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Dpartement de Chimie
MEMOIRE
Prsent par
Mr Abderrahmane Benmiloud
Pour obtenir le diplme de
Magister
Discipline : Chimie
Ecole Doctorale : S.P.R.S.M.
structure, proprit et ractivit des systmes molculaires
Option : Analyse et Ractivit molculaire
A mon pre.
enfants ..
( ) - 4 -
TLC .
) --( D ) +( D .
. 254
- 4 - ,:
Rsum :
Huit imino-4-hespridine drivs ont t synthtiss par condensation de lhespridine
(extrait de peau dorange) et plusieurs amines temprature ambiante avec de bons
rendements. Les diastroisomres de ces composs ont t facilement spars par
CCM sur gel de silice optiquement pur. En utilisant les slecteurs chiraux D (+)
saccharose et le D (-) manitol temprature et pression atmosphrique 254 nm.
Abstract:
III.1 Introduction:. 44
III.2 Extraction et purification de lhespridine : . 46
III.3 caractrisation de lhespridine : .. 47
a) Chromatographie sur couche mince :.. 47
b) Point de fusion:.. 47
c) Analyse par spectroscopie UV :. 47
d) Analyse par spectroscopie Infra Rouge : 47
III.4 synthse en gnrale des imino-4-hsperidine :... 48
III.5 Mcanisme ractionnel de synthse :................ 51
III.6 Caractristiques des imino-4-hespridines :... 51
III.6.1 N-phnyle-imine-4-hespridine:.. 52
III.6.2 Ethyle-imine-4-hespridine : .. 53
III.6.3 L-tryptophane-imine-4-hespridine: .. 54
III.6.4 Amine-2-thylne-imine-4-hespridine : 55
III.6.5 Ure-imine-4-hespridine : 56
III.6.6 Thior-imine-4-hespridine:... 57
III.6.7 Isobutul-imine-4-hespridine:. 58
III.6.8 3-chloroaniline-imine-4-hespridine : ........................ 59
III.7 Discussions: ...... 60
III-8 Conclusion:....... 61
Rfrences : ......... 62
Tableau (II.1) Leffet de chiralit sur lactivit pharmacologique de quelque principe active
mdicament... 31
Tableau (IV.3) Les paramtres de chiralit des imino-hespridines avec les deux slecteurs.............. 69
Tableau (IV.5) les valeurs de max pour les deux daistroisomiare de P1 par UV visible... 73
Pf : point de fusion.
C : degr Celsius.
KBr : bromure de potassium.
t : temps.
K : facteur de capacit.
Introduction gnrale
Introduction Gnrale
Introduction gnrale :
Ces dernires annes ont vu de rapides progrs dans l'hmisynthse, des produits
diversit structurale, avec des centres de chiralit. Ainsi la chiralit est devenue un sujet
majeur dans la synthse, la dcouverte et le dveloppement de principe actif des
mdicaments. Le dveloppement d'un nantiomre isol offre des avantages thoriques et
cliniques et deux stratgies sont possibles : soit le dvelopper initialement, soit sparer le
racmat en ses deux nantiomres.
C'est dans ces deux contextes que se situe notre travail dont le fond est dtudier la
sparation TLC chiral de huit molcules drives dhespridine par l'usage de deux
diffrent slecteurs chiraux D(-)-Mannitol, D(+)-saccharose. Ces drives sont synthtises
par condensation non catalytique de lhespridine (extraite de la peau dorange) et une
srie de huit amines primaires.
Le premier chapitre, aborde une tude bibliographique sur les diffrentes mthodes de
synthse des imines surtout par les amines primaires et la ractivit de ces imines.
Le deuxime chapitre a t consacr entirement aux diffrentes mthodes des
sparations chirales et leur domaine dutilisation.
La synthse des huit drives imino-4-hespridines et leurs identifications par les
techniques spectroscopiques UV, IR, RMN H1 est dcrite dans le troisime chapitre.
Enfin, le quatrime chapitre prsente la sparation chirale de deux produits obtenus
par TLC chirale avec deux slecteurs chiraux (D(+) saccharose et le D(-) Mannitol) ce
qui nous a permis ltude des facteurs qui affectent la sparation chirale.
Chapitre I
Mthodes de synthse des imines
I.1. Introduction :
R1 R1
O R NH 2 N R H2O
R2 R2
Schma (I.1) : la raction de formation des imines
On note dans cette raction que l'limination de l'eau est ncessaire pour dplacer
l'quilibre vers la formation de la fonction imine, utilisant comme solvant l'thanol absolu
qui forme un mlange azotropique avec l'eau permettant le dplacement d'quilibre vers la
formation de l'eau et cette opration est appele autocatalyse.
Les ligands auxquels ils sont intresss plus particulirement pour la ralisation de notre
travail sont les bases complexes de schiff. Ces ligands sont obtenus par la condensation de
laldhyde salicylique ou ces drivs sur une diamine aromatique [3].
La premire synthse de ces complexes est faite par Coleman [4].
Z
Z
H O
n(H2 C) (CH 2)m (CH2)m
(CH2 )n
H 2N H 2N
OH N N
BOH/KOH
ref lux OH HO
n m z
2 2 NH
2 2 -S-
2 3 NH
3 3 NH
3 4 NH
Grce leurs importances dans la vie humaine, les complexes sont exploits dans divers
domaines, parmi lesquels on cite leurs utilisations dans :
- Le traitement de quelques maladies (accumulation du cuivre dans le foie, le cerveau et
les reins ou certaines formes de cancer.
- Lactivit biologique (activit antifongique, antibactrienne).
- Dans le domaine d'optimisation le taux de dcharge des batteries ainsi leur capacit.
- Dans le domaine de la chimie analytique (titrage, prcipitation et sparation des
mtaux).
- loxydation catalytique des hydrocarbures qui sont diversifis suivant la nature de
fonction chimique des composs organiques, tel que loxydation des alcools, carboxylation
des halognures, oxydation des amines primaire, les phnols et les hydrocarbures. Ce qui
intressent plus particulirement la ralisation de notre travail sont les complexes de base
de schiff souvent utiliss dans lpoxydation des olfines, ce dernier qui est
particulirement attirant depuis plusieurs dcennies, dans le cadre de synthtiss des
composs chimiques difficilement raliss. Ce qui nous pousse trouver des meilleures
conditions pour raliser la catalyse [3].
Dune faon gnrale les imines rsulte dune condensation damine primaire avec un
carbonyle (Schma I.3) [5,13].
R1 R
R R2
1
+ H2O
R NH2 + N
O R2
Le mcanisme de synthse des imines est trs voisin de celui de la synthse des actals.
Ltape au cours de laquelle se manifeste la diffrence de ractivit entre les amines et les
alcools est la cinquime tape : une limination intramolculaire est prfre dans le cas
des amines, alors que cest une substitution nuclophile qui se produit avec les alcools [6]
(schma I.4).
10
H R2 R1 H
R1 (a) R1
(b)
OH + H O + R N O
R2 R2 H H H N
H R
(c)
R 2 R1 H
O + H
H N
R
(d)
R1 H R1 H
R1 (f ) (e) R2
H + N H2O + N O
R2 R H N H
R2 R
R
Lorsque R est un groupe alkyle, le compos obtenu est une imine substitue. Dans ce cas,
l'quilibre est plutt en faveur des ractifs. La situation est diffrente quand la conjugaison
entre la double liaison et un doublet non liant port par R permet une stabilisation du
produit form (schma I.5) [7].
11
O R
H
N
H2O
N
R1 R2
H R
R1 R2
C'est le cas pour les oximes, les hydrazones et leurs drivs. Notons que les composs
substitus prsentent l'isomrie Z o E (Schma I.6).
Ph Ph
N N
H3C H H3C H
imine E imine Z
Les oximes sont obtenues par raction de l'hydroxylamine avec un compos carbonyl. Ce
sont des composs gnralement cristalliss temprature ordinaire (schma I.7), ce qui
permet de les purifier. Parmi les ractions intressantes des oximes, la dgradation de
Whl permet de diminuer d'un atome de carbone la chane carbone d'un ose. Dans la
premire tape, on forme l'oxime de l'ose par raction entre ce dernier et l'hydroxylamine
[7]. Par raction avec l'anhydride actique, l'oxime est dshydrate en nitrile. (Schma I.8)
O OH
H
N
H2O
N
R1 R2
H OH
R1 R2
hydroxylamine oxime
12
H N OH
H O
CHOH + H2O
+ NH2OH
CHOH
R
R
Lorsque l'oxime existe sous deux formes diastroisomres Z et E, le groupe qui migre de
faon prfrentielle est celui situ en anti du groupe OH de l'oxime. (Schma I.9)
OH HO
N N
H3 C H H3 C H
oxime E oxime Z
Lhydrazine ragit avec les composs carbonyls pour donner des hydrazones (schma
I.10).
O NH 2
H
N
H2O
N
R1 R2
H NH2
R1 R2
hydrazine hydrazone
La phnylhydrazine, prpare pour la premire fois par E. Fischer, a jou un rle trs
important dans le dveloppement de la chimie des sucres. Les drivs qu'elle forme avec
13
ceux-ci sont facilement cristallisables. Ils peuvent tre purifis et caractriss par leur point
de fusion (Schma I.11) [6].
Ph
N
O N H
H
N Ph H 2O
R1 R2
H N R1 R2
phnylhydrazine phnylhydrazone
H O H N NHPh
H OH H OH
HO H HO H H2O
+ NHPh NH 2 +
H OH H OH
H OH H OH
CH 3 CH 3
(D)-glucose (D)-mannose
14
H
O N NH2
N N
H H HN 2
H2O
R1 R2 O
R1 R2
H O
semicarbazide semicarbazone
R H H R H
NH H OH
+ O N C +
R' R' H
H
R CH 3
R H CH 3 -H
N H2 C H 2C C
N C + H 2C C O
R'
R' H O H
15
R1 N NH 2
NH2NH2
O R1 H2O
R2 R2
Me Me Me
H 2 /N i H
M eN H2 O C Me N C Me N CH
Me Me Me
Me
N CH2
Et
H 3C H3 C
H H
C O H 2N N NO2 C N N NO2
H 3C H3 C
O 2N O2 N
(2,4-dinitrophenyl)hydrazine 1-(2,4-dinitrophenyl)-2-(propan-2-ylidene)hydrazine
H O H NC6H5
HO OH
HO OH
R C6H5-NH2 R
HO OH
17
I.7.3 Synthse des complexes en mtal de transition avec N, Ligand base de Schiff de
l'hydrazone O-Chlate :
Cl
O H3 C cetone
O
Cl
CH3 N
N
H 3C OH OH CH 3 H
Ethanol NO2
+ Cl
O H 3C
OH
NH 2
N N
H
N
O2 N OH CH3
enol NO 2
RNH2 Toluene
+
ref lux
N N N N
O N
R
N N
(PhCN)2PdCl2
CH2Cl2 N
Pd
18
O
OH
O HO OCH3
1-phenyl-1,3-butanedione
H2 N
NH2 C N N C
ethylenediamine
O
H3 C
OH O
2-hydroxy-4-methoxybenzophenone
a) La formulation des imine ncessite une catalyse acide, ainsi sans catalyse acide la
raction est trs lente, bien quelle puisse se produire dans certains cas (les oximes,
par exemple, se forment sans catalyse acide mais elles se forment beaucoup plus
vite avec une catalyse acide). Il est important de remarquer que lacide nest pas
ncessaire pour ltape daddition, en fait, la protonation de lamine rend cette
tape trs lente en milieu acide fort), mais il est ncessaire pour llimination de
leau dans la suite de la raction. La formation dimine est en ralit la plus rapide
pH 4-6 : aux pH infrieurs, une trop grande proportion de lamine est protone et la
vitesse de la premire tape est lente ; aux pH suprieurs, la concentration des
protons est trop faible pour permettre la proportion du groupe partant OH dans
ltape de dshydratation. La formation de limine ressemble une raction
biologique : elle est plus rapide au voisinage de la neutralit [11].
b) Les imine sont instables, par apport au compos carbonyl et lamine de dpart, et
depuis il exige llimination deau du mlange ractionnel (Schma I.23).
19
Me
O Me
N Ph
cat.H
H2O
Ph Me H 2N Ph benzne au ref lux
(Dean stark) Ph Me
c) Les imines se forment partir des aldhydes ou des ctones avec la plupart des
amines Primaires. En gnral, elles ne sont assez stables pour tre isoles que si le
C ou N de la double liaison de limine porte un substituant aromatique. Les imines
formes partir de lammoniac sont instables mais on peut les dtecter en solution
CH2=NH2, par exemple, se dcompose aux tempratures suprieures -80C,
mais PhCH=NH peut tre dtect par spectroscopie UV dans un mlange de
benzaldhyde et dammoniac dans le mthanol (Schma I.24) [12].
CHO
NH 2
NH2 H 2O
d) Les imines sont facilement hydrolyses en carbonyle et amine par les acides aqueux
en fait, la plupart peuvent tre hydrolyse par leau sans catalyse acide ni basique
(Schma I.25) [12].
20
H2O
Ph
Ph Ph H
Ph Ph
O
H2N OH OH
NH NH2 H
H 2N H 3N
H H
Ph Ph
O O
H
e) Les imines dont latome dazote porte un groupement lectrongatif sont en gnral
stable cest le cas des oximes, des hydrazones et des semicarbazones (Schma I.26)
[10].
oxime
OH
N
O NH2
O NH2
Ph
NH
NH H2 N NH
N semicarbazide N
ctone
semicarbazone
phenyl-
hydrazone
21
I.9 Conclusion :
Dans cette partie bibliographique on a essay de balayer plusieurs mthodes de synthse
des imines. Les critres qui ont t retenus pour lobtention des imines partir dune
ctone, sont les suivant :
9 Lutilisation dun catalyseur acide pour former limine, sans catalyse acide la
raction est trs lente.
9 Les imines sont instables par apport au compos carbonyl et lamine de dpart.
22
Rfrence:
[7] Vi Thuy Dao ; Le Gossypol Et Ses Nouveaux Drivs : Synthse Et Etude Dactivits
Biologiques. Thse Docteur Universit De Paris-Sud U.F.R Scientifique dOrsay.2002,
p 159.
23
[11] Clyden G, Warren W ; Chimie Organique. Edition Jacquemont Paris ; Janvier 2003,
p1508 ; p349, 356.
[12] Arzallier J, Mesnil C, Brenon F ; Chimie Organique 2-Reactions Classes Preparation
Cours De Chimie. Edition Vaibert 63bd St-Germain ; Fvrier 1987 p 217, 218, 219,220.
24
Chapitre II
Chiralit et mthode de sparation
chirale
Chapitre II Chiralit et mthode de sparation chirale
La chiralit molculaire est une caractristique lmentaire du monde vivant [1]. Un grand
nombre de fonctions biologiques et physiques reposent sur la reconnaissance molculaire
gnre par la chiralit [2]. La configuration de ces entits molculaires reprsente la
disposition spatiale des atomes ou des groupes d'atomes [3]. Cette notion de configuration
dcoule directement de la strochimie [4]. Ce sont les progrs conjugus de la physique et de
la chimie qui ont conduit les scientifiques du XIXme sicle la notion de chiralit.
Tout commence en 1808, quand Malus dcouvre la polarisation de la lumire et que plus
tard, en 1825, Biot montre que lacide tartrique possde la proprit de dvier la lumire
polarise alors quun acide du mme type appel racmique est inactif (racemus : grappe de
raisin) [5]. La relation entre pouvoir rotatoire et dissymtrie molculaire est faite en 1848,
quand Pasteur explique pourquoi lacide paratartrique ne montre aucun pouvoir rotatoire, bien
quil ait la mme composition chimique que lacide tartrique. En examinant attentivement
cette espce (que lon appellerait aujourdhui mlange racmique), Pasteur dcouvre quelle
est compose de cristaux hmidriques aux facettes orientes soit droite, soit gauche, en
les triant la pince, Pasteur spare les deux nantiomres et dcouvre que lacide tartrique
naturel possde un jumeau, dont les solutions font tourner le plan de polarisation de la
lumire dans le sens oppos [5]. Il montre ainsi lexistence dune dissymtrie molculaire ,
en posant les bases de la strochimie molculaire, anticipant au pralable la notion de la
chiralit. Vingt cinq annes plus tard et plus prcisment, en 1874, Le Bel et VantHoff
introduisent la thorie du carbone ttradrique, crant le concept du carbone asymtrique [6].
Enfin, en 1898, le physicien Lord Kelvin donne le nom de chiralit la proprit qui
distingue les nantiomres dune mme molcule [5].
Le mot chiralit vient du mot grec kheir qui signifie main. La chiralit peut tre donc
dfinie comme une caractristique structurale qui fait quune molcule est asymtrique et non
superposable son image dans un miroir, exactement limage de la main gauche et de la
main droite (Figure II.1) [7].
26
Cest en 1874 que la relation entre le phnomne dactivit optique et les structures
molculaires a t tabli. Indpendamment, J.H. vantHoff, ainsi que J.A. LeBel, dcouvrirent
que tous les composs optiquement actifs connus possdaient un carbone asymtrique. Ils
avancrent donc que larrangement spatial des groupes autour dun atome de carbone central
est ttradrique [9].
a a H H
c c Cl Cl
d d F Br Br F
b b
27
Atomes du groupe 14 :
Dans le groupe 14 de la classification priodique, on trouve la mme situation pour Si, Ge,
Sn, Pb, que pour le carbone (Schma II.2). Le premier exemple dorganosilane chiral a t
prpar par Sommer et Collaborateurs [11].
H Si
CH3
Ge H
C2 H5
[]D=+33.4 []D=+23.6
28
COOH COOH
H 2 N H H N H 2
R R
srie L srie D
Schma (II.3) : Position du groupement NH2 pour dfini les acides amin (D/L)
29
La rotation optique est mise en vidence laide dun polarimtre. Un faisceau lumineux est
transform en un faisceau de lumire polarise plane: le faisceau lumineux oscille dans une seule
direction. Dans le polarimtre, cette lumire polarise passe ensuite travers une cellule de
longueur connue, dans laquelle est contenue une solution de la molcule analyser. Si la molcule
est optiquement active, le plan de la lumire polarise est dvi dun angle , enregistr par un
analyseur. Cet angle de dviation est appel pouvoir rotatoire de la molcule analyse. [14]
L : longueur de la cuve en dm
Tableau (II. 1) : leffet de chiralit sur lactivit pharmacologique de quelque principe actif
de mdicament.
devient rapidement le sdatif et le calmant le plus apprci [13]. En 1960, on estime ~15000
ftus qui ont t touch par la thalidomide et qui sont presque tous ns avec des
malformations; et plus de la moiti de ces enfants n'a pas vcu plus d'une anne (schma II.4)
[16].
O O
N O O N
NH HN
O O O O
31
- La ktamine tait originellement destine tre utilise chez lhomme et chez lanimal
en tant quanesthsique. Du fait de ses effets hallucinognes chez lhomme, elle est devenue
rapidement un produit recherch pour usage illicite (Schma II.5).
NH HN
O Cl Ketamine Cl
O
(S)ansthsique (R) Hallucinogne
OH HO
H
N H
N
N N
H H
OH Ethambutol
HO
(S,S):anti-tuberculique (R,R): rend aveugle
Aujourdhui, environ la moiti des mdicaments mis sur le march contiennent au moins un
centre asymtrique. La majorit est employe sous forme diastroisomrique ou racmique.
Mais, depuis quelques annes, la commercialisation dun nantiomre pur, de prfrence au
mlange racmique, a pris un grand essor. Lindustrie pharmaceutique a montr au cours de
ces dernires annes un trs fort intrt pour la production et la commercialisation de
mdicaments nantiopurs la place des mlanges racmiques.
32
C`est la mthode la plus commune de rsolution d`nantiomres ioniques, et elle est celle
labore par Pasteur. Deux nantiomres ont les mmes proprits physiques et chimiques
tant que le phnomne ou le ractif est achiral : ils ne peuvent pas en gnral tre spars.
En revanche, deux diastroisomres ont gnralement des proprits physiques diffrentes,
ce qui permet de les sparer par exemple par cristallisation fractionne.
Pour sparer un mlange de deux nantiomres, on peut les faire ragir, par une raction
renversable, avec un ractif chiral de configuration donne. Les diastroisomres du
mlange obtenu peuvent tre spars. Il sagit en suite de librer sparment chacun des
nantiomres. Le choix du ractif est important car toutes les tapes doivent avoir dexcellents
rendements, la recristallisation fractionne et la chromatographie.
II.4.2 Chromatographie chirale:
Les dveloppements des chromatographies ont permis la mise au point de techniques de plus
en plus performantes. Les proprits physico-chimiques de deux nantiomres sont identiques
sauf lorsquils sont placs dans un environnement dissymtrique. Ce dernier peut tre obtenu
par trois mthodes :
33
Dans la chromatographie sur couche mince on peut utiliser une de trois techniques pour la
sparation des composs nantiomrique [20] :
2. Sparation des phases stationnaires ordinaires au moyen d'additifs chiraux dans l'luant, qui
forment complexes diastereomerique avec le substrat.
34
La manire la plus facile d'effectuer la sparation directe est d'ajouter un slecteur chiral la
phase mobile dans le cas de la chromatographie liquide sous haute pression, de la
chromatographie sur couche mince et de la CE. Cette approche simple donne de bons rsultats
dans beaucoup de cas, mais elle n'est pas toujours faisable et son cot est lev avec des
ractifs chers [25].
Plusieurs modles pour que les conditions obtiennent l'identification chirale ont t discutes.
Le modle le plus fiable est le modle trois points de contact, propos par Dalgliesh, qui
postule que trois interactions doivent entrer en vigueur et au moins l'un d'entre eux doit tre
stroslective [26].Ce modle peut tre appliqu la plupart des principes chiraux de
sparation.
Bas sur les proprits des liaisons hydrognes multiples plusieurs travaux ont t dvelopps
dans le domaine de la sparation chirale chromatographique ainsi des phases chirales de
chromatographie gazeuse bases sur les esters acides L-amins n-trifluoroactyliques et les
acides amins n-trifluoroactyliques ont t dvelopps [27]. De mme une phase de
chromatographie gazeuse base sur le diamide de valine lie aux polysiloxanes, a t
commercialise sous le nom de Chirasil-Val par Bayer. Plus tard plusieurs autres phases
chirales de chromatographie gazeuse ont t dveloppes, et des mcanismes d
35
Des phases de chromatographie liquide sous haute pression utilisent des amides d'acide amin
en tant que slecteurs chiraux ont t prpares. Dans les annes 70, le groupe Pirkle a
introduit le consepte de phase chirale de -donneur et de -accepteur, La capacit chirale
d'identification pour un large ventail des composs avec des groupes de -donateur en plus
des - interactions. Enfin, il a t constat que le diple empilant et les liaisons hydrogne
sont les interactions responsables de lidentification chirale [29] (Schma II.8).
36
LHPLC peut tre employe pour sparer des nantiomres indirectement avec des ractifs
chiraux de drivation ou directement avec des phases stationnaires chirales ou des additifs
chiraux de phase mobile [31]. Cependant, la drivatisation reprsente une tape additionnelle
ce qui peut impliquer des ractions secondaires indsirables, formation des produits et de la
racmisation de dcomposition.
37
Nom
Slecteur chirale R nomenclature
commercial
Cl amylose tri 4- _
O O O chlorophnylcarbamate
NH
HN O O R H3 C
amylose tris (S)-1-
R Chiralpak AS
mthylphnylcarbamate
38
II.8 Conclusion :
La sparation chirale est devenue une mthode prfre pour accder rapidement aux
composs nantiopure dans l'industrie pharmaceutique, en grande partie d la vitesse avec
laquelle une mthode chromatographique peut tre dveloppe et excute. L'utilisation de la
chromatographie TLC chiral pu rsolu diffrent problme de sparation observe
actuellement en chimie analytique. Ainsi la chromatographie sur couche mince et sur la
cellulose a t trs utilise dans ce contexte. Plus particulirement, depuis les annes 70 ou il
ya eut un dveloppement de phase chiral et dappareillage.
39
II.9 Rfrences :
[2] Meierhemrich U.J, Amino acides and the asymetry of life, 2008; Springer.
[3] Maystre. D and Enoch. S, Perfect leneses made with left-handed materials, Alice
mirror; 2004, J.Opt.Soc.Am.122-131.
[9] Pinault J.F. Travaux sur le dveloppement dun auxiliaire chiral applicable la phase
solide et permettant de crer des centres chiraux quaternaires thse pour lobtention du
grade matre s sciences par Jean-Franois Pinault Universit de Sherbrooke, Avril 2004,
Canada, p.3, 4,5.
[10] Krausz P, Benhaddou R, Granet R, Mini manuel de chimie organique ; 2008, Dunod.
[11] Satyajit D.S, Lutfun N; chemistry for pharmacy students; general, organic and natural
product chemistry; edition Wiley, 2007, England; Vol 43.
[12] Beesley T.E, Raymond P et Scott W; Chiral Chromatography Edition Wiley & Sons;
November (1998), England P.12, 13.
[13] Brnest L.E, Samuel H.W, strochimie des composes organiques Edition Tec & Doc,
Paris (1996), p. 58.59.62.64.1156.1160.
40
[14]Madesclaire M. Stroisomrie Edition ellipses France (1987). P.17, 24, 28, 29, 41,
48.
[17] Dupont G, Duteil M et Bernard C.L ; cours de chimie organique Edition Mar Keting
(1986).p. 60.
[22] Welch, C.J., Kress, M.H., Beconi, M. and Mathre, D.J., Studies on the racemisation of
a stereolabile5-aryl-thiazolidinedione, Chirality, 2003, 15(2), 143147.
[24] Zhou Y, Luan P, Liu L, Sun ZP. Chiral derivatizingre agents for drug enantiomers
bearing hydroxyl-groups. JChromatogr B 1994; 659: 109126.
[25] Dalgliesh CE. The optical resolution of aromatic aminoacidson paper chromatograms. J
ChemSoc, 1952 ;137: 39403942.
41
[29] Wolf, C., Spence, P. L., Pirkle, W. H., Cavender, D. M., and Derrico, E. M; Investigation
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;( 2000), 21, 917924.
[32] Beesly T.E, Scott W, Chiral chromatography , John Wiley & Sons; (1998), Ltd.
England, 221-263.
[33] Claude G, Gille B ; le monde de chiralit ; actualit chimique ; 1995, Vol 7, p 14.
[34] Gbitz G and Schmid M.G Chiral Separations: Methods and Protocols Methods in
Molecular Biology, 2004, Vol. 243; Humana Press p174.
42
Chapitre III
Synthse et caractrisation des imino-
hespridines
III.1 Introduction :
Les substances naturelles issues des vgtaux ont des intrts multiples mis profit dans
lindustrie : en alimentation, en cosmtologie et en dermopharmacie. La Pharmacie utilise
encore une forte proportion de principe active de mdicaments dorigine vgtale et la
recherche trouve chez les plantes des molcules actives nouvelles, ou des matires premires
pour lhimisynthse [1]. Le but de cette phase de notre travail est de synthtiser une srie de
drives imino-4-hespridine. Ces derniers sont prpars par condensation des amines
primaires avec lhespridine (schma III.1).
HO
OH
OH
HO 1Rha
H3C O 3'
5Rha OC H3
O 2'
4'
8
6Glu 9 1'
5Glu O O 7 O 5'
1Glu 2 6'
HO
HO OH 6 3
5 10 4
OH O
Il est bien connu que les flavonodes prsentent plusieurs intrts biologiques dont on citera :
- Les flavonodes sont des antioxydants puissants susceptibles dinhiber la
formation des radicaux libres et de sopposer loxydation des macromolcules,
cette activit dpend du nombre et de la disposition spatiale des groupes OH
phnoliques.
- Plusieurs tudes pidmiologiques ont suggr les effets bnfiques des agrumes
(riche en flavanones) contre de nombreuses maladies cardio-vasculaires et certains
cancers [2,3].
44
Les agrumes sont une bonne source de composs phnoliques, en particulier les glycosides
flavanones comprennent essentiellement la naringine, hespridine, narirutine, et
nohespridine (Schma III.2), (tableau III.1) [4,5].
OH
OH
OCH3
O O
O O Rut
Rut
OH O
OH O
Hespridine Narirutine
OH
OCH3 OH
O O O O
Nhes Nhes
OH O OH O
Nohespridine Naringine
HO OH OH
HO OH
OH O
O O O
CH3
O CH3
O
OH OH
HO
OH
HO OH
45
46
ds Rf = di /ds
di
Rf = 0.66
Figure III.1 : Analyse par ccm de lextrait de lhespridine.
a) Point de fusion :
Par des tubes capillaire dune appareille de type B-540 Bchi on a mesure le point de fusion
de lextrait pure.
Point de fusion = 264 C.
b) Analyse par spectroscopie UV :
En remarque sur le spectre enregistrer par le spectrophotomtre UV visible de type HEIOS
deux bandes dabsorption :
La bande (I) vers 276nm pour le dplacement lectronique ( *)
La bande (II) vers 300nm pour le dplacement lectronique (n *)
c) Analyse par spectroscopie Infra Rouge :
Le produit est caractris par le spectre enregistr sur un appareil spectrophotomtre IR a
transform de FOURIER (ANNEXE (A)) comme suite :
Une large bande vers (3317 3546) cm-1 indique lexistence des liaisons OH des glycosides
de lhespridine. Et des vibrations de valence de groupement CH2 et CH3 vers Une bande
intense entre 2847 et 2995 cm-1.
Vers 1650.99 cm-1 on remarque une forte absorption du a la vibration dlongation de la
fonction ctone (C=O).
47
Des vibrations de valence des doubles liaisons aromatiques sont remarque vers1520 cm-1, et
sur lintervalle 1355 et 1470 cm-1 des vibrations de dformation des groupements OH, CH2 et
CH3 vers, et Entre 1118 et 1275cm-1 des vibrations de valence des groupements C-O sont
prsentes. En fin une bande caractristique de groupement CH2 absorbe vers 650 et720 cm-1.
48
OH OH
OCH 3 OCH 3
R
O O O O
Rut + N Rut + H2O
H H
OH O OH N
R
Amine R
Aniline C6H7
Ethylamine C2H5
L-Tryptophane C11H12NO2
Ure CH4NO
Thiour CH4NS
Ethlndiamine C2H6N
t-Butylamine C4H11
3-Chloraniline C6H6Cl
49
OH
OCH3
O O
Rut
Et NH 2 86.33 MeOH/DCM 0.80
OH N 7/3
Et
OH
OCH3
NH2
O O
Rut
CH 47.52 MeOH/DCM 0.88
COOH OH N 7/3
N HOOC
H N
H
OH
OCH 3
O O
35.71 MeOH/DCM 0.60
NH2 Rut
8/2
OH N
H2 N
NH 2
OH
OCH3
O O O
Rut
86.32 MeOH/DCM 0.88
H2 N NH 2 OH N 7/3
H 2N O
OH
OCH3
S
O O
Rut
H2 N NH 2
OH N
13.09 MeOH/DCM 0.77
H 2N S 5/7
OH
OCH3
Me O O
Rut
50
OH OH
OCH 3 OCH 3
O O O O
R ut R R ut + H O
2
+ N
H - H
OH O OH N
R
OH
OH
OCH 3
OCH 3
O O Rut O O
R ut
R
R N
N H
OH O
OH O H H H H
OH
OCH 3
O O
Rut
+ H
N R
OH O H
H
- Les rendements des produits obtenus, a t calcule a partir des produits finale purifie par
CLC.
- Les points de fusion sont mesure par une appareille de type B-540 Bchi.
51
- Les analyses RMN H sont effectue dans un appareil BRUKER a 400 MHz avec le
DMSO comme rfrence.
III.6.1 N-phnyle-imine-4-hespridine:
Cette imine est obtenu par condensation quimolaire pendant 48 heurs de 244 mg
dhespridine et 37.2mg daniline.
OH
OCH 3
NH 2 O O
Rut
+
OH O
OH
OCH 3
O O
Rut
OH N
RMN H1 (400 MHz, DMSO) ppm: 7.10 7.00 (m, 5H,H-1,2,3,4,5), 6.90 (s, 1H,H-
2), 6.84 (d, J = 10.4 Hz, 2H,H-5,6), 6.54 (s, 1H,H-6), 6.37 (s, 1H,H-8), 5.80 (s, 1H,1Glu), 5.56
(s, 1H,H-2), 5.41 (d, J = 14.6 Hz, 2H,1Rha,OH-2Rha), 4.28 (s, 1H,OH-3Glu), 4.20 (s, 1H,H3),
4.11 (s, 1H,OH-2Glu), 3.93 (s, 1H,2Glu), 3.83 3.79 (m, 3H,H-4a,4b,4c), 3.69 (t, J = 7.3 Hz,
3H,H-3Rha,5Rha,6 a,Glu
), 3.60 (s, 1H,H-2Rha), 3.53 (s, 1H, H-3Glu), 3.43 (dd, J = 25.4, 19.9 Hz,
4H,H-5Glu,4Rha,6b,Glu,4Glu), 3.12 (s, 1H ,H-3a), 2.96 (s, 1H,H-3b), 1.41 (d, J = 9.5 Hz, 2H,OH-
4Rha,3Rha), 1.32 1.20 (m, 3H,CH3-H5Rha ,a,b,c), 1.09 (s, 1H,OH-4Glu).
52
III.6.2 Ethyle-imine-4-hespridine :
La raction auto-catalytique dune quantit quimolaire de lthyle amine (18.8 mg) et (244
mg) hespridine produise limine correspondant :
OH
OCH 3
O O
Rut
Et NH 2 +
OH O
OH
OCH3
Rut O O
OH N
Et
RMN1 H (400 MHz, DMSO) ppm:8.65 (s, 1H,H-5), 7.31 7.21 (m, 5H,H-1a,b,2a,b,c),
6.90 (s, 1H,H-2), 6.84 (d, J = 10.4 Hz, 2H,H-5,6), 6.54 (s, 1H,H-6), 6.37 (s, 1H,H-8), 5.80 (s,
1H,1Glu), 5.56 (s, 1H,H-2), 5.41 (d, J = 14.6 Hz, 2H,1Rha,OH-2Rha), 4.28 (s, 1H,OH-3Glu), 4.20
(s, 1H,H3), 4.11 (s, 1H,OH-2Glu), 3.93 (s, 1H,2Glu), 3.83 3.79 (m, 3H,H-4a,4b,4c), 3.69 (t,
J = 7.3 Hz, 3H,H-3Rha,5Rha,6 a,Glu), 3.60 (s, 1H,H-2Rha), 3.53 (s, 1H, H-3Glu), 3.43 (dd, J = 25.4,
19.9 Hz, 4H,H-5Glu,4Rha,6b,Glu,4Glu), 3.12 (s, 1H ,H-3a), 2.96 (s, 1H,H-3b), 1.41 (d, J = 9.5 Hz,
2H,OH-4Rha,3Rha), 1.32 1.20 (m, 3H,CH3-H5Rha ,a,b,c), 1.09 (s, 1H,OH-4Glu).
53
III.6.3 L-tryptophane-imine-4-hespridine:
Ce produit est prpar partir de Lhespridine (244 mg) et L-tryptophane (81.6 mg).
OH
OCH 3
H 2N
O O
Rut
HOOC
+
N
H OH O
OH
OCH 3
O O
Rut
OH N
HOOC
N
H
54
III.6.4 Amine-2-thylne-imine-4-hespridine :
Obtenu par raction de lhespridine (244 mg) et lEthylne Diamine (24 mg) pendant 48
heurs.
OH
OCH 3
O O
Rut
H2 N
+
NH2
OH O
OH
OC H3
O O
R ut
OH N
NH 2
RMN1 H (400 MHz, DMSO) ppm: 8.16 (s, 1H,H-5), 6.91 (s, 1H,H-2), 6.48 (s, 1H,H-8),
5.79 (d, J= 14.5 Hz, 1H,1Glu), 5.39 (d, J = 11.9 Hz, 2H,1Rha,OH-2Rha), 4.31 (s, 1H,OH-3Glu),
4.20 (s, 1H,H3), 4.14 (s, 1H,OH-2Glu),4.02 (s, 1H,2Glu), 3.83 3.79 (m, 3H,H-4a,4b,4c),
3.69 (t, J = 7.4 Hz, 3H,H-3Rha,5Rha,6 a,Glu
), 3.52 (s, 1H, H-3Glu), 3.42 (dd, J = 26.0, 19.9 Hz,
4H,H-5Glu,4Rha,6b,Glu,4Glu), 3.20 (s, 1H ,H-3a), 2.98 (s, 1H,H-3b), 1.41 (d, J = 9.5 Hz, 2H,OH-
4Rha,3Rha), 1.32 1.20 (m, 3H,CH3-H5Rha ,a,b,c), 1.07 (s, 1H,OH-4Glu).
55
III.6.5 Ure-imine-4-hespridine :
Ce produit est prpar partir de lhespridine (244 mg) et lUre (24 mg).
OH
OCH 3
O O
Rut
NH2
O +
NH2
OH O
OH
OC H3
O O
R ut
OH N NH 2
RMN1 H (400 MHz, DMSO) ppm: 8.23 (s, 1H,H-5), 6.89 6.78 (m, 3H,H-2,5,6), 6.67
(s, 1H,H-2), 6.43 (s, 1H,H-8), 5.40 (d, J = 0.9 Hz, 2H, 1Rha,OH-2Rha), 4.32 (s, 1H,Ha), 4.17
(s, 1H,Hb), 3.97 (s, 1H, OH-3Glu), 3.91 (s, 1H, 1H,H3), 3.83 3.79 (m, 3H,H-4a,4b,4c),
3.69 (t, J = 7.3 Hz, 3H,H-3Rha,5Rha,6 a,Glu), 3.60 (s, 1H, H-2Glu), 3.53 (s, 1H, H-3Glu), 3.44 (t, J
= 5.3 Hz, 3H,H-5Glu,4Rha,6b,Glu), 3.36 (s, 1H,OH-4Glu), 3.12 (s, 1H ,H-3a), 3.01 (s, 1H,H-3b),
1.41 (d, J = 9.5 Hz, 2H,OH-4Rha,3Rha), 1.33 1.20 (m, 3H,CH3-H5Rha ,a,b,c), 1.09 (s, 1H,OH-
4Glu).
56
III.6.6 Thiour-imine-4-hespridine:
Limine est obtenue partir de lhespridine (244 mg) et Thiour (30.4mg).
OH
OCH 3
O O
Rut
NH2
S +
NH2
OH O
OH
OC H3
O O
R ut
OH N NH 2
57
III.6.7 Isobutul-imine-4-hespridine:
Ce produit est synthtis partir de lhespridine (244 mg) et Isobutulamine (29.2 mg).
OH
OCH 3
O O
Rut
CH 3
H 2N CH 3 +
CH 3
OH O
OH
OC H3
O O
R ut
CH 3
OH N
C H3
CH 3
RMN1 H (400 MHz, DMSO) ppm: 6.82 6.79 (m, 2H,H-2,6), 6.74 (s, 1H,H-5), 6.39 (d,
J = 17.0 Hz, 2H,H-6,8), 5.80 (s, 1H,1Glu), 5.46 (s, 1H,H-2), 5.42 (d, J = 23.0 Hz, 2H,1Rha,OH-
2Rha), 4.82 (s, 1H,OH-3Glu), 3.96 (s, 1H, OH-2Glu), 3.84 3.80 (m, 3H,H-4a,4b,4c), 3.76
3.68(m, 3H,OCH3-Ha,b,c), 3.57 (d, J = 14.2 Hz, 2H,H-4Glu,6Glu), 3.41 (d, J = 10.6 Hz, 2H,H-
7Glu,a,3Rha), 3.33 (s, 1H,H-4Rha), 2.57(s, 1H,H-3), 1.82 (s, 1H,OH-3Glu), 1.72 1.64 (m,
3H,OH-4Glu,2Glu,2Rha), 1.34 1.19 (m, 12H,3CH3-Ha,b,c,CH35Rha-Ha,b,c), 0.99 (s, 1H, OH-
4Glu).
58
III.6.8 Chloro-3-aniline-imine-4-hespridine :
Produit de la raction de lhespridine (244 mg) et 3-chloroaniline (51 mg) pendant 48 heurs.
OH
OCH 3
NH 2
O O
Rut
+
Cl
OH O
OH
OC H3
O O
R ut
OH N Cl
RMN1 H (400 MHz, DMSO) ppm: 7.42 (s, 1H,OH-5), 7.24 (dd, J = 21.4, 10.5 Hz, 4H,H-
2,4,5,6), 6.82 6.70 (m, 3H,H-2,6,5), 6.45 (s, 1H,H-8), 6.35 (s, 1H,H-6), 5.80 (s,
1H,H-2Glu), 5.50 (s, 1H,H-2Rha), 5.40 (s, 1H,H-2), 4.79 (s, 1H,OH-3), 3.83 3.79 (m,
3H,OCH3-Ha,b,c), 3.76 3.68 (m, 3H,H-5Rha,4Rha,6Rha), 3.42 (d, J = 1.4 Hz, 2H,H-6Glu,3Rha),
3.35 (s, 1H,H-4Rha), 3.01 (s, 1H,H-3b), 2.63 (s, 1H,H-3a), 1.93 (s, 1H,H-4Glu),1.79 (s, 1H,H-
3Glu), 1.31 1.20 (m, 4H,OH-4Rha,H-5Rha(a,b,c)), 1.05 (s, 1H, OH-4Glu).
59
III.7 Discussion :
Daprs les rsultats danalyse spectroscopique UV, lhespridine prsente une bande
maximal caractristique 276 nm (Bande I), et une autre vers 300 nm (Bande II).la
condensation de lhespridine par des amines primaire est caractris par les dplacements
bathochromes de la bande I avec (=19,01, 19, 4,14 nm) respectivement des imines (P1, P2,
P3, P6, P7). Les diamines P4, P5 et P8 montre des dplacements hypochromes sur la mme
bande (=30, 04, 23 nm). Seul les produits P1, P2 prsente des dplacements bathochromes
sur la bande II (=28,06 nm).
60
Lanalyse spectroscopique RMN H1 enregistre dans le DMSO pour la srie des huit imino-
hespridine indique :
- Un signal apparait vers (1.06-1.20 ppm), avec une intgration de 3H correspond aux
protons de groupement mthyle de rhamnose.
- Un multiplet entre (3.53-3.83 ppm) caractrise les protons de la partie rhamnose.
- Un signale de groupement mthoxyle sur la position 4 gale 3.73ppm.
- Autre multiplets entre (6.70-6.83ppm) correspond portons de cycle A, et un vers (6.77-
6.92 ppm) des protons aromatiques du cycle C.
- Un doublet 5.42 ppm, avec une intgration de 2H, confirme lexistence dun centre
chiral C-2 (ANNEXE-B-).
III-8 Conclusion:
La condensation non catalytique de lhespridine par des amines primaires est ralisable dans
les conditions normales de temprature et de pression, avec des bons rendements, sauf pour
les composes P6 (13.09 %) et P7 (5.26 %). Lidentification des produits synthtiss par les
mthodes spectroscopique UV, IR et RMN H1 confirme la prsence de la fonction imine pour
tous les produits.
61
Rfrence :
[2] Benavente-Garcia, O. Castillo, J., Marin, F. R., Ortuno, A., & Rio, J. A. Uses and
properties of citrus flavonoids. Journal of Agricultural and Food Chemistry; 1997, p 45,
4505-4515.
[3] Tripoli, E., Guardia, M. L., Giammanco, S., Majo, D. D., & Giammanco, M. Citrus
flavonoids: Molecular structure, biological activity and nutritional properties: A review.
Food Chemistry; 2007, 104, 466-479.
[5]Zia, R., Citrus peel extract A natural source of antioxidant. Food Chemistry;
2006, 99, 450-454.
[6] Peterson J, Beecher G, Bhagwat S, Dwyer JT, Gebhardt SE, Haytowitz DB, Holden
JM. Flavanones in grapefruit, lemons, and limes: A compilation and review of the data
from the analytical literature. J. Food Comp. Anal. 19 (2006 b) S74-S80.
[7]Peterson J, Dwyer J, Beecher G, Bhagwat SA, Gebhardt SE, Haytowitz DB, Holden
JM. Flavanones in oranges, tangerines (mandarins), tangors, and tangelos: a
compilation and review of the data from the analytical literature. J. Food Comp. Anal. 19
(2006 a) S66-S73.
62
[10]Inoue T,Tsubaki S,Ogawa K,Onishi K et Azuma Jl; Isolation of hesperidin from peels of
thinned citrus unshiu fruits by microwave-assisted extraction (2010).
63
Chapitre IV
Sparation TLC chiral des imino-
hespridines
IV.1 Introduction :
La chromatographie en couche mince (CCM) sur gel de silice est trs utilise pour l'analyse
qualitative des flavonodes et les acides phnoliques [1]. Elle repose principalement sur des
phnomnes d'adsorption : la phase mobile est un luant, qui progresse le long d'une phase
stationnaire fixe sur une plaque de verre ou aluminium. Aprs que l'chantillon ait t dpos
sur la phase stationnaire, les substances migrent une vitesse qui dpend de leur nature et de
celle du solvant [2]. Deux mthodes sont disponibles pour la sparation des nantiomres par
la chromatographie sur couche mince. Une mthode comporte l'utilisation des phases
stationnaires chirales (CSPs), alors que l'autre ncessite l'utilisation des additifs chiraux de
phase mobile (CMAs) [3]. Cette dernire nous lavons applique pour la sparation des
imino-4-Hespridines, synthtises.
Nous avons utilis la technique TLC pour sparer les diasterioisomeres des huit drives
imino-4-hespridines synthtiss par usage de deux slecteur chiraux le D(+) saccharose et le
D(-) Mannitol.
La sparation chirale est base sur le mlange des quantits quimolaires des imino-
hespridines et de slecteur chirale, ainsi les nantiomres sont pralablement transformes en
diastreoisomres. Aprs on passe lanalyse par CCM, sur plaque de gel de silice.
3. Ne doit pas interfrer avec la dtection des analyses sil est utilis comme additif.
65
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines
Citons parmi les slecteurs chiraux de bon march et trs utiliss au laboratoire :
On met sous agitation le mlange pendant 20min, et on suit par ccm (des plaques de gel de
silice) tous les 5min. en rvlation par une lampe UV (Ultra Violet) pour la rvlation des
tches invisibles, ces manipulations sont rptes avec le deuxime slecteur chiral. chaque
compos est dfini par son Rf .
66
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines
a) facteur de capacit :
t1t0 ts tm d1
K = = tm Et = tm +ts = 100
t0 d
5
= 5
K : facteur de capacit.
67
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines
b) Slectivit :
Pour caractriser la distance sparant les sommets de deux pics conscutifs 1 et 2, on utilise le
facteur de slectivit (ou rtention relative) dfini par la relation:
2 0 2 1 5
= = =
1 0 1 2 5
c) Rsolution :
W1 : La largeur spot 1.
W2 : La largeur de spot 2.
Nous avons, calcule les paramtres de chiralit, a partir des quations prcdente. Les valeurs
de calcul sont consignes dans le tableau (IV.3).
68
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines
Tableau (IV.3) : les paramtres de chiralit des imino-hespridines avec les deux slecteurs.
Les facteurs
Imine Eluant Saccharose Mannitol
(t=20min)
Rf1 0.72 0.75
Rf2 0.91 0.88
K1 13,4 14
P1 MeOH K2 17,2 16,6
R 1.09 1.11
1,28 1,18
Rf1 0.69 0.7
Rf2 0.94 0.87
MeOH, K1 12,8 13
DCM ; 5/5 K2 17,8 16,4
R 1.4 1.75
1,39 1,26
P2 DCM Rf 0 -
Rf1 0.4 -
Rf2 0.4 -
MeOH,Ether ; K1 7 -
4/6 K2 7 -
R 0 -
1 -
P3 MeOH Rf - 0.82
DCM,
P4 Rf - -
MeOH ; 8/2
DCM Rf - 0.15
MeOH Rf - 0.78
-
Rf1 0.61
Rf2 0.82 -
MeOH,
K1 11,2 -
DCM ; 6/4
K2 15,4 -
P5 R 3.33 -
1,375 -
Rf1 - 0.21
Rf2 - 0.32
MeOH, K1 - 3,2
DCM ; 5/5 K2 - 5,4
R - 1.5
- 1.68
P6 CHCl3 Rf - -
P7 CHCl3 Rf 0.19 -
CHCl3,MeOH
P8 Rf 0.73 -
8/2
69
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines
OH
O
O O
Rut
OH N R ( %)
PHOTOGRAPHIE
Sorbflil TLC Videodensitometer
OH
O
O O
R ut
S (%)
OH N
Produit Rf S% H%
Rf1=0.10 53.0 44.2
P2
avec le saccharose Rf2=0.79 47.0 55.8
Avec :
70
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines
Cette technique est souvent utilise dans le cas dun mlange sparer contenant un grand
nombre de composs.
La CCM bidimensionnelle effectue sur le compose P2, dans lluant (MeOH /Ether, 4/6) nous
a permis de rvler quatre spots avec diffrant valeur de Rf (figure IV.1).
a) Des rsultats rsums dans le tableau des paramtres de chiralit (tableau IV.3), nous
signalons les points suivants :
- Les produits P3, P3, P6, P7 et P8 ne sont pas sparables aprs 20 min avec
les deux slecteur chiraux le D(+) saccharose et le D(-) Mannitol.
- P2 et P5 ne prsente aucune sparation avec le slecteur chiral Mannitol , en mme
temps la bonne sparation du produit P5 avec le D(+)-saccharose dans les mmes
conditions pour cela on fait un changement de polarit de solvant, On utilise le solvant
DCM pour les deux produits pour diminu la polarit car les valeurs de Rf pour les
deux sont assai leves Rf2=0.83 et Rf5=0.85.
- Aprs 20min dagitation et avec les mme conditions on observe que le produit P2
dans le mlange de deux solvant mthanol et ther (4/6) donne deux spots en mme
ligne perpendiculaire laxe de migration, donc les deux spots apparaissent avec le
mme Rf =0.4 (R=0 mauvaise rsolution).
- Le saccharose et le Mannitol prsente une faible rsolution avec les produits P1, P2.
- Le D(+) saccharose donne une meilleure rsolution avec le produit P5.
71
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines
b) Dautre part les valeurs obtenus du produit P2 (tableau IV.4) indique quil existe un
excs nontiomrique avec le pourcentage de 55.8 %.
c) Notons que la molcule dhespridine est une molcule chiraux contenons plusieurs
centre chirale ; dans la parte glucoside sont fix par une seul forme mais il y un
carbonne asymtrie on position 2 dans le cycle C prsent deux diastroisomres S et
R; et de mme la molcule imino-hespridine possde un carbonne asymtrique et on
plus la fonction imine et leurs drivs. Notons que les composs substitus
prsentent l'isomrie Z, E existant sous deux formes diastroisomres Z et E, par
exemple le groupe qui migre de faon prfrentielle est celui situ en anti du groupe
OH pour l'oxime dans le cas la plus simple ; pour la molcule dimino-Hespridine
est situ en anti de la partie glucoside. (Schma IV.2).
d) Lusage de la CCM bidimensionnelle nous a permis dobtenir de bonnes sparations
des composs de structures trs proches.
OH OH
OH O O OMe OH O O OMe
CH3 O O CH3 O O
OH O OH O
OHOH OH OHOH OH
OH OH
S-E OH N R-Z OH N
R R
OH OH
OH O O OMe OH O O OMe
CH3 O O CH3 O O
OH O OH O
OHOH OH OHOH OH
OH OH
R-E OH N OH N
R R-Z
R
72
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines
OH OH
OH O O OMe OH O O OMe
CH3 O CH3 O
OH O O OH O O
OH OH OH OH OH OH
OH OH
OH N OH N
R R
HO OH
HO O O
OH
HO OH
HO OH HO OH
Nous avons procd la sparation de produit P1en mlange avec le slecteur chirale
saccharose par chromatographie CLC (colonne 24.51 cm ; masse de gel de silice m=5g ;
lluant le mthanol).
Lanalyse par CCM chirale des produits obtenus aprs sparation indique des Rf diffrentes
Rf1= 0.86 etRf2= 0.89. Ils sont trs proche aux valeurs dj calcul de produit P1 avec le
slecteur chiral saccharose. Lanalyse UV-visible des composes spar sur CLC du produit P1
(Tableau IV.5).
Tableau (IV.5) : Valeurs de max pour les deux daistroisomiare de P1.
73
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines
Pour la deuxime transition n*les deux valeurs de max sont gaux ce qui indique les
deux diastroisomres ayant la mme forme gomtrique la plus stable E (Schma IV.3).
OH
OH O O OMe
CH3 O
OH O O
OH OH OH
OH
OH N
Ces rsultats nous ne donnent aucune information importante pour diffrencier entre
les deux diastroisomres, pour cela nous avons pass lidentification par IR
Schma (IV.5).
74
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines
- Des vibrations de dformation des liaisons (-CH=CH-) de forme gomtrique (E) vers
929 et 1000 cm-1, ce quil confirme la forme (E) pour les deux diastroisomres.
- Les autres zones labsorption dans les spectres IR des deux diastroisomres sont
presque identiques celle du produit P1.
- Do les deux produits qui sont spar par CLC possdent deux diastroisomres
drives imino-4-Hespridine possdent la fonction imine (max=280nm ; C=N
1618cm-1). Les deux diastroisomres ayant la mme forme gomtrique (E) (la plus
stable). Aussi nous proposons les deux configurations S et R (schma IV.6).
75
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines
OH OH
OCH 3 OC H3
O O O O
Rut R ut
* *
OH N
OH N
R -Z S -Z
OH OH
OC H3 OC H3
O O O O
R ut R ut
* *
OH N OH N
R -E
S -E
76
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines
OH
OH
OC H3
OCH 3
O O
O O R ut
Rut *
*
OH N
OH N
R -E
S -E
IV.13 Conclusion :
Dans cette partie nous avons tudi la sparation chirale des drives imino-4-Hespridines
par CCM avec deux slecteurs chiraux (le Saccharose et le Mannitol).
La sparation par TLC chirale est possible, pour les produits ayant une slectivit et
rsolution moyenne comme P1et P5.
Nous avons effectue la sparation des deux diastroisomres par CLC du produit P1, et
lidentification par UV visible montre que les deux diastroisomres possde la mme forme
gomtrique (la forme la plus stable trans E), mais les spectres IR des deux composs sont
diffrents, ce qui explique leffet de la rotation du carbonne asymtrique qui donne deux
configurations R, S (deux diastroisomres trans R et trans S).
77
Chapitre IV Sparation TLC chiral des imino-hespridines
Rfrence :
[3]Aboul-Enein H.Y, El-Awady M.I, Heard C.M et Nicholls P.J; Application of thin-layer
chromatography in enantiomeric chiral analysisan overview: Biomed. Chromatogr. Vol 13:
1999, p531.
78
Conclusion gnrale
Conclusion Gnrale
Conclusion Gnrale :
Les substances naturelles issues des vgtaux prsentent de multiples intrts qui sont mis
profit dans lindustrie : alimentation, cosmtologie et dermopharmacie. Un nombre important de
mdicaments sont dorigine naturelles, obtenus directement de la biomasse naturelle ou par
hmisynthse. Notre travail cadre dans la valorisation des mtabolites secondaires par la synthse de
drives partir de molcules extraite des peaux dorange savoir lhespridine.
Une recherche bibliographique sur les diffrentes mthodes de synthse dimine plus
prcisment la raction de condensation damine avec les carbonyles nous a aids choisir une
mthode de synthse des imino-4-hespridines.
Dans ce travail, nous avons synthtis et identifie une srie de huit nouveaux drivs imino-
hespridine par raction de condensation non catalytique entre lhespridine et des amines primaires.
Les molcules synthtis porte plusieurs centres chiraux, ce qui nous a conduit effectu la
sparation des diastroisomres avec deux slecteurs chiraux D(+) Saccharose et D(-) Mannitol.
La sparation chirale est russie pour deux produits P1 et P2 ; prsentant de bonne rsolution.
Dans ces expriences, nous avons analys le rle des slecteurs chiraux le Saccharose et
Mannitol sur les proprits de reconnaissance chirale de diffrente drive des imino-4-hespridine, et
on a pu sparer les deux diastroisomres (E) S et R [N-phnyle-imine-4-hespridine] par TLC
chiral dans les conditions de laboratoire.
En fin ce travail peut tre considr comme tant le premier pas vers dautres recherches en
perspective, telles que :
80
Annexes
%Transmittance
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
5
4000
3546,59
3500
3470,11
3420,94
3317,15
Rut
3082,25
3000
2934,75 2983,92
O
2918,36
OH
2500
O
O
ANNEXE(A)
2000
OH
Spectre IR dhespridine.
Wavenumbers (cm-1)
1650,99
OCH 3
1607,28
1500
1514,42
1465,25
1443,40
1355,99
1000
973,60
886,19
847,95
815,17
673,14 744,16
634,90 613,05
500
580,27
82
AN
NNEXE((A)
OH
O CH 3
R utO O
OH N
Spectre IR
I du N-phnyle-imine-4-hespridine (P1).
83
ANNEXE(B)
84
Rsum :
Ces dernires annes ont vu de rapides progrs dans l'hmisynthse,
des produits diversit structurale, avec des centres de chiralit. Ainsi
la chiralit est devenue un sujet majeur dans la synthse, la dcouverte
et le dveloppement de principe actif des mdicaments. Le
dveloppement d'un nantiomre isol offre des avantages thoriques
et cliniques et deux stratgies sont possibles : soit le dvelopper
initialement, soit sparer le racmat en ses deux nantiomres.
Huit imino-4-hespridine drivs ont t synthtiss par
condensation de lhespridine (extrait de peau dorange) et plusieurs
amines temprature ambiante avec de bons rendements. Les
diastroisomres de ces composs ont t facilement spars par
CCM sur gel de silice optiquement pur. En utilisant les slecteurs
chiraux D (+) saccharose et le D (-) manitol temprature et pression
atmosphrique 254 nm.