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Objetivos

Aprender la manera ms adecuada y segura de cmo se preparan los medios de cultivo


Conocer los medios de cultivos utilizados en los diferentes microorganismos

III. PROCEDIMIENTOS

a) Materiales:

Materiales y/o equipos Imagen

Pabilo

Autoclave

Agua destilada

Balanza analtica
Espatula

Medios

b) Tcnica
Para esta practica cada grupo de trabajo se encargo de la preparacin de un
cultivo, eso depender de cuantos tubos de ensayo tenga cada grupo
Para la preparacin se seguirn los mismos pasos para todos los cultivos

Pesar la cantidad del medio indicada (LIA., MaccKonkey, ,citrato de simons) en un


pedazo de papel aluminio.

Disolver el medio de cultivo, agregar el volumen de agua destilada necesaria en


una botella de vidrio, se recomienda que sea en dos partes, primero la mitad del
volumen y luego la otra mitad asi los restos que hayan quedado adheridas en la
pared interna de la botella se desprendan

Cerrar la botella de vidrio, para homogenizar la solucin hacer giros circulares la


base

Llevar el medio preparado a ebullicin por 15 min, dejar enfriar el medio para
evitar que se formen gotas de agua.

Encender el mechero, para que nuestro medio de trabajo este esteril.

Flameando previamente la boca de la botella se agrega a cada tubo ensayo que se


encuentra cerca del mechero, tapar inmediatamente y hacer un capuchn con
papel aluminio.
Dejar enfriar el cultivo a temperatura ambiente.

Practica 6

INTRODUCCION

Para realizar el estudio de los microorganismos, se han diseado diversos


mtodos que permiten cultivarlos bajo condiciones artificiales, en los que es
posible cultivarlos bajo condiciones experimentales y manejar un solo tipo de
microorganismos.

Una de las tcnicas ms usadas en el laboratorio de microbiologa consiste en


transferir una muestra microbiolgica de un ambiente determinado a un medio
de cultivo, lo que permite obtener cultivos microbianos. Al hacer este
procedimiento, es necesario considerar que en el rea de trabajo existen
muchos otros microorganismos; debido a esto, es necesario tomar precauciones
para impedir que stos lleguen a penetran y contaminen los cultivos en estudio
y nuestra rea de trabajo. La aplicacin de estos procedimientos ha permitido
propagar a los microorganismos en cultivos mixtos, as como su aislamiento y
la obtencin de cultivos puros, facilitando de este modo, el estudio,
caracterizacin, aplicacin y control de los mismos. La forma de sembrarlos y
cultivarlos depende del tipo de microorganismo y propsito especfico del
estudio.

La manera de cultivar en los tubos de ensayo son comunmente de forma liquida


estos luego son colocados en angulo para que se enfrien y solidifiquen. El
inoculo se siembra de dos maneras inoculo en profundidad (vertical) e inoculo
en superficie (zigzag)

1.- cuales pueden son los problemas que se pueden presentar durante la
preparacion y manipulacion de los medios de cultivos?

Si bien sabemos un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de


crecimiento y otros componentes que crean las condiciones necesarias para el
desarrollo de microoganismos es por ello debemos tener una adecuada
preparacion y manipulacion de los medios de cultivos

- Los materiales que utilicemos no esten esteriles, para el estudio de una


bacteria es necesario destruir todos aqullos miroorganismos presentes.
- Que el inoculo no se contamine modifique o destruya
- Que las condiciones durante el trabajo con el cultivo sean esteriles
2.-Cuales son los metodos de conservacion de los medios de cultivo?

Los metodos de conservacion de cultivos son:

LARGO PLAZO

Congelamiento (crioconservacion)

Crioconservacin es la conservacin de material biolgico a muy bajas


temperaturas

Rango -20 C a -196 C (nitrgeno lquido)

El nitrgeno lquido es la temperatura prctica mas baja disponible. A la


temperatura de equilibrio, la difusin molecular es extremadamente
lenta y la probablilidad de que ocurran reacciones qumicas es
prcticamente nula

Deshidratacion :
Este mtodo implica la remocin de agua de las clulas (humedad final
tpica: 0.06-5.0 % de agua).

La deshidratacin puede llevarse a cabo desde la fase lquida (L-drying)


o por sublimacin desde el estado congelado (liofilizacin)

Las prdida de viabilidad durante la deshidratacin es principalmente


atribuida a alteraciones de la membrana celular.

Las clulas deshidratadas son susceptibles al deterioro causado por


oxgeno

El deterioro de las clulas durante la deshidratacin puede ser


controlado por el agregado de aditivos. Algunos forman una matriz
amorfa que dispersa los componentes txicos que la clula puede liberar
durante el secado. Otro protectores interactan con las membranas,
estabilizando su estructura en el estado anhidro

Los aditivos mas comunes son: leche descremada, aminocidos


(glutamato) y azcares (sacarosa, trealosa)

MEDIANO PLAZO

Desecacion en papel filtro

Se utiliza un papel bastante absorbente que se inpregna con una


solucion muy densa de celulas
se deja secar al aire en condiciones esteriles

Desecacion en suelo, arena, silica gel.


Se aaden las celulas a estos sustratos que las protegeran al desecar
Los microorganismos productores de esporas se pueden conservar
durane bastante tiempo por este metodo.
Desecacion en bolitas de alginato

Este es un procedimiento bastante eficaz.


Las celulas se encuentran en una matriz de alginato y la eliminacion de
agua se hace por tratamiento con soluciones hipertonicas sucesivas y
posteior desecacion al aire hasta que se pierde un 70% de su contenido
CORTO PLAZO
La cepa microbiana se guarda en forma de cultivo activo en el medio de
cultivo en el que ha crecido, Sin embargo, estas celulas no pueden
permanecer indefinidamnete en el mismo tubo, porque al seguir activas
excretan productos toxicos del metabolismo que se acumulan,
provocando el envejecimiento y muerte celulares, por lo que es necesario
transferirlas a otro tubo con medio de cultivo fresco.

http://www.academia.edu/INFORME_7_CULTIVO_DE_MICROORGANISMOS

1. Garca MD, Uruburu F. La conservacin de cepas microbianas . Act SEM.


2000;30:12-6.
2. Castro G, Hernndez JT, Aquino C. Manual sobre conservacin de
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de Ciencias Biolgicas. 2000:21.
3. Floccari M. Mtodos de conservacin de cultivos bacterianos. Rev Arg
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