. Com base nessas informaes
que o germoplasma passa a agregar valor.

Tendo por referncia a caderneta de campo utilizada pelo Cenargen desde os anos 1970, a
seguir so indicadas e brevemente comentadas algumas dessas informaes (WALTER e
CAVALCANTI, 2005a). Vale destacar que as informaes de campo podem ser anotadas
em qualquer caderno ou caderneta de campo especfica; entretanto, a partir da coleta, tais
informaes passaro a ser uma espcie de certido de nascimento daquele acesso.

Figura 5. Prdio da Botnica e Ecologia, onde fica o Herbrio CEN.


12 Manual de Curadores de Germoplasma Vegetal: Coleta de Germoplasma

Uma caderneta de campo no algo pessoal, e sim institucional; nela o coletor deve
anotar:

nome do coletor (ou coletores): registrar os nomes dos coletores participantes. Ao coletor
principal (o primeiro nome registrado) que a coleo (coleta) ficar associada;

nmero do coletor: nmero sequencial crescente que, para cada coletor, inicia-se em 1 e segue
infinitamente para qualquer acesso ou material de herbrio que venha a ser coletado por ele, em
qualquer local, para quaisquer materiais, estando em qualquer instituio;

data da coleta: anotar dia, ms e ano da coleta;

pas, regio, estado, territrio, municpio: sempre fazer estes registros;

latitude, longitude, altitude: registrar as coordenadas geogrficas e a altitude local;

local da coleta: com riqueza de detalhes, anotar o local da coleta, possibilitando que outros
coletores possam realizar novas colees na mesma rea;

ambiente geral: descrever o ambiente (formao vegetal) de onde o espcime foi obtido;

substrato geral: indicar o substrato ou o tipo de solo;

relevo: registrar indicaes sobre a topografia do terreno (plano, acidentado, etc.);

famlia: anotar a famlia botnica do espcime coletado;

nome cientfico: estando no campo, os coletores (se treinados) j podem determinar o gnero
ou a famlia do espcime e, se possvel, a sua espcie;

nome comum local: registrar os nomes populares do espcime, como so conhecidos no local
ou na regio de coleta, a partir de informaes obtidas com pessoas da comunidade. No
registrar nomes conhecidos em outras regies;

nome do determinador e data: registrar o nome da pessoa que identificou o espcime e a data
da identificao. Nos materiais de herbrio, por conveno, a identificao mais recente do
espcime a que deve ser considerada como sendo a correta;

interesse econmico: anotar o uso do espcime (florestal, medicinal, ornamental, etc.);

material coletado: anotar se foram coletadas sementes, mudas, estacas, exsicatas, amostras
de folhas, etc;

hbito de crescimento: registrar o hbito do espcime ou das plantas do acesso (rvore,


arvoreta, arbusto, subarbusto, erva, liana, epfita, etc.);

frequncia relativa: registrar a abundncia da espcie na rea ou local;

cor da flor: registrar a colorao principal da flor e quaisquer outras caractersticas reprodutivas
da planta que possam ser perdidas no processo de herborizao;

cor do fruto: registrar a colorao do fruto e indicar seu grau de maturao; e

observaes: anotar outras informaes que se julgue importantes e necessrias sobre a


coleta.
Manual de Curadores de Germoplasma Vegetal: Coleta de Germoplasma 13

Produtos diferentes podem demandar mais informaes que as acima sugeridas. Porm,
geralmente so estes os primeiros e principais registros feitos sobre materiais oriundos de
coleta. Aqui comeam a ser registrados os dados de passaporte.

Quanto material deve-se coletar e quantas


sementes por planta

Este um tema controverso e que possui vasta literatura. De maneira geral, a resposta
tem sido dada para espcies cultivadas ou para espcies silvestres. So estes os dois
grupos principais. Para ambos, deve-se definir qual (quais) espcie ser coletada,
priorizando aquelas que possam ser utilizadas mais facilmente (as pertencentes ao
conjunto gnico primrio das plantas cultivadas) e, quando necessrio, aquelas que
estejam ameaadas. fundamental a definio das reas em que se realizar a coleta, com
base na distribuio conhecida da espcie. Se a rea de distribuio for grande, deve-se
priorizar locais onde mais espcies (afins e parentes silvestres) possam ser encontradas, se
possvel buscando os centros de diversidade (ou, teoricamente, tambm os centros de
origem).

Como estratgia geral, para espcies cultivadas sobre as quais haja pouca ou nenhuma
informao disponvel a respeito da estrutura gentica da espcie-alvo, pode-se adotar as
seguintes recomendaes gerais (VENCOVSKY, 1986; LLERAS, 1988; BROWN e
MARSHALL, 1995):

amostrar cerca de 50 populaes por rea ecogeogrfica, ou durante uma expedio;

amostrar cerca de 50 indivduos em cada populao;

amostrar os indivduos aleatoriamente em cada stio, com amostras separadas para


microambientes distintos, se o stio for heterogneo;

amostrar sementes, ou materiais vegetativos, suficientes por planta, a fim de assegurar a


representao de cada planta original em possveis duplicatas;

para conservar a variabilidade de espcies algamas, coletar sementes extensivamente e de


forma casualizada em cada populao, com amostras pequenas de cada matriz; porm, amostras
de nmero igual ou aproximadamente igual por matriz, do maior nmero de populaes;

para conservar a variabilidade de espcies autgamas, coletar sementes extensivamente e de


forma casualizada em cada populao, com amostras grandes de cada matriz, do maior nmero
de populaes; e

para ganhar tempo em programas de melhoramento, coletar, se for vivel, material vegetativo
de matrizes consideradas de elite, procurando represent-las dentro da amostra.

Para as espcies silvestres, pode-se considerar ainda as seguintes recomendaes


(CHAPMAN, 1989; WALTER e CAVALCANTI, 2005):

coletar nos mais diversos stios possveis, tanto em termos geogrficos quanto ecolgicos;

enfatizar o nmero de stios, em vez do nmero de indivduos por stio;

amostrar os indivduos aleatoriamente em cada stio, com amostras separadas por


microambientes distintos, se os stios forem heterogneos; e
14 Manual de Curadores de Germoplasma Vegetal: Coleta de Germoplasma

para conservar a diversidade gentica, coletar o germoplasma extensivamente em cada


populao definida, com amostras grandes de cada matriz, do maior nmero de matrizes, no
maior nmero de populaes.

Como recomendao prtica geral, mais importante amostrar o mximo de locais


(stios/populaes) do que amostrar o nmero teoricamente ideal de plantas por local, com
amostras to grandes quanto possvel.

O que fazer para realizar uma coleta e como


proceder ao seu final
Teoricamente, a coleta de germoplasma pode ser subdividida em trs etapas sequenciais e
complementares: pr-coleta, coleta no campo e ps-coleta (WALTER e CAVALCANTI,
2005a). Pr-coleta envolve as atividades e o planejamento tcnico e logstico conduzido
antes da realizao da expedio. Nela feito o plano geral, consulta-se a legislao
pertinente, formam-se as equipes, verificam-se caminhos, o itinerrio e o transporte, e
dimensionam-se os materiais e equipamentos de campo. No campo, coloca-se em prtica o
planejamento anterior.

Terminada a expedio, inicia-se a ps-coleta, que so as atividades tcnicas e prticas


conduzidas aps a expedio. Entre as atividades mais relevantes, est a triagem e o
beneficiamento dos acessos de germoplasma-semente e eventual plantio de sementes e
mudas; a distribuio ou o encaminhamento de amostras do germoplasma para
conservao (duplicatas, se for o caso e, preferencialmente, envio de amostras para
conservao a longo prazo na Coleo de Base da Embrapa Recursos Genticos e
Biotecnologia/Cenargen); a complementao dos dados da caderneta de campo; e incio da
digitao dos dados e organizao do material fotogrfico. Quanto ao material de herbrio,
deve-se finalizar a herborizao e dar incio separao de duplicatas e montagem das
exsicatas para incorporao em herbrio. Para registro, recomenda-se fortemente que se
prepare um relatrio tcnico sobre a expedio.

Atualmente, no sistema Embrapa, os produtos mais tradicionais vm sendo coletados


dentro de projetos prprios coordenados e liderados nas unidades descentralizadas. Para
recursos genticos ausentes desses projetos, o Cenargen (Figura 5) tem procurado cobrir
lacunas, buscando colet-los e encaminh-los para conservao a longo prazo,
especialmente aqueles que se encontram em reas sob impacto antrpico, com nfase
para produtos de uso ainda potencial.
Manual de Curadores de Germoplasma Vegetal: Coleta de Germoplasma 15

Referncias

BROWN, A. H. D.; MARSHALL, D. R. A basic sampling strategy: theory and practice. In:
GUARINO, L.; RAO, V. R.; REID, R. (Ed.). Collecting plant genetic diversity: technical
guidelines. Wallingford, UK: Cab International, 1995. p. 75-91.

CHAPMAN, C. G. D. Collection strategies for wild relatives of field crops. In: BROWN, A.
H. D.; FRANKEL, O. H.; MARSHALL, D. R.; WILLIAMS, J. T. (Ed.). The use of plant
genetic resources. Cambridge: Cambridge University Press, 1989. p. 263-279.

FIDALGO, O.; BONONI, V. L. R. Tcnicas de coleta, preservao e herborizao de


material botnico. So Paulo: Instituto de Botnica, 1989. 62 p. (Srie documentos).

GUARINO, L.; RAO, V. R.; REID, R. (Ed.). Collecting plant genetic diversity: technical
guidelines. Wallingford Oxon, UK: Cab International, 1995. 748p.

LLERAS, E. Coleta de recursos genticos vegetais. In: ARAUJO, S. M. C.; OSUNA, J. A.


(Ed.). Anais do Encontro sobre Recursos Genticos. Jaboticabal, FCAV, 1988. p. 23-42.

MORI, S. A.; SILVA, L. A. M.; LISBOA, G.; CORADIN, L. Manual de manejo do herbrio
fanerogmico. 2. ed. Ilhus, BA: Centro de Pesquisas do Cacau (CEPLAC), 1989. 104 p.

VENCOVSKI, R. Tamanho efetivo populacional na coleta e preservao de germoplasma de


espcies algamas. Braslia, DF: EMBRAPA-CENARGEN, 1986. 15 p. (EMBRAPA-
CENARGEN. Boletim de Pesquisa, 1).

WALTER, B. M. T.; CAVALCANTI, T. B. (Ed.). Fundamentos para a coleta de germoplasma


vegetal. Braslia: Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia, 2005. 778 p.

WALTER, B. M. T.; CAVALCANTI, T. B. A prtica da coleta de germoplasma. In: WALTER,


B. M. T.; CAVALCANTI, T. B. (Ed.). Fundamentos para a coleta de germoplasma vegetal.
Braslia: Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia, 2005a. p. 179-215.

WALTER, B. M. T.; CAVALCANTI, T. B.; BIANCHETTI, L. B.; VALLS, J. F. M. Coleta de


germoplasma vegetal: relevncia e conceitos bsicos. In: WALTER, B. M. T.;
CAVALCANTI, T. B. (Ed.). Fundamentos para a coleta de germoplasma vegetal. Braslia,
Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia, 2005. p. 26-55.