You are on page 1of 22

Fisiología microbiana. Albert

Fisiología microbiana.

Albert G. Moat, John W. Foster

G. Moat, John W. Foster yy Michael P. Spector

Michael P. Spector

Derechos de autor

2002

2002

2002

2002

2002

por Wiley Liss, Cª

por Wiley Liss, Cª

por Wiley Liss, Cª

por Wiley Liss, Cª

por Wiley Liss, Cª

ISBN: 0-471-39483-1

CAPÍTULO 11

VÍAS DE FERMENTACIÓN

Las principales vías utilizadas por los microorganismos para la desasimilación de hidratos de carbono y la generación de energía biológicamente útil (como PMF o ATP) y poder reductor (tal como NADH o NADPH) se delinean en capítulos anteriores. También se describen las reacciones de iniciación por el que una variedad de azúcares alternativos y otros sustratos son metabolizados a productos intermedios que pueden entrar en las rutas metabólicas centrales. Los organismos individuales pueden utilizar la fructosa bifosfato aldolasa, fosfocetolasa, o cetogluconato aldolasa vías o variaciones de ellos. productos fermentativos adicionales pueden derivarse a partir de piruvato o otros intermedios. Las vías fermentativas que ocurren en algunos de los principales grupos de microorganismos se describen en la figura 11-1 y se consideran en detalle en este capítulo.

SALDOS DE FERMENTACIÓN

Una evaluación completa de las vías de fermentación de carbohidratos requiere identificación cualitativa de la contabilidad

cuantitativa dede lala cantidad

yy cuantitativa

cantidad dede productos recuperados. Para evaluar lala exactitud

productos recuperados. Para evaluar

exactitud dede las determinaciones analíticas, una balance

las determinaciones analíticas, una balance

carbono oooo lalalala recuperación

dededede carbono

carbono

carbono

recuperación dededede carbono puede calcularse, como sesesese muestra

recuperación

recuperación

carbono puede calcularse, como

carbono puede calcularse, como

carbono puede calcularse, como

muestra

muestra

muestra enenenen lalalala fermentación

fermentación dededede lalalala muestra

fermentación

fermentación

muestra

muestra

muestra enenenen lalalala

Tabla 11-1. En virtud de un número de circunstancias, el equilibrio puede no ser ideal porque una parte de los hidratos de

carbono puede ser asimilado en constituyentes celulares o compuestos distintos de la principal sustrato añadido puede

ser utilizado para formar una parte de los productos recuperados.

Las reacciones de oxidación-reducción juegan un papel importante en el metabolismo fermentativo de hidratos de

carbono. Está, por lololo tanto,

carbono. Está, por

carbono. Está, por

tanto, eseses aconsejable realizar una reducción dedede oxidación

tanto,

aconsejable realizar una reducción

aconsejable realizar una reducción

oxidación ooo

oxidación

equilibrio O-R enen los productos formados. El equilibrio O-R proporciona una indicación

equilibrio O-R

los productos formados. El equilibrio O-R proporciona una indicación enen cuanto

cuanto aa si el saldo

si el saldo

productos formados con respecto a sus estados oxidados o reducidos. Puede que no sea posible equilibrar el

hidrógeno y el oxígeno del sustrato directamente porque hidrataciones o deshidrataciones pueden ocurrir pasos

como intermediarios en la vía de fermentación. Sin embargo, una forma sencilla de lograr el mismo fin es calcular

una oxidación

una oxidación

412

SALDOS DE FERMENTACIÓN

413

CHCH 33

HCOH

CHCH 33 + 2H C = O
CHCH 33
+ 2H
C = O

COCO 22 (2)

(2)

SALDOS DE FERMENTACIÓN 413 CHCH 33 HCOH CHCH 33 + 2H C = O COCO 22

CHCH 33

+ 2H

CHCH 33

CHO

CHCHCH 222 OHOHOH

Etanol

((( --- 1)

CHCH 33

HO

do
do

COCH 33

COCH

COOH

un- Acetolactato (0)

un- Acetolactato (0)

--- COCOCO 222

CHCH 33

HCOH C

= O

CHCH 22

acetoína ((( --- 2)

acetoína

acetoína

2)

2)

-- 2H2H
-- 2H2H

-- 2H2H

CHCH 33

CHCH 33

HCOH

C

= O

HCOH

C

= O

CHCH 22

CHCH 22

3)

3)

diacetilo

((((( ----- 1)

1)

1)

1)

COOH COOH lactato piruvato acetaldehído COCO 22 (0) (1) 1) 1) COOH C = O COCO
COOH
COOH
lactato
piruvato
acetaldehído
COCO 22
(0)
(1)
1)
1)
COOH
C = O
COCO 22
+ CoA
+ 2H
CHCH 22
COOH
oxaloacetato
+
COCO 22
+
CHCH 33
MARIDO
MARIDO 22
+
HCOOH
(3)
((( --- 1) (2)
1) (2)
1) (2)
Formiato de (1)
CO-S-CoA
+ 2H
Acetil-CoA
((( --- 1)
1)
1)
-- CoA
CoA
COOH
+ 4H
HCOH
CHCH 33
CHCH 33
-- CoA
CoA
COOH
CHCHCH 222 OHOHOH
CHCH 22
COOH
Acetato
etanol ((( --- 2)
etanol
etanol
2)
2)
COOH
Malate (2)
(0)
+ 2H
C = O
---- MARIDO
MARIDO
MARIDO
MARIDO 2222 OOOO
CHCH 22
COOH
COOH
acetoacetato
CH
(0)
CH
COCO 22
+ 4H
COOH
((( --- 3)
Fumarato de (2)
+ 2H
CHCH 33
CHCH 33
C = O
(CH 2)
(CH
2) 22
COOH
COOH
COOH
HCOH
HCOH CHCH 22
Acetona
butirato ((( --- 2)
butirato
butirato
2)
2)
((( --- 2)
2)
2)
COOH
+ 2H
+ 4H

Succinato de (1)

COCO 22

2,3-butanodiol

1) ((((( ----- 2)

2)

2)

2)

2)

CHCH 33

CHCH 33

CHCH 22

HCOH

COOH

COOH

propionato

((( --- 1)

1)

1)

isopropanol

((( --- 3)

3)

3)

CHCH 33

(CH 2)

(CH

2) 22

MARIDO 222 COH

MARIDO

MARIDO

COH

COH

butanol

((( --- 4)

4)

4)

Fig. 11-1. Las principales vías dede lala formación

Fig. 11-1. Las principales vías

formación dede producto

producto dede fermentación

fermentación aa partir

partir dede piruvato. Los números entre paréntesis son los

piruvato. Los números entre paréntesis son los

valores de oxidación calculado sobre la base del número de átomos de oxígeno de menos de la mitad el número de átomos de hidrógeno como se

muestra en la Tabla 11-1.

valor para cada compuesto yy comparar

valor para cada compuesto

comparar lala cantidad total dede productos oxidados yy reducidos, como sese muestra

cantidad total

productos oxidados

reducidos, como

muestra enen lala

Tabla 11-1. Si la relación de productos oxidados a productos reducidos está cerca del valor teórico de 1,0, esto

proporciona una indicación adicional de que los productos están en equilibrio.

  • 414 VÍAS DE FERMENTACIÓN

TABLA 11-1. Equilibrio dede fermentación

TABLA 11-1. Equilibrio

fermentación para

para Lactobacillus pentoaceticus

Lactobacillus pentoaceticus

Compuesto Mmol

mmol

carbono unun

carbono

Valor de

oxidación segundo

oxidación

segundo

productos

oxidados

mercancía

reducida

dodo 11

Observado

dodo 11

Calculado dodo

Calculado

Glucosa

100

600

0

lactato

96

288

0

Glicerol

7

21

-- 11

7

Etanol

86

172

-- 22

172

86

Acetato

7

14

0

7

COCO 22

89

89

+ 2

178

89

Los totales

584

178

179

89

93

 

recuperación de carbono

sustrato mmol producto

mmol ××× 100

mmol

mmol

100

100

 

Reducción de oxidación

productos oxidados

 

dododo 111 Equilibrar

Equilibrar

Equilibrar

CC observada

observada 11

584

584

584

584

600 ×××× 100

600

600

600

100

100

100

==== 97,4%

97,4%

97,4%

97,4%

productos reducidos

178 179

178

179 == 1.0

1.0

mmol CCCCC ===== compuesto

ununununun mmol

mmol

mmol

mmol

compuesto mmmmmmmmmm ××××× número

compuesto

compuesto

compuesto

número

número

número

número dedededede átomos

átomos

átomos

átomos

átomos dedededede C.

C.

C.

C.

C.

segundo valor

segundo

segundo

segundo

segundo

valor dedededede oxidación

valor

valor

valor

oxidación ===== (Número

oxidación

oxidación

oxidación

(Número

(Número

(Número

(Número dedededede átomos

átomos

átomos

átomos

átomos dedededede O)

O)

O)

O)

O)

número dedededede átomos

----- ((((( número

número

número

número

átomos

átomos

átomos

átomos dedededede HHHHH ///// 2).

2).

2).

2).

2).

calculado: CC 11

calculado:

8989 9393 == 0.96

0.96

 
 

Piruvato (C(C(C(C(C(C(C(C(C(C 3) ---- →→→→→→→→→→ etanol

Piruvato

Piruvato

Piruvato

Piruvato

Piruvato

Piruvato

Piruvato

Piruvato

Piruvato

3) ----

3)

3)

3)

3)

3)

3)

3)

3)

----

----

---- ----

----

----

----

----

etanol

etanol

etanol

etanol

etanol

etanol

etanol

etanol

etanol (C(C(C(C(C(C(C(C(C(C 2)

2) ++++++++++ COCOCOCOCOCOCOCOCOCO 2222222222 (((((((((( dodododododododododo 1)

2)

2)

2)

2)

2)

2)

2)

2)

1)

1)

1)

1)

1)

1)

1)

1)

1)

Del mismo modo, para cada mmol dedede piruvato convertido enenen acetato, una cantidad igual dedede COCOCO 222 sesese espera:

Del mismo modo, para cada mmol

Del mismo modo, para cada mmol

piruvato convertido

piruvato convertido

acetato, una cantidad igual

acetato, una cantidad igual

espera:

espera:

Piruvato (C(C(C(C(C(C(C(C(C(C 3) ---- →→→→→→→→→→ acetato

Piruvato

Piruvato

Piruvato

Piruvato

Piruvato

Piruvato

Piruvato

Piruvato

Piruvato

3)

3)

3)

3)

3)

3)

3)

3) ----

3)

----

----

----

----

----

----

----

----

acetato

acetato

acetato

acetato

acetato

acetato

acetato

acetato

acetato dededededededededede (C(C(C(C(C(C(C(C(C(C 2)

2)

2)

2)

2)

2)

2)

2)

2)

2) ++++++++++ COCOCOCOCOCOCOCOCOCO 2222222222 (((((((((( dodododododododododo 1)

1)

1)

1)

1)

1)

1)

1)

1)

1)

los valor dedede oxidación los valor los valor oxidación dedede ununun compuesto oxidación compuesto compuesto sesese
los valor dedede oxidación
los valor
los valor
oxidación dedede ununun compuesto
oxidación
compuesto
compuesto sesese determina
determina aaa partir del número
determina
partir del número
partir del número dedede átomos
átomos
átomos dedede oxígeno
oxígeno dedede menos
oxígeno
menos dedede lalala
menos
mitad el número de átomos de hidrógeno. Para la glucosa, que tiene 6 átomos de oxígeno y 12 átomos de hidrógeno,
el valor dedede oxidación
el valor
el valor
oxidación eseses 000 (Tabla 11-1). Por
oxidación
(Tabla 11-1). Por
(Tabla 11-1). Por lololo tanto,
tanto, lalala glucosa
tanto,
glucosa sesese denomina una compuesto neutro, yyy ser igualmente
glucosa
denomina una compuesto neutro,
denomina una compuesto neutro,
ser igualmente
ser igualmente

equilibrada los productos de fermentación deben contener cantidades equivalentes de productos oxidados y

reducidos. El carbono en los productos finales en el ejemplo mostrado en la Tabla 11-1 está muy cerca de la cantidad

de glucosa fermentada (97,4%). Además, la cantidad de producto oxidado (dióxido de carbono) es aproximadamente

igual a la cantidad de productos reducidos (glicerol y etanol), por lo que el equilibrio O-R es muy próximo al valor

teórico de 1,0. La Figura 11-1 muestra las rutas generales de formación y los valores de oxidación para un número de

productos de fermentación comunes.

Otro aspecto Otro aspecto Otro aspecto dedededededede los saldos dedededededede fermentación Otro aspecto Otro aspecto Otro
Otro aspecto
Otro aspecto
Otro aspecto dedededededede los saldos dedededededede fermentación
Otro aspecto
Otro aspecto
Otro aspecto
Otro aspecto
los saldos
los saldos
los saldos
los saldos
los saldos
los saldos
fermentación
fermentación eseseseseseses lalalalalalala dododododododo 1111111 equilibrar.
fermentación
fermentación
fermentación
fermentación
equilibrar.
equilibrar.
equilibrar.
equilibrar.
equilibrar. LaLaLaLaLaLaLa cantidad
equilibrar.
cantidad
cantidad
cantidad dedededededede CCCCCCC esperada
cantidad
cantidad
cantidad
esperada
esperada
esperada
esperada
esperada
esperada 1111111 producto
producto
producto
producto
producto
producto
producto
sesese calcula
calcula aaa partir
calcula
partir dedede las cantidades dedede los productos para los que
partir
las cantidades
las cantidades
los productos para los que COCOCO 222 ooo formiato
los productos para los que
formiato sesese espera como ununun
formiato
espera como
espera como

producto adjunto. Por ejemplo, si unun CC 22

producto adjunto. Por ejemplo, si

compuesto tal como etanol ooo acetato

compuesto tal como etanol

compuesto tal como etanol

acetato

acetato eseses uno

uno dedede los productos finales fi, una cantidad igual

uno

los productos finales fi, una cantidad igual dedede COCOCO 222 que

los productos finales fi, una cantidad igual

que sesese

que

espera, puesto que el etanol se deriva de piruvato por descarboxilación. Tenga en cuenta que en la Tabla 11-1

CCC 111 equilibrio (0.96) eseses muy próximo al valor teórico

equilibrio (0.96)

equilibrio (0.96)

muy próximo al valor teórico

muy próximo al valor teórico dedede 1,0.

1,0.

1,0.

fermentación de la levadura

fermentación de la levadura

415

Aunque se conocen más de 800 especies de levaduras, el paradigma para estudios de la fisiología, el

metabolismo intermediario, yyy lalala genética

metabolismo intermediario,

metabolismo intermediario,

genética

genética eseses Saccharomyces

Saccharomyces cerevisiae. Esta

Saccharomyces cerevisiae.

cerevisiae.

Esta especie dedede levadura utiliza lalala vía

Esta especie

especie

levadura utiliza

levadura utiliza

vía dedede

vía

EMP de metabolismo de la glucosa en las condiciones de pH neutro o ligeramente ácido y un ambiente

anaeróbico. Los productos principales formados en estas condiciones son dióxido de carbono y etanol. La

secuencia de reacciones implicadas en esta vía se presenta en la Figura 8-1. Sin embargo, ciertas facetas de la

fermentación alcohólica de levadura llevan consideración adicional.

Cuando las células de levadura se cultivan en altas concentraciones de glucosa, las células funcionan bajo un sistema

control reguladora llamada represión catabólica por carbono ooo represión

dedede control reguladora llamada represión catabólica por carbono

control reguladora llamada represión catabólica por carbono

represión

represión dedede lalala glucosa. Mediante el uso 131313 sustratos

glucosa. Mediante el uso

glucosa. Mediante el uso

sustratos

sustratos

C-etiquetados, es posible hacer estimaciones fiables en cuanto al metabolismo fl ujos que ocurren en la célula. En cultivo

discontinuo, 16.2 de cada 100 moléculas de glucosa consumida por las células entra en la ruta de las pentosas fosfato,

mientras que la misma ux fl relativa es 44,2 por cada 100 moléculas de un quimiostato. El ciclo de TCA no funciona como un

ciclo en cultivos por lotes de células de levadura en crecimiento. En contraste, los cultivos de quimioestato de levadura

utilizan el ciclo de TCA en su forma intacta.

La fermentación etanólica en la levadura puede ser alterado como resultado de una serie de cambios en el medio de

cultivo. En presencia de sulfito sódico, el acetaldehído es atrapado como un complejo de adición de bisulfito te fi, y glicerol

se forma como producto principal:

HSO

HSO

HSO

HSO

HSO

HSO

HSO

HSO

glucosa ++++++++++ HSO

glucosa

glucosa

glucosa

glucosa

glucosa

glucosa

glucosa

glucosa

glucosa

HSO 3333333333 ---------- ---

--- →→→→→→→→→→ glicerol

---

---

---

---

---

---

---

---

acetaldehído-HSO

acetaldehído-HSO

acetaldehído-HSO

acetaldehído-HSO

acetaldehído-HSO

acetaldehído-HSO

acetaldehído-HSO

acetaldehído-HSO

glicerol ++++++++++ acetaldehído-HSO

glicerol

glicerol

glicerol

glicerol

glicerol

glicerol

glicerol

glicerol

acetaldehído-HSO 3333333333 ---------- ++++++++++ COCOCOCOCOCOCOCOCOCO 2222222222

En estas condiciones, el acetaldehído es incapaz de servir como un aceptor de hidrógeno. dihidroxiacetona

fosfato se convierte en el aceptor de hidrógeno preferido, produciendo glicerol-3-fosfato, que es luego

hidrolizado aaa glicerol

hidrolizado

hidrolizado

glicerol

glicerol yyy PPP yo.

yo. LaLaLa fermentación

yo.

fermentación nonono sesese desplaza totalmente enenen lalala dirección

fermentación

desplaza totalmente

desplaza totalmente

dirección

dirección dedede lalala formación

formación

formación dedede

glicerol, ya que no es posible añadir su fi ciente bisulfito de obligar a todo el acetaldehído sin incurrir en efectos

tóxicos adicionales. Por lo tanto, algo de etanol se encuentra entre los productos.

En condiciones alcalinas se observa todavía otro tipo de patrón de fermentación:

2222 dededede glucosa --- →→→→ ++++ Acetato

glucosa ---

glucosa ---

glucosa ---

Acetato

Acetato

Acetato dededede 2222 glicerol

glicerol

glicerol

glicerol ++++ etanol

etanol

etanol

etanol ++++ 2CO

2CO 2222

2CO

2CO

En estas condiciones una reacción de dismutación se produce en la que 1 mol de acetaldehído se oxida a acetato y otro se reduce a etanol. Esta secuencia es catalizada por dos deshidrogenasas ligada a NAD y requiere un equilibrio entre las reacciones siguientes:

CHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCH 3333333333333 CHO CHO CHO +++++++++++++ NAD CHO CHO CHO CHO CHO CHO CHO CHO CHO
CHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCH 3333333333333 CHO
CHO
CHO +++++++++++++ NAD
CHO
CHO
CHO
CHO
CHO
CHO
CHO
CHO
CHO
CHO
NAD
NAD
NAD
NAD +++++++++++++ +++++++++++++ HHHHHHHHHHHHH 2222222222222 OOOOOOOOOOOOO ---
NAD
NAD
NAD
NAD
NAD
NAD
NAD
NAD
---
---
---
---
---
---
---
--- →→→→→→→→→→→→→ CHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCH 3333333333333 COOH
---
---
---
---
COOH +++++++++++++ NADH
COOH
COOH
COOH
COOH
COOH
COOH
COOH
COOH
COOH
COOH
COOH
NADH
NADH
NADH
NADH
NADH
NADH
NADH
NADH
NADH
NADH
NADH
NADH +++++++++++++ HHHHHHHHHHHHH +++++++++++++ CHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCH 3333333333333 CHO
CHO
CHO
CHO
CHO
CHO
CHO
CHO
CHO
CHO
CHO
CHO
CHO +++++++++++++ NADH
NADH
NADH
NADH
NADH
NADH
NADH
NADH
NADH
NADH
NADH
NADH +++++++++++++ HHHHHHHHHHHHH +++++++++++++ ---
NADH
---
---
---
---
---
---
---
---
---
---
---
---
→→→→→→→→→→ CHCHCHCHCHCHCHCHCHCH 3333333333 CHCHCHCHCHCHCHCHCHCH 2222222222 OHOHOHOHOHOHOHOHOHOH ++++++++++ NAD
NAD
NAD
NAD
NAD
NAD
NAD
NAD
NAD ++++++++++ GA-3-P
NAD
GA-3-P
GA-3-P ++++++++++ PPPPPPPPPP iiiiiiiiii ++++++++++ NAD
GA-3-P
GA-3-P
GA-3-P
GA-3-P
GA-3-P
GA-3-P
GA-3-P
NAD
NAD
NAD ++++++++++ ---
NAD
NAD
NAD
NAD
NAD
NAD
---
--- →→→→→→→→→→ NADH
---
---
---
---
---
---
---
NADH
NADH
NADH ++++++++++ HHHHHHHHHH 1,3-difosfoglicerato
NADH
NADH
NADH
NADH
NADH
NADH
1,3-difosfoglicerato
1,3-difosfoglicerato
1,3-difosfoglicerato
1,3-difosfoglicerato
1,3-difosfoglicerato
1,3-difosfoglicerato
1,3-difosfoglicerato ++++++++++
1,3-difosfoglicerato
1,3-difosfoglicerato
NADH +++ HHH +++ dihidroxiacetona-P
NADH
NADH
dihidroxiacetona-P +++ +++ ---
dihidroxiacetona-P
--- →→→ glicerol-3-P
---
glicerol-3-P +++ NAD
glicerol-3-P
NAD +++
NAD

Esta serie de reacciones se denomina a veces como la lanzadera glicerol-3-fosfato. La oxidación del acetaldehído en acetato rendimientos no ATP, ya que la reacción procede directamente sin la formación intermedia de acetil-CoA.

  • 416 VÍAS DE FERMENTACIÓN

Los productos de fermentación formados por la levadura también se pueden alterar drásticamente a través de ingeniería

metabólica. Por ejemplo, metabólica. Por ejemplo, metabólica. Por ejemplo, metabólica. Por ejemplo, lalalala introducción introducción dededede
metabólica. Por ejemplo,
metabólica. Por ejemplo,
metabólica. Por ejemplo,
metabólica. Por ejemplo, lalalala introducción
introducción dededede unununun gen
introducción
introducción
gen
gen
gen dededede lactato deshidrogenasa aaaa partir
lactato deshidrogenasa
lactato deshidrogenasa
lactato deshidrogenasa
partir
partir dededede músculo bovina (((( LDH-A) dentro S.
partir
músculo bovina
músculo bovina
músculo bovina
LDH-A)
LDH-A) dentro S.
LDH-A)
dentro
dentro
S.
S.
cerevisiae
cerevisiae engendra
engendra lala producción
producción dede ácido láctico aa niveles que rivalizan con los conseguidos por las bacterias del ácido láctico.
ácido láctico
niveles que rivalizan con los conseguidos por las bacterias del ácido láctico.

EnEnEn lalala levadura libre dedede células extrae lalala adición

levadura libre

levadura libre

células extrae

células extrae

adición dedede PPP yoyoyo dadada como resultado ununun marcado aumento enenen lalala

adición

como resultado

como resultado

marcado aumento

marcado aumento

velocidad dedede fermentación.

velocidad

velocidad

fermentación. LaLaLa tasa finalmente desaparece

fermentación.

tasa finalmente desaparece aaa lalala del control sin

tasa finalmente desaparece

del control sin

del control sin PPP añadido yo. LaLaLa adición

añadido yo.

añadido

yo.

adición

adición dedede una

una

una

segunda cantidad dedede PPP yoyoyo volverá

segunda cantidad

segunda cantidad

volverá

volverá aaa aumentar

aumentar lalala velocidad

aumentar

velocidad dedede fermentación. Este fenómeno

velocidad

fermentación. Este fenómeno (a(a(a veces referido

fermentación. Este fenómeno

veces referido

veces referido

como el efecto Harden-Young) resulta dedede lalala incorporación

como el efecto Harden-Young) resulta

como el efecto Harden-Young) resulta

incorporación

incorporación dedede PPP yoyoyo enenen ésteres

ésteres dedede fosfato orgánico, enenen particular

ésteres

fosfato orgánico,

fosfato orgánico,

particular

particular

fructosa-1,6-bisfosfato, F-6-P, G-6-P, y G-1-P. fosfato inorgánico se asimila durante la formación de

1,3-difosfoglicerato. En etapas posteriores, ADP es fosforilado a ATP, que a su vez permite la fosforilación de

lalala glucosa adicional. LaLaLa acumulación

glucosa adicional.

glucosa adicional.

acumulación

acumulación dedede ésteres

ésteres dedede fosfato limita lalala cantidad

ésteres

fosfato limita

fosfato limita

cantidad

cantidad dedede PPP yoyoyo disponible para el

disponible para el

disponible para el

metabolismo de la glucosa adicional. Este efecto puede ser contrarrestado por la adición de ion arseniato, lo

que resulta en la formación de arseniato phosphoglyceryl. Este compuesto se hidroliza enzimáticamente, la

prevención de la acumulación de intermediarios fosforilados. Durante el procedimiento habitual de preparación

de los extractos libres de células de levadura, la ATPasa de la enzima puede ser inactivada. Preparaciones en

las que ATPasa está activo, ooo al que exógenas ATPasa sesese añade,

las que ATPasa está activo,

las que ATPasa está activo,

al que exógenas ATPasa

al que exógenas ATPasa

añade,

añade, nonono agotan el PPP yo,

agotan el

agotan el

yo,

yo, yyy ésteres

ésteres dedede fosfato

ésteres

fosfato

fosfato nonono sesese

acumulan. En estas condiciones, la fermentación continúa a un ritmo constante.

En una suspensión de células de levadura de reposo que está fermentando la glucosa, la introducción de los resultados de

oxígeno en la cesación de la formación de etanol. Este fenómeno, denominado

Efecto Pasteur, haha sido ampliamente estudiado

Efecto Pasteur,

sido ampliamente estudiado enen los intentos para dilucidar el mecanismo involucrado. Que crecen las

los intentos para dilucidar el mecanismo involucrado. Que crecen las

células de levadura no muestran un efecto notable Pasteur. Las células que crecen respiran solamente 3 a 20% del

azúcar cataboliza y el resto se fermenta. El mecanismo implicado en el cese de la fermentación en las células en reposo

(es decir, bajo condiciones de inanición de nitrógeno) es un inactivación progresiva de los sistemas de transporte de

azúcar. Como consecuencia, la contribución de la respiración a la glucosa catabolismo, que es pequeño en células en

crecimiento, se convierte en bastante significativo en las condiciones de inanición de nitrógeno.

Algunos de los di fi DIF en el estudio de la fermentación alcohólica en los resultados de levadura del hecho de que varias isoenzimas de la alcohol deshidrogenasa (ADH) están presentes, y las actividades de estas y otras enzimas relacionadas con el metabolismo de carbohidratos se dividen entre el citoplasma, la membrana mitocondrial, y la citosol mitocondrial. La enzima clave de la producción fermentativa alcohol (ADH1) reduce el acetaldehído a etanol en presencia de NADH y sirve para mantener el equilibrio redox de la fermentación de glucosa se produce en el citoplasma de las células de levadura. Durante la oxidación de etanol, ADH2 cataliza la formación de acetaldehído.

utilización oxidativa de etanol en la mitocondria implica ADH3. La membrana mitocondrial interna es impermeable a

NAD +++ ooo NADH. mutantes dedede levadura que carecen

NAD

NAD

NADH. mutantes

NADH. mutantes

levadura que carecen

levadura que carecen dedede ADH1

ADH1

ADH1 pueden regenerar NAD

pueden regenerar NAD +++ citoplasmática mediante lalala

pueden regenerar NAD

citoplasmática mediante

citoplasmática mediante

reducción de DHAP a glicerol-3-fosfato. El glicerol-3-fosfato puede entrar en la membrana mitocondrial, donde se vuelve

a oxidar a DHAP por una deshidrogenasa de glicerol-3-fosfato FAD vinculados. Los electrones generados en esta

oxidación se transfieren a la cadena respiratoria. Por esta razón, las células fi cientes ADH1-de son incapaces de crecer

anaeróbicamente. Como resultado dedede lalala liberación

anaeróbicamente. Como resultado

anaeróbicamente. Como resultado

liberación

liberación dedede PPP yoyoyo aaa partir

partir dedede glicerol-3phosphate, glicerol aparece como ununun

partir

glicerol-3phosphate, glicerol aparece como

glicerol-3phosphate, glicerol aparece como

producto final. Sin embargo, la levadura de deficiente en al menos cuatro de las isoenzimas ADH conocidas todavía

produce hasta un tercio del rendimiento máximo teórico de etanol a partir de glucosa. Esto puede deberse a la presencia

de formas adicionales de

FERMENTACIONES productora de ácido láctico

417

ADH. El genoma publicado por S.

ADH. El genoma publicado por

ADH. El genoma publicado por

S.

S.

cerevisiae identi

cerevisiae

cerevisiae

identi fififi cados al menos siete genes que potencialmente podría código para

identi

cados al menos siete genes que potencialmente podría código para

cados al menos siete genes que potencialmente podría código para

los miembros de la familia de ADH. El glicerol es un producto de fermentación principal, pero acetaldehído y acetato

también se producen. La producción de etanol en las células se multiplican ADH-de fi ciente depende de transporte de

electrones mitocondrial asociada con la membrana mitocondrial interna.

FERMENTACIONES productora de ácido láctico

En las bacterias productoras de ácido láctico se producen dos tipos principales de la fermentación del ácido láctico. Aquellas especies

que fermentan lala glucosa principalmente aa ácido láctico son homofermentativos

que fermentan

glucosa principalmente

ácido láctico son homofermentativos

y los que producen una mezcla de otros productos junto con ácido láctico son

heterofermentantes. Algunas especies homofermentativas pueden formar una variedad más amplia dede productos si

heterofermentantes. Algunas especies homofermentativas pueden formar una variedad más amplia

productos si

se alteran las condiciones de la fermentación. A pH alcalino de las cantidades de formiato, acetato, y el etanol se

incrementan a expensas de lactato (Tabla 11-2). Como se discutió anteriormente, los estudios de isótopos de

etiquetado son útiles para determinar lala principal vía utilizada

etiquetado son útiles para determinar

principal vía utilizada enen lala formación

formación dede productos

productos finales.

finales. Lactobacillus casei,

Lactobacillus casei,

L. L. pentosus, yy pentosus, S. S. S. S. S. S. S. S. faecalis faecalis faecalis
L.
L.
pentosus, yy
pentosus,
S.
S.
S.
S.
S.
S.
S.
S.
faecalis
faecalis
faecalis sesesesesesesese mostró
faecalis
faecalis
faecalis
faecalis
faecalis
mostró
mostró
mostró aaaaaaaa producir
mostró
mostró
mostró
mostró
producir
producir
producir
producir
producir 1414141414141414 lactato
producir
producir
lactato C-metil-etiquetados
lactato C-metil-etiquetados
lactato C-metil-etiquetados
lactato C-metil-etiquetados
lactato C-metil-etiquetados aaaaaaaa partir
lactato C-metil-etiquetados
lactato C-metil-etiquetados
C-metil-etiquetados
partir
partir
partir dededededededede glucosa-1-
partir
partir
partir
partir
glucosa-1-
glucosa-1-
glucosa-1-
glucosa-1- 1414141414141414 CCCCCCCC con una dilución del 50%
glucosa-1-
glucosa-1-
glucosa-1-
con una dilución del 50%
con una dilución del 50%
con una dilución del 50%
con una dilución del 50%
con una dilución del 50%
con una dilución del 50% yyyyyyyy 1414141414141414 lactato
con una dilución del 50%
lactato
lactato
lactato
lactato
lactato
lactato
lactato
marcado con C-carboxilo
marcado con C-carboxilo aaa partir
marcado con C-carboxilo
partir dedede glucosa-3,4-
partir
glucosa-3,4- 141414 CCC sin dilución dedede lalala actividad específica. Estos patrones dedede marcaje
glucosa-3,4-
sin dilución
sin dilución
actividad específica. Estos patrones
actividad específica. Estos patrones
marcaje fififi
marcaje
t la distribución de átomos de carbono que se esperan de la utilización de la vía de EMP, como se muestra en la Figura
11-2. EnEn L.
11-2.
L. lactis
lactis

un operón se ha demostrado que codifican para la fosfofructoquinasa, la piruvato quinasa, y lactato

deshidrogenasa, tres enzimas crucial para el funcionamiento dedede lalala vía

deshidrogenasa, tres enzimas crucial para el funcionamiento

deshidrogenasa, tres enzimas crucial para el funcionamiento

vía

vía dedede EMP. Distribución dedede 141414 sustratos

EMP. Distribución

EMP. Distribución

sustratos CCC

sustratos

marcado indica que más del 90% del carbono en azúcares fermentados se convierte en productos finales

metabólicos, normalmente ácido láctico (ver Fig. 11-2). Tan poco como 5% del carbono glucosa consumida se

convierte en biomasa.

SeSeSe hahaha propuesto que el término homoláctica ser usado para referirse

propuesto que el término homoláctica ser usado para referirse aaa las bacterias del ácido láctico que contienen

propuesto que el término homoláctica ser usado para referirse

las bacterias del ácido láctico que contienen

las bacterias del ácido láctico que contienen

aldolasa pero no transcetolasa. bacterias del ácido homolácticas verdaderos metabolizar la glucosa mediante la ruta de

EMP mientras que los que son realmente heterofermentativo presumiblemente siguen una vía de monofosfato de hexosa.

Sin embargo, algunos datos sugieren que una combinación de ambas vías puede ser operativo en ciertos organismos.

TABLA 11-2. Efecto del pHpH sobre

TABLA 11-2. Efecto del

sobre lala glucosa

glucosa enen lala fermentación por S.

fermentación por

S. faecalis

faecalis

 

pH

Los productos formados unun

Los productos formados

5.0

7.0

9.0

Ácido láctico

174,0

146,0

122,0

Ácido acético

12.2

18.8

31.2

Ácido fórmico

15.4

33.6

52.8

Etanol

7.0

14.6

22.4

recuperación Carbon%

95.0

90.0

88.0

índice oo segundo

índice

segundo

1.02

1.18

1.18

Las cantidades dededededede los productos mostrados como μμμμμμ mol

Las cantidades

Las cantidades

Las cantidades

Las cantidades

unununununun Las

cantidades

los productos mostrados como

los productos mostrados como

los productos mostrados como

los productos mostrados como

los productos mostrados como

mol

mol

mol

mol

mol ////// 100

100 100

100

100

100

mol dededededede glucosa fermentada.

μμμμμμ mol

mol

mol

mol

mol

glucosa fermentada.

glucosa fermentada.

glucosa fermentada.

glucosa fermentada.

glucosa fermentada.

segundo Véase

segundo

Véase lala Tabla 7-5 para definición dede OROR (oxidación-reducción) índice yy susu cálculo.

Tabla 7-5 para definición

(oxidación-reducción) índice

cálculo.

Fuente: Fuente: Fuente: De De Wood, De Wood, 1961. Wood, 1961. 1961. LaLaLa fermentación fermentación dedede
Fuente:
Fuente:
Fuente: De
De Wood,
De Wood, 1961.
Wood,
1961.
1961.
LaLaLa fermentación
fermentación dedede hidratos
fermentación
hidratos dedede carbono
hidratos
carbono
carbono yyy compuestos relacionados. EnEnEn Las
compuestos relacionados.
compuestos relacionados.
Las
Las
bacterias,
bacterias, Vol.
Vol. II, Metabolismo. ICIC Gunsalus
II, Metabolismo.
Gunsalus yy RYRY Stanier (Eds.). Academic Press, Nueva York, pág. 59.
Stanier (Eds.). Academic Press, Nueva York, pág. 59.
  • 418 VÍAS DE FERMENTACIÓN

Ruta de Embden-Meyerhof-Parnas

  • 1 CHO

CHO

  • 2 CHOH

CHOH

  • 3 HO * CH H *

HO * CH H *

CHO

CHOH

HO * CH H *

CHCHCH 222 OPOPOP

1 CHO CHO 2 3 HO * CH H * HO * CH H * CHO

C = O

*** CHCHCH 222 OHOHOH

CHCH 33

1 CHO CHO 2 3 HO * CH H * HO * CH H * CHO

C = O

* COOH

  • 1 CHCH 33

1 CHO CHO 2 3 HO * CH H * HO * CH H * CHO
1 CHO CHO 2 3 HO * CH H * HO * CH H * CHO

2

CHCHCH 222 OHOHOH

3 * COCO 22
3 * COCO 22
  • 3 *COCO 22

  • 4 COH

COH

COH

* CHO

* COOH

4 COH COH COH * CHO * COOH ** COCO 22

** COCO 22

  • 5 HCOH

HCOH

CHCHCH 222 OHOHOH

  • 6 CHCHCH 222 OPOPOP

Glucosa

G-6-P

HCOH

CHCHCH 222 OPOPOP

5 CHCHCH OHOHOH 6 CHCHCH 222 OPOPOP Glucosa G-6-P CHCHCH 222 OPOPOP HCOH C = O

HCOH

CHCHCH 222

OPOPOP

5 CHCHCH OHOHOH 6 CHCHCH 222 OPOPOP Glucosa G-6-P CHCHCH 222 OPOPOP HCOH C = O

C = O

CHCH 33

5 4

5 CHCHCH OHOHOH 6 CHCHCH 222 OPOPOP Glucosa G-6-P CHCHCH 222 OPOPOP HCOH C = O

CHCHCH 222 OHOHOH

  • 6 CHCH 33

F-1,6-BP DHAP

F-1,6-BP

DHAP ++ GA-3-P piruvato Etanol

GA-3-P piruvato Etanol ++ COCO 22

1

COOH

1 COOH COCO 22 1 COCO 22

COCO 22

  • 1 COCO 22

Camino

CHOH

CHCHCH 333 OHOHOH

CHCH 33

CHCH 33

CHCH 33

Warburg-

Dickens-

3

2

HO * CH H *

*C = O

Warburg- Dickens- 3 2 HO * CH H * * C = O * COOPERATIVA *
Warburg- Dickens- 3 2 HO * CH H * * C = O * COOPERATIVA *

*COOPERATIVA

*CHO

Warburg- Dickens- 3 2 HO * CH H * * C = O * COOPERATIVA *

2
3

*CHCHCH 222 OHOHOH

Horecker

HMP

4

5

COH

HCOH

Horecker HMP 4 5 COH HCOH H * COH HCOH * CHO HCOH * COOH 5

H * COH

HCOH

*CHO

Horecker HMP 4 5 COH HCOH H * COH HCOH * CHO HCOH * COOH 5

HCOH

*COOH

Horecker HMP 4 5 COH HCOH H * COH HCOH * CHO HCOH * COOH 5

C = O

Horecker HMP 4 5 COH HCOH H * COH HCOH * CHO HCOH * COOH 5

5 4

*COOH

HCOH

6

CHCHCH 222 OPOPOP

CHCHCH 222 OPOPOP

CHCHCH 222 OPOPOP

CHCH 33

  • 6 CHCH 33

6-PG

COCO 22

+

Acetil-P acetaldehído

+

+

COCOCO 2+2+2+ Etanol

Etanol

Etanol

+

R-5-P

GA-3-P

piruvato

lactato

1

COOH

COOH

1 COOH COOH COCO 22 1 COCO 22

COCO 22

  • 1 COCO 22

Entner-

Doudoroff

Camino

3

2

C = O

*CHCH 22

Entner- Doudoroff Camino 3 2 C = O * CHCH 22 C = O * CHCH

C = O

*CHCH 33

CHCHCH 222 OHOHOH

Entner- Doudoroff Camino 3 2 C = O * CHCH 22 C = O * CHCH

*CHCH 33

CHCHCH 222 OHOHOH

2 3

*CHCH 33

5

4

H * COH

HCOH

*CHO

5 4 H * COH * CHO * COOH ** COCO 22 CHCHCH 222 OHOHOH 5

HCOH

*COOH

5 4 H * COH * CHO * COOH ** COCO 22 CHCHCH 222 OHOHOH 5

C = O

5 4 H * COH * CHO * COOH ** COCO 22 CHCHCH 222 OHOHOH 5

** COCO 22

5 4 H * COH * CHO * COOH ** COCO 22 CHCHCH 222 OHOHOH 5

CHCHCH 222 OHOHOH

5 4

** COCO 22

CHCHCH 222 OHOHOH

6

CHCHCH 222 OPOPOP

CHCHCH 222 OPOPOP

CHCH 33

CHCH 33

  • 6 CHCH 33

2K3D6PG piruvato

2CO 22

2CO

+

+

GA-3-P

2 etanol

Fig. 11-2. patrones dedede isótopos

Fig. 11-2. patrones

Fig. 11-2. patrones

isótopos

isótopos dedede etiquetado

etiquetado enenen las vías centrales del metabolismo

etiquetado

las vías centrales del metabolismo dedede carbohidratos

las vías centrales del metabolismo

carbohidratos

carbohidratos enenen los microorganismos. *** CCC

los microorganismos.

los microorganismos.

indica 141414 C-etiquetado átomos dedede carbono.

indica

indica

C-etiquetado átomos

C-etiquetado átomos

carbono.

carbono.

Uno de los principales factores que controlan el tipo de producto formado es la cantidad de equivalentes

reductores disponibles. EnEn lala etapa

reductores disponibles.

etapa dede oxidación

oxidación enen lala vía

vía dede fosfato isomerasa, NAD

fosfato isomerasa, NAD ++ esta reducido. El potencial

esta reducido. El potencial

electrodo dedededede este sistema (NAD

dedededede electrodo

electrodo

electrodo

electrodo

este sistema (NAD +++++ ///// NADH 2) eseseseses ----- 0,28 V. El potencial del electrodo dedededede lalalalala reacción

este sistema (NAD

este sistema (NAD

este sistema (NAD

NADH 2)

NADH

NADH

NADH

2)

2)

2)

0,28 V. El potencial del electrodo

0,28 V. El potencial del electrodo

0,28 V. El potencial del electrodo

0,28 V. El potencial del electrodo

reacción

reacción

reacción

reacción dedededede lactato

lactato

lactato

lactato

lactato

deshidrogenasa eseses --- 0,18 V. Como este está

deshidrogenasa

deshidrogenasa

0,18 V. Como este está aaa ununun potencial más alto, reduce NAD donará sus átomos dedede hidrógeno

0,18 V. Como este está

potencial más alto, reduce NAD donará sus átomos

potencial más alto, reduce NAD donará sus átomos

hidrógeno

hidrógeno

en piruvato, reduciéndolo a lactato. Sin embargo, si algún otro aceptor de hidrógeno está disponible, la reducción de

NAD donará sus átomos de hidrógeno a esta aceptor en lugar de piruvato si el potencial del electrodo de la reacción

alternativa eseses mayor (véase Fig. 9-6). Por ejemplo, el potencial dedede lalala reducción

alternativa

alternativa

mayor (véase Fig. 9-6). Por ejemplo, el potencial

mayor (véase Fig. 9-6). Por ejemplo, el potencial

reducción

reducción dedede acetaldehído

acetaldehído

acetaldehído aaa etanol

etanol

etanol eseses --- 0,07 V.

0,07 V.

0,07 V.

Si se forma acetaldehído, a continuación, NADH donará sus átomos de hidrógeno para este sistema. En las

condiciones habituales de fermentación de ácido láctico, no parece estar formado en cualquier cantidad apreciable

acetaldehído. Sin embargo, por la alteración del valor de pH, la fermentación puede ser desviada a una variedad de

productos (Tabla 11-3). Desde los estreptococos parecen utilizar la vía de EMP, el desvío de la fermentación debe

ocurrir en una etapa después de piruvato

FERMENTACIONES productora de ácido láctico

419

TABLA 11-3. Ejemplos de acetona Butanol y Mixed-Disolvente Fermentaciones

productos unun

productos

11 segundo

segundo

22 dodo

33 rere

44 mi

mi

55 FF

66 gramo

gramo

COCO 22

195.5

220,0

207,0

174,0

215,0

195,0

MARIDO 22

MARIDO

233.0

165,9

111.1

229,4

137,0

54.0

Acetato

42.6

24.8

20.3

48.5

16.0

5.0

butirato

75.3

7.1

14.5

59.5

formiato

rastro

10.0

lactato

25.7

Etanol

4.9

122,0

95.0

butanol

47.4

50.2

4.5

Acetona

22.3

28.0

6.0

isopropanol

18.0

acetoına

5.7

2,3-butanodiol

12.0

39.0

recuperación C (%)

97.0

98.0

93.5

98.0

105,0

100,0

equilibrio o

1.02

1.01

1.05

0.99

0.90

1.13

cantidades expresadas como milimoles por 100 mmol dede glucosa utilizada.

Las cantidades expresadas como milimoles por 100 mmol

unun Las

glucosa utilizada.

segundo segundo C. segundo C. C. saccharobutyricum. saccharobutyricum. Donker, saccharobutyricum. Donker, HL 1926. Ph.D. tesis, escuela
segundo
segundo C.
segundo
C.
C.
saccharobutyricum.
saccharobutyricum. Donker,
saccharobutyricum.
Donker, HL 1926. Ph.D. tesis, escuela Technishe Hooge, Delft, Países Bajos.
Donker, HL 1926. Ph.D. tesis, escuela Technishe Hooge, Delft, Países Bajos.
HL 1926. Ph.D. tesis, escuela Technishe Hooge, Delft, Países Bajos.
dododo C.
C.
C.
acetobutylicum.
acetobutylicum. Donker
acetobutylicum.
Donker dedede 1926.
Donker
1926.
1926.
rererererere C.
C.
C.
C.
C.
C.
butylicum.
butylicum. Sjolander,
butylicum.
butylicum.
butylicum.
butylicum.
Sjolander,
Sjolander,
Sjolander,
Sjolander,
Sjolander, NWNWNWNWNWNW 1937.
1937.
1937.
1937.
1937.
1937.
J.
J.
J.
J.
J.
J.
Bacteriol.
Bacteriol.
Bacteriol.
Bacteriol. 34:
Bacteriol.
Bacteriol.
34: 419.
34: 419.
34: 419.
34: 419.
34: 419.
419.
mi
mi
mi
mi
C.
C.
C.
C.
thermosaccharolyticum. Osburn,
thermosaccharolyticum.
thermosaccharolyticum.
thermosaccharolyticum.
Osburn, GL,
Osburn, GL, RWRWRWRW Brown,
Osburn, GL,
GL,
Brown, yyyy CHCHCHCH Werkman.
Brown,
Brown,
Werkman. 1937.
Werkman.
Werkman.
1937.
1937.
1937.
J.
J.
J.
J.
Biol. Chem.
Biol. Chem.
Biol. Chem.
Biol. Chem.
121: 685.
121: 685.
FFF B.
B.
B.
acetobutylicum.
acetobutylicum. Osburn,
acetobutylicum.
Osburn, et al., 1937.
Osburn, et al.,
et al.,
1937.
1937.
gramo
gramo
gramo B.
B.
B.
polymyxa.
polymyxa. Osburn,
polymyxa.
Osburn, et al.,
Osburn, et al., 1937.
et al.,
1937.
1937.

formación en lugar de por la metabolización de hexosa a través de una vía alternativa. En estas condiciones, una

dismutación del piruvato se produce, dando lugar a lactato, acetato, y la formación a través de la siguiente

secuencia:

CHCHCH 333 COCOOH COCOOH +++ CoASH COCOOH CoASH CoASH CHCHCH 333 CO-SCoA CO-SCoA +++ HCOOH CO-SCoA
CHCHCH 333 COCOOH
COCOOH +++ CoASH
COCOOH
CoASH
CoASH
CHCHCH 333 CO-SCoA
CO-SCoA +++ HCOOH
CO-SCoA
HCOOH
HCOOH
CHCHCHCH 3333 CO-Scoa
CO-Scoa ++++ PPPP yoyoyoyo
CO-Scoa
CO-Scoa
CHCHCHCHCHCHCHCH 33333333 COOPO
COOPO 33333333 MARIDO
COOPO
COOPO
COOPO
COOPO
COOPO
COOPO
MARIDO
MARIDO
MARIDO
MARIDO 22222222 ++++++++ CoASH
MARIDO
MARIDO
MARIDO
CoASH
CoASH
CoASH
CoASH
CoASH
CoASH
CoASH
CHCHCH 333 COCOOH
COCOOH +++ 2H2H2H
COCOOH
CHCHCH 333 CHOHCOOH
CHOHCOOH
CHOHCOOH
CHCHCHCHCHCHCHCH 33333333 COOPO
COOPO 33333333 MARIDO
COOPO
COOPO
COOPO
COOPO
COOPO
COOPO
MARIDO
MARIDO
MARIDO
MARIDO
MARIDO
MARIDO 22222222 ++++++++ ADP
MARIDO
ADP
ADP
ADP
ADP
ADP
ADP
ADP
CHCHCH 333 COOH
COOH +++ ATP
COOH
ATP
ATP
RED:
RED: 222 piruvato
RED:
piruvato +++ 2H2H2H +++ ADP
piruvato
ADP +++ PPP yoyoyo
ADP
lactato de etilo + + formiato + ATP

El etanol, cuando se produce, se forma a través de la reducción de acetil fosfato:

CHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCH 33333333333333 COOPO

COOPO

COOPO

COOPO

COOPO

COOPO

COOPO

COOPO

COOPO

COOPO

COOPO

COOPO

COOPO

MARIDO

COOPO 33333333333333 MARIDO

MARIDO

MARIDO

MARIDO

MARIDO

MARIDO

MARIDO

MARIDO

MARIDO

MARIDO

MARIDO

MARIDO

MARIDO 22222222222222 ++++++++++++++ 22222222222222 (2H)

(2H) --- →→→→→→→→→→→→→→ CHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCH 33333333333333 CHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCHCH 22222222222222 OHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOHOH ++++++++++++++ PPPPPPPPPPPPPP yoyoyoyoyoyoyoyoyoyoyoyoyoyo

(2H) ---

(2H) ---

(2H) ---

(2H) ---

(2H) ---

(2H) ---

(2H) ---

(2H) ---

(2H) ---

(2H) ---

(2H) ---

(2H) ---

---

Debido a una diferencia en los sistemas de piruvato de escisión, formiato, en lugar de dióxido de carbono es el principal

producto de un carbono. El dióxido de carbono se forma en pequeñas cantidades por algunos organismos homolácticas

bajo condiciones en las que la fermentación se desvía de la producción de lactato.

organismos homofermentativas, tales como S.

organismos homofermentativas, tales como

organismos homofermentativas, tales como

S.

S.

faecalis, han

faecalis,

faecalis,

han demostrado que poseen altos niveles dedede

han demostrado que poseen altos niveles

demostrado que poseen altos niveles

deshidrogenasa de glucosa-6-fosfato y 6-fosfogluconato deshidrogenasa.

  • 420 VÍAS DE FERMENTACIÓN

Sin embargo, un patrón homofermentativa se mantiene a través interrelaciones reguladores entre las vías de EMP

y HMP (ver Fig. 11-3). La especificidad de activación fi c de lactato deshidrogenasa (LDH) por FDP es

característico dedede S. bovis yyy muchos otros productores

característico

característico

S.

S.

bovis

bovis

muchos otros productores dedede ácido bacterias lácticas. El nivel

muchos otros productores

ácido bacterias lácticas. El nivel

ácido bacterias lácticas. El nivel dedede LDH, que eseses

LDH, que

LDH, que

dependiente dede FDP para lala actividad, disminuye aa medida que lala fermentación

dependiente

FDP para

actividad, disminuye

medida que

fermentación sese convierte heteroláctica. EnEn S.

convierte heteroláctica.

S.

faecalis unun solo

faecalis

solo 6PGD ligada aa NADP

6PGD ligada

NADP sese observa cuando lala glucosa

observa cuando

glucosa eses lala fuente

fuente dede energía primaria. células

energía primaria. células

Gluconato-adaptado producen dos 6-PGD: uno específico para NADP y la otra especificidad c para NAD. La

enzima ligada a NADP es insensible a la inhibición FDP pero es inhibida por ATP y otros nucleótidos. La isomerasa

de G-6-P es inhibida por 6-PG.

Cuando hay una demanda celular para ATP, estas actividades reguladoras de carbono glucosa directa a

través de la vía de EMP de producción de energía. La inhibición de G-6-P isomerasa por 6-PG evita la

acumulación de F-6-P. La alteración del patrón de fermentación de estos organismos por el cambio en el pH o de

otra influencias ambientales puede resultar dedede lalala interrupción

otra influencias ambientales puede resultar

otra influencias ambientales puede resultar

interrupción

interrupción dedede estas funciones reguladoras.

estas funciones reguladoras. EnEnEn S. mutans, fosfatos

estas funciones reguladoras.

S.

S.

mutans,

mutans,

fosfatos

fosfatos

de triosa (gliceraldehído-3-fosfato o fosfato de dihidroxiacetona) inhiben fuertemente liasa pyruvateformate (PFL),

el primer paso en la secuencia de dismutación. La inhibición por fosfatos de triosa en cooperación con un efecto

de la reactivación de ferredoxina puede regular la actividad de liasa pyruvateformate.

Glucosa

ATP NAD NADH ADP G-6-P 6-P-GL 6-PG NADP Inhibición F-6-P NADPH ATP Ribulosa-1-P Ribulosa-1-P ++ COCO
ATP
NAD NADH
ADP
G-6-P
6-P-GL
6-PG
NADP
Inhibición
F-6-P
NADPH
ATP
Ribulosa-1-P
Ribulosa-1-P ++ COCO 22
ADP
PAG yoyo
PAG
F-1,6-BP
DHAP
GA-3-P
GA-3-P + Acetil-P
ADP
+2P2P2P iii +++ 2ADP
2ADP
2ADP
NADH
NAD
ATP
2ATP
NADH
piruvato
acetaldehído
NADH
NADH
Activación
NAD
NAD
lactato
Etanol

Fig. 11-3. Regulación dedede las vías metabólicas

Fig. 11-3. Regulación

Fig. 11-3. Regulación

las vías metabólicas enenen Streptococcus faecalis. 6-fosfogluconato (6-PG) inhibe

las vías metabólicas

Streptococcus faecalis.

Streptococcus faecalis.

6-fosfogluconato (6-PG) inhibe lalala

6-fosfogluconato (6-PG) inhibe

actividad de la isomerasa de hexosa difosfato. La fructosa-1,6-bifosfato (F-1,6-BP) inhibe la actividad de

6-fosfogluconato deshidrogenasa. LaLaLa lactato deshidrogenasa sesese activa por F-1,6-BP.

6-fosfogluconato deshidrogenasa.

6-fosfogluconato deshidrogenasa.

lactato deshidrogenasa

lactato deshidrogenasa

activa por F-1,6-BP.

activa por F-1,6-BP. ((( Fuente: Reproducida dedede Foso,

Fuente: Reproducida

Fuente:

Reproducida

Foso,

Foso,

AGAGAG 1985. Biología dedede lalala acético láctico yyy bacterias del ácido propiónico. EnEnEn Biología

1985.

1985.

Biología

Biología

acético láctico

acético láctico

bacterias del ácido propiónico.

bacterias del ácido propiónico.

Biología

Biología dedede Microorganismos Industriales, ALALAL

Microorganismos Industriales,

Microorganismos Industriales,

Demain y NA Solomon (Eds.). Benjamin-Cummings, Menlo Park, CA. pp. 143-186.)

FERMENTACIONES productora de ácido láctico

421

el género el género el el género el género el género el género el género género
el género
el género
el
el género
el género
el género
el género
el género
género Lactococcus
Lactococcus
Lactococcus incluye L. lactis, L. cremoris,
Lactococcus
Lactococcus
Lactococcus
Lactococcus
Lactococcus
incluye
incluye
incluye
incluye
incluye
incluye
incluye L.
L.
L.
L.
L.
L.
L.
lactis, L. cremoris,
lactis, L. cremoris,
lactis, L. cremoris,
lactis, L. cremoris, yyyyyyyy L. diacetylactis. Estas
lactis, L. cremoris,
lactis, L. cremoris,
lactis, L. cremoris,
L.
L.
L.
L.
L.
L.
L.
diacetylactis.
diacetylactis.
diacetylactis.
diacetylactis.
diacetylactis.
diacetylactis.
diacetylactis.
Estas especies, así como varias especies
Estas especies, así como varias especies
Estas especies, así como varias especies
Estas especies, así como varias especies
Estas especies, así como varias especies
Estas especies, así como varias especies
Estas especies, así como varias especies
especies, así como varias especies
dedededede Leuconostoc
Leuconostoc
Leuconostoc
Leuconostoc
Leuconostoc yyyyy Lactobacillus,
Lactobacillus,
Lactobacillus,
Lactobacillus,
Lactobacillus, producir
producir acetoína, diacetilo,
producir acetoína, diacetilo, yyyyy 2,3-butanodiol. Estos compuestos son responsables
producir acetoína, diacetilo,
producir acetoína, diacetilo,
acetoína, diacetilo,
2,3-butanodiol. Estos compuestos son responsables
2,3-butanodiol. Estos compuestos son responsables
2,3-butanodiol. Estos compuestos son responsables
2,3-butanodiol. Estos compuestos son responsables

de la característica y deseable Avor fl en ciertos productos lácteos tales como mantequilla. En ciertas otras

fermentaciones, la presencia de estos compuestos no es deseable, y es de importancia para ser capaz de

minimizar su producción. Como se muestra en la Figura 11-4, hay varias rutas para la producción de acetoína y

diacetilo. Con etilo como sustrato, la acetil-CoA se forma directamente a partir de acetato sin la formación

intermedia dededede piruvato.

intermedia

intermedia

intermedia

piruvato. diacetylactis Lactococcus, Lactobacillus casei,

piruvato.

piruvato.

diacetylactis Lactococcus, Lactobacillus casei,

diacetylactis Lactococcus, Lactobacillus casei,

diacetylactis Lactococcus, Lactobacillus

casei, yyyy otros organismos productoras

otros organismos productoras dededede lactato que

otros organismos productoras

otros organismos productoras

lactato que

lactato que

lactato que

requieren el ácido lipoico para el acetato de activate crecimiento a acetil fosfato y forman entonces acetil-CoA a

través de la quinasa de etilo y fosfotransacetilasa. Por lo tanto, en medios carentes de ácido lipoico, estos

organismos pueden no formar acetil-CoA a partir de piruvato.

En un medio libre de lipoato que contiene glucosa y acetato, acetoína se forma tanto a través de la

acetil-CoA-C acetil-CoA-C 2- condensación TPP yyyyyyyy CCCCCCCC 2- acetil-CoA-C acetil-CoA-C acetil-CoA-C acetil-CoA-C acetil-CoA-C acetil-CoA-C 2- condensación
acetil-CoA-C
acetil-CoA-C 2- condensación TPP yyyyyyyy CCCCCCCC 2-
acetil-CoA-C
acetil-CoA-C
acetil-CoA-C
acetil-CoA-C
acetil-CoA-C
acetil-CoA-C 2- condensación TPP
2-
2-
2-
2-
2-
2-
condensación TPP
condensación TPP
condensación TPP
condensación TPP
condensación TPP
condensación TPP
2-
2- dodododododododo 33333333 rutas condensación. EnEnEnEnEnEnEnEn L.
2-
2-
2-
2-
2-
rutas condensación.
rutas condensación.
rutas condensación.
rutas condensación.
rutas condensación.
rutas condensación.
rutas condensación.
L.
L.
L.
L.
L.
L.
L.
lactis
lactis
lactis
lactis
lactis
lactis
lactis
lactis
el gen
el gen
el gen
el gen
el gen dedededede lalalalala α- descarboxilasa acetolactato
α-
α-
α- descarboxilasa acetolactato ((((( aldB) está agrupado con los genes para los aminoácidos
α-
descarboxilasa acetolactato
descarboxilasa acetolactato
descarboxilasa acetolactato
aldB)
aldB)
aldB)
aldB) está
está agrupado con los genes para los aminoácidos dedededede cadena
está agrupado con los genes para los aminoácidos
está agrupado con los genes para los aminoácidos
agrupado con los genes para los aminoácidos
cadena
cadena
cadena
cadena

ramificada. Esta enzima parece desempeñar un doble papel en este organismo mediante la regulación de la

biosíntesis de valina y leucina, así como la catálisis de la segunda etapa de la ruta para acetoína y 2,3-butanodiol. El

control de la transición de homoláctica a fermentación mixta-ácido parece estar regulado por la NADH / NAD +

relación relacionada con el fl ux-control de la actividad de glyyceraldehyde-3-fosfato deshidrogenasa.

Durante el crecimiento en la leche, PFL y lactato deshidrogenasa son importantes para sostener el

crecimiento dedede L. lactis yyy regenerar cofactores reducidos bajo condiciones anaeróbicas. El gen que codifica PFL

crecimiento

crecimiento

L.

L.

lactis

lactis

regenerar cofactores reducidos bajo condiciones anaeróbicas. El gen que codifica PFL

regenerar cofactores reducidos bajo condiciones anaeróbicas. El gen que codifica PFL

ha sido clonado y caracterizado. La enzima se activa

CHCH 33

CHCH 33

C = O

COOH

piruvato

COOH

Acetato

ATP

ADP CHCH 33 POLICÍA Acetil-P --- PAG +CoA PAG yoyoyo PAG
ADP
CHCH 33
POLICÍA
Acetil-P
--- PAG
+CoA
PAG yoyoyo
PAG

CHCH 33

C = O

CoA

Acetil-CoA

+TPP CHCH 33
+TPP
CHCH 33

2- dodododo 3333

COOH

--- COCOCO 222

OH

FERMENTACIONES productora de ácido láctico 421 el género el género el el género el género el

CHCH 33

condensación

do
do

TPP C

Acetal-TPP

2- dodododo 2222

condensación

FERMENTACIONES productora de ácido láctico 421 el género el género el el género el género el

Acetal-TPP

-- TPP

TPP

dodododo 2-

2- 2-

±± 2H2H

FERMENTACIONES productora de ácido láctico 421 el género el género el el género el género el
FERMENTACIONES productora de ácido láctico 421 el género el género el el género el género el

-- CoA

CoA

CHCH 33

C

= O

= O

CHCH 33

C = O

CHCH 33

un- acetolactato un- acetolactato --- COCOCO 222
un- acetolactato
un- acetolactato
--- COCOCO 222
CHCH 33 CHCH 33 CC =OH OH CH OH ±± 2H2H C = O
CHCH 33
CHCH 33
CC =OH
OH
CH OH
±± 2H2H
C = O

CHCH 33

CHCH 33

C

2,3-butanodiol

acetoına

diacetilo

Fig. 11-4. rutas alternas para acetoína, diacetilo yy 2,3-butanodiol. TPP, pirofosfato

Fig. 11-4. rutas alternas para acetoína, diacetilo

2,3-butanodiol. TPP, pirofosfato dede tiamina.

tiamina.

  • 422 VÍAS DE FERMENTACIÓN

a través de la formación de radicales libres y se degrada en presencia de oxígeno. En condiciones anaerobias, el

carbono fl ux a partir de piruvato se distribuye principalmente entre las dos enzimas que compiten: lactato

deshidrogenasa (LDH) y liasa piruvato-formiato (PFL). La regulación de la transición de homofermentativa a la

formación de mezclado-ácido se asocia principalmente con la influencia de los efectores alostéricos que actúan sobre

la LDH y enzimas PFL.

Los organismos que metabolizan azúcares a través de vías fermentativas y no utilizan oxígeno molecular como

un aceptor de hidrógeno final o generan ATP a través de la fosforilación oxidativa son anaerobios. Sin embargo, si

tales organismos crecen en presencia de oxígeno, pueden ser referidos como aerotolerant. En presencia de

oxígeno, productos tóxicos tales como el peróxido de hidrógeno pueden ser generados por la autooxidación de la

reducción de FAD, y los radicales hidroxilo se pueden formar por la interacción de este compuesto con superóxido.

organismos anaerobios que toleran la presencia de oxígeno son generalmente capaces de hacerlo en virtud de la

presencia de enzimas que las protegen de estos compuestos tóxicos (véase más discusiones en el capítulo 18).

Algunos organismos fermentativos tales como L. plantarum sesese aerotolerant simplemente porque

Algunos organismos fermentativos tales como

Algunos organismos fermentativos tales como

L.

L.

plantarum

plantarum

aerotolerant simplemente porque

aerotolerant simplemente porque nonono interactúan con

interactúan con

interactúan con

el oxígeno molecular. concentraciones intracelulares elevadas dedede Mn

el oxígeno molecular. concentraciones intracelulares elevadas

el oxígeno molecular. concentraciones intracelulares elevadas

Mn

Mn 2+2+2+ también ayudar aaa estos organismos enenen

también ayudar

también ayudar

estos organismos

estos organismos

barrido de anión superóxido.

Streptococcus pyogenes yy otras

Streptococcus pyogenes

otras bacterias

bacterias dede ácido láctico producen NADH oxidasa, una avoprotein

ácido láctico producen NADH oxidasa, una avoprotein flfl única que

única que

cataliza la reducción de cuatro electrones de oxígeno a agua. Esta enzima puede en realidad permitir que ciertos

organismos fermentativos para utilizar el oxígeno molecular con ventaja en la producción de energía. Bajo

condiciones anaeróbicas la conversión de piruvato a lactato o una mezcla de formiato, acetato, etanol y sirve para

oxidar NADH a NAD +. En presencia de oxígeno, FL enzimas avin que contienen catalizan la oxidación de NADH

por el oxígeno.

pesar dedede que

AAA pesar

pesar

que S. mutans depende

que

S.

S.

mutans

mutans

depende dedede lalala glucólisis

depende

glucólisis

glucólisis yyy prefiere

prefiere ununun ambiente anaeróbico, lalala presencia

prefiere

ambiente anaeróbico,

ambiente anaeróbico,

presencia dedede

presencia

oxígeno induce la formación de NADH oxidasa y la superóxido dismutasa. Dos tipos de NADH oxidasa se

inducen enenen las cepas tolerantes

inducen

inducen

las cepas tolerantes

las cepas tolerantes aaa oxígeno

oxígeno dedede S. mutans. AAA oxidasa que forman peróxidos (Nox-1) cataliza lalala

oxígeno

S.

S.

mutans.

mutans.

oxidasa que forman peróxidos (Nox-1) cataliza

oxidasa que forman peróxidos (Nox-1) cataliza

reacción:

NADH +++++++++ HHHHHHHHH +++++++++ +++++++++ OOOOOOOOO 222222222 ---

NADH

NADH

NADH

NADH

NADH

NADH

NADH

NADH

---

---

---

---

---

---

---

--- →→→→→→→→→ NAD

NAD +++++++++ +++++++++ HHHHHHHHH 222222222 OOOOOOOOO 222222222

NAD

NAD

NAD

NAD

NAD

NAD

NAD

El segundo oxidasa (Nox-2) cataliza una reducción de cuatro electrones del oxígeno por NADH:

2NADH ++++++++ 2H2H2H2H2H2H2H2H ++++++++ ++++++++ OOOOOOOO 22222222 ---

2NADH

2NADH

2NADH

2NADH

2NADH

2NADH

2NADH

---

---

---

---

---

---

--- →→→→→→→→ 2NAD

2NAD ++++++++ ++++++++ 2H2H2H2H2H2H2H2H 22222222 OOOOOOOO

2NAD

2NAD

2NAD

2NAD

2NAD

2NAD

La presencia de FAD libre aumenta la actividad de Nox-1 pero no la de Nox-2.

S.

S.

S.

S.

S.

S.

también produce una peroxidasa (AhpC) codificada por

ahpC,

ahpC,

ahpC,

ahpC,

mutans también produce una peroxidasa (AhpC) codificada por ahpC, unununununun gen localizado aguas arriba dededededede lalalalalala nox-1 gene.

mutans

mutans

mutans

mutans

mutans

también produce una peroxidasa (AhpC) codificada por

también produce una peroxidasa (AhpC) codificada por

también produce una peroxidasa (AhpC) codificada por

también produce una peroxidasa (AhpC) codificada

por ahpC,

gen localizado aguas arriba

gen localizado aguas arriba

gen localizado aguas arriba

gen localizado aguas arriba

gen localizado aguas arriba

nox-1 gene.

nox-1

nox-1

nox-1

nox-1

gene.

gene.

gene.

gene.

Esta enzima peroxidasa complementa Nox-1 mediante la reducción del peróxido a agua y emulando la acción de

Nox-2. Sin embargo, Nox-2 parece jugar un papel importante en el metabolismo energético aeróbico en oxígeno

tolerantes S.

tolerantes

S. mutans,

mutans,

mientras que Nox-1 sirve un papel insignificante a pesar del hecho de que es la única enzima que se produce

cuando el organismo se cultiva en condiciones anaeróbicas. Este organismo también produce otro sistema

antioxidante, codificada por el antioxidante, codificada por antioxidante, codificada por el el DPR DPR gen DPR
antioxidante, codificada por el
antioxidante, codificada por
antioxidante, codificada por el
el DPR
DPR gen
DPR
gen que eseses independiente del sistema
gen que
que
independiente del sistema dedede Nox-1-AhpC
independiente del sistema
Nox-1-AhpC
Nox-1-AhpC yyy puede compensar las
puede compensar las
puede compensar las
deleciones dededede ambos
deleciones
deleciones
deleciones
ambos nox-1
ambos
ambos
nox-1 yyyy ahpC
nox-1
nox-1
ahpC
ahpC
ahpC

las cepas mutantes. El producto dedede lalala DPR gen, Dpr,

enenen las cepas mutantes. El producto

las cepas mutantes. El producto

DPR gen, Dpr, eseses una proteína dedede unión al hierro que, presumiblemente, contribuye aaa lalala

DPR

gen, Dpr,

una proteína

una proteína

unión al hierro que, presumiblemente, contribuye

unión al hierro que, presumiblemente, contribuye

tolerancia de oxígeno mediante el mantenimiento de un nivel bajo de hierro.

La mayoría de las bacterias de ácido láctico no producen citocromos porque son incapaces de sintetizar hemo.

Sin embargo, cuando sese cultiva

Sin embargo, cuando

cultiva enen presencia

presencia dede hematina,

hematina, Enterococcus

Enterococcus

FERMENTACIONES SOLVENTES A LA PRODUCCIÓN DE ÁCIDO-Y BUTÍRICO

423

faecalis produce

faecalis

faecalis

produce citocromos funcionales que producen ATP aaa través

produce citocromos funcionales que producen ATP

citocromos funcionales que producen ATP

través

través dedede lalala fosforilación oxidativa. Un

fosforilación oxidativa. Un

fosforilación oxidativa.

E.

E.

Un E. faecalis

faecalis

faecalis

grupo grupo dedededede genes, grupo grupo grupo genes, genes, genes, genes, cydABCD, cydABCD, cydABCD, cydABCD, codifica
grupo
grupo dedededede genes,
grupo
grupo
grupo
genes,
genes,
genes,
genes, cydABCD,
cydABCD,
cydABCD,
cydABCD, codifica
cydABCD,
codifica una citocromo funcional
codifica una citocromo funcional
codifica una citocromo funcional bdbdbdbdbd oxidasa -terminal que
codifica una citocromo funcional
una citocromo funcional
oxidasa -terminal que sesesesese produce cuando las
oxidasa -terminal que
oxidasa -terminal que
oxidasa -terminal que
produce cuando las
produce cuando las
produce cuando las
produce cuando las
células
células
células sesese cultivan
cultivan
cultivan enenen presencia
presencia dedede hemo.
presencia
hemo. LaLaLa capacidad
hemo.
capacidad dedede formar citocromos parece limitarse aaa E.
capacidad
formar citocromos parece limitarse
formar citocromos parece limitarse
E.
E.
faecalis
faecalis yyy
faecalis
algunas cepas dedede L.
algunas cepas
algunas cepas
L.
L.
lactis.
lactis. Otras
lactis.
Otras bacterias dedede ácido láctico producen menaquinonas, que son quinonas
Otras bacterias
bacterias
ácido láctico producen menaquinonas, que son quinonas
ácido láctico producen menaquinonas, que son quinonas

isoprenoides que funcionan en el transporte de electrones y, posiblemente, en la fosforilación oxidativa.

FERMENTACIONES SOLVENTES A LA PRODUCCIÓN DE ÁCIDO-Y BUTÍRICO

Los miembros dedede lalala Clostridium,

Los miembros

Los miembros

Clostridium, Butyrivibrio, Bacillus, yyy otra

Clostridium, Butyrivibrio, Bacillus,

Butyrivibrio, Bacillus,

otra menos bien dedede fififi nido

otra menos bien

menos bien

nido

nido flflfl ora

ora dedede sedimentos pantano, madera

ora

sedimentos pantano, madera

sedimentos pantano, madera

húmeda de árboles vivos, y los sistemas de digestión anaerobia de aguas residuales producir ácido butírico, butanol,

acetona, isopropanol, o 2,3-butanodiol. Hidrógeno, dióxido de carbono, acetato y etanol se encuentran comúnmente

entre los productos de fermentación.

Clostridium acetobutylicum utiliza

Clostridium acetobutylicum

utiliza lala vía

vía dede EMP para el catabolismo dede lala glucosa con lala formación

EMP para el catabolismo

glucosa con

formación dede etanol,

etanol,

dióxido de carbono, hidrógeno, acetona, isopropanol, butirato, y butanol a partir de piruvato a través de acetil-CoA,

como se muestra en la Figura 11-1. Durante el crecimiento, las primeras formas organismo de acetato y butirato

(fase acidogénica). A medida que el pH cae y el cultivo entra en la fase estacionaria, hay un cambio metabólico a

disolvente de producción (fase solvetogenic). La reacción fundamental en estas fermentaciones es la formación de

acetil-CoA a partir de piruvato. Acetil-CoA puede entonces someterse a condensación para formar acetoacetato,

que puede ser reducido a butirato y butanol o escinde mediante descarboxilación a la acetona. La acetona puede

reducirse aún más a isopropanol. Acetil-CoA también puede ser reducido en acetaldehído y etanol. Con otras

especies como

B.

B.

B.

B.

acetoethylicum oooo B. polymyxa, lactato

acetoethylicum

acetoethylicum

acetoethylicum

B.

B.

B.

polymyxa,

polymyxa,

polymyxa,

lactato oooo 2,3-butanodiol pueden observarse como sesesese muestra

lactato

lactato

2,3-butanodiol pueden observarse como

2,3-butanodiol pueden observarse como

2,3-butanodiol pueden observarse como

muestra

muestra

muestra enenenen lalalala Tabla 11-3.

Tabla 11-3.

Tabla 11-3.

Tabla 11-3.

En el equilibrio de los productos de fermentación formados en estas fermentaciones complejas, no es difícil de

explicar el carbono en los productos formados. Sin embargo, la formulación de un esquema teórico para dar cuenta de

un equilibrio de productos oxidados y reducidos puede ser más difícil. Considere la siguiente ecuación:

444444 glucosa --- →→→→→→ 222222 dededededede etilo glucosa --- glucosa --- glucosa --- glucosa --- glucosa
444444 glucosa --- →→→→→→ 222222 dededededede etilo
glucosa ---
glucosa ---
glucosa ---
glucosa ---
glucosa ---
etilo ++++++ 333333 butirato
etilo
etilo
etilo
etilo
butirato
butirato ++++++ 8CO
butirato
butirato
butirato
8CO
8CO
8CO
8CO 222222 ++++++ 8H8H8H8H8H8H 222222
8CO
Balance
Balance dedededededededededede carbono:
Balance
Balance
Balance
Balance
Balance
Balance
Balance
Balance
Balance
carbono:
carbono: (4(4(4(4(4(4(4(4(4(4(4 ××××××××××× 6)
carbono:
carbono:
carbono:
carbono:
carbono:
carbono:
carbono:
carbono:
6)
6)
6)
6)
6)
6) =========== (2(2(2(2(2(2(2(2(2(2(2 ××××××××××× 2)
6)
6)
6)
6)
2)
2)
2)
2)
2)
2)
2)
2)
2)
2) +++++++++++ (3(3(3(3(3(3(3(3(3(3(3 ××××××××××× 4)
4)
4)
4)
4)
4)
4)
4)
4) +++++++++++ (8(8(8(8(8(8(8(8(8(8(8 ××××××××××× 1)
4)
4)
1)
1)
1)
1)
1)
1)
1)
1)
1)
1) =========== 2424242424242424242424
O-R equilibrio:
O-R equilibrio: 0000000000 ========== 0000000000 ++++++++++ 3333333333 (((((((((( ---------- 2)
O-R equilibrio:
O-R equilibrio:
O-R equilibrio:
O-R equilibrio:
O-R equilibrio:
O-R equilibrio:
O-R equilibrio:
O-R equilibrio:
2)
2)
2) ++++++++++ 8888888888 (2)
2)
2)
2)
2)
2)
2)
(2)
(2)
(2)
(2)
(2)
(2)
(2)
(2) ++++++++++ 8888888888 (((((((((( ---------- 1)
(2)
1)
1)
1)
1)
1) ========== 16161616161616161616 ---------- 14141414141414141414
1)
1)
1)
1)

Los átomos de balance de carbono, pero hay un déficit de algún producto reducida. En la mayoría de las fermentaciones

clostridiales hay una formación compensatoria de pequeñas cantidades de varios productos reduce como se muestra en

la Tabla 11-3. La producción de estos compuestos parece ser necesario debido a la condensación de 2 moles de

acetil-CoA para formar acetoacetil y la posterior conversión a la acetona a través de los resultados de acetoacetato

descarboxilasa en una fuerte disminución en el número de aceptores de hidrógeno disponible. Acetil-CoA puede actuar

como un aceptor de hidrógeno, dando lugar a etanol, y acetona se puede reducir adicionalmente a isopropanol. En

fermentaciones que muestran la mejor O-R equilibrio, etanol, acetoína, y

2,3-butanodiol se encuentran entre los productos finales fi nales.

  • 424 VÍAS DE FERMENTACIÓN

La ecuación general para butirato de mezclado, acetona, y la fermentación del etanol puede dar cuenta tanto

para el carbono y el resto O-R:

dodo 66 butirato dedededededede (C(C(C(C(C(C(C 4) butirato butirato butirato butirato butirato butirato 4) 4) 4) 4)
dodo 66
butirato dedededededede (C(C(C(C(C(C(C 4)
butirato
butirato
butirato
butirato
butirato
butirato
4)
4)
4)
4) +++++++ 2C2C2C2C2C2C2C 1+1+1+1+1+1+1+ 2H2H2H2H2H2H2H 2222222
4)
4)
dodo 66
acetona
acetona
acetona
acetona
acetona (C(C(C(C(C(C(C(C 3)
acetona
acetona
acetona
3)
3)
3)
3) ++++++++ 3C3C3C3C3C3C3C3C 11111111 ++++++++
3)
3)
3)
2H2H2H2H2H2H2H2H 22222222
dodo 66
22222222 etanol
etanol
etanol (C(C(C(C(C(C(C(C 2)
etanol
etanol
etanol
etanol
etanol
2)
2)
2)
2)
2)
2) ++++++++ 1C1C1C1C1C1C1C1C 11111111 ++++++++ 2H2H2H2H2H2H2H2H 22222222
2)
RED:
RED:
RED: 3C3C3C 666
dodododododododododododododo 44444444444444 ++++++++++++++
dodododododododododododododo 33333333333333 ++++++++++++++ 2C2C2C2C2C2C2C2C2C2C2C2C2C2C 22222222222222 ++++++++++++++ 7C7C7C7C7C7C7C7C7C7C7C7C7C7C 11111111111111 ++++++++++++++ 6H6H6H6H6H6H6H6H6H6H6H6H6H6H 22222222222222 (((((((((((((( balance
balance
balance
balance
balance dededededededededededededede carbono:
balance
balance
balance
balance
balance
balance
balance
balance
balance
carbono:
carbono:
carbono:
carbono:
carbono:
carbono:
carbono:
carbono:
carbono: 1818181818181818181818181818 ============== 18)
carbono:
carbono:
carbono:
carbono:
18)
18)
18)
18)
18)
18)
18)
18)
18)
18)
18)
18)
18)
O: 00
O:
((((((((((( ----------- 1)
1)
1) +++++++++++ ((((((((((( ----------- 2)
1)
1)
1)
1)
1)
1)
1)
1)
2)
2)
2)
2)
2) +++++++++++ 22222222222 ((((((((((( ----------- 2)
2)
2)
2)
2)
2)
2)
2)
2)
2)
2)
2)
2)
2)
2)
2) +++++++++++ 77777777777 (2)
(2)
(2)
(2)
(2) +++++++++++ 66666666666 ((((((((((( ----------- 1)
(2)
(2)
(2)
(2)
(2)
(2)
1)
1)
1)
1)
1)
1)
1)
1)
1)
1) =========== 1414141414141414141414 ----------- 1414141414141414141414 =========== 00000000000

Generalmente, se formarán pequeñas cantidades de productos, ya sea oxidado o reducido para proporcionar un

equilibrio de los productos oxidados y reducidos. Los valores de oxidación se dan en la Figura 11-1. Los ejemplos

representativos de acetona-butanol y fermentaciones-disolvente mixto se muestran en la Tabla 11-3.

Formiato se produce en relativamente pocas de estas fermentaciones. Aunque el dióxido de carbono y gas de

hidrógeno se producen como en la fermentación de organismos gram-negativos,

en clostridios y otros anaerobios de hidrógeno se forma a través de una

piruvato: ferredoxina (Fd) oxidorreductasa sin la producción intermediario de formiato. La ferredoxina

reducida se convierte en hidrógeno por hidrogenasa:

piruvato piruvato piruvato piruvato piruvato piruvato +++++++ FdFdFdFdFdFdFd --- piruvato --- --- --- --- --- →→→→→→→
piruvato
piruvato
piruvato
piruvato
piruvato
piruvato +++++++ FdFdFdFdFdFdFd ---
piruvato
---
---
---
---
--- →→→→→→→ acetil-CoA
---
acetil-CoA
acetil-CoA
acetil-CoA +++++++ COCOCOCOCOCOCO 2222222 +++++++ FdH
acetil-CoA
acetil-CoA
acetil-CoA
FdH
FdH
FdH
FdH
FdH
FdH +++++++ HHHHHHH +++++++ FdH
FdH
FdH
FdH
FdH +++++++ HHHHHHH +++++++ ---
FdH
FdH
---
---
---
--- →→→→→→→ MARIDO
---
---
MARIDO
MARIDO
MARIDO
MARIDO
MARIDO
MARIDO
22 ++ fdfd
El flujo
El flujo dedede electrones
El flujo
electrones
electrones dedede NADH
NADH aaa FDH
NADH
FDH aaa HHH 222 explica por qué estos organismos producen grandes cantidades
FDH
explica por qué estos organismos producen grandes cantidades
explica por qué estos organismos producen grandes cantidades
dededede HHHH 2222 yyyy nononono consumen
consumen HHHH 2.
consumen
consumen
2.
2.
2.

Una enzima que contiene dos FeFeFeFeFe 44444 SSSSS 44444 racimos cataliza lalalalala oxidación

Una enzima que contiene dos

Una enzima que contiene dos

Una enzima que contiene dos

Una enzima que contiene dos

racimos cataliza

racimos cataliza

racimos cataliza

racimos cataliza

oxidación

oxidación

oxidación

oxidación dedededede piruvato

piruvato aaaaa acetil-CoA, dióxido dedededede

piruvato

piruvato

piruvato

acetil-CoA, dióxido

acetil-CoA, dióxido

acetil-CoA, dióxido

acetil-CoA, dióxido

ferredoxina reducida. Ferredoxina también contiene dos

ferredoxina reducida. Ferredoxina también contiene dos

ferredoxina reducida. Ferredoxina también contiene dos

ferredoxina reducida. Ferredoxina también contiene dos

simetría

simetría

simetría

simetría

carbono, yyyyy ferredoxina reducida. Ferredoxina también contiene dos FeFeFeFeFe 44444 SSSSS 44444 agrupaciones dispuestas enenenenen simetría

carbono,

carbono,

carbono,

carbono,

agrupaciones dispuestas

agrupaciones dispuestas

agrupaciones dispuestas

agrupaciones dispuestas

aproximadamente dos veces dentro de la proteína ferredoxina. Hydrogenases que resultan en la producción de

gas dedede hidrógeno contienen enzimas irononly. los

gas

gas

hidrógeno contienen enzimas irononly. los C.

hidrógeno contienen enzimas irononly. los

C.

C.

pasteurianum enzima

pasteurianum

pasteurianum

enzima contiene cinco categorías diferenciadas

enzima contiene cinco categorías diferenciadas

contiene cinco categorías diferenciadas

dedededededededede hierro-azufre unidos covalentemente

hierro-azufre unidos covalentemente

hierro-azufre unidos covalentemente

hierro-azufre unidos covalentemente

hierro-azufre unidos covalentemente

hierro-azufre unidos covalentemente

hierro-azufre unidos covalentemente

hierro-azufre unidos covalentemente

proteína. una

proteína. una

proteína. una

proteína. una

proteína. una

proteína. una

proteína. una

proteína. una

hierro-azufre unidos covalentemente aaaaaaaaa lalalalalalalalala proteína. una FeFeFeFeFeFeFeFeFe 222222222 SSSSSSSSS 222222222 cluster

cluster

cluster

cluster

cluster

cluster

cluster

cluster

cluster yyyyyyyyy tres

tres FeFeFeFeFeFeFeFeFe 444444444 SSSSSSSSS 444444444 racimos transferir electrones

tres

tres

tres

tres

tres

tres

tres

racimos transferir electrones

racimos transferir electrones

racimos transferir electrones

racimos transferir electrones

racimos transferir electrones

racimos transferir electrones

racimos transferir electrones

racimos transferir electrones

al centro de hidrógeno, el sitio catalítico presunta de la enzima. El centro de hidrógeno se compone de un grupo

de seis de hierro y un subgrupo de dos hierro unido a monóxido de carbono y / o cianuro. La disposición del hierro

(Fe) y átomos de azufre (S) en el cluster de cuatro hierro se muestra en la Figura 11-5.

Producción dedede ácido acético aaa partir

Producción

Producción

ácido acético

ácido acético

partir dedede glucosa por C. thermoaceticum sesese eee fififi ciente

partir

glucosa por

glucosa por

C.

C.

thermoaceticum

thermoaceticum

ciente

ciente enenen que

que 333 moléculas

que

moléculas dedede

moléculas

etilo se producen por molécula de glucosa. Esto se consigue mediante una nueva serie de reacciones que implica

la síntesis de acetato de dióxido de carbono:

dodododododo 666666 MARIDO MARIDO MARIDO MARIDO MARIDO EMP 2CH 2CH 2CH 2CH 2CH 3333333 COOH 2CH
dodododododo 666666 MARIDO
MARIDO
MARIDO
MARIDO
MARIDO
EMP
2CH
2CH
2CH
2CH
2CH 3333333 COOH
2CH
2CH
COOH
COOH
COOH
COOH
COOH +++++++ 2CO