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CRECIMIENTO

MICROBIANO

ANA CRISTINA BOLAOS R.


CRECIMIENTO MICROBIANO
CRECIMIENTO MICROBIANO

Define:

- Incremento en el nmero de clulas.


- Aumento del tamao y masa.

***************
CRECIMIENTO MICROBIANO

1. REPRODUCCION

- FISIN BINARIA

(E. coli) 20 min.


CRECIMIENTO MICROBIANO

Generacin:
Tiempo de generacin

1 21 22 23 24 25. 2n

Relacin directa:

* Nmero de clulas iniciales y el nmero de


clulas finales en un cultivo.
CRECIMIENTO MICROBIANO

EXPRESARSE:

N = No 2n

N = Nmero final de clulas


No = Nmero inicial de clulas
n = Nmero de generaciones
ocurridas durante un
perodo de crecimiento.
CRECIMIENTO MICROBIANO

N = No 2n

Log N = Log No 2n
Log N = Log No + n log 2
Log N Log No = n log 2
n = Log N Log No
______________
Log 2
n = Log N Log No / 0.301
n = 3.3 ( Log N Log No )
CRECIMIENTO MICROBIANO

TIEMPO DE GENERACION:

g=t/n = t, en horas, minutos de


crecimiento.

g = t / 3.3 (log N Log No )


CRECIMIENTO MICROBIANO
CURVA DE CRECIMIENTO
FASES DEL CRECIMIENTO
MICROBIANO

Fase de latencia.
Fase exponencial.
Fase estacionaria.
Fase de muerte celular.
CONDICIONES PARA EL
CRECIMIENTO MICROBIANO
CRECIMIENTO MICROBIANO

1. FACTORES NUTRICIONALES

2. FACTORES AMBIENTALES
REQUERIMENTOS NUTRICIONALES

Nutrientes:

Productos qumicos exteriores a partir


de los cuales la clula realiza sus
constituyentes celulares.
TIPOS DE NUTRIENTES

MACRONUTRIENTES:

Carbono (C) Nitrgeno (N) Fsforo (P)


Azufre (S) Potasio (K) Calcio (Ca)
Sodio (Na) Hierro (Fe)
Magnesio (Mg)
TIPOS DE NUTRIENTES

MICRONUTRIENTES:

Molibdeno (Mo) Manganeso (Mn)


Cromo (Cr) Cobalto (Co)
Cobre (Cu) Niquel (Ni)
Selenio (Se) Zinc (Zn)

* Funcin estructural en varias enzimas.


TIPOS DE NUTRIENTES

FACTORES DE CRECIMIENTO:
(Vitaminas, aminoacidos, purinas,
pirimidinas)

AGUA
CLASIFICACION SEGN LA
FUENTE CARBONO Y ENERGIA
TIPOS NUTRICIONALES DE LOS
MICROORGANISMOS
FACTORES AMBIENTALES
FACTORES AMBIENTALES

TEMPERATURA
pH
OXIGENO
ACTIVIDAD DE AGUA
1. TEMPERATURA

?
TEMPERATURA

INFLUENCIA EL CRECIMIENTO

Temperaturas altas
Temperaturas bajas

* VARIA ENTRE MICROORGANISMOS

Cada microorganismo:

Mnima Optima Mxima


TEMPERATURA
TEMPERATURA

Los mas abundantes en la naturaleza: Mesfilos:

T. ptima de crecimiento = 37 C,

Se encuentra:

Bacterias Enfermedades en humanos.

Ejemplo: E.coli,

T.max = 48C
T min = 8C
Temp. ptima = 39 C
pH
OXIGENO

a. Aerobios estrictos
b. Anaerobios
c. Aerobios facultativos
d. Microaerfilos
e. Anaerobios tolerantes
ACTIVIDAD DEL AGUA

Cantidad de agua disponible en un sustrato de


crecimiento.

Actividad de agua baja, limita el crecimiento


de los microorganismos.

Concepto Concentracin de
solutos en un medio.
PRESIN OSMTICA

OSMOSIS

Los efectos osmticos son importantes:

Microorganismos Altas concentraciones de


sal (MARINOS)
PRESIN OSMTICA

- Xerfilos: Crecen en ambientes


muy secos (por falta
de agua).

- Osmfilos: Crecen a alta


Concentracin de
azcar.
HALOFILOS
Organismos Cloruro de sodio y otros minerales
Agua de mar ( concentracin de NaCl)

Grupos:

Halfilos discreto: 1 - 6% de cloruro de sodio.


Halfilo moderado: 6 15 % de la sal para poder vivir.

Halfilos extremos: 15 - 30% de cloruro de sodio.

*************
CULTIVO DE
MICROORGANISMOS
AUTOCLAVE
MEDIOS DE CULTIVO

Dos tipos generales:

Medios qumicamente definidos


Medios complejos

Un medio de Cultivo:
Lquidos
Slidos
MEDIO DE CULTIVO
Medio de cultivo Cultivo puro: COLONIAS

1 sola especie
TIPOS DE MEDIOS DE
CULTIVO

MEDIOS ENRIQUECIDOS
MEDIOS SELECTIVOS
MEDIOS DIFERENCIALES
MEDIOS DE PRUEBA
MEDIOS PARA CONTEO
MEDIOS DE MANTENIMIENTO
METODOS DE CULTIVO

TIPOS DE SIEMBRA:

Mtodo de siembra por estra y extensin


Mtodo de dilucin
Mtodo de vertido en placa - profundidad
Mtodo de siembra por puncin
METODO POR ESTRIA Y
EXTENSION
SIEMBRA POR ESTRIA
METODO DE SIEMBRA POR
DILUCION
SIEMBRA POR VERTIDO
EN PLACA/ PROFUNDIDAD
SIEMBRA POR PUNCION O
PICADURA
MEDIDA DEL CRECIMIENTO
BACTERIANO
MEDIDA DEL CRECIMIENTO
BACTERIANO

METODOS DIRECTOS

Recuento total de clulas


Recuento de clulas viables.
Dilucin seriada.
Conteo por filtros de membrana

METODOS INDIRECTOS

Turbidimetra
Actividad metablica
Peso seco
Contenido de Nitrgeno
1. RECUENTO TOTAL DE CLULAS

- Determinacin del nmero total de clulas de una


poblacin:

- Muestras slidas (secas)


- Muestras lquidas (cmara de Petroff- Hausser).

Directo al microscopio
2.RECUENTO DE CELULAS
VIABLES

Conteo solo de clulas vivas.

Cada clula viable lugar a una colonia

a) Siembra en superficie por extensin.

b) Siembra por vertido en placa.

* Volumen : 0.1 1.0 ml de una dilucin bacteriana.


2. RECUENTO DE CELULAS
VIABLES
VERTIDO EN PLACA- PROFUNDIDAD
Se debe realizar diluciones para poder contar las
clulas.
Se usa 0.1-1.0 ml de suspensin bacteriana y se adiciona
medio de cultivo fundido.
Se incuba.

Conteo de colonias:

El nmero de colonias no debe ser muy elevado,


tampoco muy bajo de forma que estadsticamente sea
significativo.
( 30-300)

El resultado se expresa siempre en unidades


formadoras de colonias ( UFC).
3 DILUCION SERIADA
CONTEO POR FILTRO DE
MEMBRANA
METODOS INDIRECTOS

PESO SECO
TURBIDEZ
ACTIVIDAD METABOLICA
CONTENIDO DE NITROGENO
PESO SECO

La masa de clulas presente en un cultivo


determinado.

Pesando hasta peso seco constante

Centrifugacin de un volumen conocido y el


pesaje del precipitado.
TURBIDEZ

Dispersin de la luz en
una suspensin de
clulas.
ACTIVIDAD METABOLICA /
CONTENIDO DE NITROGENO

Actividad metablica.

Contenido de Nitrgeno
CULTIVO CONTINUO
CULTIVO CONTINUO

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