El procesamiento de naranjas produce un aumento en la produccin de subproductos de Citrus, el

ms importante de los cuales es el aceite esencial extrado de la cscara. El aceite esencial de naranja
se utiliza para agregar el aroma naranja de la naranja a los productos tales como bebidas
carbonatadas, helados, tortas, ambientadores y perfumes. Tambin se utiliza por sus propiedades
germicidas, antioxidantes y anticancergenas [2]. El aceite de ctricos est presente en los sacos de
aceite o glndulas oleosas ubicadas a diferentes profundidades en la cscara de la fruta. La
recuperacin del aceite se realiza principalmente mediante prensado en fro de estas peladuras. Sin
embargo, la extraccin simultnea de jugo y aceite es considerada por muchos procesadores de
frutas como econmicamente atractiva [3]. Ninguno de los procesos mecnicos o manuales
utilizados para extraer aceites esenciales de fruta o cscara es capaz de recuperar la cantidad total
de estos derivados importantes. En cualquier caso, es esencial disponer de un mtodo para
determinar el contenido total de aceite esencial de la fruta. Esta informacin es fundamental para
la decisin sobre la calidad de los frutos y la eficiencia de la maquinaria empleada [4]. El aparato de
Clevenger [5] basado en la destilacin es el mejor mtodo para determinar el contenido de aceite
esencial de la fruta. En general, un procedimiento analtico para el aceite esencial de frutas o
cscaras de naranja comprende dos etapas: extraccin (hidro-destilacin o destilacin de vapor) y
anlisis (cromatografa de gases (GC), cromatografa de gases acoplada a espectrometra de masas
(GC-MS)). Aunque el segundo paso es slo 15-30 minutos, la extraccin dura varias horas. La
extraccin se hace frecuentemente mediante un calentamiento prolongado y agitacin en agua
hirviendo. La energa de microondas, con una frecuencia de 2,45 GHz, es bien conocida por tener
un efecto significativo sobre la velocidad de diversos procesos en la industria qumica y alimentaria.
Se ha prestado mucha atencin a la aplicacin de calor dielctrico de microondas en la qumica
analtica debido a la reduccin del tiempo de anlisis, simplificacin de la manipulacin y el trabajo,
y una mayor pureza del producto final [6 - 8]. Varias clases de compuestos como aceites esenciales,
aromas, pesticidas, fenoles, dioxinas y otros compuestos orgnicos han sido extrados
eficientemente de una variedad de matrices (principalmente suelos, sedimentos, tejidos animales,
alimentos y materiales vegetales). Todas las aplicaciones informadas han demostrado que la
extraccin-disolvente asistida por microondas (MAE) es una alternativa viable a las tcnicas
convencionales para tales matrices. Los principales beneficios son la reduccin del tiempo de
extraccin y del disolvente utilizado. Hasta ahora, sin embargo, slo hay unos pocos artculos en la
literatura que han informado de la aceleracin de la extraccin de aceite esencial por la irradiacin
de microondas [9 - 13]. Las ventajas del uso de energa de microondas, una fuente de calor sin
contacto, para la extraccin de aceites esenciales de materiales vegetales podran incluir:
calentamiento ms eficaz, transferencia de energa ms rpida, gradientes trmicos reducidos,
calentamiento selectivo, tamao reducido del equipo, respuesta ms rpida al calentamiento del
proceso control, arranque ms rpido, aumento de la produccin y eliminacin de los pasos del
proceso [14]. El objetivo de este trabajo fue presentar una destilacin de Clevenger de microondas
mejorada para la extraccin de aceites esenciales de cscaras de naranja (Citrus sinensis L. Osbeck,
Rutaceae), y comparar los resultados con los obtenidos por la tcnica convencional, para introducir
esta ventaja alternativa en el anlisis de aceites esenciales en la industria agroalimentaria.
2. Experimental

2.1. Plantas de material

Las naranjas utilizadas en este estudio fueron Citrus sinensis L. Osbeck de Valencia tardo cultivar.
Todos los frutos se obtuvieron de la misma plantacin experimental Institut Technique de
l'Arboriculture Fruitiere (ITAF), situada en la regin de Mitidja, a 40 km al sur de Argel (Boufarik,
Argelia). Las naranjas fueron peladas a mano, separando la parte externa de la naranja (flavedo),
dando un rendimiento de 20% (p / p) de cscara de naranja con respecto a la fruta entera. Se emple
material vegetal fresco en todas las extracciones. El contenido de humedad inicial de la cscara de
naranja fue del 90%.

2.2. Aparato y procedimiento de Clevenger de microondas

La destilacin acelerada de microondas MAD se realiz utilizando el horno de microondas "DryDist"

ilustrado en la Fig. 1 [15]. Se trata de un reactor de microondas multimodo de 2,45 GHz con una
potencia mxima suministrada de 1000 W variable en incrementos de 10 W. La temperatura fue
monitorizada por un sensor infrarrojo externo (IR). Sobre la base de un principio relativamente
simple, este mtodo implica la colocacin de cscaras de naranja en el reactor de microondas, sin
ningn disolvente o agua aadida. El calentamiento interno del agua in situ dentro de las cscaras
de naranja distende las glndulas y sacos de aceite y conduce a la ruptura de las glndulas y
receptculos oleferos. Este proceso libera as el aceite esencial, que es evaporado por el agua in
situ del material vegetal. Un sistema de refrigeracin fuera del horno de microondas condensa el
destilado continuamente. El agua en exceso se refluy al recipiente de extraccin con el fin de
restaurar el agua al material vegetal. El MAD no es una extraccin asistida por microondas
modificada (MAE), que utiliza disolventes orgnicos, ni una hidro-destilacin modificada (HD) que
utilizan una gran cantidad de agua. En un procedimiento de MAD tpico realizado a presin
atmosfrica, se calentaron 200 g de cscaras de naranja frescas usando una densidad de potencia
fija de 1 W g-1 (200W) durante 30 min sin adicin de disolventes o agua. La extraccin se continu
a 100 C hasta que no se obtuvo ms aceite esencial. El aceite esencial se recogi, se sec sobre
sulfato de sodio anhidro y se almacen a 4 C hasta su utilizacin. Las extracciones se realizaron al
menos tres veces, y se informaron los valores medios.

2.3. Aparato y procedimiento convencionales de Clevenger o Hydro-distillation

200 g de cscara de naranja fresca se sometieron a hidrodestilacin con un aparato de tipo

Clevenger [5, 16] de acuerdo con la Farmacopea Europea, y se extrajeron con 2 l de agua durante 3
h (hasta que no se obtuvo ms aceite esencial). Se recogi el aceite esencial, se sec bajo sulfato
sdico anhidro y se almacen a 4 C hasta su utilizacin. Las extracciones se realizaron al menos
tres veces, y se informaron los valores medios.

2.4. Cromatografa de gases

Se utiliz un sistema de GC Hewlett-Packard 6890 para anlisis de cromatografa de gases, equipado

con una columna capilar de slice fundida con una fase estacionaria apolar HP5MSTM (espesor de
pelcula de 30 m x 0,25 mm x 0,25 m). La temperatura de la columna avanza de 60 a 280 C a 2 C
min-1. La inyeccin se realiz a 250 C en el modo sin divisin; Se inyect 1 L de muestra. Se utiliz
un caudal de 0,3 ml / min de gas portador (N _ {2}). La deteccin de ionizacin de llama se realiz a
320 C.

2.5. Identificacin de cromatografa de gases por espectrometra de masas

Los aceites esenciales se analizaron mediante cromatografa de gases acoplada a espectrometra de

masas (GC-MS) (sistema computarizado Hewlett-Packard que comprenda un cromatgrafo de
gases 6890 acoplado a un espectrmetro de masas 5973A) usando una columna capilar de slice
fundida con una fase estacionaria apolar HP5MSTM 30 m 0,25 mm x 0,25 m de grosor de pelcula).
Los espectros de GC-MS se obtuvieron usando las siguientes condiciones: gas portador He; caudal
0,7 ml min - 1; split 1:20; volumen de inyeccin 0,1 L; temperatura de inyeccin 250 C; progreso de
la temperatura del horno de 60 a 280 C a 2 C min-1; el modo de ionizacin utilizado fue el impacto
electrnico a 70 eV.

2.6. Anlisis cualitativos y cuantitativos

La mayora de los constituyentes se identificaron tentativamente mediante la comparacin de sus

ndices de retencin de GC Kovats (RI), determinados con referencia a una serie homloga de n-
alcanos C5-C28 y con los estndares autnticos disponibles en el laboratorio de los autores. La
identificacin se confirm cuando fue posible mediante la comparacin de sus patrones de
fragmentacin espectral de masa con los almacenados en la base de datos MS (Instituto Nacional
de Estndares y Tecnologa y bibliotecas Wiley) y con datos de la literatura de espectros de masas
[17, 18]. Las concentraciones relativas de los componentes se obtuvieron directamente de las reas
de pico de GC obtenidas con GC-FID.

2.7. Evaluacin olfativa

Los dos aceites esenciales fueron evaluados olfativamente por Jean Claude ELLENA (Perfurmer de
Symrise, Francia).

2.8. Constantes fsicas

Los aceites esenciales de naranja han sido analizados segn el mtodo estndar AFNOR. Las
constantes fsicas habituales que definen el aceite esencial se han determinado a 20 C: gravedad
especfica, ndice de refraccin, rotacin ptica y solubilidad en etanol al 95% [19].

2.9. Micrografas electrnicas de barrido (SEM)

Los especmenes se liofilizaron, se fijaron en el soporte del espcimen con cinta de aluminio y luego
se pulverizaron con oro. Todos los especmenes fueron examinados por un TOPCON ABT60, bajo
condiciones de vaco y voltaje de aceleracin de 15 kV, con un tamao de punto 5 y una distancia
de trabajo de 15 mm.

3. Resultados y discusin

3.1. Rendimiento y tiempo de extraccin

MAD es claramente ms rpido que HD convencional. La extraccin dura 30 min, mientras que 3 h
se requieren por hidro-destilacin. Para HD o MAD, la temperatura de extraccin es igual a la
temperatura de ebullicin del agua a presin atmosfrica (100 C). La Fig. 2 muestra los perfiles de
temperatura durante las extracciones MAD y HD. Para alcanzar esta temperatura de extraccin (100
C) y as obtener la destilacin de la primera gota de aceite esencial, es necesario calentar slo 3
min con MAD, en comparacin con 30 min para HD. Como se muestra en la Tabla 1 y Figura 2, un
tiempo de extraccin de 30 min con MAD proporciona rendimientos comparables a los obtenidos
despus de 180 min por medio de HD, que es uno de los mtodos de referencia en la extraccin de
aceite esencial. El rendimiento final de aceite esencial obtenido de las cscaras de naranja fue 0,42
0,02% en MAD y 0,39 0,02% en HD. Los rendimientos se expresan en gramos de aceite esencial
por 100 g de fruta de naranja. Estos resultados significan un ahorro sustancial de tiempo, energa y
material vegetal.

3.2. Composicin del aceite esencial

En la tabla 1 se presenta la comparacin de los rendimientos, los tiempos de extraccin, la fraccin

oxigenada, la composicin de las familias qumicas y la composicin detallada de cada extracto. Los
principales componentes del aceite esencial extrado de naranja fueron el limoneno, el -microceno,
el linalol, el isensal y el decanal pero las cantidades relativas difieren para los dos mtodos de
extraccin. El limoneno, un hidrocarburo monoterpnico, es el componente ms abundante
presente en el 76,7% y el 78,5%, respectivamente, para MAD y HD. Linalool, un monoterpeno
oxigenado, est presente en el 3,1% y 2,0%, respectivamente para MAD y HD. Existen cantidades
sustancialmente mayores de compuestos oxigenados y menores cantidades de hidrocarburos
monoterpenos en el aceite esencial de las cscaras de naranja extradas por MAD en comparacin
con HD. La fraccin oxigenada en muestras de aceites esenciales de MAD (11,7%) fue mayor que HD
(7,9%). Los hidrocarburos monoterpenos son menos valiosos que los compuestos oxigenados en
trminos de su contribucin a la fragancia del aceite esencial. Por el contrario, los compuestos
oxigenados son altamente odorferos y, por tanto, los ms valiosos. La mayor proporcin de
compuestos oxigenados en los aceites esenciales MAD es probablemente debido a la disminucin
de los efectos trmicos e hidrolticos, en comparacin con la hidro-destilacin, que utiliza una gran
cantidad de agua y consume tiempo y energa. El agua es un disolvente polar, que acelera muchas
reacciones, especialmente las reacciones a travs del carbocatin como intermedios.

3.3. Constantes fsicas y evaluacin olfatoria

Los aceites esenciales de naranja han sido analizados segn el mtodo estndar AFNOR para
determinar las constantes fsicas habituales que definen el aceite esencial extrado por MAD o HD:
gravedad especfica, ndice de refraccin, rotacin ptica y solubilidad en etanol al 95% a 20 C 2).
No hay diferencia significativa entre las constantes fsicas de los aceites esenciales obtenidos por
MAD o HD. Las propiedades organolpticas de los aceites esenciales extrados por MAD y HD se
muestran en la Tabla 3. Segn el Sr. JC Ellena, un nariz o perfumista, el mtodo MAD ofrece la
posibilidad de una mejor reproduccin del aroma natural del aceite esencial de naranja que el aceite
esencial hidro-destilado.

3.4. Cambios estructurales despus de la extraccin

Los diversos mtodos de extraccin produjeron cambios fsicos distinguibles en las cscaras de
naranja. La Fig. 3a es una micrografa de las peladuras no tratadas, que puede compararse con
estructuras de las cscaras de naranja tratadas en la Fig. 3b (MAD) y la Fig. 3c (HD). La Fig. 3b muestra
la estructura tpica despus de la extraccin MAD; las clulas estn vacas pero an intactas. En el
caso de la extraccin HD, se observ un dao significativo en la superficie externa de la cscara de
naranja junto con algn material celular disperso. Esto indica que la deformacin mecnica inducida
por la descompresin rpida y la vaporizacin violenta del agua tienen dos efectos principales: el
efecto deshidratante debido a la vaporizacin y un cambio posterior en la tensin superficial de la
pared glandular, haciendo que se desmorone o se rompa ms fcilmente ( Fig. 3). Los efectos
similares fueron sealados por Pare y Belanger '[20], y Chen y Spiro [21] para la extraccin por
microondas de hojas de romero en hexano. Cuando las glndulas fueron sometidas a tensiones
trmicas ms severas ya altas presiones localizadas, como en el caso del calentamiento por
microondas, la acumulacin de presin dentro de las glndulas podra haber excedido su capacidad
de expansin y causado su ruptura ms rpidamente que en la extraccin convencional.

3.5. Costo, limpieza y escalamiento

El coste reducido de la extraccin es claramente ventajoso para el mtodo MAD propuesto en

trminos de tiempo y energa. Tabla 4 Consumo de energa de los mtodos MAD y HD MAD HD
Tiempo de extraccin (min) 30 180 Consumo elctrico (kWh) 0,25 4,33 CO2 rechazada (g) 200 3464
seguido por evaporacin de agua y aceite esencial durante 150 min. El mtodo MASD requiri
calentamiento durante 3 minutos solamente y evaporacin durante 27 minutos del agua in situ y
aceite esencial de las cscaras de naranja. La energa necesaria para realizar los dos mtodos de
extraccin es, respectivamente, 4,33 kWh para HD y 0,25 kWh para MAD (Tabla 4). El consumo de
energa se ha determinado con un vatmetro en la entrada del generador de microondas y la fuente
de alimentacin del calentador elctrico. Respecto al impacto ambiental, la cantidad calculada de
dixido de carbono rechazada en la atmsfera es mayor en el caso del HD (3464 g CO2 / g de aceite
esencial) que en el MASD (200 g CO2 / g de aceite esencial). Estos clculos se han hecho segn la
literatura: para obtener 1 kWh de carbn o combustible, 800 g de CO2 sern rechazados en la
atmsfera durante la combustin de combustibles fsiles [22]. En este estudio, presentamos MAD
como un mtodo de extraccin "respetuoso con el medio ambiente" adecuado para la preparacin
de la muestra antes del anlisis del aceite esencial. MAD es un mtodo muy limpio, que evita el uso
de gran cantidad de agua y voluminosos recipientes de extraccin (HD). MAD tambin podra ser
utilizado para producir mayores cantidades de aceites esenciales mediante el uso de reactores de
extraccin de microondas existentes a gran escala [23]. Estos reactores de microondas son
adecuados para la extraccin de 10, 20 100 kg de material vegetal fresco por tiempo. Estos
reactores podran ser fcilmente modificados y utilizados para extracciones de MAD 3.6.
Consideraciones de seguridad

El proceso de extraccin por microondas es simple y puede entenderse fcilmente en trminos de

los pasos operativos a realizar. Sin embargo, la aplicacin de energa de microondas puede
representar peligros serios en manos inexpertas. Un alto nivel de seguridad y atencin a los detalles
cuando la planificacin y realizacin de experimentos deben ser utilizados por todas las personas
que se ocupan de microondas. Tienen que asegurarse de que buscan informacin adecuada de
fuentes bien informadas y que no intentan implementar esta tcnica a menos que se proporcione
una orientacin adecuada. nicamente deben utilizarse equipos aprobados y procedimientos
cientficamente vlidos.
4. Conclusin

Microondas La tcnica de Clevenger o destilacin acelerada por microondas (MAD) ha sido

comparada con el mtodo convencional de hidro-destilacin, para la extraccin de aceite esencial
a partir de cscaras de naranja fresca. Este mtodo de extraccin por microondas ofrece
importantes ventajas sobre la hidro-destilacin tradicional, a saber: proceso libre de agua y
solvente, tiempos de extraccin ms cortos (30 min frente a 3 h para la hidro-destilacin); mejores
rendimientos (0,42% contra 0,39% para HD); compuestos oxigenados superiores; Amigable con el
medio ambiente; menor produccin de subproductos (ya que no se utiliza agua o disolvente); costo
ms bajo; y la posibilidad de una mejor reproduccin del aroma natural del aceite esencial de
naranja que el aceite esencial hidrodestilado. Las imgenes SEM de cscaras de naranja no tratadas
o sometidas a MAD o HD enfatizan la diferencia entre los dos mtodos de extraccin utilizados. Las
microondas parecen causar la rotura de las clulas y las glndulas ms rpidamente que en la hidro-
destilacin convencional.