PREINFORME
PRCTICA DE LABORATORIO DE BIOQUIMICA
PRACTICA N 1
SEGURIDAD Y NORMAS DE LABORATORIO
Se entiende la prctica de laboratorio, como la estrategia pedaggica que facilita la
consolidacin del aprendizaje y el desarrollo de competencias disciplinares
NORMAS PERSONALES
NORMAS PARA LA UTILIZACIN DE
PRODUCTOS QUMICOS
NORMAS PARA LA UTILIZACIN DE
INSTRUMENTACIN
NORMAS DE EMERGENCIA
MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS
La vestimenta deber ser apropiada y cmoda, que facilite la
movilidad para la actividad que se desarrolla en los
laboratorios. Debe cubrir reas considerables de la piel con
pantalones (jeans), blusas con mangas, la bata y guantes.
Cuando se tiene que hacer una reaccin qumica se debe
escoger el recipiente adecuado a la cantidad que se va a usar.
Los ensayos se hacen en tubos de ensayo o en placas de gotas,
nunca en vasos, matraces, etc.
Cuando se determinan masas de productos qumicos con balanza
se utilizar un recipiente adecuado.
Se debe mantener perfectamente limpio y seco el lugar dnde se
encuentre situado cualquier instrumento con contactos
elctricos.
En caso de tener que evacuar el laboratorio, cerrar la llave del
gas y salir de forma ordenada siguiendo en todo momento las
instrucciones que haya impartido el Profesor. Localizar al iniciar
la sesin de prcticas los diferentes equipos de emergencia en el
correspondiente laboratorio
Se har la discusin sobre las normas de seguridad antes descriptas
y las que encuentran en el Reglamentacin y Normas de
Bioseguridad en los Laboratorios de la
UNAD y Otras Disposiciones
PRACTICA N 2 PROPIEDADES BIOQUIMICAS DE LOS AMINOACIDOS

PROPIEDADES BIOQUMICAS DE LOS AMINOCIDOS

Los aminocidos se denominan as por tener un grupo amino (-NH2) y un grupo carboxilo (-
COOH).
Es posible agrupar los aminocidos en clases principales basadas en las propiedades de sus
grupos R, en especial de su polaridad, o tendencia a interaccionar como el agua a pH
biolgico (cerca del pH 7.0). La polaridad de los grupos R vara enormemente desde
totalmente apolar o hidrofbico (insoluble en agua) hasta altamente polar o hidroflico (soluble
en agua).

La cadena R es de estructura variable y es la responsable de las caractersticas particulares de los AA y de su clasificacin, en

funcin de sta podemos agrupar a los 20 aminocidos, en diversas categoras as mismo, la nomenclatura puede hacerse
utilizando un cdigo de tres letras o de una, tal como se observa en la siguiente tabla:
Tabla 1 Aminocidos proteicos con nomenclatura clsica sistema de tres letras y sistema de una sola
letra, impuesto en gentica molecular.

REACCIN CON LA NINHIDRINA

El grupo alfa-amino de los aminocidos forma complejos coloreados con la ninhidrina: violeta azuloso
en la mayora de los aminocidos cuyo grupo amino es primario, amarillo para la prolina e
hidroxiprolina y caf para la asparagina que tiene un grupo amido en la cadena lateral.
Esta reaccin la producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos ya que se debe a la presencia
del enlace peptdico CO-NH que se destruye al liberarse los aminocidos. El reactivo de Biuret lleva sulfato de
Cobre (II) y sosa. El Cu, en un medio fuertemente alcalino, se une con los enlaces peptdicos formando un
complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentracin de protenas.

REACCION XANTOPROTEICA
Los anillos aromticos presentes en algunos aminocidos reaccionan con cido ntrico concentrado
formando nitro derivados de color amarillo o anaranjado por lo cual esta reaccin permite reconocer la
presencia de Tirosina, Fenilalanina y Triptfano.
REACCION DE MILLON
El anillo fenlico tiene un comportamiento caracterstico frente a las sales de Mercurio a pH cido,
formando complejos color rojo ladrillo con el anillo fenlico de la tirosina y las protenas que la
contienen.

REACCION DE SAKAGUCHI
El grupo guanidinio presente en la cadena lateral de la Arginina reacciona con soluciones de
alfa naftol en presencia de Bromo en medio alcalino formando complejos coloreados rosados
o rojos.
PRACTICA N 3 BIOQUMICAS DE LAS PROTENAS

BIOQUMICAS DE LAS PROTENAS

Las protenas son uno de los principales componentes de todas nuestras clulas. Los aminocidos
(compuestos orgnicos) son los ladrillos de construccin de la protenas. Los aminocidos se
agrupan de acuerdo con su comportamiento qumico.

La sntesis de las protenas ocurre mediante la unin entre s de las cadenas de aminocidos.

Los aminocidos tiene tres tipos de reacciones qumicas importantes: (1) reacciones debido a la
presencia del grupo carboxilo (COO- ), (2) reacciones debidas al grupo amino (NH), y (3)
reacciones debido al grupo R.

Las reacciones debidas al grupo carboxilo y al grupo amino son generales y se dan para todos los
aminocidos.

Las reacciones del radical R son reacciones especficas; por ejemplo, cistena da una reaccin para
azufre, triptfano da ciertas reacciones de color debido a que su molcula contiene el grupo indol,
tirosina da otras reacciones de color debido a su grupo fenlico.

Existen tambin reacciones generales porque sirven para caracterizar grupos comunes a todas las
protenas como grupos amino o uniones.
REACCIN DE AMINOCIDOS
Se pone de manifiesto por la formacin de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Se basa esta reaccin
en la separacin mediante un lcali, del azufre de los aminocidos, el cual al reaccionar con una solucin de
acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo
PROCEDIMIENTO Y MATERIALES
Entre las reacciones coloreadas especficas de las protenas, que sirven por tanto para su
identificacin, destaca la reaccin del Biuret. Esta reaccin la producen los pptidos y las
protenas, pero no los aminocidos ya que se debe a la presencia del enlace peptdico CO-NH
que se destruye al liberarse los aminocidos. El reactivo de Biuret lleva sulfato de Cobre (II) y
sosa. El Cu, en un medio fuertemente alcalino, se une con los enlaces peptdicos formando un
complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentracin de
protenas.
DETERMINACIN DE LA CONCENTRACIN DE PROTENAS: MTODO DE BRADFORD.

Se basa en el empleo de emplea un colorante hidrofbico cuyas disoluciones acuosas en

presencia de cido fosfrico tienen un color pardo y que, al encontrarse en el entorno
hidrofbico del interior de una protena, origina un color azul intenso que se puede medir
fcilmente.

La determinacin de protenas por el mtodo de Bradford consiste en la cuantificacin de

la unin de un colorante, el Azul de Coomassie G-250, a la protena, comparando esta
unin con la de diferentes cantidades de una protena estndar (Albmina de Suero
Bovino (BSA)).

La cuantificacin se hace midiendo la absorbancia en un espectrofotmetro, a 595 nm, y

graficando la absorbancia vs la concentracin de protenas, obteniendo una curva de
calibracin de la protena estndar. Con esta curva de calibracin, se puede interpolar la
concentracin de protenas en una muestra al medir su absorbancia a 595 nm.