ANALISIS FITOQUIMICO PRELIMINAR

I. INTRODUCCION.
El hombre utiliza las plantas con propsitos medicinales desde tiempos
prehistricos y an hoy tienen un papel clave en el mantenimiento de la salud de
la mayor parte de la poblacin mundial, pese a los avances de la medicina
moderna. Esto si se tienen en cuenta las diversas formas en que se utilizan, que
van desde la preparacin de decocciones e infusiones en zonas rurales y pases
pobres, pasando por los productos fitoteraputicos, hasta la obtencin de
principios activos en pases desarrollados para la elaboracin de medicamentos.
Se estima que en el mundo se utilizan cerca de 10000 especies vegetales con
fines medicinales, la mayor parte en sistemas de medicina tradicional.

El estudio de los productos naturales de los vegetales comprende: los estudios

etnobotnico, fitoqumico y de bioactividad.

La etnobotnica es el estudio de las relaciones entre plantas y hombres. En la

etnobotnica se trata el cultivo, la cosecha y el uso posible y efectivo de las
plantas, los cultos que refieren a esos y el papel de las plantas en la visin del
mundo y en la lengua.

La fitoqumica estudia las propiedades y estructuras qumicas de los productos

naturales (de las plantas). A travs de lo que se conoce como marcha fitoqumica
(serie de pasos donde se observan reacciones como cambio de color,
fluorescencia, etc.) se determina la existencia de un tipo de compuesto qumico.

La bioactividad trata de descubrir qu parte de la planta es responsable de la

actividad biolgica importante y propiedades tiles para ser estudiada.

Hay tres razones por las cuales el anlisis fitoqumico preliminar de los productos
naturales vegetales es necesario para establecer:

La identidad y fuente correcta de la droga (variacin bioqumica).

La pureza, ausencia y lmites de materias extraas (adulteracin).

La calidad y cantidad de componentes activos (deterioro).

El Anlisis Fitoqumico de una planta puede comprender los siguientes aspectos:

estudio etnobotnico de la planta; identificacin botnica; recoleccin y coleccin
de la especie vegetal; extraccin, separacin y aislamiento de los componentes
de inters; caracterizacin de los compuestos aislados; investigacin de las rutas
biosintticas referidas a compuestos determinados; valoraciones cuantitativas.

Toda la materia prima utilizada procedente de una planta ha de ser

adecuadamente identificada, ya que puede desperdiciarse mucho tiempo y
dinero en el examen del material de origen dudoso. La eleccin de la marcha
fitoqumica preliminar depende de la naturaleza de la materia prima vegetal y de
los componentes que han de ser aislados de ella. Uno de los mtodos es
fraccionar o separar los distintos compuestos de la planta segn una regla de
afinidad; por ejemplo a ciertos disolventes.

II. OBJETIVO.

2.1. Conocer las tcnicas bsicas para realizar un anlisis fitoqumico preliminar
de una especie vegetal.

2.2. Identificar los diferentes grupos de metabolitos secundarios presentes en su

muestra.

III. FUNDAMENTO TEORICO.

Los organismos vivos pueden considerarse como un laboratorio biosinttico, no

solamente de compuestos utilizables en la alimentacin (carbohidratos,
protenas, grasas), sino tambin de una gran variedad de compuestos
(glicsidos, alcaloides, aceites voltiles, etc. que ejercen determinados efectos
fisiolgicos. Estos compuestos qumicos dan a las drogas sus propiedades
teraputicas y se les llama constituyentes activos, para diferenciarlos de los
constituyentes "inertes" que tambin estn en las drogas.

Una clasificacin de los constituyentes de los organismos vivos es en primarios

o esenciales y secundarios:

Primarios: sustancias que son necesarias para el funcionamiento

qumico normal de la clula (metabolitos, aminocidos, cidos grasos,
glicridos, monosacridos, vitaminas, hormonas, etc.)
 Secundarios: sustancias que aparentemente no tienen funciones y que
solamente aparecen en especies particulares (alcaloides, aceites
esenciales, antraquinonas, etc.)

3.1. Identificacin de los grupos de metabolitos secundarios.

Debido a la diversidad de grupos funcionales que pueden estar presentes en los

componentes de una planta no existe una prueba especfica para su
reconocimiento. Sin embargo existen unos pocos procedimientos
experimentales que permiten reconocer algunos de ellos por una serie de
reacciones de precipitacin, coloracin con diferentes reactivos, su absorcin de
luz UV de 254 nm y su Rf en cromatografa en capa fina.

Las reacciones de precipitacin y coloracin se utilizan para comprobar la

presencia de los metabolitos secundarios en la muestra. Se han desarrollado un
gran nmero de reactivos de coloracin y de precipitacin, algunos de ellos son
considerados de aplicacin general, mientras otros son ms especficos y
pueden servir para clasificaciones parciales de sustancias. Generalmente se
considera que hay presencia de especfica de ese grupo de metabolitos
secundarios si dan reaccin positiva a por lo menos dos de estos reactivos; en
el caso de los alcaloides, por lo menos cuatro de estos reactivos. Los anlisis
pueden realizarse de variadas formas.

Tanto en los extractos obtenidos en frio y en caliente se realizan las pruebas

descritas a continuacin: Extraccin, destilacin a contracorriente, precipitacin
de derivados poco solubles, destilacin, absorcin e intercambio inico. En el
anlisis de las drogas crudas son muy tiles la microdestilacin, sublimacin,
precipitacin, ensayos a la gota, cromatografa de absorcin en papel. En el caso
de drogas no particulares (grasas, aceites esenciales, resinas, es til para la
identificacin la determinacin de una serie de valores tales como ndice de iodo,
punto de fusin, ndice de saponificacin, ndice de acetilo, ndice de steres,
solubilidad, viscosidad, materia insaponificable, ndice de refraccin, densidad,
poder rotatorio.

Los mtodos qumicos empleados en el anlisis de drogas puras son del mismo
tipo que los usados para compuestos qumicamente puros (gravimetra,
hidrovolumetra, colorimetra, espectrofotometra, cromatografa, etc.), pero en
muchos casos debe primero alcanzarse una determinada concentracin del
compuesto ensayado para eliminar interferencias de otros constituyentes. En los
ltimos aos el desarrollo de mtodos de separacin y aislamiento por medio de
adsorcin, intercambio inico y cromatografa de gases han facilitado muchos
anlisis.

El uso del IR hace necesario el aislamiento previo.

3.2. Resultados de los grupos de metabolitos secundarios.

La Prctica de Laboratorio permitir establecer la presencia de las siguientes

familias demetabolitos:

Aceites Esenciales,

Carotenoides,

cidos Grasos,

Cumarinas,

Taninos Catquicos,

Taninos Glicos,

Quinonas,

Alcaloides,

Flavonoides,

Compuestos Reductores,

Antocianinas,

Esteroles,

Triterpenos,

Lactonas Insaturadas,

Y Otros.
IV. PROCEDIMIENTO.
V. MATERIALES Y REACTIVOS.

5.1. Materiales.

Balanza
Vasos de precipitacin
Estufa
Matraces
Bao mara
Embudos
Cocina elctrica
Papel de filtro
Equipo de evaporacin al vaco.

5.2. Reactivos.

Solventes: Etanol, metanol, cloroformo y ter.

Tricloruro de hierro: FeCl3 al 1%.

Reactivo de Borntranger: NaOH al 10%.

Reactivo de Liebermann-Bouchard: Mezclar 5 ml de anhdrido actico

con 5 ml de cido sulfrico concentrado. Agregar esta mezcla, con mucho
cuidado y enfriando, a 50 ml de etanol (preparar poco antes de su uso).
Aspersar y calentar 10 min. A 110 C. Observar la aparicin de una mancha
fluorescente a la luz UV, a 365 nm, para la deteccin 5-3-esteroles, otros
esteroides y glicsidos triterpnicos.

Reactivo de Dragendorf, segn Munier:

Solucin a: Se disuelven 1,7 g de nitrato bsico de bismuto, en 20 g

de cido tartrico y luego en 80 ml de H2O.

Solucin b: Se disuelven 16 g de ioduro de potasio en 40 ml de H2O.

Solucin de reserva: Mezclar volmenes iguales de las soluciones a

y b, conservar en refrigeracin.
 Para utilizar, disolver 10 g de cido tartrico en 50 ml de H2O y
agregar 5 ml de la solucin de reserva, para la deteccin de alcaloides
indlicos y derivados.

Reactivo de Mayer:

Solucin a: Se disuelven 13,5 g de HgCl2 en 20 ml de H2O. Se

disuelven 49,8 g de KI en 20 ml de H2O. Se mezclan y se completa a
100 ml. Se agrega 15 ml HCl en solucin acuosa al 17%.

Solucin b: Se disuelven 5 g de ZnCl2 en 80 ml de HCl (37%).

Solucin c: Solucin amoniacal al 15%.

Aspersar con a, se lava el cromatograma con agua durante 10 min,,

se deja escurrir, se aspersa con b y despus con c. Observar la
aparicin de manchas marrones, para la deteccin de alcaloides.

Reactivo de Wagner: Se disuelven 1 g de iodo y 10 g de ioduro de potasio

en 50 ml de H2O. Acidificar con 2 ml de cido actico glacial y completar
con H2O hasta 100 ml. Aspersar y observar formacin de manchas
marrones, para la deteccin de alcaloides.

Reactivo de Shinoda. Se adiciona a la solucin problema limaduras de

Mg y 1 ml de HCl al 0%. Observar la aparicin de coloracin rojiza, hasta
los 10 min., para la deteccin de flavonoides.

Ensayo de la Espuma: Se adiciona 5 ml de solucin etanlica en un tubo

de ensayo, se agita vigorosamente. Observar la aparicin de espuma con
una permanencia de 10 segundos, para la deteccin de saponinas.
 VI. RESULTADOS.

METABOLITO
ENSAYO COLORACIN RESULTADOS
SECUNDARIO
Taninos glicos FeCl3 Azul +
Taninos catquicos FeCl3 Verde oscuro -
Quinonas Borntranger Rojo en fase acuosa -
Liebermann- Verde o azul-
Esteroides -
bouchard verdoso
Dragendorf Naranja -
Alcaloides Mayer Blanco o crema -
Wagner Marrn +
Flavonoides shinoda Rojo -
antoncianinas Verde castao o azul -
Leyenda:

(+) Presenta.

(-) no presenta.

Adems nuestra muestra presento saponinas, las cuales identificamos al agitar

un poco de la muestra por 2 minutos y dejar reposar por 10, manteniendo una
leve espuma, lo que indico la presencia de saponinas.

VII. CONCLUSIONES

Los resultados del anlisis fitoqumico preliminar efectuado sobre la muestra

de hojas de Origanum vulgare evidencian la presencia de alcaloides, taninos,
saponinas. No presento flavonoides, ya que al momento de hacer el anlisis
no presento un color rojizo, sino un marrn y no tiene antisoninas porque al
agregar hidrxido de sodio no cambio de color.
VIII. DISCUSION DE LOS RESULTADOS.

8.1. Cules son los resultados ms resaltantes obtenidos de la marcha

fitoqumica preliminar realizada por su Grupo de Trabajo?

Principalmente, al empezar nuestro anlisis nos dimos cuenta que la muestra

de organo nos dio por resultado de que presentaba taninos glicos, los
cuales son polmeros heterogneos formados por cidos fenlicos, en
particular cido glico, y azcares simples. Son ms pequeos que los
taninos condensados y son hidrolizados con ms facilidad, slo basta cido
diluido para lograrlo. La mayora tiene una masa molecular entre 600 y
3000.los cuales son los que dan un ligero olor caracterstico, sabor amargo
y astringente, y su color va desde el amarillo hasta el castao oscuro

8.2. Son los resultados obtenidos en el anlisis fitoqumico preliminar de su

especie vegetal concordantes con los reportados en la bibliografa?

De acuerdo Nelson Genovs (1980) la hoja de organo en un anlisis

preliminar presenta, taninos glicos, alcaloides triterpenos, saponinas.
Segn los resultados obtenidos y con el anlisis preliminar que realizamos
al organo, podemos decir que obtuvimos la gran parte de estos resultados
concordando con Nelson en los resultados del anlisis preliminar,
obteniendo as taninos glicos, saponinas y alcaloides. Claro los cuales
tambin pudieron de alguna manera haber sido afectados por el solvente
(alcohol) que se us en este anlisis, ya que si bien sabemos el alcohol
podra hacer que varen los resultados, arrojndonos datos errneos.

8.3. Las propiedades medicinales/colorantes/cosmticas/industriales de la

especie vegetal analizada por su Grupo, podran explicarse por la presencia
de los metabolitos secundarios encontrados?

Si, debido a que est formado por taninos glicos lo cuales se encuentran
en dicotiledneas las cuales estn presentes en la familia Lamiaceae, en las
que se encuentra el organo y sirve para tratar enfermedades como clicos,
reumatismo, artritis, etc.
 8.4. Cul sera la utilidad, como profesional agroindustrial, que le
proporcionar el anlisis fitoqumico preliminar de su especie vegetal?

Conocer qu principios activos posee, en nuestro caso el organo, y as

poder producir productos capaces de mejorar la calidad de vida de las
personas de una manera sana y natural.

El organo se podra utilizar en el campo farmacutico como comprimido,

estomacal, digestivo.

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS UTILIZADAS.

Nelson Genovs Leonor (tesis de graduacin) 1980. Obtencin y

aprovechamiento de extractos vegetales.

Cumpa J, Uribe A. "Plantas medicinales- propiedades y usos. Primera

edicin 2003 Tomo 2. BIBLIOTECA DE LA UNIVERSIDAD CESAR
VALLEJO