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CARÁCTER ANFOTÉRICO Y PUNTO ISOELÉCTRICO DE AMINOÁCIDOS

RESUMEN
Los aminoácidos son moléculas orgánicas las cuales permite la unión entre sí para formar
un enlace amida conocido como enlace peptídico. Todos los aminoácidos componentes
de las proteínas son L-alfa-aminoácidos. Durante el desarrollo de la práctica se
desarrollaron dos titulaciones con diferentes aminoácidos, como es el caso de la Alanina y
la Lisina, las cuales sirvieron para analizar el comportamiento de estos, en medios
acuosos y con variación diferentes de pH que permitieron evidenciar el comportamiento
tampón de estos dos aminoácidos.

INTRODUCCIÓN principalmente como un ion dipolar neutro
(zwitterion).2
Todas las proteínas están constituidas por
aminoácidos unidos en una secuencia
lineal mediante un tipo específico de
enlace covalente (enlace peptídico)
formado entre el grupo amino de un
aminoácido (—NH2) y el grupo carboxilo
(—COOH) del aminoácido precedente. A
partir de estas combinaciones, las células
tienen la capacidad de sintetizar proteínas,
como anticuerpos, enzimas, hormonas,
proteínas estructura- les y más. Todos los
aminoácidos que se hallan en las
proteínas son alfa aminoácidos; es decir,
en todos ellos el carbono α (alfa) es
asimétrico y está unido a cuatro grupos
diferentes: el grupo carboxilo, el grupo
amino, un grupo R y un átomo de H.
Todos los aminoácidos de las proteínas
tienen configuración L y difieren entre sí
por la estructura de sus cadenas laterales
o grupos R. 1
En disolución ácida, el aminoácido es
TABLA 1.Estructura de los aminoácidos mas
protonado y existe principalmente como un
comunes
catión. En disolución básica, el aminoácido
es desprotonado y existe principalmente Este pH se llama punto isoeléctrico (pI) del
como un anión. Entre las dos está a un pH aminoácido y tiene un valor de 6.01 para la
intermedio en el que el aminoácido está alanina. Más específicamente, el pI de
balanceado exactamente entre las formas cualquier aminoácido es el promedio de las dos
aniónica y catiónica y existe constantes ácidas de disociación que
involucran al ion dipolar neutro. 2

La primera con HCl 0.05M y solución acida de HCl 0. 𝑂𝑂𝑂𝑂5 Moles 1000 en dos partes. En el cual se utilizó inicialmente alícuotas de 0.0002 0.0004 0. Gráfico de la curva de titulación obtenida para la alanina con Luego se realizaron dos titulaciones a la solución 0. Valores de pKa de los NaOH se encuentran en la tabla 3.05M a la cual se le aplicaron primeramente alícuotas de 0. aminoácidos. RESULTADOS Y ANÁLISIS Para el caso de la titulación de la L-alanina los valores obtenidos para el ácido HCl y la base TABLA 2. luego alícuotas de 0.0006 0.05M. parte de la práctica se tomaron soluciones acuosas 0.05M Tabla 3. en donde la primera parte se realizó un trabajo teórico en casa.05 Para el desarrollo de la práctica se dividió 1𝑚𝐿 ∗ = 0. FIG1. solución.1 ml después se usaron alícuotas de 0. el Seguidamente de obtener las moles se cual fue indispensable para realizar la realizaron los cálculos pertinentes para el parte experimental.05M en un vaso de precipitado de 50mL.5 ml y por ultimo de 1ml hasta completar la titulación.5 mL y la segunda HCl .2 mL hasta completar 1 Ml. con NaOH 0. Con los valores obtenidos en la titulación se hicieron los cálculos de la concentración de H+ del ácido HCl: METODOLOGIA 0.0008 uso de pH-metro para iniciar con la Equivalentes de H+ medición de pH inicial de la solución.5 ml hasta llegar a un (pH) de 11. Titulación de la L-alanina con NaoH y usando alícuotas de 0. Titulación de aminoácido L-lisina En este caso tomaron 5mL de l-lisina para la titulación.35 y de 1ml para finalizar.05M de los aminoácidos L-alanina y L-lisina pH vs Equivalentes de H+ 8 Titulación de aminoácido L-alanina 6 pH Para el desarrollo de la titulación se 4 tomaron 5 mL de la solución acuosa del 2 aminoácido L-alanina 0. Para la segunda desarrollo de la gráfica de la titulación. esto para tener un conjunto de datos más completo a la hora de graficar. Seguidamente 0 se atendieron las indicaciones para el 0 0.

233 6 1.8 8.5 1.719 7.5 2.976 5 1.001 9.59 10.776 11.553 figura 2.699 10.5 1.0005 0.5 9.955 procedimiento de la titulación con HCl pero 0.887 La Unión de estas dos graficas estaría 15 11.Vln de Vln de NaOH pH Para el caso de la L-alanina titulada con NaOH HCL pH 0.61 la base.845 14 4.767 1 2.489 gobernada por dos sitios en los cuales el 16 11.4 8.5 3.65 0 9 11.364 0.53 3. 18 11.999 .732 4.372 6.754 hallando los equivalentes de OH presentes en 1 9.534 7 1.5 9.679 8.5 11.244 2.078 pH VS Equivalentes de 3.5 1.54 y solución básica de NaOH 0.928 12.732 11 1.439 2 9.05M.919 1.591 4 2.5 9.05M 12 11.6 8. Gráfico de la curva de titulación 11 11.564 Fig2.5 11.683 8 11.952 5 10.5 9.853 12 1.2 8.5 2. 1.238 2.098 5.201 2 8.971 aminoácido presenta comportamiento de 17 11.58 9.5 1.5 1. 13 11.5 2.05 2 2.5 1.379 3 2.5 1.139 la gráfica obtenida se puede observar en la 0.531 14 11.888 12 5.5 2.5 10.01 OH 4 9.754 6 7 10.519 13 1.49 0 0.618 Equivalentes de OH- 10 11.745 7.783 8 pH 6. para la cual se hizo el mismo 0.646 10 1.388 9 1.986 tampón como se observa el figura 3.5 10.839 10 6 10.55 obtenida para la alanina con solución 0.5 10.5 1.5 11.995 4 8 1.177 3 9.

5 9.1 7.612 (zwitterion) podemos observar que el 0. actúa químicamente como una base.8 8.4 7. Titulación de la L-lisina con NaOH protonado (-NH3+).285 pH básico. Para el caso de la primera parte de la titulación el grupo carboxilo del aminoácido tiene un valor aproximados Fig 4.9 8.2 7.5 7.60 (pK2) el carboxilo 0.5 8.116 se tituló la lisina. al igual que la arginina esto se debe a que tiene una cadena lateral la cual contiene un grupo amino protonable que por lo general participa en puentes de hidrógeno y como base general en catálisis3.214 queda con una carga negativa neta y un 1 8.012 • A partir de pH 9. que es un aminoácido 3. Fig3.284 simultáneamente positiva y negativa 0.6 8. 1. Molécula de la Lisina de pKa de 2.594 2 8. Vln de OH pH Cuando el aminoácido tiene una carga 0.26 el cual presenta tres pka diferentes y .34 (pK1) el carboxilo se disocia (-COO-) y el amino sigue Tabla 4.757 aminoácido tiene un punto de 0. En la figura 4 se puede observar la estructura de la lisina en la cual se evidencia los dos grupos aminos.943 La segunda parte de la experimentación 3 9.789 Titulación de a Lisina 2.165 pierde el protón (-NH2).5 8.862 equivalencia al cual se le conoce como punto isoeléctrico en el cual la carga 0. Es decir encuentran en la tabla 4.7 8.943 neta es igual a cero.3 7.34 el cual al aumentar el pH se desprotona obteniéndose una Para el caso de la titulación de la L-lisina los mezcla del aminoácido protonado y valores obtenidos para el ácido NaoH se desprotonado en el carbonilo.105 sigue disociado (-COO-) y el amino 0. que a partir de pH 2. El aminoácido 0. 0. Curva de calibración de la alanina al aumentar la concentración de OH.

5 11. 8. 4 9. el aminoácido es 10 11.872 La representación gráfica de la lisina 5 10.669 Para el caso de la lisina el punto isoeléctrico 15 11. Gráfico de la curva de titulación Para un pH ácidos el NH2 capta un protón obtenida para la lisina con solución NH3+ (el pka para este radical es 9) y En pH .5 10.16 y pK 10.5 11. Equivalenes de OH- Fig 4.853 taponamiento en el pKa 9.443 aminoácido en cada rango de pH y la carga 7. 3 14 11.749 es de 9.064 disolución básica.74 debido a su carácter básico y se 16 11. 12 .982 aminoácidos están protonados y en 9.806 pude observar los dos puntos cercanos de 17 11.00003 amino de los 20 aminoácidos.883 Cabe recalcar que en disolución ácida. se presentan ionizados o 8 protonados. actuando los dos como donantes pH 6 o aceptores de protones. los 9 10.251 un anión.6 involucran al ion dipolar neutro.5 10. Estos radicales.00001 0.493 las dos constantes ácidas de disociación que 13 11.5 10. 18 11.352 de cualquier aminoácido es el promedio de 12 11.05M. al estar en contacto 10 con el agua. el pI 11 11.271 zona tampón.773 del pH.05M y solución básica de NaOH 0.654 eléctrica del aminoácido encada rango 8 10. Cuando ese tiene carga cero.5 10. 4. 4 ¿En qué rangos de pH? Argumente su 2 respuesta.99 CUESTIONARIO Luego de hacer los cálculos pertinentes se graficó el pH con los equivalentes de ¿Pueden comportarse los aminoácidos como OH.14 los pK de los grupos ionizabes que en este caso se localizan en el punto medio de la 6 10.153 desprotonado y existe principalmente como 10.00002 0.5 9.882 20 11.411 Además las formas ionizables del 7 10.396 0.049 proporciona información sobre la medida de 5. 6. un buffer intracelular? ¿Por qué? Los aminoácidos tienen carácter anfótero PORQUE pueden ceder protones y también pH vs Equivalentes OH captarlos ya que poseen radicales comunes en todos los aminoácidos: el grupo NH2 y el 14 grupo COOH. Tenga en cuenta el rango de 0 valores del pKa de los grupos carboxilo y 0 0.67.

aminoácidos R(Argenina).básicos El COOH pierde un protón: Para calcular el PI del péptido primeramente COO. COO. en el cual radicales amino desprotonados (NH2). L-leucina). es decir donde la sustancia estaba protonados (NH3+) y el otro 50 % de cargada o poseía diferentes pKa.36 y 4. E- Glutamato.metro se pudo amortiguador.con pk de 4. 50 % de radicales carboxilo desprotonados (COO-). . ¿Cómo separaría los aminoácidos R. En el punto de pKa del grupo amino seguidamente se observaron os sitios de existe el 50 % de radicales amino interés. H(Histina). D y E de una mezcla a pH 7? tiene la capacidad de donar o aceptar Para hacer la separación se necesitó protones gracias a sus grupos amino y conocer los diferentes pk de los carboxilo. Haciendo los análisis ya que cerca de estos puntos los pertinentes se pudo observar que la aminoácidos presentan carácter tampón. 3. Argenina en pH 7 presenta una carga que son importantes para la neta de +1 el cual en presencia de neutralización y utilización de procesos electroforesis su corrimiento es rápido biológicos. mientras que a Histina en un pH 7 tiene  El comportamiento zwitterion del un carga neta de cero e cual va a aminoácido se puede observar generar muy poco movimiento el cual notoriamente al agregar equivalentes de con lleva una mala separación.35 el péptido tiene un carga neta cero el cual utilizando la formula En el punto de pKa para el grupo 𝑝𝐾𝐴1+𝑝𝐾𝐴2 carboxilo existe el 50 % de radicales PI = se pudo obtener que el valor 2 carboxilo protonados (COOH) y el otro del punto isoeléctrico es igual a 3. Calcule el PI del péptido N-E-A-L.(el pKa para este radical es 2). como lo son los pka en pH 7.8.  Las curvas de titulación muestran los D(Aspartato) y E(Glutamato) y puntos más sobresalientes en la reacción analizarlos cuando la mezcla estuviera de los aminoácidos. A. solución de aminoácido L-alanina que H. se pudo observar 3 puntos de interés NH3+ con un pk de 8. Por lo tanto. En este nivel de CONCLUSIONES pH el aminoácido también es buen  Utilizando el pH. si que se agregaba equivalentes de OH se adicionamos NaOH a la solución. ya que cerca al punto isoeléctrico la casa del Aspartato y Glutamato en pH 7 variación de pH es aproximadamente poseen una carga neta de -1 el cual en superior e inferior a uno con solo agregar la separación va hacer que fluya un ml en ambos casos. Alanina. comprobar el carácter anfótero de la 2.35 y un grupo COOH con pK de 2. se desarrolló el enlace peptídico de los aminoácidos mencionados (N-Asparagina. Para el OH. es pudo observar la desprotonación y la carga mínima. en este punto la neta en cada punto dando como resultado capacidad amortiguadora es máxima. rápidamente hacia cátodo. la variación de pH. final que entre 2.36.36 e cual a medida En este punto.

Quinta edición. BRUICE. QUÍMICA [1] ZÁRATE. CARLOS. ORTUÑO. QUÍMICA ORGÁNICA. MC GRAW HILL. 2008. PEARSON. CENGAGE learning SAHAGÚN. ORGÁNICA. Santa Barbara. DANIEL 7a. edición. 2009.. JOHN. [2] YURKANIS.2008. BEAS. . BIBLIOGRAFÍA [3] MCMURRY. PAULA. BIOLOGÍA MOLECULAR FUNDAMENTOS Y APLICACIONES. University of California.