UNIVERSIDAD DE LA COSTA

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BSICAS

AREA DE MICROBIOLOGIA
FACULTA DE CIENCIAS AMBIENTALES

Dilucin por nmero ms probable

1. Resumen The purpose is to perform an analysis to

La calidad del agua se define como el
conjunto de caracteres fsicos qumicos y
biolgicos que deben satisfacerse con el fin
de que el agua que se suministra sea segura
para el fin destinado.
La contaminacin del agua por materia
fecal es un factor de importancia sanitaria
debido a que las heces contienen una gran
variedad de microorganismos, pudiendo
contener incluso microorganismos
enteropatgenos como bacterias del gnero
Salmonella, Shigella y Vibrio; protozoarios
como Entamoeba histolytica; virus como
enterovirus o de la hepatitis A.
El propsito es realizar un anlisis para
determinar la calidad microbiolgica del
agua mediante un mtodo para la deteccin
y cuantificacin de los microorganismos
coliformes mediante el cultivo en un medio
lquido en varios tubos y el clculo de su
Nmero Ms Probable (NMP).
Palabras claves
Agua, Contaminacin, turbidez, Cultivo,
Diluciones.
Abstrac
Water quality is defined as the set of
physical and biological chemical characters
that must be satisfied in order for the water
supplied to be safe for the purpose intended.
Fecal contamination of water is a factor of
sanitary importance because the feces
contain a great variety of microorganisms,
being able to contain even enteropatgenos
microorganisms like bacteria of the sort
Salmonella, Shigella and Vibrio; Protozoa
such as Entamoeba histolytica; Viruses
such as enterovirus or hepatitis A.
determine the microbiological quality of the
water by a method for the detection and
quantification of coliform microorganisms
by culturing in a liquid medium in several
tubes and the calculation of its Most
Probable Number (MPN).
Key words
Water, Pollution, turbidity, Crop, Dilutions.
Objetivos generales
-Aprender y desarrollar el anlisis de
muestras de aguas (potable y natural)
siguiendo el mtodo de recuento de nmero
ms probable.
Objetivos especficos
-Conocer y comprender las tcnicas de
recuento microbiano.
-Comprender los mtodos y principios para
el manejo de muestras con diluciones.
2.Marco terico
Dilucin bacteriana:
Los mtodos de dilucin son utilizados para
medir la actividad in vitro de un agente
antimicrobiano sobre un microorganismo
especfico, utilizando diferentes
concentraciones del agente y un inculo
conocido de la cepa bacteriana. Las pruebas
pueden ser realizadas por dilucin en caldo
o en agar, de esta forma es posible
determinar la concentracin inhibitoria
mnima (CIM) del antibitico, despus de la
incubacin por 24 horas a 35.
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aceptables tanto para los humanos como

para los organismos acuticos.
Tipos de dilucin:
La tcnica de dilucin por extincin:
3. Materiales y mtodos
Consiste en inocular una serie de frascos
tipo antibitico que contienen 9 ml del Materiales
medio de cultivo apropiado segn el tipo de
-Tubos de ensayo
bacteria que se quiera evaluar. Se obtiene 1
ml de la muestra usando una jeringa -Vasos de Filtracin
descartable, estril, de 1 o 2 ml de
capacidad. Se inocula el primer frasco, sin -Pipetas
retirar la aguja se agita el mismo, se invierte -Medios y caldos de cultivo
y se retira 1 ml que se inocula en el 2
frasco. Con una nueva jeringa, se retira 1 ml -Solucin salina
del frasco N 2, previamente agitado, y se
-Muestras de agua potable
inocula el frasco N 3 y as sucesivamente,
utilizando una nueva jeringa para cada -Muestras de agua natural
frasco.

Calidad del agua.
La calidad de cualquier masa de agua,
superficial o subterrnea depende tanto de
factores naturales como de la accin
humana. Sin la accin humana, la calidad
del agua vendra determinada por la erosin
del substrato mineral, los procesos
atmosfricos de evapotranspiracin y
sedimentacin de lodos y sales, la
lixiviacin natural de la materia orgnica y
los nutrientes del suelo por los factores
hidrolgicos, y los procesos biolgicos en
el medio acutico que pueden alterar la
composicin fsica y qumica del agua.
Por lo general, la calidad del agua se
determina comparando las caractersticas
fsicas y qumicas de una muestra de agua
con unas directrices de calidad del agua o
estndares. En el caso del agua potable,
estas normas se establecen para asegurar un
suministro de agua limpia y saludable para
el consumo humano y, de este modo,
proteger la salud de las personas. Estas
normas se basan normalmente en unos
niveles de toxicidad cientficamente
Mtodos
Mtodo del nmero ms probable NMP.
El mtodo se basa en determinar la
presencia o ausencia (positivo o negativo)
de atributos especficos de
microorganismos en copias obtenidas por
diluciones consecutivas a partir de muestras
liquidas. Se basa en el principio de que una
nica clula viva puede desarrollarse y
producir un cultivo turbio. El NMP requiere
la realizacin una serie de diluciones
seriadas al dcimo de la muestra de cultivo,
en un medio lquido adecuado para el
crecimiento de dicho organismo (Figura 1).
Posteriormente, se incuban las muestras de
dichos tubos problema. Una vez que ha
pasado suficiente tiempo como para que
crezca el microorganismo, se examinan los
tubos.
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cultivo mixto que pueden crecer en un

medio lquido determinado.

Figura 1. Diluciones e inoculacin

Fuente:
http://3.bp.blogspot.com/UeaeTaR6RhA/V
FLEGRPglVI/AAAAAAAAAYc/lxLDnvr
LWl0/s1600/1.jpg
Aquellos tubos que fueron inoculados con
una o ms clulas microbianas a partir de la Tabla 1. Tabla del nmero ms probable
muestra, se pondrn turbios, mientras que
los tubos que no recibieron ninguna clula Fuente:
permanecern transparentes. A medida que http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/demos/
se aumenta el factor de dilucin, se microbiologia/unidades/documen/uni_02/5
alcanzar un punto en el cual algunos tubos 8/texthtml/cap801.htm
contendrn tan slo un organismo y otros,
ninguno. Al determinar la probabilidad de
que los tubos no recibieran ninguna clula,
se puede determinar el nmero ms
probable de microorganismos presentes en
la muestra original, utilizando para ello una
tabla estadstica. La Tabla 1 muestra una
tabla del NMP.

La precisin del nmero ms probable

aumenta con el nmero de tubos que se
4. Analisis de resultados
usan, aunque cinco tubos por dilucin se
consideran como una relacin apropiada Despus de poner en prctica el mtodo del
entre la precisin y la economa. El mtodo nmero ms probable y pasado el tiempo de
del NMP se utiliza para contar incubacin los resultados obtenidos fueron
microorganismos que son difciles de los siguientes.
cultivar en medio slido. Tambin se usa
para determinar el nmero de clulas de un Tub Tub Tub Tub Tub
o1 o2 o3 o4 o5
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Muest + + + + +
ra
Dilucio + + + + + 6.Bibliografia
n 10 a 1. http://3.bp.blogspot.com/-
la -1 UeaeTaR6RhA/VFLEGRPglVI/AA
Dilucio + + + + +
AAAAAAAYc/lxLDnvrLWl0/s160
n 10 a
0/1.jpg
la -2
Tabla 2. Resultados 2. http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/
Fuente: autor demos/microbiologia/unidades/doc
Hfxb m umen/uni_02/58/texthtml/cap801.ht
m
3. http://www.respyn.uanl.mx/viii/3/ar
ticulos/calidad_de_agua.htm
5. Conclusiones:
Aprendimos a realizar pruebas con mtodo 4. http://microbiologia3bequipo5.blog
de recuento de nmero ms probable se spot.com.co/2014/10/dilucion-
basa en determinar la presencia o ausencia bacteriana.html
(positivo o negativo) y tambin 5. http://aprendeenlinea.udea.edu.co/l
determinamos el anlisis de muestras de ms/moodle/mod/page/view.php?id=
aguas (potable y natural) siguiendo el 100909
mtodo de recuento de nmero ms 6. http://www.un.org/spanish/waterfor
probable. Se comprendi las tcnicas de lifedecade/quality.shtml
recuento microbiano y principios para el
manejo de muestras con diluciones.
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